ISO 6736:1982

Dried milk — Determination of nitrate and nitrite contents — Method by cadmium reduction and photometry

Describes a method suitable for whole, partly skimmed and skimmed milk powder. The principle of determination consists in dissolving the dried milk in water, precipitating the fat and proteins, filtering and reducing the nitrate to nitrite in a portion of the filtrate by means of copperized cadmium. The sampling shall be made as specified in ISO 707. The apparatus for nitrate reduction is shown in a figure.

Lait sec — Détermination des teneurs en nitrates et en nitrites — Méthode par réduction au cadmium et photométrie

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 30-Nov-1982
• Withdrawal Date: 30-Nov-1982
• ICS: 67.100.10 - Milk and processed milk products
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Completion Date: 01-Nov-2001

Relations

• Revised: ISO 14673-2:2001 - Milk and milk products — Determination of nitrate and nitrite contents — Part 2: Method using segmented flow analysis (Routine method)
• Effective Date: 15-Apr-2008
• Revised: ISO 14673-1:2001 - Milk and milk products — Determination of nitrate and nitrite contents — Part 1: Method using cadmium reduction and spectrometry
• Effective Date: 15-Apr-2008
• Revised: ISO 14673-3:2001 - Milk and milk products — Determination of nitrate and nitrite contents — Part 3: Method using cadmium reduction and flow injection analysis with in-line dialysis (Routine method)
• Effective Date: 15-Apr-2008

Standards Content (Sample)

International Standard
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATIONWEIKJYHAPOLZHAR OPi-AHM3ALWlR fl0 CTAH~APTt43ALWWORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Dried milk - Determination of nitrate and nitrite contents -
Method by Cadmium reduction and photometry
- Methode par reduction au Cadmium et photom&rie
Lait sec - Determination des teneurs en nitra tes et en nitrites
First edition - 1982-12-01
Ref. No. ISO 6736-1982 (E)
UDC 637.143 : 543.242.8 : 546.173/.175
dairy products, milk, dried milk, Chemical analysis, determination of content, nitrates, nitrites,
Descriptors : agricultural products,
spectrophotometric analysis.
Price based on 6 pages

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Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national Standards institutes (ISO member bedies). The work of developing lnter-
national Standards is carried out through ISO technical committees. Every member
body interested in a subject for which a technical committee has been set up has the
right to be represented on that committee. International organizations, governmental
and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the ISO Council.
International Standard ISO 6736 was developed by Technical Committee ISO/TC 34,
Agricukural food products, and was circulated to the member bodies in June 1981.
lt has been approved by the member bodies of the following countries :
Australia
India Romania
Austria
Iraq South Africa, Rep. of
Belgium
Israel Spain
Canada Korea, Rep. of Sri Lanka
Czechoslova kia
Netherlands Tanzania
Egypt, Arab Rep. of New Zealand Thailand
Ethiopia
Peru Turkey
France Philippines United Kingdom
Germany, F.R. Poland USSR
Hungary Portugal
Y ugoslavia
No member body expressed disapproval of the document.
0 International Organization for Standardization, 1982
Printed in Switzerland

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ISO 67364982 (E)
INTERNATIONAL STANDARD
contents -
Dried milk - Determination of nitrate and nitrite
Method by Cadmium reduction and photometry
NOTE - In Order to avoid possible inclusion of small gas bubbles in the
1 Scope and field of application
copperized Cadmium column (6. IO), the distilled or deionized water
used for the preparation of the column (8.11, for checking the reducing
This International Standard specifies a method by Cadmium
capacity of the column (8.21, and for regeneration of the column (8.3)
reduction and photometry for the determination of the nitrate
should preferably be freshly boiled and afterwards cooled to room
and nitrite contents of dried milk.
temperature.
The method is suitable for whole, partly skimmed and skimmed
milk powder.
5.1 Cadmium, granules, diameter 0,3 to 0,8 mm.
NOTE - Methods for the determination of the nitrate and nitrite con-
If Cadmium granules are not available commercially, they may
tents of whey cheese and dried whey are specified in ISO 6739 and
be prepared as follows.
ISO 6740 respectively.
Place a suitable number of zinc rods in a beaker and cover
with a 40 g/l Solution of Cadmium sulphate octahydrate
2 Reference
KdS04m 8H,O). From time to time, scrape the Cadmium sponge
ISO 707, Milk and milkproducts - Methods of sampling. 1) from the rods over a period of 24 h. Remove the zinc rods and
decant the liquid until only sufficient remains to cover the cad-
mium. Wash the sponge two or three times with distilled water.
3 Definition
Transfer the Cadmium to a laboratory blender together with
400 ml of 0,l mol/1 hydrochloric acid Solution and blend for a
nitrate and nitrite contents oi dried milk : The contents of
few seconds to obtain granules of the required size. Return the
substances determined by the procedure specified in this Inter-
contents of the blender to the beaker and leave to stand for
national Standard and expressed respectively as milligrams of
several hours, occasionally stirring to remove bubbles. Decant
nitrate ion (NO$ and of nitrite ion (NO$ per kilogram (Parts per
most of the liquid and immediately copperize as described in
million).
8.1.1 to 8.1.5.
4 Principle
5.2 CopperUl) sulphate solution.
Dissolution of the dried milk in water, precipitation of the fat and
Dissolve 20 g of copper(ll) sulphate pentahydrate
Proteins, and filtration.
(CuS04m 5H20) in water and dilute to 1000 ml.
Reduction of the nitrate in a Portion of the filtrate to nitrite, by
means of copperized Cadmium. 5.3 Buffer solution, pH 9,6 to 9,7.
Development of a red colour, in Pottions of both unreduced
Dilute 50 ml of concentrated hydrochloric acid [eZO 1,19 g/ml,
filtrate and of the reduced Solution, by addition of sulpha-
about 38% (mlm) solutionl with 600 ml of water. After mixing,
nilamide and IV-1-naphthyl-ethylenediamine dihydrochloride,
add 135 ml of ammonium hydroxide Solution [eZO 0,91 g/ml,
and photometric measurement at a wavelength of 538 nm.
about 25% (mlm) solutionl. Dilute to 1000 ml with water and
mix.
Calculation of the nitrite content of the Sample and of the total
nitrite content after reduction of nitrate, by comparing the
NOTE - If ammonium hydroxide Solution of this concentration is not
measured absorbances with those of a series of Standard
available, an equivalent amount of a more concentrated Solution may be
sodium nitrite solutions; calculation of the nitrate content from
used, for example 100 ml of 35 % (mlm) Solution (~20 0,88 g/ml).
the differente between these two contents.
Adjust the pH to 9,6 to 9,7 if necessary.
5 Reagents
5.4 Hydrochlorit acid, about 2 mol/1 Solution.
All reagents shall be of recognized analytical quality. The water
used shall be distilled or deionized water, free from nitrate and Dilute 160 ml of concentrated hydrochloric acid (eZO 1,19 g/ml)
nitrite.
to 1000 ml with water.
1) At present at the Stage of draft. (Revision of ISO/R 707-1968.)

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ISO 67364982 (EI
On the day of use, dilute 5 ml of this solution with 20 ml of the
5.5 Hydrochlorit acid, about 0,l mol/1 solution.
buffer Solution (5.3) and dilute further to 1000 ml with water in
Dilute 50 ml of the hydrochloric acid Solution (5.4) to 1000 ml a one-mark volumetric flask. Mix.
with water.
1 ml of this Standard Solution contains 450 Lug of NO;.
5.6 Solutions for precipitation of Proteins and fat.
6 Apparatus
5.6.1 Zinc sulphate Solution.
Dissolve 53,5 g of zinc sulphate heptahydrate (ZnSOa.7H20) in All glassware shall be thoroughly cleaned and rinsed with dis-
water and dilute to TOO ml.
tilled water to ensure that it is free from nitrate and nitrite.
Usual laboratory apparatus, and in particular
5.6.2 Potassium hexacyanoferrate(ll) solution.
Dissolve 17,2 g of potassium hexacyanoferrate(ll) trihydrate
6.1 Analytical balance.
[K4Fe(CNIGe3H201 in water and dilute to 100 ml.
62 ‘ Sample Container, provided with an airtight lid.
5.7 EDTA Solution.
Dissolve 33,5 g of disodium ethylenediaminetetraacetate
6.3 Conical flasks, of capacity 250 ml. .
dihydrate (Na2C10H14N208~2H20) in water and dilute to
1000 ml.
6.4 Conical flask, of capacity 500 ml.
5.8 Solutions for colour development.
6.5 Volumetric flasks, of capacity 100 - 500 and 1000 ml,
complying with the requirements of ISO 1042, class B.
5.8.1 Solution 1.
Dissolve, by heating on a water bath, 0,5 g of sulphanilamide
6.6 Pipettes, to deliver 2 - 4 - 5 - 6 - 8 - 10 - 12 -
(NH&H,S02NH2) in a mixture of 75 ml of water and 5 ml of
with the requirements of
20 - 25 and 50 ml, complying
concentrated hydrochloric acid (ezO 1,19 g/ml). Cool to room
ISO 648, class A, or ISO 835.
temperature and dilute to 100 ml with water. Filter if necessary.
NOTE - Where appropriate, burettes may be used instead of pipettes.
5.8.2 Solution II.
6.7 Graduated cylinders, of capacity 5 - 10 - 25 -
Dilute 450 ml of concentrated hydrochloric acid & 1,19 g/ml)
100 - 250 - 500 and 1000 ml.
to 1000 ml with water.
68 . Glass funnels, of diameter about 7 cm, with short Stern.
5.8.3 Solution Ill.
Dissolve 0,l g of /V-l -naphthyl-ethylenediamine dihydrochloride
6.9 Filter Paper, medium grade, of diameter about 15 cm,
(C10H7NHCH2CH2NH2~2HCI) in water. Dilute to 100 ml with
free from nitrate and nitrite.
water. Filter if necessary.
The Solution may be stored for up to 1 week in a weil-stoppered
6.10 Reduction column (for example as shown in the
brown bottle in a refrigerator.
figure).
5.9 Sodium nitrite, Standard Solution corresponding to
6.11 Photoelectric colorimeter or spectrophotometer,
0,001 g of nitrite per litre.
suitable for making readings at a wavelength of 538 nm, with
cells of Optical path length 1 to 2 cm.
On the day of use, dissolve in water 0,150 g of sodium nitrite
(NaNO$, dried to constant mass at 110 to 120 OC, dilute to
1000 ml with water in a one-mark volumetric flask and mix.
7 Sampling
Dilute 10 ml of this Solution with 20 ml of the buffer Solution
See ISO 707.
(5.3) and dilute further to 1000 ml with water in a one-mark
volumetric flask. Mix.
1 ml of this Standard Solution contains 1,00 pg of NO:.
8 Procedure
5.10 Potassium nitrate, Standard Solution corresponding to
8.1 Preparation of the copperized Cadmium
0,004 5 g of nitrate ion per litre.
column
Dissolve in water 1,468 g of potassium nitrate (KNO,), dried to
8.1.1 Transfer the Cadmium granules (5.1) (approximately 40
constant mass at 1 IO to 120 OC, dilute to 1000 ml with water in
a one-mark volumetric flask and mix. to 60 g for each column) into a conical flask (6.3).
2

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ISO 67364982 (El
8.1.2 Add sufficient of the hydrochloric acid Solution (5.4) to 8.2.5
...

~
Norme internationale
-
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION.ME)I(P(YHAPO~HAR OPTAHM3ALWlR l-i0 CTAH~APTH3Al.Wl~~RGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Lait sec - Détermination des teneurs en nitrates et en
nitrites - Méthode par réduction au cadmium et
photométrie
Dried milk - Determination of nitrate and nitrite contents - Method b y cadmium reduction and photometry
Première édition - 1982X2-01
CDU 637.143 : 543.242.8 : 546.173/.175 Réf. no : ISO 6736-1982 (F)
Descripteurs : produit agricole, produit laitier, lait, lait en poudre, analyse chimique, dosage, nitrate, nitrite, méthode spectrophotométrique.
Prix basé sur 6 pages

---------------------- Page: 1 ----------------------
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
correspondant. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I’ISO, participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation com’me Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO.
La Norme internationale ISO 6736 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires, et a été soumise aux comités membres en juin 1981.
Les comités membres des pays suivants l’ont approuvée :
Afrique du Sud, Rép. d’
France Portugal
Allemagne, R. F.
Hongrie Roumanie
Australie Inde Royaume-Uni
Autriche
Iraq Sri Lanka
Belgique Israël Tanzanie
Canada Nouvelle-Zélande Tchécoslovaquie
Corée, Rép. de Pays-Bas Thaïlande
Égypte, Rép. arbe d’ Pérou Turquie
Espagne Philippines URSS
Éthiopie Pologne Yougoslavie
Aucun comité membre ne l’a désapprouvée.
0 Organisation internationale de normalisation, 1982 0
Imprimé en Suisse

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ISO 6736-1982 (F)
NORME INTERNATIONALE
Lait sec - Détermination des teneurs en nitrates et en
nitrites - Méthode par réduction au cadmium et
photométrie
5 Réactifs
1 Objet et domaine d’application
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue.
La présente Norme internationale spécifie une méthode par
réduction au cadmium et photométrie, pour la détermination L’eau utilisée doit être de l’eau distillée ou désionisée, exempte
de nitrates et de nitrites.
des teneurs en nitrates et en nitrites du lait sec.
NOTE - Dans le but d’éviter l’inclusion de petites bulles de gaz dans la
La méthode est applicable au lait sec entier, écrémé ou partiel-
colonne de cadmium cuivré (6.1 OI, l’eau distillée ou désionisée, utilisée
lement écrémé.
pour la préparation de la colonne (8.11, pour la vérification du pouvoir
réducteur de la colonne (8.2) et pour la régénération de la colonne
NOTE - Des méthodes de détermination des teneurs en nitrates et en
(8.3), doit être de préférence récemment bouillie puis refroidie à la tem-
nitrites du fromage de sérum et du lactosérum sont spécifiées respecii-
pérature ambiante.
vement dans I’ISO 6739 et I’ISO 6740.
5.1 Cadmium, sous forme de granulés, diamètre des parti-
cules 0,3 à 0,8 mm.
2 Référence
S’il n’est pas possible de se procurer dans le commerce des gra-
ISO 707, Lait et produits laitiers - Méthodes d’échantillon-
nulés de cadmium, ceux-ci peuvent être préparés de la manière
nage. 1)
suivante.
Placer, dans un bécher, un nombre convenable de baguettes de
zinc et les recouvrir avec une solution de sulfate de cadmium
3 Définition
octohydraté KdS04m 8H,O) à 40 g/l. Gratter de temps en
temps le cadmium spongieux déposé sur les baguettes et cela
teneurs en nitrates et nitrites du lait sec : Teneurs en subs-
durant une période de 24 h. Retirer les baguettes de zinc et
tances déterminées selon la méthode spécifiée dans la présente
décanter le liquide jusqu’à ce qu’il en reste seulement une quan-
Norme internationale et exprimées respectivement en milli-
tité suffisante pour recouvrir le cadmium. Laver deux ou trois
grammes d’ion nitrate (NO$ et d’ion nitrite (NO$ par kilo-
fois le cadmium spongieux avec de l’eau. Transférer le cad-
gramme (parties par million).
mium dans un broyeur de laboratoire avec 400 ml de solution
d’acide chlorhydrique à 0,l mol/1 et broyer durant quelques
secondes afin d’obtenir des granulés de la dimension requise.
4 Principe
Replacer le contenu du broyeur dans le bécher et l’y maintenir
durant plusieurs heures en agitant de temps en temps pour
Dissolution du lait sec dans de l’eau chaude, précipitation de la
chasser les bulles. Décanter la majeure partie du liquide et pro-
matière grasse et des protéines, et filtration.
céder immédiatement au cuivrage comme décrit de 8.1 .l
à 8.1.5.
Sur une portion du filtrat, réduction, à l’état de nitrites, des
nitrates extraits, au moyen de cadmium cuivré.
5.2 Sulfate de cuivre(ll1, solution.
Développement d’une coloration rouge à partir de portions de
Dissoudre 20 g de sulfate de cuivre(U) pentahydraté
filtrat non réduit et à partir de portions de filtrat réduit, par addi-
EuSO n 5HzO) dans de l’eau et compléter à 1000 ml.
tion de sulfanilamide et de dichlorhydrate de Wnaphtyl-1)
éthylène diamine, puis mesurage photométrique à une lon-
gueur d’onde de 538 nm.
5.3 Solution tampon, de pH 9,6 à 9,7.
Calcul de la teneur en nitrites de l’échantillon et de la teneur Diluer 50 ml d’acide chlorhydrique concentré [ezO 1,19 g/ml;
totale en nitrites aprés réduction des nitrates, par comparaison
solution à environ 38% (mlm)] avec 600 ml d’eau. Après
des absorbantes mesurées avec celles d’une série de solutions
mélange, ajouter 135 ml de solution d’hydroxyde d’ammonium
étalons de nitrite de sodium; calcul de la teneur en nitrates à
concentrée L@a 0,91 g/ml; solution à environ 25 % (mlm)l.
partir de la différence entre ces deux teneurs.
Compléter à 1000 ml avec de l’eau et homogénéiser.
1) Actuellement au stade de projet. (Révision de I’ISO/R 707-1968.)
1

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ISO 6736-1982 (FI
5.9 Nitrite de sodium, solution étalon correspondant à
NOTE - Si la solution d’hydroxyde d’ammonium n’est pas disponible
0,001 g d’ion nitrite par litre.
à cette concentration, une quantité équivalente d’une solution plus
concentrée peut être utilisée, par exemple 100 ml de solution à 35 %
bnlm) (~20 0,88 g/ml). Le jour de l’utilisation, dissoudre 0,150 g de nitrite de sodium
(NaN02), préalablement séché à 110 à 120 “CI jusqu’à masse
Ajuster le pH de 9,6 à 9,7 si nécessaire.
constante, dans de l’eau; compléter à 1000 ml avec de l’eau
dans une fiole jaugée et homogénéiser.
5.4 Acide chlorhydrique, solution à environ 2 mol/l.
Diluer 10 ml de cette solution avec 20 ml de la solution tampon
(5.3), compléter ensuite à 1000 ml avec de l’eau dans une fiole
Diluer 160 ml d’acide chlorhydrique concentré (e2o 1,19 g/ml) à
jaugée et homogénéiser.
1000 ml avec de l’eau.
1 ml de cette solution étalon contient 1,00 vg ‘de NOi.
5.5 Acide chlorhydrique, solution à environ 0,l mol/l.
5.10 Nitrate de potassium, solution étalon correspondant à
Diluer 50 ml de la solution d’acide chlorhydrique (5.4) à 1000 ml
0,004 5 g d’ion nitrate par litre.
avec de l’eau.
Dissoudre 1,468 g de nitrate de potassium (KNO,), préalable-
ment séché à 110 à 120 OC jusqu’à masse constante, dans de
5.6 Solutions pour la précipitation des protéines et de la
l’eau; compléter à 1000 ml avec de l’eau dans une fiole jaugee
matière grasse.
et homogénéiser.
56.1 Sulfate de zinc, solution.
Le jour de l’utilisation, diluer 5 ml de cette solution avec 20 ml
’ de la solution tampon (5.31, compléter ensuite à 1000 ml avec
de sulfate de zinc heptahydraté
Dissoudre 53,5 g de l’eau dans une fiole jaugée et homogénéiser.
(ZnSO,m 7H20) dans de l’eau et compléter à 100 ml.
1 ml de cette solution étalon contient 450 pg de NO$
5.6.2 HexacyanoferrateUl) de potassium, solution.
6 Appareillage
Dissoudre 17,2 g d’hexacyanoferrate(II) de potassium trihy-
draté [ K,Fe( CN)G n 3H20] dans de l’eau et compléter à 100 ml.
Toute la verrerie doit être soigneusement lavée et rincée avec
de l’eau distillée pour être certain qu’elle est exempte de nitra-
tes et de nitrites.
5.7 EDTA, solution.
Matériel courant de laboratoire, et notamment
Dissoudre 33,5 g d’éthylène diamine tétraacétate disodique
dihydraté (Na2C10H14N208~2H20) dans de l’eau et compléter à
1000 ml.
6.1 Balance analytique.
5.8 Solutions pour le développement de la coloration.
. Réci pient pour échantil Ion, muni d’un couvercle étan-
62
che à l’air.
58.1 Solution 1.
6.3 Fioles coniques, de 250 ml de capacité.
Dissoudre, en chauffant au bain d’eau, 0’5 g de sulfanilamide
(NH2C6H4S02NH2) dans un mélange constitué par 75 ml d’eau
6.4 Fiole conique, de 500 ml de capacité.
et 5 ml d’acide chlorhydrique concentré (@20 1’19 g/ml). Refroi-
dir à la température ambiante et compléter à 100 ml avec de
6.5 Fioles jaugées à un trait, de 100 - 500 et 1000 ml de
l’eau. Filtrer si nécessaire.
capacités, conformes aux spécifications de I’ISO 1042,
classe B.
5.8.2 Solution II.
6.6 Pipettes, permettant de délivrer 2 - 4 - 5 - 6 - 8 -
Diluer 450 ml d’acide chlor ydriq ue concentré (g20 1’19 g/ml) à
10 - 12 - 20 - 25 et 50 ml, conformes aux spécifications de
1000 ml avec de l’eau.
I’ISO 648, classe A, ou de I’ISO 835.
échéant, des burettes peuvent être utilisées à la
NOTE - Le cas place
5.8.3 Solution Ill.
des pipettes.
Dissoudre 0’1 g de dichlorhydrate de Wnaphtyl-1) éthylène
6.7 Éprouvettes graduées, de 5 - 10 - 25 - 100 -
diamine (CIoH,NHCH2CH2NH2~2HCI) dans de l’eau. Compléter
250 - 500 et 1000 ml de capacités.
à 100 ml avec de l’eau. Filtrer si nécessaire.
réfrigéra- 6.8 Entonnoirs en verre, d’environ 7 cm de diamètre, à tige
La solution peut être conservée jusqu ‘à 1 semaine au
un récipient en verre brun bien bouché. courte.
teur, dans
2

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ISO 67364982 (FI
82 . Contrôle du pouvoir réducteur de la colonne
6.9 Papier filtre, pour filtration moyenne, d’environ 15 cm
de diamètre, exempt de nitrates et de nitrites.
au moins deux fois par jour, au et
Procéder à ce contrôle
à la fin d’u ne série de déterminations.
exemple
Appareil pour la réduction des nitrates (par
6.10
celui qui est représenté par la figure).
8.2.1 Prélever, à la pipette, 20 ml de la solution étalon de
nitrate de potassium (5.10) et les introduire dans le réservoir
6.11 Colorimètre photoélectrique, ou spectrop
...

~
Norme internationale
-
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Lait sec - Détermination des teneurs en nitrates et en
nitrites - Méthode par réduction au cadmium et
photométrie
Dried milk - Determination of nitrate and nitrite contents - Method b y cadmium reduction and photometry
Première édition - 1982X2-01
CDU 637.143 : 543.242.8 : 546.173/.175 Réf. no : ISO 6736-1982 (F)
Descripteurs : produit agricole, produit laitier, lait, lait en poudre, analyse chimique, dosage, nitrate, nitrite, méthode spectrophotométrique.
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Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
correspondant. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I’ISO, participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation com’me Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO.
La Norme internationale ISO 6736 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires, et a été soumise aux comités membres en juin 1981.
Les comités membres des pays suivants l’ont approuvée :
Afrique du Sud, Rép. d’
France Portugal
Allemagne, R. F.
Hongrie Roumanie
Australie Inde Royaume-Uni
Autriche
Iraq Sri Lanka
Belgique Israël Tanzanie
Canada Nouvelle-Zélande Tchécoslovaquie
Corée, Rép. de Pays-Bas Thaïlande
Égypte, Rép. arbe d’ Pérou Turquie
Espagne Philippines URSS
Éthiopie Pologne Yougoslavie
Aucun comité membre ne l’a désapprouvée.
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Imprimé en Suisse

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NORME INTERNATIONALE
Lait sec - Détermination des teneurs en nitrates et en
nitrites - Méthode par réduction au cadmium et
photométrie
5 Réactifs
1 Objet et domaine d’application
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue.
La présente Norme internationale spécifie une méthode par
réduction au cadmium et photométrie, pour la détermination L’eau utilisée doit être de l’eau distillée ou désionisée, exempte
de nitrates et de nitrites.
des teneurs en nitrates et en nitrites du lait sec.
NOTE - Dans le but d’éviter l’inclusion de petites bulles de gaz dans la
La méthode est applicable au lait sec entier, écrémé ou partiel-
colonne de cadmium cuivré (6.1 OI, l’eau distillée ou désionisée, utilisée
lement écrémé.
pour la préparation de la colonne (8.11, pour la vérification du pouvoir
réducteur de la colonne (8.2) et pour la régénération de la colonne
NOTE - Des méthodes de détermination des teneurs en nitrates et en
(8.3), doit être de préférence récemment bouillie puis refroidie à la tem-
nitrites du fromage de sérum et du lactosérum sont spécifiées respecii-
pérature ambiante.
vement dans I’ISO 6739 et I’ISO 6740.
5.1 Cadmium, sous forme de granulés, diamètre des parti-
cules 0,3 à 0,8 mm.
2 Référence
S’il n’est pas possible de se procurer dans le commerce des gra-
ISO 707, Lait et produits laitiers - Méthodes d’échantillon-
nulés de cadmium, ceux-ci peuvent être préparés de la manière
nage. 1)
suivante.
Placer, dans un bécher, un nombre convenable de baguettes de
zinc et les recouvrir avec une solution de sulfate de cadmium
3 Définition
octohydraté KdS04m 8H,O) à 40 g/l. Gratter de temps en
temps le cadmium spongieux déposé sur les baguettes et cela
teneurs en nitrates et nitrites du lait sec : Teneurs en subs-
durant une période de 24 h. Retirer les baguettes de zinc et
tances déterminées selon la méthode spécifiée dans la présente
décanter le liquide jusqu’à ce qu’il en reste seulement une quan-
Norme internationale et exprimées respectivement en milli-
tité suffisante pour recouvrir le cadmium. Laver deux ou trois
grammes d’ion nitrate (NO$ et d’ion nitrite (NO$ par kilo-
fois le cadmium spongieux avec de l’eau. Transférer le cad-
gramme (parties par million).
mium dans un broyeur de laboratoire avec 400 ml de solution
d’acide chlorhydrique à 0,l mol/1 et broyer durant quelques
secondes afin d’obtenir des granulés de la dimension requise.
4 Principe
Replacer le contenu du broyeur dans le bécher et l’y maintenir
durant plusieurs heures en agitant de temps en temps pour
Dissolution du lait sec dans de l’eau chaude, précipitation de la
chasser les bulles. Décanter la majeure partie du liquide et pro-
matière grasse et des protéines, et filtration.
céder immédiatement au cuivrage comme décrit de 8.1 .l
à 8.1.5.
Sur une portion du filtrat, réduction, à l’état de nitrites, des
nitrates extraits, au moyen de cadmium cuivré.
5.2 Sulfate de cuivre(ll1, solution.
Développement d’une coloration rouge à partir de portions de
Dissoudre 20 g de sulfate de cuivre(U) pentahydraté
filtrat non réduit et à partir de portions de filtrat réduit, par addi-
EuSO n 5HzO) dans de l’eau et compléter à 1000 ml.
tion de sulfanilamide et de dichlorhydrate de Wnaphtyl-1)
éthylène diamine, puis mesurage photométrique à une lon-
gueur d’onde de 538 nm.
5.3 Solution tampon, de pH 9,6 à 9,7.
Calcul de la teneur en nitrites de l’échantillon et de la teneur Diluer 50 ml d’acide chlorhydrique concentré [ezO 1,19 g/ml;
totale en nitrites aprés réduction des nitrates, par comparaison
solution à environ 38% (mlm)] avec 600 ml d’eau. Après
des absorbantes mesurées avec celles d’une série de solutions
mélange, ajouter 135 ml de solution d’hydroxyde d’ammonium
étalons de nitrite de sodium; calcul de la teneur en nitrates à
concentrée L@a 0,91 g/ml; solution à environ 25 % (mlm)l.
partir de la différence entre ces deux teneurs.
Compléter à 1000 ml avec de l’eau et homogénéiser.
1) Actuellement au stade de projet. (Révision de I’ISO/R 707-1968.)
1

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ISO 6736-1982 (FI
5.9 Nitrite de sodium, solution étalon correspondant à
NOTE - Si la solution d’hydroxyde d’ammonium n’est pas disponible
0,001 g d’ion nitrite par litre.
à cette concentration, une quantité équivalente d’une solution plus
concentrée peut être utilisée, par exemple 100 ml de solution à 35 %
bnlm) (~20 0,88 g/ml). Le jour de l’utilisation, dissoudre 0,150 g de nitrite de sodium
(NaN02), préalablement séché à 110 à 120 “CI jusqu’à masse
Ajuster le pH de 9,6 à 9,7 si nécessaire.
constante, dans de l’eau; compléter à 1000 ml avec de l’eau
dans une fiole jaugée et homogénéiser.
5.4 Acide chlorhydrique, solution à environ 2 mol/l.
Diluer 10 ml de cette solution avec 20 ml de la solution tampon
(5.3), compléter ensuite à 1000 ml avec de l’eau dans une fiole
Diluer 160 ml d’acide chlorhydrique concentré (e2o 1,19 g/ml) à
jaugée et homogénéiser.
1000 ml avec de l’eau.
1 ml de cette solution étalon contient 1,00 vg ‘de NOi.
5.5 Acide chlorhydrique, solution à environ 0,l mol/l.
5.10 Nitrate de potassium, solution étalon correspondant à
Diluer 50 ml de la solution d’acide chlorhydrique (5.4) à 1000 ml
0,004 5 g d’ion nitrate par litre.
avec de l’eau.
Dissoudre 1,468 g de nitrate de potassium (KNO,), préalable-
ment séché à 110 à 120 OC jusqu’à masse constante, dans de
5.6 Solutions pour la précipitation des protéines et de la
l’eau; compléter à 1000 ml avec de l’eau dans une fiole jaugee
matière grasse.
et homogénéiser.
56.1 Sulfate de zinc, solution.
Le jour de l’utilisation, diluer 5 ml de cette solution avec 20 ml
’ de la solution tampon (5.31, compléter ensuite à 1000 ml avec
de sulfate de zinc heptahydraté
Dissoudre 53,5 g de l’eau dans une fiole jaugée et homogénéiser.
(ZnSO,m 7H20) dans de l’eau et compléter à 100 ml.
1 ml de cette solution étalon contient 450 pg de NO$
5.6.2 HexacyanoferrateUl) de potassium, solution.
6 Appareillage
Dissoudre 17,2 g d’hexacyanoferrate(II) de potassium trihy-
draté [ K,Fe( CN)G n 3H20] dans de l’eau et compléter à 100 ml.
Toute la verrerie doit être soigneusement lavée et rincée avec
de l’eau distillée pour être certain qu’elle est exempte de nitra-
tes et de nitrites.
5.7 EDTA, solution.
Matériel courant de laboratoire, et notamment
Dissoudre 33,5 g d’éthylène diamine tétraacétate disodique
dihydraté (Na2C10H14N208~2H20) dans de l’eau et compléter à
1000 ml.
6.1 Balance analytique.
5.8 Solutions pour le développement de la coloration.
. Réci pient pour échantil Ion, muni d’un couvercle étan-
62
che à l’air.
58.1 Solution 1.
6.3 Fioles coniques, de 250 ml de capacité.
Dissoudre, en chauffant au bain d’eau, 0’5 g de sulfanilamide
(NH2C6H4S02NH2) dans un mélange constitué par 75 ml d’eau
6.4 Fiole conique, de 500 ml de capacité.
et 5 ml d’acide chlorhydrique concentré (@20 1’19 g/ml). Refroi-
dir à la température ambiante et compléter à 100 ml avec de
6.5 Fioles jaugées à un trait, de 100 - 500 et 1000 ml de
l’eau. Filtrer si nécessaire.
capacités, conformes aux spécifications de I’ISO 1042,
classe B.
5.8.2 Solution II.
6.6 Pipettes, permettant de délivrer 2 - 4 - 5 - 6 - 8 -
Diluer 450 ml d’acide chlor ydriq ue concentré (g20 1’19 g/ml) à
10 - 12 - 20 - 25 et 50 ml, conformes aux spécifications de
1000 ml avec de l’eau.
I’ISO 648, classe A, ou de I’ISO 835.
échéant, des burettes peuvent être utilisées à la
NOTE - Le cas place
5.8.3 Solution Ill.
des pipettes.
Dissoudre 0’1 g de dichlorhydrate de Wnaphtyl-1) éthylène
6.7 Éprouvettes graduées, de 5 - 10 - 25 - 100 -
diamine (CIoH,NHCH2CH2NH2~2HCI) dans de l’eau. Compléter
250 - 500 et 1000 ml de capacités.
à 100 ml avec de l’eau. Filtrer si nécessaire.
réfrigéra- 6.8 Entonnoirs en verre, d’environ 7 cm de diamètre, à tige
La solution peut être conservée jusqu ‘à 1 semaine au
un récipient en verre brun bien bouché. courte.
teur, dans
2

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ISO 67364982 (FI
82 . Contrôle du pouvoir réducteur de la colonne
6.9 Papier filtre, pour filtration moyenne, d’environ 15 cm
de diamètre, exempt de nitrates et de nitrites.
au moins deux fois par jour, au et
Procéder à ce contrôle
à la fin d’u ne série de déterminations.
exemple
Appareil pour la réduction des nitrates (par
6.10
celui qui est représenté par la figure).
8.2.1 Prélever, à la pipette, 20 ml de la solution étalon de
nitrate de potassium (5.10) et les introduire dans le réservoir
6.11 Colorimètre photoélectrique, ou spectrop
...