ISO 5553:2024

Meat and meat products - Detection of condensed phosphates

This document specifies a method for the detection of linear condensed phosphates in meat and meat products by thin layer chromatographic separation. This document only applies to the detection of added condensed phosphates that are still present in the sample at the time of investigation, because condensed phosphates are gradually hydrolyzed by enzymes present in meat or meat products and during heat treatment of meat or meat products.

Viandes et produits à base de viande — Recherche des phosphates condensés

Le présent document spécifie une méthode de recherche des phosphates condensés linéaires dans les viandes et les produits à base de viande, après séparation par chromatographie sur couche mince. Le présent document s’applique uniquement à la recherche des phosphates condensés ajoutés qui sont encore présents dans l’échantillon au moment de la recherche, étant donné que les phosphates condensés sont progressivement hydrolysés par les enzymes présentes dans les viandes ou les produits à base de viande et au cours du traitement par la chaleur des viandes ou des produits à base de viande.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 22-Feb-2024
• ICS: 67.120.10 - Meat and meat products
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 6 - Meat, poultry, fish, eggs and their products
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 6 - Meat, poultry, fish, eggs and their products
• Current Stage: 6060 - International Standard published
• Start Date: 23-Feb-2024
• Due Date: 04-Jun-2024
• Completion Date: 23-Feb-2024

Relations

• Revises: ISO 5553:1980 - Meat and meat products - Detection of polyphosphates
• Effective Date: 06-Jun-2022

Overview

ISO 5553:2024 - Meat and meat products - Detection of condensed phosphates specifies a laboratory method for detecting linear condensed phosphates added to meat and meat products using thin‑layer chromatography (TLC). The method targets condensed phosphates that are still present in the sample at analysis time (they can be gradually hydrolyzed by meat enzymes or heat). This second edition updates reagents, sampling guidance, limit of detection and validation information.

Key topics and technical requirements

• Scope: Detection of added linear condensed phosphates (not applicable to completely hydrolyzed residues).
• Principle: Extraction with trichloroacetic acid, serum clarification (ethanol/diethyl ether), TLC separation on cellulose plates and colour development with two spray reagents.
• Sample requirements: Start from a representative sample (recommendation: ≥200 g received; homogenize and analyse promptly - serum prep from 50 g test portion).
• Reagents & apparatus: Lists analytical‑grade reagents (trichloroacetic acid, ammonium molybdate, 1‑amino‑2‑naphthol‑4‑sulphonic acid, developing solvent) and TLC equipment (cellulose plates, spreading device, developing tank, pipettes, oven).
• Procedure highlights:
  • Prepare cellulose TLC plates (or use ready‑made).
  • Apply serum and a reference mixture (orthophosphate, diphosphate, triphosphate, hexametaphosphate) to the plate.
  • Develop with a specified isopropyl alcohol / trichloroacetic acid / ammonium hydroxide solvent.
  • Detect with Spray Reagent I (yellow spots) and optionally Spray Reagent II (intense blue spots) for improved detection.
• Limit of detection (LOD): 0.5 g/kg for orthophosphate, diphosphate, triphosphate and hexametaphosphate.
• Validation: Contains interlaboratory test data; includes repeatability and reproducibility guidance and Rf (R) reference ranges for the reference mixture.

Applications and users

• Food testing laboratories performing food safety and quality control analysis for meat products.
• Regulatory authorities and inspection bodies verifying compliance with labeling and additive use rules.
• Meat processors and quality assurance teams monitoring process control, ingredient addition and traceability.
• Research laboratories studying phosphate degradation/hydrolysis in meat matrices.

Related standards

• ISO 3696 - Water for analytical laboratory use (referenced for water quality).
• CAC/GL 50‑2004 - Recommended sampling method for foods (sampling guidance mentioned).

Keywords: ISO 5553:2024, condensed phosphates, meat testing, thin layer chromatography, TLC, limit of detection, food quality control, phosphate detection, analytical method.

Standards Content (Sample)

International
Standard
ISO 5553
Second edition
Meat and meat products —
2024-02
Detection of condensed phosphates
Viandes et produits à base de viande — Recherche des phosphates
condensés
Reference number
© ISO 2024
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CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: [phone]
Email: [e-mail]
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii
Contents Page
Foreword .iv
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 1
5 Sampling . 1
6 Preparation of the test sample. 1
7 Reagents and apparatus . 2
7.1 Reagents .2
7.2 Apparatus .3
8 Procedure . 4
8.1 Preparation of thin-layer plates .4
8.2 Preparation of serum .4
8.3 Chromatographic separation .4
8.4 Detection of phosphates .5
8.5 Limit of detection .5
8.6 Repeatability and reproducibility .5
9 Interpretation . 5
10 Test report . 5
Annex A (informative) Interlaboratory test . 7
Annex B (informative) Thin layer chromatograms of reference mixture . 8
Bibliography . 9

iii
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee
has been established has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely
with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described
in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the different types
of ISO document should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the
ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
ISO draws attention to the possibility that the implementation of this document may involve the use of (a)
patent(s). ISO takes no position concerning the evidence, validity or applicability of any claimed patent
rights in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a)
patent(s) which may be required to implement this document. However, implementers are cautioned that
this may not represent the latest information, which may be obtained from the patent database available at
www.iso.org/patents. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and expressions
related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the World Trade
Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 6, Meat,
poultry, fish, eggs and their products.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 5553:1980), which has been technically
revised.
The main changes are as follows:
— term “polyphosphates” has been revised to “condensed phosphates”;
— clauses have been reordered;
— Clause 5 “Sampling” has been updated;
— Clause 7 “Reagents and Apparatus” has been updated;
— the amount of extracting solution has been revised and the temperature conditions of the extracting
solution has been deleted (8.2.1);
— “Limit of detection” has been added (8.5);
— “Repeatability and reproducibility” has been added (8.6);
— Clause 9 “Interpretation” has been modified and the R values of the phosphates in the reference mixture
F
have been revised;
— “Annex A” and “Annex B” have been added;
— “Bibliography” has been added.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.

iv
International Standard ISO 5553:2024(en)
Meat and meat products — Detection of condensed
phosphates
1 Scope
This document specifies a method for the detection of linear condensed phosphates in meat and meat
products by thin layer chromatographic separation.
This document only applies to the detection of added condensed phosphates that are still present in the
sample at the time of investigation, because condensed phosphates are gradually hydrolyzed by enzymes
present in meat or meat products and during heat treatment of meat or meat products.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content constitutes
requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For undated references,
the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 3696, Water for analytical laboratory use — Specification and test methods
3 Terms and definitions
No terms and definitions are listed in this document.
ISO and IEC maintain terminology databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at https:// www .electropedia .org/
4 Principle
Extraction of the meat or meat products with trichloroacetic acid. Clearing of the serum obtained with
ethanol/diethyl ether mixture. Separation of the phosphates by thin layer chromatography and detection of
condensed phosphates by spraying with reagents for colour development.
5 Sampling
Sampling is not part of the method specified in this document. A recommended sampling method is given in
CAC/GL 50-2004.
It is important that the laboratory-received sample is truly representative and has not been damaged or
changed during transport or storage.
Start from a representative sample of at least 200 g. Store the sample in such a way that deterioration and
change in composition are prevented.
6 Preparation of the
...

Norme
internationale
ISO 5553
Deuxième édition
Viandes et produits à base
2024-02
de viande — Recherche des
phosphates condensés
Meat and meat products — Detection of condensed phosphates
Numéro de référence
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
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ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: [phone]
E-mail: [e-mail]
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii
Sommaire Page
Avant-propos .iv
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe. 1
5 Échantillonnage . 1
6 Préparation de l’échantillon pour essai . 2
7 Réactifs et appareillage . 2
7.1 Réactifs .2
7.2 Appareillage .3
8 Mode opératoire . 4
8.1 Préparation des plaques à couche mince .4
8.2 Préparation du sérum .4
8.3 Séparation par chromatographie .4
8.4 Recherche des phosphates .5
8.5 Limite de détection .5
8.6 Répétabilité et reproductibilité .5
9 Interprétation . 5
10 Rapport d’essai . 6
Annexe A (informative) Essai interlaboratoires . 7
Annexe B (informative) Chromatogrammes sur couche mince du mélange de référence . 8
Bibliographie . 9

iii
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO, participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document
a été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2
(voir www.iso.org/directives).
L’ISO attire l’attention sur le fait que la mise en application du présent document peut entraîner l’utilisation
d’un ou de plusieurs brevets. L’ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité et à l’applicabilité de
tout droit de brevet revendiqué à cet égard. À la date de publication du présent document, l’ISO n'avait pas
reçu notification qu’un ou plusieurs brevets pouvaient être nécessaires à sa mise en application. Toutefois,
il y a lieu d’avertir les responsables de la mise en application du présent document que des informations
plus récentes sont susceptibles de figurer dans la base de données de brevets, disponible à l'adresse
www.iso.org/brevets. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir identifié tout ou partie de
tels droits de propriété.
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données pour
information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion de
l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au
commerce (OTC), voir www.iso.org/avant-propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité
SC 6, Viandes, volailles, poissons, œufs et leurs produits dérivés.
Cette seconde édition annule et remplace la première édition (ISO 5553:1980) qui a fait l'objet d'une révision
technique.
Les principales modifications sont les suivantes:
— le terme « polyphosphates » a été remplacé par « phosphates condensés »;
— l’ordre des articles a été réorganisé;
— l’Article 5 « Échantillonnage » a été mis à jour;
— l’Article 7 « Réactifs et appareillage » a été mis à jour;
— la quantité de solution d’extraction a été modifiée et les conditions de température de la solution
d’extraction ont été supprimées (8.2.1);
— une « limite de détection » a été ajoutée (8.5);
— un paragraphe sur la « répétabilité et la reproductibilité » a été ajouté (8.6);
— l’Article 9 « Interprétation » a été révisé et les valeurs du R des phosphates dans le mélange de référence
F
ont été révisées;
— l’« Annexe A » et l’« Annexe B » ont été ajoutées;
— une « Bibliographie » a été ajoutée.

iv
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes se
trouve à l’adresse www.iso.org/fr/members.html.

v
Norme internationale ISO 5553:2024(fr)
Viandes et produits à base de viande — Recherche des
phosphates condensés
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie une méthode de recherche des phosphates condensés linéaires dans les
viandes et les produits à base de viande, après séparation par chromatographie sur couche mince.
Le présent document s’applique uniquement à la recherche des phosphates condensés ajoutés qui sont
encore présents dans l’échantillon au moment de la recherche, étant donné que les phosphates condensés
sont progressivement hydrolysés par les enzymes présentes dans les viandes ou les produits à base de
viande et au cours du traitement par la chaleur des viandes ou des produits à base de viande.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour
les références non datées, la dernière édition de la publication à laquelle il est fait référence s'applique (y
compris tous les amendements).
ISO 3696, Eau pour laboratoire à usage analytique — Spécification et méthodes d'essai
3 Termes et définitions
Aucun terme n’est défini dans le présent document.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en normalisation,
consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse https:// www .electropedia .org/
4 Principe
Extraction des viandes ou des produits à base de viande par l’acide trichloracétique. Défécation du sérum
obtenu au moyen d’un mélange éthanol/oxyde de diéthyle. Séparation des phosphates par chromatographie
sur couche mince et recherche des phosphates condensés par pulvérisation avec des réactifs de
développement de la couleur.
5 Échantillonnage
L’échantillonnage ne fait pas partie de la méthode spécifiée dans le présent document. Une méthode
d’échantillonnage recommandée est indiquée dans les Directives CAC/GL 50-2004.
Il est important que l'échantillon reçu par le laboratoire soit réellement représentatif et qu'il n'ait pas été
endommagé ni altéré pendant le transport ou le stockage.
Démarrer à partir d’un échantillon représentatif d’au moins 200 g. Conserver l’échantillon de façon à éviter
toute détérioration et toute modification de sa composition.

6 Préparation de l’échantillon pour essai
Homogénéiser l'échantillon avec l’équipement approprié (7.2.5). Si un hachoir à viande mécanique à plaque
est utilisé, passer l’échantillon au moins deux fois dans l’app
...