ISO 17410:2019
(Main)Microbiology of the food chain — Horizontal method for the enumeration of psychrotrophic microorganisms
Microbiology of the food chain — Horizontal method for the enumeration of psychrotrophic microorganisms
This document specifies a horizontal method for the enumeration of psychrotrophic microorganisms that are able to grow and form colonies on a solid agar culture medium after aerobic incubation at 6,5 °C. This document is applicable to — products intended for human consumption, — products intended for animal feeding, — environmental samples in the area of food and feed production, handling, and — samples from the primary production stage. NOTE Annex B specifies a rapid method for the estimated enumeration of psychrotrophic microorganisms in raw and pasteurized milk.
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Méthode horizontale pour le dénombrement des micro-organismes psychrotrophes
Le présent document spécifie une méthode horizontale pour le dénombrement des micro-organismes psychrotrophes capables de se développer et de former des colonies sur un milieu de culture gélosé solide après incubation en aérobiose à 6,5 °C. Le présent document est applicable aux: — produits destinés à la consommation humaine, — produits destinés à l'alimentation animale, — échantillons environnementaux dans le domaine de la production et de la manutention de denrées alimentaires, et — échantillons au stade de production primaire. NOTE L'Annexe B spécifie une méthode rapide pour l'estimation du nombre de micro-organismes psychrotrophes dans le lait cru et pasteurisé.
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 17410
Second edition
2019-07
Microbiology of the food chain —
Horizontal method for the
enumeration of psychrotrophic
microorganisms
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Méthode horizontale pour
le dénombrement des micro-organismes psychrotrophes
Reference number
ISO 17410:2019(E)
©
ISO 2019
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ISO 17410:2019(E)
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Published in Switzerland
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ISO 17410:2019(E)
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Culture media and reagents . 2
6 Equipment and consumables . 2
7 Sampling . 3
8 Preparation of test sample . 3
9 Procedure. 3
9.1 Test portion, initial suspension and dilutions . 3
9.2 Inoculation and incubation . 4
9.3 Counting of colonies . 4
10 Expression of results . 5
11 Test report . 5
12 Quality assurance . 5
Annex A (normative) Culture media and reagents . 6
Annex B (informative) Rapid method for the estimated enumeration of psychrotrophic
microorganisms in raw or pasteurized milk . 8
Bibliography .10
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ISO 17410:2019(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see www .iso
.org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9,
Microbiology.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 17410:2001), which has been technically
[2] [4]
revised. It also replaces ISO 6730:2005 | IDF 101:2005 and ISO 8552:2004 | IDF 132:2004 . The main
changes compared with the previous edition are as follows:
— the surface-plating technique is used, as opposed to the pour-plate technique used in
ISO 6730:2005 | IDF 101:2005 and ISO 8552:2004 | IDF 132:2004, as psychrotrophic microorganisms
are sensitive to heat;
— one horizontal method is used for the enumeration of psychrotrophic microorganisms in a) products
intended for human consumption, b) products intended for animal feeding, c) environmental samples
in the area of food and feed production, handling, and d) samples from the primary production stage;
— the rapid method has been included as an annex for the estimation of psychrotrophic plate count in
raw and pasteurized milk (originating from ISO 8552:2004 | IDF 132:2004);
— performance testing of the culture medium, plate count agar (PCA), has been introduced;
— the expression of results has been changed to be in accordance with ISO 7218.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.
iv © ISO 2019 – All rights reserved
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ISO 17410:2019(E)
Introduction
Psychrotrophic microorganisms are able to grow at low temperatures. These microorganisms may
cause decay of refrigerated foods (except gas-packaged foods) due to odour and taste deviations. Some
psychrotrophic microorganisms present in raw milk are also capable of producing heat stable enzymes.
When heated (pasteurization or sterilization) these enzymes are insufficiently inactivated, causing
quality defects in the heated product (fat or protein degradation).
For the revision of this document, no performance characteristics were included due to the lack of
data and the fact that an interlaboratory study was not organized for the described method, since
psychrotrophic microorganisms are a group of microorganisms that are mainly used for process
monitoring and considered to be non-pathogenic.
The main technical changes listed in the Foreword, introduced in this document compared to
[6]
ISO 17410:2001, are considered as minor (see ISO 17468 ).
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 17410:2019(E)
Microbiology of the food chain — Horizontal method for
the enumeration of psychrotrophic microorganisms
1 Scope
This document specifies a horizontal method for the enumeration of psychrotrophic microorganisms
that are able to grow and form colonies on a solid agar culture medium after aerobic incubation at 6,5 °C.
This document is applicable to
— products intended for human consumption,
— products intended for animal feeding,
— environmental samples in the area of food and feed production, handling, and
— samples from the primary production stage.
NOTE Annex B specifies a rapid method for the estimated enumeration of psychrotrophic microorganisms
in raw and pasteurized milk.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies.
For undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments)
applies.
ISO 835, Laboratory glassware — Graduated pipettes
ISO 6887 (all parts), Microbiology of the food chain — Preparation of test samples, initial suspension and
decimal dilutions for microbiological examination
ISO 7218, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements and guidance for
microbiological examinations
ISO 8655-2, Piston-operated volumetric apparatus — Part 2: Piston pipettes
ISO 11133, Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production, storage and
performance testing of culture media
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https: //www .iso .org/obp
— IEC Electropedia: available at http: //www .electropedia .org/
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ISO 17410:2019(E)
3.1
psychrotrophic microorganism
entity of microscopic size, encompassing bacteria, yeasts and moulds
Note 1 to entry: Psychrotrophic microorganisms are bacteria, yeasts and moulds that are able to produce colonies
under the conditions specified in this document.
4 Principle
A specified quantity of a test sample (liquid products), or a specified quantity of an initial suspension
in the case of other products (non-liquid products), is surface-plated on a solid agar culture medium
contained in Petri dishes.
Other plates are prepared under the same conditions using decimal dilutions of the test sample or of
the initial suspension.
The plates are incubated under aerobic conditions at 6,5 °C for 10 days.
Annex B specifies a method for the rapid estimation of psychrotrophic plate count in raw and pasteurized
milk by incubating plates at 21 °C for 25 h. However, it should be noted that not all microorganisms able
to produce colonies at 6,5 °C will produce colonies if incubated at 21 °C.
The number of psychrotrophic microorganisms per gram of sample or the number of psychrotrophic
microorganisms per millilitre of sample is calculated from the number of colonies obtained on the
plates containing fewer than 150 colonies.
5 Culture media and reagents
Follow current laboratory practices in accordance with ISO 7218. The composition of culture media
and reagents and their preparation are specified in Annex A. For performance testing of culture media,
follow the procedures in accordance with ISO 11133 and Annex A.
6 Equipment and consumables
Disposable equipment is an acceptable alternative to reusable glassware if it has suitable specifications.
Usual microbiological laboratory equipment (see ISO 7218) and, in particular, the following:
6.1 Colony-counting device (optional), consisting, for example, of an illuminated base with a dark
background, fitted with a magnifying screen to aid colony detection, and (optionally) a mechanical or
electronic digital counter.
6.2 Sterile spreader or spatula, made of glass, plastic or steel, for spreading inoculated material on
the surface of the culture medium.
NOTE A spreader made of glass can be made from a glass rod of about 3,5 mm in diameter, shaped like a
hockey stick about 20 cm long, bent at right angles about 3 cm from one end and flattened at the ends by heating.
6.3 Incubator, capable of operating at a temperature of 6,5 °C ± 1 °C.
6.4 Oven for dry sterilization or autoclave for wet sterilization, used in accordance with ISO 7218.
6.5 Petri dishes, made of glass or plastic, of approximately 90 mm or 140 mm diameter.
6.6 pH meter, accuracy to within ±0,1 pH unit at 25 °C.
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ISO 17410:2019(E)
6.7 Refrigerator, capable of operating at 5 °C ± 3 °C.
6.8 Total delivery graduated pipettes, sterile, of nominal capacities 0,1 ml and 1 ml, ISO 835 class A,
or automated pipettes, ISO 8655-2 with use of sterile tips.
6.9 Tubes, bottles or flasks, of appropriate capacity, for preparation, sterilization and, if necessary,
storage of culture media.
6.10 Water bath, or similar apparatus, capable of operating at a temperature of 47 °C to 50 °C and of
boiling water.
7 Sampling
Sampling is not part of the method specified in this document. Follow the specific International
Standard dealing with the product concerned. If there is no specific International Sta
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 17410
Deuxième édition
2019-07
Microbiologie de la chaîne
alimentaire — Méthode horizontale
pour le dénombrement des micro-
organismes psychrotrophes
Microbiology of the food chain — Horizontal method for the
enumeration of psychrotrophic microorganisms
Numéro de référence
ISO 17410:2019(F)
©
ISO 2019
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ISO 17410:2019(F)
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
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être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Publié en Suisse
ii © ISO 2019 – Tous droits réservés
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ISO 17410:2019(F)
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Milieux de culture et réactifs . 2
6 Matériel et consommables . 2
7 Échantillonnage . 3
8 Préparation de l’échantillon pour essai . 3
9 Mode opératoire. 3
9.1 Prise d'essai, suspension mère et dilutions . 3
9.2 Ensemencement et incubation . 4
9.3 Comptage des colonies . 4
10 Expression des résultats. 5
11 Rapport d’essai . 5
12 Assurance qualité . 5
Annexe A (normative) Milieux de culture et réactifs . 6
Annexe B (informative) Méthode rapide pour l’estimation du nombre de micro-organismes
psychrotrophes dans le lait cru ou pasteurisé . 8
Bibliographie .10
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ISO 17410:2019(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir www .iso .org/avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 9, Microbiologie.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 17410:2001), qui a fait
[2]
l'objet d'une révision technique. Elle remplace également l’ISO 6730:2005 | FIL 101:2005 et
[4]
l’ISO 8552:2004 | FIL 132:2004. Les principales modifications par rapport à l’édition précédente sont
les suivantes:
— ut ilisat ion de la technique d’ensemencement en sur face, par opposit ion à la technique d’ensemencement
en profondeur utilisée dans l’ISO 6730:2005 | FIL 101:2005 et l’ISO 8552:2004 | FIL 132:2004, les
micro-organismes psychrotrophes étant sensibles à la chaleur;
— utilisation d’une méthode horizontale pour le dénombrement des micro-organismes psychrotrophes
dans a) les produits destinés à la consommation humaine, b) les produits destinés à l’alimentation
animale, c) les échantillons environnementaux dans le domaine de la production et de la manutention
de denrées alimentaires et d) les échantillons au stade de production primaire;
— inclusion, en annexe, de la méthode rapide pour l’estimation du nombre de micro-organismes
psychrotrophes dans le lait cru et pasteurisé (extraite de l’ISO 8552:2004 | FIL 132:2004);
— introduction de l’essai de performance du milieu de culture (gélose PCA);
— changement du paragraphe applicable à l’expression des résultats pour être conforme à l’ISO 7218.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
iv © ISO 2019 – Tous droits réservés
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ISO 17410:2019(F)
Introduction
Les micro-organismes psychrotrophes sont capables de se développer à basses températures. Ces
micro-organismes peuvent être responsables de la putréfaction des aliments réfrigérés (à l’exception
des aliments emballés sous atmosphère modifiée) qui se manifeste par des modifications d’odeur et de
goût. Certains micro-organismes psychrotrophes présents dans le lait cru sont également capables de
produire des enzymes stables à la chaleur. Lorsqu’elles sont chauffées (pasteurisation ou stérilisation),
ces enzymes ne sont pas complètement inactivées, entraînant des défauts de qualité dans le produit
traité thermiquement (dégradation des matières grasses ou des protéines).
Pour la révision du présent document, aucune caractéristique de performance n’a été incluse en raison
du manque de données et du fait qu’aucune étude interlaboratoires n’a été organisée pour la méthode
décrite, car les micro-organismes psychrotrophes sont un groupe de micro-organismes principalement
utilisés pour le contrôle des processus et considérés comme non pathogènes.
Les principales modifications techniques énumérées dans l’avant-propos, introduites dans le présent
[6]
document par rapport à l’ISO 17410:2001, sont considérées comme mineures (voir l’ISO 17468 ).
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NORME INTERNATIONALE ISO 17410:2019(F)
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Méthode
horizontale pour le dénombrement des micro-organismes
psychrotrophes
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie une méthode horizontale pour le dénombrement des micro-organismes
psychrotrophes capables de se développer et de former des colonies sur un milieu de culture gélosé
solide après incubation en aérobiose à 6,5 °C.
Le présent document est applicable aux:
— produits destinés à la consommation humaine,
— produits destinés à l’alimentation animale,
— échantillons environnementaux dans le domaine de la production et de la manutention de denrées
alimentaires, et
— échantillons au stade de production primaire.
NOTE L’Annexe B spécifie une méthode rapide pour l’estimation du nombre de micro-organismes
psychrotrophes dans le lait cru et pasteurisé.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 835, Verrerie de laboratoire — Pipettes graduées
ISO 6887 (toutes les parties), Microbiologie de la chaîne alimentaire — Préparation des échantillons, de la
suspension mère et des dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique
ISO 7218, Microbiologie des aliments — Exigences générales et recommandations
ISO 8655-2, Appareils volumétriques à piston — Partie 2: Pipettes à piston
ISO 11133, Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et de l'eau — Préparation, production,
stockage et essais de performance des milieux de culture
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https: //www .iso .org/obp
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http: //www .electropedia .org/
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ISO 17410:2019(F)
3.1
micro-organisme psychrotrophe
organisme de taille microscopique, incluant les bactéries, les levures et les moisissures
Note 1 à l'article: à l’Article Les micro-organismes psychrotrophes sont des bactéries, levures et moisissures
capables de produire des colonies dans les conditions spécifiées dans le présent document.
4 Principe
Une quantité spécifiée d’échantillon pour essai (produits liquides) ou une quantité spécifiée d’une
suspension mère, dans le cas des autres produits (produits non liquides), est étalée en surface sur un
milieu de culture gélosé solide contenu dans des boîtes de Petri.
D’autres boîtes sont préparées dans les mêmes conditions avec les dilutions décimales obtenues à partir
de l'échantillon pour essai ou de la suspension mère.
Les boîtes sont incubées en aérobiose à 6,5 °C pendant 10 jours.
L’Annexe B spécifie une méthode rapide pour l’estimation du nombre de micro-organismes
psychrotrophes dans le lait cru et le lait pasteurisé en incubant les boîtes à 21 °C pendant 25 h.
Cependant, il convient de noter que tous les micro-organismes capables de produire des colonies à
6,5 °C peuvent ne pas donner de colonies s’ils sont incubés à 21 °C.
Le nombre de micro-organismes psychrotrophes par gramme d’échantillon ou le nombre de micro-
organismes psychrotrophes par millilitre d’échantillon est calculé d’après le nombre de colonies
obtenues dans les boîtes contenant moins de 150 colonies.
5 Milieux de culture et réactifs
Suivre les pratiques courantes de laboratoire conformément à l’ISO 7218. La composition et la
préparation des milieux de culture et des réactifs sont spécifiées à l’Annexe A. Pour l’essai de
performance des milieux de culture, suivre les modes opératoires conformément à l’ISO 11133 et
l’Annexe A.
6 Matériel et consommables
Un matériel jetable constitue une alternative acceptable à la verrerie réutilisable si ses spécifications
sont appropriées.
Un matériel courant de laboratoire de microbiologie est nécessaire (voir l’ISO 7218), et en particulier, ce
qui suit:
6.1 Compteur de colonies (en option), constitué, par exemple, d’une base éclairée sur fond sombre,
équipé d’une loupe grossissante pour faciliter la détection des colonies et (en option), d’un compteur
numérique mécanique ou électronique.
6.2 Étaleurs ou râteaux stériles, en verre, plastique ou acier, pour étaler l’inoculum en surface du
milieu de culture.
NOTE Un étaleur en verre peut être constitué d’une pipette Pasteur d’environ 3,5 mm de diamètre, en forme
de crosse de hockey d’environ 20 cm de long, pliée à angle droit environ 3 cm depuis une extrémité et aplatie aux
extrémités par chauffage.
6.3 Étuve, capable de fonctionner à une température de 6,5 °C ± 1 °C.
6.4 Four pour une stérilisation en chaleur sèche ou autoclave pour une stérilisation en chaleur
humide, utilisé conformément à l’ISO 7218.
2 © ISO 2019 – Tous droits réservés
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ISO 17410:2019(F)
6.5 Boîtes de Petri, en verre ou en plastique, d’un diamètre d’environ 90 mm ou 140 mm.
6.6 pH-mètre, ayant une précision de lecture de ± 0,1 unité de pH à 25 °C.
6.7 Étuve réfrigérée, capable de fonctionner à une température de 5 °C ± 3 °C.
6.8 Pipettes graduées à écoulement total, stériles, de capacités nominales de 0,1 ml et 1 ml, ISO 835
classe A, ou pipettes automatiques, ISO 8655-2 avec utilisation de pointes stériles.
6.9 Tubes, bouteilles ou flacons, de capacité appropriée, pour la préparation, la stérilisation et, si
nécessaire, la conservation des milieux de culture.
6.10 Bain-marie ou appareil similaire, capable de fonctionner à une température comprise entre
44 °C et 50 °C et capable de faire bouillir l’eau.
7 Échantillonnage
L’échantillonnage ne fait pas partie de la méthode spécifiée dans le présent document. Voir la Norme
internationale spécifique au produit concerné. S'il n'existe aucune Norme internationale traitant de
l’échantillonnage du produit concerné, il est recommandé aux parties concernées de trouver un accord
à ce sujet.
Des techniques d’échantillonnage recommandées sont donnée
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.