ISO 4134:1978
(Main)Meat and meat products — Determination of L-(+)- glutamic acid content — Reference method
Meat and meat products — Determination of L-(+)- glutamic acid content — Reference method
Viandes et produits à base de viande — Détermination de la teneur en acide L-(+)-glutamique — Méthode de référence
General Information
Relations
Buy Standard
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL STANDARD
4134
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDlZATlONWvWKflYHAPOLIHAR OPrAHM3AUMR f-l0 CTAHAAPTM3AL&WWORGANlSATlON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Determination of L-( +)-glutamic
Meat and meat products -
acid content (Reference method)
Viandes et produits ;i base de viande - Determination de la teneur en acide L-(+)-glutamique
(Mthode de re ’fgrence)
First edition - 1978-06-l 5
Corrected and reprinted
Ref. No. IS0 4134-1978 (E)
UDC 637.5 : 543.8
Descriptors : meat, meat products, chemical analysis, determination of content, organic acids.
Price based on 4 pages
---------------------- Page: 1 ----------------------
FOREWORD
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation
of national standards institutes (IS0 member bodies). The work of developing
International Standards is carried out through IS0 technical committees. Every
member body interested in a subject for which a technical committee has been set
up has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated
to the member bodies for approval before their acceptance as International
Standards by the IS0 Council.
International Standard IS0 4134 was developed by Technical Committee
ISO/TC 34, Agricultural food products, and was circulated to the member bodies
in June 1977.
It has been approved by the member bodies of the following countries :
Australia Hungary Philippines
Austria India Poland
Bulgaria Iran South Africa, Rep. of
Chile Ireland Spain
Czechoslovakia Israel Thailand
Egypt, Arab Rep. of Kenya Turkey
Ethiopia Korea, Rep. of United Kingdom
Mex ice U.S.S.R.
France
Netherlands Yugoslavia
Germany, F. R.
No member body expressed disapproval of the document.
0 International Organization for Standardization, 1978 l
Printed in Switzerland
---------------------- Page: 2 ----------------------
IS0 4134-1978 (E)
INTERNATIONAL STANDARD
Determination of L-(+)-glutamic
Meat and meat products -
acid content (Reference method)
The water used shall be double-distilled or demineralized
1 SCOPE AND FIELD OF APPLICATION
and distilled water, obtained by carrying out the final
This International Standard specifies a reference method
distillation in an all-glass apparatus.
for the determination of the L-(-I-)-glutamic acid content
NOTE - Water distilled only once may contain metal ion traces,
of meat and meat products.
and demineralized water may contain micro-organisms. Metal ions
may decrease the activity of enzymes, while micro-organisms may
2 REFERENCES give rise to an aspecific enzymatic background activity that might
adversely affect the results of analysis.
IS0 1442, Meat and meat products - Determination of
moisture con tent.
5.1 Perchloric acid solution, I,0 M.
I SO 3 100, Meat and meat products - Sampling.
Dilute 8,6 ml of perchloric acid, 70 % (m/m), pzO I,67 g/ml,
to 100 ml with water.
3 DEFINITION
5.2 Potassium hydroxide solution, 2 M.
L-(-I-)-glutamic acid content of meat and meat products :
The L-(+)-glutamic acid content determined according to
Dissolve 56,l g of potassium hydroxide in water and dilute
the procedure described in this International Standard
to 500 ml.
and expressed as a percentage by mass.
5.3 Triethanolamine-phosphate buffer solution, pH 8,5.
4 PRINCIPLE
a) Dissolve I,86 g of triethanolamine hydrochloride in
water and adjust the pH to 8,6 with the potassium
Extraction of the L-(+)-glutamic acid present in a test
hydroxide solution (5.2) using a pH meter. Add 0,68 g
portion with ice-cold perchloric acid solution. Centri-
of octylphenol-decaethyleneglycolether (for example
fuging, decantation and filtration, followed by adjustment
Triton X-100) and dilute to 100 ml with water.
of pH and transformation of the L-(+)-glutamate in a
portion of the filtrate by the following reactions 1) with
b) Dissolve 0,86 g of dipotassium hydrogen phosphate
nicotinamide adenine dinucleotide (NAD), and 2), with
(K,HPO,) and 0,007 g of potassium dihydrogen ortho-
concomitant oxidation of an equivalent amount of
phosphate (KH,PO,) in water and dilute to 100 ml.
nicotinamide adenine dinucleotide (reduced) (NADH) :
Mix 20 ml of solution a) with 5 ml of solution b).
glutamate
dehydrogenase
Keep the solution at 4 “C.
\
1) L-(+)-glutamate + NAD+ -I- H,O \
cu-cetoglutamate -I- NADH + NH, -I- H+
5.4 Nicotinamide adenine dinucleotide (NAD) solution.
2) NADH -I- iodonitrotetrazolium chloride -t- H+
Weigh 0,025 g of NAD in a small, stoppered flask and add
diaphorase
5,0 ml of water.
- NAD+ i- formazane
The solution can be kept for at least 4 weeks at 4 “C.
Photometric measurement of the amount of formazane
formed.
5.5 lodonitrotetrazolium (INT) chloride [2-(p-iodophenyl)-
3-(p-nitrophenyl)-,5-phenyltetrazolium chloride] solution.
5 REAGENTS
Weigh 0,030 g of INT in a small, stoppered brown flask and
All reagents shall be of analytical quality. Except for the
add 50 ml of water.
solutions of inorganic compounds (5.1 and 5.2), all solu-
tions shall be stored in stoppered brown glass bottles which
The solution can be kept for at least 2 months at 4 “C in
have been scrupulously cleaned and steamed or sterilized. the dark.
1
---------------------- Page: 3 ----------------------
lSO4134=1978(E)
6.9 Small plastic spatula, bent at 90°, for mixing the
5.6 Diaphorase (I ipoamine-dehydrogenase, EC* 1.6.4.3)
solution. contents of the photometric cell.
Dissolve 0,003 g of lyophilized diaphorase in 1 ml of water.
6.10 Photoelectric calorimeter, provided with a filter
having a transmittance maximum at 492 nm, or spectro-
The solution can be kept for at least 3 weeks at 4 “C.
photometer.
5.7 Glutamate dehydrogenase (GIDH) (EC* 1.4.1.2)
6.11 Photometric cells of 10 mm optical path length.
free from ammonium sulphate,
solution, 10 mg/ml,
ethyienedinitrilotetraacetic acid (EDTA) and glutaminase.
This solution is supplied as such (for example in quantities
of I,0 ml) and can be kept for at least 12 months at 4 “C.
7 SAMPLING AND LABORATORY SAMPLE
5.8 L-(+I-glutamic acid, standard solution.
7.1 Sampling
Dissolve 0,050 0 g of L-(-I--)-glutamic acid in 25 ml of water.
See IS0 3100.
Adjust the pH to 7,0 with the potassium hydroxide
solution (5.2) and dilute to 50 ml.
7.2 Laboratory sample
Keep this solution at 4 “C and dilute 1 i- 49 shortly before
Proceed from a representative sample of at least 200 g.
use.
Store the sample in such a way that deterioration and
change in composition are prevented.
6 APPARATUS
ise specified, and
Usual laboratory e lquipm
...
NORME INTERNATIONALE 4134
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION*ME~YHAPOL\HAR OPrAHHJAUHR il0 CTAHL\APTH3AUH#.ORGANlSATlON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
*
Viandes et produits a base de viande - Détermination de la
teneur en acide L-(+)-glutamique (Méthode de référence)
Meat and meat products - Determination of L- (+)glutamic acid content (Reference method)
Première édition - 1978-12-15
._
U
-
Réf. no : IS0 4134-1978 (FI
CDU 637.5 : 543.8
m
(r,
O>
c
Descripteurs : viande, produit a base de viande, analyse chimique, dosage, acide organique.
m
a
Prix base sur 4 pages
---------------------- Page: 1 ----------------------
AVANT-PROPOS
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d'organismes nationaux de normalisation (comités membres de I'ISO). L'élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I'ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partiedu comité technique
correspondant. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I'ISO, participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont
soumis aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme
Normes internationales par le Conseil de I'ISO.
La Norme internationale IS04134 a été élaborée par le comité technique
ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, et a été soumise aux comités membres
en juin 1977.
Les comités membres des pays suivants l'ont approuvée :
Afrique du Sud, Rép. d' Éthiopie Pays-Bas
Allemagne, R. F. France Philippines
Australie Hongrie
Pologne
Autriche Inde Royaume-Uni
Bulgarie iran Thécosl ovaquie
Chili Irlande Thaïlande
Corée, Rép. de Israël Turquie
U.R.S.S.
Egypte, Rép. arabe d' Kenya
Yougoslavie
Espagne Mexique
Aucun comité membre ne l'a désapprouvée.
O organisation intern8tionalr de normalisation, 1978 O
Imprimé en Suisse
---------------------- Page: 2 ----------------------
IS0 4134-1978 (F)
NORME INTERNATIONALE
Viandes et produits à base de viande - Détermination de la
teneur en acide L-(+)-glutamique (Méthode de référence)
1 OBJET ET DOMAINE D'APPLICATION 5 RÉACTIFS
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique. Toutes
La présente Norme internationale spécifie une méthode de
les solutions, sauf les solutions des composés minéraux (5.1
référence pour la détermination de la teneur en acide L-(+)-
et 5.21, doivent être conservées dans des récipients fermés
glutamique des viandes et produits à base de viande.
en verre brun, soigneusement nettoyés puis traités à la
vapeur ou stérilisés. L'eau utilisée doit être de l'eau bi-
2 RÉFÉRENCES
distillée ou déminéralisée, et l'eau distillée doit être obtenue
en réalisant la distillation finale dans un appareil entière-
IS0 1442, Viandes et produits à base de viande - Déter-
ment en verre.
mination de l'humidité.
NOTE - L'eau distillée une seule fois peut contenir des traces d'ions
IS0 3100, Viandes et produits à base de viande - Échan-
métalliques et l'eau déminéralisée peut contenir des micro-
tillonnage.
organismes. Les ions métalliques peuvent provoquer une diminution
de l'activité des enzymes, tandis que les micro-organismes peuvent
donner lieu à une activité enzymatique secondaire non spécifique
3 DÉFINITION qui pourrait affecter dans l'autre sens les résultats de l'analyse.
teneur en acide L-(+)-glutamique des viandes et produits
5.1 Acide perchlorique, solution 1 ,O M.
à base de viande : Teneur en acide L-(+)-glutamique déter-
0
minée selon la méthode décrite dans la présente Norme in-
Diluer 8.6 ml d'acide perchlorique à 70% (m/m), p2,,
ternationale et exprimée en pourcentage en masse.
1.67 g/ml, à 100 ml avec de l'eau.
5.2 Hydroxyde de potassium, solution 2 M.
4 PRINCIPE
56,l g d'hydroxyde de potassium dans de l'eau
Dissoudre
Extraction de l'acide L-(+)-glutamique présent dans une
et compléter à 500 ml avec de l'eau.
prise d'essai au moyen d'une solution d'acide perchlorique
refroidie par de la glace. Centrifugation, décantation et fil-
5.3 Phosphate-triéthanolamine, solution tampon, pH 8,5.
tration, suivies d'un ajustement du pH et transformation du
L-(+)-glutamate d'une partie du filtrat selon les réactions
a) Dissoudre 1,86 g de chlorhydrate de triéthanolamine
suivantes I), avec de la dinucléotide nicotinamide adénine
dans de l'eau et ajuster le pH à 8,6 avec la solution
(NAD), et 2), avec oxydation simultanée d'un montant
d'hydroxyde de potassium (5.21, en se servant d'un
équivalent de dinucléotide nicotinamide adénine (réduite)
pH-mètre. Ajouter 0,68 g d'octylphénol-décaéthylène-
(NADH) :
glycoléther (par exemple Triton X-100) et compléter à
glutamate
100 ml avec de l'eau.
déhydrogénase
1) L-(+)-glutamate + NAD+ + H,O d
b) Dissoudre 0,86 g d'hydrogénophosphate dipotassique
a-cétoglut ate + NADH + NH, + Hf
(K,HPO,) et 0,007 g de dihydrogénoorthophosphate de
Trn
potassium (KH,PO,) dans de l'eau et compléter à
2) NADH +chlorure d'iodonitrot&razolium, + H+
100 ml avec de l'eau.
diaphorase
t NAD+ + formazane
20 ml de la solution a) avec 5 ml de la solution b).
Mélanger
Mesurage photométrique de la quantité de formazane
Conserver la soiution à 4 OC.
obtenue.
1
---------------------- Page: 3 ----------------------
IS0 4134-1978 (F)
6.6 Fioles jaugées à un trait, de capacités 100 et 250 mi,
5.4 Dinucléotide nicotinamide adénine (NAD), solution.
conformes à I'ISO 1042, classe A.
Peser 0,025g de NAD dans une fiole étroite bouchée et
ajouter 5,O ml d'eau.
6.7 Pipettes à un trait, de capacités 100, 50 et 25 mi,
conformes à I'ISO 648, classe A.
Cette solution peut être conservée pendant au moins
4 semaines à 4 OC.
6.8 Pipettes graduées, permettant de délivrer 2,5 - 0,5 -
0,2 et 0.05 mi, conformes à I'ISO/R 835, classe A.
5.5 Chlorure d'iodonitrotétrazolium (INT) [chlorure de
(piodophényl)-2 (pnitrophényl)-3 phényltétrazolium-51,
solution.
6.9 Spatule étroite, en plastique, courbée à 90°, destinée
à mélanger le contenu de la cuve du photomètre.
Peser 0,030g d'lNT dans une fiole étroite bouchée, en
verre brun, et ajouter 50 ml d'eau.
6.10 Colorimètre photoélectrique, muni d'un filtre ayant
Cette solution peut être conservée pendant au moins 2 mois une absorbance maximale à 492 nm, ou spectrophotomètre.
à 4 OC, à l'obscurité.
6.1 1 Cuves de photomètre, de 1 O mm de parcours optique.
5.6 Diaphorase (lipoarnine déhydrogénase, EC" 1.6.4.3),
solution.
7 ÉCHANTILLONNAGE ET ÉCHANTILLON POUR
Dissoudre 0,003gde diaphorase lyophilisée dans 1 ml d'eau.
LABO RAT0 I RE
Cette solution, peut être conservée pendant au moins
3 semaines à 4 OC.
7.1 Échantillonnage
Voir IS0 3100.
5.7 Glutamate déhydrogénase (GIDH) (EC* 1.4.1.21,
solution à 10 mg/ml, exempte de sulfate d'ammonium,
7.2 Échantillon pour laboratoire
d'acide éthylène dinitrilotétraacétique (EDTA) et de
glutaminase.
Opérer à partir d'un échantillon représentatif d'au moins
200 g.
Cette solution est fournie telle quelle (par exemple en
quantités de 1,0 mi) et peut être conservée pendant au
Stocker l'échantillon de façon à éviter toute détérioration
moins 12 mois à 4 OC.
et tout changement dans sa composition.
5.8 Acide L-(+)glutamique, solution étalon.
Dissoudre 0,050 O g d'acide L-(+)-glutamique dans 25 ml
8 MODE OPÉRATOIRE
d'eau. Ajuster le pH à 7,O avec la solution d'hydroxyde de
potassium (5.2) et diluer à 50 mi.
8.1 Préparation de l'échantillon pour essai
Conserver
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.