EN ISO 19040-2:2022
(Main)Water quality - Determination of the estrogenic potential of water and waste water - Part 2: Yeast estrogen screen (A-YES, Arxula adeninivorans) (ISO 19040-2:2018)
Water quality - Determination of the estrogenic potential of water and waste water - Part 2: Yeast estrogen screen (A-YES, Arxula adeninivorans) (ISO 19040-2:2018)
This document specifies a method for the determination of the estrogenic potential of water and waste water by means of a reporter gene assay with a genetically modified yeast strain Arxula adeninivorans. This reporter gene assay is based on the activation of the human estrogen receptor alpha.
Arxula adeninivorans is a highly robust and salt- and temperature-tolerant test organism and is especially suitable for the analysis of samples with high salinity (conductivity up to 70 mS/cm). The test organism can be cultivated in medium with sodium chloride content up to 20 %.
This method is applicable to:
— fresh water;
— waste water;
— sea water;
— brackish water;
— aqueous extracts and leachates;
— eluates of sediments (fresh water);
— pore water;
— aqueous solutions of single substances or of chemical mixtures;
— drinking water.
The limit of quantification (LOQ) of this method for the direct analysis of water samples is between 1,5 ng/l and 3 ng/l 17β-estradiol equivalents (EEQ). The upper threshold of the dynamic range for this test is between 25 ng/l and 40 ng/l 17β-estradiol equivalents (EEQ). Samples showing estrogenic potencies above this threshold have to be diluted for a valid quantification. Extraction and pre-concentration of water samples can prove necessary, if their estrogenic potential is below the given LOQ.
An international interlaboratory trial for the validation of this document has been carried out. The results are summarized in Annex F.
NOTE Extraction and pre-concentration of water samples can prove necessary.
Wasserbeschaffenheit - Bestimmung des estrogenen Potentials von Wasser und Abwasser - Teil 2: Hefe-Estrogenscreening (A-YES, Arxula adeninivorans) (ISO 19040-2:2018)
Dieses Dokument legt ein Verfahren zur Bestimmung des estrogenen Potentials von Wasser und Abwasser mittels eines Reportergen-Assays mit einem gentechnisch veränderten Hefestamm von Arxula adeninivorans fest. Dieser Reportergen-Assay beruht auf der Aktivierung des humanen Estrogenrezeptors alpha.
Arxula adeninivorans ist ein sehr robuster sowie salz- und temperaturtoleranter Testorganismus, welcher besonders für die Analyse von Proben mit hohem Salzgehalt (Leitfähigkeit bis 70 mS/cm) geeignet ist. Der Testorganismus kann in einem Medium mit einem Natriumchloridgehalt von bis zu 20 % kultiviert werden.
Dieses Verfahren ist anwendbar auf:
Süßwasser;
Abwasser;
Meerwasser;
Brackwasser;
wässrige Extrakte und Sickerwasser;
Eluate von Sedimenten (Süßwasser);
Porenwasser;
wässrige Lösungen von Einzelsubstanzen oder von chemischen Gemischen;
Trinkwasser.
Die Bestimmungsgrenze (LOQ) dieses Verfahrens zur direkten Analyse von Wasserproben liegt zwischen 1,5 ng/l und 3 ng/l 17β Estradiol-Äquivalenten (EEQ). Der obere Schwellenwert des dynamischen Bereichs für diesen Test liegt zwischen 25 ng/l und 40 ng/l 17β Estradiol-Äquivalenten (EEQ). Proben, die estrogenes Potenzial oberhalb dieser Schwelle zeigen, müssen für eine gültige Quantifizierung verdünnt werden. Die Extraktion und Aufkonzentrierung von Wasserproben kann sich als notwendig erweisen, wenn ihr estrogenes Potential unter der angegebenen LOQ liegt.
Es wurde ein internationaler Ringversuch zur Validierung des Verfahrens durchgeführt. Die Ergebnisse sind in Anhang F zusammengefasst.
ANMERKUNG Eine Extraktion und Aufkonzentrierung von Wasserproben kann sich als notwendig erweisen.
Qualité de l'eau - Détermination du potentiel oestrogène de l'eau et des eaux résiduaires - Partie 2: Test d'oestrogénicité (A-YES, Arxula adeninivorans) (ISO 19040-2:2018)
Le présent document spécifie une méthode permettant de déterminer le potentiel œstrogénique de l’eau et des eaux résiduaires au moyen d’un essai avec un gène rapporteur à l’aide d’une souche de levure génétiquement modifiée Arxula adeninivorans. Cet essai avec gène rapporteur se fonde sur l’activation du récepteur des œstrogènes humains alpha. L’essai détecte la fraction du potentiel œstrogénique ou de l’œstrogénicité d’un échantillon qui est induite par les molécules interagissant avec le récepteur; il ne répond pas aux molécules ayant des modes d’action qui ne passent pas directement par le récepteur comme les modulateurs de la stéroïdogenèse, du transport ou de la clairance des stéroïdes sexuels.
L’essai A-YES (essai d’œstrogénicité sur levure Arxula) est un essai avec gène rapporteur qui peut être utilisé pour mesurer l'activation du récepteur alpha des œstrogènes humains (ERα) en présence d'un échantillon contenant des composés qui provoquent des effets œstrogéniques en interagissant avec le récepteur. Ainsi, le dosage détecte l’activité œstrogénique de l’ensemble de l’échantillon dans son état réel comme une mesure intégrale incluant les effets additifs, synergique et antagoniste possibles du mélange sur le récepteur des œstrogènes humains.
Arxula adeninivorans est un organisme d’essai très robuste, résistant au sel et à la température qui est particulièrement adapté à l’analyse d’échantillons ayant une salinité élevée (conductivité jusqu’à 70 mS/cm). L’organisme d’essai peut être cultivé dans un milieu contenant jusqu’à 20 % de chlorure de sodium.
Cette méthode est applicable:
— aux eaux douces;
— aux eaux résiduaires;
— à l’eau de mer;
— à l’eau saumâtre;
— aux extraits aqueux et lixiviats;
— aux éluats de sédiments (eau douce);
— aux eaux interstitielles;
— aux solutions aqueuses contenant des substances uniques ou des mélanges chimiques;
— à l’eau potable.
La limite de quantification (LDQ) de cette méthode pour l’analyse directe d’échantillons d’eau est comprise entre 1,5 ng/l et 3 ng/l d’équivalents 17β-œstradiol (EEQ). Le seuil supérieur de la gamme dynamique pour cet essai est compris entre 25 ng/l et 40 ng/l d’équivalent 17β-œstradiol (EEQ). Les échantillons présentant un potentiel œstrogénique supérieur à ce seuil doivent être dilués pour une quantification valable. L’extraction et la préconcentration des échantillons d’eau peuvent s’avérer nécessaires, si leur potentiel œstrogénique est inférieur à la LDQ donnée.
Un essai interlaboratoires international a été réalisé pour la validation du présent document. L’Annexe F fournit un récapitulatif des résultats.
NOTE L’extraction et la préconcentration des échantillons d’eau peuvent s’avérer nécessaires.
Kakovost vode - Določanje estrogenega potenciala vode in odpadne vode - 2. del: Presejalni preskus s kvasovkami (A-YES, Arxula adeninivorans) (ISO 19040-2:2018)
Ta dokument opisuje metodo za določevanje estrogenskega potenciala vode in odpadne vode z uporabo poročevalskega gena z gensko spremenjenimi sevi kvasovk Arxula adeninivorans. Poročevalski gen temelji na aktiviranju človeškega estrogenskega receptorja alfa.
Arxula adeninivorans je zelo robusten preskusni organizem, odporen na sol in temperaturo, in je posebej primeren za analiziranje vzorcev z zelo visoko vsebnostjo soli (prevodnost do 70 mS/cm). Preskusne organizme je mogoče gojiti v mediju z vsebnostjo natrijevega klorida do 20 %.
Ta metoda se uporablja za:
– sladko vodo;
– odpadno vodo;
– morsko vodo;
– somornico;
– vodne ekstrakte in izcedne vode;
– izlužke sedimentov (sladka voda);
– porno vodo;
– vodne raztopine posameznih snovi ali kemičnih mešanic;
– pitno vodo.
Mejna vrednost kvantifikacije (LOQ) te metode za neposredno analizo vzorcev vode je med 1,5 ng/l in 3 ng/l 17β-estradiol ekvivalentov (EEQ). Zgornja mejna vrednost dinamičnega razpona za ta preskus je med 25 ng/l in 40 ng/l 17β-estradiol ekvivalentov (EEQ). Vzorce, ki kažejo estrogene potence nad to mejo, je treba za veljavno kvantifikacijo razredčiti. Če je estrogenski potencial pod določeno mejno vrednostjo kvantifikacije, je morda potrebna ekstrakcija in predkoncentracija vzorcev vode.
Izveden je bil mednarodni medlaboratorijski preskus za ovrednotenje tega dokumenta. Rezultati so povzeti v dodatku F.
OPOMBA: Morda je potrebna ekstrakcija in predkoncentracija vodnih vzorcev.
General Information
Standards Content (Sample)
SLOVENSKI STANDARD
01-junij-2023
Kakovost vode - Določanje estrogenega potenciala vode in odpadne vode - 2. del:
Presejalni preskus s kvasovkami (A-YES, Arxula adeninivorans) (ISO 19040-
2:2018)
Water quality - Determination of the estrogenic potential of water and waste water - Part
2: Yeast estrogen screen (A-YES, Arxula adeninivorans) (ISO 19040-2:2018)
Wasserbeschaffenheit - Bestimmung des estrogenen Potentials von Wasser und
Abwasser - Teil 2: Hefe-Estrogenscreening (A-YES, Arxula adeninivorans) (ISO 19040-
2:2018)
Qualité de l'eau - Détermination du potentiel oestrogène de l'eau et des eaux résiduaires
- Partie 2: Test d'oestrogénicité (A-YES, Arxula adeninivorans) (ISO 19040-2:2018)
Ta slovenski standard je istoveten z: EN ISO 19040-2:2022
ICS:
13.060.70 Preiskava bioloških lastnosti Examination of biological
vode properties of water
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.
EN ISO 19040-2
EUROPEAN STANDARD
NORME EUROPÉENNE
September 2022
EUROPÄISCHE NORM
ICS 13.060.70
English Version
Water quality - Determination of the estrogenic potential
of water and waste water - Part 2: Yeast estrogen screen
(A-YES, Arxula adeninivorans) (ISO 19040-2:2018)
Qualité de l'eau - Détermination du potentiel Wasserbeschaffenheit - Bestimmung des estrogenen
oestrogène de l'eau et des eaux résiduaires - Partie 2: Potentials von Wasser und Abwasser - Teil 2: Hefe-
Test d'oestrogénicité (A-YES, Arxula adeninivorans) Estrogenscreening (A-YES, Arxula adeninivorans) (ISO
(ISO 19040-2:2018) 19040-2:2018)
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Contents Page
European foreword . 3
European foreword
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modification.
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 19040-2
First edition
2018-08
Water quality — Determination of
the estrogenic potential of water and
waste water —
Part 2:
Yeast estrogen screen (A-YES, Arxula
adeninivorans)
Qualité de l'eau — Détermination du potentiel oestrogène de l'eau et
des eaux résiduaires —
Partie 2: Test d'oestrogénicité (A-YES, Arxula adeninivorans)
Reference number
ISO 19040-2:2018(E)
©
ISO 2018
ISO 19040-2:2018(E)
© ISO 2018
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Published in Switzerland
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ISO 19040-2:2018(E)
Contents Page
Foreword .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 2
3 Terms and definitions . 2
4 Principle . 4
5 Interferences . 4
6 Apparatus and materials. 4
7 Reagents, media and test strains . 5
8 Sampling and samples . 9
8.1 General . 9
8.2 Bottles and material for sampling . 9
8.3 Bottles and material pre-cleaning .10
8.4 Sampling procedure .10
8.5 Transport of samples .10
8.6 Pretreatment of samples .10
8.7 Storage of samples .11
9 Procedure.11
9.1 Test set up .11
9.1.1 Preparation of the reference dilution series .11
9.1.2 Reactivation of the yeast .11
9.1.3 Negative control .12
9.1.4 Blank replicate .12
9.1.5 Sample dilution .12
9.1.6 Field blank .13
9.1.7 Plate set up .13
9.1.8 Inoculation of the test plate .13
9.2 Measurement .14
9.2.1 Measurement of the reporter gene activity .14
9.2.2 Measurement of the cell density .15
9.3 Calculations .15
9.3.1 Background correction .15
9.3.2 Calculation of the relative growth .16
9.3.3 Calculations for assessment of sample blanks .17
9.3.4 Calculation of the reporter gene induction .19
10 Validity criteria .22
11 Assessment criteria .23
12 Test report .23
13 Verification .23
Annex A (informative) Plate set up .25
Annex B (informative) Lyophilization of Arxula adeninivorans cells .26
Annex C (informative) Scheme of test principle .28
Annex D (informative) Test set up for chemicals and extracts .29
Annex E (informative) Preparation of dilution series .
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.