Foodstuffs - Determination of niacin by HPLC

by high performance liquid chromatography (HPLC) by three different ways of hydrolysis, acid hydrolysis (A),
enzymatic hydrolysis (B) or acid/alkaline hydrolysis (C).
The method has been validated in interlaboratory tests on fortified and non-fortified samples such as breakfast
cereal powder, chocolate cereals, cooked ham, green peas, lyophilized green peas with ham, lyophilized soup,
nutritive orange juice, milk powder and wheat flour, at levels from 0,5 mg/100 g to 24 mg/100 g. For further
information on the validation data, see Annex B.
A and B give similar results for niacin. In options A and B niacin is calculated as the sum of nicotinamide and
nicotinic acid, and expressed as nicotinic acid [1]. Option C gives higher results than A and B for niacin with
non-supplemented cereals, but similar results for other products. In option C, niacin is calculated and
expressed as nicotinic acid after transformation of nicotinamide into nicotinic acid [2].
Option A is faster and cheaper than B and C.
Option B is used if an exact quantification of nicotinamide and nicotinic acid is needed. This cannot be done
with option A, because there is a slight transformation of nicotinamide into nicotinic acid during the acid
Option C quantifies total niacin. The alkaline hydrolysis is able to liberate other forms giving higher results for
niacin, which in some foods such as maize and cereals are not normally biologically available, see [3], [4] and
Information on a comparison between the three different ways of hydrolysis is given in Annex C.

Lebensmittel - Bestimmung von Niacin mit HPLC

Diese Europäische Norm legt ein Verfahren für die Bestimmung des Massenanteils an Niacin in Lebensmitteln mit Hochleistungsflüssigchromatographie (HPLC) nach drei verschiedenen Hydrolyse¬möglichkeiten fest. Säurehydrolyse (A), enzymatische Hydrolyse (B) oder saure/alkalische Hydrolyse (C).
Das Verfahren wurde in einem Ringversuch an angereicherten und nicht angereicherten Proben wie pulverisierten Frühstückscerealien, Frühstückscerealien mit Schokolade, Kochschinken, grünen Erbsen, grünen Erbsen mit Schinken (lyophilisiert), Suppe (lyophilisiert), an angereichertem Orangensaft, Milchpulver und Weizenmehl validiert, die 0,5 mg/100 g bis 24 mg/100 g an Niacin enthielten. Weitere Informationen, siehe Anhang B.
A und B ergeben ähnliche Ergebnisse für Niacin. Bei den Optionen A und B wird Niacin als die Summe von Nicotinamid und Nicotinsäure berechnet und als Nicotinsäure angegeben [1]. Option C ergibt bei Niacin in nicht angereicherten Cerealien höhere Ergebnisse als A und B, aber bei anderen Lebensmitteln ähnliche Ergebnisse. Bei der Option C wird Nicotinamid in Nicotinsäure umgewandelt und das Niacin als Nicotinsäure berechnet und ausgedrückt [2].
Option A ist schneller und preiswerter als B und C.
Option B wird verwendet, wenn eine genaue Quantifikation von Nicotinamid und Nicotinsäure erforderlich ist. Hierfür ist die Option A nicht geeignet, da während der Säurehydrolyse Nicotinamid in geringem Maße in Nicotinsäure umgewandelt wird.
Bei der Option C wird der Gesamtgehalt an Niacin bestimmt. Die alkalische Hydrolyse kann andere Derivate freisetzen, was zu höheren Befunden von Niacin führt, was in einigen Lebensmitteln wie Mais oder Getreiden üblicherweise nicht biologisch aktiv ist, siehe [3], [4] und [5].
Ein Vergleich der drei verschiedenen Hydrolysewege ist in Anhang C wiedergegeben.

Produits alimentaires - Dosage de la niacine par CLHP

La présente Norme européenne spécifie une méthode de dosage de la fraction massique de niacine dans les produits alimentaires par chromatographie liquide à haute performance (CLHP) suivant trois types différents d'hydrolyse : l'hydrolyse acide (A), l'hydrolyse enzymatique (B) ou l'hydrolyse acide/alcaline (C).
La méthode a été validée par des essais interlaboratoires sur des échantillons enrichis et non enrichis tels que poudre de céréales pour petit déjeuner, céréales au chocolat, jambon cuit, petits pois, petits pois au jambon lyophilisés, soupe lyophilisée, jus d'orange, lait en poudre et farine de blé, à des concentrations allant de 0,5 mg/100 g à 24 mg/100 g. Pour de plus amples informations sur les données de validation, voir l'Annexe B.
A et B donnent des résultats similaires pour la niacine. Dans les options A et B, la teneur en niacine est calculée en tant que somme du nicotinamide et de l'acide nicotinique et elle est exprimée sous forme d'acide nicotinique [1]. L'option C donne des résultats plus élevés que A et B pour la niacine avec des céréales sans ajout de vitamines, mais elle fournit des résultats similaires pour les autres produits. Dans l'option C, la teneur en niacine est calculée et exprimée sous forme d'acide nicotinique après transformation du nicotinamide en acide nicotinique [2].
L'option A est plus rapide et moins onéreuse que B et C.
On utilise l'option B si l'on a besoin d'une quantification exacte du nicotinamide et de l'acide nicotinique. Cela n'est pas réalisable avec l'option A car une petite partie du nicotinamide est transformée en acide nicotinique durant l'hydrolyse acide.
L'option C donne une quantification de la niacine totale. L'hydrolyse alcaline peut libérer d'autres formes donnant des résultats plus élevés pour la niacine, qui ne sont pas normalement disponibles biologiquement dans certains aliments à base de maïs ou de céréales, voir [3], [4] et [5].

Živila - Določevanje niacina s HPLC

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EN 15652:2009
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2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.Lebensmittel - Bestimmung von Niacin mit HPLCProduits alimentaires - Dosage de la niacine par CLHPFoodstuffs - Determination of niacin by HPLC67.050Splošne preskusne in analizne metode za živilske proizvodeGeneral methods of tests and analysis for food productsICS:Ta slovenski standard je istoveten z:EN 15652:2009SIST EN 15652:2009en,fr,de01-september-2009SIST EN 15652:2009SLOVENSKI

SIST EN 15652:2009

EUROPEAN STANDARDNORME EUROPÉENNEEUROPÄISCHE NORMEN 15652May 2009ICS 67.050 English VersionFoodstuffs - Determination of niacin by HPLCProduits alimentaires - Dosage de la niacine par CLHPLebensmittel - Bestimmung von Niacin mit HPLCThis European Standard was approved by CEN on 23 April 2009.CEN members are bound to comply with the CEN/CENELEC Internal Regulations which stipulate the conditions for giving this EuropeanStandard the status of a national standard without any alteration. Up-to-date lists and bibliographical references concerning such nationalstandards may be obtained on application to the CEN Management Centre or to any CEN member.This European Standard exists in three official versions (English, French, German). A version in any other language made by translationunder the responsibility of a CEN member into its own language and notified to the CEN Management Centre has the same status as theofficial versions.CEN members are the national standards bodies of Austria, Belgium, Bulgaria, Cyprus, Czech Republic, Denmark, Estonia, Finland,France, Germany, Greece, Hungary, Iceland, Ireland, Italy, Latvia, Lithuania, Luxembourg, Malta, Netherlands, Norway, Poland, Portugal,Romania, Slovakia, Slovenia, Spain, Sweden, Switzerland and United Kingdom.EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATIONCOMITÉ EUROPÉEN DE NORMALISATIONEUROPÄISCHES KOMITEE FÜR NORMUNGManagement Centre:
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EN 15652:2009 (E) 2 Contents Page Foreword .31Scope .42Normative references .43Principle .44Reagents .45Apparatus .76Procedure . 107Calculation . 118Precision . 129Test report . 14Annex A (informative)
Typical chromatogram . 15Annex B (informative)
Precision data for acid-, enzymatic- and acid/alkaline hydrolysis . 16Annex C (informative)
Comparison between three different ways of hydrolysis . 19Bibliography . 21 SIST EN 15652:2009

EN 15652:2009 (E) 3 Foreword This document (EN 15652:2009) has been prepared by Technical Committee CEN/TC 275 “Food analysis - Horizontal methods”, the secretariat of which is held by DIN. This European Standard shall be given the status of a national standard, either by publication of an identical text or by endorsement, at the latest by November 2009, and conflicting national standards shall be withdrawn at the latest by November 2009. Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent rights. CEN [and/or CENELEC] shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. WARNING —The use of this standard may involve hazardous materials, operation

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