SIST ISO 17495:2001
(Main)Water quality -- Determination of selected nitrophenols -- Method by solid-phase extraction and gas chromatography with mass spectrometric detection
Water quality -- Determination of selected nitrophenols -- Method by solid-phase extraction and gas chromatography with mass spectrometric detection
This International Standard specifies a method for the determination of selected nitrophenols (see Table 1) in
drinking, ground and surface water in mass concentrations _ 0,5 _g/l1).
Table 1 — Nitrophenols to which this method is applicable
CAS No.
CAS No.
2-Nitrophenol
88-75-5
2,4-Dinitrophenol
51-28-5
3-Nitrophenol
554-84-7
2,5-Dinitrophenol
329-71-5
4-Nitrophenol
100-02-7
2,6-Dinitrophenol
573-56-8
4-Methyl-2-nitrophenol
119-33-5
2,4-Dinitro-6-methylphenol
534-52-1
3-Methyl-4-nitrophenol
2581-34-2
2,6-Dimethyl-4-nitrophenol
2423-71-4
5-Methyl-2-nitrophenol
700-38-9
2,4-Dichloro-6-nitrophenol
609-89-2
3-Methyl-2-nitrophenol
4920-77-8
2,6-Dichloro-4-nitrophenol
618-80-4
CAS = Chemical Abstracts Service.
Qualité de l'eau -- Dosage des nitrophénols selectionnés-- Méthode par extraction en phase solide avec détection par chromatographie en phase gazeuse et spectrométrie de masse
La présente Norme internationale spécifie une méthode pour le dosage des nitrophénols sélectionnés (voir
Tableau 1) dans les eaux potables, les eaux souterraines et les eaux de surface, ŕ des concentrations en masse
_ 0,5 _g/l1).
Tableau 1 — Phénols pouvant ętre dosés selon la présente méthode
CAS no
CAS no
2-Nitrophénol
88-75-5
2,4-Dinitrophénol
51-28-5
3-Nitrophénol
554-84-7
2,5-Dinitrophénol
329-71-5
4-Nitrophénol
100-02-7
2,6-Dinitrophénol
573-56-8
4-Méthyl-2-nitrophénol
119-33-5
2,4-Dinitro-6-méthylphénol
534-52-1
3-Méthyl-4-nitrophénol
2581-34-2
2,6-Diméthyl-4-nitrophénol
2423-71-4
5-Méthyl-2-nitrophénol
700-38-9
2,4-Dichloro-6-nitrophénol
609-89-2
3-Méthyl-2-nitrophénol
4920-77-8
2,6-Dichloro-4-nitrophénol
618-80-4
CAS = «Chemical Abstracts System» (Systčme d'abréviations chimiques).
Kakovost vode - Določevanje izbranih nitrofenolov - Metoda z ekstrakcijo na trdni fazi in plinsko kromatografijo z masno spektrometrijsko detekcijo
General Information
Relations
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Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 17495
First edition
2001-08-15
Water quality — Determination of selected
nitrophenols — Method by solid-phase
extraction and gas chromatography with
mass spectrometric detection
Qualité de l'eau — Dosage des nitrophénols sélectionnés — Méthode par
extraction en phase solide avec détection par chromatographie en phase
gazeuse et spectrométrie de masse
Reference number
ISO 17495:2001(E)
©
ISO 2001
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ISO 17495:2001(E)
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that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.
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ISO 17495:2001(E)
Contents Page
Foreword.iv
Introduction.v
1 Scope .1
2 Normative references .1
3 Principle.2
4 Interferences .2
5 Reagents.3
6 Apparatus .5
7 Sampling.6
8 Procedure .6
9 Calibration .9
10 Calculation.12
11 Expression of results .14
12 Test report .14
Annex A (informative) Examples of suitable capillary columns.15
Annex B (informative) Examples of sorbents suitable for solid-phase extraction of nitrophenols .16
Annex C (informative) Precision data.17
Annex D (informative) Example of typical spectra.18
Bibliography.19
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---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 17495:2001(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO
member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical
committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in
liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 3.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting.
Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this International Standard may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
International Standard ISO 17495 was prepared by Technical Committee ISO/TC 147, Water quality,
Subcommittee SC 2, Physical, chemical and biochemical methods.
Annexes A to D of this International Standard are for information only.
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ISO 17495:2001(E)
Introduction
Several methods may be applied to determine nitrophenols in water. This International Standard describes a gas
chromatographic/mass spectrometric determination after solid-phase extraction and derivatization with
diazomethane. It should be investigated whether and to what extent particular problems will require the
specification of additional marginal conditions.
© ISO 2001 – All rights reserved v
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 17495:2001(E)
Water quality — Determination of selected nitrophenols — Method
by solid-phase extraction and gas chromatography with mass
spectrometric detection
WARNING — Persons using this International Standard should be familar with normal laboratory practice.
This International Standard does not purport to address all safety problems, if any, associated with its use.
It is the responsibility of the user to establish appropriate health and safety practices and to ensure
compliance with any national regulatory conditions.
1 Scope
This International Standard specifies a method for the determination of selected nitrophenols (see Table 1) in
1)
drinking, ground and surface water in mass concentrations � 0,5�g/l .
Table 1 — Nitrophenols to which this method is applicable
CAS No. CAS No.
2-Nitrophenol 88-75-5 2,4-Dinitrophenol 51-28-5
3-Nitrophenol 554-84-7 2,5-Dinitrophenol 329-71-5
4-Nitrophenol 100-02-7 2,6-Dinitrophenol 573-56-8
4-Methyl-2-nitrophenol 119-33-5 2,4-Dinitro-6-methylphenol 534-52-1
3-Methyl-4-nitrophenol 2581-34-2 2,6-Dimethyl-4-nitrophenol 2423-71-4
5-Methyl-2-nitrophenol 700-38-9 2,4-Dichloro-6-nitrophenol 609-89-2
3-Methyl-2-nitrophenol 4920-77-8 2,6-Dichloro-4-nitrophenol 618-80-4
CAS � Chemical Abstracts Service.
2 Normative references
The following normative documents contain provisions which, through reference in this text, constitute provisions of
this International Standard. For dated references, subsequent amendments to, or revisions of, any of these
publications do not apply. However, parties to agreements based on this International Standard are encouraged to
investigate the possibility of applying the most recent editions of the normative documents indicated below. For
undated references, the latest edition of the normative document referred to applies. Members of ISO and IEC
maintain registers of currently valid International Standards.
ISO 5667-1:1980, Water quality — Sampling — Part 1: Guidance on the design of sampling programmes.
ISO 5667-2:1991, Water quality — Sampling — Part 2: Guidance on sampling techniques.
1) See the results from the interlaboratory trial given in annex C.
© ISO 2001 – All rights reserved 1
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ISO 17495:2001(E)
ISO 5667-3:1994, Water quality — Sampling — Part 3: Guidance on the preservation and handling of samples.
ISO 8466-1:1990, Water quality — Calibration and evaluation of analytical methods and estimation of performance
characteristics — Part 1: Statistical evaluation of the linear calibration function.
3Principle
Solid-phase extraction of the nitrophenols is carried out from the acidified sample, followed by solvent elution,
derivatization with diazomethane and determination by gas chromatography and mass spectrometry.
It is absolutely essential that the tests described in this International Standard be carried out by suitably qualified
staff.
4 Interferences
4.1 Interferences during enrichment
In order to avoid losses, analyse the sample as soon as possible after sampling. If storage is unavoidable, store at
4�C until sample pretreatment.
The commercially available adsorbance materials are often of varying quality. Considerable batch-to-batch
variations in quality and selectivity of this material are possible.
The recovery may vary with the concentration, and shall therefore regularly be checked at different concentrations.
Calibration and analysis shall be performed with material from one and the same batch only.
Suspended matter in the water sample (such as iron hydroxide, calcium carbonate) occurring on sampling, storage
and sample preparation, as well as increased concentrations of microorganisms, may clog the packing. In this case
the water sample may be filtered through a glass-fibre filter prior to the enrichment. A filtration step shall be
mentioned in the test report.
Possible losses due to heating and volume reduction of the eluate may be reduced by the addition of a keeper (for
example iso-octane)
4.2 Interferences in the gas chromatograph
The operating conditions shall be set in accordance with the manufacturer's instructions. These settings shall be
checked at regular intervals.
General interferences, caused by the injection system or insufficient separation, can be eliminated with the help of
special laboratory experience and the instrument manuals.
Excess diazomethane may cause instrument failure or damage, due to its high reactivity. Therefore care should be
taken to remove excess diazomethane as far as possible by reducing the volume of the solution.
The use of alcohol as solvent should be avoided because any alcohol may destroy the deactivation layer (poly-
siloxane) of the glass liner, leading to column load and an overload of the detector. In this case, the quantification
of the analyte and the reproducibility of the result are no longer possible.
The stability of the analyte system should be checked (for example by application of a measuring standard).
2 © ISO 2001 – All rights reserved
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ISO 17495:2001(E)
5 Reagents
Reagents “for residual analysis” shall be used. Impurities of the reagents and of the water contributing to the blank
shall be negligibly low. The blank shall be checked before use, especially prior to the use of a new batch.
5.1 Water, double-distilled or of comparable purity.
5.2 Operating gases for the gas chromatograph/mass spectrometer, in accordance with the manufacturer's
instructions.
The operating gases shall be of high purity.
5.3 Nitrogen, high purity, minimum 99,996 % (volume fraction), for drying and eventually for concentration by
evaporation.
5.4 Hydrochloric acid, c(HCl)�2mol/l.
5.5 Diethyl ether,C H O, stabilized only with ethanol.
4 10
5.6 Potassium hydroxide, KOH, aqueous solution, �� 0,6.
5.7 Ethanol,C H OH.
2 5
5.8 N-methyl-N-nitroso-4-toluenesulfonamide, (Diazald) C H N O S.
8 10 2 3
5.9 Acetic acid,CH COOH , aqueous solution, 10 % volume fraction (used to destroy diazomethane).
3
5.10 Solvents
5.10.1 Acetone, C H O.
3 6
5.10.2 Methanol,CH OH.
3
5.10.3 Ethyl acetate, C H O .
4 8 2
5.11 Methylated phenols
Reference substances as methylated substances according to Table 1, with defined concentrations for the
preparation of calibration solutions for gas chromatography (8.3)
5.11.1 Standard stock solution of methylated single substances
Weigh 50 mg of each of the reference substances into a 100-ml measuring flask, dissolve in ethyl acetate (5.10.3)
or acetone (5.10.1) and bring to volume with ethyl acetate or acetone.
Store the solution in a refrigerator (about 4 °C). The shelf-life is limited (about 3 months) and the concentration
shall be checked before use.
5.11.2 Intermediate standard solution of methylated single substances
Pipette into 100-ml measuring flasks 1 ml of the solution of the single substance (5.11.1), and bring to volume with
ethyl acetate or acetone.
Store the solution in a refrigerator (about 4�C). The shelf-life is limited (about 3 months) and the concentration
shall be checked before use.
© ISO 2001 – All rights reserved 3
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ISO 17495:2001(E)
5.11.3 Calibration solutions for multipoint calibration (methylated phenols).
Prepare the calibration solutions by adequate dilution of the stock solutions (5.11.2) with ethyl acetate (5.10.3).
Store the solution in a refrigerator (about 4 °C). Their shelf-life is limited (about 3 months) and their concentration
shall be checked regularly.
5.12 Reference substances
Reference substances (see Table 1) with defined concentrations for preparation of calibration solutions, for
determination of the recovery (9.5) and for calibration over the overall procedure (9.3).
5.12.1 Standard stock solutions of non-methylated phenols
Weigh 50 mg of each of the reference substances in a 100-ml measuring flask, dissolve with acetone (5.10.1) or
ethyl acetate (5.10.3) and bring to volume with ethyl acetate (5.10.3).
Store the solutions in a refrigerator (about 4 °C). Their shelf-life is limited (about 3 months) and their concentration
shall be checked before use.
5.12.2 Intermediate standard solutions of non-methylated phenols
Pipette into 100-ml measuring flasks 1 ml of the solution of the single substances (5.12.1), and bring to volume with
ethyl acetate (5.10.3)
Store the solutions in a refrigerator. Their shelf-life is limited (about 3 months) and their concentration shall be
checked before use.
5.12.3 Calibration solutions for multipoint calibration (non-methylated phenols)
Prepare the calibration solutions by adequate dilution of the intermediate standard solutions (5.12.2) with solvent.
Store the solutions in a refrigerator. Their shelf-life is limited (about 3 months) and their concentration shall be
checked regularly.
5.13 Diazomethane solution
WARNING — Diazomethane is explosive, extremely toxic and severely irritating, causing pulmonary
oedema when inhaled in high concentrations. Long-term, low-level exposure may lead to sensitization,
resulting in asthma-like symptoms. Diazald and diazomethane should be regarded as toxic, carcinogenic
and mutagenic. Handle with care.
Diazomethane may be prepared in a distillation apparatus or in a commercially available equipment, preferably in a
fume cupboard. An example of a preparation method is as follows.
In a 250 ml reaction flask, add 8 ml of the KOH solution (5.6) and 10 ml of ethanol (5.7).
Dissolve 5,0 g of Diazald (5.8) in 45 ml of diethyl ether (5.5) in a filter funnel.
Cautiously warm the reaction flask to about 60�C (water bath) and, within 20 min, dropwise add the solution from
the filter funnel.
Collect the diazomethane being formed during this process and the diethyl ether in the cooled trap (cooling with
ice/NaCl).
After this reaction, add a further 10 ml of diethyl ether through the filter funnel and distil the remaining
diazomethane.
Stopper the trap and store at about� 18�C for not longer than 1 month.
4 © ISO 2001 – All rights reserved
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ISO 17495:2001(E)
Glassware used in the preparation of diazomethane or which has come into contact with Diazald should be cleaned
with a 10 % aqueous solution of acetic acid (5.9). It is advisable to clean the apparatus after rinsing the filter funnel
and the reaction flask by distillation of about 50 ml of ethanol (5.7).
5.14 Internal standards
As internal standards, use two of the following phenols:
2,4-Dibromophenol, C H OBr , CAS No. 615-58-7
6 4 2
2,6-Dibromophenol, C H OBr , CAS No. 608-33-3
6 4 2
2,3,6-Trichlorophenol, C H OCl , CAS No. 933-75-5
6 3 3
2,4,6-Tribromophenol, C H OBr , CAS No. 118-79-6
6 3 3
13
Deuterated or C-labelled substances are suitable as well.
NOTE The internal standards are used for the control of the analytical procedure. The choice of the substances depends
on the expected phenols to be determined.
Prepare a mixed standard solution of the two components in a concentration which gives peak heights in the upper
part of the linear range.
Usually, a concentration of 10�g/ml is suitable; check the concentration prior to use.
6 Apparatus
Equipment or parts of it which may come into contact with the water sample or its extract should be free from
residues causing significant blanks. It is recommended to use vessels made of glass or stainless steel.
6.1 Flat-bottomed flasks, preferably brown glass, 1 000 ml and 2 000 ml, with glass stoppers.
6.2 Cartridges, made of polypropene or glass, filled with solid-phase material, e.g. styrene/divinylbenzene
polymer (see annex B).
6.3 Vacuum or pressure assembly for the enrichment step.
6.4 Measuring flasks, or graduated flasks with inert stopper, for the eluates.
In the case of autosampling, vials shall be made from glass and the septum covered with polytetrafluoroethene
(PTFE).
6.5 Apparatus for preparing diazomethane, comprising:
� double-necked round-bottomed flask, 250 ml;
� filter funnel, 100 ml;
� distillation column, e.g. Vigreux column;
� distillation head;
� condenser, e.g. Liebig condenser;
� flask for absorption of diazomethane;
© ISO 2001 – All rights reserved 5
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ISO 17495:2001(E)
� security flask;
or a commercial distillation apparatus, preferably with fire-polished connections.
NOTE A closed system allows for a safer preparation of diazomethane.
6.6 Capillary gas chromatograph, equipped with a mass-spectrometric detector operated in the electron
impact mode, gas supply according to the manufacturer.
The mass spectrometer should be capable of operating across the mass range of interest and incorporate a data
system capable of quantifying ions using selected m/z values.
6.7 Injector, equipped for application with or without splitting, through-septum or on-column technique, or with
temperature programming.
6.8 Capillary columns for gas chromatography (see examples in Table A.1).
6.9 Glass-fibre filters, made of borosilicate glass, fibre diameter e.g. 0,75�mto 1,5�m, with inorganic binding
material.
6.10 Injection syringes, nominal capacity 5�lor10�l.
7 Sampling
Collect samples in accordance with ISO 5667-1, 5667-2 and 5667-3.
Use for sampling carefully cleaned, preferably brown flat-bottomed glass flasks, of capacity 250 ml or 1 000 ml.
Add 2 ml of hydrochloric acid (5.4) and fill to the brim with the sample.
In the case of possible presence of oxidizing agents, especially in presence of chlorine, add 1 g of sodium sulfite
(Na SO ) per 1 000 ml of sample.
2 3
The pH shall be� 2, if not, add more hydrochloric acid (5.4).
Prior to analysis, store the samples in the refrigerator. Storage time shall not exceed 3 days.
8 Procedure
8.1 Solid-phase enrichment
8.1.1 Pretreatment
As a rule, cartridges of 3 ml (sorbent mass 0,2 g) are suitable (see annex B for examples of suitable sorbents).
Condition the cartridges as follows:
a) Add 3 ml of ethyl acetate (5.10.3) , wait for 5 min, subsequently let it run dry.
b) Add 3 ml of methanol (5.10.2), and do not let it run dry.
c) Replace the methanol by 10 ml of water (5.1), acidified to pH 2. Do not let the cartridge run dry.
NOTE The size of the cartridges (volume, sorbent) depends on the mass concentration of phenols and the content of other
organic substances present.
6 © ISO 2001 – All rights reserved
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ISO 17495:2001(E)
8.1.2 Enrichment
Start the enrichment immediately after conditioning.
Make sure that n
...
SLOVENSKI STANDARD
SIST ISO 17495:2001
01-december-2001
.DNRYRVWYRGH'RORþHYDQMHL]EUDQLKQLWURIHQRORY0HWRGD]HNVWUDNFLMRQDWUGQL
ID]LLQSOLQVNRNURPDWRJUDILMR]PDVQRVSHNWURPHWULMVNRGHWHNFLMR
Water quality -- Determination of selected nitrophenols -- Method by solid-phase
extraction and gas chromatography with mass spectrometric detection
Qualité de l'eau -- Dosage des nitrophénols selectionnés-- Méthode par extraction en
phase solide avec détection par chromatographie en phase gazeuse et spectrométrie de
masse
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 17495:2001
ICS:
13.060.50 3UHLVNDYDYRGHQDNHPLþQH Examination of water for
VQRYL chemical substances
SIST ISO 17495:2001 en
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.
---------------------- Page: 1 ----------------------
SIST ISO 17495:2001
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Water quality — Determination of selected
nitrophenols — Method by solid-phase
extraction and gas chromatography with
mass spectrometric detection
Qualité de l'eau — Dosage des nitrophénols sélectionnés — Méthode par
extraction en phase solide avec détection par chromatographie en phase
gazeuse et spectrométrie de masse
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Contents Page
Foreword.iv
Introduction.v
1 Scope .1
2 Normative references .1
3 Principle.2
4 Interferences .2
5 Reagents.3
6 Apparatus .5
7 Sampling.6
8 Procedure .6
9 Calibration .9
10 Calculation.12
11 Expression of results .14
12 Test report .14
Annex A (informative) Examples of suitable capillary columns.15
Annex B (informative) Examples of sorbents suitable for solid-phase extraction of nitrophenols .16
Annex C (informative) Precision data.17
Annex D (informative) Example of typical spectra.18
Bibliography.19
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Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting.
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Introduction
Several methods may be applied to determine nitrophenols in water. This International Standard describes a gas
chromatographic/mass spectrometric determination after solid-phase extraction and derivatization with
diazomethane. It should be investigated whether and to what extent particular problems will require the
specification of additional marginal conditions.
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Water quality — Determination of selected nitrophenols — Method
by solid-phase extraction and gas chromatography with mass
spectrometric detection
WARNING — Persons using this International Standard should be familar with normal laboratory practice.
This International Standard does not purport to address all safety problems, if any, associated with its use.
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1 Scope
This International Standard specifies a method for the determination of selected nitrophenols (see Table 1) in
1)
drinking, ground and surface water in mass concentrations � 0,5�g/l .
Table 1 — Nitrophenols to which this method is applicable
CAS No. CAS No.
2-Nitrophenol 88-75-5 2,4-Dinitrophenol 51-28-5
3-Nitrophenol 554-84-7 2,5-Dinitrophenol 329-71-5
4-Nitrophenol 100-02-7 2,6-Dinitrophenol 573-56-8
4-Methyl-2-nitrophenol 119-33-5 2,4-Dinitro-6-methylphenol 534-52-1
3-Methyl-4-nitrophenol 2581-34-2 2,6-Dimethyl-4-nitrophenol 2423-71-4
5-Methyl-2-nitrophenol 700-38-9 2,4-Dichloro-6-nitrophenol 609-89-2
3-Methyl-2-nitrophenol 4920-77-8 2,6-Dichloro-4-nitrophenol 618-80-4
CAS � Chemical Abstracts Service.
2 Normative references
The following normative documents contain provisions which, through reference in this text, constitute provisions of
this International Standard. For dated references, subsequent amendments to, or revisions of, any of these
publications do not apply. However, parties to agreements based on this International Standard are encouraged to
investigate the possibility of applying the most recent editions of the normative documents indicated below. For
undated references, the latest edition of the normative document referred to applies. Members of ISO and IEC
maintain registers of currently valid International Standards.
ISO 5667-1:1980, Water quality — Sampling — Part 1: Guidance on the design of sampling programmes.
ISO 5667-2:1991, Water quality — Sampling — Part 2: Guidance on sampling techniques.
1) See the results from the interlaboratory trial given in annex C.
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SIST ISO 17495:2001
ISO 17495:2001(E)
ISO 5667-3:1994, Water quality — Sampling — Part 3: Guidance on the preservation and handling of samples.
ISO 8466-1:1990, Water quality — Calibration and evaluation of analytical methods and estimation of performance
characteristics — Part 1: Statistical evaluation of the linear calibration function.
3Principle
Solid-phase extraction of the nitrophenols is carried out from the acidified sample, followed by solvent elution,
derivatization with diazomethane and determination by gas chromatography and mass spectrometry.
It is absolutely essential that the tests described in this International Standard be carried out by suitably qualified
staff.
4 Interferences
4.1 Interferences during enrichment
In order to avoid losses, analyse the sample as soon as possible after sampling. If storage is unavoidable, store at
4�C until sample pretreatment.
The commercially available adsorbance materials are often of varying quality. Considerable batch-to-batch
variations in quality and selectivity of this material are possible.
The recovery may vary with the concentration, and shall therefore regularly be checked at different concentrations.
Calibration and analysis shall be performed with material from one and the same batch only.
Suspended matter in the water sample (such as iron hydroxide, calcium carbonate) occurring on sampling, storage
and sample preparation, as well as increased concentrations of microorganisms, may clog the packing. In this case
the water sample may be filtered through a glass-fibre filter prior to the enrichment. A filtration step shall be
mentioned in the test report.
Possible losses due to heating and volume reduction of the eluate may be reduced by the addition of a keeper (for
example iso-octane)
4.2 Interferences in the gas chromatograph
The operating conditions shall be set in accordance with the manufacturer's instructions. These settings shall be
checked at regular intervals.
General interferences, caused by the injection system or insufficient separation, can be eliminated with the help of
special laboratory experience and the instrument manuals.
Excess diazomethane may cause instrument failure or damage, due to its high reactivity. Therefore care should be
taken to remove excess diazomethane as far as possible by reducing the volume of the solution.
The use of alcohol as solvent should be avoided because any alcohol may destroy the deactivation layer (poly-
siloxane) of the glass liner, leading to column load and an overload of the detector. In this case, the quantification
of the analyte and the reproducibility of the result are no longer possible.
The stability of the analyte system should be checked (for example by application of a measuring standard).
2 © ISO 2001 – All rights reserved
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SIST ISO 17495:2001
ISO 17495:2001(E)
5 Reagents
Reagents “for residual analysis” shall be used. Impurities of the reagents and of the water contributing to the blank
shall be negligibly low. The blank shall be checked before use, especially prior to the use of a new batch.
5.1 Water, double-distilled or of comparable purity.
5.2 Operating gases for the gas chromatograph/mass spectrometer, in accordance with the manufacturer's
instructions.
The operating gases shall be of high purity.
5.3 Nitrogen, high purity, minimum 99,996 % (volume fraction), for drying and eventually for concentration by
evaporation.
5.4 Hydrochloric acid, c(HCl)�2mol/l.
5.5 Diethyl ether,C H O, stabilized only with ethanol.
4 10
5.6 Potassium hydroxide, KOH, aqueous solution, �� 0,6.
5.7 Ethanol,C H OH.
2 5
5.8 N-methyl-N-nitroso-4-toluenesulfonamide, (Diazald) C H N O S.
8 10 2 3
5.9 Acetic acid,CH COOH , aqueous solution, 10 % volume fraction (used to destroy diazomethane).
3
5.10 Solvents
5.10.1 Acetone, C H O.
3 6
5.10.2 Methanol,CH OH.
3
5.10.3 Ethyl acetate, C H O .
4 8 2
5.11 Methylated phenols
Reference substances as methylated substances according to Table 1, with defined concentrations for the
preparation of calibration solutions for gas chromatography (8.3)
5.11.1 Standard stock solution of methylated single substances
Weigh 50 mg of each of the reference substances into a 100-ml measuring flask, dissolve in ethyl acetate (5.10.3)
or acetone (5.10.1) and bring to volume with ethyl acetate or acetone.
Store the solution in a refrigerator (about 4 °C). The shelf-life is limited (about 3 months) and the concentration
shall be checked before use.
5.11.2 Intermediate standard solution of methylated single substances
Pipette into 100-ml measuring flasks 1 ml of the solution of the single substance (5.11.1), and bring to volume with
ethyl acetate or acetone.
Store the solution in a refrigerator (about 4�C). The shelf-life is limited (about 3 months) and the concentration
shall be checked before use.
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SIST ISO 17495:2001
ISO 17495:2001(E)
5.11.3 Calibration solutions for multipoint calibration (methylated phenols).
Prepare the calibration solutions by adequate dilution of the stock solutions (5.11.2) with ethyl acetate (5.10.3).
Store the solution in a refrigerator (about 4 °C). Their shelf-life is limited (about 3 months) and their concentration
shall be checked regularly.
5.12 Reference substances
Reference substances (see Table 1) with defined concentrations for preparation of calibration solutions, for
determination of the recovery (9.5) and for calibration over the overall procedure (9.3).
5.12.1 Standard stock solutions of non-methylated phenols
Weigh 50 mg of each of the reference substances in a 100-ml measuring flask, dissolve with acetone (5.10.1) or
ethyl acetate (5.10.3) and bring to volume with ethyl acetate (5.10.3).
Store the solutions in a refrigerator (about 4 °C). Their shelf-life is limited (about 3 months) and their concentration
shall be checked before use.
5.12.2 Intermediate standard solutions of non-methylated phenols
Pipette into 100-ml measuring flasks 1 ml of the solution of the single substances (5.12.1), and bring to volume with
ethyl acetate (5.10.3)
Store the solutions in a refrigerator. Their shelf-life is limited (about 3 months) and their concentration shall be
checked before use.
5.12.3 Calibration solutions for multipoint calibration (non-methylated phenols)
Prepare the calibration solutions by adequate dilution of the intermediate standard solutions (5.12.2) with solvent.
Store the solutions in a refrigerator. Their shelf-life is limited (about 3 months) and their concentration shall be
checked regularly.
5.13 Diazomethane solution
WARNING — Diazomethane is explosive, extremely toxic and severely irritating, causing pulmonary
oedema when inhaled in high concentrations. Long-term, low-level exposure may lead to sensitization,
resulting in asthma-like symptoms. Diazald and diazomethane should be regarded as toxic, carcinogenic
and mutagenic. Handle with care.
Diazomethane may be prepared in a distillation apparatus or in a commercially available equipment, preferably in a
fume cupboard. An example of a preparation method is as follows.
In a 250 ml reaction flask, add 8 ml of the KOH solution (5.6) and 10 ml of ethanol (5.7).
Dissolve 5,0 g of Diazald (5.8) in 45 ml of diethyl ether (5.5) in a filter funnel.
Cautiously warm the reaction flask to about 60�C (water bath) and, within 20 min, dropwise add the solution from
the filter funnel.
Collect the diazomethane being formed during this process and the diethyl ether in the cooled trap (cooling with
ice/NaCl).
After this reaction, add a further 10 ml of diethyl ether through the filter funnel and distil the remaining
diazomethane.
Stopper the trap and store at about� 18�C for not longer than 1 month.
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SIST ISO 17495:2001
ISO 17495:2001(E)
Glassware used in the preparation of diazomethane or which has come into contact with Diazald should be cleaned
with a 10 % aqueous solution of acetic acid (5.9). It is advisable to clean the apparatus after rinsing the filter funnel
and the reaction flask by distillation of about 50 ml of ethanol (5.7).
5.14 Internal standards
As internal standards, use two of the following phenols:
2,4-Dibromophenol, C H OBr , CAS No. 615-58-7
6 4 2
2,6-Dibromophenol, C H OBr , CAS No. 608-33-3
6 4 2
2,3,6-Trichlorophenol, C H OCl , CAS No. 933-75-5
6 3 3
2,4,6-Tribromophenol, C H OBr , CAS No. 118-79-6
6 3 3
13
Deuterated or C-labelled substances are suitable as well.
NOTE The internal standards are used for the control of the analytical procedure. The choice of the substances depends
on the expected phenols to be determined.
Prepare a mixed standard solution of the two components in a concentration which gives peak heights in the upper
part of the linear range.
Usually, a concentration of 10�g/ml is suitable; check the concentration prior to use.
6 Apparatus
Equipment or parts of it which may come into contact with the water sample or its extract should be free from
residues causing significant blanks. It is recommended to use vessels made of glass or stainless steel.
6.1 Flat-bottomed flasks, preferably brown glass, 1 000 ml and 2 000 ml, with glass stoppers.
6.2 Cartridges, made of polypropene or glass, filled with solid-phase material, e.g. styrene/divinylbenzene
polymer (see annex B).
6.3 Vacuum or pressure assembly for the enrichment step.
6.4 Measuring flasks, or graduated flasks with inert stopper, for the eluates.
In the case of autosampling, vials shall be made from glass and the septum covered with polytetrafluoroethene
(PTFE).
6.5 Apparatus for preparing diazomethane, comprising:
� double-necked round-bottomed flask, 250 ml;
� filter funnel, 100 ml;
� distillation column, e.g. Vigreux column;
� distillation head;
� condenser, e.g. Liebig condenser;
� flask for absorption of diazomethane;
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SIST ISO 17495:2001
ISO 17495:2001(E)
� security flask;
or a commercial distillation apparatus, preferably with fire-polished connections.
NOTE A closed system allows for a safer preparation of diazomethane.
6.6 Capillary gas chromatograph, equipped with a mass-spectrometric detector operated in the electron
impact mode, gas supply according to the manufacturer.
The mass spectrometer should be capable of operating across the mass range of interest and incorporate a data
system capable of quantifying ions using selected m/z values.
6.7 Injector, equipped for application with or without splitting, through-septum or on-column technique, or with
temperature programming.
6.8 Capillary columns for gas chromatography (see examples in Table A.1).
6.9 Glass-fibre filters, made of borosilicate glass, fibre diameter e.g. 0,75�mto 1,5�m, with inorganic binding
material.
6.10 Injection syringes, nominal capacity 5�lor10�l.
7 Sampling
Collect samples in accordance with ISO 5667-1, 5667-2 and 5667-3.
Use for sampling carefully cleaned, preferably brown flat-bottomed glass flasks, of capacity 250 ml or 1 000 ml.
Add 2 ml of hydrochloric acid (5.4) and fill to the brim with the sample.
In the case of possible presence of oxidizing agents, especially in presence of chlorine, add 1 g of sodium sulfite
(Na SO ) per 1 000 ml of sample.
2 3
The pH shall be� 2, if not, add more hydrochloric acid (5.4).
Prior to analysis, store the samples in the refrigerator. Storage time shall not exceed 3 days.
8 Procedure
8.1 Solid-phase enrichment
8.1.1 Pretreatment
As a rule, cartridges of 3 ml (sorbent mass 0,2 g) are suitable (see annex B for examples of suitable sorbents).
Condition the cartridges as follows:
a) Add 3 ml of ethyl acetate
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 17495
Première édition
2001-08-15
Qualité de l'eau — Dosage des nitrophénols
sélectionnés — Méthode par extraction en
phase solide avec détection par
chromatographie en phase gazeuse et
spectrométrie de masse
Water quality — Determination of selected nitrophenols — Method by solid-
phase extraction and gas chromatography with mass spectrometric
detection
Numéro de référence
ISO 17495:2001(F)
©
ISO 2001
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ISO 17495:2001(F)
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Imprimé en Suisse
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ISO 17495:2001(F)
Sommaire Page
Avant-propos.iv
Introduction.v
1 Domaine d'application.1
2Références normatives .1
3 Principe.2
4Interférences .2
5Réactifs .3
6 Appareillage .5
7 Échantillonnage .6
8 Mode opératoire.7
9 Étalonnage.9
10 Calcul .13
11 Expression des résultats .14
12 Rapport d’essai.14
Annexe A (informative) Exemples de colonnes capillaires appropriées.16
Annexe B (informative) Exemples d’absorbants adaptés à l'extraction en phase solide de nitrophénols .17
Annexe C (informative) Données de fidélité .18
Annexe D (informative) Exemples de spectres typiques .19
Bibliographie .20
© ISO 2001 – Tous droits réservés iii
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ISO 17495:2001(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiéeaux
comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude aledroit de fairepartie ducomité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en
liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec la Commission
électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI, Partie 3.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour
vote. Leur publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités
membres votants.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments delaprésente Norme internationale peuvent faire
l’objet de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de
ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
La Norme internationale ISO 17495 a étéélaboréepar le comité technique ISO/TC 147, Qualité de l'eau,
sous-comité SC 2, Méthodes physiques, chimiques et biochimiques.
Les annexes A àDdelaprésente Norme internationale sont données uniquement à titre d’information.
iv © ISO 2001 – Tous droits réservés
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ISO 17495:2001(F)
Introduction
Plusieurs méthodes peuvent être appliquées pour le dosage des nitrophénols dans l’eau. La présente Norme
internationale décrit une méthode de dosage par chromatographie en phase gazeuse/spectrométrie de masse
aprèsextractionenphasesolideetdérivatisation avec le diazométhane. Il convient d’étudier si et dans quelle
mesure des problèmes particuliers nécessiteront la spécification de conditions particulières supplémentaires.
© ISO 2001 – Tous droits réservés v
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NORME INTERNATIONALE ISO 17495:2001(F)
Qualité de l'eau — Dosage des nitrophénols sélectionnés —
Méthode par extraction en phase solide avec détection par
chromatographie en phase gazeuse et spectrométrie de masse
AVERTISSEMENT — Il convient que les personnes utilisant la présente Norme internationale soient
familières des pratiques courantes de laboratoire. La présente Norme internationale ne prétend pas
aborder tous les éventuels problèmes de sécurité liés à son utilisation. Il est de la responsabilité de
l’utilisateur d’établir des pratiques de santé et de sécurité appropriées et de s’assurer de la conformité aux
exigences réglementaires nationales.
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale spécifie une méthode pour le dosage des nitrophénols sélectionnés(voir
Tableau 1) dans les eaux potables, les eaux souterraines et les eaux de surface, à des concentrations en masse
1)
� 0,5�g/l .
Tableau 1 — Phénols pouvant être dosés selon la présente méthode
o o
CAS n CAS n
2-Nitrophénol 88-75-5 2,4-Dinitrophénol 51-28-5
3-Nitrophénol 554-84-7 2,5-Dinitrophénol 329-71-5
4-Nitrophénol 100-02-7 2,6-Dinitrophénol 573-56-8
4-Méthyl-2-nitrophénol 119-33-5 2,4-Dinitro-6-méthylphénol 534-52-1
3-Méthyl-4-nitrophénol 2581-34-2 2,6-Diméthyl-4-nitrophénol 2423-71-4
5-Méthyl-2-nitrophénol 700-38-9 2,4-Dichloro-6-nitrophénol 609-89-2
3-Méthyl-2-nitrophénol 4920-77-8 2,6-Dichloro-4-nitrophénol 618-80-4
CAS � «Chemical Abstracts System» (Système d’abréviations chimiques).
2Références normatives
Les documents normatifs suivants contiennent des dispositions qui par suite de la référence qui y est faite,
constituent des dispositions valables pour la présente Norme internationale. Pour les références datées, les
amendements ultérieurs ou les révisions de ces publications ne s’appliquent pas. Toutefois, les parties prenantes
aux accords fondés sur la présente Norme internationale sont invitées à rechercher la possibilité d'appliquer les
éditions les plus récentes des documents normatifs indiqués ci-après. Pour les références non datées, la dernière
édition du document normatif en référence s’applique. Les membres de la CEI et de l'ISO possèdent le registre des
Normes internationales en vigueur à un moment donné.
1) Voir les résultats de l’essai interlaboratoire donnés dans l’annexe C.
© ISO 2001 – Tous droits réservés 1
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ISO 17495:2001(F)
ISO 5667-1:1980, Qualité de l’eau—Échantillonnage — Partie 1: Guide général pour l’établissement des
programmes d’échantillonnage.
ISO 5667-2:1991, Qualité de l’eau—Échantillonnage — Partie 2: Guide général sur les techniques
d’échantillonnage.
ISO 5667-3:1994, Qualité de l’eau—Échantillonnage — Partie 3: Guide général pour la conservation et la
manipulation des échantillons.
ISO 8466-1:1990, Qualité de l’eau—Étalonnage et évaluation des méthodes d’analyse et estimation des
caractères de performance — Partie 1: Évaluation statistique de la fonction linéaire d’étalonnage.
3Principe
Extraction en phase solide des nitrophénols contenus dans l’échantillon acidifié, élution par un solvant,
dérivatisation par le diazométhane et dosage par chromatographie en phase gazeuse et spectrométrie de masse.
Il est absolument essentiel que les essais décrits dans la présente Norme internationale soient effectués par un
personnel convenablement qualifié.
4Interférences
4.1 Interférences au cours de l’enrichissement
Pour éviter les pertes, analyser l’échantillon aussitôt que possible aprèsl’échantillonnage. Si le stockage est
inévitable, conserver à 4 °C jusqu’au prétraitement de l’échantillon.
Les matériaux adsorbants disponibles dans le commerce sont souvent de qualité variable. Des écarts
considérables dans la qualité et la sélectivité de ces matériaux sont possibles d’un lot à l’autre.
Le rendement peut varier avec la concentration, et doit donc être contrôlé régulièrement à des concentrations
différentes. L’étalonnage et l’analyse doivent être effectués avec des matériaux provenant d’un seul et même lot.
La présencedematières en suspension dans l’échantillon d’eau (comme de l’hydroxyde de fer, du carbonate de
calcium) lors de l’échantillonnage, du stockage et de la préparation de l’échantillon, de même qu’une augmentation
de la concentration en micro-organismes, peut obstruer le remplissage. Dans ce cas, l’échantillon d’eau peut être
filtréà travers un filtre en fibre de verre avant la phase d’enrichissement. L’étape de filtration doit être mentionnée
dans le rapport d’essai.
Il est possible de réduire les risques de perte dus au réchauffement et à la réduction de volume de l’éluat en
ajoutant un conservateur (par exemple l’isooctane).
4.2 Interférences au cours de la chromatographie en phase gazeuse
Les conditions opératoires doivent être déterminées en conformité avec les instructions du fabricant. Ces réglages
doivent être contrôlés à intervalles réguliers.
Les interférences générales, causées par le système d’injection ou une séparation insuffisante, peuvent être
éliminées sur labasedel’expérience spécifique du laboratoire et en se reportant aux manuels de l’instrument.
Une quantité excessive de diazométhane peut entraîner une défaillance ou des dommages de l’instrument, du fait
de sa haute réactivité.C’est pourquoi il convient d’éliminer l’excédent de diazométhane dans la plus grande
proportion possible en réduisant le volume de la solution.
2 © ISO 2001 – Tous droits réservés
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ISO 17495:2001(F)
Il convient d’éviter l’emploi d’alcool comme solvant, un alcool pouvant détruire la couche de désactivation
(polysiloxane) du tube de verre, ce qui induirait une charge de la colonne et une surcharge du détecteur. Dans ce
cas, la quantification de l’analyte et la reproductibilité du résultat ne sont plus possibles.
Il convient de contrôler la stabilité du système d’analyse (par exemple en appliquant un étalon de contrôle).
5Réactifs
Des réactifs «pour analyse de résidus» doivent être utilisés. Les impuretés des réactifs et de l’eau participant à
l’essai à blanc doivent êtreenquantité négligeable. Le blanc doit être contrôlé avant utilisation, notamment avant
d’utiliser un nouveau lot.
5.1 Eau, distillée deux fois ou être de pureté comparable.
5.2 Gaz pour la chromatographie en phase gazeuse/spectrométrie de masse, conformément aux
instructions du fabricant. Les gaz doivent être d’une haute pureté.
5.3 Azote, de haute pureté, au moins 99,996 % (fraction volumique), pour le séchage et, éventuellement, pour la
concentration par évaporation.
5.4 Acide chlorhydrique, c(HCl)�2mol/l.
5.5 Éther diéthylique,C H O, stabilisé exclusivement avec de l’éthanol.
4 10
5.6 Hydroxyde de potassium, KOH, solution aqueuse,�� 0,6.
5.7 Éthanol,C H OH.
2 5
5.8 N-méthyl-N-nitroso-4-toluène sulfonamide, (Diazald) C H N O S.
8 10 2 3
5.9 Acide acétique CH COOH, solution aqueuse à 10% (fraction volumique) (utilisée pour détruire le
3
diazométhane).
5.10 Solvants
5.10.1 Acétone,C H O.
3 6
5.10.2 Méthanol,CH OH.
3
5.10.3 Acétate d’éthyle,C H O
.
4 8 2
5.11 Phénols méthylés
Substances de référence, comme substances méthylées conformément au Tableau 1, de concentrations définies
pour la préparation de solutions d’étalonnage pour la chromatographie en phase gazeuse (8.3).
5.11.1 Solutions étalons mères de substances méthylées individuelles.
Peser 50 mg de chacune des substances de référence dans une fiole jaugée de 100 ml, dissoudre dans de
l’acétate d’éthyle (5.10.3) ou de l’acétone (5.10.1), puis compléter auvolume avecdel’acétate d’éthyle ou de
l’acétone.
Conserver les solutions au réfrigérateur (à 4 °C environ). Leur durée de conservation est limitée(environ 3 mois) et
leur concentration doit être contrôlée avant utilisation.
© ISO 2001 – Tous droits réservés 3
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ISO 17495:2001(F)
5.11.2 Solutions étalons intermédiaires de substances méthylées individuelles.
Dans des fioles jaugées de 100 ml, introduire à l’aide d’une pipette 1 ml de la solution des substances individuelles
(5.11.1), puis compléter auvolumeavec de l’acétate d’éthyleoudel’acétone.
Conserver les solutions au réfrigérateur (à 4 °C environ). Leur durée de conservation est limitée(environ 3 mois) et
leur concentration doit être contrôlée avant utilisation.
5.11.3 Solutions d’étalonnage pour l’étalonnage multipoint (phénols méthylés).
Préparer les solutions d’étalonnage par une dilution appropriée des solutions intermédiaires (5.11.2) avec de
l’acétate d’éthyle (5.10.3).
Conserver les solutions au réfrigérateur (à 4 °C environ). Leur durée de conservation est limitée(environ 3 mois) et
leur concentration doit être régulièrement contrôlée.
5.12 Substances de référence
Substances de référence (voir Tableau 1) de concentrations définies pour la préparation des solutions
d’étalonnage, pour la détermination du rendement (9.5) et pour l’étalonnagedelaprocédure globale (9.3).
5.12.1 Solutions étalons mères de phénols non méthylés.
Peser 50 mg de chacune des substances de référence dans une fiole jaugée de 100 ml, dissoudre dans de
l’acétone (5.10.1) ou de l’acétate d’éthyle (5.10.3), puis compléterauvolumeavecdel’acétate d’éthyle (5.10.3).
Conserver les solutions au réfrigérateur (à 4 °C environ). Leur durée de conservation est limitée(environ 3 mois) et
leur concentration doit être contrôlée avant utilisation.
5.12.2 Solutions étalons intermédiaires de phénols non méthylés.
Dans des fioles jaugées de 100 ml, introduire à l’aide d’une pipette 1 ml de la solution des substances individuelles
(5.12.1), puis compléter auvolumeavec de l’acétate d’éthyle (5.10.3).
Conserver les solutions au réfrigérateur. Leur durée de conservation est limitée (environ 3 mois) et leur
concentration doit être contrôlée avant utilisation.
5.12.3 Solutions d’étalonnage pour l’étalonnage multipoint (phénols non méthylés).
Préparer les solutions d’étalonnage par une dilution appropriée des solutions intermédiaires (5.12.2) avec du
solvant.
Conserver les solutions au réfrigérateur. Leur durée de conservation est limitée (environ 3 mois) et leur
concentration doit être régulièrement contrôlée.
5.13 Solution de diazométhane
AVERTISSEMENT — Le diazométhane est une substance explosive, extrêmement toxique et fortement
irritante, qui peut entraîner la formation d’un œdème pulmonaire lorsqu’on l’inhale en fortes
concentrations. Une exposition à long terme à de faibles niveaux peut entraîner une sensibilisation
produisant des symptômes de type asthmatique. Il convient que le Diazald et le diazométhane soient
considérés comme des substances toxiques, cancérigènes et mutagènes. À manipuler avec précaution.
Le diazométhane peut se préparer dans un appareil de distillation ou dans un équipement du commerce, de
préférence sous une hotte. Un exemple d’une méthode de préparation est comme suit:
Dans un ballon à réaction de 250 ml, introduire 8 ml d’une solution de KOH (5.6) et 10 ml d’éthanol (5.7).
Dissoudre 5,0 g de Diazald (5.8) dans 45 ml d’éther diéthylique (5.5) dans une ampoule à décantation.
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Chauffer avec précautions le ballon à réaction à 60 °C environ (au bain-marie), puis, dans un délai de 20 min,
ajouter goutte à goutte la solution de l’ampoule à décantation.
Recueillir le diazométhane formé au cours de ce processus, ainsi que l’éther, dans le piège refroidi (refroidir avec
un mélange de glace/NaCl).
À l’issue de cette réaction, ajouter encore 10 ml d’éther diéthylique à travers l’ampoule de décantation, puis distiller
le diazométhane restant.
Boucher le piège et conserver à� 18 °C environ pendant 1 mois au maximum.
Il convient de nettoyer la verrerie utiliséepour lapréparation du diazométhane, ou qui a été en contact avec le
Diazald, avec une solution aqueuse à 10 % d’acide acétique (5.9). Il est recommandé de nettoyer l’appareillage
aprèsavoir rincé l’ampoule à décantation et le ballon à réaction par distillation d’environ 50 ml d’éthanol (5.7).
5.14 Étalons internes
Utiliser deux des phénols ci-aprèscomme étalons internes:
2,4-Dibromophénol, C H OBr ,CASn° 615-58-7
6 4 2
2,6-Dibromophénol, C H OBr ,CASn° 608-33-3
6 4 2
2,3,6-Trichlorophénol, C H OCl ,CASn° 933-75-5
6 3 3
2,4,6-Tribromophénol, C H OBr ,CASn° 118-79-6
6 3 3
13
Des substances deutérisées ou marquées au Cpeuvent également convenir.
NOTE Les étalons internes servent à contrôler la procédure analytique. Le choix des substances dépend des phénols
suspectés à doser.
Préparer une solution étalon mixte des deux composés dans une concentration qui conduit à des pics dans la
partie supérieure de la gamme linéaire.
Généralement, une concentration de 10�g/ml peut être utilisée. Contrôler la concentration avant utilisation.
6 Appareillage
Il convient que les équipements ou les parties d’appareillage qui peuvent être en contact avec l’échantillon d’eau
ou son extrait soient exempts de tous résidus pouvant causer des blancs significatifs. Il est recommandé d’utiliser
des récipients en verre ou en acier inoxydable.
6.1 Ballons à fond plat, de préférence en verre brun, de 1 000 ml et 2 000 ml de capacité, munis de bouchons
en verre.
6.2 Cartouches, en polypropylène ou en verre, remplies d’adsorbant solide, par exemple polymère à base de
styrène-divinylbenzène (voir annexe B).
6.3 Appareil sous vide ou sous pression pour l’étape d’enrichissement.
6.4 Fioles jaugées, ou fioles graduées munies d’un bouchon inerte, pour les éluats.
En cas d’utilisation d’échantillonneur automatique, les fioles doivent être en verre et le septum recouvert de
polytétrafluoroéthylène (PTFE).
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6.5 Appareillage pour la préparation du diazométhane, comprenant:
� un ballon à fond plat à double col de 250 ml;
� une ampoule à décanter de 100 ml;
� une colonne de distillation (par exemple colonne Vigreux);
� une tête de distillation;
� un condenseur (par exemple condenseur Liebig);
� un ballon pour l’absorption du diazométhane;
� un ballon de sécurité;
ou un appareil de distillation du commerce, muni de préférence de raccords rodés.
NOTE L’emploi d’un système fermé permet de préparer le diazométhane dans de meilleures conditions de sécurité.
6.6 Chromatographe en phase gazeuse, équipé d’une colonne capillaire et d’un détecteur par spectrométrie
de masse fonctionnant en mode impact électronique, et raccordéà une alimentation en gaz conformément aux
instructions du fabricant.
Il convient que le spectromètre de masse fonctionne sur la gamme de masses considérée, et qu’il comporte un
système de données capable de quantifier des ions en utilisant des valeurs m/z sélectionnées.
6.7 Injecteur, équipé pour des applications avec ou sans diviseur, avec utilisation d’un septum ou injection dans
la colonne, ou avec une programmation de température.
6.8 Colonnes capillaires pour chromatographie en phase gazeuse (voir les exemples dans le Tableau A.1).
6.9 Filtres en fibres de verre, à base de verre borosilicaté,avec undiamètre de fibre compris par exemple
entre 0,75�met1,5�m, et avec un liant inorganique.
6.10 Seringues d’injection, d’une capaciténominalede5�lou10�l.
7 Échantillonnage
Prélever les échantillons conformément à l’ISO 5667-1, à l’ISO 5667-2 et à l’ISO 5667-3.
Pour l’échantillonnage, utiliser des flacons à fond plat, de préférence en verre brun, soigneusement nettoyés, de
250 ml ou 1 000 ml, avec 2 ml d’acide chlorhydrique (5.4). Remplir jusqu’au bord avec l’échantillon.
En cas de présence éventuelle d’agents oxydants, et plus particulièrement en présence de chlore, ajouter 1 g de
sulfite de sodium (Na SO ) pour 1 000 ml d’échantillon.
2 3
Le pH doit être inférieur à 2; dans le cas contraire, ajouter de l’acide chlorhydrique (5.4).
Avant de procéder à l’analyse, conserver les échantillons au réfrigérateur. Le temps de conservation ne doit pas
excéder 3 jours.
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8 Mode opératoire
8.1 Enrichissement en phase solide
8.1.1 Prétraitement
En règle générale, des cartouches de 3 ml (masse d’adsorbant: 0,2 g) conviennent (voir l’annexe B pour des
exemples appropriés).
Conditionner les cartouches en procédant comme suit:
a) Ajouter 3 ml d’acétate d’éthyle (5.10.3), attendre 5 min, puis laisser sécher.
b) Ajouter 3 ml de méthanol (5.10.2); ne pas laisser sécher.
c) Remplacer le méthanol par 10 ml d’eau (5.1), acidifiée à pH 2; ne pas laisser la cartouche sécher.
NOTE La taille des cartouches (volume, adsorbant) dépend de la concentration en masse des phénols et de la teneur des
autres substances organiques présentes.
8.1.2 Enrichissement
Démarrer la procédure d’enrichissement immédiatement après le conditionnement.
S’assurer qu’aucune bulle d’air n’est piégée dans le lit de l’adsorbant lors du passage de la solution de rinçage à
l’échantillon.
Laisser un volume défini d’échantillon s’écouler à travers la colonne à un débit compris entre 3 ml/min et 5 ml/min
en s’assurant que le débit reste constant.
Laver l’adsorbant avec 10 ml d’eau (5.1), acidifiée à pH 2, puis évaporer avec environ 7 ml/s d’azote (5.3) dans un
délai supérieur ou égal à 10 min.
NOTE La procédure de séchage peut prendre jusqu’à 1 h. La fin de la procédure peut se reconnaître par un
éclaircissement de la couleur de l’adsorbant.
8.1.3 Élution
Éluer avec 2 ml d’acétate d’éthyle (5.10.3), ajouter le solvant par petites quantités à intervalles d’environ 1 min.
Concentrer l’éluat jusqu’à 0,5 ml environ en utilisant de l’azote (5.3), à la température ambiante.
NOTE De manière générale, et en cas d’absorbant à l’état sec, 1 ml d’acétate d’éthyle suffit pour parvenir à une élution
complète. De plus grandes quantités de solvants, ou des combinaisons de plusieurs solvants peuvent être utilisées, dans les
cas où l’on estime que l’absorbant ne peut être séché dans un temps raisonnable. Dans ces cas, il peut être judicieux
d’effectuer une pré-élution avec une petite quantité de méthanol. Il convient alors de noter ceci dans le rapport d’essai.
8.2 Dérivatisation avec le diazométhane
Ajouter un volume suffisant de solution de diazométhane (de 200�l à 500�l environ), boucher le ballon et laisser
la réaction se développer à l’obscurité.
À l’issuedela réaction (30 min environ; la solution reste jaune), évaporer la solution avec de l’azote (5.3) à un
volume d’au moins 200�l.
NOTE L’ajout d’un conservateur (environ 0,05 ml d’isooctane, par exemple) peut être utile pour éviter les pertes au cours
de l’évaporation.
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En cas d’étalonnage avec un étalon externe, compléter lasolutionauvolumeavecdel’acétate d’éthyle (5.10.3).
8.3 Chromatographie en phase gazeuse
Optimiser les paramètres de l’instrument comme décrit dans le manuel de l’opérateur.
Les colonnes capillaires avec des phases stationnaires quasi non polaires ou non polaires, à base de
méthylsilicones, sont spécialement adaptées (voir Tableau A.1). Selon les cas, il peut être intéressant d’utiliser une
colonne semi-polaire ou polaire.
Utiliser un détecteur par spectrométrie de masse.
Les spectres de masse sont enregistrés dans le mode de balayage intégral pour une gamme de masses comprise
entre 35 m/z et 260 m/z, la limite supérieure étant au moins 10 m/z au-dessus de la plus forte masse moléculaire
envisagée. L’énergie électronique est régléesur � 70 eV environ. Si, eu égard à la sensibilité uniquement, seuls
des ions sélectionnéssont détectés, enregistrer au moins trois ions de diagnostic, de préférence aux valeurs m/z
les plus élevées.
L’annexe D fournit des exemples de plusieurs spectres typiques.
8.4 Contrôle du blanc
Vérifier l’état satisfaisant des instruments et des réactifs en effectuant un contrôle du blanc à intervalles réguliers.
Pour procéder aux mesurages du blanc, préparer et analyser 1 000 ml d’eau (5.1) de la même manière que
l’échantillon.
En cas de valeurs du blanc supérieures à la limite de détermination, une recherche systématique doit être
effectuée pour détecter et éliminer la source de contamination.
8.5 Identification des composés individuels (voir Tableau 2)
Le composé analysé est présent (est identifié) dans l’échantillon si:
� le temps de rétention relatif ou absolu mesuré dans l’échantillon ne diffère pas de plus de �1% (ou un
maximum de � 6 s) du temps de rétention relatif ou absolu déterminé dans la dernière solution étalon externe
mesurée
et
� les intensités relatives de tous les ions de diagnostic sélectionnés mesurés dans l’échantillon ne s’écartent pas
de plus de � (0,1� I� 10) % des intensités relatives déterminées dans la solution étalon externe, où I
correspond à l’intensité relative de l’ion de diagnostic dans la solution étalon externe.
EXEMPLE Trois ions de diagnostic sélectionnés ont les intensités relatives suivantes: 100 %, 50 % et 15 %.
L’écart maximal autorisé dans l’échantillon est:
� (0,1 � 100 � 10) %�� 20 %; l’intensité relative dans l’échantillon doit se situer entre 80 % et 120 %;
� (0,1 � 50 � 10) %�� 15 %; l’intensité relative dans l’échantillon doit se situer entre 35 % et 65 %;
� (0,1 � 15 � 10) %�� 11,5 %; l’intensité relative dans l’échantillon doit se situer entre 3,5 % et 26,5 %.
Le composé est considéré comme identifié uniquement si l’identification du composé a été conduite de la manière décrite ci-
dessus.
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Tableau 2 — Ester et masses de quantification typiques (El, 70 eV)
Substance Formule CAS n° Ion pour quantification, m/z
premier choix second choix
2,4-dibromoanisol C H Br O 21702-84-01 266 264, 268
7 6 2
2,6-dibromoanisol C H Br O 38603-09-7 266 264, 268
7 6 2
2,4,6-tribromoanisol C H Br O 607-99-8 344 346, 329, 331
7 5 3
2,3,6-trichloroanisol C H Cl O 50375-10-5 210 212, 195, 197
7 5 3
2-nitroanisol C H NO 91-23-6 153 106, 92
7 7 3
3-nitroanisol C H NO 555-03-3 153 92, 107
7 7 3
4-nitroanisol C H NO 100-17-4 153 92, 123
7 7 3
4-méthyl-2-nitroanisol C H NO 119-10-8 167 120, 137
8 9 3
3-méthyl-4-nitroanisol C H NO 5367-32-8 167 150
8 9 3
3-méthyl-2-nitroanisol C H NO 5345-42-6 167 150
8 9 3
5-méthyl-2-nitroanisol C H NO 38512-82-2 167 150
8 9 3
2,6-diméthyl-4-nitroani
...
Questions, Comments and Discussion
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