ISO 6887-3:2003

Microbiology of food and animal feeding stuffs — Preparation of test samples, initial suspension and decimal dilutions for microbiological examination — Part 3: Specific rules for the preparation of fish and fishery products

ISO 6887-3:2003 specifies rules for the preparation of fish and fishery product samples and their suspension for microbiological examination when the samples require a different preparation from the method described in ISO 6887-1. ISO 6887-1 defines the general rules for the preparation of the initial suspension and decimal dilutions for microbiological examination. ISO 6887-3:2003 only describes methods of preparation that are applicable to several microorganisms simultaneously. It excludes the preparations that only apply to the detection and/or enumeration of a single microorganism where the methods of preparation are described in the relevant standard concerning that microorganism, for example Vibrio parahaemolyticus. ISO 6887-3:2003 is applicable to the following raw, processed, cooked or frozen fish and shellfish and their products: raw fish, crustaceans, molluscs and others; processed fish, crustaceans, molluscs and others; frozen fish, crustaceans, molluscs and others, in blocks or otherwise.

Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des dilutions décimales en vue de l'examen microbiologique — Partie 3: Règles spécifiques pour la préparation des produits de la pêche

L'ISO 6887-3:2003 spécifie des règles pour la préparation des échantillons de poissons et produits de la pêche et leur mise en suspension en vue de l'examen microbiologique, lorsque ces échantillons nécessitent une préparation différente de la méthode décrite dans l'ISO 6887-1. L'ISO 6887-1 définit des règles générales pour la préparation de la suspension mère et des dilutions décimales en vue de l'examen microbiologique. L'ISO 6887-3:2003 décrit uniquement les méthodes de préparation applicables à plusieurs micro-organismes simultanément. Elle exclut les préparations ne s'appliquant qu'à la recherche et/ou au dénombrement d'un seul micro-organisme pour lequel la méthode de préparation est décrite dans la norme appropriée correspondante à ce micro-organisme, par exemple Vibrio parahaemolyticus. L'ISO 6887-3:2003 est applicable aux poissons, coquillages et crustacés crus, transformés, cuits ou congelés et à leurs produits dérivés suivants: poissons, crustacés, mollusques et autres, crus, poissons, crustacés, mollusques et autres, transformés; poissons, coquillages, mollusques et autres, conglés, en pains ou autres,

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 24-Jul-2003
• Withdrawal Date: 24-Jul-2003
• ICS: 07.100.30 - Food microbiology
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 9 - Microbiology
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 9 - Microbiology
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Completion Date: 15-Mar-2017

Relations

• Revised: ISO 6887-3:2017 - Microbiology of the food chain — Preparation of test samples, initial suspension and decimal dilutions for microbiological examination — Part 3: Specific rules for the preparation of fish and fishery products
• Effective Date: 29-Dec-2012

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 6887-3
First edition
2003-08-01


Microbiology of food and animal feeding
stuffs — Preparation of test samples,
initial suspension and decimal dilutions
for microbiological examination —
Part 3:
Specific rules for the preparation of fish
and fishery products
Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la
suspension mère et des dilutions décimales en vue de l'examen
microbiologique —
Partie 3: Règles spécifiques pour la préparation des produits de la
pêche




Reference number
ISO 6887-3:2003(E)
©
ISO 2003

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ISO 6887-3:2003(E)
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Published in Switzerland

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ISO 6887-3:2003(E)
Contents Page
Foreword. iv
1 Scope. 1
2 Normative references . 2
3 Terms and definitions. 2
4 Principle . 3
5 Diluents . 3
5.1 Basic materials. 3
5.2 Diluents for general use . 3
5.3 Diluents for special purposes. 3
5.4 Distribution and sterilization of the diluent. 4
6 Apparatus. 4
7 Preparation of samples . 5
7.1 Frozen products . 5
7.2 Hard and dry products. 5
7.3 Liquid and non-viscous products . 5
7.4 Heterogeneous products. 5
8 General procedures . 5
8.1 General. 5
8.2 General case for acidic products . 6
8.3 High fat foods (for example over 20 % of total mass is fat). 6
9 Specific procedures. 6
9.1 Raw fish, crustaceans, molluscs and others . 6
9.2 Processed products of fish, crustaceans, molluscs and other products. 8
9.3 Frozen fish, crustaceans, molluscs and other products . 9
10 Further decimal dilutions . 10
Bibliography . 11

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ISO 6887-3:2003(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 6887-3 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9,
Microbiology.
ISO 6887 consists of the following parts, under the general title Microbiology of food and animal feeding
stuffs — Preparation of test samples, initial suspension and decimal dilutions for microbiological examination:
 Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension and decimal dilutions
 Part 2: Specific rules for the preparation of meat and meat products
 Part 3: Specific rules for the preparation of fish and fishery products
 Part 4: Specific rules for the preparation of products other than milk and milk products, meat and meat
products, and fish and fishery products
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 6887-3:2003(E)

Microbiology of food and animal feeding stuffs — Preparation
of test samples, initial suspension and decimal dilutions for
microbiological examination —
Part 3:
Specific rules for the preparation of fish and fishery products
WARNING — The use of this standard may involve hazardous materials, operations and equipment. It
is the responsibility of the user of this standard to establish appropriate safety and health practices
and to determine the applicability of regulatory limitations prior the use.
1 Scope
This part of ISO 6887 specifies rules for the preparation of fish and fishery product samples and their
suspension for microbiological examination when the samples require a different preparation from the method
described in ISO 6887-1. ISO 6887-1 defines the general rules for the preparation of the initial suspension and
decimal dilutions for microbiological examination.
This part of ISO 6887 only describes methods of preparation that are applicable to several microorganisms
simultaneously. It excludes the preparations that only apply to the detection and/or enumeration of a single
microorganism where the methods of preparation are described in the relevant standard concerning that
microorganism, for example Vibrio parahaemolyticus.
This part of ISO 6887 is applicable to the following raw, processed, cooked or frozen fish and shellfish and
their products:
a) RAW fish, crustaceans, molluscs and others, including
 fish, whole or fillets, with or without skin and heads, and gutted,
 fish, salted, dried smoked or pickled,
 cephalopods, whole or sliced,
 crustaceans, whole, including prawns, crayfish, lobsters, crabs and Norway lobsters,
 live gastropods, bivalves, echinoderms and tunicates, and
 snails;
b) PROCESSED fish, crustaceans, molluscs and others, including
 dried, smoked, marinated, salted, pickled and breaded fish or shellfish,
 fish, whole or prepared fillets, with or without skin,
 surimi and delicatessen fish products,
© ISO 2003 — All rights reserved 1

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ISO 6887-3:2003(E)
 whole or shelled crustaceans and molluscs, and crustacean and mollusc flesh,
 cooked fish, crustaceans, molluscs, holothurians, tunicates, shellfish and snail-based dishes;
c) FROZEN fish, crustaceans, molluscs and others, in blocks or otherwise, including
 fish, fish fillets and pieces,
 whole and shelled prawns,
 flaked crab,
 cephalopods, and
 shelled cooked shellfish and shelled snails.
NOTE 1 Milk and milk products are dealt with in ISO 8261.
NOTE 2 The purpose of the analysis performed on these test samples may be either hygiene testing or quality control.
However, the sampling techniques described in this part of ISO 6887 relate mainly to hygiene testing (on muscle tissues).
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 6887-1:1999, Microbiology of food and animal feeding stuffs — Preparation of test samples, initial
suspension and decimal dilutions for microbiological examination — Part 1: General rules for the preparation
of the initial suspension and decimal dilutions.
ISO 7218, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General rules for microbiological examinations.
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
laboratory sample
sample prepared for sending to the laboratory and intended for inspection or testing
[ISO 7002]
3.2
test portion
measured (volume or mass) representative sample taken from the laboratory sample for use in the
preparation of the initial suspension
3.3
initial suspension
primary dilution
suspension, solution or emulsion obtained after a weighed or measured quantity of the product under
examination (or of a test sample prepared from the product) has been mixed with, normally, a nine-fold
quantity of diluent, allowing large particles, if present, to settle
2 © ISO 2003 — All rights reserved

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ISO 6887-3:2003(E)
3.4
further decimal dilutions
suspensions or solutions obtained by mixing a measured volume of the initial suspension (3.3) with a nine-fold
volume of diluent and by repeating this operation with further dilutions, until a decimal dilution series, suitable
for the inoculation of culture media, is obtained
4 Principle
An initial suspension (3.3) is prepared to obtain as uniform a distribution as possible of the microorganisms
contained in the test sample.
A pre-enrichment or enrichment suspension is prepared in the same way, using the medium recommended by
the method of analysis concerned, except in the special cases mentioned in each product section of this part
of ISO 6887.
If necessary, decimal dilutions (3.4) are prepared in order to reduce the number of microorganisms per unit
volume to allow, after incubation, observation of any growth (in the case of liquid media) or colonies (in the
case of agar plates), as stated in each specific standard.
In order to restrict, if required, the range of enumeration to a given interval, or if high numbers of
microorganisms are foreseen, it is possible to inoculate only the necessary decimal dilutions (at least two
successive dilutions) needed to achieve the enumeration according to the calculation described in ISO 7218.
5 Diluents
5.1 Basic materials
See ISO 6887-1.
When examining raw, unprocessed marine fish for their natural marine (halophilic) microbial flora, the use of a
3,5 % to 4 % solution of sodium chloride (i.e. isotonic to seawater), for example, is recommended.
5.2 Diluents for general use
5.2.1 Peptone salt solution
See ISO 6887-1:1999, 5.2.1.
5.2.2 Buffered peptone water
See ISO 6887-1:1999, 5.2.2.
5.3 Diluents for special purposes
5.3.1 Peptone-salt solution with Bromocresol purple
5.3.1.1 Composition
Peptone salt solution (see 5.2.1) 1 000 ml
Bromocresol purple (0,04 % alcohol solution, e.g. ethanol solution) 0,1 ml
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ISO 6887-3:2003(E)
5.3.1.2 Preparation
Add 0,1 ml of Bromocresol purple to 1 000 ml of peptone salt solution (5.2.1).
5.3.1.3 Application
This solution may be used for certain acidic products so that adjustment of the pH can be carried out without
the use of a sterile pH probe (see 8.2).
Bromocresol purple is yellow at acidic pH, changing to purple at pH above 6,8.
5.3.2 Peptone solution
5.3.2.1 Composition
Enzymatic digest of casein 1 g
Water 1 000 ml
5.3.2.2 Preparation
Dissolve the components in the water, by heating if necessary.
If necessary, adjust the pH so that, after sterilization, it is 7,0 ± 0,2 at 25 °C.
5.3.2.3 Application
This solution may be used for bivalve molluscs, gastropods and other marine shellfish (see [1]).
NOTE Curre
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 6887-3
Première édition
2003-08-01



Microbiologie des aliments —
Préparation des échantillons, de la
suspension mère et des dilutions
décimales en vue de l'examen
microbiologique —
Partie 3:
Règles spécifiques pour la préparation
des produits de la pêche
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Preparation of test
samples, initial suspension and decimal dilutions for microbiological
examination —
Part 3: Specific rules for the preparation of fish and fishery products




Numéro de référence
ISO 6887-3:2003(F)
©
ISO 2003

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ISO 6887-3:2003(F)
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Publié en Suisse

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ISO 6887-3:2003(F)
Sommaire Page
Avant-propos. iv
1 Domaine d'application. 1
2 Références normatives. 2
3 Termes et définitions . 2
4 Principe . 3
5 Diluants . 3
5.1 Composants de base . 3
5.2 Diluants d'emploi général . 3
5.3 Diluants pour des besoins particuliers. 4
5.4 Distribution et stérilisation du diluant . 4
6 Appareillage. 4
7 Préparation des échantillons. 5
7.1 Produits congelés . 5
7.2 Produits durs et secs. 5
7.3 Produits liquides et non visqueux . 5
7.4 Produits hétérogènes . 5
8 Modes opératoires généraux . 6
8.1 Généralités. 6
8.2 Cas général des produits acides. 6
8.3 Aliments à haute teneur en matière grasse (par exemple plus de 20 % de matière grasse
sur la masse totale). 6
9 Modes opératoires spécifiques . 6
9.1 Poissons, crustacés, mollusques et autres, crus . 6
9.2 Poissons, crustacés, mollusques et autres produits transformés. 8
9.3 Poissons, mollusques, crustacés et autres produits congelés. 9
10 Dilutions décimales suivantes. 11
Bibliographie . 12

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ISO 6887-3:2003(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 6887-3 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 9,
Microbiologie.
L'ISO 6887 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Microbiologie des aliments —
Préparation des échantillons, de la suspension mère et des dilutions décimales en vue de l'examen
microbiologique:
 Partie 1: Règles générales pour la préparation de la suspension mère et des dilutions décimales
 Partie 2: Règles spécifiques pour la préparation des viandes et produits à base de viande
 Partie 3: Règles spécifiques pour la préparation des produits de la pêche
 Partie 4: Règles spécifiques pour la préparation des produits autres que les produits laitiers, les produits
carnés et les produits de la pêche

iv © ISO 2003 — Tous droits réservés

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NORME INTERNATIONALE ISO 6887-3:2003(F)

Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de
la suspension mère et des dilutions décimales en vue de
l'examen microbiologique —
Partie 3:
Règles spécifiques pour la préparation des produits de la pêche
ATTENTION — L'usage de la présente norme peut impliquer l'emploi de matériels, équipements ou
manipulations dangereux. Il est de la responsabilité de l'utilisateur de la présente norme d'établir les
pratiques de sécurité et règles sanitaires et de déterminer l'application prioritaire de limites
réglementaires avant usage de la norme.
1 Domaine d'application
La présente partie de l'ISO 6887 spécifie des règles pour la préparation des échantillons de poissons et
produits de la pêche et leur mise en suspension en vue de l'examen microbiologique, lorsque ces échantillons
nécessitent une préparation différente de la méthode décrite dans l'ISO 6887-1. L'ISO 6887-1 définit des
règles générales pour la préparation de la suspension mère et des dilutions décimales en vue de l'examen
microbiologique.
La présente partie de l'ISO 6887 décrit uniquement les méthodes de préparation applicables à plusieurs
micro-organismes simultanément. Elle exclut les préparations ne s'appliquant qu'à la recherche et/ou au
dénombrement d'un seul micro-organisme pour lequel la méthode de préparation est décrite dans la norme
appropriée correspondante à ce micro-organisme, par exemple Vibrio parahaemolyticus.
La présente partie de l'ISO 6887 est applicable aux poissons, coquillages et crustacés crus, transformés, cuits
ou congelés et à leurs produits dérivés suivants:
a) poissons, crustacés, mollusques et autres, CRUS, y compris
 poissons entiers ou en filets, avec ou sans peau et/ou tête, vidés,
 poissons salés, séchés, fumés ou saumurés,
 céphalopodes, entiers ou tranchés,
 crustacés entiers du type crevettes, langoustes, homards, crabes et langoustines,
 gastéropodes, bivalves, échinodermes et tuniciers vivants, et
 escargots;
b) poissons, crustacés, mollusques et autres, TRANSFORMÉS, y compris
 poissons ou coquillages séchés, fumés, marinés, salés, saumurés et panés,
 poissons entiers ou en filets, avec ou sans peau,
© ISO 2003 — Tous droits réservés 1

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ISO 6887-3:2003(F)
 surimi et charcuterie de poisson,
 crustacés et mollusques entiers ou décortiqués et leur chair,
 poissons cuisinés, plats cuisinés à base de crustacés, mollusques, holothuries, tuniciers, coquillages
et escargots;
c) poissons, coquillages, mollusques et autres, CONGELÉS, en pains ou autres, y compris
 poissons, filets et morceaux de poisson,
 crevettes entières ou décortiquées,
 chair de crabe,
 céphalopodes, et
 coquillages et crustacés cuits décortiqués et escargots décoquillés.
NOTE 1 Le lait et les produits laitiers font l'objet de l'ISO 8261.
NOTE 2 L'objet de l'analyse menée sur ces échantillons pour essai peut être une analyse d'hygiène ou bien un
contrôle qualité. Cependant, les techniques de prélèvement décrites dans la présente partie de l'ISO 6887 relèvent
davantage d'analyse d'hygiène (sur tissus musculaires).
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 6887-1:1999, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons de la suspension mère et des
dilutions décimales en vue de l'examen microbiologique — Partie 1: Règles générales pour la préparation de
la suspension mère et des dilutions décimales
ISO 7218, Microbiologie des aliments — Règles générales pour les examens microbiologiques
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
échantillon pour laboratoire
échantillon dans l'état de préparation où il est envoyé au laboratoire et destiné à être utilisé pour un contrôle
ou pour des essais
[ISO 7002]
3.2
prise d'essai
échantillon représentatif mesuré (volume ou masse) prélevé sur l'échantillon pour laboratoire pour servir à la
préparation de la suspension mère
2 © ISO 2003 — Tous droits réservés

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ISO 6887-3:2003(F)
3.3
suspension mère
première dilution
suspension, solution ou émulsion obtenues après qu'une quantité pesée ou mesurée du produit à analyser
(ou de l'échantillon pour essai préparé à partir de ce produit) a été mélangée avec une quantité de diluant
égale le plus souvent à neuf fois cette quantité de produit, en laissant se déposer les particules grossières, s'il
y en a
3.4
dilutions décimales suivantes
suspensions ou solutions obtenues en mélangeant un volume mesuré de la suspension mère (3.3) avec un
volume de diluant égal à neuf fois le volume prélevé de la suspension mère et en répétant cette opération sur
chaque dilution préparée de la sorte, jusqu'à obtention d'une gamme de dilutions décimales, appropriée pour
l'ensemencement des milieux de culture
4 Principe
Préparation de la suspension mère (3.3), de façon à obtenir une répartition aussi uniforme que possible des
micro-organismes contenus dans l'échantillon pour essai.
Préparation d'une suspension de préenrichissement ou d'enrichissement de la même façon, avec utilisation
du milieu préconisé par la méthode d'analyse concernée, sauf cas particuliers mentionnés dans chaque
chapitre relatif à un produit de la présente partie de l'ISO 6887.
Préparation, si nécessaire, de dilutions décimales (3.4) en vue de réduire le nombre de micro-organismes par
unité de volume pour permettre, après incubation, d'observer leur éventuel développement (cas des milieux
liquides) ou d'observer les colonies (cas des boîtes de gélose), comme précisé dans chaque norme
spécifique.
Pour restreindre, si nécessaire, le domaine de dénombrement à un intervalle donné, ou si des nombres
élevés de micro-organismes sont attendus, il est possible d'ensemencer uniquement les dilutions décimales
nécessaires (au moins deux dilutions successives) pour pouvoir effectuer le dénombrement selon le mode de
calcul décrit dans l'ISO 7218.
5 Diluants
5.1 Composants de base
Voir l'ISO 6887-1.
Pour examiner la flore microbienne marine naturelle (halophile) des poissons de mer crus non transformés, il
est recommandé d'utiliser par exemple une solution de chlorure de sodium à 3,5 % à 4 % (c'est-à-dire
isotonique par rapport à l'eau de mer).
5.2 Diluants d'emploi général
5.2.1 Solution de peptone-sel
Voir l'ISO 6887-1:1999, 5.2.1.
5.2.2 Eau peptonée tamponnée
Voir l'ISO 6887-1:1999, 5.2.2.
© ISO 2003 — Tous droits réservés 3

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ISO 6887-3:2003(F)
5.3 Diluants pour des besoins particuliers
5.3.1 Solution de peptone-sel avec pourpre de bromocrésol
5.3.1.1 Composition
Solution de peptone-sel (voir 5.2.1) 1 000 ml
Pourpre de bromocrésol (solution alcoolisée à 0,04 %, par exemple 0,1 ml
solution dans l'éthanol)
5.3.1.2 Préparation
Diluer 0,1 ml de pourpre de bromocrésol dans 1 000 ml de solution de peptone-sel (5.2.1).
5.3.1.3 Application
Cette solution peut être utilisée pour l'analyse de certains produits acides, ce qui permet de régler le pH sans
utiliser de sonde de pH stérile (voir 8.2).
Le pourpre de bromocrésol est jaune à un pH acide et vire au pourpre à un pH au-dessus de 6,8.
5.3.2 Solution de peptone
5.3.2.1 Composition
Digestat enzymatique de caséine 1 g
Eau 1 000 ml
5.3.2.2 Préparation
Dissoudre les composants dans l'eau en chauffant si nécessaire.
Si nécessaire, ajuster le pH de sorte qu'après stérilisation, il soit de 7,0 ± 0,2 à 25 °C.
5.3.2.3 Application
Cette solution peut être utilisée dans le cas de l'analyse de mollusques bivalves, gastéropodes et autres
coquillages marins (voir [1]).
NOTE Les études disponibles actuellement ne montrent pas clairement que seul ce diluant peut être utilisé pour
l'analyse des mollusques bivalves, gastéropodes et autres coquillages marins. La solution de peptone-sel (5.2.1), diluant à
usage général, peut également être utilisée, depuis qu'il a été démontré que ce dernier produisait des résultats
acceptables pour ce type de produits (voir [2] et [3]).
5.4 Distribution
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