ISO 10927:2018

Plastics — Determination of the molecular mass and molecular mass distribution of polymer species by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS)

This document specifies a general method for determining the average molecular mass and molecular mass distribution of polymers (see Reference [1]) from 2 000 g ⋅ mol−1 to 20 000 g ⋅ mol−1 by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS). The average molecular masses and molecular mass distributions are calculated from a calibration curve constructed using synthetic-polymer and/or biopolymer standards. This method is therefore classified as a relative method. The method is not applicable to polyolefins or to polymers with a polydispersity >1,2.

Plastiques — Détermination de la masse moléculaire et de la distribution des masses moléculaires des polymères par spectrométrie de masse, à temps de vol, après désorption/ionisation laser assistée par matrice (SM-MALDI-TOF)

Le présent document spécifie une méthode générale permettant de déterminer la masse moléculaire moyenne et la distribution des masses moléculaires moyennes de polymères (voir Référence [1]) comprises entre 2 000 g ⋅ mol−1 et 20 000 g ⋅ mol−1 par spectrométrie de masse, à temps de vol, après désorption/ionisation laser assistée par matrice (SM-MALDI-TOF). Les masses moléculaires et les distributions des masses moléculaires moyennes sont calculées à partir d'une courbe d'étalonnage établie à l'aide d'étalons de polymères synthétiques et/ou de biopolymères. Par conséquent, la présente méthode est classée comme méthode relative. La présente méthode n'est pas applicable aux polyoléfines et aux polymères ayant une polydispersité > 1,2.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 04-Jun-2018
• ICS: 83.080.01 - Plastics in general
• Technical Committee: ISO/TC 61/SC 5 - Physical-chemical properties
• Drafting Committee: ISO/TC 61/SC 5/WG 11 - Analytical methods
• Current Stage: 9020 - International Standard under periodical review
• Start Date: 15-Apr-2028

Relations

• Revises: ISO 10927:2011 - Plastics — Determination of the molecular mass and molecular mass distribution of polymer species by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS)
• Effective Date: 10-Dec-2016

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 10927
Second edition
2018-06
Plastics — Determination of the
molecular mass and molecular mass
distribution of polymer species by
matrix-assisted laser desorption/
ionization time-of-flight mass
spectrometry (MALDI-TOF-MS)
Plastiques — Détermination de la masse moléculaire et de la
distribution des masses moléculaires des polymères par spectrométrie
de masse, à temps de vol, après désorption/ionisation laser assistée
par matrice (SM-MALDI-TOF)
Reference number
ISO 10927:2018(E)
©
ISO 2018

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ISO 10927:2018(E)

COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
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be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
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Website: www.iso.org
Published in Switzerland
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ISO 10927:2018(E)

Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Reagents . 2
5.1 Matrices . 2
5.2 Solvents . 2
5.3 Salts . 3
5.4 Molecular mass standards . 3
6 Apparatus . 3
6.1 General . 3
6.2 Sample introduction chamber/target . 3
6.3 Laser source . 4
6.4 Flight tube . 4
6.5 Detector . 4
6.6 Data recording . 4
6.7 Data handling . 5
7 Procedure. 5
7.1 General . 5
7.2 Sample preparation . 5
7.2.1 General. 5
7.2.2 Preparation of polymer/matrix/salt solutions . 5
7.2.3 Deposition of the sample on the sample plate (target) . 5
7.2.4 Preparation and spotting of biopolymer/matrix solutions . 6
7.3 Instrument settings . 6
7.4 Recording spectra . 7
8 Data acquisition and processing . 7
8.1 General . 7
8.2 Calibration . 8
8.2.1 General. 8
8.2.2 Calibration of mass axis using synthetic-polymer standards . 8
8.2.3 Calibration of mass axis using biopolymer standards . 8
8.2.4 Self-calibration method . 8
8.3 Generation of calibration curve . 8
8.4 Signal intensity axis calibration . 8
9 Expression of results . 9
9.1 Calculation of molecular mass distribution . 9
9.2 Calculation of the average molecular masses . 9
10 Precision . 9
11 Test report . 9
Annex A (normative) Calibrants .11
Annex B (informative) Precision data .12
Bibliography .13
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ISO 10927:2018(E)

Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see the following
URL: www .iso .org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 61, Plastics, Subcommittee SC 5, Physical-
chemical properties.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 10927:2011), which has been technically
revised to update Figure 1 and 6.7 on data handling.
iv © ISO 2018 – All rights reserved

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ISO 10927:2018(E)

Introduction
The molecular mass and molecular mass distribution of a synthetic polymer are fundamental
characteristics that result from the polymerization process. They may be used for a wide variety of
correlations for fundamental studies and for processing and product applications. Determination of
the molecular mass and molecular mass distribution is used for quality control of polymers and for
specification purposes in the commerce of polymers. The comparability of MALDI-TOF-MS results
obtained in different laboratories can be ensured by using standardized conditions of measurement,
identical samples and identical matrix preparation methods. The classification of MALDI-TOF-
MS as an equitable (standardized) method compared with other established methods of polymer
characterization could result in a significant increase in the use of MALDI-TOF-MS.
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 10927:2018(E)
Plastics — Determination of the molecular mass and
molecular mass distribution of polymer species by matrix-
assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass
spectrometry (MALDI-TOF-MS)
1 Scope
This document specifies a general method for determining the average molecular mass and molecular
−1 −1
mass distribution of polymers (see Reference [1]) from 2 000 g ⋅ mol to 20 000 g ⋅ mol by matrix-
assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS).
The average molecular masses and molecular mass distributions are calculated from a calibration
curve constructed using synthetic-polymer and/or biopolymer standards. This method is therefore
classified as a relative method.
The method is not applicable to polyolefins or to polymers with a polydispersity >1,2.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 472, Plastics — Vocabulary
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the terms and definitions given in ISO 472 and the following apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— IEC Electropedia: available at http: //www .electropedia .org/
— ISO Online browsing platform: available at https: //www .iso .org/obp
3.1
matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight-mass spectrometry
MALDI-TOF-MS
mass-spectrometric technique in which the separation is based on different flight times in a field free
flight tube depending on the mass of formed polymer ions after ionization by a laser, desorption and
acceleration by high voltage
3.2
number-average molecular mass
M
n
∞
()NM×
∑ ii
i=1
M =
n
∞
N
i
∑
i=1
where N is the number of molecules of species i of molecular mass M
i i
© ISO 2018 – All rights reserved 1

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ISO 10927:2018(E)

3.3
mass-average molecular mass
M
w
∞
∞
2
NM× mM×
()
∑ ii ii
∑
i=1
i=1
M = =
w
∞ ∞
NM× m
()
ii i
∑ ∑
i=1 i=1
where
N is the number of molecules of species i of molecular mass M ;
i i
th
m is the mass of the i species (i.e. m = N M )
i i i i
3.4
z-average molecular mass
M
z
∞ ∞
∞
3 2
NM× mM×
zM×
()ii ()ii
∑ ∑ ii
∑∑
i=1 i=1
i=1
M = = =
z
∞ ∞ ∞
2
NM× mM× z
()
ii ii i
∑ ∑ ∑
i=1 i=1 i=1
where
N is the number of molecules of species i of molecular mass M ;
i i
th
m is the mass of the i species (i.e. m = N M );
i i i i
z = m M /Σm
i i i i
4 Principle
The MALDI process involves the desorption and the ionization of an analyte dispersed in an organic
small-molecule matrix. The matrix shall be able to absorb the laser energy. A metal salt may be added to
cationize the analyte. A polymer is co-crystallized or co-mixed with the matrix molecule and deposited
on the target. A short-duration UV laser pulse is used to desorb the matrix and the analyte. The laser
energy is transferred to the matrix molecules, causing them to vaporize. Analyte and matrix molecules
leave the target surface in a plume. Due to the very short desorption time, polymer molecules do not
degrade. The polymer in the desorption plume gains a cation and is accelerated by a high voltage, drifts
down the field-free flight tube and is detected at the end of the flight tube. The time of flight of the
species is a measure of its mass. From the distribution of arrival times and the calibration of the arrival
times with known mass standards, the mass distribution of the polymer is determined.
5 Reagents
5.1 Matrices
2,5-dihydroxybenzoic acid (gentisic acid, DHB), trans-2-[3-(4-tert-butylphenyl)-2-methyl-2-
propenylidene]malononitrile (DCTB), and 1,8,9-trihydroxyanthracene (dithranol) are the recommended
matrices for this method. All of these materials shall be at least 97 % pure. They shall be stored in a
freezer and warmed to room temperature immediately before use.
5.2 Solvents
The recommended solvent is tetrahydrofuran (THF) with the purity more than 99 %. THF with
an antioxidant, such as 2,6-di-tert-butyl-4-methylphenol (dibutylated hydroxytoluene, BHT) at
a concentration of 0,025 % to 0,1 % (m/V), shall be stored in an amber container. If THF without an
2 © ISO 2018 – All rights reserved

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ISO 10927:2018(E)

antioxidant is used, it shall be stored in an amber container under an inert gas. Otherwise, it will react
with oxygen to form peroxides which are hazardous on evaporative concentration.
Depending on the solubility of the polymer being investigated, toluene, methanol and acetone may also
be used.
High-purity solvents are recommended.
5.3 Salts
Lithium, sodium, potassium, cesium and silver trifluoroacetate are recommended since they are soluble
in THF and toluene. AgNO with ethanol as solvent may be used with the polymer and matrix in THF.
3
The salts shall be soluble in the solvent chosen for the polymer and the matrix. When silver nitrate is
used, relevant safety aspects should be borne in mind.
5.4 Molecular mass standards
The calibration of the mass spectrometer shall be carried out using biopolymers and/or synthetic
polymers with known repeating units and end groups. The molecular masses of the standards shall
lie within the range of the molecular mass of the polymer being investigated. The software of the mass
spectrometer shall be used for calibration. A list of recommended biopolymers and their molecular
masses is given in Annex A.
6 Apparatus
6.1 General
A schematic diagram of a MALDI-TOF mass spectrometer is shown in Figure 1. The main components are
a sample introduction chamber, a laser source, an ion source (target), a flight tube with an acceleration
region and an ion detector (linear detector). The instruments may have additionally an ion deflector
and a reflector detector.
Both commercially available TOF mass
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 10927
Deuxième édition
2018-06
Plastiques — Détermination de
la masse moléculaire et de la
distribution des masses moléculaires
des polymères par spectrométrie
de masse, à temps de vol, après
désorption/ionisation laser assistée
par matrice (SM-MALDI-TOF)
Plastics — Determination of the molecular mass and molecular mass
distribution of polymer species by matrix-assisted laser desorption/
ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS)
Numéro de référence
ISO 10927:2018(F)
©
ISO 2018

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ISO 10927:2018(F)

DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
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Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en oeuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Publié en Suisse
ii © ISO 2018 – Tous droits réservés

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ISO 10927:2018(F)

Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d'application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Réactifs . 2
5.1 Matrices . 2
5.2 Solvants . 3
5.3 Sels . 3
5.4 Étalons de masse moléculaire . 3
6 Appareillage . 3
6.1 Généralités . 3
6.2 Chambre d'introduction de l'échantillon/cible . 3
6.3 Source laser . 4
6.4 Tube de vol . 4
6.5 Détecteur . 4
6.6 Enregistrement de données . 4
6.7 Traitement des données . 5
7 Mode opératoire. 5
7.1 Généralités . 5
7.2 Préparation des échantillons . 5
7.2.1 Généralités . 5
7.2.2 Préparation des solutions polymère/matrice/sels . 5
7.2.3 Dépôt de l'échantillon sur la plaque porte-échantillon (cible) . 6
7.2.4 Préparation et dépôt des solutions biopolymère/matrice . 6
7.3 Paramétrage des instruments . 6
7.4 Enregistrement des spectres . 7
8 Acquisition et traitement des données . 8
8.1 Généralités . 8
8.2 Étalonnage . 8
8.2.1 Généralités . 8
8.2.2 Étalonnage de l'axe de masse à l'aide d'étalons de polymère synthétique . 8
8.2.3 Étalonnage de l'axe de masse à l'aide d'étalons de biopolymère . 8
8.2.4 Méthode d'auto-étalonnage . 8
8.3 Établissement de la courbe d'étalonnage . 9
8.4 Étalonnage de l'axe d'intensité du signal . 9
9 Expression des résultats. 9
9.1 Calcul de la distribution des masses moléculaires . 9
9.2 Calcul des masses moléculaires moyennes . 9
10 Fidélité . 9
11 Rapport d'essai . 9
Annexe A (normative) Étalons .11
Annexe B (informative) Données de fidélité .12
Bibliographie .13
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ISO 10927:2018(F)

Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l'intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l'Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/iso/fr/avant -propos .html.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 61, Plastiques, sous-comité SC 5,
Propriétés physicochimiques.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 10927:2011), qui a fait l'objet d'une
révision technique pour mettre à jour la Figure 1 et 6.7 sur le traitement des données.
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ISO 10927:2018(F)

Introduction
La masse moléculaire et la distribution des masses moléculaires d'un polymère synthétique constituent
des caractéristiques fondamentales résultant du processus de polymérisation. Celles-ci peuvent être
utilisées pour une grande variété de corrélations dans le cadre d'études fondamentales ainsi que pour
des applications relatives à la transformation et aux produits. La détermination de la masse moléculaire
et de la distribution des masses moléculaires est utilisée dans le contrôle qualité des polymères et à des
fins de spécification dans la commercialisation des polymères. L'utilisation de conditions de mesure
normalisées ainsi que de méthodes de préparation des échantillons et de la matrice identiques permet
de garantir la comparabilité des résultats obtenus par SM-MALDI-TOF dans divers laboratoires. Le
classement de la SM-MALDI-TOF comme méthode équivalente (normalisée) aux autres méthodes
établies de caractérisation des polymères pourrait se traduire par une augmentation significative de
l'utilisation de la SM-MALDI-TOF.
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NORME INTERNATIONALE ISO 10927:2018(F)
Plastiques — Détermination de la masse moléculaire et de
la distribution des masses moléculaires des polymères par
spectrométrie de masse, à temps de vol, après désorption/
ionisation laser assistée par matrice (SM-MALDI-TOF)
1 Domaine d'application
Le présent document spécifie une méthode générale permettant de déterminer la masse moléculaire
moyenne et la distribution des masses moléculaires moyennes de polymères (voir Référence [1])
−1 −1
comprises entre 2 000 g ⋅ mol et 20 000 g ⋅ mol par spectrométrie de masse, à temps de vol, après
désorption/ionisation laser assistée par matrice (SM-MALDI-TOF).
Les masses moléculaires et les distributions des masses moléculaires moyennes sont calculées à partir
d'une courbe d'étalonnage établie à l'aide d'étalons de polymères synthétiques et/ou de biopolymères.
Par conséquent, la présente méthode est classée comme méthode relative.
La présente méthode n'est pas applicable aux polyoléfines et aux polymères ayant une
polydispersité > 1,2.
2 Références normatives
Les documents suivants cités dans le texte constituent, pour tout ou partie de leur contenu, des
exigences du présent document. Pour les références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les
références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y compris les éventuels
amendements).
ISO 472, Plastiques — Vocabulaire
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions donnés dans l'ISO 472 ainsi que les
suivants s'appliquent.
L'ISO et l'IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— IEC Electropedia: disponible à l'adresse http: //www .electropedia .org/
— Plateforme de consultation en ligne ISO: disponible à l'adresse https: //www .iso .org/obp
3.1
spectrométrie de masse, à temps de vol, après désorption/ionisation laser assistée par matrice
SM-MALDI-TOF
technique de spectrométrie de masse dans laquelle la séparation repose sur des temps de vol différents
dans un tube de vol sans champ en fonction de la masse d'ions polymères formés après ionisation par
laser, désorption et accélération par une tension élevée
3.2
masse moléculaire moyenne en nombre
M
n
∞
()NM×
ii
∑
i=1
M =
n
∞
N
i
∑
i=1
© ISO 2018 – Tous droits réservés 1

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ISO 10927:2018(F)

où N est le nombre de molécules de l'espèce i de masse moléculaire M
i i
3.3
masse moléculaire moyenne en masse
M
w
∞
∞
2
NM×
mM×
()
ii
∑ ∑ ii
i=1
i=1
M = =
w
∞ ∞
NM× m
()
ii i
∑ ∑
i=1 i=1
où
N est le nombre de molécules de l'espèce i de masse moléculaire M ;
i i
e
m est la masse de la i espèce (c'est-à-dire m = N M )
i i i i
3.4
masse moléculaire moyenne en z
M
z
∞ ∞
∞
3 2
NM× mM× zM×
() ()
∑ ii ∑ ii ii
∑∑
i=1 i=1
i=1
M = = =
z
∞ ∞ ∞
2
NM× mM× z
()ii ii i
∑ ∑ ∑
i=1 i=1 i=1
où
N est le nombre de molécules de l'espèce i de masse moléculaire M ;
i i
e
m est la masse de la i espèce (c'est-à-dire m = N M );
i i i i
z = m M /Σm
i i i i
4 Principe
Le procédé MALDI implique la désorption et l'ionisation d'un analyte dispersé dans une matrice
composée de petites molécules organiques. La matrice doit pouvoir absorber l'énergie laser. Un sel
métallique peut être ajouté pour le transfert de protons à l'analyte. Un polymère est co-crystallisé ou
co-mélangé à la molécule composant la matrice et déposé sur la cible. Une brève impulsion laser UV est
utilisée pour la désorption de la matrice et de l'analyte. L'énergie laser est transférée aux molécules
composant la matrice, ce qui provoque leur vaporisation. L'analyte et les molécules composant la
matrice sont désorbés de la surface de la cible pour former un plasma. Les molécules de polymère ne
se dégradent pas en raison du temps de désorption très court. Le polymère dans le plasma gagne un
proton et est accéléré grâce à une tension élevée, parcourt le tube de vol sans champ et est détecté
à l'extrémité de celui-ci. Le temps de vol de l'espèce est une mesure de sa masse. La distribution des
masses du polymère est déterminée à partir de la distribution et de l'étalonnage des temps de vol
d'étalons de masse connue.
5 Réactifs
5.1 Matrices
De l'acide 2,5-dihydroxy-benzoïque (acide gentisique, DHB), 2-[(2E)-3-(4-tert-butylphényl)-2-
méthylprop-2-énylidène]malononitrile (DCTB) et du 1,8,9-trihydroxyanthracène (dithranol) sont les
matrices recommandées pour la présente méthode. La pureté minimale de ces matières doit être d'au
minimum 97 %. Elles doivent être stockées dans un congélateur et amenées à température ambiante
juste avant utilisation.
2 © ISO 2018 – Tous droits réservés

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ISO 10927:2018(F)

5.2 Solvants
Le solvant recommandé est le tétrahydrofurane (THF) de pureté supérieure à 99 %. Le THF contenant
un antioxydant tel que du 2,6-di-tert-butyl-4-méthylphénol (hydroxytoluène dibutylé, BHT) à une
concentration comprise entre 0,025 % et 0,1 % (m/V) doit être stocké dans un récipient ambré. Si du
THF sans antioxydant est utilisé, il doit être stocké dans un récipient ambré sous un gaz inerte. Sinon,
celui-ci réagira avec l'oxygène pour former des peroxydes présentant un danger lors de la concentration
par évaporation.
En fonction de la solubilité des polymères étudiés, il est également possible d'utiliser du toluène, du
méthanol et de l'acétone.
L'utilisation de solvants de pureté élevée est recommandée.
5.3 Sels
L'utilisation de lithium, de sodium, de potassium, de césium et de trifluoroacétate d'argent est
recommandée en raison de leur solubilité dans le THF et le toluène. Il est possible d'utiliser de l'AgNO
3
solubilisé dans l'éthanol avec le mélange de polymère et de matrice dans le THF.
Les sels doivent être solubles dans le solvant choisi pour le polymère et la matrice. En cas d'utilisation
de nitrate d'argent, il convient de tenir compte des aspects spécifiques liés à la sécurité.
5.4 Étalons de masse moléculaire
L'étalonnage du spectromètre de masse doit être effectué à l'aide de biopolymères et/ou de polymères
synthétiques constitués d'unités de répétition connues et de groupes terminaux définis. La masse
moléculaire des étalons doit être comprise dans la plage des masses moléculaires du polymère étudié.
Le logiciel du spectromètre de masse doit être utilisé pour l'étalonnage. Une liste des biopolymères
recommandés et de leurs masses moléculaires est donnée à l'Annexe A.
6 Appareillage
6.1 Généralités
Un schéma de principe d'un spectromètre de masse MALDI-TOF est illustré à la Figure 1. Il se compose
essentiellement d'une chambre d'introduction de l'échantillon, d'une source laser, d'une source d'ions,
d'un tube de vol avec zone d'accélération et d'un détecteur d'ions. Les instruments peuvent en outre
comporter un réflectron d'ions et un détecteur d'ions pour le mode réflectron.
Les systèmes et spectromètres de masse TOF disponibles dans le commerce et assemblés en laboratoire
peuvent être utilisés pour la présente méthode, à condition qu'ils satisfassent aux niveaux requis de
performances.
6.2 Chambre d'introduction de l'échantillon/cible
Un échantillon pour essai MALDI est constitué d'un film contenant l'analyte, la matrice et un mélange de
sels déposé sous forme de « spots » (points de dépôts d'échantillon) sur une plaque métallique. Le terme
cible MALDI désigne en général la plaque enti
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