SIST-TS CEN/TS 15634-2:2012
(Main)Foodstuffs - Detection of food allergens by molecular biological methods - Part 2: Celery (Apium graveolens) - Qualitative determination of a specific DNA sequence in cooked sausages by real-time PCR
Foodstuffs - Detection of food allergens by molecular biological methods - Part 2: Celery (Apium graveolens) - Qualitative determination of a specific DNA sequence in cooked sausages by real-time PCR
This Technical Specification specifies a method for the qualitative detection of celery (Apium graveolens) in emulsion-type sausages (e.g. frankfurter, wiener).
Real-time PCR detection of celery is based on a 101 bp (base pair) sequence from the gene of the mannitol dehydrogenase (GenBank acc. no. AF067082) of celery (Apium graveolens). The method has been validated on emulsion-type sausages (Bavarian "Leberkäse") spiked with celery. For this purpose meat batter containing mass fractions of 50 % pork meat, 25 % pork fat, 23 % crushed ice and 1,8 % of a mixture of sodium chloride, nitrite, nitrate, phosphates and ascorbates was prepared according to a standard procedure for emulsion-type sausage. The meat batter was spiked with ground celery seeds or alternatively celery root powder, both at a 1000 mg/kg level. Lower spiking levels were obtained by diluting with celery-free meat batter. The batter was stuffed into casings and heated at 65 °C for 60 min [2].
Lebensmittel - Nachweis von Lebensmittelallergenen mit molekularbiologischen Verfahren - Teil 2: Sellerie (Apium graveolens) - Qualitative Bestimmung einer spezifischen DNA-Sequenz in Brühwürsten mittels Real-time-PCR
Diese technische Spezifikation legt ein Verfahren für den qualitativen Nachweis von Sellerie (Apium graveolens) in Brühwürsten (z. B. Frankfurter, Wiener) fest.
Der Nachweis von Sellerie mittels Real-time-PCR beruht auf der Vervielfältigung einer 101 bp (Basenpaar) langen Sequenz aus dem Gen der Mannitoldehydrogenase (GenBank acc. no. AF067082) von Sellerie (Apium graveolens).
Das Verfahren wurde an mit Sellerie dotierten Brühwürsten (Bayrischer Leberkäse) validiert. Zu diesem Zweck wurde ein Fleischbrät bestehend aus Massenanteilen von 50 % Rindfleisch, 25 % Schweinefleisch, 23 % zerstoßenem Eis und 1,8 % einer Mischung aus Natriumchlorid, Nitrit, Nitrat, Phosphaten und Ascorbaten nach einem Standardverfahren für Brühwürste hergestellt. Das Fleischbrät wurde mit gemahlener Selleriesaat oder alternativ mit Sellerieknollenpulver jeweils auf die Dotierungsstufe 1 000 mg/kg aufgestockt. Niedrigere Dotierungsstufen wurden durch Verdünnung mit selleriefreiem Fleischbrät erhalten. Das Brät wurde in Gefäße abgefüllt und für 60 min auf 65 °C erwärmt [2].
Produits alimentaires - Détection des allergènes alimentaires par des méthodes d'analyse de biologie moléculaire - Partie 2: Céleri (Apium graveolens) - Détermination qualitative d'une séquence d'ADN spécifique dans des saucisses cuites par PCR en temps réel
La présente Spécification technique décrit une méthode de détection qualitative du céleri (Apium graveolens)
dans des saucisses émulsionnées (par exemple, saucisses de Francfort ou de Vienne).
La détection du céleri par PCR en temps réel repose sur une séquence de 101 pb (paires de base) provenant
du gène de la mannitol déshydrogénase (n° d'accès GenBank AF067082) du céleri (Apium graveolens).
La méthode a été validée pour les saucisses émulsionnées (saucissons bavarois de type « Leberkäse »)
supplémentées en céleri. Pour cela, préparer une pâte de viande contenant des fractions massiques de 50 %
de viande de porc, 25 % de graisse de porc, 23 % de glace pilée et 1,8 % d’un mélange de chlorure de
sodium, nitrite, nitrate, phosphates et ascorbates en respectant le mode opératoire normalisé relatif aux
saucisses émulsionnées. La pâte de viande a été supplémentée en graines de céleri broyées ou en poudre
de racine de céleri, à une teneur de 1 000 mg/kg. Des taux de supplémentation moins élevés ont été obtenus
par dilution dans de la pâte de viande exempte de céleri. La pâte a été embossée dans des boyaux et
chauffée à 65 °C pendant 60 min [2].
Živila - Odkrivanje prisotnosti alergenov v živilih z metodami molekularne biologije - 2. del: Zelena (Apium graveolens) - Kvalitativno določanje specifičnega niza DNK v obarjenih klobasah s PCR v realnem času
Ta tehnična specifikacija določa metodo za kvalitativno odkrivanje zelene (Apium graveolens) v klobasah na osnovi emulzije (npr. frankfurtska klobasa, hrenovka). Odkrivanje zelene s PCR v realnem času temelji na nizu 101 baznega para gena manitol dehidrogenaze (GenBank dost. št. AF067082) zelene (Apium graveolens). Metoda je bila potrjena na klobasah na osnovi emulzije (bavarskih »Leberk?se«), ki vsebujejo zeleno. Mesna masa, ki je vsebovala masne deleže 50 % prašičjega mesa, 25 % prašičje maščobe, 23 % zdrobljenega ledu in 1,8 % mešanice natrijevega klorida, nitrita, nitrata, fosfatov in askorbatov, je bila za ta namen pripravljena po standardnem postopku za klobase na osnovi emulzije. Mesni masi so bila dodana mleta semena zelene ali korenina zelene v prahu, in sicer 1000 mg/kg. Manjši delež zelene je bil dosežen z redčenjem z maso brez zelene. Masa je bila nadevana v ovoje in 60 min segrevana na 65 °C.
General Information
Relations
Standards Content (Sample)
SLOVENSKI STANDARD
SIST-TS CEN/TS 15634-2:2012
01-april-2012
äLYLOD2GNULYDQMHSULVRWQRVWLDOHUJHQRYYåLYLOLK]PHWRGDPLPROHNXODUQHELRORJLMH
GHO =HOHQD $SLXPJUDYHROHQV .YDOLWDWLYQRGRORþDQMHVSHFLILþQHJDQL]D'1.
YREDUMHQLKNOREDVDKV3&5YUHDOQHPþDVX
Foodstuffs - Detection of food allergens by molecular biological methods - Part 2: Celery
(Apium graveolens) - Qualitative determination of a specific DNA sequence in cooked
sausages by real-time PCR
Lebensmittel - Nachweis von Lebensmittelallergenen mit molekularbiologischen
Verfahren - Teil 2: Sellerie (Apium graveolens) - Qualitative Bestimmung einer
spezifischen DNA-Sequenz in Brühwürsten mittels Real-time-PCR
Produits alimentaires - Détection des allergènes alimentaires par des méthodes
d'analyse de biologie moléculaire - Partie 2: Céleri (Apium graveolens) - Détermination
qualitative d'une séquence d'ADN spécifique dans des saucisses cuites par PCR en
temps réel
Ta slovenski standard je istoveten z: CEN/TS 15634-2:2012
ICS:
07.100.30 Mikrobiologija živil Food microbiology
67.050 Splošne preskusne in General methods of tests and
analizne metode za živilske analysis for food products
proizvode
SIST-TS CEN/TS 15634-2:2012 en,fr,de
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.
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SIST-TS CEN/TS 15634-2:2012
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SIST-TS CEN/TS 15634-2:2012
TECHNICAL SPECIFICATION
CEN/TS 15634-2
SPÉCIFICATION TECHNIQUE
TECHNISCHE SPEZIFIKATION
February 2012
ICS 07.100.30; 67.050
English Version
Foodstuffs - Detection of food allergens by molecular biological
methods - Part 2: Celery (Apium graveolens) - Qualitative
determination of a specific DNA sequence in cooked sausages
by real-time PCR
Produits alimentaires - Détection des allergènes
Lebensmittel - Nachweis von Lebensmittelallergenen mit
alimentaires par des méthodes d'analyse de biologie molekularbiologischen Verfahren - Teil 2: Sellerie (Apium
moléculaire - Partie 2: Céleri (Apium graveolens) - graveolens) - Qualitative Bestimmung einer spezifischen
Détermination qualitative d'une séquence d'ADN spécifique DNA-Sequenz in Brühwürsten mittels Real-time-PCR
dans des saucisses cuites par PCR en temps réel
This Technical Specification (CEN/TS) was approved by CEN on 15 November 2011 for provisional application.
The period of validity of this CEN/TS is limited initially to three years. After two years the members of CEN will be requested to submit their
comments, particularly on the question whether the CEN/TS can be converted into a European Standard.
CEN members are required to announce the existence of this CEN/TS in the same way as for an EN and to make the CEN/TS available
promptly at national level in an appropriate form. It is permissible to keep conflicting national standards in force (in parallel to the CEN/TS)
until the final decision about the possible conversion of the CEN/TS into an EN is reached.
CEN members are the national standards bodies of Austria, Belgium, Bulgaria, Croatia, Cyprus, Czech Republic, Denmark, Estonia,
Finland, France, Germany, Greece, Hungary, Iceland, Ireland, Italy, Latvia, Lithuania, Luxembourg, Malta, Netherlands, Norway, Poland,
Portugal, Romania, Slovakia, Slovenia, Spain, Sweden, Switzerland, Turkey and United Kingdom.
EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION
COMITÉ EUROPÉEN DE NORMALISATION
EUROPÄISCHES KOMITEE FÜR NORMUNG
Management Centre: Avenue Marnix 17, B-1000 Brussels
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worldwide for CEN national Members.
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SIST-TS CEN/TS 15634-2:2012
CEN/TS 15634-2:2012 (E)
Contents Page
Foreword .3
1 Scope .4
2 Principle .4
3 Reagents .4
4 Apparatus and equipment .6
5 Analysis steps .6
6 Validation status and performance criteria . 11
7 Sample
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.