ISO 10993-3:2026

• Abstract:

  This document specifies strategies for risk estimation and evaluation of biological harms with respect to: genotoxicity; carcinogenicity; reproductive toxicity; and developmental toxicity. This document is applicable when the need to evaluate a medical device for potential genotoxicity, carcinogenicity, reproductive toxicity and developmental toxicity has been established. This document is not applicable to active pharmaceutical ingredients of device-drug combination products or biological components of device-biologic combination products which are covered by regulations. NOTE Guidance on selecting relevant biological effects for medical devices is covered in ISO 10993-1.

• Status: Published
• Publication Date: 05-Aug-2026
• ICS: 11.100.20 - Biological evaluation of medical devices
• Technical Committee: ISO/TC 194 - Biological and clinical evaluation of medical devices
• Drafting Committee: ISO/TC 194/WG 6 - Mutagenicity, carcinogenicity and reproductive toxicity
• Current Stage: 6060 - International Standard published
• Start Date: 06-Aug-2026
• Due Date: 27-Oct-2026
• Completion Date: 06-Aug-2026

• Consolidates: FprEN ISO 10993-3 - Biological evaluation of medical devices - Part 3: Evaluation of genotoxicity, carcinogenicity, reproductive toxicity, and developmental toxicity (ISO/FDIS 10993-3:2026)
• Effective Date: 12-Feb-2026
• Consolidates: ISO/IEC 23090-6:2021 - Information technology — Coded representation of immersive media — Part 6: Immersive media metrics
• Effective Date: 18-Nov-2023
• Revises: ISO/TR 10993-33:2015 - Biological evaluation of medical devices — Part 33: Guidance on tests to evaluate genotoxicity — Supplement to ISO 10993-3
• Effective Date: 28-Feb-2026
• Revises: ISO 10993-3:2014 - Biological evaluation of medical devices — Part 3: Tests for genotoxicity, carcinogenicity and reproductive toxicity
• Effective Date: 04-Nov-2023

Overview

ISO 10993-3:2026 is an essential standard within the ISO 10993 series, focusing on the biological evaluation of medical devices, specifically in relation to genotoxicity, carcinogenicity, reproductive toxicity, and developmental toxicity. Prepared by ISO Technical Committee 194, this standard provides strategies for risk estimation and guidance on the selection of test methods for identifying potentially irreversible biological harms arising from exposure to medical device materials. It is applied when medical devices require evaluation for potential genetic toxicity, cancerogenic effects, reproductive hazards, or developmental risks.

By emphasizing a risk-based approach and placing chemical characterization and toxicological assessment at its core, ISO 10993-3 helps ensure that medical devices are both safe and fit for their intended clinical use.

Key Topics

ISO 10993-3:2026 addresses several essential topics in medical device safety:

• Genotoxicity: Strategies for identifying and evaluating substances that may cause genetic mutations.
• Carcinogenicity: Assessment methods for determining the cancer risk posed by device materials.
• Reproductive Toxicity: Evaluation of adverse effects on reproductive function and fertility.
• Developmental Toxicity: Assessment concerning harm to the developing organism, from early stages up to sexual maturation.
• Risk Assessment Approaches: Emphasis on chemical characterization and toxicological risk assessment as primary evaluation methods before considering animal testing.
• Sample Preparation: Guidance on test sample selection and extraction methods aligned with ISO 10993-12.
• Test Method Selection: Recommendations for in vitro batteries of tests using validated OECD guidelines, with in vivo methods reserved for specific circumstances.

Applications

The practical application of ISO 10993-3 spans various phases of the medical device lifecycle, supporting manufacturers, regulatory bodies, and clinical professionals in risk management:

• Product Development: Guides device manufacturers in identifying and mitigating potential biological risks early in design, especially for new or modified materials.
• Regulatory Approval: Assists in preparing technical documentation and substantiating the biological safety of medical devices for regulatory submission.
• Post-market Surveillance: Uses risk-based frameworks to assess new scientific information or incidents involving existing products.
• Clinical Evaluation: Helps clinical researchers and regulatory professionals evaluate whether further genotoxicity, carcinogenicity, or reproductive toxicity testing is required based on chemical composition or expected patient exposure.

The standard supports decisions on waiving or requiring biological testing, promoting efficiency and animal welfare while maintaining robust safety standards.

Related Standards

ISO 10993-3 works within a broader framework of standards relevant to the biological evaluation of medical devices:

• ISO 10993-1: Requirements and general principles for evaluation of biological safety.
• ISO 10993-2: Animal welfare requirements in biological testing.
• ISO 10993-12: Sample preparation and reference materials for biological evaluation.
• ISO 10993-17: Toxicological risk assessment of medical device constituents.
• ISO 10993-18: Chemical characterization of device materials within risk management.
• ISO 14971: Application of risk management to medical devices.
• Various OECD Guidelines for Testing of Chemicals (e.g., OECD 471, 473, 487, 490).

Conclusion

ISO 10993-3:2026 is integral for anyone involved in the design, manufacturing, or approval of medical devices, as it establishes a systematic approach to evaluating genotoxicity, carcinogenicity, reproductive, and developmental toxicity hazards. By aligning with globally recognized risk management and chemical assessment principles, manufacturers can demonstrate compliance, safeguard patient health, and speed time to market for innovative medical technologies.

Keywords: ISO 10993-3, biological evaluation, medical devices, genotoxicity assessment, carcinogenicity testing, reproductive toxicity, developmental toxicity, chemical characterization, toxicological risk assessment, medical device safety standards.

International
Standard
ISO 10993-3
Fourth edition
Biological evaluation of medical
2026-08
devices —
Part 3:
Evaluation of genotoxicity,
carcinogenicity, reproductive
toxicity and developmental toxicity
Évaluation biologique des dispositifs médicaux —
Partie 3: Évaluation de la génotoxicité, de la cancérogénicité,
de la toxicité sur la reproduction et de la toxicité sur le
développement
Reference number
© ISO 2026
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CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: [phone]
Email: [e-mail]
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 2
4 Assessment strategies . . 2
4.1 General .2
4.2 Other considerations .3
5 Genotoxicity assessment . 3
5.1 General .3
5.2 Testing strategy .4
5.2.1 General .4
5.2.2 In vitro genotoxic test battery .4
5.2.3 In vivo genotoxicity testing .5
5.2.4 Follow-up evaluation .5
5.3 Test sample preparation .5
6 Carcinogenicity assessments . 6
6.1 General .6
6.2 Evaluation strategy .6
6.2.1 General .6
6.2.2 Genotoxic carcinogens .6
6.2.3 Non-genotoxic carcinogens .7
7 Evaluation of reproductive toxicity and developmental toxicity . 7
7.1 General .7
7.2 Evaluation methods .8
8 Test report . 9
Annex A (informative) Test sample preparation method for genotoxicity testing .10
Annex B (normative) Tests for genotoxicity .16
Annex C (informative) Carcinogenicity tests in animals .27
Annex D (informative) Genotoxicity assessment of nanomaterials .30
Annex E (informative) Recipe for S9 mix .31
Annex F (informative) Endocrine disruptors .32
Annex G (informative) Evaluation of reproductive toxicity and developmental toxicity .33
Bibliography .37

iii
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee
has been established has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely
with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described
in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the different types
of ISO document should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the
ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
ISO draws attention to the possibility that the implementation of this document may involve the use of (a)
patent(s). ISO takes no position concerning the evidence, validity or applicability of any claimed patent
rights in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a)
patent(s) which may be required to implement this document. However, implementers are cautioned that
this may not represent the latest information, which may be obtained from the patent database available at
www.iso.org/patents. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and expressions
related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the World Trade
Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 194, Biological and clinical evaluation of medical
devices, in collaboration with the European Committee for Standardization (CEN) Technical Committee CEN/
TC 206, Biological and clinical evaluation of medical devices, in accordance with the Agreement on technical
cooperation between ISO and CEN (Vienna Agreement).
This fourth edition of ISO 10993-3 cancels and replaces ISO 10993-3:2014 and ISO/TR 10993-33:2015.
The main changes are as follows:
— this document has been entirely revised to emphasize evaluation of genotoxicity, carcinogenicity,
reproductive toxicity and developmental toxicity instead of testing;
— chemical characterization and toxicological risk assessment have been added as an approach to address
genotoxicity, carcinogenicity, reproductive toxicity and developmental toxicity;
— the follow-up evaluation has been changed when an in vitro genotoxicity test is positive and the flowchart
for follow-up evaluation has been removed;
— reproductive toxicity and developmental toxicity have been described separately;
— the annex on cellular transformation has been deleted;
— ISO/TR 10993-33 has been merged into this document as Annex B on genotoxicity test methods.
A list of all parts in the ISO 10993 series can be found on the ISO website.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.

iv
Introduction
The basis for biological evaluation of medical devices is often empirical and driven by relevant concerns
for human safety. The risk of serious and irreversible effects, such as cancer or second-generation
abnormalities, is of particular public concern. It is inherent in the provision of safe medical devices that such
risks be minimized to the greatest extent feasible. The assessment of mutagenic, carcinogenic, reproductive
toxicity and developmental toxicity hazards is an essential component of the control of these risks. Not all
test methods for the assessment of genotoxicity, carcinogenicity, reproductive toxicity and developmental
toxicity are equally well developed, nor is their validity well established for the testing of medical devices.
Significant issues with test sample size and preparation, scientific understanding of disease processes and
test validation can be cited as limitations of available methods. Since the previous edition of this document,
many genotoxicity test methods have been updated with revised OECD guidelines. However, these generally
provide clearer recommendations but little alteration in test methods. Scientifically sound alternatives to
the proposed testing can be acceptable insofar as they address relevant matters of safety assessment of the
medical device.
In the selection of tests needed to evaluate a particular medical device, a careful assessment of expected
human uses and potential interactions with biological systems is important, particularly in such areas as
reproductive toxicity and developmental toxicity.
This document presents test methods and evaluation strategies for the identification of specific biological
harms. Testing is not always necessary or appropriate in evaluating biological risks associated with exposure
to medical device materials but, where it is appropriate, it is important that maximum test sensitivity is
achieved.
In view of the multitude of possible outcomes and the importance of factors such as extent of exposure,
species differences and mechanical or physical considerations, risk assessment is typically performed on a
[7]
case-by-case basis. Suggestions for risk consideration and integration of ISO 10993-17 and ISO 10993-18
are provided.
v
International Standard ISO 10993-3:2026(en)
Biological evaluation of medical devices —
Part 3:
Evaluation of genotoxicity, carcinogenicity, reproductive
toxicity and developmental toxicity
1 Scope
This document specifies strategies for risk estimation and evaluation of biological harms with respect to:
— genotoxicity;
— carcinogenicity;
— reproductive toxicity; and
— developmental toxicity.
This document is applicable when the need to evaluate a medical device for potential genotoxicity,
carcinogenicity, reproductive toxicity and developmental toxicity has been established.
This document is not applicable to active pharmaceutical ingredients of device-drug combination products
or biological components of device-biologic combination products which are covered by regulations.
NOTE Guidance on selecting relevant biological effects for medical devices is covered in ISO 10993-1.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content constitutes
requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For undated references,
the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 10993-1:2025, Biological evaluation of medical devices — Part 1: Requirements and general principles for
the evaluation of biological safety within a risk management process
ISO 10993-2, Biological evaluation of medical devices — Part 2: Animal welfare requirements
ISO 10993-12:2021, Biological evaluation of medical devices — Part 12: Sample preparation and reference
materials
ISO 10993-17, Biological evaluation of medical devices — Part 17: Toxicological risk assessment of medical
device constituents
ISO 14971:2019, Medical devices — Application of risk management to medical devices
OECD 471:2020, OECD Guideline for the Testing of Chemicals — Bacterial Reverse Mutation Test
OECD 473:2016, OECD Guideline for the Testing of Chemicals — In vitro Mammalian Chromosome Aberration
Test
OECD 487:2016, OECD Guideline for the Testing of Chemicals — In vitro Mammalian Cell Micronucleus Test
OECD 490:2016, OECD Guideline for the Testing of Chemicals — In vitro Mammalian Cell Gene Mutation Tests
Using the Thymidine Kinase Gene

3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the terms and definitions given in ISO 10993-1, ISO 10993-12 and the
following apply.
ISO and IEC maintain terminology databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at https:// www .electropedia .org/
3.1
carcinogenicity test
test to determine cancer outcomes after long term or life-span exposure of animals
Note 1 to entry: Outcomes are typically based on tumorigenic potential and other factors.
3.2
developmental toxicity evaluation
methods to determine adverse effects on the developing organism during prenatal development or
postnatally to the time of sexual maturation
3.3
genotoxicity test
test using cells, bacteria, yeast, fungi, animals or other biological systems to determine whether gene
mutations, chromosomal alterations or other genetic changes are caused by the test sample
3.4
reproductive toxicity evaluation
methods to evaluate the potential effects of test samples on male or female reproductive function during
any stage of development or fertility
3.5
sham-incubated vehicle
vehicle control exposed to the same extraction time and temperature as the test sample extract
3.6
threshold of toxicological concern
TTC
level of exposure for constituents, below which there would be no appreciable risk to human health
Note 1 to entry: The constituent is defined as a chemical or compound present in or on a finished medical device
or material(s) of construction. Constituents can be intentionally present (e.g. an additive such as an antioxidant) or
unintentionally present (e.g. an impurity).
[11]
[SOURCE: ISO/TS 21726:2019, 3.5 , modified — Note 1 to entry has been added.]
4 Assessment strategies
4.1 General
ISO 10993-1 indicates circumstances where the potential for genotoxicity, carcinogenicity, reproductive
toxicity and developmental toxicity are relevant biological harms for consideration in an overall biological
safety evaluation. Evaluation of the biological harms shall consider the following factors:
— whether assessment is necessary based on patient population (e.g. life expectancy, sensitive population)
and the anticipated impact of test results on risk management judgements,
— whether assessment is necessary based on the worst-case quantity, type of contact and duration of
exposure,
NOTE Quantity can be influenced by device size and number used per patient.
— an analysis of the chemical constituents of the device material(s), including manufacturing process
residues and degradation products or metabolites, to identify causes of concern. The identification can
be based on chemical-specific toxicity data if available; otherwise, structure-activity relationships or
previous demonstration of relevant toxicity in the chemical class can be used,
— existing information relevant to the genotoxicity, carcinogenicity, reproductive toxicity and
developmental toxicity evaluation of the medical device, and
— previous use of equivalent (see ISO 10993-1:2025, 6.7) materials and processing in relevant applications.
The decision to waive in vitro genotoxicity, carcinogenicity, reproductive toxicity and developmental toxicity
testing shall be justified. The decision to conduct in vivo testing shall be justified.
[7]
If exposure to constituents identified in accordance with ISO 10993-18 is determined to be within
acceptable levels based on a toxicological risk assessment conducted in accordance with ISO 10993-17, no
additional testing needs to be performed to address the relevant risks.
4.2 Other considerations
Toxicity evaluation can be warranted for additional states of the device, such as wear debris generated
from the device, absorbable materials, or materials that cure in situ (e.g. cements, adhesives, pre-polymer
mixtures) unless toxicological risk assessment based on material information determines no cause for
concern. For guidance on test sample preparation for in situ curing devices, see ISO 10993-12.
NOTE Material information can include chemical composition, degradation products, debris size and morphology,
pre-polymerization, post-polymerization products, etc.
5 Genotoxicity assessment
5.1 General
Assessment of genotoxic risk should be made:
a) by conducting toxicological risk assessment based on chemical characterization according to
[7]
ISO 10993-17 and ISO 10993-18 ; or
b) by performing genotoxicity testing in the standard test battery according to 5.2.2.
In certain cases (e.g. a material which has not been used in a legally marketed device for its intended use),
both toxicological risk assessment of medical device constituents based on chemical characterization and
genotoxicity testing of a medical device can be appropriate.
NOTE 1 Genotoxicity testing can also be appropriate when chemical characterization data is insufficient for a
toxicological risk assessment.
If the device is made with and releases nanomaterials, additional evaluation shall be considered.
[9]
NOTE 2 See ISO/TR 10993-22 and Annex D for more information.
If chemical characterization of the device identifies genotoxicants which are not easily detected using non-
[7]
targeted analytical approaches described in ISO 10993-18 (e.g. glutaraldehyde, formaldehyde), targeted
analysis of genotoxic residuals shall be conducted. Where compositional profiling or analytical chemistry
reveals the presence of chemical constituents with inadequate genotoxicity data and where quantitative
structure activity relationship (QSAR) information is inconclusive (see ISO 10993-17), testing of individual
chemicals or device components containing the chemical should be considered. In either case, the test
sample shall be justified and documented.

5.2 Testing strategy
5.2.1 General
No single test is capable of detecting all types of genotoxic agents. Therefore, the usual approach is to
conduct a battery of in vitro and, under certain circumstances, also in vivo tests.
Genotoxicity tests are designed to detect the two major classes of genetic damage:
— gene mutations (DNA single base pair changes, small deletions or insertions), and
— chromosomal damage [structural aberrations such as translocations, small or large deletions and
insertions, and gain or loss of whole chromosomes (aneuploidy) or parts of chromosomes].
NOTE Bacterial reverse mutation assays have been shown to detect relevant small-scale mutational changes
produced by the majority of genotoxic carcinogens detected by rodent bioassays.
5.2.2 In vitro genotoxic test battery
When genotoxicity testing is performed, it shall be conducted in accordance with Annex B and the test
battery shall include:
a) a test for gene mutations in bacteria (see OECD 471), modified for use with medical devices, see
Clause B.2, and
b) one of the following three validated in vitro mammalian cell tests:
1) an in vitro test with cytogenetic evaluation of chromosomal damage with mammalian cells (see
OECD 473), modified for medical devices, in accordance with Clause B.3 and B.4.2, or
+/- +/-
2) an in vitro mouse lymphoma tk assay using L5178Y (tk ) cells (see OECD 490), modified for
medical devices, including detection of small (slow growing) and large colonies, see Clause B.3 and
B.4.1, or
3) an in vitro mammalian cell micronucleus test for chromosomal damage and aneugenicity (see OECD
487), modified for medical devices, see Clause B.3 and B.4.3.
NOTE 1 If the medical device is known to contain nanomaterials testing according to OECD 471 is not recommended,
see Annex D.
All tests (bacterial and in vitro mammalian tests) shall be performed in the presence and absence of
metabolic activation. Metabolic activation is achieved by addition of a co-factor-supplemented post-
mitochondrial fraction (S9).
NOTE 2 An example for a S9 recipe is given in Annex E.
In vitro mammalian tests shall include both a short-term exposure with and without S9 and a long-term
exposure without S9.
NOTE 3 See B.3.2.3 for descriptions of short-and long-term exposure.
+/-
Results from both chromosomal aberration assays and the in vitro mouse lymphoma tk assay (MLA) have
a relatively high level of congruence for compounds that are regarded as genotoxic but yield negative results
in the bacterial reverse mutation assay. The MLA detects the broadest set of genetic damage, including both
small-scale and large-scale genetic damages. The micronucleus assay detects chromosomal damage in the
form of whole chromosome loss or chromosomal fragments and uniquely detects aneuploidy. The three tests
are equally acceptable as an in vitro mammalian genotoxicity test (see OECD 473, OECD 487 and OECD 490).
The hypoxanthine guanine phosphoribosyl transferase gene mutation assay (HGPRT/HPRT) method (see
[84]
OECD 476 ) is not included in the recommended test battery for device testing. This test can be appropriate
for medical devices containing nanomaterials (see Annex D).

5.2.3 In vivo genotoxicity testing
In vivo genotoxicity tests are not part of the recommended genotoxicity test battery because they are
relatively insensitive and not likely to detect genotoxicity at the concentrations of substances generally
[73][74]
found in medical devices or in medical device extracts . These concentrations can be insufficient to
meet the limit dose required by the test methods. However, under certain circumstances, an in vivo test can
be useful.
These circumstances can include:
a) assessment of nanomaterial or other particulates suspected of sequestration in particular organs or
[9]
tissues (see Annex D, Reference [30] and ISO/TR 10993-22 ); or
[6]
b) when additional relevant factors [e.g. toxicokinetics (see ISO 10993-16 ), organ-specific toxicity] need
to be considered.
In vivo tests are valid only with data demonstrating the test sample reached the target cells, organs, or
tissues. Mutational analysis in target organs of rats or mice can be determined using one of several rodent
[27]
transgenic mutation assays (see OECD 488 ); chromosomal damage can be assessed in the erythrocyte
[24] [28]
micronucleus assay (see OECD 474 ), the in vivo comet assay (see OECD 489 ), or the in vivo chromosomal
[25]
aberration assay (see OECD 475 ). See Clause B.5 for additional considerations for in vivo assays.
All animal studies shall be performed in a facility meeting the requirements of ISO 10993-2.
5.2.4 Follow-up evaluation
If in vitro genotoxicity tests are performed in accordance with 5.2.2 and if the tests are negative, the test
sample can be considered non-genotoxic and further testing is not necessary.
Equivocal results (i.e. elevated results that do not meet criteria for a positive result), can require repeating
tests with a modified protocol such as adjusting dilution of the test sample or extract.
When any single in vitro test is positive or equivocal, then the following options shall be considered:
a) Identification of genotoxic constituents by chemical characterization (information gathering or
analytical chemistry testing) or other testing, with appropriate steps taken to eliminate or manage any
identified risks.
b) If confounding factors (e.g. osmolality, pH, cytotoxicity) are suspected to have caused the positive
response or equivocal in an initial genotoxicity test, the dosing or test conditions may be modified with
a justification to address confounding factors.
c) Presume that a genotoxicity risk exists and manage the risk in accordance with ISO 14971.
5.3 Test sample preparation
Test samples should be extracted in vehicles compatible with the test system (see Annex A). Use of extraction
vehicles that are incompatible with the test system requires additional manipulation (e.g. solvent removal)
that can alter the composition of the extract and, therefore, affect the results of the test. Use of extraction
vehicles that are incompatible with the test system shall be justified.
Extraction shall be performed in accordance with ISO 10993-12 unless otherwise justified.
Tests can be performed on solutions (e.g. soluble or liquid devices), suspensions (e.g. Method A in Annex A),
extracts (e.g. Method B in Annex A) of the finished product, medical device components or individual
chemicals from the medical device. If individual chemicals are tested, then the appropriate OECD guidelines
shall be followed.
NOTE Some authorities having jurisdiction prefer Method C in Annex A while others do not accept Method C.

6 Carcinogenicity assessments
6.1 General
The objective of carcinogenicity studies is to determine tumorigenic potential of medical devices or medical
device constituents in animals and to evaluate the relevant risk to patients. Mechanisms of carcinogenesis
can be genotoxic or non-genotoxic. Medical devices shall be evaluated for both types of carcinogenicity,
preferably by alternative approaches, such as chemical characterization and toxicological risk assessment,
that do not use in vivo testing.
Animal testing for carcinogenicity is technically challenging. It requires implantation of many medical
devices, representative samples of the medical device, or the application of concentrated medical device
extracts to achieve the elevated doses necessary for a valid test in a reasonable number of animals. For these
reasons, animal testing is generally not justified when the risks can be adequately assessed by other means.
NOTE For additional information on animal carcinogenicity testing, see Annex C.
6.2 Evaluation strategy
6.2.1 General
[7]
Carcinogenicity should be evaluated initially using chemical characterization according to ISO 10993-18
and toxicological risk assessment according to ISO 10993-17. When medical devices or materials are not
readily amenable to analytical chemistry testing and adequate chemical characterization information
is available from information gathering, it is always preferable to use the chemical information and
toxicological risk assessment including assessment of available genotoxicity data to evaluate carcinogenicity
rather than performing an animal carcinogenicity study.
NOTE 1 Some authorities having jurisdiction can require consideration of carcinogenicity testing for novel
materials (e.g. when data are not available to provide an adequate assessment).
NOTE 2 Evaluation of solid-state carcinogenesis due to release of particulates or fibres from a medical device can
be partially addressed by toxicological risk assessment according to ISO 10993-17. This does not address all the risks.
See Annex C for more information.
If the results of toxicological risk assessment indicate the risk of carcinogenicity is acceptable, no further
assessment is required.
Carcinogenicity testing shall not be performed when risks can be adequately assessed or managed
without generating new carcinogenicity test data or when the benefit-risk analysis obviates the need for
a carcinogenicity assessment. If the toxicological risk of carcinogenicity is unacceptable, the risk shall be
managed accordingly (see also ISO 14971).
If the medical device contains a chemical with inadequate toxicological data, biological testing to address
carcinogenicity shall be justified and documented based on the need for additional information. The
assessment should address both genotoxic (see 6.2.2) and non-genotoxic carcinogenicity (see 6.2.3) on the
individual chemical identified in the toxicological risk assessment.
NOTE 3 The history of human clinical use can be considered in the risk assessment. The clinical evidence for
carcinogenicity risk is generally not monitored over an adequate timeframe and this aspect of medical device safety
can be unknown.
6.2.2 Genotoxic carcinogens
The carcinogenicity risk from genotoxic carcinogens can be established by genotoxicity testing (if unknown)
or by toxicological risk assessment (of identified genotoxins). Genotoxicity testing requires a battery of tests
(see 5.2.2).
Where genotoxicity of a medical device is established, either based on genotoxicity testing or prior material
knowledge of the medical device, additional evaluation of carcinogenic risk shall be performed in accordance

with ISO 10993-17. It can be appropriate to identify the genotoxic constituent and focus the evaluation on
only that constituent.
Genotoxic chemicals that are DNA reactive but with adverse effects that can be mitigated by rapid
detoxification before coming in contact with DNA or by a demonstrated effective repair of induced damage
[75]
can be evaluated by the use of a No observed effect level and uncertainty factors .
NOTE While genotoxic carcinogenicity can include non-threshold mechanisms, there are exposure levels below
which impact on lifetime cancer risk is considered acceptable (usually less than 1 in 100 000 anticipated additional
lifetime incidence).
6.2.3 Non-genotoxic carcinogens
Non-genotoxic carcinogens do not cause direct DNA damage but induce cancer via other mechanisms
(see References [54], [55] and [60]). These carcinogens can induce their effects (leading to cancer) upon
repeated exposure leading to prolonged interference with homeostatic processes that lead to irreversible
and uncontrolled cellular proliferation. The estimation of carcinogenic risk for non-genotoxic chemicals is
complicated by:
— the diversity of modes of action;
— the tissue and species specificity; and
— the absence of currently validated test methods.
There are many practical challenges to conducting a rodent carcinogenicity test (see 6.1). Therefore, a
toxicological risk assessment according to ISO 10993-17 should be used.
If a medical device constituent is not genotoxic and carcinogenicity data are not available, then a tolerable
intake (TI) based on subchronic or chronic systemic toxicity data can be used to evaluate carcinogenicity
risk. If there are insufficient data to set a TI, then the TTC may be used to estimate the risk in accordance
with ISO 10993-17. Recent publications indicate that the TTCs based on Cramer Class are protective for non-
genotoxic carcinogens (see Reference [62]).
NOTE 1 Non-genotoxic carcinogens have thresholds, below which the risk of cancer is unlikely (see Reference [61]).
NOTE 2 Approaches for prediction of non-genotoxic carcinogenicity are under active investigation (e.g.
References [58] and [60]).
NOTE 3 Examples of non-genotoxic carcinogens can be found in the supplementary material in Reference [62].
7 Evaluation of reproductive toxicity and developmental toxicity
7.1 General
Reproductive toxicity evaluation shall be considered for medical devices intended for use in individuals of
reproductive age under any of the following conditions:
— medical devices that have prolonged or long-term direct or indirect contact with reproductive organs or
gametes;
— medical devices that have prolonged or long-term in vitro contact with gametes or reproductive tissue
(e.g. devices used as assisted reproductive technologies) taking into account the influence of temperature;
— medical devices that have prolonged or long-term use and contain known or presumed reproductive
toxicants (i.e. materials with a known adverse effect on reproduction);
— medical devices that are absorbable or cure in situ, and are in close proximity to the reproductive organs,
regardless of duration of contact; or
— materials that have not been used in a legally marketed device, for a similar intended use.

NOTE 1 Material means material of construction, intended additives or process residuals, or any combination
of the three.
NOTE 2 Similar intended use means the nature of contact category and contact-duration category are the
same; and the device risk level is considered the same or lower compared to the legally marketed medical device.
In addition to contact category and contact-duration, additional factors to consider in the determination of the
medical device risk level include: the material type and quantity, the material constituent composition, medical
device contact frequency, nature or degree of tissue contact with the device, and user population.
Developmental toxicity evaluation shall be considered for:
— medical devices with prolonged or long-term direct or indirect contact with embryos or foetuses;
— medical devices for prolonged or long-term use on individuals in early childhood that contain known or
presumed developmental toxicants [e.g. endocrine disruptors according to Annex F, lead (Pb)]; potential
exposure to a medical device in contact with lactating women should also be considered;
— medical devices that are absorbable or cure in situ, and that are in close proximity to the reproductive
organs, regardless of duration of contact; or
— materials that have not been used in a legally marketed medical device, for an equivalent intended
purpose.
7.2 Evaluation methods
Assessment of reproductive and developmental risk should be made:
a) by toxicological risk assessment based on chemical characterization according to ISO 10993-17 and
[7]
ISO 10993-18 ; or
b) by performing developmental and reproductive testing as described in Annex G.
Current biological test methods for the evaluation of reproductive toxicity and developmental toxicity
are for single substances and are not validated for mixtures (e.g. medical device extracts). Evaluation for
medical devices shall first consider a toxicological risk assessment focusing on reproductive toxicity and
developmental toxicity in accordance with ISO 10993-17. Exposure estimates can be determined through
[7]
chemical characterization outlined in ISO 10993-18 .
Exposure estimates can also be improved with
— leachables studies, or
— simulated-use studies, or
— release kinetic studies
[7]
performed according to ISO 10993-18 .
If it is determined that the amount of a reproductive and developmental toxicant in the medical device is
above acceptable limits, the presence of the toxicant shall be carefully considered for risk control where
possible and in the benefit-risk analysis in the (overall) risk management file in accordance with ISO 14971.
The following factors should be considered in the risk assessment:
— an assessment of reproductive potential of the subject population (medical devices used in early
adulthood or reproductive age-individuals);
— a specific assessment of reproductive toxicity data, if available;
— the potential for exposure of reproductive tissues, the developing offspring or nursing child, including
[7]
available chemical characterization information according to ISO 10993-18 and available toxicokinetic
[6]
studies according to ISO 10993-16 ;
— medical device physical characteristics taking into account the influence of temperature;

— available medical device genotoxicity information;
— history of clinical use;
— indication for use; and
— any other information.
NOTE For more information on reproductive toxicity and developmental toxicity, see Annex G.
When the remaining risk is unacceptable due to a lack of robust experimental data, individual chemical
substances can be tested with in vitro or in vivo biological test methods (e.g. see Reference [63], Clause G.2
[14]
and OECD 43 ). For example, testing an individual chemical in a developmental toxicity study can yield an
effect level or no effect level to help refine the risk assessment.
8 Test report
The test report shall include at least the following details:
a) the International Standard used (including its year of publication);
b) a description of the test sample (e.g. identifier, material composition, processing, size and weight)
including its intended use;
c) a description, rationale and justification of the test methods used (e.g. OECD 471) and the test details
(including at least conditions, materials, dose and test sample preparation);
d) a description of analytical methods including quantification limits;
e) a statement of conformity of the laboratory to appropriate current best laboratory or quality practices,
[8]
for example, Good Laboratory Practices (GLP) or ISO/IEC 17025 , where applicable;
f) a description of S9 mix (including manufacturers as applicable) and final % of S9 fraction used in testing;
g) historical control data;
h) test results including summary;
i) statistical methods, if applicable;
j) any deviations from the procedure or any unusual features observed;
k) interpretation and discussion of results;
l) further details regarding follow-up testing as specified in Annex B, Annex C or Annex G, if applicable;
m) date of the test;
n) name and signature of the responsible person.

Annex A
(informative)
Test sample preparation method for genotoxicity testing
A.1 General
This annex gives guidance for selecting an appropriate test sample preparation method for genotoxicity
testing of medical devices. The selection of the appropriate test sample preparation method including
vehicles, is critical to obtain relevant results from genotoxicity tests, because inappropriate test sample
preparation can result in an underestimation of genotoxicity risk.
A.2 Test sample preparation methods
A.2.1 General
The ideal test sample preparation method for genotoxic tests is exhaustive extraction.
ISO 10993-12 may be used to conduct exaggerated extraction for test sample preparation, as this is
considered more practical and achievable. For some medical devices (e.g. liquids), other test sample
preparation methods can be more appropriate.
NOTE 1 The selection of a test sample preparation method for any material or medical device intended for use in
humans requires a structured approach that takes the chemical composition and physicochemical properties of the
material or medical device into consideration.
The test sample preparation should follow one of the two proposed methods – Method A or Method B –
described in Figure A.1.
Figure A.1 — Structured approach to select a test sample preparation method
When the test sample requires extraction in accordance with ISO 10993-12, Method B (see A.2.3) shall be
used. Otherwise, Method A (see A.2.2) should be used.
The method used should be justified.
NOTE 2 Some authorities having jurisdiction prefer Method C while others do not accept Method C.
The solvents or extraction vehicles shall be compatible with the test sample and the test system. Some
vehicles can react with or alter the test material (e.g. cause degradation, swelling). Care should be taken to
avoid altering the extractable profile resulting in clinically irrelevant compounds.

A.2.2 Method A
The test sample is either dissolved or suspended (or partially dissolved) in the solvent. The final volume
of test sample preparation added to the test system varies with the compatibility of the solvent in the test
system.
Solutions should be used immediately after preparation to prevent sorption on to containers or to prevent
other changes in composition. If samples are not used immediately, justification should be provided (e.g.
stability of the solution). Solution pH shall
...

Norme
internationale
ISO 10993-3
Quatrième édition
Évaluation biologique des
2026-08
dispositifs médicaux —
Partie 3:
Évaluation de la génotoxicité, de la
cancérogénicité, de la toxicité sur la
reproduction et de la toxicité sur le
développement
Biological evaluation of medical devices —
Part 3: Evaluation of genotoxicity, carcinogenicity, reproductive
toxicity and developmental toxicity
Numéro de référence
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
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Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
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E-mail: [e-mail]
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .vi
1 Domaine d'application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 2
4 Stratégies d'évaluation . 3
4.1 Généralités .3
4.2 Autres considérations .3
5 Évaluation de la génotoxicité . . 3
5.1 Généralités .3
5.2 Stratégie d'essai .4
5.2.1 Généralités .4
5.2.2 Batterie d'essais de génotoxicité in vitro .4
5.2.3 Essai de génotoxicité in vivo .5
5.2.4 Évaluation de suivi .6
5.3 Préparation des échantillons pour essai .6
6 Évaluations de la cancérogénicité . 6
6.1 Généralités .6
6.2 Stratégie d'évaluation .7
6.2.1 Généralités .7
6.2.2 Cancérogènes génotoxiques .7
6.2.3 Cancérogènes non génotoxiques .7
7 Évaluation de la toxicité sur la reproduction et de la toxicité sur le développement . 8
7.1 Généralités .8
7.2 Méthodes d'évaluation .9
8 Rapport d'essai . 10
Annexe A (informative) Méthode de préparation des échantillons pour essai pour les essais de
génotoxicité .11
Annexe B (normative) Essais de génotoxicité . 17
Annexe C (informative) Essais de cancérogénicité chez les animaux .29
Annexe D (informative) Évaluation de la génotoxicité des nanomatériaux .32
Annexe E (informative) Recette pour le mélange S9 .34
Annexe F (informative) Perturbateurs endocriniens .35
Annexe G (informative) Évaluation de la toxicité sur la reproduction et de la toxicité sur le
développement .36
Bibliographie . 41

iii
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document
a été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2
(voir www.iso.org/directives).
L'ISO attire l'attention sur le fait que la mise en application du présent document peut entraîner l'utilisation
d'un ou de plusieurs brevets. L'ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité et à l'applicabilité
de tout droit de propriété revendiqué à cet égard. À la date de publication du présent document, l'ISO
n'avait pas reçu notification qu'un ou plusieurs brevets pouvaient être nécessaires à sa mise en application.
Toutefois, il y a lieu d'avertir les responsables de la mise en application du présent document que des
informations plus récentes sont susceptibles de figurer dans la base de données de brevets, disponible à
l'adresse www.iso.org/brevets. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir identifié de tels
droits de propriété et averti de leur existence.
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données pour
information, par souci de commodité, à l'intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion de
l'ISO aux principes de l'Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au
commerce (OTC), voir www.iso.org/iso/fr/avant-propos.html.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 194, Évaluation biologique et clinique
des dispositifs médicaux, en collaboration avec le comité technique CEN/TC 206, Évaluation biologique et
clinique des dispositifs médicaux, du Comité européen de normalisation (CEN) conformément à l’Accord de
coopération technique entre l’ISO et le CEN (Accord de Vienne).
Cette quatrième édition de l'ISO 10993-3 annule et remplace l'ISO 10993-3:2014 et l'ISO/TR 10993-33:2015.
Les principales modifications sont les suivantes:
— le présent document a été entièrement révisé afin de mettre l'accent sur l'évaluation de la génotoxicité,
de la cancérogénicité, de la toxicité sur la reproduction et de la toxicité sur le développement plutôt que
sur les essais;
— la caractérisation chimique et l'évaluation des risques toxicologiques ont été ajoutées comme approche
permettant d'étudier la génotoxicité, la cancérogénicité, la toxicité sur la reproduction et la toxicité sur
le développement;
— les modalités de l'évaluation de suivi ont été modifiées lorsqu'un essai de génotoxicité in vitro s'avère
positif et le diagramme de l'évaluation de suivi a été supprimé;
— la toxicité sur la reproduction et la toxicité sur le développement ont été décrit séparément;
— l'annexe sur la transformation cellulaire a été supprimée;
— L'ISO/TR 10993-33 a été intégrée au présent document en tant qu’Annexe B, laquelle porte sur les
méthodes d'essai de génotoxicité.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 10993 se trouve sur le site web de l'ISO.

iv
Il convient que l'utilisateur adresse tout retour d'information ou toute question concernant le présent
document à l'organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes se
trouve à l'adresse www.iso.org/fr/members.html.

v
Introduction
La base de l'évaluation biologique des dispositifs médicaux est souvent empirique et guidée par les conditions
requises pour la sécurité des personnes. Le risque d'effets graves et irréversibles, tels que le cancer ou des
anomalies de deuxième génération, est une préoccupation publique importante. La fourniture de dispositifs
médicaux sûrs implique que de tels risques soient réduits autant que possible. L'évaluation des risques
mutagènes, cancérogènes, de la toxicité sur la reproduction et de la toxicité sur le développement est une
composante essentielle du contrôle de ces risques. Toutes les méthodes d'évaluation de la génotoxicité, de
la cancérogénicité ou de la toxicité sur la reproduction et de la toxicité sur le développement ne sont pas
développées de façon égale et leur validité n'est pas établie de façon suffisante pour les essais des dispositifs
médicaux.
Des aspects importants concernant la taille et la préparation des échantillons pour essai, la connaissance
scientifique des étapes de la maladie et la validation des essais peuvent être cités en tant que limitations des
méthodes disponibles. Depuis la précédente édition du présent document, de nombreuses méthodes d'essai
de génotoxicité ont été mises à jour avec la révision des lignes directrices de l'OCDE. Cependant, celles-
ci fournissent généralement des recommandations plus claires mais peu d'altérations dans les méthodes
d'essai. Des alternatives scientifiquement raisonnables aux essais proposés peuvent être acceptables dans la
mesure où elles abordent les aspects adéquats de l'évaluation de la sécurité du dispositif médical.
Lors de la sélection des essais nécessaires à l'évaluation d'un dispositif médical particulier, une évaluation
minutieuse des utilisations prévues chez l'Homme et des interactions potentielles avec les systèmes
biologiques est importante, en particulier dans des domaines tels que la toxicité sur la reproduction et la
toxicité du développement.
Le présent document présente des méthodes d'essai et des stratégies d'évaluation pour l'identification des
dommages biologiques spécifiques. Des essais ne sont pas toujours nécessaires ou appropriés pour évaluer
les risques biologiques associés à l'exposition aux matériaux des dispositifs médicaux mais, lorsque cela est
approprié, il est important d'obtenir une sensibilité d'essai maximale.
Étant donné la multiplicité des résultats possibles et l'importance de certains facteurs tels que le degré
d'exposition, les différences interespèces et les considérations mécaniques ou physiques, l'évaluation
du risque est généralement effectuée au cas par cas. Des suggestions concernant la prise en compte et
[7]
l'intégration du risque de l'ISO 10993-17 et de l'ISO 10993-18 sont fournies.

vi
Norme internationale ISO 10993-3:2026(fr)
Évaluation biologique des dispositifs médicaux —
Partie 3:
Évaluation de la génotoxicité, de la cancérogénicité, de
la toxicité sur la reproduction et de la toxicité sur le
développement
1 Domaine d'application
Le présent document définit des stratégies d'estimation et d'évaluation des risques liés aux dommages
biologiques quant aux sujets suivants:
— génotoxicité;
— cancérogénicité;
— toxicité sur la reproduction; et
— toxicité sur le développement.
Le présent document est applicable lorsque le besoin d'évaluer un dispositif médical dont le risque de
génotoxicité, de cancérogénicité, de toxicité sur la reproduction et de toxicité sur le développement a été
identifié.
Le présent document n'est pas applicable aux principes pharmaceutiques actifs des dispositifs médicaux
combinés à des médicaments ni aux composants biologiques des dispositifs médicaux combinés à des
produits biologiques, qui sont régis par des réglementations.
NOTE Des recommandations relatives à la sélection de critères biologiques pertinents pour les dispositifs
médicaux sont données dans l'ISO 10993-1.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour
les références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y compris les éventuels
amendements).
ISO 10993-1:2025,
Évaluation biologique des dispositifs médicaux — Partie 1: Exigences et principes généraux pour
l’évaluation de la sécurité biologique au sein d’un processus de gestion des risques
ISO 10993-2, Évaluation biologique des dispositifs médicaux — Partie 2: Exigences relatives à la protection des
animaux
ISO 10993-12:2021, Évaluation biologique des dispositifs médicaux — Partie 12: Préparation des échantillons et
matériaux de référence
ISO 10993-17, Évaluation biologique des dispositifs médicaux — Partie 17: Appréciation du risque toxicologique
des constituants des dispositifs médicaux
ISO 14971:2019, Dispositifs médicaux — Application de la gestion des risques aux dispositifs médicaux

OCDE 471:2020, Lignes directrices de l'OCDE pour les essais de produits chimiques — Essai de mutation réverse
sur des bactéries
OCDE 473:2016, Lignes directrices de l'OCDE pour les essais de produits chimiques — Essai d'aberration
Chromosomique In Vitro chez les Mammifères
OCDE 487:2016, Lignes directrices de l'OCDE pour les essais de produits chimiques — Essai in vitro de
micronoyaux sur cellules de mammifères
OCDE 490:2016, Lignes directrices de l'OCDE pour les essais de produits chimiques — Essai In Vitro de Mutation
Génique Sur Cellules de Mammifères Utilisant le Gène de la Thymidine Kinase
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et les définitions de l'ISO 10993-1 et de l'ISO 10993-12
ainsi que les suivants s'appliquent.
L'ISO et l'IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en normalisation,
consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l'adresse https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: disponible à l'adresse https:// www .electropedia .org/
3.1
essai de cancérogénicité
essai destiné à déterminer la survenue d’un cancer après une exposition à long terme ou à la durée de vie des
animaux
Note 1 à l'article: Les résultats dépendent généralement du potentiel tumorigène et d'autres facteurs.
3.2
évaluation de la toxicité sur le développement
méthodes destinées à déterminer les effets indésirables sur l'organisme en développement au cours du
développement prénatal ou après l'accouchement jusqu'au moment de la maturation sexuelle
3.3
essai de génotoxicité
essai qui utilise des cellules, des bactéries, des levures, des champignons, des animaux ou d'autres systèmes
biologiques afin de déterminer si des mutations géniques, des altérations chromosomiques ou d'autres
modifications génétiques sont causées par l'échantillon pour essai
3.4
évaluation de toxicité sur la reproduction
méthodes destinées à évaluer les effets potentiels des échantillons pour essai sur la fonction reproductrice
mâle ou femelle à tout stade de développement ou de fertilité
3.5
véhicule en incubation fictive
véhicule témoin exposé au même temps et à la même température d'extraction que l'extrait d'échantillon
pour essai
3.6
seuil de préoccupation toxicologique
TTC
niveau d'exposition des constituants, au-dessous duquel il n'y aurait pas de risque appréciable pour la santé
humaine
Note 1 à l'article: Le constituant est défini comme un produit chimique ou un composé présent dans ou sur un dispositif
médical fini ou un ou plusieurs matériaux constitutifs. La présence des constituants peut être volontaire (par exemple,
un additif tel qu'un antioxydant) ou involontaire (par exemple, une impureté).

[11]
[SOURCE: ISO/TS 21726:2019, 3.5, modifié — La Note 1 à l'article a été ajoutée.]
4 Stratégies d'évaluation
4.1 Généralités
L'ISO 10993-1 indique les circonstances dans lesquelles le potentiel de génotoxicité, de cancérogénicité,
de toxicité sur la reproduction et de toxicité sur le développement constitue des dommages biologiques
pertinents à prendre en compte dans une évaluation de sécurité biologique globale. L'évaluation des
dommages biologiques doit tenir compte des facteurs suivants:
— si l'évaluation est nécessaire basée sur la population de patients (par exemple, espérance de vie,
populations sensibles); et l'impact anticipé des résultats des essais sur les décisions de gestion des
risques;
— si l'évaluation est nécessaire basée sur la quantité la plus défavorable, le type de contact et la durée de
l'exposition;
NOTE La quantité peut être influencée par la taille et le nombre de dispositifs utilisés par patient.
— analyse des composants chimiques du ou des matériaux du dispositif, notamment des résidus du
processus de fabrication et des produits de dégradation ou des métabolites, pour identifier les causes
des problèmes. L'identification peut être fondée sur des données de toxicité spécifiques à un produit
chimique, le cas échéant; sinon, les relations structure/activité ou la démonstration antérieure de la
toxicité dans la classe chimique peuvent être utilisées;
— informations existantes pertinentes relatives à l'évaluation de la génotoxicité, de la cancérogénicité, de
la toxicité sur la reproduction et de la toxicité sur le développement du dispositif médical; et
— l'utilisation antérieure de matériaux et traitements équivalents (voir l'ISO 10993-1:2025, 6.7) dans des
applications pertinentes.
La décision de ne pas réaliser d'essais de génotoxicité, de cancérogénicité, de toxicité pour la reproduction
et de toxicité pour le développement in vitro doit être justifiée. La décision de réaliser des essais in vivo doit
être justifiée.
[7]
Si l'exposition à des constituants identifiés conformément à l'ISO 10993-18 est déterminée comme étant
dans les limites acceptables sur la base de l'évaluation du risque toxicologique effectuée conformément
à l'ISO 10993-17, alors aucun essai supplémentaire n'est nécessaire pour évaluer les risques concernés.
4.2 Autres considérations
L'évaluation de la toxicité peut être garantie pour les états supplémentaires du dispositif, tels que des débris
d'usure provenant du dispositif, des matériaux résorbables ou les matériaux qui durcissent in situ (par
exemple, ciments, adhésifs, mélanges de prépolymères) sauf si l'évaluation du risque toxicologique fondée
sur les informations sur le matériau ne détermine aucune cause de problème. Pour des lignes directrices sur
la préparation des échantillons pour essai pour les dispositifs de durcissement in situ, voir l'ISO 10993-12.
NOTE Les informations sur le matériau peuvent inclure la composition chimique, les produits de dégradation, la
taille et la morphologie des débris, la prépolymérisation, les produits de post-polymérisation, etc.
5 Évaluation de la génotoxicité
5.1 Généralités
Il convient d'évaluer le risque génotoxique:
a) en réalisant une évaluation toxicologique du risque fondée sur la caractérisation chimique,
[7]
conformément à l'ISO 10993-17 et à l'ISO 10993-18 ; ou

b) en réalisant des essais de génotoxicité de la batterie d'essais standards conformément à 5.2.2.
Dans certains cas (par exemple, un matériau qui n'a pas été utilisé dans un dispositif commercialisé
légalement pour la même utilisation clinique), l'évaluation des risques toxicologiques des constituants du
dispositif médical basée sur la caractérisation chimique et les essais de génotoxicité du dispositif médical
peuvent être appropriés.
NOTE 1 Les essais de génotoxicité peuvent également s'avérer appropriés lorsque les données de caractérisation
chimique sont insuffisantes pour permettre une évaluation des risques toxicologiques.
Une évaluation supplémentaire doit être prise en compte dans le cas où le dispositif est composé de et libère
des nanomatériaux.
[9]
NOTE 2 Voir l'ISO/TR 10993-22 et l'Annexe D pour plus d'informations.
Si la caractérisation chimique du dispositif identifie des substances génotoxiques qui ne sont pas facilement
[7]
détectées à l'aide des approches analytiques décrites dans l'ISO 10993-18 et qui ne sont pas ciblées (par
exemple glutaraldéhyde, formaldéhyde), une analyse ciblée des résidus génotoxiques doit être effectuée.
Lorsque le profilage de la composition ou la chimie analytique révèle la présence de composants chimiques
avec des données de génotoxicité inappropriées et lorsque les informations sur la relation quantitative
structure activité (QSAR) ne sont pas concluantes (voir l'ISO 10993-17), il convient de prendre en compte les
essais de chaque produit chimique ou composant du dispositif contenant le produit chimique. Dans les deux
cas, l'échantillon pour essai doit être justifié et consigné.
5.2 Stratégie d'essai
5.2.1 Généralités
Aucun essai unique n'est capable de détecter tous les types d'agents génotoxiques. Par conséquent, l'approche
habituelle est d'effectuer une batterie d'essais in vitro et, dans certaines circonstances, également in vivo.
Les essais de génotoxicité sont conçus pour détecter les deux principales classes de lésions génétiques:
— les mutations géniques (modification d'une paire de base simple de l'ADN, petites suppressions ou
insertions); et
— la lésion chromosomique [aberrations structurelles telles que des translocations, des petites ou
grandes délétions et insertions et gain ou perte de chromosomes entiers (aneuploïdie) ou de parties de
chromosomes].
NOTE Des essais de mutation réverse sur des bactéries ont permis de détecter des modifications de mutation
pertinentes à petite échelle générées par la majorité des cancérigènes génotoxiques détectés par des essais biologiques
sur rongeurs.
5.2.2 Batterie d'essais de génotoxicité in vitro
Lorsque des essais de génotoxicité sont réalisés, ils doivent être effectués conformément à l'Annexe B et la
batterie d'essais doit comprendre:
a) un essai de mutation géniques dans les bactéries (voir OCDE 471), modifié pour les dispositifs médicaux,
voir Article B.2; et
b) l'un des trois essais suivants sur des cellules de mammifères in vitro validés:
1) un essai in vitro avec une évaluation cytogénétique des lésions chromosomiques de cellules de
mammifères (voir OCDE 473), modifié pour les dispositifs médicaux, conformément à l'Article B.3 et
à B.4.2; ou
± ±
2) un essai de kinase de thymidine  du lymphome murin in vitro utilisant des cellules L5178Y (tk )
(voir OCDE 490) modifié pour les dispositifs médicaux, comprenant la détection de petites colonies
(à croissance lente) et grandes colonies, voir Article B.3 et B.4.1; ou

3) un essai in vitro de micronoyaux sur cellules de mammifères relatif aux lésions chromosomiques
et au pouvoir aneugène (voir OCDE 487) modifié pour les dispositifs médicaux, voir Articles B.3
et B.4.3.
NOTE 1 S'il est établi que le dispositif médical contient des nanomatériaux, il n'est pas recommandé de procéder
aux essais décrits dans l'OCDE 471; voir Annexe D.
Tous les essais (essais bactériens et essais in vitro sur des cellules de mammifères) doivent être réalisés
en présence et en l'absence d'activation métabolique. L'activation métabolique est obtenue par ajout d'une
fraction post-mitochondriale enrichie en cofacteur (S9).
NOTE 2 L'Annexe E fournit un exemple recette de S9.
Les essais mammifères in vitro doivent inclure à la fois une exposition à court terme avec et sans S9 et une
exposition à long terme sans S9.
NOTE 3 Voir B.3.2.3 pour consulter les descriptions de l'exposition à court et à long terme.
±
Les résultats des essais d'aberration chromosomique et de kinase de thymidine  du lymphome murin (MLA)
ont un niveau de concordance relativement élevé pour les composés qui sont considérés comme génotoxiques
mais qui donnent des résultats négatifs dans l'essai de mutation réverse sur des bactéries. Le MLA détecte
le spectre le plus large de lésions génétiques, y compris les lésions génétiques à petite et à grande échelle.
L'essai de micronoyau détecte les lésions chromosomiques sous la forme d'une perte chromosomique totale
ou de fragments chromosomiques et détecte de manière unique l'aneuploïdie. Les trois essais sont également
acceptables en tant qu'essai de génotoxicité mammifères in vitro (voir OCDE 473, OCDE 487 et OCDE 490).
La méthode d'essai de mutation génique de l'hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransférase (HGPRT/
HPRT) (voir l'OCDE 476) ne figure pas dans la batterie d'essais recommandée pour les essais sur
des dispositifs médicaux. Cet essai peut être approprié pour les dispositifs médicaux contenant des
nanomatériaux (voir Annexe D).
5.2.3 Essai de génotoxicité in vivo
Les essais de génotoxicité in vivo ne font pas partie de la batterie d'essais de génotoxicité recommandée car
ils sont relativement insensibles et ne sont pas susceptibles de détecter la génotoxicité à des concentrations
de substances généralement présentes dans les dispositifs médicaux ou dans les extraits de dispositifs
[73][74]
médicaux. Ces concentrations peuvent s'avérer insuffisantes pour atteindre la dose limite requise par
les méthodes d'essai. Cependant, dans certaines circonstances, un essai in vivo peut être utile.
Ces circonstances peuvent inclure:
a) l'évaluation des nanomatériaux ou autres particules suspectés de séquestration dans des organes ou
[9]
tissus particuliers (voir l’Annexe D, la Référence [30] et l'ISO/TR 10993-22 ); ou
[6]
b) lorsque des facteurs pertinents supplémentaires [tels que la toxicocinétique (voir l'ISO 10993-16 ) ou
la toxicité spécifique à un organe] sont à prendre en compte.
Les essais in vivo ne sont valides qu'avec des données démontrant que l'échantillon pour essai a atteint les
cellules, organes ou tissus cibles. L'analyse de mutation dans les organes cibles de rats ou de souris peut
[27]
être déterminée à l'aide de l'un des essais de mutation chez les rongeurs transgéniques (voir OCDE 488 );
les lésions chromosomiques peuvent être évaluées dans l'essai de micronoyau sur érythrocytes
[24] [28]
(voir OCDE 474 ), dans l'essai des comètes in vivo (voir OCDE 489 ) ou dans l'essai d'aberration
[25]
chromosomique in vivo (voir OCDE 475 ). Voir Article B.5 pour des considérations supplémentaires
relatives aux essais in vivo.
Toutes les études sur les animaux doivent être effectuées dans un établissement satisfaisant aux exigences
de l'ISO 10993-2.
5.2.4 Évaluation de suivi
Si les essais de génotoxicité in vitro sont réalisés conformément à 5.2.2 et si les essais sont négatifs,
l'échantillon pour essai peut être considéré comme non génotoxique et il n'est pas nécessaire de réaliser
d'autres essais.
Les résultats équivoques (c'est-à-dire les résultats élevés qui ne répondent pas aux critères d'un résultat
positif) peuvent nécessiter de répéter les essais avec un protocole modifié tel que l'ajustement de la dilution
de l'échantillon ou de l'extrait pour essai.
Lorsqu'un seul essai in vitro est positif ou équivoque, les options suivantes doivent être prises en compte:
a) l'identification des constituants génotoxiques par caractérisation chimique (collecte d'informations ou
essais chimiques analytiques) ou autres essais, avec les mesures appropriées prises pour éliminer ou
gérer tout risque identifié;
b) S'il est soupçonné que des facteurs de confusion (par exemple, l'osmolalité, le pH, la cytotoxicité) sont
à l'origine d'une réponse positive ou équivoque lors d'un essai de génotoxicité initial, le dosage ou les
conditions d'essai peuvent être modifiés afin de tenir compte de ces facteurs de confusion en justifiant
de cet objectif.
c) la supposition qu'un risque de génotoxicité existe et gérer le risque conformément à l'ISO 14971.
5.3 Préparation des échantillons pour essai
Il convient d'extraire les échantillons pour essai dans des véhicules compatibles avec le système d'essai
(voir l'Annexe A). L'utilisation de véhicules d'extraction incompatibles avec le système d'essai exige une
manipulation supplémentaire (par exemple l'élimination du solvant) qui peut altérer la composition
de l'extrait et, par conséquent, affecter les résultats de l'essai. L'utilisation de véhicules d'extraction
incompatibles avec le système d'essai doit être justifiée.
Sauf justification contraire, l'extraction doit être effectuée conformément à l'ISO 10993-12.
Les essais peuvent être réalisés sur des solutions (par exemple, dispositifs solubles ou liquides), des
suspensions (par exemple, méthode A de l'Annexe A), des extraits (par exemple, méthode B de l'Annexe A)
du produit fini, des composants du dispositif médical ou des produits chimiques individuels provenant du
dispositif médical. Si des produits chimiques individuels sont soumis à essai, les lignes directrices de l'OCDE
appropriées doivent être suivies.
NOTE Certaines autorités compétentes privilégient la méthode C de l’Annexe A, tandis que d'autres n'acceptent
pas cette méthode.
6 Évaluations de la cancérogénicité
6.1 Généralités
L'objectif des études de cancérogénicité est de déterminer le potentiel tumorigène des dispositifs médicaux
ou des constituants de dispositifs médicaux chez les animaux et d'évaluer le risque concerné pour les
patients. Les mécanismes de cancérogénicité peuvent être génotoxiques ou non génotoxiques. Les dispositifs
médicaux doivent être évalués pour les deux types de cancérogénicité, de préférence par des approches
alternatives, telles que la caractérisation chimique et l'évaluation des risques toxicologiques, qui n'utilisent
pas d'essais in vivo.
L'expérimentation animale en matière de cancérogénicité est techniquement difficile. Elle exige
l'implantation de nombreux dispositifs médicaux, des échantillons représentatifs du dispositif médical ou
l'application d'extraits concentrés du dispositif médical pour obtenir les doses élevées nécessaires à un essai
valide sur un nombre raisonnable d'animaux. Pour ces raisons, l'expérimentation animale n'est généralement
pas justifiée lorsque les risques peuvent être correctement évalués par d'autres moyens.
NOTE Pour plus d'informations sur les essais de cancérogénicité chez l'animal, voir l'Annexe C.

6.2 Stratégie d'évaluation
6.2.1 Généralités
Il convient d'évaluer la cancérogénicité initialement au moyen de la caractérisation chimique conformément
[7]
à l'ISO 10993-18 et l'évaluation des risques toxicologiques conformément à l'ISO 10993-17. Lorsque les
dispositifs médicaux ou les matériaux ne se prêtent pas facilement à des essais chimiques analytiques et
que des informations adéquates sur leur caractérisation chimique peuvent être obtenues en collectant
des données, il est toujours préférable d'utiliser des informations chimiques et une évaluation des
risques toxicologiques, y compris l'évaluation des données de génotoxicité disponibles, pour évaluer la
cancérogénicité plutôt que de mener une étude de cancérogénicité sur des animaux.
NOTE 1 Certaines autorités compétentes peuvent exiger la prise en compte des essais de cancérogénicité pour les
nouveaux matériaux (par exemple, lorsque des données ne sont pas disponibles pour fournir une évaluation adéquate).
NOTE 2 L'évaluation de la cancérogénèse à l'état solide due au rejet de particules ou de fibres provenant
d'un dispositif médical peut être partiellement effectuée au moyen d'une évaluation des risques toxicologiques
conformément à l'ISO 10993-17. Cela ne couvre pas tous les risques. Voir Annexe C pour plus d'informations.
Aucune autre évaluation n'est requise dans le cas où les résultats de l'évaluation des risques toxicologiques
indiquent un risque acceptable de cancérogénicité.
Les essais de cancérogénicité ne doivent pas être réalisés lorsque les risques peuvent être correctement
évalués ou gérés sans générer de nouvelles données d'essai de cancérogénicité ou lorsque l'analyse bénéfices/
risques dispense d'une évaluation de cancérogénicité. Si le risque toxicologique de cancérogénicité est
inacceptable, le risque doit être géré en conséquence (voir également l'ISO 14971).
Si le dispositif contient un produit chimique avec des données toxicologiques inappropriées, les essais
biologiques effectués pour étudier la cancérogénicité doivent être justifiés et consignés sur la base d'un
besoin d'informations supplémentaires. Il convient que l'évaluation porte à la fois sur la cancérogénicité
génotoxique (voir 6.2.2) et sur la cancérogénicité non génotoxique (voir 6.2.3) du produit chimique individuel
identifié dans l'évaluation des risques toxicologiques.
NOTE 3 L'historique d'utilisation clinique chez l'homme peut être pris en compte dans l'évaluation des risques. Les
preuves cliniques du risque de cancérogénicité ne sont généralement pas surveillées sur une période adéquate et cet
aspect de la sécurité du dispositif médical peut être inconnu.
6.2.2 Cancérogènes génotoxiques
Le risque de cancérogénicité lié aux agents cancérigènes génotoxiques peut être établi par des essais
de génotoxicité (s'il n'est pas établi) ou par une évaluation des risques toxicologiques (des substances
génotoxiques identifiées). Les essais de génotoxicité nécessitent une batterie d'essais (voir 5.2.2).
Lorsque la génotoxicité d'un dispositif médical est établie, que ce soit sur la base d'essais de génotoxicité ou
de connaissances antérieures sur les matériaux constituant ce dispositif, une évaluation supplémentaire des
risques cancérogènes doit être effectuée conformément à l'ISO 10993-17. Il peut être approprié d'identifier le
constituant génotoxique et de concentrer l'évaluation uniquement sur ce constituant.
Les substances chimiques génotoxiques qui réagissent avec l'ADN, mais dont les effets indésirables peuvent
être atténués par une détoxication rapide avant qu'elles n'entrent en contact avec l'ADN ou par une réparation
avérée efficace des lésions induites, peuvent être évaluées au moyen d'une dose sans effet observé et de
[75]
facteurs d'incertitude .
NOTE Bien que la cancérogénicité génotoxique puisse impliquer des mécanismes sans seuil, il existe des niveaux
d'exposition en dessous desquels l'impact sur le risque de cancer à vie est considéré comme acceptable (généralement
moins d'une incidence supplémentaire anticipée sur 100 000 au cours de la vie).
6.2.3 Cancérogènes non génotoxiques
Les agents cancérogènes non génotoxiques ne causent pas de lésion directe à l'ADN, mais induisent des
cancers par d'autres mécanismes (voir les Références [54], [55] et [60]). Ces agents cancérogènes peuvent

induire leurs effets (menant à un cancer) lors d'une exposition répétée entraînant une interférence prolongée
avec des processus homéostatiques conduisant à une prolifération cellulaire irréversible et incontrôlée.
L'estimation du risque cancérogène des produits chimiques non génotoxiques est compliquée par:
— la diversité des modes d'action;
— la spécificité des tissus et des espèces; et
— l'absence de méthodes d'essai actuellement validées.
La réalisation d'un essai de cancérogénicité chez les rongeurs pose de nombreux défis pratiques (voir 6.1). Par
conséquent, il convient de réaliser une évaluation des risques toxicologiques conformément à l'ISO 10993-17.
Si un constituant du dispositif médical n'est pas génotoxique et si les données de cancérogénicité ne sont
pas disponibles, alors une dose tolérable (TI) basée sur des données de toxicité systémique subchronique
ou chronique peut être utilisée pour évaluer le risque de cancérogénicité. Si les données disponibles
sont insuffisantes pour établir une TI, le TTC peut être utilisé pour estimer le risque conformément
à l'ISO 10993-17. Des publications récentes indiquent que les TTC basés sur la classe de Cramer sont
protecteurs pour les agents cancérogènes non génotoxiques (voir la Référence [62]).
NOTE 1 Les cancérogènes non génotoxiques comportent des seuils au-dessous desquels le risque de cancer est peu
probable (voir la Référence [61]).
NOTE 2 Les approches de prédiction de la cancérogénicité non génotoxique sont activement en cours d'étude (par
exemple, Références [58] et [60]).
NOTE 3 Des exemples de cancérogènes non génotoxiques peuvent être trouvés dans le matériau supplémentaire de
la Référence [62].
7 Évaluation de la toxicité sur la reproduction et de la toxicité sur le développement
7.1 Généralités
L'évaluation de la toxicité sur la reproduction doit être prise en compte pour les dispositifs médicaux
destinés à être utilisés chez des individus en âge de reproduction dans l'une des conditions suivantes:
— les dispositifs médicaux qui sont en contact direct ou indirect, prolongé ou à long terme, avec des organes
reproducteurs ou des gamètes;
— les dispositifs médicaux qui sont en contact in vitro prolongé ou à long terme avec des gamètes ou
des tissus reproducteurs (par exemple, les dispositifs utilisés dans des techniques de procréation
médicalement assistée), en tenant compte de l'influence de la température;
— les dispositifs médicaux qui ont une utilisation prolongée ou à long terme et contiennent des substances
toxiques sur la reproduction connues ou présumées (par exemple, les matériaux ayant un effet néfaste
connu sur la reproduction);
— les dispositifs médicaux qui sont résorbables ou durcis in situ, et sont à proximité immédiate des organes
reproducteurs, quelle que soit la durée du contact; ou
— les matériaux qui n'ont pas été utilisés dans un dispositif commercialisé légalement, pour un usage
similaire prévu.
NOTE 1 Le terme “matériau” désigne le matériau constitutif, les additifs prévus ou les résidus de processus, ou
une combinaison des trois.
NOTE 2 Une utilisation prévue similaire signifie que la catégorie de la nature de contact et la catégorie de
la durée de contact sont identiques; et le niveau de risque du dispositif médical est considéré comme identique
ou inférieur à celui du dispositif médical commercialisé légalement. Outre la catégorie de contact et la durée
de contact, les facteurs supplémentaires à prendre en compte dans la détermination du niveau de risque du
dispositif médical incluent: le type et la quantité de matériau, la composition du matériau, la fréquence de contact
du dispositif médical, la nature ou le degré de contact tissulaire avec le dispositif et la population d'utilisateurs.

L'évaluation de la toxicité sur le développement doit être prise en compte pour:
— les dispositifs étant en contact direct ou indirect, prolongé ou à long terme, avec des embryons ou des
fœtus;
— les dispositifs médicaux destinés à une utilisation prolongée ou à long terme chez les enfants en bas âge
et contenant des substances toxiques sur le développement connues ou présumées [par exemple, les
perturbateurs endocriniens conformément à l’Annexe F, le plomb (Pb)]; il convient de prendre également
en considération l'exposition potentielle à un dispositif médical en contact avec des femmes
...