ISO 3091:1975

Meat and meat products - Determination of nitrate content (Reference method)

The method consists in extracting of a test portion with hot water, precipitating of proteins and filtrating. Reduction of the extracted nitrates into nitrites by metallic cadmium. Formation of a red colouration by adding of sulfanilamide and nphthyl ethylenediamine hydrochloride and photometric measurement at a wavelength of 538 nm.

Viandes et produits à base de viande — Détermination de la teneur en nitrates (Méthode de référence)

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 31-Aug-1975
• ICS: 67.120.10 - Meat and meat products
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 6 - Meat, poultry, fish, eggs and their products
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 6 - Meat, poultry, fish, eggs and their products
• Current Stage: 9093 - International Standard confirmed
• Start Date: 20-Feb-2024
• Completion Date: 13-Dec-2025

Overview

ISO 3091:1975 is an internationally recognized reference method for determining nitrate content in meat and meat products. Developed by the International Organization for Standardization (ISO) under Technical Committee ISO/TC 34 (Agricultural food products), this standard outlines a precise chemical analysis procedure. It provides a reliable way to extract, reduce, and measure nitrates in meat, ensuring consistent quality control and safety assessments across the food industry.

The method involves extracting nitrates from meat samples using hot water, precipitating proteins, and filtering the extract. Extracted nitrates are then chemically reduced to nitrites using a metallic cadmium column. A red color develops upon the addition of sulfanilamide and N-1-naphthylethylenediamine hydrochloride, which is quantified through photometric measurement at a wavelength of 538 nm. Results are expressed as milligrams of potassium nitrate per kilogram of product.

Key Topics

• Scope & Application: Applicable to all types of meat and meat products for nitrate content quantification, serving as a reference method in food safety and quality control laboratories.
• Extraction & Preparation: Extraction of nitrate using hot water; precipitation and removal of interfering proteins.
• Cadmium Reduction: Use of a cadmium column to reduce nitrates to nitrites, enhancing selectivity and accuracy of detection.
• Color Development: Formation of a measurable red azo dye complex through a diazotization reaction with sulfanilamide and N-1-naphthylethylenediamine hydrochloride.
• Photometric Measurement: Absorbance measured at 538 nm via photoelectric colorimeter or spectrophotometer to determine nitrate concentration.
• Calibration Curve: Preparation of sodium nitrite standards to calibrate and quantify nitrate concentrations, ensuring precision and repeatability.
• Repeatability & Reporting: Standard requires that duplicate tests on the same sample show less than 10% variation, with detailed reporting of all conditions and results.

Applications

• Food Industry Quality Control: ISO 3091:1975 provides a standardized way to monitor nitrate levels in meat products, ensuring products meet safety regulations and consumer expectations.
• Regulatory Compliance: Facilitates compliance with food safety authorities by providing a validated method for nitrate quantification.
• Research & Development: Supports investigations into nitrate content variations caused by processing methods or ingredient changes.
• Consumer Safety: Monitoring of nitrates helps control potential health risks related to nitrate and nitrite intake from meat consumption.
• International Trade: Enables consistent and comparable nitrate measurements, crucial for exporters and importers in meeting international food standards.

Related Standards

• ISO 2918: Meat and meat products - Determination of nitrite content (Reference method) - complements ISO 3091 by focusing on nitrites.
• ISO 3100: Meat and meat products - Sampling - standardizes sampling to ensure representative test portions.
• Analytical Techniques for Food Safety: Standards related to photometric methods and chemical reagent quality ensure reliability across laboratory analyses.
• Food Additives and Contaminants Testing: Other ISO standards for detection of preservatives and contaminants support comprehensive meat safety evaluation.

---

Adopting ISO 3091:1975 ensures accurate, reproducible nitrate analyses in meat products, reinforcing food safety frameworks and supporting global trade in agriculture and food products. Technical accuracy, detailed procedural guidance, and defined calibration promote trusted nitrate measurements vital for industry stakeholders.

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL STANDARD
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION .MEXflYHAPOAHAFI OPI-AHM3AUMA l-IO CTAHAAPTM3ALWiM*ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Determination of nitrate content
Meat and meat products -
(Reference method)
Viandes et produits ;i base de viande - De ’termination de la teneur en nitrates (Me ’thode de re ’f&ence)
First edition - 1975-09-01
UDC 637.5 : 546.175 Ref. No. IS0 3091-1975 (E)
Descriptors : meat, meat products, chemical analysis, determination of content, nitrates.
Price based on 5 pages
FOREWORD
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation
of national standards institutes (IS0 Member Bodies). The work of developing
International Standards is carried out through IS0 Technical Committees. Every
Member Body interested in a subject for which a Technical Committee has been set
up has the right to be represented on that Committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the Technical Committees are circulated
to the Member Bodies for approval before their acceptance as International
Standards by the IS0 Council.
International Standard IS0 3091 was drawn up by Technical Committee
ISO/TC 34, Agricultural food products, and circulated to the Member Bodies in
May 1974.
It has been approved by the Member Bodies of the following countries :
Australia Germany South Africa, Rep. of
Austria Hungary Spain
Bulgaria India Thailand
Czechoslovakia Ireland Turkey
Denmark Israel United Kingdom
Netherlands U.S.S.R.
Egypt, Arab Rep. of
Poland Yugoslavia
Ethiopia
France Romania
The Member Body of the following country expressed disapproval of the document
on technical grounds :
Canada
0 International Organization for Standardization, 1975 l
Printed in Switzerland
IS0 3091-1975 (E)
INTERNATIONAL STANDARD
Meat and meat products -
Determination of nitrate content
(Reference method)
1 SCOPE AND FIELD OF APPLICATION 5.2.2 Reagent II
This International Standard specifies a reference method Dissolve 220g of zinc acetate dihydrate
for the determination of the nitrate content of meat and [Zn(CHaCOO)2=2H20] and 30 ml of glacial acetic acid in
meat products.
water and dilute to 1 000 ml.
5.2.3 Borax solution, saturated
2 REFERENCES
Dissolve 50 g of disodium tetraborate decahydrate
IS0 2918, Meat and meat products - Determination of
(Na2B407J OH20) in 1 000 ml of tepid water and cool to
nitrite con tent (Reference method).
room temperature.
I SO 3 100, Meat and meat products - Sampling.
5.3 Cadmium sulphate solution, 30 g/l.
Dissolve 37 g of cadmium sulphate (3CdSOa.8H20) in
3 DEFINITION
water and dilute to 1 000 ml.
nitrate content of meat and meat products : The nitrate
content determined according to the procedure described in
5.4 Hydrochloric acid solution, about 0,l N.
this International Standard and expressed as milligrams of
potassium nitrate per kilogram (parts per million).
Dilute 8 ml of concentrated hydrochloric acid solution
(pzc I,19 g/ml) to 1 000 ml with water.
4 PRINCIPLE
5.5 Ammonia buffer solution, pH 9,6 to 9,7.
Extraction of a test portion with hot water, precipitation of
Dilute 20 ml of concentrated hydrochloric acid
the proteins and filtration.
(p2c I,19 g/ml) with 500 ml of water. After mixing, add
Reduction of the extracted nitrates to nitrite by metallic
10 g of ethylenediamine tetra-acetic acid disodium-salt
cadmium. Development of a red colour by addition of
dihydrate, [CH~N(CH~COOH)CH~COONa]2~2H20, and
sulphanilamide and N-l -naphthyIethyIenediamine dihydro-
55 ml of concentrated ammonia (p2e 0,88 g/ml). Dilute to
chloride to the filtrate and photometric measurement at
1 000 ml with water and mix. Check the pH.
a wavelength of 538 nm.
5.6 Sodium nitrite standard solutions.
5 REAGENTS
Dissolve 1,000 g of sodium nitrite (NaNO*) in water and
dilute to 100 ml in a one-mark volumetric flask. Pipette
All reagents shall be of analytical quality. The water used
5 ml of the solution into a 1 000 ml one-mark volumetric
shall be distilled water or water of at least equivalent
flask. Dilute to the mark.
purity.
Prepare a series of standard solutions by pipettrng 5 ml,
5.1 Zinc rods, length about 15 cm and diameter 5 to
10 ml and 20 ml of this solution into 100 ml one-mark
7 mm.
volumetric flasks and diluting to the mark with water.
These standard solutions contain respectively 2,5 rug,
5.2 Solutions for precipitation of proteins
5,0 pg and IO,0 pg of sodium nitrite per millilitre.
5.2.1 Reagent I
The standard solutions and the dilute (0,05 g/l) sodium
Dissolve 106 g of potassium ferrocyanide trihydrate
nitrite solution from which they are prepared shall be made
[ KdFe(CN)em3H20] in water and dilute to 1 000 ml.
up on the day of use.
IS0 30914975 (E)
5.7 Solutions necessary for colour development 6.9 Conical flask, 300 ml.
5.7.1 Solution I
Dissolve, by heating on a water bath, 2 g of sulphanilamide
7 SAMPLE
(NH&H4S02NH2) in 800 ml of water. Cool, filter, if
necessary, and add 100 ml of concentrated hydrochloric
7.1 Proceed from a representative sample of at least 200 g.
acid solution (p20 I,19 g/ml), while stirring. Dilute to
See IS03100.
1 000 ml with water.
7.2 Prepare the test sample (8.1) immediately or, if this
5.7.2 Solution II
cannot be done, store the sample at a temperature of 0 to
5 ‘C, for not longer than 4 days.
Dissolve 0,25 g of A/-I-naphthylethylenediamine dihydro-
chloride (C, oH7NHCH&H2NHZa2HCI) in water. Dilute
to 250 ml with water.
Store the solution in a wel I -stoppered brown bo Ittle. It shall
8 PROCEDURE
be ke pt in a refrigerat or, for not longe r than one wee k.
Preparation of test sample
8.1
5.7.3 Solution Ill
Make the sample homogeneous by passing it at least twice
Dilute 445 ml of concentrated hydrochloric acid solution
through the meat mincer (6.1) and mixing. Keep it in a
(pzc I,19 g/ml) to 1 000 ml with water.
completely filled, air-tight, closed container under
refrigeration.
5.8 Potassium nitrate standard solution.
Analyse the test sample as soon as possible, but always
Dissolve 1,465 g of potassium nitrate (KNOS) in water and
within 24 h.
dilute to 100 ml in a one-mark volumetric flask. Pipette
5 ml of the solution into a 1 000 ml volumetric flask and
In the case of uncooked products, analyse immediately
NOTE -
dilute to the mark. after homogenization.
This solution contains 73,25 pglml of potassium nitrate!.
8.2 Preparation of the cadmium column
This standard solution shall be prepared on the day of use.
8.2.1 Place 3 to 5 zinc rods (5.1) in the cadmium sulphate
solution (5.3) contained in a beaker (1 I of cadmium
6 APPARATUS
sulphate solution is sufficient for preparing one cadmium
column).
Usual laboratory equipment and the following items :
8.2.2 Remove the spongy metallic cadmium deposit from
6.1 Mechanical meat mincer, laboratory size, fitted with a
the zinc rods every 1 or 2 h by swirling them in the solution
perforated plate with holes not greater than 4 mm in
or rubbing them against each other.
diameter.
8.2.3 Finally, after 6 to 8 h, decant the solution and wash
6.2 Analytical balance.
the deposit twice with 1 I of water, taking care that the
cadmium is continuously covered with a layer of liquid.
6.3 One-mark volumetric flasks of 100 ml, 200 ml and
1 000 ml, complying with ISO/R 1042, Class B.
8.2.4 Transfer the cadmium deposit with 400 ml of
hydrochloric acid solution (5.4) to a laboratory mixer and
6.4 One-mark pipettes of 10 ml and 20 ml and, if
blen
...

NORME INTERNATIONALE
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION #MEXfiYHAPOAHAR OPI-AHM3ALWl I-l0 CTAHAAPTM3ALJMI?~ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Viandes et produits à base de viande - Détermination de la
teneur en nitrates (Méthode de référence)
Meat and meat products - Determination of nitrate content (Reference method)
Première édition - 1975-09-01
Réf. no : ISO 3091-1975 (F)
CDU 637.5 : 546.175
Descripteurs : viande, produit à base de viande, analyse chimique, dosage, nitrate.
Prix basé sur 5 pages
AVANT-PROPOS
L’ISO (Organisation Internationale de Normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (Comités Membres KO). L’élaboration de
Normes Internationales est confiée aux Comités Techniques ISO. Chaque Comité
Membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du Comité Technique
correspondant. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO, participent également aux travaux.
Les Projets de Normes Internationales adoptés par les Comités Techniques sont
soumis aux Comités Membres pour approbation, avant leur acceptation comme
Normes Internationales par le Conseil de I’ISO.
La Norme Internationaie ISO 3091 a été établie par le Comité Technique
lSO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, et soumise aux Comités Membres en
mai 1974.
Elle a été approuvée par les Comités Membres des pays suivants :
Afrique du Sud, Rép. d’
Éthiopie Roumanie
Allemagne France Royaume-Uni
Australie Hongrie Tchécoslovaquie
Thaïlande
Autriche Inde
Turquie
Bulgarie Irlande
U.R.S.S.
Danemark Israël
Yougoslavie
Égypte, Rép. arabe d’ Pays-Bas
Espagne Pologne
Le Comité Membre du pays suivant a désapprouvé le document pour des raisons
techniques :
Canada
0 Organisation Internationale de Normalisation, 1975 l
Imprimé en Suisse
603091-1975(F)
NORME INTERNATIONALE
Viandes et produits à base de viande - Détermination de la
teneur en nitrates (Méthode de référence)
1 OBJET ET DOMAINE D’APPLICATION
5.2.2 Réactif II
La présente Norme Internationale spécifie une méthode de Dissoudre d’acétate de zinc
220 g dihydraté
référence pour la détermination de la teneur en nitrates des
[Zn(CHaCOO)2.2H20] et 30 ml d’acide acétique
viandes et produits à base de viande.
cristallisable dans de l’eau et compléter à 1 000 ml.
2 RÉFÉRENCES 5.2.3 Borax, solution saturée.
ISO 2918, Viandes et produits à base de viande -
Dissoudre 50 g de tétraborate de sodium décahydraté
Détermination de la teneur en nitrites (Méthode de (Na2B407.10HzO) d ans 1 000 ml d’eau tiède et laisser
référence). refroidir à la température du laboratoire.
ISO 3 100, Viandes et produits à base de viande -
5.3 Sulfate de cadmium, solution à 30 g/l=
Échantillonnage.
Dissoudre 37 g de sulfate de cadmium (3CdS04.8H20)
dans de l’eau et compléter à 1 000 ml.
3 DÉFINITION
teneur en nitrates des viandes et produits à base de viande :
Teneur en nitrates déterminée suivant le mode opératoire 5.4 Acide chlorhydrique, solution environ 0,l N.
décrit dans la présente Norme Internationale et exprimée en
concentré
Diluer 8 ml d’acide chlorhydrique
milligrammes de nitrate de potassium par kilogramme
(p2c III9 g/ml) dans de l’eau et compléter à 1 000 ml.
(parties par million).
5.5 Solution tampon ammoniacale, pH 9,6 à 9,7.
4 PRINCIPE
concentré
Diluer 20 ml d’acide chlorhydrique
Extraction à l’eau chaude d’une prise d’essai, précipitation
*c 1 ,19 g/ml) avec 500 ml d’eau. Mélanger, ajouter 10 g
(P
des protéines et filtration.
de sel disodique de l’acide éthylène diamine tétracétique
Réduction des nitrates extraits dans le filtrat en nitrites, par
55 ml
[CH2N(CH2COOH)CH2COONa12.2H# et
du cadmium métallique. Obtention d’une coloration rouge
d’hydroxyde d’ammonium concentré (pso 0,88 g/ml).
par addition de chlorure de sulfanilamide et de chlorure de
Compléter à 1 000 ml avec de l’eau et mélanger. Contrôler
naphtyléthylènediamine au filtrat et mesurage
le pH.
photométrique à une longueur d’onde de 538 nm.
5.6 Nitrite de sodium, solutions étalons.
5 RÉACTIFS
Dissoudre 1,000 g de nitrite de sodium (NaNO*) dans de
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique. L’eau
100 ml dans une fiole jaugée.
l’eau et compléter à
utilisée doit être de l’eau distillée ou de pureté au moins
Transférer, à la pipette, 5 ml de cette solution dans une
équivalente.
fiole jaugée de 1 000 ml. Ajuster au trait repère.
5.1 Zinc en baguettes, d’environ 15 cm de longueur et 5 à
Préparer une série de solutions étalons en transférant, à la
7 mm de diamètre.
pipette, 5 ml, 10 ml et 20 ml de cette solution dans des
fioles jaugées de 100 ml et en complétant au trait repère
avec de l’eau. Ces solutions étalons contiennent
5.2 Solutions utilisées pour la précipitation des protéines
respectivement 2,5 pg, 5,0 pg, et 10,O rc(g de nitrite de
sodium par millilitre.
5.2.1 Réactif I
Les solutions étalons, ainsi que la solution de nitrite de
Dissoudre 106g d’hexacyanoferrate de potassium
sodium (à 0,05 g/l) dont elles proviennent, doivent être
trihydraté [K4Fe(CN)e.3H20] dans de l’eau et compléter à
préparées le jour de leur utilisation.
1 000 ml.
ISO3091-1975(F)
5.7 Solutions pour le développement de la coloration
photoélectrique ou spectrophotomètre
6.8 Colorimètre
avec des cellules de 1 cm de parcours optique.
5.7.1 Solution I
6.9 Fiole conique, de 300 ml.
Dissoudre par chauffage au bain d’eau 2 g de sulfanilamide
(NH,CGH,SO,NH,) dans 800 ml d’eau. Refroidir, filtrer,
100 ml d’acide
si nécessaire,. et, ajouter, en agitant,
7 ÉCHANTILLON
chlorhydrique concentré (p2c 1,19 g/ml). Compléter à
1 000 ml avec de l’eau.
7.1 Opérer sur un échantillon représentatif d’au moins
200 g. Voir ISO 3100.
5.72 Solution II
7.2 Préparer immédiatement l’échantillon pour essai (8.1)
Dissoudre, dans l’eau, 0,25 g de chlorure de N
ou, si cela n’est pas possible, conserver l’échantillon, à une
naphtyl-l-éthylènediamine (C, cH,NHCH$H,NH,.2HCI.)
température comprise entre 0 et 5 OC, durant 4 jours au
Compléter à 250 ml avec de l’eau.
maximum.
Garder la solution dans un flacon brun foncé, bien fermé
et la co nservek au réfrigérateur, une semaine au imum.
max
8 MODE OPÉRATOIRE
5.7.3 Solution Ill
8.1 Préparation de l’échantillon pour essai
Diluer à 1 000 ml, avec de l’eau, 445 ml d’acide
chlorhydrique concentré (pZO III9 g/mI).
Rendre l’échantillon homogène par au moins deux passages
dans le hachoir à viande (6.1), et mélanger. Le conserver au
froid dans un flacon étanche rempli complètement.
5.8 Nitrate de potassium, solution étalon.
l’échantillon essai le plus rapidement
Analyse pour
Dissoudre 1,465 g de nitrate de potassium (KNOS) dans de
24 h.
mais toujours d ans les
l’eau et compléter à 100 ml dans une fiole jaugée.
Transférer, à la pipette, 5 ml de la solution dans une autre
produits non cuits, analyser l’échantillon
NOTE - Dans le cas des
fiole jaugée de 1 000 ml et ajuster au trait repère.
ogénéisat
imméd iatement après hom ion.
Cette solution contient 73,25 pg/mI de nitrate de
8.2 Préparation de la colonne de cadmium
potassium.
Cette solution étalon doit être préparée le jour même de
8.2.1 Placer 3 à 5 baguettes de zinc (5.1) dans la solution
son u til isation.
de sulfate de cadmium (5.3) contenue dans un bécher (1 I
de solution de sulfate de cadmium suffit pour préparer une
colonne de cadmium).
6 APPAREILLAGE
8.2.2 Enlever, toutes les 1 ou 2 h, le cadmium métallique
spongieux déposé sur les baguettes de zinc, en remuant
Matériel courant de laboratoire, et notamment :
celles-ci dans la solution ou en les frottant l’une contre
I ‘autre.
6.1 Hachoir mécanique à viande, type de laboratoire, muni
d’une plaque dont les trous ont un diamètre ne dépassant
8.2.3 Finalement, après 6 à 8 h, décanter la solution et
pas4mm. *
laver le dépôt deux fois avec 1 I d’eau distillée, en prenant
soin que le cadmium soit continuellement recouvert d’une
6.2 Balance analytique.
couche de liquide.
6.3 Fioles jaugées, de 100 ml, 200 ml et 1 000 ml,
8.2.4 Transvaser le dépôt de cadmium au moyen de
conformes à l’lSO/R 1042, classe B.
400 ml de la solution d’acide chlorhydrique (5.4) dans un
appareil mélangeur pour laboratoire et mélanger durant 10 s.
6.
...

NORME INTERNATIONALE
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION #MEXfiYHAPOAHAR OPI-AHM3ALWl I-l0 CTAHAAPTM3ALJMI?~ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Viandes et produits à base de viande - Détermination de la
teneur en nitrates (Méthode de référence)
Meat and meat products - Determination of nitrate content (Reference method)
Première édition - 1975-09-01
Réf. no : ISO 3091-1975 (F)
CDU 637.5 : 546.175
Descripteurs : viande, produit à base de viande, analyse chimique, dosage, nitrate.
Prix basé sur 5 pages
AVANT-PROPOS
L’ISO (Organisation Internationale de Normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (Comités Membres KO). L’élaboration de
Normes Internationales est confiée aux Comités Techniques ISO. Chaque Comité
Membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du Comité Technique
correspondant. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO, participent également aux travaux.
Les Projets de Normes Internationales adoptés par les Comités Techniques sont
soumis aux Comités Membres pour approbation, avant leur acceptation comme
Normes Internationales par le Conseil de I’ISO.
La Norme Internationaie ISO 3091 a été établie par le Comité Technique
lSO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, et soumise aux Comités Membres en
mai 1974.
Elle a été approuvée par les Comités Membres des pays suivants :
Afrique du Sud, Rép. d’
Éthiopie Roumanie
Allemagne France Royaume-Uni
Australie Hongrie Tchécoslovaquie
Thaïlande
Autriche Inde
Turquie
Bulgarie Irlande
U.R.S.S.
Danemark Israël
Yougoslavie
Égypte, Rép. arabe d’ Pays-Bas
Espagne Pologne
Le Comité Membre du pays suivant a désapprouvé le document pour des raisons
techniques :
Canada
0 Organisation Internationale de Normalisation, 1975 l
Imprimé en Suisse
603091-1975(F)
NORME INTERNATIONALE
Viandes et produits à base de viande - Détermination de la
teneur en nitrates (Méthode de référence)
1 OBJET ET DOMAINE D’APPLICATION
5.2.2 Réactif II
La présente Norme Internationale spécifie une méthode de Dissoudre d’acétate de zinc
220 g dihydraté
référence pour la détermination de la teneur en nitrates des
[Zn(CHaCOO)2.2H20] et 30 ml d’acide acétique
viandes et produits à base de viande.
cristallisable dans de l’eau et compléter à 1 000 ml.
2 RÉFÉRENCES 5.2.3 Borax, solution saturée.
ISO 2918, Viandes et produits à base de viande -
Dissoudre 50 g de tétraborate de sodium décahydraté
Détermination de la teneur en nitrites (Méthode de (Na2B407.10HzO) d ans 1 000 ml d’eau tiède et laisser
référence). refroidir à la température du laboratoire.
ISO 3 100, Viandes et produits à base de viande -
5.3 Sulfate de cadmium, solution à 30 g/l=
Échantillonnage.
Dissoudre 37 g de sulfate de cadmium (3CdS04.8H20)
dans de l’eau et compléter à 1 000 ml.
3 DÉFINITION
teneur en nitrates des viandes et produits à base de viande :
Teneur en nitrates déterminée suivant le mode opératoire 5.4 Acide chlorhydrique, solution environ 0,l N.
décrit dans la présente Norme Internationale et exprimée en
concentré
Diluer 8 ml d’acide chlorhydrique
milligrammes de nitrate de potassium par kilogramme
(p2c III9 g/ml) dans de l’eau et compléter à 1 000 ml.
(parties par million).
5.5 Solution tampon ammoniacale, pH 9,6 à 9,7.
4 PRINCIPE
concentré
Diluer 20 ml d’acide chlorhydrique
Extraction à l’eau chaude d’une prise d’essai, précipitation
*c 1 ,19 g/ml) avec 500 ml d’eau. Mélanger, ajouter 10 g
(P
des protéines et filtration.
de sel disodique de l’acide éthylène diamine tétracétique
Réduction des nitrates extraits dans le filtrat en nitrites, par
55 ml
[CH2N(CH2COOH)CH2COONa12.2H# et
du cadmium métallique. Obtention d’une coloration rouge
d’hydroxyde d’ammonium concentré (pso 0,88 g/ml).
par addition de chlorure de sulfanilamide et de chlorure de
Compléter à 1 000 ml avec de l’eau et mélanger. Contrôler
naphtyléthylènediamine au filtrat et mesurage
le pH.
photométrique à une longueur d’onde de 538 nm.
5.6 Nitrite de sodium, solutions étalons.
5 RÉACTIFS
Dissoudre 1,000 g de nitrite de sodium (NaNO*) dans de
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique. L’eau
100 ml dans une fiole jaugée.
l’eau et compléter à
utilisée doit être de l’eau distillée ou de pureté au moins
Transférer, à la pipette, 5 ml de cette solution dans une
équivalente.
fiole jaugée de 1 000 ml. Ajuster au trait repère.
5.1 Zinc en baguettes, d’environ 15 cm de longueur et 5 à
Préparer une série de solutions étalons en transférant, à la
7 mm de diamètre.
pipette, 5 ml, 10 ml et 20 ml de cette solution dans des
fioles jaugées de 100 ml et en complétant au trait repère
avec de l’eau. Ces solutions étalons contiennent
5.2 Solutions utilisées pour la précipitation des protéines
respectivement 2,5 pg, 5,0 pg, et 10,O rc(g de nitrite de
sodium par millilitre.
5.2.1 Réactif I
Les solutions étalons, ainsi que la solution de nitrite de
Dissoudre 106g d’hexacyanoferrate de potassium
sodium (à 0,05 g/l) dont elles proviennent, doivent être
trihydraté [K4Fe(CN)e.3H20] dans de l’eau et compléter à
préparées le jour de leur utilisation.
1 000 ml.
ISO3091-1975(F)
5.7 Solutions pour le développement de la coloration
photoélectrique ou spectrophotomètre
6.8 Colorimètre
avec des cellules de 1 cm de parcours optique.
5.7.1 Solution I
6.9 Fiole conique, de 300 ml.
Dissoudre par chauffage au bain d’eau 2 g de sulfanilamide
(NH,CGH,SO,NH,) dans 800 ml d’eau. Refroidir, filtrer,
100 ml d’acide
si nécessaire,. et, ajouter, en agitant,
7 ÉCHANTILLON
chlorhydrique concentré (p2c 1,19 g/ml). Compléter à
1 000 ml avec de l’eau.
7.1 Opérer sur un échantillon représentatif d’au moins
200 g. Voir ISO 3100.
5.72 Solution II
7.2 Préparer immédiatement l’échantillon pour essai (8.1)
Dissoudre, dans l’eau, 0,25 g de chlorure de N
ou, si cela n’est pas possible, conserver l’échantillon, à une
naphtyl-l-éthylènediamine (C, cH,NHCH$H,NH,.2HCI.)
température comprise entre 0 et 5 OC, durant 4 jours au
Compléter à 250 ml avec de l’eau.
maximum.
Garder la solution dans un flacon brun foncé, bien fermé
et la co nservek au réfrigérateur, une semaine au imum.
max
8 MODE OPÉRATOIRE
5.7.3 Solution Ill
8.1 Préparation de l’échantillon pour essai
Diluer à 1 000 ml, avec de l’eau, 445 ml d’acide
chlorhydrique concentré (pZO III9 g/mI).
Rendre l’échantillon homogène par au moins deux passages
dans le hachoir à viande (6.1), et mélanger. Le conserver au
froid dans un flacon étanche rempli complètement.
5.8 Nitrate de potassium, solution étalon.
l’échantillon essai le plus rapidement
Analyse pour
Dissoudre 1,465 g de nitrate de potassium (KNOS) dans de
24 h.
mais toujours d ans les
l’eau et compléter à 100 ml dans une fiole jaugée.
Transférer, à la pipette, 5 ml de la solution dans une autre
produits non cuits, analyser l’échantillon
NOTE - Dans le cas des
fiole jaugée de 1 000 ml et ajuster au trait repère.
ogénéisat
imméd iatement après hom ion.
Cette solution contient 73,25 pg/mI de nitrate de
8.2 Préparation de la colonne de cadmium
potassium.
Cette solution étalon doit être préparée le jour même de
8.2.1 Placer 3 à 5 baguettes de zinc (5.1) dans la solution
son u til isation.
de sulfate de cadmium (5.3) contenue dans un bécher (1 I
de solution de sulfate de cadmium suffit pour préparer une
colonne de cadmium).
6 APPAREILLAGE
8.2.2 Enlever, toutes les 1 ou 2 h, le cadmium métallique
spongieux déposé sur les baguettes de zinc, en remuant
Matériel courant de laboratoire, et notamment :
celles-ci dans la solution ou en les frottant l’une contre
I ‘autre.
6.1 Hachoir mécanique à viande, type de laboratoire, muni
d’une plaque dont les trous ont un diamètre ne dépassant
8.2.3 Finalement, après 6 à 8 h, décanter la solution et
pas4mm. *
laver le dépôt deux fois avec 1 I d’eau distillée, en prenant
soin que le cadmium soit continuellement recouvert d’une
6.2 Balance analytique.
couche de liquide.
6.3 Fioles jaugées, de 100 ml, 200 ml et 1 000 ml,
8.2.4 Transvaser le dépôt de cadmium au moyen de
conformes à l’lSO/R 1042, classe B.
400 ml de la solution d’acide chlorhydrique (5.4) dans un
appareil mélangeur pour laboratoire et mélanger durant 10 s.
6.
...