Microbiology of the food chain - Detection of Trichinella larvae in meat by artificial digestion method (ISO 18743:2015)

ISO 18743:2015 specifies a method of detection of Trichinella spp. muscle stage larvae in meat of individual animal carcasses intended for human consumption. It is applicable to the examination of meat from domestic and sylvatic animal species, which can be infected by nematodes of the genus Trichinella.
This method does not allow the identification of the species or genotype of detected parasites; species or genotype identification can be carried out by molecular methods.
The method described in this International Standard is intended to be used in conjunction with the guidelines in the OIE Manual of Diagnostic Tests and Vaccines and by the International Commission on Trichinellosis (ICT) for Trichinella testing and the inspection of carcasses intended for human consumption, unless it has been demonstrated by other means that the animal was not at risk for exposure to Trichinella.
The artificial digestion/magnetic stirrer method is considered to be the standard method because it has proven to give the most reliable results in validation studies.
NOTE          Provided equivalence with the method described within this International Standard can be documented, alternative methods can be used for analysis.

Mikrobiologie der Lebensmittelkette - Nachweis von Trichinella-Larven im Fleisch mit künstlichem Verdauungsverfahren (ISO 18743:2015)

In der vorliegenden Internationalen Norm wird ein Verfahren festgelegt, das zum Nachweis von Larven von Trichinella spp. in der Muskelphase (Muskellarven) im Fleisch von einzelnen Schlachttierkörpern, die für den menschlichen Verzehr bestimmt sind, angewendet werden kann. Es ist anwendbar zur Untersuchung von Fleisch von Haus- und Wildtierarten (aus dem domestischen und silvatischen Zyklus), die mit Nematoden der Gattung Trichinella infiziert sein können.
Dieses Verfahren ermöglicht keine Bestimmung der Art oder des Genotyps der nachgewiesenen Parasiten; eine Identifizierung kann mit molekularen Verfahren erfolgen.
Das in dieser Internationalen Norm beschriebene Verfahren ist in Verbindung mit den Leitlinien im OIE-Diagnosehandbuch und von der ICT zur Untersuchung auf Trichinella und zur Kontrolle von Schlachttierkörpern, die für den menschlichen Verzehr bestimmt sind, anzuwenden, sofern nicht auf andere Weise nachgewiesen wurde, dass das Tier kein Risiko bezüglich einer Trichinella-Exposition darstellte.
Das Magnetrührverfahren für die künstliche Verdauung wird als „Goldstandard“ (Maßstab) angesehen, weil in Validierungsstudien nachgewiesen wurde, dass es zu den zuverlässigsten Ergebnissen führt.
Vorausgesetzt, dass die Gleichwertigkeit mit dem in dieser Internationalen Norm beschriebenen Verfahren dokumentiert werden kann, dürfen alternative Verfahren zur Analyse angewendet werden.

Microbiologie de la chaîne alimentaire - Recherche des larves de Trichinella dans la viande par une méthode de digestion artificielle (ISO 18743:2015)

ISO 18743:2015 décrit une méthode de détection de larves musculaires de Trichinella spp. dans la viande provenant de carcasses individuelles d'animaux destinées à la consommation humaine. Elle est applicable à l'examen de viande d'espèces animales domestiques et sauvages qui peuvent être infectées par des nématodes du genre Trichinella.
Cette méthode ne permet pas d'identifier l'espèce ou le génotype des parasites détectés; l'identification de l'espèce ou du génotype peut être réalisée à l'aide de méthodes moléculaires.
La méthode décrite dans la présente Norme internationale est destinée à être utilisée en association avec les lignes directrices du Manuel des tests de diagnostic et des vaccins de l'OIE et celles émises par la Commission internationale sur la trichinellose (ICT) pour la recherche de Trichinella et l'inspection de carcasses destinées à la consommation humaine, sauf s'il a été prouvé par d'autres moyens que l'animal ne risquait pas d'avoir été exposé à Trichinella.
La méthode de digestion artificielle utilisant un agitateur magnétique est considérée comme la méthode normalisée puisqu'il a été démontré, lors d'études de validation, qu'elle donne les résultats les plus fiables.
NOTE          Si l'équivalence avec la méthode décrite dans la présente Norme internationale peut être documentée, d'autres méthodes peuvent être utilisées pour l'analyse.

Mikrobiologija v prehranski verigi - Ugotavljanje prisotnosti ličink Trichinella v mesu z digestivno metodo (ISO 18743:2015)

Ta mednarodni standard določa metodo, ki se uporablja za ugotavljanje prisotnosti ličink Trichinella v mesu posameznih živalskih trupel, namenjenih za prehrano ljudi. Uporablja se za pregled mesa domačih in gozdnih živali, ki so lahko okužene s parazitom iz rodu Trichinella. Ta metoda ne omogoča ugotavljanja vrste ali genotipa odkritih parazitov; identifikacija se lahko izvede z molekularnimi metodami.

General Information

Status
Published
Publication Date
29-Sep-2015
Withdrawal Date
30-Mar-2016
Current Stage
6060 - Definitive text made available (DAV) - Publishing
Start Date
30-Sep-2015
Completion Date
30-Sep-2015

Relations

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SLOVENSKI STANDARD
01-december-2015
0LNURELRORJLMDYSUHKUDQVNLYHULJL8JRWDYOMDQMHSULVRWQRVWLOLþLQN7ULFKLQHOODY
PHVX]GLJHVWLYQRPHWRGR ,62
Microbiology of the food chain - Detection of Trichinella larvae in meat by artificial
digestion method (ISO 18743:2015)
Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln - Nachweis von Trichinellenlarven aus
Fleischproben - Physikalisches Verdauungsverfahren (ISO 18743:2015)
Microbiologie de la chaîne alimentaire - Recherche des larves de Trichinella dans la
viande par une méthode de digestion artificielle (ISO 18743:2015)
Ta slovenski standard je istoveten z: EN ISO 18743:2015
ICS:
07.100.30 Mikrobiologija živil Food microbiology
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

EN ISO 18743
EUROPEAN STANDARD
NORME EUROPÉENNE
September 2015
EUROPÄISCHE NORM
ICS 07.100.30
English Version
Microbiology of the food chain - Detection of Trichinella
larvae in meat by artificial digestion method (ISO
18743:2015)
Microbiologie de la chaîne alimentaire - Recherche des Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln -
larves de Trichinella dans la viande par une méthode Nachweis von Trichinellenlarven aus Fleischproben -
de digestion artificielle (ISO 18743:2015) Physikalisches Verdauungsverfahren (ISO
18743:2015)
This European Standard was approved by CEN on 24 July 2015.

CEN members are bound to comply with the CEN/CENELEC Internal Regulations which stipulate the conditions for giving this
European Standard the status of a national standard without any alteration. Up-to-date lists and bibliographical references
concerning such national standards may be obtained on application to the CEN-CENELEC Management Centre or to any CEN
member.
This European Standard exists in three official versions (English, French, German). A version in any other language made by
translation under the responsibility of a CEN member into its own language and notified to the CEN-CENELEC Management
Centre has the same status as the official versions.

CEN members are the national standards bodies of Austria, Belgium, Bulgaria, Croatia, Cyprus, Czech Republic, Denmark, Estonia,
Finland, Former Yugoslav Republic of Macedonia, France, Germany, Greece, Hungary, Iceland, Ireland, Italy, Latvia, Lithuania,
Luxembourg, Malta, Netherlands, Norway, Poland, Portugal, Romania, Slovakia, Slovenia, Spain, Sweden, Switzerland, Turkey and
United Kingdom.
EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION
COMITÉ EUROPÉEN DE NORMALISATION

EUROPÄISCHES KOMITEE FÜR NORMUNG

CEN-CENELEC Management Centre: Avenue Marnix 17, B-1000 Brussels
© 2015 CEN All rights of exploitation in any form and by any means reserved Ref. No. EN ISO 18743:2015 E
worldwide for CEN national Members.

Contents Page
European foreword . 3

European foreword
This document (EN ISO 18743:2015) has been prepared by Technical Committee ISO/TC 34 "Food
products" in collaboration with Technical Committee CEN/TC 275 “Food analysis - Horizontal methods”
the secretariat of which is held by DIN.
This European Standard shall be given the status of a national standard, either by publication of an
identical text or by endorsement, at the latest by March 2016, and conflicting national standards shall
be withdrawn at the latest by March 2016.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. CEN [and/or CENELEC] shall not be held responsible for identifying any or all such patent
rights.
According to the CEN-CENELEC Internal Regulations, the national standards organizations of the
following countries are bound to implement this European Standard: Austria, Belgium, Bulgaria,
Croatia, Cyprus, Czech Republic, Denmark, Estonia, Finland, Former Yugoslav Republic of Macedonia,
France, Germany, Greece, Hungary, Iceland, Ireland, Italy, Latvia, Lithuania, Luxembourg, Malta,
Netherlands, Norway, Poland, Portugal, Romania, Slovakia, Slovenia, Spain, Sweden, Switzerland,
Turkey and the United Kingdom.
Endorsement notice
The text of ISO 18743:2015 has been approved by CEN as EN ISO 18743:2015 without any modification.
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 18743
First edition
2015-09-15
Microbiology of the food chain —
Detection of Trichinella larvae in meat
by artificial digestion method
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Recherche des larves de
Trichinella dans la viande par une méthode de digestion
artificielle
Reference number
ISO 18743:2015(E)
©
ISO 2015
ISO 18743:2015(E)
© ISO 2015, Published in Switzerland
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form
or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior
written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below or ISO’s member body in the country of
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www.iso.org
ii © ISO 2015 – All rights reserved

ISO 18743:2015(E)
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
4.1 General . 2
4.2 Sample size . 2
4.3 Blending/grinding of the muscle sample . 2
4.4 Preparation of the digest fluid . 2
4.5 Digestion of the chopped meat . 2
4.6 Filtration of the digest fluid . 3
4.7 Sedimentation of the digest fluid . 3
4.8 Microscopic examination . 3
4.9 Verification of findings . 3
5 Reagents . 3
6 Apparatus . 4
7 Sampling, labelling, and transport . 5
8 Sample preparation . 5
9 Procedure. 5
9.1 General . 5
9.2 Blending/grinding . 5
9.3 Preparation of the digest fluid . 6
9.4 Digestion of the chopped meat in the glass beaker . 6
9.5 Filtration of the digest fluid . 6
9.6 Sedimentation of the digest fluid in the separatory funnel . 7
9.7 Collection of the primary and secondary sediment . 7
9.8 Microscopic examination . 7
10 Documentation . 8
11 Expression of the results . 8
12 Safety measures . 8
Annex A (normative) Sample collection . 9
Annex B (normative) Frozen samples .11
Annex C (informative) Artificial digestion magnetic stirrer method .12
Annex D (informative) Example of a laboratory worksheet for recording data when testing
pooled samples by digestion assay .14
Bibliography .15
ISO 18743:2015(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduct
...


SLOVENSKI STANDARD
01-december-2015
Mikrobiologija v prehranski verigi - Ugotavljanje prisotnosti ličink Trichinella v
mesu z digestivno metodo (ISO 18743:2015)
Microbiology of the food chain - Detection of Trichinella larvae in meat by artificial
digestion method (ISO 18743:2015)
Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln - Nachweis von Trichinellenlarven aus
Fleischproben - Physikalisches Verdauungsverfahren (ISO 18743:2015)
Microbiologie de la chaîne alimentaire - Recherche des larves de Trichinella dans la
viande par une méthode de digestion artificielle (ISO 18743:2015)
Ta slovenski standard je istoveten z: EN ISO 18743:2015
ICS:
07.100.30 Mikrobiologija živil Food microbiology
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

EN ISO 18743
EUROPÄISCHE NORM
EUROPEAN STANDARD
September 2015
NORME EUROPÉENNE
ICS 07.100.30
Deutsche Fassung
Mikrobiologie der Lebensmittelkette - Nachweis von
Trichinella-Larven im Fleisch mit künstlichem
Verdauungsverfahren (ISO 18743:2015)
Microbiology of the food chain - Detection of Trichinella Microbiologie de la chaîne alimentaire - Recherche des
larvae in meat by artificial digestion method (ISO larves de Trichinella dans la viande par une méthode de
18743:2015) digestion artificielle (ISO 18743:2015)
Diese Europäische Norm wurde vom CEN am 24. Juli 2015 angenommen.

Die CEN-Mitglieder sind gehalten, die CEN/CENELEC-Geschäftsordnung zu erfüllen, in der die Bedingungen festgelegt sind, unter
denen dieser Europäischen Norm ohne jede Änderung der Status einer nationalen Norm zu geben ist. Auf dem letzten Stand
befindliche Listen dieser nationalen Normen mit ihren bibliographischen Angaben sind beim Management-Zentrum des CEN-
CENELEC oder bei jedem CEN-Mitglied auf Anfrage erhältlich.

Diese Europäische Norm besteht in drei offiziellen Fassungen (Deutsch, Englisch, Französisch). Eine Fassung in einer anderen
Sprache, die von einem CEN-Mitglied in eigener Verantwortung durch Übersetzung in seine Landessprache gemacht und dem
Management-Zentrum mitgeteilt worden ist, hat den gleichen Status wie die offiziellen Fassungen.

CEN-Mitglieder sind die nationalen Normungsinstitute von Belgien, Bulgarien, Dänemark, Deutschland, der ehemaligen
jugoslawischen Republik Mazedonien, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Kroatien, Lettland,
Litauen, Luxemburg, Malta, den Niederlanden, Norwegen, Österreich, Polen, Portugal, Rumänien, Schweden, der Schweiz, der
Slowakei, Slowenien, Spanien, der Tschechischen Republik, der Türkei, Ungarn, dem Vereinigten Königreich und Zypern.

EUROPÄISCHES KOMITEE FÜR NORMUNG
EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION

COMITÉ EUROPÉEN DE NORMALISATION

CEN-CENELEC Management-Zentrum: Avenue Marnix 17, B-1000 Brüssel
© 2015 CEN Alle Rechte der Verwertung, gleich in welcher Form und in welchem Ref. Nr. EN ISO 18743:2015 D
Verfahren, sind weltweit den nationalen Mitgliedern von CEN
vorbehalten.
Inhalt
Seite
Europäisches Vorwort . 3
Vorwort . 4
Einleitung . 5
1 Anwendungsbereich . 6
2 Normative Verweisungen . 6
3 Begriffe . 7
4 Kurzbeschreibung . 7
4.1 Allgemeines . 7
4.2 Probenumfang . 7
4.3 Zerkleinern/Wolfen der Muskelprobe . 7
4.4 Herstellung der Verdauungsflüssigkeit . 8
4.5 Verdauung des zerkleinerten Fleisches . 8
4.6 Filtration der Verdauungsflüssigkeit . 8
4.7 Sedimentation der Verdauungsflüssigkeit . 8
4.8 Mikroskopische Untersuchung . 8
4.9 Verifizierung von Befunden . 9
5 Reagenzien . 9
6 Geräte . 9
7 Probenahme, Kennzeichnung und Transport . 10
8 Probenvorbereitung . 11
9 Verfahren . 11
9.1 Allgemeines . 11
9.2 Zerkleinern/Wolfen . 11
9.3 Herstellung der Verdauungsflüssigkeit . 11
9.4 Verdauung des zerkleinerten Fleisches im Becherglas . 12
9.5 Filtration der Verdauungsflüssigkeit . 12
9.6 Sedimentation der Verdauungsflüssigkeit in einem Scheidetrichter . 12
9.7 Sammeln des primären und sekundären Sediments. 12
9.8 Mikroskopische Untersuchung . 13
10 Dokumentation . 14
11 Auswertung . 14
12 Sicherheitsmaßnahmen . 14
Anhang A (normativ) Probenahme . 15
Anhang B (normativ) Gefrorene Proben . 17
Anhang C (informativ) Magnetrührverfahren für die künstliche Verdauung . 18
Anhang D (informativ) Beispiel für ein Labor-Arbeitsblatt zur Aufzeichnung von Daten bei der
Untersuchung von Sammelproben durch den Verdauungstest . 20
Literaturhinweise . 21
Europäisches Vorwort
Dieses Dokument (EN ISO 18743:2015) wurde vom Technischen Komitee ISO/TC 34 „Food products“ in
Zusammenarbeit mit dem Technischen Komitee CEN/TC 275 „Lebensmittelanalytik - Horizontale Verfahren“
erarbeitet, dessen Sekretariat vom DIN gehalten wird.
Diese Europäische Norm muss den Status einer nationalen Norm erhalten, entweder durch Veröffentlichung
eines identischen Textes oder durch Anerkennung bis März 2016, und etwaige entgegenstehende nationale
Normen müssen bis März 2016 zurückgezogen werden.
Es wird auf die Möglichkeit hingewiesen, dass einige Elemente dieses Dokuments Patentrechte berühren
können. CEN [und/oder] CENELEC sind nicht dafür verantwortlich, einige oder alle diesbezüglichen
Patentrechte zu identifizieren.
Entsprechend der CEN-CENELEC-Geschäftsordnung sind die nationalen Normungsinstitute der folgenden
Länder gehalten, diese Europäische Norm zu übernehmen: Belgien, Bulgarien, Dänemark, Deutschland, die
ehemalige jugoslawische Republik Mazedonien, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland, Island,
Italien, Kroatien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, Niederlande, Norwegen, Österreich, Polen, Portugal,
Rumänien, Schweden, Schweiz, Slowakei, Slowenien, Spanien, Tschechische Republik, Türkei, Ungarn,
Vereinigtes Königreich und Zypern.
Anerkennungsnotiz
Der Text von ISO 18743:2015 wurde vom CEN als EN ISO 18743:2015 ohne irgendeine Abänderung
genehmigt.
Vorwort
ISO (die Internationale Organisation für Normung) ist eine weltweite Vereinigung von Nationalen
Normungsorganisationen (ISO-Mitgliedsorganisationen). Die Erstellung von Internationalen Normen wird
normalerweise von ISO Technischen Komitees durchgeführt. Jede Mitgliedsorganisation, die Interesse an
einem Thema hat, für welches ein Technisches Komitee gegründet wurde, hat das Recht, in diesem Komitee
vertreten zu sein. Internationale Organisationen, staatlich und nicht-staatlich, in Liaison mit ISO, nehmen
ebenfalls an der Arbeit teil. ISO arbeitet eng mit der Internationalen Elektrotechnischen Kommission (IEC)
bei allen elektrotechnischen Themen zusammen.
Die Verfahren, die bei der Entwicklung dieses Dokuments angewendet wurden und die für die weitere Pflege
vorgesehen sind, werden in den ISO/IEC-Direktiven, Teil 1 beschrieben. Im Besonderen sollten die für die
verschiedenen ISO-Dokumentenarten notwendigen Annahmekriterien beachtet werden. Dieses Dokument
wurde in Übereinstimmung mit den Gestaltungsregeln der ISO/IEC-Direktiven, Teil 2 erarbeitet (siehe
www.iso.org/directives).
Es wird auf die Möglichkeit hingewiesen, dass einige Elemente dieses Dokuments Patentrechte berühren
können. ISO ist nicht dafür verantwortlich, einige oder alle diesbezüglichen Patentrechte zu identifizieren.
Details zu allen während der Entwicklung des Dokuments identifizierten Patentrechten finden sich in der
Einleitung und/oder in der ISO-Liste der empfangenen Patenterklärungen (siehe www.iso.org/patents).
Jeder in diesem Dokument verwendete Handelsname wird als Information zum Nutzen der Anwender
angegeben und stellt keine Anerkennung dar.
Eine Erläuterung der Bedeutung ISO-spezifischer Benennungen und Ausdrücke, die sich auf
Konformitätsbewertung beziehen, sowie Informationen über die Beachtung der WTO-Grundsätze zu
technischen Handelshemmnissen (TBT, en: Technical Barriers to Trade) durch ISO enthält der folgende Link:
Foreword - Supplementary information.
Das für dieses Dokument verantwortliche Komitee ist ISO/TC 34, Food products, Unterkomitee SC 9
Microbiology.
Einleitung
Trichinella spp. sind die Verursacher der Trichinellose beim Menschen, einer Erkrankung, die eine Gefahr für
die öffentliche Gesundheit darstellt und als Folge davon auch ein wirtschaftliches Problem in der
Schweineerzeugung. Aufgrund der zoonotischen Bedeutung dieser Infektion in vielen Ländern
konzentrieren sich die Bemühungen hauptsächlich auf Bekämpfung und/oder Tilgung von Trichinella bei
Hausschweinen, die die wichtigste Quelle für Infektionen beim Menschen weltweit sind.
Verdauungsverfahren zum Nachweis von Trichinella-Larven in Muskelproben von Schweinen und anderen
empfänglichen Tierarten, die für den menschlichen Verzehr bestimmt sind (z. B. Pferde, Wildschweine,
Walrosse und Bären), sind effektive Verfahren zur Vorbeugung einer klinischen Trichinellose beim
Menschen. Aufgrund der begrenzten Empfindlichkeit von Verdauungsverfahren können infizierte Tiere mit
nur sehr geringer Larvenanzahl in Muskelproben, die möglicherweise ein Risiko für subklinische Infektionen
beim Menschen darstellen können, durch diese Verfahren nicht erkannt werden.
WARNUNG — Anwender dieser Internationalen Norm sollten mit der üblichen Laborpraxis vertraut
sein. Diese Internationale Norm gibt nicht vor, alle unter Umständen mit der Anwendung des
Verfahrens verbundenen Sicherheitsaspekte anzusprechen. Es liegt in der Verantwortung des
Anwenders, angemessene Sicherheits- und Schutzmaßnahmen zu treffen und sicherzustellen, dass
diese mit nationalen Festlegungen übereinstimmen.
1 Anwendungsbereic
...

Questions, Comments and Discussion

Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.