Soil quality — Sampling of soil invertebrates — Part 5: Sampling and extraction of soil macro-invertebrates

ISO 23611-5:2011 specifies a method for sampling, extracting and preserving macro-invertebrates from soils, including the litter zone. The proposed method is a prerequisite for using these animals as bio-indicators (e.g. to assess the quality of a soil as a habitat for organisms). The main premise of this method is rapid assessment (completing the sampling of a plot in one or two days with only basic equipment and a small number of field assistants), in order to be able to address all the taxonomic groups of soil macro-invertebrates at the same time and in the same place. The Tropical Soil Biology and Fertility (TSBF) method has evolved and some modifications have been introduced in order to use it in temperate regions. The sampling and extraction methods in ISO 23611-5:2011 are applicable to almost all types of soils, with the exception of soils in extreme climatic conditions (hard, frozen or flooded soils) and matrices other than soil, e.g. tree trunks, plants or lichens. Sampling design is specified in ISO 23611-6.

Qualité du sol — Prélèvement des invertébrés du sol — Partie 5: Prélèvement et extraction des macro-invertébrés du sol

L'ISO 23611-5:2011 spécifie une méthode pour le prélèvement, l'extraction et la conservation des macro-invertébrés du sol, y compris la zone de litière. La méthode proposée est un prérequis à l'utilisation de ces animaux en tant que bio-indicateurs (par exemple pour évaluer la qualité d'un sol en tant qu'habitat pour des organismes). Les principes majeurs de cette méthode consistent à avoir une évaluation rapide (réaliser l'échantillonnage d'une zone en un ou deux jours avec un équipement de base et avec un nombre réduit d'assistants de terrain), pour être capable de traiter tous les groupes taxinomiques de macro‑invertébrés du sol en même temps et au même endroit. La méthode TSBF (biologie et fertilité des sols tropicaux) a évolué et quelques modifications ont été introduites afin de l'utiliser dans des régions tempérées. Les méthodes de prélèvement et d'extraction de l'ISO 23611-5:2011 sont applicables à la quasi‑totalité des sols. Les sols présents sous des conditions climatiques extrêmes (sols durs, gelés ou inondés) et les matrices autres que le sol, par exemple des troncs d'arbres, des plantes ou des lichens, peuvent constituer des exceptions. Le plan d'échantillonnage est spécifié dans l'ISO 23611-6.

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Published
Publication Date
22-Nov-2011
Current Stage
9599 - Withdrawal of International Standard
Completion Date
15-Aug-2024
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ISO 23611-5:2011 - Soil quality -- Sampling of soil invertebrates
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ISO 23611-5:2011 - Qualité du sol -- Prélevement des invertébrés du sol
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Standards Content (Sample)


INTERNATIONAL  ISO
STANDARD 23611-5
First edition
2011-12-01
Soil quality — Sampling of soil
invertebrates —
Part 5:
Sampling and extraction of soil macro-
invertebrates
Qualité du sol — Prélèvement des invertébrés du sol — Partie 5:
Prélèvement et extraction des macro-invertébrés du sol
Reference number
ISO 23611-5:2011(E)
©
ISO 2011
©  ISO 2011
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or ISO’s
member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2011 – All rights reserved

Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International
Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 23611-5 was prepared by Technical Committee ISO/TC 190, Soil quality, Subcommittee SC 4, Biological
methods.
ISO 23611 consists of the following parts, under the general title Soil quality — Sampling of soil invertebrates:
—  Part 1: Hand-sorting and formalin extraction of earthworms
—  Part 2: Sampling and extraction of micro-arthropods (Collembola and Acarina)
—  Part 3: Sampling and soil extraction of enchytraeids
—  Part 4: Sampling, extraction and identification of soil-inhabiting nematodes
—  Part 5: Sampling and extraction of soil macro-invertebrates
—  Part 6: Guidance for the design of sampling programmes with soil invertebrates
© ISO 2011 – All rights reserved  iii

Introduction
This part of ISO 23611  was prepared in response to a need to standardize sampling and extraction methods for
soil macro-invertebrates in several European (temperate) and tropical countries. These methods are needed
for the following purposes:
—  biological classification of soils, including soil quality assessment (e.g. References [21], [32] and [41]);
—  terrestrial bio-indication and long-term monitoring (e.g. References [71], [79], [80] and [81]).
Data collected using standardized methods can be evaluated more accurately as it allows more reliable
comparison between sites (e.g. polluted vs non-polluted sites, changes in land-use practices).
Soils of the world host an abundance of highly diverse macro-invertebrate communities. Their biology and
ecology have been widely studied. Soil invertebrates are irreplaceable actors of soil formation and conservation
in natural ecosystems. Their relevance to the soil system comes from their abundance and diversity, and also
from their role in key biological processes. They are sensitive indicators of soil quality and recognized agents
of its fertility (e.g. References [63] and [56]). Among the wide diversity of species, adaptive strategies and size
ranges represented, one specific group, also called “soil ecosystem engineers”, includes large invertebrates
that actually determine the activities of other smaller organisms through the mechanical activities they produce
in soil (e.g. References [24] and [49]).
Soil macro-invertebrates span a wide range of ecological functions in soil: decomposition of organic matter,
through their own activity and by stimulating the soil’s microbiological activity (e.g. References [8], [10] and
[40]), predation that plays an important part in food webs (e.g. References [16], [55], [61], [64] and [68]), soil
aggregation by the production of organo-mineral structures (e.g. nests, galleries, casts) that can last for days,
months or years, and soil bioturbation (e.g. Reference [32]), etc. These characteristics, coupled with in-depth
taxonomic knowledge, has enabled their use as study organisms in several research programmes dealing
with the impacts of forest practices (e.g. References [18], [40], [50], [62], [65] and [75]) or crop management
practices (e.g. References [15], [25], [31], [33], [34], [37], [42], [60] and [66]). These features make them suitable
organisms for use as bio-indicators of changes in soil quality, especially with respect to land-use practices and
pollution (e.g. References [26], [39], [48], [52], [53], [59], [65] and [79]).
The method proposed in this part of ISO 23611 covers the sampling of all soil macro-invertebrates. However,
the sampling of earthworms is already covered in ISO 23611-1. This method is described in ISO 23611-1:2006,
Annex C, as an alternative sampling method for earthworms.
iv © ISO 2011 – All rights reserved

INTERNATIONAL STANDARD ISO 23611-5:2011(E)
Soil quality — Sampling of soil invertebrates —
Part 5:
Sampling and extraction of soil macro-invertebrates
1 Scope
This part of ISO 23611 specifies a method for sampling, extracting and preserving macro-invertebrates from
soils, including the litter zone. The proposed method is a prerequisite for using these animals as bio-indicators
(e.g. to assess the quality of a soil as a habitat for organisms). The main premise of this method is rapid
assessment (completing the sampling of a plot in one or two days with only basic equipment and a small
number of field assistants) in order to be able to address all the taxonomic groups of soil macro-invertebrates
at the same time and in the same place. The Tropical Soil Biology and Fertility (TSBF) method has evolved and
some modifications have been introduced in order to use it in temperate regions.
The sampling and extraction methods in this part of ISO 23611 are applicable to almost all types of soil, with
the exception of soils in extreme climatic conditions (hard, frozen or flooded soils) and matrices other than soil,
e.g. tree trunks, plants or lichens.
A sampling design is specified in ISO 23611-6.
NOTE 1  The method specified in this part of ISO 23611 is based on guidelines developed under the Tropical Soil
[7]
Biology and Fertility Program (TSBF method) .
NOTE 2  Basic information on the ecology of macro-invertebrates and their use can be found in the references listed in
the Bibliography.
2 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
2.1
macro-invertebrates
soil organism whose longest dimension is greater than 10 mm
NOTE  See Annex A for further details.
EXAMPLE  These include especially the following groups: Oligochaeta, Gastropoda, Chilopoda, Diplopoda, Isopoda,
Arachnida, plus various insects: Coleoptera, Orthoptera, Hymenoptera, Hemiptera, Dermaptera, Lepidoptera (larvae) and
Diptera (larvae).
2.2
blotted mass
mass of individuals after preservation in formalin or ethanol (when the substance used for preservation has
been absorbed by the tissues)
3 Principle
Soil macro-invertebrates are collected in the field using a metallic frame to delimit the soil surface of the
sampling point. Macro-invertebrates present in litter and soil are picked up separately. In temperate regions, a
reagent is used to extract macro-invertebrates from soil. The sampling is completed by hand-sorting. Animals
are preserved and transported to the laboratory for further identifications (e.g. References [11], [12], [13], [14],
[17], [19], [20], [22], [23], [27], [28], [29], [30], [35] ,[36], ,[38], [45], [46], [47], [54], [57], [70], [72], [73], [76], [77],
[78] and [84]). Abundance values are usually recalculated relative to area (1 m).
© ISO 2011 – All rights reserved  1

4 Reagents
4.1 Ethanol, (70 % volume fraction).
4.2 Formalin [formaldehyde solution], 4 % (volume fraction).
Both 70 % ethanol and 4 % formalin should be available for the preservation of specimens (4 % formalin is
more suitable for taxa with soft body parts, which can be transferred to ethanol after about 4 d fixation).
4.3 Formalin, 0,2 % (volume fraction), prepared by diluting 25 ml of formalin (39 %) in 5 l of water, for soil
macro-invertebrate extraction.
5 Apparatus
Use standard laboratory equipment and the following.
5.1 Petri dishes.
5.2 Stereo-microscope.
5.3 Plastic vials.
5.4 Entomological forceps.
5.5 Pencil, notebook, water-resistant marker, labels.
5.6 Tape measures.
5.7 Knife (cut glass).
5.8 Spade.
5.9 Plastic-weave produce sacks, for spreading on the ground.
5.10 Precision balance.
5.11 Large flat plastic trays (500 mm × 400 mm × 100 mm), for sorting the soil and litter.
5.12 Trowel.
5.13 Small plastic trays.
5.14 Fine forceps (or entomological forceps), pipette, fine paint brushes.
5.15 Sample vials, in various sizes with secure alcohol-tight caps.
5.16 Indian-ink pen (waterproof).
5.17 Stiff card for labels, ranging compass.
5.18 Large strong plastic bags (sealable).
2 © ISO 2011 – All rights reserved

5.19 Table and plastic chairs, for sorting.
5.20 Cover, for protection from heavy rain.
5.21 Polyvinyl gloves, to protect hands from formalin.
5.22 Metallic frame, preferably 250 mm × 250 mm.
Sample frame (250 mm × 250 mm × 50 mm) made of stainless steel and with sharpened edges to delimit the
sampling point where animals are sampled from the litter layer and soil.
5.23 Watering can.
5.24 Pair of scissors, to cut vegetation inside the frame.
5.25 Field balances.
6 Field procedure
6.1 General
Sampling should take place when accessible biodiversity is thought to be largest. In temperate regions, it
corresponds to spring or autumn, and in the tropics, it should take place towards the end of the rainy season.
When sampling soil invertebrates, it is strongly recommended that the site be physico-chemically characterized.
In particular, pH, particle size distribution, C/N ratio, organic carbon content and water-holding capacity should
be measured using ISO 10390, ISO 10694, ISO 11274, ISO 11277, ISO 11461, ISO 11465.
6.2 Collecting macro-invertebrates from the litter zone
At each sampling point (= monolith) (previously defined according to sampling design rules), a litter sample is
collected using a metallic frame (5.22). The metallic frame is pressed into the litter by hand. The litter inside the
frame is removed and checked manually in the field using a large tray (5.11). Litter invertebrates are preserved
in 4 % formalin (4.2).
6.3 Collecting macro-invertebrates from soil
6.3.1 General
In temperate countries, the extraction of soil macro-invertebrates is carried out in two steps (see 6.3.2.1 and
6.3.2.2), while in tropical countries only the second step shall be performed (see 6.3.3).
6.3.2 Temperate regions
6.3.2.1 Formalin extraction
The soil surface delimited by the metallic frame (5.22) is sprayed with 0,2 % formalin (4.3) using a watering can
(5.23). Two applications of 1,5 l of formalin are performed at intervals of about 10 min. Soil invertebrates coming
up to the surface are collected and preserved in vials (5.3) containing formalin (4.2).
6.3.2.2 Hand-sorting of “passive” macro-invertebrates
At the end of the formalin extraction, the metallic frame (5.22) is removed and the upper 150 mm of soil is
excavated within the frame area (250 mm × 250 mm). The excavated soil is placed in a plastic bag (5.18) that
can be closed with a cover to prevent animals from escaping from the soil sample.
© ISO 2011 – All rights reserved  3

Appropriate sub-samples of soil are taken from the container and spread on a large tray (5.11). Macro-invertebrates
are collected and preserved in vials (5.3) with formalin (4.2). When hand-sorting is finished, the excavated soil
is replaced to avoid creating holes on the sampling site.
6.3.3 Tropical regions
In tropical countries, soil macro-invertebrates are sampled using a 250 mm × 250 mm × 300 mm deep soil
monolith. The monolith is isolated by cutting with a spade (5.8) a few centimetres outside the quadrate (metallic
frame) and then digging a 20 mm wide by 300 mm deep trench around it. This facilitates cutting of the sample
into horizontal strata and collecting animals escaping from the block.
The delimited block is divided into three layers, 0 mm to 100 mm, 100 mm to 200 mm and 200 mm to 300 mm,
and the soil and litter material is hand-sorted in trays (5.11). Since formalin is not applied in tropical regions, the
sampling depth shall be doubled in order to be sure to collect endogenic species of earthworms.
For social insects, it is recommended that special measures be considered that take account of their high
abundance and marked patchiness; a nest can contain millions of individuals, of which none are sampled
by a short transect, and the contribution of the species concerned to a macrofaunal assemblage can thus
be completely missed. On the other hand, a highly populated nest sampled directly by a monolith can lead
to a large overestimation of the overall numerical or biomass density. In general, the TSBF transect should
be placed so as to avoid direct contact with termite and ant nests. For discussions, see References [39] and
[40]. The protocol for a 100 m × 2 m transect designed to assess termite biodiversity (and feeding group
representation) is given in Reference [52]. In suitable circumstances, this protocol can also be deployed in
parallel with the TSBF transect.
NOTE  Besides the general characterization of the site, it is useful to determine the actual moisture of the soil to be
sampled.
7 Laboratory procedure
7.1 Treatment of collected samples
In the labo
...


NORME  ISO
INTERNATIONALE 23611-5
Première édition
2011-12-01
Qualité du sol — Prélèvement des
invertébrés du sol —
Partie 5:
Prélèvement et extraction des macro-
invertébrés du sol
Soil quality — Sampling of soil invertebrates — Part 5: Sampling and
extraction of soil macro-invertebrates
Numéro de référence
ISO 23611-5:2011(F)
©
ISO 2011
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
©  ISO 2011
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit
de l’ISO à l’adresse ci-après ou du comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
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Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2011 – Tous droits réservés

Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales,
en liaison avec l’ISO participent également aux travaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission
électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d’élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de droits
de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir
identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L’ISO 23611-5 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous-comité SC 4, Méthodes
biologiques.
L’ISO 23611 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Qualité du sol — Prélèvement
des invertébrés du sol:
—  Partie 1: Tri manuel et extraction au formol des vers de terre
—  Partie 2: Prélèvement et extraction des micro-arthropodes (Collembola et Acarina)
—  Partie 3: Prélèvement et extraction des enchytréides
—  Partie 4: Prélèvement, extraction et identification des nématodes du sol
—  Partie 5: Prélèvement et extraction des macro-invertébrés du sol
—  Partie 6: Lignes directrices pour la conception de programmes d’échantillonnage des invertébrés du sol
© ISO 2011 – Tous droits réservés  iii

Introduction
La présente partie de l’ISO 23611 a été élaborée en raison de la nécessité de normaliser les méthodes
de prélèvement et d’extraction des macro-invertébrés du sol dans plusieurs pays (tempérés) européens et
tropicaux. Ces méthodes sont nécessaires pour les applications suivantes:
—  la classification biologique des sols, y compris l’évaluation de la qualité des sols (par exemple
Références [21], [32] et [41]);
—  la bio-indication terrestre et la surveillance à long terme (par exemple Références [71], [79], [80] et [81]).
Les données obtenues à l’aide de méthodes normalisées permettent des évaluations plus précises et donc
des comparaisons plus fiables entre différents sites (par exemple sites pollués face à des sites non pollués,
modifications des pratiques d’utilisation du sol).
Les sols du monde entier abritent des communautés de macro-invertébrés abondantes et très diversifiées,
dont la biologie et l’écologie ont été largement étudiées. Les invertébrés du sol sont en effet des acteurs
irremplaçables de la formation et de la conservation des sols dans les écosystèmes naturels. Leur importance
pour le sol est due à leur grande abondance et à leur grande diversité, mais aussi au rôle qu’ils jouent dans les
principaux processus biologiques. Ils constituent des indicateurs sensibles de la qualité des sols et sont des
agents reconnus de leur fertilité (par exemple Références [63] et [56]). Parmi la grande variété d’espèces, de
stratégies adaptatives et d’échelles de taille, un groupe spécifique, dont les membres sont également appelés
«ingénieurs de l’écosystème du sol», inclut de grands invertébrés qui déterminent véritablement les activités
d’autres organismes plus petits du fait des activités mécaniques qu’ils réalisent dans le sol (par exemple
Références [24] et [49]).
Les macro-invertébrés du sol couvrent une large gamme de fonctions écologiques dans le sol: la décomposition
de la matière organique, par leur activité propre et par la stimulation de l’activité microbiologique du sol (par
exemple Références [8], [10] et [40]), la prédation qui joue un rôle important dans les réseaux trophiques (par
exemple Références [16], [55], [61], [64] et [68]), l’agrégation du sol, par la production de structures organo-
minérales (par exemple nids, galeries, turricules) qui peuvent persister pendant des jours, des mois ou des
années et la bioturbation du sol (par exemple Référence [32]), etc. Ces caractéristiques, ajoutées à la bonne
connaissance de leur taxinomie, ont permis leur utilisation en tant qu’organismes d’étude au sein de plusieurs
programmes de recherche traitant des impacts de l’exploitation forestière (par exemple Références [18], [40],
[50], [62], [65] et [75]) ou des pratiques de gestion des cultures (par exemple Références [15], [25], [31], [33],
[34], [37], [42], [60] et [66]). Ces caractéristiques en font des organismes pertinents pour être utilisés comme
bio-indicateurs afin de mesurer des changements de la qualité du sol, en particulier en raison des pratiques
d’exploitation du sol et de la pollution (par exemple Références [26], [39], [48], [52], [53], [59], [65] et [79]).
La méthode proposée dans la présente partie de l’ISO 23611 couvre le prélèvement de tous les macro-invertébrés
du sol. Toutefois, le prélèvement des vers de terre est déjà couvert dans l’ISO 23611-1. Cette méthode est
décrite dans l’ISO 23611-1:2006, Annexe C, en tant que variante pour le prélèvement des vers de terre.
iv © ISO 2011 – Tous droits réservés

NORME INTERNATIONALE ISO 23611-5:2011(F)
Qualité du sol — Prélèvement des invertébrés du sol —
Partie 5:
Prélèvement et extraction des macro-invertébrés du sol
1 Domaine d’application
La présente partie de l’ISO 23611 spécifie une méthode pour le prélèvement, l’extraction et la conservation des
macro-invertébrés du sol, y compris la zone de litière. La méthode proposée est un prérequis à l’utilisation de
ces animaux en tant que bio-indicateurs (par exemple pour évaluer la qualité d’un sol en tant qu’habitat pour
des organismes). Les principes majeurs de cette méthode consistent à avoir une évaluation rapide (réaliser
l’échantillonnage d’une zone en un ou deux jours avec un équipement de base et avec un nombre réduit
d’assistants de terrain), pour être capable de traiter tous les groupes taxinomiques de macro-invertébrés du
sol en même temps et au même endroit. La méthode TSBF (biologie et fertilité des sols tropicaux) a évolué et
quelques modifications ont été introduites afin de l’utiliser dans des régions tempérées.
Les méthodes de prélèvement et d’extraction de la présente partie de l’ISO 23611 sont applicables à la
quasi-totalité des sols, à l’exception des sols présents sous des conditions climatiques extrêmes (sols durs,
gelés ou inondés) et les matrices autres que le sol, par exemple des troncs d’arbres, des plantes ou des lichens.
Le plan d’échantillonnage est spécifié dans l’ISO 23611-6.
NOTE 1  La méthode spécifiée dans la présente partie de l’ISO 23611 est basée sur les lignes directrices qui ont été
[7]
développées dans le cadre du programme de biologie et de fertilité des sols tropicaux (méthode TSBF) .
NOTE 2  Les informations de base sur l’écologie des macro-invertébrés et leur utilisation peuvent être trouvées dans
les références citées dans la Bibliographie.
2 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
2.1
macro-invertébrés
organismes du sol d’une taille moyenne supérieure à 10 mm
NOTE  Voir Annexe A pour plus de détails.
EXEMPLE  Ce sont notamment les groupes suivants: les Oligochètes, les Gastéropodes, les Chilopodes, les
Diplopodes, les Isopodes, les Arachnides, plus divers insectes: les Coléoptères, les Orthoptères, les Hyménoptères, les
Hémiptères, les Dermaptères, les Lépidoptères (larves) et les Diptères (larves).
2.2
masse imprégnée
masse des individus après conservation dans le formol ou l’éthanol (lorsque la substance utilisée pour la
conservation a été absorbée par les tissus)
3 Principe
Les macro-invertébrés du sol sont collectés sur le terrain au moyen d’un cadre métallique pour délimiter
la surface de sol du point d’échantillonnage. Les macro-invertébrés de la litière et du sol sont prélevés
séparément. Dans les régions tempérées, un réactif est utilisé pour extraire les macro-invertébrés du sol.
L’échantillonnage est complété par tri manuel. Les animaux sont conservés et transportés au laboratoire en
vue de leur identification (par exemple Références [11], [12], [13], [14], [17], [19], [20], [22], [23], [27], [28], [29],
© ISO 2011 – Tous droits réservés  1

[30], [35], [36], [38], [45], [46], [47], [54], [57], [70], [72], [73], [76], [77], [78] et [84]). Les valeurs d’abondance
sont généralement recalculées et rapportées à une surface (1 m).
4 Réactifs
4.1 Éthanol, 70 % (fraction volumique).
4.2 Formol (solution de formaldéhyde), 4 % (fraction volumique).
Il convient de disposer à la fois d’éthanol à 70 % et de formol à 4 % pour la conservation des spécimens (le
formol à 4 % est plus approprié pour les taxons dont le corps comporte des parties molles, qui peuvent être
transférés dans l’éthanol après 4 jours de fixation).
4.3 Formol, 0,2 % (fraction volumique), préparé en diluant 25 ml de formol (39 %) dans 5 l d’eau, pour
l’extraction des macro-invertébrés du sol.
5 Appareillage
Utiliser du matériel courant de laboratoire ainsi que ce qui suit.
5.1 Boîtes de Petri.
5.2 Loupe binoculaire.
5.3 Flacons en plastique.
5.4 Pinces entomologiques.
5.5 Crayon, carnet de notes, marqueur indélébile, étiquettes.
5.6 Mètres rubans.
5.7 Couteau (verre taillé).
5.8 Bêche.
5.9 Sacs en plastique tissé (pour poser sur le sol).
5.10 Balance de précision.
5.11 Plateaux plats larges en plastique (500 mm × 400 mm × 100 mm), pour trier le sol et la litière.
5.12 Tarière.
5.13 Petits plateaux en plastique.
5.14 Pinces fines (ou pinces entomologiques), pipette, pinceaux fins.
5.15 Flacons d’échantillonnage, de différentes dimensions, munis de couvercles hermétiques étanches à
l’alcool.
5.16 Stylo à encre de Chine (résistante à l’eau).
2 © ISO 2011 – Tous droits réservés

5.17 Carton rigide pour étiquettes, boussole.
5.18 Grands sacs en plastique épais (scellables).
5.19 Table et chaises en plastique, pour le tri.
5.20 Bâche, pour abriter de la pluie battante.
5.21 Gants en polyvinyle, pour se protéger les mains du formol.
5.22 Cadre métallique, de préférence de 250 mm × 250 mm.
Cadre de prélèvement (250 mm × 250 mm × 50 mm), en acier inoxydable et présentant des bords tranchants
pour délimiter le point d’échantillonnage où les animaux sont prélevés dans la couche de litière et dans le sol.
5.23 Arrosoir.
5.24 Paire de ciseaux, pour couper la végétation à l’intérieur du cadre.
5.25 Balances de terrain.
6 Mode opératoire sur le terrain
6.1 Généralités
Il convient de réaliser le prélèvement au moment où l’on pense pouvoir disposer de la biodiversité la plus large.
Dans les régions tempérées, cela correspond au printemps ou à l’automne; dans les régions tropicales, il
convient que le prélèvement soit effectué vers la fin de la saison des pluies.
Lorsqu’on prélève des invertébrés du sol, il est fortement recommandé de déterminer les caractéristiques
physico-chimiques du sol. Il convient de mesurer notamment le pH, la granulométrie, le rapport C/N, la teneur
en carbone organique et la capacité de rétention d’eau en utilisant l’ISO 10390, l’ISO 10694, l’ISO 11274,
l’ISO 11277, l’ISO 11461 et l’ISO 11465.
6.2 Collecte des macro-invertébrés de la litière
À chaque point d’échantillonnage (= monolithe) (préalablement défini selon les règles du plan d’échantillonnage),
un échantillon de litière est prélevé en utilisant un cadre métallique (5.22). Le cadre métallique est enfoncé
manuellement dans la litière. La litière à l’intérieur du cadre est retirée et contrôlée à la main sur le terrain en
utilisant un plateau large (5.11). Les invertébrés de la litière sont conservés dans le formol à 4 % (4.2).
6.3 Collecte des macro-invertébrés du sol
6.3.1 Généralités
Dans les pays tempérés, l’extraction des macro-invertébrés du sol est réalisée en deux étapes (voir 6.3.2.1 et
6.3.2.2), tandis que dans les pays tropicaux, seule la seconde étape doit être exécutée (voir 6.3.3).
6.3.2 Régions tempérées
6.3.2.1 Extraction au formol
La surface du sol délimitée par le cadre métallique (5.22) est arrosée de formol à 0,2 % (4.3) au moyen d’un
arrosoir (5.23). Deux applications de 1,5 l de formol espacées d’environ 10 min sont réalisées. Les invertébrés
du sol remontant à la surface sont ramassés et conservés dans des flacons (5.3) contenant du formol (4.2).
© ISO 2011 – Tous droits réservés  3

6.3.2.2 Tri manuel des macro-invertébrés «passifs»
À la fin de l’extraction au formol, le cadre métallique (5.22) est retiré et la couche correspondant aux 150 mm
supérieurs du sol est creusée à l’intérieur de la surface du cadre (250 mm × 250 mm). Le sol creusé est placé
dans un sac en plastique (5.18) qui peut être fermé par un couvercle pour empêcher les animaux de s’échapper
de l’échantillon de sol.
Des sous-échantillons de sol appropriés sont prélevés dans le sac et étalés sur un plateau large (5.11). Les
macro-invertébrés sont prélevés et conservés dans des flacons (5.3) contenant du formol (4.2). Après avoir
procédé au tri manu
...

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