ISO 17410:2001
(Main)Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the enumeration of psychrotrophic microorganisms
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the enumeration of psychrotrophic microorganisms
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour le dénombrement des micro-organismes psychrotrophes
La présente Norme internationale spécifie une méthode de dénombrement des micro-organismes psychrotrophes par le biais d'une technique de comptage des colonies à 6,5 °C. Cette méthode est applicable aux produits destinés à la consommation humaine ou aux aliments destinés aux animaux.
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 17410
First edition
2001-05-15
Microbiology of food and animal feeding
stuffs — Horizontal method for the
enumeration of psychrotrophic
microorganisms
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour le dénombrement
des micro-organismes psychrotrophes
Reference number
ISO 17410:2001(E)
©
ISO 2001
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ISO 17410:2001(E)
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ISO 17410:2001(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO
member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical
committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in
liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 3.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting.
Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this International Standard may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
International Standard ISO 17410 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products,
Subcommittee SC 9, Microbiology.
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 17410:2001(E)
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal
method for the enumeration of psychrotrophic microorganisms
1 Scope
This International Standard specifies a method for the enumeration of psychrotrophic microorganisms by means of
the colony-count technique at 6,5 °C. The method is applicable to products intended for human consumption or for
animal feeding stuffs.
2 Normative references
The following normative documents contain provisions which, through reference in this text, constitute provisions of
this International Standard. For dated references, subsequent amendments to, or revisions of, any of these
publications do not apply. However, parties to agreements based on this International Standard are encouraged to
investigate the possibility of applying the most recent editions of the normative documents indicated below. For
undated references, the latest edition of the normative document referred to applies. Members of ISO and IEC
maintain registers of currently valid International Standards.
ISO 6887-1, Microbiology of food and animal feeding stuffs — Preparation of test samples, initial suspension and
decimal dilutions for microbiological examination — Part 1: General rules for the preparation of the initial
1)
suspension and decimal dilutions.
ISO 7218, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General rules for microbiological examinations.
ISO 8261, Milk and milk products — Preparation of samples and dilutions for microbiological examination.
3 Term and definition
For the purposes of this International Standard, the following term and definition applies.
3.1
psychrotrophic microorganism
bacteria, yeasts and moulds forming countable colonies under the conditions specified in this International
Standard
4Principle
4.1 Two agar plates are prepared using a solid non-selective culture medium, and using a specified quantity of
the test sample if the initial product is liquid, or using a specified quantity of an initial suspension in the case of
other products. In order to prevent heat stress, surface inoculation is used.
Other pairs of agar plates are prepared, under the same conditions, using decimal dilutions of the test sample or
the initial suspension.
1) Parts 2 to 5 are in preparation, see biliography.
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ISO 17410:2001(E)
4.2 The plates are subjected to aerobic incubation at 6,5 °C for 10 days.
4.3 The number of microorganisms per millilitre or per gram of sample is calculated from the number of colonies
obtained on the plates chosen.
5 Culture media and dilution fluid
For current laboratory practice, see ISO 7218.
Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise specified, and distilled or demineralized water
or water of equivalent purity.
If the prepared culture media and reagents are not used immediately, store them, unless otherwise stated, in the
dark at a temperature of 3 °C � 2 °C for no longer than 1 month, under conditions which do not produce any
change in their composition.
5.1 Dilution fluid
See ISO 6887-1.
5.2 Plate count agar (PCA)
5.2.1 Composition
Enzymatic digest of casein 5,0 g
Yeast extract 2,5 g
Glucose 1,0 g
a
Agar
9gto 18g
Water 1 000 ml
a
Depending on the gel strength of the agar.
When dairy products are examined, it is recommended to add 1,0 g of skimmed milk powder per litre of the culture
medium. The skimmed milk powder shall be free from inhibitory substances.
5.2.2 Preparation
Dissolve the components or the dehydrated complete medium in the water, by heating if necessary. Mix thoroughly
and leave to stand for several minutes. Adjust the pH (6.9), if necessary, so that after sterilization it is
7,0 � 0,2 at 25 °C.
Dispense the medium into flasks or bottles (6.10) in appropriate quantities. Sterilize for 15 min in the autoclave
(6.1) set at 121 °C.
If the medium is to be used immediately, cool it before use in the water bath (6.7) set at 44 °Cto47 °C. If not, allow
the medium to solidify in the flask or bottle. Before use, melt the medium completely in a boiling water bath, then
cool it in the water bath (6.7) set at 44 °Cto47 °C.
Place in each of an appropriate number of Petri dishes (6.5) about 15 ml of the freshly prepared, or remelted,
complete medium. Allow to solidify.
Immediately before use, dry the agar plates carefully (preferably with the lids off and the agar surface downwards)
in an incubator (6.3) set between 37 °C and 55 °C until the surface of the agar is dry. The agar plates may also be
dried in a laminar-flow safety cabinet for 30 min with half-open lids, or overnight with the lids in place (see
ISO 7218).
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ISO 17410:2001(E)
6 Apparatus and glassware
For general requirements, see ISO 7218.
Disposable apparatus is an acceptable alternative to reusable glassware if it has similar specifications.
Usual microbiological laboratory equipment and, in particular, the following.
6.1 Autoclave, capable of operating at a temperature of 121 °C.
6.2 Oven for dry sterilization, capable of operating at a temperature between 170 °C and 175 °Cfor 1h.
6.3 Incubator, capable of operating at a temperature of 37 °Cto55 °C.
6.4 Incubator, capable of operating at a temperature of 6,5 °C � 1 °C.
6.5 Petri dishes, made of glass or plastic, of approximately 90 mm to 100 mm diameter.
6.6 Pipettes, calibrated for bacteriological use, having nominal capacities of 0,1 ml, 1 ml and 10 ml.
6.7 Water baths, or similar apparatus, one capable of operating at a temperature of 44 °Cto47 °C and another
capable of boiling water.
6.8 Colony-counting equipment, consisting of an illuminated base and, optionally, a mechanical or electronic
digital counter.
6.9 pH-meter, capable of being read to the nearest 0,01 pH unit at 25 °C, enabling measurements to be made
which are accurate to � 0,1 pH unit.
6.10 Bottles or flasks, of appropriate capacity, for preparation, sterilization and, if necessary, storage of culture
media.
6.11 Glass or plastic spreaders, sterile, for spreading inoculation m
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 17410
Première édition
2001-05-15
Microbiologie des aliments — Méthode
horizontale pour le dénombrement des
micro-organismes psychrotrophes
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the
enumeration of psychrotrophic microorganisms
Numéro de référence
ISO 17410:2001(F)
©
ISO 2001
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ISO 17410:2001(F)
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Imprimé en Suisse
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ISO 17410:2001(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiéeaux
comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude aledroit de fairepartie ducomité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en
liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec la Commission
électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI, Partie 3.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour
vote. Leur publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités
membres votants.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments delaprésente Norme internationale peuvent faire
l’objet de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de
ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
La Norme internationale ISO 17410 a étéélaboréepar le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires,
sous-comité SC 9, Microbiologie.
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NORME INTERNATIONALE ISO 17410:2001(F)
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour le
dénombrement des micro-organismes psychrotrophes
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale spécifie une méthode de dénombrement des micro-organismes psychrotrophes
par le biais d’une technique de comptage des colonies à 6,5 °C. Cette méthode est applicable aux produits
destinés à la consommation humaine ou aux aliments destinés aux animaux.
2Références normatives
Les documents normatifs suivants contiennent des dispositions qui, par suite de la référence qui y est faite,
constituent des dispositions valables pour la présente Norme internationale. Pour les références datées, les
amendements ultérieurs ou les révisions de ces publications ne s’appliquent pas. Toutefois, les parties prenantes
aux accords fondés sur la présente Norme internationale sont invitées à rechercher la possibilité d'appliquer les
éditions les plus récentes des documents normatifs indiqués ci-après. Pour les références non datées, la dernière
édition du document normatif en référence s’applique. Les membres de l'ISO et de la CEI possèdent le registre des
Normes internationales en vigueur.
ISO 6887-1, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des dilutions
décimales en vue de l’examen microbiologique — Partie 1: Règles générales pour la préparation de la suspension
1)
mère et des dilutions décimales.
ISO 7218, Microbiologie des aliments — Règles générales pour les examens microbiologiques.
ISO 8261, Lait et produits laitiers — Préparation des échantillons pour essai et des dilutions en vue de l’examen
microbiologique.
3 Terme et définition
Pour les besoins de la présente Norme internationale, le terme et la définition suivants s’appliquent.
3.1
micro-organisme psychrotrophe
bactéries, levures ou moisissures formant des colonies comptables dans les conditions spécifiées dans la présente
Norme internationale
4Principe
4.1 Préparation de deux boîtes de Petri à partir d’un milieu de culture solide non sélectif et à partir d’une quantité
déterminéed’échantillon pour essai si le produit initial est liquide ou, dans le cas des autres produits, à partir d’une
quantité déterminée de suspension mère. Pour éviter les contraintes thermiques, l’inoculation est faite en surface.
1) Les parties 2 à 5del’ISO 6887 sont en préparation (voir la bibliographie).
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Préparation d’autres paires de boîtes de Petri dans les mêmes conditions à partir de dilutions décimales de
l’échantillon pour essai ou à partir de la suspension mère.
4.2 Incubation en aérobiose des boîtes à 6,5 °C pendant 10 jours.
4.3 Calcul du nombre de micro-organismes par millilitre ou par gramme d’échantillon à partir du nombre de
colonies obtenues sur les boîtes choisies.
5 Milieux de culture et diluants
Pour les pratiques courantes de laboratoire, voir l’ISO 7218.
Sauf spécification contraire, n’utiliser que des réactifs de qualité analytique reconnue et de l’eau distilléeou
déminéraliséeoudel’eau de puretééquivalente.
Si les milieux de culture et les réactifs préparés ne sont pas utilisésimmédiatement, les conserver, sauf
spécification contraire, à l’abri de la lumière à une température de 3 °C � 2 °C pendant une période n’excédant pas
1 mois dans des conditions n’entraînant pas de modification de leur composition.
5.1 Diluant
Voir l’ISO 6887-1.
5.2 Milieu de comptage
5.2.1 Composition
Digestat enzymatique de caséine 5,0 g
Extrait de levure 2,5 g
Glucose 1,0 g
a
Agar-agar 9 g à 18 g
Eau 1 000 ml
a
Selon le pouvoir gélifiant de l’agar-agar.
Dans le cas d’analyse de produits laitiers, il est recommandé d’ajouter 1,0 g de lait en poudre écrémé par litre de
milieu de culture. Le lait en poudre écrémé doit être exempt de substances inhibitrices.
5.2.2 Préparation
Dissoudre les composants ou le milieu de culture complet déshydraté dans de l’eau, en chauffant si nécessaire.
Homogénéiser et laisser reposer plusieurs minutes. À l’aide du pH-mètre (6.9), ajuster, si besoin est, le pH de sorte
qu’aprèsstérilisation il soit de 7,0 � 0,2 à 25 °C.
Verser le milieu dans des fioles ou flacons (6.10) par quantité appropriées. Stériliser pendant 15 min à l’autoclave
(6.1) régléà 121 °C.
Si le milieu est à utiliser immédiatement, le refroidir avant l’emploi dans un bain d’eau (6.7) régléà une température
comprise entre 44 °Cet 47 °C. Dans le cas contraire, laisser le milieu se solidifier dans la fiole ou le flacon. Avant
l’emploi, faire fondre le milieu complètement dans un bain d’eau bouillante, puis le refroidir dans un bain d’eau (6.7)
régléà une température comprise entre 44 °Cet47 °C.
Placer dans chacune d’un nombre approprié de boîtes de Petri (6.5) environ 15 ml du milieu de culture complet
préparé extemporanément ou refondu. Laisser se solidifier.
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ISO 17410:2001(F)
Immédiatement avant l’emploi, placer les boîtes de Petri soigneusement (de préférence couvercle enlevé et
surface gélosée sur le dessous) dans un incubateur (6.3) réglé entre 37 °Cet 55 °Cjusqu’à ce que la surface
géloséesoitsèche. Le séchage des boîtes contenant le milieu gélosé peut aussi être réalisé sous hotte à flux
laminaire pendant 30 min avec le couvercle entrouvert ou toute une nuit avec le couvercle en place (ISO 7218).
6 Appareillage et verrerie
Pour les exigences générales, voir l’ISO 7218.
Un appareillage jetable constitue une alternative acceptable à la verrerie réutilisable si ses spécifications sont
similaires.
Matériel courant de laboratoire de microbiologie et, en particulier, ce qui suit.
6.1 Autoclave, capable de fonctionner à une température de 121 °C.
6.2 Étuve pour stérilisation en chaleur sèche, capable de fonctionner à une température comprise entre
170 °C et 175 °C pendant 1 h.
6.3 Incubateur, capable de fonctionner à une température comprise entre 37 °Cet55 °C.
6.4 Incubateur, capable de fonctionner à une température de 6,5 °C � 1 °C.
6.5 Boîtes de Petri, en verre ou en plastique, de diamètre d’environ 90 mm à 100 mm.
6.6 Pipettes,calibrées pour un usage bactériologique, de capacité nominale de 0,1 ml, 1 ml et 10 ml.
6.7 Bains d’eau ou appareils similaires, l’un capable de fonctionner à une température comprise entre 44 °Cet
47 °Cetl’autre pouvant être amenéàébullition.
6.8 Appareil de comptage des colonies, constitué d’une base éclairée et, en option, d’un compteur numérique
mécanique ou électronique.
6.9 pH-mètre, ayant une précision de lecture de � 0,01 unité pH à 25 °C, permettant de réaliser des mesures
précises à � 0,1 unité pH.
6.10 Fioles ou flacons, de capacité appropriée, pour la préparation, la stérilisation et, si nécessaire, la
conservation des milieux de culture.
6.11 Étaleurs (râteaux),stériles, e
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.