ISO 2293:1988

Meat and meat products — Enumeration of micro-organisms — Colony count technique at 30 degrees C (Reference method)

Viande et produits à base de viande — Dénombrement des micro-organismes — Méthode par comptage des colonies obtenues à 30 degrés C (Méthode de référence)

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 17-Aug-1988
• Withdrawal Date: 17-Aug-1988
• ICS: 07.100.30 - Food microbiology
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 6 - Meat, poultry, fish, eggs and their products
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 6 - Meat, poultry, fish, eggs and their products
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Completion Date: 25-Jul-1997

Relations

• Revises: ISO 2293:1976 - Meat and meat products — Aerobic count at 30 degrees C (Reference method)
• Effective Date: 15-Apr-2008

Standards Content (Sample)

f,
-
IS0
INTERNATIONAL STANDARD 2293
Second edition
1988-08-15
~~
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXAYHAPOAHAR OPrAHM3AuMR il0 CTAHAAPTM3AuMM
Meat and meat products - Enumeration of
micro-organisms - Colony count technique at 30 OC
(Reference method)
Viandes et produits à base de viande - Dénombrement des micro-organismes - Méthode
par comptage des colonies obtenues B 30 OC (Méthode de référence)
Reference number
IS0 2293 : 1988 (E)

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IS0 2293 : 1- (E)
Foreword
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national standards bodies (IS0 member bodies). The work of preparing International
Standards is normally carried out through IS0 technical committees. Each member
a subject for which a technical committee has been established has
body interested in
the right to be represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. IS0
collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all
matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the IS0 Council. They are approved in accordance with IS0 procedures requiring at
least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard IS0 2293 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34,
Agricultural food products.
This second edition cancels and replaces the first edition (IS0 2293 : 19761, of which it
constitutes a technical revision.
0 International Organization for Standardization, 1988 0
Printed in Switzerland

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INTERNATIONAL STANDARD IS0 2293 : 1988 (E)
Meat and meat products - Enumeration of
micro-organisms - Colony count technique at 30 OC
(Reference method)
1 Scope 4 Principle
This International Standard specifies the reference method for
4.1 Preparation of two poured plates using a specified
the enumeration of micro-organisms present in meat and meat
a specified quantity of the test
culture medium, and using
products by counting the colonies growing in a solid medium
sample if the initial product is liquid (drip), or a specified quan-
-
after incubating aerobically at 30 OC. It has been drafted in con-
tity of an initial supension in the case of other products.
formity with IS0 4833, Microbiology - General guidance for
enumeration of micro-organisms - Colony count technique
Preparation of other pairs of poured plates, under the same
at 30 OC.
conditions, using decimal dilutions of the test sample or of the
initial suspension.
A limitation on the applicability of this International Standard is
imposed by the method's susceptibility to a large degree of
4.2 Aerobic incubation of the plates at 30 OC for 72 h.
variability. The method should be applied and the results inter-
preted in the light of the information given in 10.2.
4.3 Calculation of the number of micro-organisms per
millilitre or per gram of sample from the number of colonies
2 Normative references
obtained in selected plates (see 10.1).
The following standards contain provisions which, through
reference in this text, constitute provisions of this International
5 Culture media and dilution fluid
Standard. At the time of publication, the editions indicated
were valid. All standards are subject to revision, and parties to
5.1 Basic materials
agreements based on this International Standard are encour-
aged to investigate the possibility of applying the most recent
In order to improve the reproducibility of the results, it is
editions of the standards listed below. Members of IEC and IS0
recommended that, for the preparation of the culture media,
maintain registers of currently valid International Standards.
a complete dehydrated
dehydrated basic components, or
medium, be used. The manufacturer's instructions shall be
IS0 3100-1 : -'I, Meat and meat products - Sampling and
'b
rigorously followed.
preparation of test samples - Part 1: Sampling.
The chemicals used shall be of recognized analytical quality.
IS0 3100-2: 1988, Meat and meat products - Sampling and
preparation of test samples - Part2: Preparation of test
The water used shall be distilled or deionized, and shall be free
samples for microbiological examination.
from substances that might inhibit the growth of micro-
organisms under the test conditions.
IS0 6887: 1983, Microbiology - General guidance for the
preparation of dilutions for microbiological examination.
If the media and dilution fluid are not used immediately, they
shall, unless otherwise specified, be stored in the dark at a
temperature between O OC and + 5 OC, and in conditions that
3 Definition
prevent any change in their composition. They shall not be kept
for longer than 1 month.
For the purposes of this International Standard, the following
definition applies.
5.2 Dilution fluid
micro-organisms: Bacteria, yeasts and moulds growing
at 30 OC, under the conditions specified in this Inter- Refer to IS0 6887 and to the International Standard dealing
aerobically
national Standard. with the product under examination.
1) To be published.
1

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IS0 2293 : 1988 (E)
5.3 Plate count agar
6 Apparatus and glassware
Composition
NOTE - Disposable apparatus is an acceptable alternative to
if it has similar specifications.
glassware
Tryptone') 5,O g
Dehydrated yeast extract 23 g
Usual microbiological laboratory apparatus and, in particular,
Anhydrous D-glucose (anhydrous dextrose) 1,o g
the following.
Agar in powder or flake form 12 g to 18 g2)
Water 1 000 ml
6.1 Blending equipment.
Preparation
One of the following shall be used :
Dissolve the components or the complete dehydrated medium
a) mechanical meat mincer, laboratory size, capable of
in the water by boiling. Adjust the pH so that after sterilization a plate with holes not exceeding
being sterilized, fitted with
it is 7,O 2 0,2 at 25 OC.
4 mm in diameter;
Dispense the medium into test tubes (6.9), in quantities of peristaltic-type blender (Stomacher), with sterile plastic
b)
15 ml per tube, or into flasks or bottles (6.9) of capacity not bags.
greater than 500 ml, in quantities equal to about half the
volume of the respective container.
or wet
6.2 Apparatus for dry sterilization (oven)
4
Sterilization (autoclave).
Sterilize in an autoclave (6.2) at 121 OC k 1 OC for 15 min.
If the medium is to be used immediately, cool it to
Apparatus that will come into contact with the culture media,
45 OC + 0,5 OC in the water-bath (6.6) before use. If not,
the dilution fluid or the sample, particularly plastic apparatus,
before beginning the microbiological examination, in order to
except for apparatus that is supplied sterile, shall be sterilized
avoid any delay when pouring the medium, completely melt the
either
medium in a boiling water-bath, and then cool it to
45 OC I 0,5 OC in the water-bath (6.6).
-
by being kept at 170 OC to 175 OC for not less than 1 h
in the oven, or
5.4 Water-agar medium (if necessary - see 9.2.1.4)
-
at 121 OC k 1 OC for not less than
by being kept
20 min in the autoclave.
Composition
6.3 Incubator, capable of being
...

IS0
NORME INTERNATIONALE
2293
Deuxième édition
1988-08-15
~~ ___
~____
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXAYHAPOAHAR OPrAHM3AuMR no CTAHAAPTM3AuMM
Viandes et produits à base de viande -
Dénombrement des micro-organismes - Méthode par
comptage des colonies obtenues à 30 OC (Méthode de
référence)
Meat and meat products - Enumeration of micro-organisms - Colony count technique at
30 OC (Reference method)
Numéro de référence
IS0 2293 : 1988 (F)

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IS0 2293 : 1988 (FI
Avant-propos
L‘ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d‘organismes nationaux de normalisation (comités membres de I‘ISO). L’élaboration
I’ISO.
des Normes internationales est en général confiée aux comités techniques de
Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec 1’1S0 participent également aux travaux. L‘ISO col-
labore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale IS0 2293 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (IS0 2293 : 1976i, dont
elle constitue une révision technique.
@ Organisation internationale de normalisation, 1988 0
Imprimé en Suisse

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IS0 2293 : 19ûû (FI
NORME INTERNATIONALE
Viandes et produits à base de viande -
Dénombrement des micro-organismes - Méthode par
comptage des colonies obtenues à 30 OC (Méthode de
référence)
1 Domaine d’application IS0 3100-2: 1988, Viandes et produits à base de viande -
Échantillonnage et préparation des échantillons pour essai -
La présente Norme internationale prescrit la méthode de réfé-
Partie2: Traitement des échantillons pour essai en vue de
rence pour le dénombrement des micro-organismes dans la Sexamen microbiologique.
viande et les produits à base de viande, par comptage des colo-
nies obtenues en milieu solide après incubation en aérobiose à IS0 6887, Microbiologie - Directives générales pour la prépa-
30 OC. Elle a été élaborée conformément à 1’1S0 4833, Micro-
ration des dilutions en vue de Sexamen microbiologique.
biologie - Directives générales pour le dénombrement des
micro-organismes - Méthode par comptage des colonies
obtenues à 30 OC.
3 Définition
Des limites sont imposées aux possibilités d’application de la
Pour les besoins de la présente Norme internationale, la défini-
présente Norme internationale, du fait que cette méthode est
tion suivante s’applique.
sujette à de grandes variations. Il est recommandé d‘appliquer
cette méthode et d’interpréter les résultats à la lumière des ren-
micro-organismes: Bactéries, levures et moisissures se déve-
seignements donnés en 10.2.
à 30 OC, dans les conditions opératoires
loppant en aérobiose
décrites dans la présente Norme internationale.
+
2 Références normatives
4 Principe
Les normes suivantes contiennent des dispositions qui, par
suite de la référence qui en est faite, constituent des disposi-
4.1 Ensemencement en profondeur d’un milieu de culture
tions valables pour la présente Norme internationale. Au
défini, coulé dans deux boîtes de Petri, avec une quantité déter-
moment de la publication de cette norme, les éditions indiquées
minée de l‘échantillon pour essai si le produit à examiner est
étaient en vigueur. Toute norme est sujette à révision et les
liquide, ou avec une quantité déterminée de suspension mère
parties prenantes des accords fondés sur cette Norme inter-
dans le cas d’autres produits.
nationale sont invitées à rechercher la possibilité d’appliquer les
éditions les plus récentes des normes indiquées ci-après. Les
Dans les mêmes conditions, ensemencement des dilutions
membres de la CE1 et de 1’1S0 possèdent le registre des Normes
décimales obtenues à partir de l‘échantillon pour essai ou de la
internationales en vigueur à un moment donné.
suspension mère.
Viandes et produits à base de viande -
IS0 3100-1 : -l),
Échantillonnage et préparation des échantillons pour essai - 4.2 Incubation de ces boîtes pendant 72 h à 30 OC en aéro-
Partie 1: Échantillonnage. biose.
1) A publier
1

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IS0 2293 : 1988 (FI
4.3 Calcul du nombre de micro-organismes par millilitre ou à l’autoclave (6.2) à 121 OC * 1 OC pendant 15 min.
Stériliser
par gramme d’échantillon, à partir du nombre de colonies obte- Si le milieu est utilisé extemporanément, le refroidir à
nues dans les boîtes de Petri retenues (voir 10.1). 45 O C k 0,5 OC au bain d’eau (6.6) avant emploi. Dans le cas
contraire, avant de commencer l’examen microbiologique, afin
d‘éviter toute attente au moment de couler la gélose, faire
5 Milieux de culture et diluant fondre complètement le milieu au bain d’eau bouillante, puis
refroidir à 45 OC k 0,5 OC au bain d’eau (6.6).
5.1 Composants de base
5.4 Gélose non nutritive, dite ((gélose blanche))
Pour améliorer la reproductibilité des résultats, il est recom-
(si nécessaire, voir 9.2.1.4)
mandé d‘utiliser, pour la préparation des milieux de culture, des
composants de base déshydratés ou des milieux complets
déshydratés. Les prescriptions du fabricant doivent être suivies
Composition
scrupuleusement.
Agar-agar, en poudre ou en paillettes à 18 g2)
12 g
Les produits chimiques utilisés doivent être de qualité analyt-
Eau 1 O00 ml
que reconnue.
Préparation
L‘eau utilisée doit être de l’eau distillée ou déionisée, exempte
de substances susceptibles d’inhiber la croissance des micro-
Dissoudre l’agar-agar dans l’eau en portant à ébullition. Ajuster
organismes dans les conditions de l’essai.
-
le pH, de sorte qu’après stérilisation, il soit de 7,O + 0,2 à
25 OC.
Si les milieux et le diluant ne sont pas utilisés extemporané-
ment, ils doivent, sauf spécifications contraires, être conservés
Répartir le milieu dans des tubes à essais (6.9), à raison de 4 ml
à l’obscurité entre O OC et + 5 OC pendant 1 mois au maximum,
par tube, ou dans des fioles (6.9) de 150 ml, à raison de 100 ml
dans des conditions évitant toute modification de leur composi-
par fiole.
tion.
Stériliser à l’autoclave à 121 OC k 1 OC pendant 15 min. Si le
5.2 Diluant
milieu est utilisé extemporanément, le refroidir à
45 OC f 0.5 OC au bain d‘eau (6.6) avant emploi. Dans le cas
Se reporter à I’ISO 6887 et à la Norme internationale traitant du
contraire, avant de commencer l‘examen microbiologique, afin
produit à examiner.
d’éviter toute attente au moment de couler la gélose, faire
fondre complètement le milieu au bain d‘eau bouillante, puis
refroidir à 45 OC k 0.5 OC au bain d‘eau (6.6).
5.3 Gélose pour dénombrement
Composition
6 Appareillage et verrerie
Tryptone’) 5,O g
Extrait de levure déshydraté 2,5
NOTE - Le matériel à usage unique est acceptable au même titre que
D-glucose anhydre (dextrose anhydre)
1,o LI2)
la verrerie réutilisable, si ses spécifications sont convenables.
Agar-agar, en poudre ou en paillettes 12 gà 18 g
.-
Eau 1 O00 ml
Matériel courant de laboratoire de microbiologie, et notamment
Préparation
6.1 Appareil pour l’homogénéisation.
Dissoudre les composants ou le milieu complet déshydraté
Un des appareils suivants doit être utilisé:
dans l’eau en portant à ébullition. Ajuster le pH, de sorte
qu‘après stérilisation, il soit de 7,O k 0,2 à 25 OC.
a) un homogénéisateur mécanique à viande, tail
...