ISO 1854:1987
(Main)Whey cheese — Determination of fat content — Gravimetric method (Reference method)
Whey cheese — Determination of fat content — Gravimetric method (Reference method)
Fromage de sérum — Détermination de la teneur en matière grasse — Méthode gravimétrique (Méthode de référence)
General Information
Relations
Buy Standard
Standards Content (Sample)
ISO
INTERNATIONAL STANDARD
1854
Second edition
1987-06-15
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXClyHAPQ,lJHAR OPI-AHM3A~Mfl i-l0 CTAHAAPTM3A~MM
--
Whey cheese - Determination of fat content -
Gravimetric method (Reference method)
Fromage de s&um -
Determination de Ia teneur en ma ti&re grasse - Methode gravimktrique
(Methode de rGf&ence)
Reference number
ISO 1854 : 1987 (E)
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Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national Standards bodies (ISO member bodies). The work of preparing International
Standards is normally carried out through ISO technical committees. Esch member
body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the ISO Council. They are approved in accordance with ISO procedures requiring at
least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard ISO 1354 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34,
Agricultural food products, in collaboration with the International Dairy Federation
(IDF) and the Association of Official Analytical Chemists (AOAC) and will also be
published by these organizations.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 1854 : 1972), of which it
constitutes a technical revision (see introduction).
Users should note that all International Standards undergo revision from time to time
and that any reference made herein to any other International Standard implies its
latest edition, unless otherwise stated.
0 International Organkation for Standardization, 1987
Printed in Switzerland
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 1854: 1987 (E)
Whey cheese - Determination of fat content -
Gravimetric method (Reference method)
0 Introduction 2 References
This second edition of ISO 1854 has been prepared within the ISO 707, Mifk and mifk products - Methods of sampling.
framework of producing a series of methods, which are har-
ISO 2920, Whey cheese - Determination of dry matter content
monized to the greatest possible extent, for the gravimetric
determination of the fat content of milk, milk products and (Reference method).
milk-based foods.
ISO 3889, Milk and milk products - Determination of fat
content - Mojonnier- type fa t extraction flasks.
The method is based on the revised Röse-Gottlieb method for
milk specified in ISO 121 IJ), to which a number of modifica-
tions to improve the precision of the method have been made.
A more complete explanation of these modifications to the
3 Definition
basic Röse-Gottlieb (RG) procedure is given in the introduction
to ISO 1211.
For the purposes of this International Standard, the following
definition applies.
Whey cheese contains a high percentage of lactose; it cannot,
therefore, be analysed according to the method of Schmid-
fat content of whey cheese : All the substances determined
Bondzynski-Ratzlaff[jl, which is generally used for most types
by the method specified in this International Standard.
of cheese. However, as whey cheese usually dissolves easily in
ammonia, the fat content tan be determined according to the
lt is expressed as a percentage by mass.
RG method.
Although fresh cheeses such as Cottage cheese and quarg also
4 Principle
have high lactose contents, the RG method is less suitable,
probably owing to extreme inhomogeneity of the product and
Extraction of an ammoniacal ethanolic Solution of a test portion
the impracticability of attaining homogeneity. The method is
with diethyl ether and light Petroleum, removal of the solvents
also less suitable for whey Protein cheese. In such cases, a
by distillation or evaporation, and determination of the mass of
method based on the Weibull-Berntrop principle, as given in
the substances extracted which are soluble in light petroleum.
ISO 8262-321, is to be preferred.
(This is usually known as the Röse-Gottlieb principle.)
1 Scope and field of application
5 Reagents
This International Standard specifies the reference method for
All reagents shall be of recognized analytical grade and shall
the determination of the fat content of whey cheese.
leave no appreciable residue when the determination is carried
out by the method specified. The water used shall be distilled
An alternative procedure to that using fat-extraction flasks is
water or water of at least equivalent purity.
given in the annex, which forms an integral part of this Inter-
national Standard.
To test the quality of the reagents, carry out a blank test as
specified in 8.3. Use an empty fat-collecting vessel (6.9),
NOTE - If the whey cheese does not dissolve completely in the am-
prepared as specified in 8.4, for mass control purposes. The
monia or if it contains free fatty acids in significant quantities (this
reagents shall leave no residue greater than 0,5 mg (see 10.1).
occurs only in exceptional cases, and is noticeable by a distinct smell),
the result of the determination will be too low. With such products
If the residue of the complete reagent blank test is greater than
recourse has to be made to a method based on the Weibull-Berntrop
principle as given in ISO 8262-32).
0,5 mg, determine the residue of the solvents separately by
Gra vime tric me thod f Reference me thod).
1) ISO 1211, Mk - Determination of fat content -
Determination o f fa t con ten t b y the Weibull- Bern trop gra vime tric me thod (Re ference me thod)
2) ISO 8262-3, Milkproducts and mlk-based foods -
-
Part 3 ; Special cases. (At present at the Stage of draft.)
1
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 1854: 1987 (El
6.3 Distillation or evaporation apparatus, to enable the
distilling 100 ml of the diethyl ether and light Petroleum re-
solvents and ethanol to be distilled from fat-collecting flasks or
spectively. Use an empty control vessel to obtain the real mass
to be evaporated from beakers and dishes (see 8.5.10 and
of residue of each solvent, which shall not exceed 0,5 mg.
8.5.14) at a temperature not exceeding 100 OC.
reagents or solvents, or redistil
Replace unsatisfactory
solvents
6.4 Drying oven, electrically heated, with Ventilation po&)
fully open, capable of being maintained at 102 + 2 OC
solution, containing approximately
5.1 Ammonia
throughout the working space. The oven shall be fitted with a
25 % (mlm) of NH,, e20 = 910 g/l.
suitable thermometer.
NOTE - lf ammonia solution of this concentration is not available, a
more concentrated solution of known concentration may be used (sec
6.5 Boiling water bath.
8.5.3).
6.6 Mojonnier-type fat-extraction flasks, as specified in
5.2 Ethanol, or ethanol denatured by methanol, at least
ISO 3889.
94 % WV).
- It is also possible to use fat-extraction tubes (or flasks)
NOTE
(See 10.5.)
with Siphon or wash-bottle fittings, but the procedure is then dif-
ferent. This procedure is specified in the annex. The long inner limb of
5.3 Congo-red Solution. the fitting may have a hooked end if desired.
Dissolve 1 g of Congo-red in water and dilute to 100 ml. The flasks (or tubes, see the note) shall be provided with good
quality bark corks or Stoppers of other material [for example
- The use of this Solution, which allows the intet-face between
NOTE
Silicone rubber or PTFEJ)] which are unaffected by the reagents
the solvent and aqueous layers to be seen more clearly, is optional (sec
used. Bark corks shall be washed with the diethyl ether (5.4),
8.5.4). Other aqueous colour solutions may be used provided that they
kept in water at 60 OC or more for at least 15 min, and shall
I
do not affect the result of the determination.
then be allowed to cool in the water so that they are saturated
when used.
5.4 Diethyl ether, free from Peroxides (see 10.3) and con-
taining no or not more than 2 mg/kg of antioxidants and com-
6.7 Rack, to hold the fat-extraction flasks (or tubes) (see
plying with the requirements for the blank test (see clause 5,
6.6).
and also 10.1 and 10.4).
5.5 Light Petroleum, having any boiling range between 30
6.8 Wash bottle, suitable for use with the mixed solvent
and 60 OC.
(5.6). A plastic wash bottle shall not be used.
Mixed solvent, prepared shortl before use by mixing
56 Y
6.9 Fat-collecting vessels, for example boiling flasks (flat-
a nd the light Petroleum
equal volumes of the diethyl ether (5.4)
bottomed) of capacity 125 to 250 ml, conical beakers of capac-
(5.5).
ity 250 ml, or metal dishes. If metal dishes are used, they shall
be made of stainless steel, shall be flat-bottomed, preferably
with a spout, and shall have a diameter of 80 to 100 mm and a
6 Apparatus
height of approximately 50 mm.
WARNING - Since the determination involves the use of
volatile flammable solvents, electrical apparatus
6.10 Boiling aids, fat-free, of non-porous porcelain or
employed may be required to comply with legislation
Silicon carbide (optional in the case of metal dishes).
relating to the hazards in using such solvents.
Usual laboratory equipment, and in particular
6.11 Measuring cylinders, of capacities 5 and 25 ml.
6.1 Analytical balance.
6.12 Pipettes, graduated, of capacity 10 ml.
6.2 Centrifuge, in which the fat-extraction flasks or tubes
(6.6) tan be spun at a rotational frequency of 500 to 600 min - 1
6.13 Tongs, made of metal, suitable for holding flasks,
to produce an acceleration of 80g to 9Og at the outer end of the
beakers or dishes.
flasks or tubes.
6.14 Appropriate grinding or grating device, easy to
but recommended (sec
NOTE - The use of the centrifuge is optional
for preparing the Sample.
clean,
8.5.7).
1) Polytetrafluoroethylene.
2
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ISO 1854 : 1987 (E)
8.5 Determination
7 Sampling
See ISO 707.
8.51 Add 10 ml of warm water, so as to wash the test Portion
into the small bulb of the flask, and mix thoroughly in the small
bulb.
8 Procedure
NOTE - The alternative procedure using fat-extraction tubes with
Heat the flask in the boiling water bath (6.5), shaking
8.5.2
Siphon or wash-bottle fittings (sec the note to 6.6) is described in the
gently occasionally until the test Portion is completely dis-
annex.
persed. Leave the flask for 20 min in the water bath.
Preparation OP the test Sample
81 .
8.5.3 Add 2 ml of the ammonia Solution (5.1), or an
Prepare the Sample using an appropriate device (6.14). Quickly equivalent volume of a more concentrated ammonia Solution
mix the ground or grated mass and, if possible, grind it a se- (see the note to 5.1), mix thoroughly with the dispersed test
cond time and again mix thoroughly. Clean the device after
Portion in the small bulb of the flask and cool, for example in
preparing each Sample. If the Sample cannot be ground or running water. After the addition of the ammonia, continue the
grated, mix it thoroughly by intensive kneading, for example determination without delay.
with a pestle in a mortar.
Keep the prepared Sample in an airtight Container until the time 8.5.4 Add 10 ml of the ethanol (5.2) and mix gently but
of analysis, which should be carried out on the same day. If thoroughly by allowing the contents of the flask to flow
delay is unavoidable, take every precaution to ensure proper backward and fotward between the two bulbs; avoid bringing
storage of the Sample. When refrigerated, ensure that any con- the liquid too near to the neck of the flask. If desired, add
densation of moisture on the inside surface of the Container is 2 drops of the Congo-red Solution (5.3).
thoroughly and uniformly re-incorporated into the test Sample.
8.5.5 Add 25 ml of the diethyl ether (5.4), close the flask with
8.2 Test Portion a cork (see 6.6) saturated with water or with a stopper wetted
with water, and Shake the flask vigorously, but not excessively
Mix the test Sample (8.1) by gently stirring or rotating and inver- (in Order to avoid the formation of persistent emulsions), for
ting the Container and immediately weigh, to the nearest 1 mg, 1 min with the flask in a horizontal Position and the small bulb
directly or by differente, into a fat-extraction flask (6.6) about extending upwards, periodically allowing the liquid in the large
bulb to run into the small bulb. If necessary, cool the flask in
3 g of the prepared Sample.
running water, then carefully remove the cork or stopper and
rinse it and the neck of the flask with a little of the mixed sol-
The test Portion sha Il be delivered as completely as possible in-
to the lower (small) bulb of the extraction flask. vent (5.6), using the wash bottle (6.8), so that the rinsings run
into the flask or the prepared fat-collecting vessel (see 8.4).
8.3 Blank test
8.5.6 Add 25 ml of the light Petroleum (5.5), close the flask
Carry out a blank test simultaneously with the determination, with the rewetted cork or rewetted stopper (by dipping in
wate& and Shake the flask gently for 30 s as described in 8.5.5.
using the same procedure and same reagents, but replacing the
diluted test Portion in 8.5.1 by 10 ml of water (see 10.2).
8.5.7 Centrifuge the closed flask for 1 to 5 min at a rotational
- 1 (see 6.2). If a centrifuge is not
frequency of 500 to 600 min
8.4 Preparation of fat-collecting vessel
available, allow the closed flask to stand in the rack (6.7) for at
least 30 min until the supernatant layer is clear and distinctly
Dry a vessel (6.9) with a few boiling aids (6.10) in the oven (6.4)
separated from the aqueous layer. If necessary, cool the flask in
for 1 h (see note 1).
running water.
Allow the vessel to cool (protected from dust) to the
temperature of the weighing room (glass vessel for at least 1 h,
8.5.8 Carefully remove the cork or stopper and rinse it and the
metal dish for at least 0,5 h) (see note 2).
inside of the neck of the flask with a little of the mixed solvent
so that the rinsings run into the flask or the fat-collecting
Using tongs (6.13) (to avoid, in particular, temperature vari-
vessel .
ations), place the vessel on the balance (6.1) and weigh to the
nearest 0,l mg.
If the interface is below the bottom of the stem of the flask,
raise it slightly above this level by gently adding water down the
NOTES
side of the flask (see figure 1) to facilitate the decantation of
1 Boiling aids are desirable to promote gentle boiling during the
solvent.
subsequent removal of solvent, especially in the case of glass vessels;
their use is optional in the case of metal dishes.
NOTE - In figures 1 and 2, one of the three types of flasks as specified
in a desiccator, to avoid insuff i- in ISO 3889 is shown, but this does not imply any preference over the
2 The vessel should not be placed
cient cooling or unduly long cooling times. other types.
3
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 1854: 1987 (El
Before decantation Figure 2 - After decantation
Figure 1 -
(8.5.8, 8.5.12, 8.5.13) (8.5.9, 8.5.12, 8.5.13)
NOTE - The third extraction should be omitted for products having fat
8.5.9 Holding the extraction flask by the small bulb, carefully
contents of 3 % krh77) or less.
decant as much as possible of the supernatant layer into the
prepared fat-collecting vessel (see 8.4) containing a few boiling
aids (6.10) in the case tif flasks (optional with metal dishes),
8.5.14 Remove the solvents (including ethanol) as completely
avoiding decantation of any of the aqueous layer (see figure 2).
as possible from the flask by distillation, or from the beaker or
dish by evaporation (see 6.3), rinsing the inside of the neck of
8.5.10 Rinse the outside of the neck of the extraction flask
the flask with a little of the mixed solvent (5.6) before com-
with a little of the mixe6 solvent, collecting the rinsings in the
mencing the distillation.
fat-collecting vessel and taking care that the mixed solvent
...
[SO
NORME INTERNATIONALE 1854
Deuxième édition
1987-06- 15
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXflYHAPOflHAR OPTAHMBAUMR Il0 CTAHflAPTMBAUMM
Fromage de sérum - Détermination de la teneur
en matière grasse - Méthode gravimétrique'(Méth0de
de référence)
Whey cheese - Determination of fat content - Gravimetric method (Reference method)
Numéro de référence
IS0 1854: 1987 (F)
---------------------- Page: 1 ----------------------
Avant-propos
L‘ISC (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I‘ISO). L‘élaboration
des Normes internationales est normalement confiée aux comités techniques de I’ISO.
Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I‘ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internstionale IS0 1854 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires, en collaboration avec la FIL (Fédération internationale
de laiterie) et I’AOAC (Association des chimistes analytiques officiels) et sera égaie-
ment publiée par ces organisations.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (IS0 1854 : 1972). dont
elle constitue une révision technique hii i’introduction).
L’attention des utilisateurs est attirée sur le fait que toutes les Normes internationales
sont de temps en temps soumises à révision et que toute référence faite à une autre
Norme internationale dans le présent document implique qu‘il s’agit, sauf indication
contraire, de la dernière édition.
O Organisation internationale de normalisation, 1987 O
Imprimé en Suisse
---------------------- Page: 2 ----------------------
~
NORM E I NTE R N AT1 O NA LE IS0 1854 : 1987 (FI
Fromage de sérum - Détermination de la teneur
en matière grasse - Méthode gravimétrique (Méthode
de référence)
NOTE - Si le fromage de sérum ne se dissout pas complètement dans
O Introduction
l'ammoniaque ou s'il contient des acides gras libres en quantités nota-
bles (ce qui se produit seulement dans des cas exceptionnels et est
Cette deuxième édition de 1'1S0 1854 a été préparée en vue de
identifiable par une odeur Caractéristique), le résultat de la détermina-
tion sera trop faible. Avec de tels produits, on aura recours a la
disposer d'une série de méthodes, harmonisées le mieux possi-
méthode utilisant le principe de Weibull-Berntrop, telle que décrite
ble, sur la détermination gravimétrique de la matière grasse du
dans l'lS0 8262-32).
'i
lait, des produits laitiers et des aliments à base de lait.
La méthode est basée sur celle de Rose-Gottlieb révisée pour le
lait décrite dans I'ISO 12111l, dont un certain nombre de modi-
2 Références
fications ont été apportées pour améliorer la fidélité de la
méthode. Une explication plus complète de ces modifications à
IS0 707, Lait et produits laitiers - Méthodes d'échan-
la méthode de base Rose-Gottlieb (RG), est donnée dans
tillonnage.
l'introduction de I'ISO 121 1.
IS0 2920, Fromage de sérum - Détermination de la teneur en
Le fromage de sérum contient un pourcentage élevé de lactose;
matière sèche (Méthode de référence).
il ne peut donc être analysé selon la méthode de Schmid-
Bondzynski-Ratzlaff 111, qui est généralement utilisée pour la
IS0 3889, Lait et produits laitiers - Détermination de la teneur
plupart des fromages. Toutefois, du fait qu'en général le fro-
en matière grasse - Fioles d'extraction, type Mojonnier.
mage de sérum se dissout facilement dans l'ammoniaque, la
teneur en matière grasse peut être déterminée selon la méthode
Rose-Gottlieb.
3 Définition
Bien que les fromages frais tels que fromage blanc et pâte fraî-
Pour les besoins de la présente Norme internationale, la défini-
che, possèdent aussi des teneurs élevées en lactose, la
méthode Rose-Gottlieb convient moins bien, probablement à tion suivante s'applique.
cause de l'extrême hétérogénéité du produit et de l'impossibilité
d'obtenir une masse homogène. La méthode convient égale-
- teneur en matière grasse du fromage de sérum : Toutes
ment moins bien au fromage de protéines de sérum. Dans de
les substances déterminées selon la méthode décrite dans la
tels cas, on aura recours de préférence à une méthode utilisant
présente Norme internationale.
le principe de Weibull-Berntrop, telle que décrite dans
I'ISO 8262-32,.
Elle est exprimée en pourcentage en masse.
1 Objet et domaine d'application
4 Principe
La présente Norme internationale décrit une méthode de réfé-
rence pour la détermination de la teneur en matière grasse du Extraction d'une solution ammoniaco-éthanolique d'une prise
fromage de sérum. d'essai au moyen d'oxyde diéthylique et d'éther de pétrole, éli-
mination des solvants par distillation ou évaporation, et déter-
Un autre mode opératoire que celui utilisant des fioles d'extrac- mination de la masse des substances extraites qui sont solubles
tion de la matière grasse est donné en annexe et fait partie inté- dans l'éther de pétrole. (Méthode habituellement connue sous
grante de la présente Norme internationale. le nom de Rose-Gottlieb.)
IS0 1211, Lait - Détermination de la teneur en matière grasse - Méthode gravimétrique (Méthode de référence).
1)
IS0 8262-3, Produits laitiers et aliments à base de lait - Détermination de la teneur en matière grasse par la méthode Wibull-Berntrop (Méthode
2)
de référence) - Partie 3 ; Cas particuliers. (Actuellement au stade de projet.)
1
---------------------- Page: 3 ----------------------
IS0 1854 : 1987 (FI
6 Appareillage
5 Réactifs
AVERTISSEMENT - Pour les déterminations requérant
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue et
l'utilisation de solvants volatils inflammables, I'appareil-
ne doivent pas laisser de résidu appréciable lorsque la détermi-
lage électrique utilisé devra satisfaire, le cas échéant, à la
nation est effectuée selon la méthode spécifiée. L'eau utilisée
législation en matière de risques liés à l'utilisation de ces
doit être de l'eau distillée ou de l'eau de pureté au moins équiva-
solvants.
lente.
Matériel courant de laboratoire, et notamment :
Pour vérifier la qualité des réactifs, effectuer un essai à blanc
comme mentionné en 8.3. Pour les contrôles de masses, utiliser
un récipient vide de récupération de la matière grasse (6.91, pré-
6.1 Balance analytique.
paré comme décrit en 8.4. Les réactifs ne doivent pas laisser de
résidus supérieurs à 0,5 mg (voir 10.1 ).
6.2 Centrifugeuse, dans laquelle les fioles ou les tubes (6.6)
d'extraction peuvent être centrifugés à une fréquence de rota-
Si les résidus des réactifs de l'essai à blanc complet sont supé-
tion de 500 à 600 min - 1, afin d'obtenir une accélération de 80g
rieurs à 0,5 mg, déterminer les résidus des solvants séparément
à 90s à l'extrémité extérieure des fioles ou des tubes.
en distillant respectivement 100 ml d'oxyde diéthylique et
d'éther de pétrole. Utiliser un récipient de contrôle vide pour
NOTE - L'utilisation d'une centrifugeuse est facultative mais recom-
obtenir la masse réelle de résidus de chaque solvant, qui ne doit
mandée (voir 8.5.7).
pas être supérieure à 0.5 mg.
Remplacer les réactifs ou solvants non satisfaisants, ou redistil-
6.3 Appareil de distillation ou d'évaporation, permettant
ler les solvants. de distiller les solvants.et l'éthanol des fioles de récupération de
la matière grasse ou de les évaporer des béchers et des capsules
(voir 8.5.10 et 8.5.14) à une température n'excédant pas
Hydroxyde d'ammonium, solution à environ
5.1
100 OC.
25 % (m/m) de NH,, em = 910 g/l.
NOTE - Si l'on ne dispose pas d'une solution d'hydroxyde d'ammo- 6.4 Étuve à dessiccation, à chauffage électrique, munie
nium à cette concentration, une aiution plus concentrée, de concen-
d'ouïes de ventilation complètement ouvertes, réglable à une
tration connue, peut étre utilisée (voir 8.5.3).
température de 102 f 2 OC, uniforme en tous points. L'étuve
doit être munie d'un thermomètre approprié.
5.2 Éthanol, ou éthanol dénaturé au méthanol, à au
moins 94 % (V1 V).
6.5 Bain d'eau bouillante.
(Voir 10.5.)
6.6 Fioles d'extraction de la matière grasse, type
Mojonnier, telles que décrites dans VISO 3889.
5.3 Solution de rouge Congo.
NOTE - On peut également utiliser des tubes (ou des fioles)
d'extraction de la matière grasse munis d'un siphon ou d'un
Dissoudre dans l'eau 1 g de rouge Congo et diluer à 100 ml.
mais le mode opératoire est alors
système d'aspiration par le vide,
différent. Ce mode opératoire est décrit dans l'annexe. La longue tubu-
NOTE - L'utilisation de cette solution, qui permet de mieux voir
lure à l'intérieur de la fiole peut présenter une extrémité recourbée en
l'interface entre le solvant et la couche aqueuse, est facultative (voir
crochet, si on le désire.
8.5.4). D'autres solutions aqueuses de colorants peuvent être utilisées
pourvu qu'elles ne modifient pas le résultat de la détermination.
Les fioles (ou les tubes, voir la note) doivent être munis de bou-
chons en liège de bonne qualité, ou de bouchons en une autre
5.4 Oxyde diéthylique, exempt de peroxydes (voir 10.31, ne
matière [par exemple, caoutchouc siliconé ou PTFEl)] inaltéra-
contenant pas, ou contenant pas plus de 2 mgikg d'antioxygè-
bles aux réactifs utilisés. Les bouchons en liège doivent être
nes et se conformant aux prescriptions de l'essai à blanc (voir
lavés à l'oxyde diéthylique (5.41, maintenus dans l'eau à 60 OC
chapitre 5, et aussi 10.1 et 10.4).
ou plus pendant au moins 15 min et ensuite mis à refroidir dans
l'eau de façon à en être imprégnés au moment de l'emploi.
5.5 Éther de pétrole, ayant un point d'ébullition entre 30 et
60 OC. 6.7 Support, pour maintenir les fioles (ou les tubes)
d'extraction de la matière grasse (voir 6.6).
5.6 Mélange de solvants, préparé peu de temps avant
Flacon de lavage, pour le mélange de solvants (5.6). Ne
emploi par mélange à volume égal d'oxyde diéthylique (5.4) et 6.8
pas utiliser de flacon de lavage en plastique.
d'éther de pétrole (5.5).
1 i Polytétrafluoroéthylène.
2
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IS0 1854 : 1987 (FI
8.3 Essai à blanc
6.9 Récipients de récupération de la matière grasse, par
exemple fioles à ébullition (fioles à fond plat) de capacité 125 à
Effectuer un essai à blanc simultanément à la détermination, en
250 ml, fioles coniques de capacité 250 ml ou capsules métalli-
utilisant le même mode opératoire et les mêmes réactifs, mais
ques. Lorsqu‘on utilise des capsules métalliques, elles doivent
en remplacant la prise d‘essai diluée comme décrit en 8.5.1, par
être de préférence en acier inoxydable, à fond plat, avec un
10 ml d’eau (voir 10.2).
bec, et doivent avoir un diamètre de 80 à 100 mm, avec une
hauteur d‘environ 50 mm.
8.4 Préparation du récipient de récupération de
6.10 Régulateurs d’ébullition, exempts de matière grasse, la matière grasse
en porcelaine non poreuse ou en carbure de silicium ou billes de
Sécher le récipient (6.9) avec quelques régulateurs d‘ébullition
verre (facultatif dans le cas des capsules métalliques).
(6.10) pendant 1 h dans l’étuve (6.4) (voir note 1).
Éprouvettes graduées, de 5 et 25 ml de capacité.
6.11
Laisser refroidir le récipient (protégé de la poussière) à la tem-
pérature de la salle des balances [récipients en verre pendant au
Pipettes graduées, de 10 ml de capacité.
6.12
moins 1 h, capsules métalliques pendant au moins 0,5 h (voir
note 2i1.
les fioles,
6.13 Pinces métalliques, appropriées pour tenir
Placer le récipient sur la balance (6.1) à l’aide des pinces (6.13)
béchers ou capsules.
(pour éviter, en particulier, des variations de température), et
peser à 0,l mg près.
Dispositif approprié de broyage ou de râpage, facile
6.14
à nettoyer, pour préparer l’échantillon.
NOTES
1 Les régulateurs d‘ébullition sont nécessaires pour permettre une
ébullition modérée pendant l’élimination du solvant, spécialement dans
7 Échantillonnage
le cas des récipients en verre; leur utilisation est facultative dans le cas
des capsules métalliques.
Voir IS0 707.
2 Le récipient ne doit pas être placé dans un dessiccateur, afin d‘évi-
ter un refroidissement insuffisant ou des temps de refroidissement
excessifs.
8 Mode opératoire
8.5 Détermination
NOTE - Un autre mode opératoire utilisant des tubes d’extraction de
la matière grasse munis d‘un siphon ou d‘un système d’aspiration par le
vide (voir la note en 6.6) est décrit dans l’annexe.
8.5.1 Ajouter 10 ml d’eau chaude de façon à entraîner la prise
d’essai dans le bulbe étroit de la fiole et mélanger soigneuse-
ment dans le bulbe étroit
8.1 Préparation de l’échantillon pour essai
Préparer l‘échantillon en utilisant un dispositif approprié (6.14).
8.5.2 Chauffer la fiole dans le bain d‘eau à ébullition, en agi-
Mélanger rapidement la masse broyée ou râpée et, si possible,
tant doucement de temps en temps jusqu’à ce que la prise
broyer une seconde fois puis mélanger à nouveau soigneuse- d’essai soit complètement dispersée. Laisser la fiole pendant
ment. Nettoyer le dispositif après avoir préparé chaque échan-
20 min dans le bain d’eau.
tillon. Si l’échantillon ne peut être broyé ou râpé, le mélanger
soigneusement par un pétrissage intensif, par exemple avec un
8.5.3 Ajouter 2 ml de solution d‘hydroxyde d‘ammonium (5.1 1
pilon dans un mortier.
ou un volume équivalent d’une solution plus concentrée (voir la
note en 5.1 ), et mélanger soigneusement avec la prise d’essai
Conserver l‘échantillon préparé dans un récipient étanche
diluée dans le bulbe étroit de la fiole, puis refroidir, par exemple
jusqu‘au moment de l’analyse, qui devra être réalisée le jour
sous l‘eau courante. Après addition de l’hydroxyde d‘ammo-
même. Si ce délai ne peut être respecté, prendre toutes les pré-
nium, poursuivre la détermination sans attendre.
cautions pour assurer une conservation correcte de I’échantil-
Ion. S‘il est réfrigéré, s’assurer que toute condensation d’eau
8.5.4 Ajouter 10 ml d‘éthanol (5.2). Mélanger doucement
sur la surface interne du récipient est soigneusement et unifor-
mais complètement le contenu de la fiole en lui imprimant un
mément réincorporée dans l‘échantillon pour essai.
mouvement de va-et-vient entre les deux bulbes; éviter d’ame-
ner le liquide trop près du col de la fiole. Ajouter, si on le désire,
8.2 Prise d’essai
2 gouttes de solution de rouge Congo (5.3).
Mélanger l’échantillon pour essai (8.11 par agitation ou retour-
8.5.5 Ajouter 25 ml d’oxyde diéthylique (5.41, fermer la fiole
nements et rotations du récipient et peser immédiatement, à
avec un bouchon en liège (voir 6.6) saturé d‘eau, ou un autre
1 mg pres, directement ou par différence dans une fiole
dispositif de fermeture imprégné d’eau, et agiter la fiole vigou-
d’extraction de la matière grasse (6.6). environ 3 g de I’échantil-
reusement mais sans excès (de facon à éviter la formation
Ion préparé.
d‘émulsions persistantes), pendant 1 min en position horizon-
tale, le bulbe étroit étant en haut, en laissant de temps en
La prise d‘essai doit être placée aussi complètement que possi-
temps le liquide du bulbe large passer dans le bulbe étroit. Si
ble dans le bulbe inférieur (étroit) de la fiole d’extraction.
3
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IS0 1854 : 1987 (FI
récipient préparé, destiné à la récupération de la matière grasse
nécessaire, refroidir la fiole sous l‘eau courante, puis retirer
(voir 8.4). contenant quelques régulateurs d’ébullition (6.10)
avec précaution le bouchon en liège ou le dispositif de ferme-
ture et le rincer, ainsi que le col de la fiole, avec une petite quan- dans le cas des fioles (facultatif avec les capsules métalliques),
en évitant de décanter une partie quelconque de la couche
tité de mélange de solvants (5.6), en se servant du flacon de
2).
lavage (6.8), de facon que les liquides de rincage coulent dans aqueuse (voir figure
la fiole ou le récipient préparé (voir 8.4) pour la récupération de
la matière grasse.
8.5.10 Rincer l’extérieur du col de la fiole d’extraction avec un
peu de mélange de solvants, en recueillant les liquides de rin-
8.5.6 Ajouter 25 ml d‘éther de pétrole (5.51, fermer la fiole
cage dans le récipient de récupération de la matière grasse et en
avec le bouchon en liège humidifié à nouveau, ou le dispositif
prenant soin que le mélange de solvants ne soit pas projeté sur
de fermeture réhumidifié (par trempage dans l’eau), et agiter
l’extérieur de la fiole d‘extraction.
doucement la fiole pendant 30 s comme décrit en 8.5.5.
Si on le désire, les solvants ou une partie des solvants peuvent
être éliminés du récipient, par distillation ou évaporation,
8.5.7 Centrifuger la fiole bouchée pendant 1 à 5 min à une fré-
comme décrit en 8.5.14.
quence de rotation de 500 à 600 min - 1 (voir 6.2). Si l’on ne dis-
pose pas de centrifugeuse, laisser la fiole bouchée reposer sur
le support (6.7) pendant au moins 30 min, jusqu‘à ce que la
8.5.11 Ajouter 5 ml d’éthanol (5.2) aux contenus de la fiole
couche surnageante soit claire et nettement séparée de la
d’extraction en se servant de l’éthanol pour rincer l’intérieur du
couche aqueuse. Si nécessaire, refroidir la fiole sous l’eau cou-
col de la fiole et mélanger comme décrit en 8.5.4.
rante.
8.5.12 Effectuer une Seconde extraction en recommencant les
8.5.8 Retirer avec précaution le bouchon en liège ou le dispo-
opérations décrites de 8.5.5 à 8.5.10 inclus, mais en utilisant
sitif de fermeture et le rincer, ainsi que l’intérieur du col de la
seulement 15 ml d’oxyde diéthylique 15.4) et 15 ml d‘éther de
fiole, avec un peu de mélange de solvants, de façon que les
pétrole (5.5); utiliser l‘oxyde diéthylique pour rincer l’intérieur
liquides de rincage coulent dans la fiole ou le récipient préparé
la fiole d‘extraction.
du col de
pour la récupération de la matière grasse.
Si nécessaire, faire monter l’interface légèrement au-dessus du
Si l’interface se situe au-dessuus du fond du col de la fiole, le
milieu du col de la fiole (voir figure 1) pour permettre à la
faire monter à CO niveau en ajoutant doucement de l’eau par le
décantation finale des solvants d‘être aussi complète que possi-
côté de la fiole (voir figure 11, afin de faciliter la décantation du
ble (voir figure 2).
solvant.
NOTE - Aux figures et 2, l’un des trois
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.