EN ISO 16256:2021

Clinical laboratory testing and in vitro diagnostic test systems - Broth micro-dilution reference method for testing the in vitro activity of antimicrobial agents against yeast fungi involved in infectious diseases (ISO 16256:2021)

This document describes a method for testing the susceptibility to antifungal agents of yeasts, including Candida spp. and Cryptococcus neoformans, that cause infections. The reference method described here has not been used in studies of the yeast forms of dimorphic fungi, such as Blastomyces dermatitidis and/or Histoplasma capsulatum variety capsulatum. Moreover, testing filamentous fungi (moulds) introduces several additional problems in standardization not addressed by the current procedure. Those methods are beyond the scope of this document.
This document describes the broth micro-dilution reference method, which can be implemented by either of two pathways. One pathway involves visual determination of MICs (CLSI method)[1][5]; the second pathway involves spectrophotometric determination of MICs (EUCAST method)[2][10]. The MIC reflects the activity of the drug under the described test conditions and can be interpreted for clinical management purposes by taking into account other factors, such as drug pharmacology or antifungal resistance mechanisms. In addition, MIC distributions can be used to define wild type or non-wild type fungal populations. Clinical interpretation of the MIC value is beyond the scope of this document; interpretive category breakpoints specific to the CLSI- and EUCAST-derived methods can be found by consulting the latest interpretive tables provided by the organizations[5][15]. Routine susceptibility testing methods or diagnostic test devices can be compared with this reference method in order to ensure comparable and reliable results for validation or registration purposes.

Labormedizinische Untersuchungen und In-vitro-Diagnostika-Systeme - Bouillon-Mikrodilution-Referenzmethode zur Testung der In-vitro-Aktivität von antimikrobiellen Substanzen gegen Sprosspilze, die Infektionskrankheiten verursachen (ISO 16256:2021)

Dieses Dokument beschreibt eine Methode zur Empfindlichkeitsprüfung von Sprosspilzen gegen Antimykotika, einschließlich Candida spp. und Cryptococcus neoformans, die Infektionen verursachen. Das hier beschriebene Referenzverfahren wurde nicht bei Untersuchungen der Hefeformen dimorpher Pilze, wie z. B. Blastomyces dermatitidis und/oder Histoplasma capsulatum Varietät capsulatum angewendet. Außerdem führt die Prüfung von fadenförmigen Pilzen (Schimmelpilzen) zu verschiedenen zusätzlichen Problemen hinsichtlich der Standardisierung, die in dem vorliegenden Verfahren nicht behandelt werden. Diese Methoden liegen außerhalb des Anwendungsbereiches dieses Dokuments.
Dieses Dokument beschreibt die Referenzmethode der Bouillon-Mikrodilution, die auf eine von zwei Weisen umgesetzt werden kann. Eine Weise umfasst die visuelle Bestimmung von MHKs (CLSI Methode) [1] [5]; die zweite die spektrophotometrische Bestimmung von MHKs (EUCAST Methode) [2 10]. Die MHK spiegelt die Aktivität des Wirkstoffs unter den beschriebenen Prüfbedingungen wider und kann unter Berücksichtigung anderer Faktoren, wie z. B. der Pharmakologie des Wirkstoffs oder antimykotischer Resistenzmechanismen, für die Zwecke der klinischen Behandlung interpretiert werden. Die Verteilung der MHK Werte kann zudem dazu dienen, Wildtyp-Pilzpopulationen von Nicht-Wildtyp-Pilzpopulationen zu unterscheiden. Die klinische Interpretation der MHK Werte fällt nicht in den Anwendungsbereich dieses Dokuments; erläuternde Grenzwerte für die Kategorien, die für die von CLSI und EUCAST abgeleiteten Methoden spezifisch sind, können durch Hinzuziehen der von den Organisationen bereitgestellten aktuellen Interpretationstabellen  [5 15] ermittelt werden. Die Routinemethoden oder Diagnosegeräte zur Empfindlichkeitsprüfung können mit dieser Referenzmethode verglichen werden, um vergleichbare und zuverlässige Ergebnisse für Validierungs- oder Registrierungszwecke sicherzustellen.
WARNUNG — Die Anwendung dieses Dokuments kann mit der Anwendung gefährlicher Stoffe, Verfahrensschritte und Ausrüstungsgegenstände verbunden sein. Dieses Dokument erhebt nicht den Anspruch, dass alle mit seiner Anwendung verbundenen Sicherheitsprobleme angesprochen werden. Es liegt in der Verantwortung des Anwenders dieses Dokuments, geeignete Vorkehrungen für den Arbeits- und Gesundheitsschutz zu treffen und vor der Anwendung die Anwendbarkeit einschränkender Vorschriften zu bestimmen.

Laboratoires d’analyses de biologie médicale et systèmes de diagnostic in vitro - Méthode de référence de microdilution en milieu liquide pour soumettre à essai l’activité in vitro des agents antimicrobiens par rapport aux levures impliquées dans les maladies infectieuses (ISO 16256:2021)

Le présent document décrit une méthode d’essai de la sensibilité aux agents antifongiques des levures pathogènes, dont Candida spp. et Cryptococcus neoformans. La méthode de référence décrite ici n’a pas été utilisée dans des études sur les phases levures de champignons dimorphes tels que Blastomyces dermatitidis et/ou Histoplasma capsulatum variété capsulatum. En outre, les essais sur les champignons filamenteux (moisissures) posent d’autres problèmes de normalisation qui ne sont pas traités par le présent mode opératoire. Ces méthodes vont au-delà du domaine d’application du présent document.
Le présent document décrit la méthode de référence de microdilution en milieu liquide qui peut être réalisée de deux façons. La première implique une détermination visuelle de la CMI (méthode CLSI)[1][5]; la seconde implique une détermination spectrophotométrique de la CMI (méthode EUCAST)[2][10]. La CMI reflète l’activité de l’agent antimicrobien dans les conditions d’essai décrites et peut, avec d’autres facteurs tels que la pharmacologie de l’agent ou les mécanismes de résistance antifongique, servir dans la prise de décision de traitement clinique. Par ailleurs, les CMI peuvent servir à définir les populations en types sauvage ou non sauvage. L’interprétation clinique de la CMI sort du domaine d’application du présent document. Des critères d’interprétation catégoriels spécifiques aux méthodes du CLSI et de l’EUCAST sont donnés dans les derniers tableaux d’interprétation édités par ces organismes[5][15]. Dans le cadre d’une validation ou d’un enregistrement, les méthodes d’essai de sensibilité de routine ou les dispositifs de diagnostic peuvent être comparés avec la présente méthode de référence, afin de garantir des résultats comparables et fiables.

Klinično laboratorijsko preskušanje ter diagnostični preskusni sistemi in vitro - Referenčna metoda za preskušanje aktivnosti in vitro antimikrobnih snovi proti glivam kvasovkam, ki povzročajo infekcijske bolezni (ISO 16256:2021)

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 26-Oct-2021
• ICS: 11.100.10 - In vitro diagnostic test systems
• Technical Committee: CEN/TC 140 - In vitro diagnostic systems
• Drafting Committee: CEN/TC 140 - In vitro diagnostic systems
• Current Stage: 6060 - Definitive text made available (DAV) - Publishing
• Start Date: 27-Oct-2021
• Completion Date: 27-Oct-2021
• Ref Project: SIST EN ISO 16256:2021 - Clinical laboratory testing and in vitro diagnostic test systems - Broth micro-dilution reference method for testing the in vitro activity of antimicrobial agents against yeast fungi involved in infectious diseases (ISO 16256:2021)

Relations

• Replaces: EN ISO 16256:2012 - Clinical laboratory testing and in vitro diagnostic test systems - Reference method for testing the in vitro activity of antimicrobial agents against yeast of fungi involved in infectious diseases (ISO 16256:2012)
• Effective Date: 08-Jun-2022

Standards Content (Sample)

SLOVENSKI STANDARD
01-december-2021
Nadomešča:
SIST EN ISO 16256:2013
Klinično laboratorijsko preskušanje ter diagnostični preskusni sistemi in vitro -
Referenčna metoda za preskušanje aktivnosti in vitro antimikrobnih snovi proti
glivam kvasovkam, ki povzročajo infekcijske bolezni (ISO 16256:2021)
Clinical laboratory testing and in vitro diagnostic test systems - Broth micro-dilution
reference method for testing the in vitro activity of antimicrobial agents against yeast
fungi involved in infectious diseases (ISO 16256:2021)
Labormedizinische Untersuchungen und In-vitro-Diagnostika-Systeme -
Referenzmethode zur Testung der In-vitro-Aktivität von antimikrobiellen Substanzen
gegen Pilze, die Infektionskrankheiten verursachen (ISO 16256:2021)
Laboratoires d’analyses de biologie médicale et systèmes de diagnostic in vitro -
Méthode de référence de microdilution en milieu liquide pour soumettre à essai l’activité
in vitro des agents antimicrobiens par rapport aux levures impliquées dans les maladies
infectieuses (ISO 16256:2021)
Ta slovenski standard je istoveten z: EN ISO 16256:2021
ICS:
11.100.10 Diagnostični preskusni In vitro diagnostic test
sistemi in vitro systems
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

EN ISO 16256
EUROPEAN STANDARD
NORME EUROPÉENNE
October 2021
EUROPÄISCHE NORM
ICS 11.100.10 Supersedes EN ISO 16256:2012
English Version
Clinical laboratory testing and in vitro diagnostic test
systems - Broth micro-dilution reference method for
testing the in vitro activity of antimicrobial agents against
yeast fungi involved in infectious diseases (ISO
16256:2021)
Laboratoires d'analyses de biologie médicale et Labormedizinische Untersuchungen und In-vitro-
systèmes de diagnostic in vitro - Méthode de référence Diagnostika-Systeme - Referenzmethode zur Testung
de microdilution en milieu liquide pour soumettre à der In-vitro-Aktivität von antimikrobiellen Substanzen
essai l'activité in vitro des agents antimicrobiens par gegen Pilze, die Infektionskrankheiten verursachen
rapport aux levures impliquées dans les maladies (ISO 16256:2021)
infectieuses (ISO 16256:2021)
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Contents Page
European foreword . 3

European foreword
This document (EN ISO 16256:2021) has been prepared by Technical Committee ISO/TC 212 "Clinical
laboratory testing and in vitro diagnostic test systems" in collaboration with Technical Committee
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Endorsement notice
The text of ISO 16256:2021 has been approved by CEN as EN ISO 16256:2021 without any modification.

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16256
Second edition
2021-10
Clinical laboratory testing and in
vitro diagnostic test systems — Broth
micro-dilution reference method
for testing the in vitro activity of
antimicrobial agents against yeast
fungi involved in infectious diseases
Laboratoires d’analyses de biologie médicale et systèmes de
diagnostic in vitro — Méthode de référence de microdilution en
milieu liquide pour soumettre à essai l’activité in vitro des agents
antimicrobiens par rapport aux levures impliquées dans les maladies
infectieuses
Reference number
ISO 16256:2021(E)
ISO 16256:2021(E)
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Published in Switzerland
ii
ISO 16256:2021(E)
Contents Page
Foreword .iv
Introduction . vi
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Test procedures . 3
4.1 General . 3
4.1.1 Trays and method . 3
4.1.2 Conditions for use of disposable micro-dilution trays . 3
4.2 Medium . 3
4.2.1 General . 3
4.2.2 Visual reading pathway. 3
4.2.3 Spectrophotometric reading pathway . 4
4.3 Antifungal agents . 4
4.3.1 General . 4
4.3.2 Preparation of stock solutions . 4
4.3.3 Preparation of working solutions . 5
4.4 Preparation of broth micro-dilution trays . 6
4.4.1 Preparation for tests read visually – Visual reading pathway . 6
4.4.2 Preparation for tests read by spectrophotometer - Spectrophometric
reading pathway . 6
4.5 Storage of micro-dilution trays. 6
4.6 Preparation of inoculum . 7
4.6.1 General . 7
4.6.2 Preparation of inoculum for visual test reading . 7
4.6.3 Preparation of inoculum for spectrophotometric test reading . 7
4.7 Inoculation of micro-dilution trays . 7
4.8 Incubation of micro-dilution trays . 8
4.8.1 General . 8
4.8.2 Visual pathway . 8
4.8.3 Spectrophotometric pathway . 8
4.9 Reading MIC results . 8
4.9.1 General . 8
4.9.2 Visual reading method . 8
4.9.3 Spectrophotometric reading methods . 8
4.10 Interpretation of MICs . 9
5 Quality Control (QC) . 9
Annex A (informative) RPMI-1640 medium .12
Annex B (informative) McFarland 0,5 barium sulfate turbidity standard .14
Bibliography .15
iii
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