EN ISO 16140-6:2019

Microbiology of the food chain - Method validation - Part 6: Protocol for the validation of alternative (proprietary) methods for microbiological confirmation and typing procedures (ISO 16140-6:2019)

This document specifies the general principle and the technical protocol for the validation of alternative confirmation methods for microbiology in the food chain. This document compares the result of the alternative confirmation method against the confirmation procedure of a reference method or, if needed, a reference confirmation method (e.g. whole genome sequencing).
This document is applicable to the validation of alternative confirmation methods used for the analysis (detection or quantification) of isolated microorganisms in:
—          products intended for human consumption;
—          products intended for animal feeding;
—          environmental samples in the area of food and feed production, handling;
—          samples from the primary production stage.
Validated alternative confirmation methods can be used to replace (partly or completely) the confirmation procedure described in:
—          the reference method;
—          an alternative method validated in accordance with ISO 16140-2 only if one of the isolation agars specified in the validation study of the alternative confirmation method is used.
This document is also applicable to the validation of alternative typing methods, where the reference method can be, for example, a serological method (e.g. serotyping of Salmonella) or a molecular method (e.g. typing of Shiga toxin-producing E. coli).
This document is, in particular, applicable to bacteria and fungi. Some clauses can be applicable to other (micro)organisms, to be determined on a case-by-case basis.
Validation studies in accordance with this document are primarily intended to be performed by organizations or expert laboratories involved in method validation, but can also be used by a single laboratory, especially when performing in-house validation under certain conditions (see ISO 16140-4).

Mikrobiologie der Lebensmittelkette - Verfahrensvalidierung - Teil 6: Arbeitsvorschrift für die Validierung von (urheberrechtlich geschützten) Alternativverfahren für die Bestätigungs- und Typisierungsprüfung (ISO 16140-6:2019)

Dieses Dokument legt das allgemeine Prinzip und die technische Arbeitsvorschrift für die Validierung alternativer Bestätigungsverfahren in der Mikrobiologie der Lebensmittelkette fest. Dieses Dokument vergleicht die Ergebnisse des alternativen Bestätigungsverfahrens mit denen des Bestätigungsvorgangs eines Referenzverfahrens oder, falls erforderlich, eines Referenzbestätigungsverfahrens (z. B. Gesamtgenom¬sequenzierung).
Dieses Dokument ist anwendbar auf die Validierung von alternativen Bestätigungsverfahren zur Analyse (Nachweis oder quantitative Bestimmung) von isolierten Mikroorganismen in:
   Erzeugnissen, die für den menschlichen Verzehr vorgesehen sind;
   Erzeugnissen, die als Futtermittel vorgesehen sind;
   Umgebungsproben im Bereich der Herstellung und Handhabung von Lebensmitteln und Futtermitteln;
   Proben aus dem Bereich der Primärproduktion.
Validierte alternative Bestätigungsverfahren können verwendet werden, um das Bestätigungsverfahren (ganz oder teilweise) zu ersetzen, das beschrieben ist
   im Referenzverfahren,
   in einem Alternativverfahren, das nach ISO 16140 2 validiert worden ist, sofern dabei eines der in der Validierungsuntersuchung des alternativen Bestätigungsverfahrens angegebenen Isolierungs Agars verwendet wird.
Darüber hinaus ist dieses Dokument auch anwendbar auf die Validierung von alternativen Typisierungsverfahren, bei denen das Referenzverfahren beispielsweise ein serologisches Verfahren (z. B. zur Serotypisierung von Salmonella) oder ein molekulares Verfahren ist (z. B. zur Typisierung von Shigatoxin bildenden E. coli).
Dieses Dokument gilt insbesondere für Bakterien und Pilze. Einige Abschnitte sind auch auf andere (Mikro )Organismen anwendbar. Die Bestimmung muss im Einzelfall erfolgen.
Validierungsuntersuchungen nach diesem Dokument sollen in erster Linie von Organisationen oder Expertenlaboren durchgeführt werden, die an der Verfahrensvalidierung beteiligt sind. Sie können aber auch von einem Einzel-Labor verwendet werden, insbesondere bei der laborinternen Validierung unter bestimmten Bedingungen (siehe ISO 16140 4).

Microbiologie de la chaîne alimentaire - Validation des méthodes - Partie 6: Protocole pour la validation de méthodes alternatives (commerciales) pour la confirmation microbiologique et le typage (ISO 16140-6:2019)

Le présent document établit le principe général ainsi que le protocole technique pour la validation des méthodes alternatives de confirmation dans le domaine de la microbiologie de la chaîne alimentaire. Le présent document compare le résultat de la méthode alternative de confirmation avec celui du mode opératoire de confirmation d'une méthode de référence ou, si nécessaire, d'une méthode de confirmation de référence (par exemple, séquençage de génome complet).
Le présent document est applicable à la validation de méthodes alternatives de confirmation utilisées pour l'analyse (recherche ou quantification) de micro-organismes isolés présents dans:
—          les produits destinés à la consommation humaine;
—          les produits destinés à l'alimentation animale;
—          les échantillons environnementaux dans les domaines de la production et de la manutention de produits alimentaires;
—          les échantillons au stade de la production primaire.
Des méthodes alternatives de confirmation validées peuvent être utilisées pour remplacer (en partie ou en totalité) le mode opératoire de confirmation décrit dans:
—          la méthode de référence;
—          une méthode alternative validée conformément à l'ISO 16140‑2 uniquement si l'une des géloses d'isolement spécifiées dans l'étude de validation de la méthode de confirmation alternative est utilisée.
Le présent document est également applicable à la validation de méthodes alternatives de typages, dans lesquelles la méthode de référence peut, par exemple, être une méthode sérologique (par exemple, sérotypage de Salmonella) ou une méthode moléculaire (par exemple, typage d'E. coli produisant des shigatoxines).
Le présent document est notamment applicable aux bactéries et aux champignons. Certains articles peuvent être applicables à d'autres (micro)organismes, qui doivent être déterminés au cas par cas.
Les études de validation conformément au présent document sont principalement destinées à être effectuées par des organismes ou des laboratoires experts impliqués dans la validation des méthodes, mais peuvent également être utilisées par un seul laboratoire, notamment lors de la réalisation d'une validation interne sous certaines conditions (voir ISO 16140‑4).

Mikrobiologija v prehranski verigi - Validacija metode - 6. del: Protokol za validacijo alternativnih (lastniških) metod za postopke mikrobiološke potrditve in tipizacije (ISO 16140-6:2019)

Ta del standarda ISO 16140 določa splošno načelo in tehnični protokol za validacijo alternativnih, večinoma lastniških metod za potrditev mikrobiološke analize hrane, krme za živali ter vzorcev okoljske in primarne proizvodnje. Ta postopek je omejen na validacijo alternativnih (lastniških) metod za potrditev, ki naj bi delno ali v celoti nadomestile postopek potrditve, opisan v standardni metodi štetja ali zaznavanja specifičnih (skupin) mikroorganizmov. »Vzorec« za potrditev je sumljiva kolonija, ki je bila pridobljena s postopkom za pridobivanje referenčne ali alternativne kulture. Postopek ni namenjen potrditvi z uporabo (čiste) kolonije neznanega izvora. Validativne študije v skladu s tem standardom naj bi izvajale organizacije, ki sodelujejo pri validaciji metod.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 03-Dec-2019
• Withdrawal Date: 29-Jun-2020
• ICS: 07.100.30 - Food microbiology
• Technical Committee: CEN/TC 463 - Microbiology of the food chain
• Drafting Committee: CEN/TC 275/WG 6 - Microbiological contamination
• Current Stage: 6060 - Definitive text made available (DAV) - Publishing
• Start Date: 04-Dec-2019
• Due Date: 15-Jun-2017
• Completion Date: 04-Dec-2019
• Directive: 882/2004 - Regulation (EC) No 882/2004 of the European Parliament and of the Council of 29 April 2004 onofficial controls performed to ensure the verification of compliance with feed and food law, animal health and animal welfare rules
• Ref Project: SIST EN ISO 16140-6:2020 - Microbiology of the food chain - Method validation - Part 6: Protocol for the validation of alternative (proprietary) methods for microbiological confirmation and typing procedures (ISO 16140-6:2019)

Standards Content (Sample)

SLOVENSKI STANDARD
01-februar-2020
Mikrobiologija v prehranski verigi - Validacija metode - 6. del: Protokol za
validacijo alternativnih (lastniških) metod za postopke mikrobiološke potrditve in
tipizacije (ISO 16140-6:2019)
Microbiology of the food chain - Method validation - Part 6: Protocol for the validation of
alternative (proprietary) methods for microbiological confirmation and typing procedures
(ISO 16140-6:2019)
Mikrobiologie der Lebensmittelkette - Verfahrensvalidierung - Teil 6: Arbeitsvorschrift für
die Validierung (urheberrechtlich geschützter) Alternativverfahren für die Bestätigungs-
und Typisierungsprüfung (ISO 16140-6:2019)
Microbiologie de la chaîne alimentaire - Validation des méthodes - Partie 6: Protocole
pour la validation de méthodes alternatives (commerciales) pour la confirmation
microbiologique et le typage (ISO 16140-6:2019)
Ta slovenski standard je istoveten z: EN ISO 16140-6:2019
ICS:
07.100.30 Mikrobiologija živil Food microbiology
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

EN ISO 16140-6
EUROPEAN STANDARD
NORME EUROPÉENNE
December 2019
EUROPÄISCHE NORM
ICS 07.100.30
English Version
Microbiology of the food chain - Method validation - Part 6:
Protocol for the validation of alternative (proprietary)
methods for microbiological confirmation and typing
procedures (ISO 16140-6:2019)
Microbiologie de la chaîne alimentaire - Validation des Mikrobiologie der Lebensmittelkette -
méthodes - Partie 6: Protocole pour la validation de Verfahrensvalidierung - Teil 6: Arbeitsvorschrift für die
méthodes alternatives (commerciales) pour la Validierung (urheberrechtlich geschützter)
confirmation microbiologique et le typage (ISO 16140- Alternativverfahren für die Bestätigungs- und
6:2019) Typisierungsprüfung (ISO 16140-6:2019)
This European Standard was approved by CEN on 10 September 2019.

CEN members are bound to comply with the CEN/CENELEC Internal Regulations which stipulate the conditions for giving this
European Standard the status of a national standard without any alteration. Up-to-date lists and bibliographical references
concerning such national standards may be obtained on application to the CEN-CENELEC Management Centre or to any CEN
member.
This European Standard exists in three official versions (English, French, German). A version in any other language made by
translation under the responsibility of a CEN member into its own language and notified to the CEN-CENELEC Management
Centre has the same status as the official versions.

CEN members are the national standards bodies of Austria, Belgium, Bulgaria, Croatia, Cyprus, Czech Republic, Denmark, Estonia,
Finland, France, Germany, Greece, Hungary, Iceland, Ireland, Italy, Latvia, Lithuania, Luxembourg, Malta, Netherlands, Norway,
Poland, Portugal, Republic of North Macedonia, Romania, Serbia, Slovakia, Slovenia, Spain, Sweden, Switzerland, Turkey and
United Kingdom.
EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION
COMITÉ EUROPÉEN DE NORMALISATION

EUROPÄISCHES KOMITEE FÜR NORMUNG

CEN-CENELEC Management Centre: Rue de la Science 23, B-1040 Brussels
© 2019 CEN All rights of exploitation in any form and by any means reserved Ref. No. EN ISO 16140-6:2019 E
worldwide for CEN national Members.

Contents Page
European foreword . 3

European foreword
This document (EN ISO 16140-6:2019) has been prepared by Technical Committee ISO/TC 34 "Food
products" in collaboration with Technical Committee CEN/TC 463 “Microbiology of the food chain” the
secretariat of which is held by AFNOR.
This European Standard shall be given the status of a national standard, either by publication of an
identical text or by endorsement, at the latest by June 2020, and conflicting national standards shall be
withdrawn at the latest by June 2020.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. CEN shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
According to the CEN-CENELEC Internal Regulations, the national standards organizations of the
following countries are bound to implement this European Standard: Austria, Belgium, Bulgaria,
Croatia, Cyprus, Czech Republic, Denmark, Estonia, Finland, France, Germany, Greece, Hungary, Iceland,
Ireland, Italy, Latvia, Lithuania, Luxembourg, Malta, Netherlands, Norway, Poland, Portugal, Republic of
North Macedonia, Romania, Serbia, Slovakia, Slovenia, Spain, Sweden, Switzerland, Turkey and the
United Kingdom.
Endorsement notice
The text of ISO 16140-6:2019 has been approved by CEN as EN ISO 16140-6:2019 without any
modification.
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16140-6
First edition
2019-11
Microbiology of the food chain —
Method validation —
Part 6:
Protocol for the validation of
alternative (proprietary) methods
for microbiological confirmation and
typing procedures
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Validation des méthodes —
Partie 6: Protocole pour la validation de méthodes alternatives
(commerciales) pour la confirmation microbiologique et le typage
Reference number
ISO 16140-6:2019(E)
©
ISO 2019
ISO 16140-6:2019(E)
© ISO 2019
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: [phone]
Fax: [phone]
Email: [e-mail]
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2019 – All rights reserved

ISO 16140-6:2019(E)
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 2
4 General principles for the validation of confirmation and typing methods.3
5 Strains . 4
6 Method comparison study . 4
6.1 General . 4
6.2 Selection of test strains . 4
6.3 Inclusivity study . 4
6.3.1 Testing of target strains . 4
6.3.2 Family level (non-Salmonella) . 5
6.3.3 Genus level (non-Salmonella) . 5
6.3.4 Species level (non-Salmonella) . 5
6.3.5 Microbial (sub)type level (non-Salmonella) . 5
6.3.6 Salmonella genus or species level . 5
6.3.7 Salmonella serovar level . 6
6.4 Exclusivity study . 6
6.4.1 Testing of non-target strains . 6
6.4.2 Family level (non-Salmonella) . 6
6.4.3 Genus level (non-Salmonella) . 6
6.4.4 Species level (non-Salmonella) . 6
6.4.5 Microbial (sub)type level (non-Salmonella) . 6
6.4.6 Salmonella genus or species level . 7
6.4.7 Salmonella serovar level . 7
6.5 Expression and interpretation of results . 7
6.6 Evaluation . 9
7 Interlaboratory study .10
7.1 General .10
7.2 Data sets to be obtained .10
7.3 Protocol .11
7.4 Expression of results .12
7.5 Interpretation and evaluation .12
Annex A (normative) Points to be considered when selecting strains for testing inclusivity
and exclusivity .14
Annex B (informative) Example of the validation of an alternative confirmation method to
the species level (Listeria monocytogenes) .16
Annex C (informative) Example of the validation of an alternative typing method to the
Salmonella serovar level (15 different serovars claimed) .19
Annex D (normative) Overview of the various options for validation under this document
and the acceptability limits .23
Bibliography .25
ISO 16140-6:2019(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
th
...