ISO 21187:2021

Milk - Quantitative determination of microbiological quality - Guidance for establishing and verifying a conversion relationship between results of an alternative method and anchor method results

This document gives guidelines for the establishment of a conversion relationship between the results of an alternative method and an anchor method, and its verification for the quantitative determination of the microbiological quality of milk. NOTE The conversion relationship can be used a) to convert results from an alternative method to the anchor basis or b) to convert results/limits, expressed on an anchor basis, to results in units of an alternative method.

Lait — Mesure quantitative de la qualité microbiologique — Lignes directrices pour établir et vérifier une relation de conversion entre les résultats de la méthode alternatif et les résultats de la méthode d’ancrage

Le présent document donne des lignes directrices pour l'établissement d'une relation de conversion entre les résultats d'une méthode alternative et les résultats d'une méthode d'ancrage, et sa vérification en vue de la détermination quantitative de la qualité microbiologique du lait. NOTE La relation de conversion peut être utilisée a) pour convertir les résultats d'une méthode alternative sur la base de la méthode d'ancrage ou b) pour convertir les résultats/limites exprimés sur la base de la méthode d'ancrage, en résultats exprimés dans les unités d'une méthode alternative.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 22-Feb-2021
• ICS: 07.100.30 - Food microbiology
• ICS: 67.100.01 - Milk and milk products in general
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Current Stage: 6060 - International Standard published
• Start Date: 23-Feb-2021
• Due Date: 10-Mar-2020
• Completion Date: 23-Feb-2021

Relations

• Consolidates: ISO 11898-2:2016 - Road vehicles - Controller area network (CAN) - Part 2: High-speed medium access unit
• Effective Date: 06-Jun-2022
• Revises: ISO 21187:2004 - Milk - Quantitative determination of bacteriological quality - Guidance for establishing and verifying a conversion relationship between routine method results and anchor method results
• Effective Date: 10-Dec-2016

Overview

ISO 21187:2021 - Milk - Quantitative determination of microbiological quality - Guidance for establishing and verifying a conversion relationship between results of an alternative method and anchor method results - provides practical guidance for converting quantitative microbiological results obtained with an alternative method to the scale of a defined anchor method, and for verifying that conversion. The document focuses on milk and addresses how to make results and regulatory limits comparable across methods so that rapid or novel analytical approaches can be used in place of traditional methods while maintaining traceability and confidence in results.

Key topics and technical requirements

• Scope and purpose: Guidelines for establishing and verifying a conversion relationship for quantitative microbiological testing of milk; conversion can be used both to express alternative-method results on an anchor-method basis and to translate anchor-method limits into alternative-method units.
• Principles: Distinguishes conversion from calibration - conversion aligns different methodological scales rather than attempting to define a “true” microbiological value.
• Factors influencing conversion relationship: Environmental (animal species, bulk-milk storage, seasonal variation, production conditions), sampling and pre-treatment, and analytical (instrument make/model, reagents, high somatic cell counts).
• Test-sample design: Guidance on number, range and representativeness of test samples, pre-treatment, sub-sampling, storage and transport.
• Analysis and statistical treatment: Establishing the conversion relationship (now based on grouped data in the 2021 edition), removal/identification of outliers, linear regression approaches and calculation methods.
• Verification and frequency: Procedures for ongoing verification of the conversion relationship and statistical tests to confirm continued validity.
• Reporting: Required elements for test reports and annexes with worked examples (outlier identification, conversion calculation, verification spreadsheets).

Practical applications

• Enabling adoption of rapid or automated microbiological methods in dairy quality control by translating their output to established regulatory/anchor-method units.
• Supporting method validation and method-comparison studies for milk microbiology.
• Facilitating regulatory compliance, trade, and supplier/laboratory equivalence when different labs use different validated methods.
• Informing decisions about quality limits, acceptance criteria, and corrective actions based on alternative-method results.

Who should use this standard

• Dairy laboratory managers and quality-control personnel
• Method developers and instrument manufacturers
• Regulatory authorities and food safety auditors
• Accreditation bodies and testing laboratories performing microbiological analyses on milk

Related standards

• ISO 8196‑1 / IDF 128‑1 and ISO 8196‑2 / IDF 128‑2 (accuracy, calibration and quality control of alternative milk analysis methods)
• ISO 16140‑1 (microbiology method validation vocabulary)

ISO 21187:2021 helps dairy stakeholders convert, verify and confidently use alternative microbiological methods while preserving comparability and traceability to anchor-method results.

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 21187
IDF 196
Second edition
2021-02
Milk — Quantitative determination of
microbiological quality — Guidance
for establishing and verifying a
conversion relationship between
results of an alternative method and
anchor method results
Lait — Mesure quantitative de la qualité microbiologique — Lignes
directrices pour établir et vérifier une relation de conversion entre
les résultats de la méthode alternatif et les résultats de la méthode
d’ancrage
Reference numbers
IDF 196:2021(E)
©
ISO and IDF 2021
IDF 196:2021(E)
© ISO and IDF 2021
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
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CP 401 • Ch. de Blandonnet 8 Silver Building • Bd Auguste Reyers 70/B
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Website: www.iso.org Website: www.fil-idf.org
Published in Switzerland
ii © ISO and IDF 2021 – All rights reserved

IDF 196:2021(E)
Contents Page
Foreword .v
Introduction .vii
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principles . 2
4.1 General . 2
4.2 Guidance for applied methods and laboratories . 2
4.3 Organizational set-up . 3
5 Consideration of factors influencing the conversion relationship . 3
5.1 General . 3
5.2 Environmental factors . 3
5.2.1 General. 3
5.2.2 Animal species . 4
5.2.3 Bulk milk storage conditions . 4
5.2.4 Seasonal variations . 4
5.2.5 Sampling and pre-treatment of the test samples . 4
5.2.6 Test sample preservation . 4
5.2.7 Milk production conditions . 4
5.3 Analytical factors . 5
5.3.1 Instrument make and model . 5
5.3.2 Chemicals . 5
5.3.3 High somatic cell counts . 5
6 Test samples . 5
6.1 Calculation of number of test samples . 5
6.2 Range of test samples . 6
6.3 Representativeness of samples . 6
6.4 Pre-treatment of test samples . 6
6.4.1 General. 6
6.4.2 Preparation of sub-samples . 6
6.4.3 Storage and transport of sub-samples . 7
7 Analysis . 7
8 Establishing a conversion relationship . 7
8.1 General . 7
8.2 Validity of results . 7
8.3 Conversion relationship . 8
8.4 Calculations . 8
8.4.1 General. 8
8.4.2 Removal of outliers . 8
8.4.3 Conversion relationship . 8
9 Verification of a conversion relationship . 9
9.1 Frequency of verification . 9
9.2 Calculation . 9
10 Test report . 9
Annex A (informative) Number of test samples for linear regression.11
Annex B (informative) Example identification of outliers and calculation of conversion
relationship.14
Annex C (informative) Example — Calculation of significance (verification of conversion
relationship) .15
IDF 196:2021(E)
Bibliography .19
iv © ISO and IDF 2021 – All rights reserved

IDF 196:2021(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national
standards bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally
carried out through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which
a technical committee has been established has the right to be represented on that committee.
International organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part
in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all
matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/ directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/ patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www .iso .org/
iso/ foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5,
Milk and milk products, in collaboration with the European Committee for Standardization (CEN)
Technical Committee CEN/TC 302, Milk and milk products — Methods of sampling and analysis, in
accordance with the Agreement on technical cooperation between ISO and CEN (Vienna Agreement),
and the International Dairy Federation (IDF). It is being published jointly by ISO and IDF.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 21187 | IDF 196:2004), which has been
technically revised. The main changes compared with the previous edition are as follows:
— the formula describing the conversion relationship has been based on grouped data rather than
data from individual samples;
— examples of how to perform outlier tests, and calculation and verification of conversion relationships
have been given in a spreadsheet.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/ members .html.
IDF 196:2021(E)
IDF (the International Dairy Federation) is a non-profit private sector organization representing the
interests of various stakeholders in dairying at the global level. IDF members are organized in National
Committees, which are national associations composed of representatives of dairy-related national
interest groups including dairy farmers, dairy processing industry, dairy suppliers, academics and
governments/food control authorities.
ISO and IDF collaborate closely on all matters of standardization relating to methods of analysis
and sampling for milk and milk products. Since 2001, ISO and IDF jointly publish their International
Standards using the logos and reference numbers of both organizations.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. IDF shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/ patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
This document was prepared by the IDF Standing Committee on Statistics and Automation and ISO
Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5, Milk and milk products. It is being
published jointly by IDF and ISO.
The work was carried out by the IDF/ISO Action Team (S11) of the Standing Committee on Statistics
and Automation under the aegis of its project leaders, Ms B. Asmussen (DK), Ms V. Tzeneva (NL), Mr R.
Kissling (NZ) and Ms B. Müller (DE).
vi © ISO and IDF 2021 – All rights reserved

IDF 196:2021(E)
Introduction
Conversion in quantitative microbiology means expressing the result of a quantitative determination
of the microbiological status of a test sample obtained with an alternative method in units of another
method, generally an anchor method. Through this, quantitative results obtained with alternative
methods can be compared to values or limits that are stated in anchor method units. For establishing
and applying a conversion relationship, a number of prerequisites should be met. These are referred to
in this document, but are generally described elsewhere.
Although a considerable part of the applied principles for conversion coincides with those applied for
the calibration of indirect or alternative methods against an anchor method, or by means of (certified)
reference materials, it is stressed that the background and aims for applying conversion are different
from those for calibration. Calibration involves the determination of the adjustment needed for each
level of an analyte to closely approximate the true value of its concentration or number. However, in
quantitative microbiology, a true value in its strict sense cannot be established and is only defined by the
method description applied. When applying alternative methods in the quantitative determination of
microbiological quality, one is often dealing with different methodological principles and therefore also
other units. Conversion is used to transfer results obtained with different methods to a common scale.
INTERNATIONAL STANDARD
IDF 196:2021(E)
Milk — Quantitative determination of microbiological
quality — Guidance for establishing and verifying a
conversion relationship between results of an alternative
method and anchor method results
1 Scope
This document gives guidelines for the establishment of a conversion relationship between the results
of an alternative method and an anchor method, and its verification for the quantitative determination
of the microbiological quality of milk.
NOTE The conversion relationship can be used a) to convert results from an alternative method to the anchor
basis or b) to convert results/limits, expressed on an anchor basis, to results in units of an alternative method.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 8196-1 | IDF 128-1, Milk — Definition and evaluation of the overall accuracy of alternative methods of
milk analysis — Part 1: Analytical attributes of alternative methods
ISO 8196-2 | IDF 128-2, Milk — Definition and evaluation of the overall accuracy of alternative methods of
milk analysis — Part 2: Calibration and quality control in the dairy laboratory
ISO 16140-1, Microbiology of the food chain — Method validation — Part 1: Vocabulary
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the terms and definitions given in ISO 8196-1 | IDF 128-1,
ISO 8196-2 | IDF 128-2, ISO 16140-1 and the following apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at http:// www .electropedia .org/
3.1
alternative method
method of analysis allowing quantification of the microbiological status of a test sample
Note 1 to entry: The method can be proprietary or non-commercial.
Note 2 to entry: The term “alternative” in this document refers to the entire method. It includes all aspects (such
as test sample pre-treatment, materials and instruments) required for the execution of the method.
IDF 196:2021(E)
3.2
anchor method
method of analysis internationally recognized by experts or by agreement between parties, and used,
for instance, in legislation when expressing official limits for microbiological quality
Note 1 to entry: It is stressed that, in quantitative microbiology, any obtained value is only defined by the method
description applied. This applies to any alternative method as well as, for instance, to the standard plate count
for the enumeration of microorganisms.
3.3
analyte
component or property which is measured by the method of analysis
Note 1 to entry: The analyte can be the microorganism, stained particles (e.g. microscopic count), components
of microorganisms (e.g. lipopolysaccharides), the result of their ability to multiply (e.g. colony-forming units) or
their metabolic activity (e.g. change in conductivity/impedance).
3.4
organizing body
organization, possibly appointed by a competent authority, having the qualified staff and skills to
organize, coordinate and report on the outcome of the activities for the establishment and/or the
maintenance of a conversion relationship
3.5
measuring range
range wherein data with known precision and accuracy can be obtained
Note 1 to entry: Precision and accuracy data are determined in a validation study (e.g. by the instrument
manufacturer or a responsible organization).
3.6
range of interest
numerical values for alternative method results, typical of routine samples when analysing in a
laboratory
Note 1 to entry: If applicable, the range of interest shall include official limits and limits related to specific quality
schemes.
4 Principles
4.1 General
The establishment and verification of a conversion relationship is based on the examination of test
samples with an alternative method and the anchor method.
4.2 Guidance for applied methods and laboratories
For establishing and verifying a conversion relationship between the results of an alternative method
and the anchor method, the following prerequisites apply.
The alternative method should have been evaluated and validated in accordance with ISO 16140-2
and/or ISO 16297 | IDF 161. Procedures for sampling, test sample preservation, test sample transport,
test sample storage, sample pre-treatment, analysis and calculation of results should be documented,
[6]
strictly standardized and controlled in agreement with ISO/IEC 17025, the Eurachem Guide or
comparable standards.
Regular participation in proficiency tests and training according to the relevant standards, e.g.
ISO 4833-1, ISO 14461-2 | IDF 169-2, is strongly recommended.
2 © ISO and IDF 2021 – All rights reserved

IDF 196:2021(E)
The anchor method should have been validated, documented, strictly standardized and controlled in
agreement with ISO/IEC 17025, the Eurachem Guide or comparable standards.
The protocol for the establishment of the conversion relationship and its verification should be
documented. It should follow the guidelines of this document.
4.3 Organizational set-up
There are various possible organizational set-ups, e.g. both the alternative and the anchor method are
fully carried out in the same laboratory, or several laboratories are involved in the trial.
Due to the instability and variability of the microbiological status of milk samples, the most robust
conversion relationships will be obtained where the alternative method and the anchor method are
undertaken on the same test samples, at the same place, at the same time. It is recommended to ensure
that either the sequence of testing does not impose significant influence on the test results or the
method with the lowest influence on the milk sample is applied first.
Subsampling should be avoided. However, in case of two or more participating laboratories subsamples
may be necessary.
In all cases, the organizational set-up should include all the necessary provisions to guarantee that the
obtained conversion relationship is representative of the circumstances under which the alternative
method is carried out and the resulting conversion relationship is later applied. Factors to consider are
listed in Clause 5.
The organizing body should provide guidance to the collaborating laboratories. Furthermore, it should
collect information on critical points in the procedure. All collaborators should be asked to record
relevant information, such as details on the method(s) used, details on the testing of samples, quality
control data, and possibly data about storage and transport conditions.
5 Consideration of factors influencing the conversion relationship
5.1 General
A number of factors can influence the outcome of alternative method or anchor method determinations,
or both. The relative magnitude of the effects can differ between test samples and is not necessarily
the same for both methods. This implies that certain factors can also influence the conversion
relationship. In the evaluation of an alternative method, all relevant factors should be identified and
should be considered since it is necessary to cover the consequences of their variation in one conversion
relationship, or otherwise to establish distinct conversion relationships.
In general, when distinction between test samples cannot be made, or is not being made in routine
testing circumstances, the variation in the underlying variables should be covered in one conversion
relationship. Where a factor is shown to have a significant effect on the conversion relationship, more
than one conversion relationship may need to be established and applied, e.g. with collection of milk
from farms twice daily and every three days.
Influencing factors are grouped into environmental factors affecting the milk sample, e.g. content of
type of bacterial flora or background noise from the sample matrix, and analytical factors which relate
to the analysis itself, e.g. reagents. Some factors that can influence the conversion relationship in raw
milk analysis are given in 5.2 and 5.3. Some of these factors can also be applied to other situations.
5.2 Environmental factors
5.2.1 General
The microbiological flora of a milk sample, i.e. the type of microorganisms, their growth phase or
metabolic activity, influences the outcome of the measurement depending on the principle of the
IDF 196:2021(E)
method. For example, with the plate count method according to ISO 4833-1 only microorganisms
viable under the respective growth conditions are determined, whereas with a flow-cytometric
method all stainable microorganisms with a signal above the discriminator level are counted. This
can have a significant impact on the conversion relationship. The normal variation of microbiological
flora should be included in the test sample set that is used to determine a conversion relationship.
Microorganisms in milk originate from the udder, the teat skin, from the air and from contamination
from feedstuff, milking equipment and containers. The number and type of bacteria in milk can depend
on the general characteristics of milk production such as the method of milking, storage conditions and
collection intervals. The growth phase is dependent on the sample handling. Thus, there are numerous
environmental factors influencing the microbiological flora of a milk sample. Some of these factors,
which should be considered in the organizational set-up of the trial, are listed in 5.2.2 to 5.2.7.
5.2.2 Animal species
Animal species can have an impact on the bacterial flora in their milk, either directly through
differences in the type of flora or in the production environment, or indirectly through composition and
properties of the milk influencing the growth conditions for microorganisms. This can affect analytical
results with different methods in different ways and therefore the conversion relationship.
5.2.3 Bulk milk storage conditions
The storage and shipping conditions of the bulk milk will affect the number of bacteria and their growth
phase. When official limits are stated depending on the storage conditions (e.g. time, temperature)
and those conditions have a significant effect on the conversion relationship, distinct conversion
relationshi
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 21187
FIL 196
Deuxième édition
2021-02
Lait — Mesure quantitative de la
qualité microbiologique — Lignes
directrices pour établir et vérifier
une relation de conversion entre les
résultats de la méthode alternatif et
les résultats de la méthode d’ancrage
Milk — Quantitative determination of microbiological quality —
Guidance for establishing and verifying a conversion relationship
between results of an alternative method and anchor method results
Numéros de référence
FIL 196:2021(F)
©
ISO et FIL 2021
FIL 196:2021(F)
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Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office International Dairy Federation
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8 Silver Building • Bd Auguste Reyers 70/B
CH-1214 Vernier, Genève B-1030 Brussels
Tél.: [phone] Tél.: + 32 2 325 67 40
Fax: + 32 2 325 67 41
E-mail: [e-mail] E-mail: [e-mail]
Web: www.iso.org Web: www.fil-idf.org
Publié en Suisse
ii © ISO et FIL 2021 – Tous droits réservés

FIL 196:2021(F)
Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction .vii
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principes . 2
4.1 Généralités . 2
4.2 Recommandations concernant les méthodes appliquées et les laboratoires . 2
4.3 Mise en place de l’organisation . 3
5 Prise en compte des facteurs influençant la relation de conversion .3
5.1 Généralités . 3
5.2 Facteurs environnementaux . 4
5.2.1 Généralités . 4
5.2.2 Espèce animale . 4
5.2.3 Conditions de stockage du lait en vrac . 4
5.2.4 Variations saisonnières . 4
5.2.5 Échantillonnage et traitement préalable des échantillons pour essai . 4
5.2.6 Conservation des échantillons pour essai . 4
5.2.7 Conditions de production du lait . 5
5.3 Facteurs analytiques . 5
5.3.1 Marque et modèle d’instrument . 5
5.3.2 Produits chimiques . 5
5.3.3 Taux élevé de cellules somatiques . 5
6 Échantillons pour essai. 5
6.1 Calcul du nombre d’échantillons pour essai . 5
6.2 Plage des échantillons pour essai . 6
6.3 Représentativité des échantillons . 6
6.4 Traitement préalable des échantillons pour essai . 6
6.4.1 Généralités . 6
6.4.2 Préparation des sous-échantillons . 7
6.4.3 Stockage et transport des sous-échantillons . 7
7 Analyse . 7
8 Établissement d’une relation de conversion . 7
8.1 Généralités . 7
8.2 Validité des résultats . 8
8.3 Relation de conversion . 8
8.4 Calculs . 8
8.4.1 Généralités . 8
8.4.2 Élimination des valeurs aberrantes . . 8
8.4.3 Relation de conversion . 9
9 Vérification d’une relation de conversion . 9
9.1 Fréquence de vérification . 9
9.2 Calcul .10
10 Rapport d’essai .10
Annexe A (informative) Nombre d’échantillons pour essai dans une régression linéaire .11
Annexe B (informative) Exemple d’identification des valeurs aberrantes et de calcul de
la relation de conversion .14
Annexe C (informative) Exemple — Calcul de la signification (vérification de la relation
de conversion) .15
© ISO et FIL 2021 – Tous droits réservés iii

FIL 196:2021(F)
Bibliographie .19
iv © ISO et FIL 2021 – Tous droits réservés

FIL 196:2021(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/ directives).
L’attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion
de l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/ iso/ fr/ avant -propos .html.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 5, Lait et produits laitiers, en collaboration avec le comité technique CEN/TC 302, Lait et
produits laitiers — Méthodes d’échantillonnage et d’analyse, du Comité européen de normalisation
(CEN), conformément à l’Accord de coopération technique entre l’ISO et le CEN (Accord de Vienne), et la
Fédération internationale du lait (FIL). Il est publié conjointement par l’ISO et la FIL.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 21187 | FIL 196:2004), qui a fait
l’objet d’une révision technique. Les principales modifications par rapport à l’édition précédente sont
les suivantes:
— la formule décrivant la relation de conversion est fondée sur des données groupées plutôt que sur
des données provenant d’échantillons individuels;
— des exemples sur la manière de réaliser des essais de valeurs aberrantes et sur le calcul et la
vérification des relations de conversion sont donnés dans une feuille de calcul.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/ fr/ members .html.
© ISO et FIL 2021 – Tous droits réservés v

FIL 196:2021(F)
La FIL (Fédération internationale du lait) est une organisation privée à but non lucratif qui représente
les intérêts des divers acteurs de la filière laitière au niveau international. Les membres de la FIL sont
organisés en comités nationaux, qui sont des associations nationales composées de représentants de
groupes d’intérêt nationaux dans le secteur des produits laitiers, incluant des producteurs laitiers, des
acteurs de l’industrie de transformation des produits laitiers, des fournisseurs de produits laitiers, des
universitaires et des représentants des gouvernements/autorités chargées du contrôle des aliments.
L’ISO et la FIL collaborent étroitement à toutes les activités de normalisation concernant les méthodes
d’analyse et d’échantillonnage du lait et des produits laitiers. Depuis 2001, l’ISO et la FIL publient
conjointement leurs Normes internationales en utilisant les logos et les numéros de référence des deux
organisations.
L’attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. La FIL ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Le présent document a été élaboré par le Comité permanent chargé des Statistiques et de l’automatisation
de la Fédération internationale du lait (FIL) et le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires,
sous-comité SC 5, Lait et produits laitiers. Il est publié conjointement par la FIL et l’ISO.
L’ensemble des travaux a été confié à l’équipe d’action mixte ISO-FIL (S11) du Comité permanent chargé
des Statistiques et de l’automatisation, sous la conduite de ses chefs de projet, Mme B. Asmussen (DK),
Mme V. Tzeneva (NL), M. R. Kissling (NZ) et Mme B. Müller (DE).
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FIL 196:2021(F)
Introduction
La conversion en microbiologie quantitative signifie l’expression, en unités d’une autre méthode,
généralement une méthode d’ancrage, du résultat d’une détermination quantitative de l’état
microbiologique d’un échantillon pour essai obtenu en appliquant une méthode alternative. De ce fait,
les résultats quantitatifs obtenus selon les méthodes alternatives peuvent être comparés aux valeurs
ou aux limites présentées dans les unités de la méthode d’ancrage. Pour établir et appliquer une relation
de conversion, il convient de respecter un certain nombre de conditions préalables. On y renvoie dans le
présent document, mais elles sont généralement décrites par ailleurs.
Bien que les principes appliqués pour la conversion coïncident pour une grande part avec ceux appliqués
pour le calibrage des méthodes indirectes ou alternatives par rapport à une méthode d’ancrage ou à
l’aide de matériaux de référence (certifiés), il faut souligner que les raisons et les buts de l’application
de la conversion sont différents de ceux du calibrage. Le calibrage implique la détermination de
l’ajustement nécessaire pour chaque niveau d’un analyte afin d’approcher de près la valeur vraie de sa
concentration ou de son nombre. Toutefois, une valeur vraie au sens strict du terme ne peut être établie
en microbiologie quantitative et n’est définie que par la description de la méthode appliquée. Lors de
l’application de méthodes alternatives pour la détermination quantitative de la qualité microbiologique,
les principes méthodologiques sont souvent différents et par conséquent aussi les unités. La conversion
vise à transférer les résultats obtenus avec différentes méthodes sur une échelle commune.
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NORME INTERNATIONALE
FIL 196:2021(F)
Lait — Mesure quantitative de la qualité microbiologique
— Lignes directrices pour établir et vérifier une relation
de conversion entre les résultats de la méthode alternatif
et les résultats de la méthode d’ancrage
1 Domaine d’application
Le présent document donne des lignes directrices pour l’établissement d’une relation de conversion
entre les résultats d’une méthode alternative et les résultats d’une méthode d’ancrage, et sa vérification
en vue de la détermination quantitative de la qualité microbiologique du lait.
NOTE La relation de conversion peut être utilisée a) pour convertir les résultats d’une méthode alternative
sur la base de la méthode d’ancrage ou b) pour convertir les résultats/limites exprimés sur la base de la méthode
d’ancrage, en résultats exprimés dans les unités d’une méthode alternative.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 8196-1 | FIL 128-1, Lait — Définition et évaluation de la précision globale des méthodes alternatives
d'analyse du lait — Partie 1: Attributs analytiques des méthodes alternatives
ISO 8196-2 | FIL 128-2, Lait — Définition et évaluation de la précision globale des méthodes alternatives
d'analyse du lait — Partie 2: Calibrage et contrôle qualité dans les laboratoires laitiers
ISO 16140-1, Microbiologie de la chaîne alimentaire — Validation des méthodes — Partie 1: Vocabulaire
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions donnés dans l’ISO 8196-1 | FIL 128-1,
l’ISO 8196-2 | FIL 128-2, l’ISO 16140-1 ainsi que les suivants, s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http:// www .electropedia .org/
3.1
méthode alternative
méthode d’analyse permettant de quantifier l’état microbiologique d’un échantillon pour essai
Note 1 à l'article: La méthode peut être une méthode brevetée ou une méthode non commerciale.
Note 2 à l'article: Dans le présent document, le terme « alternative » désigne l’ensemble de la méthode. Il englobe
tous les aspects (que ce soit le traitement préalable de l’échantillon pour essai, les matériaux et les instruments)
nécessaires à l’exécution de la méthode.
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FIL 196:2021(F)
3.2
méthode d’ancrage
méthode d’analyse reconnue dans le monde entier par des experts ou du fait d’un accord entre les
parties, et utilisée, par exemple, dans la législation pour exprimer les limites officielles de la qualité
microbiologique
Note 1 à l'article: Il faut souligner que, en microbiologie quantitative, toute valeur obtenue est seulement définie
par la description de la méthode appliquée. Cela s’applique à toute méthode alternative, ainsi que, par exemple, au
dénombrement normalisé sur boîtes de Petri pour le dénombrement des micro-organismes.
3.3
analyte
élément ou propriété mesuré(e) par la méthode d’analyse
Note 1 à l'article: L’analyte peut être le micro-organisme, des particules colorées (dénombrement microscopique,
par exemple), des éléments de micro-organismes (les lipopolysaccharides, par exemple), le résultat de leur
aptitude à se multiplier (unités formant colonies, par exemple) ou de leur activité métabolique (changement de
conductivité/d’impédance, par exemple).
3.4
organisateur
organisme, éventuellement désigné par une autorité compétente, disposant d’un personnel qualifié et
des aptitudes requises pour organiser, coordonner et rendre compte du résultat des activités, en vue de
l’établissement et/ou de l’entretien d’une relation de conversion
3.5
plage de mesure
plage dans laquelle il est possible d’obtenir des données ayant une fidélité et une précision connues
Note 1 à l'article: Les données de fidélité et de précision sont déterminées lors d’une étude de validation (par
exemple, par le fabricant de l’instrument ou par un organisme responsable).
3.6
plage d’intérêt
valeurs numériques des résultats de la méthode alternative, caractéristiques des échantillons analysés
en routine dans un laboratoire
Note 1 à l'article: Le cas échéant, la plage d’intérêt doit inclure les limites officielles et les limites associées à des
systèmes qualité spécifiques.
4 Principes
4.1 Généralités
L’établissement et la vérification d’une relation de conversion reposent sur l’examen d’échantillons pour
essai avec une méthode alternative et la méthode d’ancrage.
4.2 Recommandations concernant les méthodes appliquées et les laboratoires
Les conditions préalables suivantes s’appliquent pour l’établissement et la vérification d’une relation de
conversion entre les résultats d’une méthode alternative et les résultats d’une méthode d’ancrage.
Il convient que la méthode alternative ait été évaluée et validée conformément à l’ISO 16140-2 et/ou
l’ISO 16297 | FIL 161. Il convient de consigner par écrit, de strictement normaliser et de contrôler, en
[6]
accord avec l’ISO/IEC 17025, le Guide Eurachem ou des normes comparables, les modes opératoires
d’échantillonnage, de conservation, de transport, de stockage et de traitement préalable des échantillons
pour essai, d’analyse et de calcul des résultats.
La participation régulière à des essais d’aptitude et à des formations conformément aux normes
pertinentes, par exemple l’ISO 4833-1 ou l’ISO 14461-2 | FIL 169-2, est vivement recommandée.
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FIL 196:2021(F)
Il convient que la méthode d’ancrage ait été validée, consignée par écrit, strictement normalisée et
contrôlée conformément à l’ISO/IEC 17025, au Guide Eurachem ou à des normes comparables.
Il convient de consigner par écrit le protocole d’établissement de la relation de conversion et sa
vérification. Il convient que ce protocole respecte les lignes directrices du présent document.
4.3 Mise en place de l’organisation
Il existe plusieurs possibilités de mise en place de l’organisation, par exemple la méthode alternative et
la méthode d’ancrage sont toutes deux effectuées dans le même laboratoire, ou plusieurs laboratoires
sont impliqués dans l’essai.
Du fait de l’instabilité et de la variabilité de l’état microbiologique des échantillons de lait, les relations de
conversion les plus fiables seront obtenues lorsque la méthode alternative et la méthode d’ancrage sont
réalisées simultanément, sur les mêmes échantillons pour essai, au même endroit. Il est recommandé
de s’assurer que l’ordre des essais n’exerce pas d’influence significative sur les résultats d’essai ou que
la méthode ayant la plus faible influence sur l’échantillon de lait est appliquée en premier.
Il convient d’éviter tout sous-échantillonnage. Cependant, si au moins deux laboratoires participent, des
sous-échantillons peuvent être nécessaires.
Dans tous les cas, il convient que la mise en place de l’organisation comporte toutes les dispositions
nécessaires pour garantir que la relation de conversion obtenue est représentative des circonstances
dans lesquelles la méthode alternative est utilisée et que la relation de conversion qui en résulte est
appliquée ultérieurement. Les facteurs à prendre en compte sont répertoriés à l’Article 5.
Il convient que l’organisateur fournisse des recommandations aux laboratoires participants. En outre, il
convient qu’il recueille des informations sur les points critiques du mode opératoire. Il est recommandé
de demander à tous les collaborateurs de consigner les informations pertinentes, telles que les détails de
la ou des méthodes utilisées, les détails sur les essais des échantillons, les données relatives au contrôle
de la qualité et, éventuellement, des données relatives aux conditions de stockage et de transport.
5 Prise en compte des facteurs influençant la relation de conversion
5.1 Généralités
Un certain nombre de facteurs peuvent influer sur le résultat des déterminations obtenues avec la
méthode alternative ou la méthode d’ancrage, ou les deux. L’importance relative des effets peut varier
en fonction des échantillons pour essai et n’est pas nécessairement identique pour les deux méthodes.
Cela implique que certains facteurs peuvent également avoir une incidence sur la relation de conversion.
Lors de l’évaluation d’une méthode alternative, il convient d’identifier et de prendre en compte tous les
facteurs pertinents, car il est nécessaire d’englober les conséquences de leur variation dans une seule
relation de conversion, ou d’établir des relations de conversion distinctes.
D’une manière générale, lorsqu’il n’est pas possible de faire la distinction entre les échantillons pour
essai ou que celle-ci n’est pas faite dans les conditions des analyses de routine, il convient de traiter
la variation des variables sous-jacentes en une seule relation de conversion. S’il s’avère qu’un facteur
a un effet non négligeable sur la relation de conversion, il peut être nécessaire d’établir et d’appliquer
plusieurs relations de conversion, par exemple avec une collecte de lait dans les fermes deux fois par
jour et tous les trois jours.
Les facteurs d’influence sont regroupés en facteurs environnementaux ayant une incidence sur
l’échantillon de lait, par exemple la teneur en un type de flore bactérienne ou le bruit de fond de la
matrice d’échantillon et les facteurs analytiques en rapport avec l’analyse à proprement parler, par
exemple les réactifs. Un certain nombre de facteurs pouvant avoir une influence sur la relation de
conversion lors de l’analyse du lait cru sont énumérés en 5.2 et 5.3. Certains de ces facteurs peuvent
également être appliqués dans d’autres situations.
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FIL 196:2021(F)
5.2 Facteurs environnementaux
5.2.1 Généralités
La flore microbiologique d’un échantillon de lait, c’est-à-dire le type de micro-organismes, leur phase
de croissance ou leur activité métabolique, influence le résultat du mesurage en fonction du principe
de la méthode. Par exemple, avec la méthode de dénombrement sur boîtes de Petri conformément à
l’ISO 4833-1, seuls des micro-organismes viables dans les conditions de croissance respectives sont
déterminés, tandis qu’avec une méthode de cytométrie de flux tous les micro-organismes pouvant
être colorés dont le signal est supérieur au niveau discriminatoire sont dénombrés. Cela peut avoir
un impact significatif sur la relation de conversion. Aussi, il convient que la variation habituelle de la
flore microbiologique soit prise en compte dans la série d’échantillons pour essai pour déterminer
une relation de conversion. Les micro-organismes présents dans le lait proviennent de la mamelle, du
trayon, de l’air et de la contamination par les aliments, le matériel de traite et les récipients. Le nombre
et le type de bactéries présentes dans le lait peuvent dépendre des caractéristiques générales de
production du lait, notamment de la méthode de traite, des conditions de stockage et des intervalles
de collecte. La phase de croissance dépend de la manipulation des échantillons. Ainsi, de nombreux
facteurs environnementaux influencent la flore microbiologique d’un échantillon de lait. Certains de
ces facteurs, qu’il convient de prendre en compte lors de la mise en place de l’organisation de l’essai,
sont répertoriés de 5.2.2 à 5.2.7.
5.2.2 Espèce animale
Les espèces animales peuvent avoir un impact sur la flore bactérienne contenue dans leur lait, soit
directement par des différences dans le type de flore ou dans l’environnement de production, soit
indirectement par la composition et les propriétés du lait influençant les conditions de croissance des
micro-organismes. Cela peut avoir une incidence sur les résultats analytiques obtenus de différentes
manières par des méthodes différentes, et donc sur la relation de conversion.
5.2.3 Conditions de stockage du lait en vrac
Les conditions de stockage et de transport du lait en vrac auront une incidence sur le nombre de bactéries
et leur phase de croissance. Lorsque des limites officielles sont fixées en fonction des conditions de
stockage (par exemple, durée, température) et que ces conditions ont un effet non négligeable sur la
relation de conversion, il convient d’établir différentes relations de conversion.
5.2.4 Variations saisonnières
Lorsqu’une influence des saisons sur la relation de conversion est observée, il convient de fonder
la relation de conversion sur un ensemble de données contenant les données de toute l’année ou de
l’adapter à l’influence des saisons, par exemple en utilisant un système glissant incluant les données de
toutes les saisons (voir 9.1).
5.2.5 Échantillonnage et traitement préalable des échantillons pour essai
L’échantillonnage
...