ISO 21479:2019
(Main)Soil quality — Determination of the effects of pollutants on soil flora — Leaf fatty acid composition of plants used to assess soil quality
Soil quality — Determination of the effects of pollutants on soil flora — Leaf fatty acid composition of plants used to assess soil quality
This document describes a method to compare the quality of soils by determining the fatty acid composition of the leaves of plant species grown in these soils. This method does not make it possible to determine an optimal value of the Omega-3 index and, therefore, cannot be used to determine the intrinsic quality of a soil from a specific area (regarded as homogeneous). The method can only be used to compare the quality of soils between various areas. This method is applicable to: — soils from contaminated sites; — amended soils; — soils after remediation; ? soil with waste products (e.g. slurry, manure, sludge or composts). Alternatively, the quality of soils can be assessed by determining the Omega-3 index of Lactuca sativa seedlings grown in these soils under controlled conditions (i.e. phytotronic chamber) and by comparing these values to those obtained from control soils (see Annex B).
Qualité du sol — Détermination des effets des polluants sur la flore du sol — Composition en acides gras foliaires des plantes utilisées pour évaluer la qualité du sol
Le présent document décrit une méthode visant à comparer la qualité des sols en déterminant la composition en acides gras des feuilles d'espèces végétales poussant sur ces sols. Cette méthode ne permet pas de déterminer une valeur optimale de l'indice Oméga-3 et ne peut donc pas être utilisée pour déterminer la qualité intrinsèque d'un sol d'une zone spécifique (considérée homogène). La méthode peut être utilisée uniquement pour comparer la qualité des sols entre plusieurs zones. Cette méthode est applicable à: — des sols provenant de sites contaminés; — des sols amendés; — des sols après remédiation; — des sols contenant des produits résiduaires (par exemple lisier, fumier, boues ou composts). La qualité des sols peut aussi être évaluée en déterminant l'indice Oméga-3 de plantules de Lactuca sativa poussant dans ces sols dans des conditions contrôlées (c'est-à-dire, enceinte phytotronique) et en comparant ces valeurs avec celles obtenues à partir de sols témoins (voir l'Annexe B).
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 21479
First edition
2019-06
Soil quality — Determination of the
effects of pollutants on soil flora —
Leaf fatty acid composition of plants
used to assess soil quality
Qualité du sol — Détermination des effets des polluants sur la flore du
sol — Composition en acides gras foliaires des plantes utilisées pour
évaluer la qualité du sol
Reference number
©
ISO 2019
© ISO 2019
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
Email: copyright@iso.org
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2019 – All rights reserved
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms, definitions and abbreviated terms . 1
3.1 Terms and definitions . 1
3.2 Abbreviated terms . 2
4 Principle . 2
5 Apparatus and reagents . 2
5.1 Apparatus . 2
5.2 Reagents. 3
6 Sampling strategies . 3
7 Sampling of leaf tissues . 3
8 Obtaining, extraction and analyses of FAMES . 4
8.1 Contamination control . 4
8.2 Obtaining and extraction of FAMES from plant leaves . 4
8.3 Analysis of FAMES . 4
9 Test report . 6
9.1 A reference to this document, i.e. ISO 21479 . 6
9.2 Description of the site and areas analysed . 6
9.3 Leaf sampling . 6
9.4 Fatty acid composition . 6
9.5 Conclusion . 6
Annex A (informative) Results of the ring test . 7
Annex B (informative) Assessment of soil quality by determining the Omega-3 index of
Lactuca sativa seedlings grown ex situ under controlled conditions .14
Annex C (informative) Plant species previously successfully used to assess soils of
contaminated sites (organic and/or metals) .16
Annex D (informative) Variation of the Omega-3 index as function of harvest time, plant
size and leaf development .17
Annex E (informative) Effect of the quantity of foliar tissues on the FAMES composition .19
Annex F (informative) Example of chromatogram obtained after the FAMES analysis of
foliar tissues .20
Annex G (informative) Recommended mathematical method to rate soils of areas when
some sampled plant species are not found in all areas .21
Bibliography .23
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see the following
URL: www .iso .org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 190, Soil quality, Subcommittee SC 4,
Biological characterization.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.
iv © ISO 2019 – All rights reserved
Introduction
Among the more than 150 ISO standards on soil quality that have been developed, less than 40 address
living organisms, and among them only five address higher plants. This is despite the importance of
monitoring the adverse effects of soil quality on living organisms.
[1]
One of these five standards addresses genotoxicity , and four of them address emergence and/or
[2-5]
growth inhibition . It therefore appears that these International Standards are focused either on a
very specific effect (genotoxicity), or on effects great enough to induce developmental (and, therefore,
visible) phenotypes (emergence or growth inhibition of young seedlings) in soils sampled in the field.
Hence, more sensitive/earlier bio-indicators of the adverse effects of pollutants on plants, such as the
“Omega-3 index”, are needed.
The assessment of soil contaminant effects by the Omega-3 index is based on the leaf fatty acid
composition of angiosperm species grown in sites of concern. The use of the Omega-3 index has proven
to be appropriate for highlighting the presence of metallic and organic contaminants (herbicides, etc.)
in the soils. With this aim, physical and chemical properties (pH, N/P/K content) of soils should also be
[12]
determined because plant fatty acid composition may vary as a function of nutrient content and pH
may influence chemical compound bioavailability. It should be noted that this bio-indicator has proved
to be more sensitive (i.e. responding to lower doses of contaminants) than the biometric parameters of
[6][14]
rate of germination and biomass . Hence, this makes it possible to gain evidence of adverse effects
of soils on plants that could not be highlighted by the rate of germination or biomass. Additionally, for in
situ assessment purposes, it can be difficult to observe evident effects on the rate of germination and/
or biomass of plants.
It should be noted that from a practical point of view, especially with plant species harvested in the
field, and in comparison with other bio-indicators, the Omega-3 index presents several advantages.
— For fatty acid analysis, only 20 mg to 50 mg of fresh leaf tissues per sample are needed. Hence, this
is not destructive for plants, and there is not a problem with getting enough tissues of one species
from a given area.
— Samples of plant tissues can be stored in methanol for several days at room temperature prior to
analyses.
— It is not necessary to find a particular species at a site, and that a priori any species (often chosen
among the most representative) can be sampled (Clause 6).
The results of a ring test performed by six individual laboratories to assess the reproducibility and the
repeatability of the method are shown in Annex A. The results obtained by the same investigator with
the same sample and the same measuring instrument over a short period of time are shown in Annex B.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 21479:2019(E)
Soil quality — Determination of the effects of pollutants on
soil flora — Leaf fatty acid composition of plants used to
assess soil quality
WARNING — Contaminated soils can contain unknown mixtures of toxic, mutagenic, or
otherwise harmful chemicals or infectious micro-organisms. Occupational health risks can
arise from dust or evaporated chemicals. Furthermore, plants might take up chemicals from the
soil and safety measures should also be considered when handling the test plants.
1 Scope
This document describes a method to compare the quality of soils by determining the fatty acid
composition of the leaves of plant species grown in these soils.
This method does not make it possible to determine an optimal value of the Omega-3 index and,
therefore, cannot be used to determine the intrinsic quality of a soil from a specific area (regarded as
homogeneous). The method can only be used to compare the quality of soils between various areas.
This method is applicable to:
— soils from contaminated sites;
— amended soils;
— soils after remediation;
— soil with waste products (e.g. slurry, manure, sludge or composts).
Alternatively, the quality of soils can be assessed by determining the Omega-3 index of Lactuca sativa
seedlings grown in these soils under controlled conditions (i.e. phytotronic chamber) and by comparing
these values to those obtained from control soils (see Annex B).
2 Normative references
There are no normative references in this document.
3 Terms, definitions and abbreviated terms
3.1 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addres
...
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 21479
First edition
2019-06
Soil quality — Determination of the
effects of pollutants on soil flora —
Leaf fatty acid composition of plants
used to assess soil quality
Qualité du sol — Détermination des effets des polluants sur la flore du
sol — Composition en acides gras foliaires des plantes utilisées pour
évaluer la qualité du sol
Reference number
©
ISO 2019
© ISO 2019
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
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Fax: +41 22 749 09 47
Email: copyright@iso.org
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2019 – All rights reserved
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms, definitions and abbreviated terms . 1
3.1 Terms and definitions . 1
3.2 Abbreviated terms . 2
4 Principle . 2
5 Apparatus and reagents . 2
5.1 Apparatus . 2
5.2 Reagents. 3
6 Sampling strategies . 3
7 Sampling of leaf tissues . 3
8 Obtaining, extraction and analyses of FAMES . 4
8.1 Contamination control . 4
8.2 Obtaining and extraction of FAMES from plant leaves . 4
8.3 Analysis of FAMES . 4
9 Test report . 6
9.1 A reference to this document, i.e. ISO 21479 . 6
9.2 Description of the site and areas analysed . 6
9.3 Leaf sampling . 6
9.4 Fatty acid composition . 6
9.5 Conclusion . 6
Annex A (informative) Results of the ring test . 7
Annex B (informative) Assessment of soil quality by determining the Omega-3 index of
Lactuca sativa seedlings grown ex situ under controlled conditions .14
Annex C (informative) Plant species previously successfully used to assess soils of
contaminated sites (organic and/or metals) .16
Annex D (informative) Variation of the Omega-3 index as function of harvest time, plant
size and leaf development .17
Annex E (informative) Effect of the quantity of foliar tissues on the FAMES composition .19
Annex F (informative) Example of chromatogram obtained after the FAMES analysis of
foliar tissues .20
Annex G (informative) Recommended mathematical method to rate soils of areas when
some sampled plant species are not found in all areas .21
Bibliography .23
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see the following
URL: www .iso .org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 190, Soil quality, Subcommittee SC 4,
Biological characterization.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.
iv © ISO 2019 – All rights reserved
Introduction
Among the more than 150 ISO standards on soil quality that have been developed, less than 40 address
living organisms, and among them only five address higher plants. This is despite the importance of
monitoring the adverse effects of soil quality on living organisms.
[1]
One of these five standards addresses genotoxicity , and four of them address emergence and/or
[2-5]
growth inhibition . It therefore appears that these International Standards are focused either on a
very specific effect (genotoxicity), or on effects great enough to induce developmental (and, therefore,
visible) phenotypes (emergence or growth inhibition of young seedlings) in soils sampled in the field.
Hence, more sensitive/earlier bio-indicators of the adverse effects of pollutants on plants, such as the
“Omega-3 index”, are needed.
The assessment of soil contaminant effects by the Omega-3 index is based on the leaf fatty acid
composition of angiosperm species grown in sites of concern. The use of the Omega-3 index has proven
to be appropriate for highlighting the presence of metallic and organic contaminants (herbicides, etc.)
in the soils. With this aim, physical and chemical properties (pH, N/P/K content) of soils should also be
[12]
determined because plant fatty acid composition may vary as a function of nutrient content and pH
may influence chemical compound bioavailability. It should be noted that this bio-indicator has proved
to be more sensitive (i.e. responding to lower doses of contaminants) than the biometric parameters of
[6][14]
rate of germination and biomass . Hence, this makes it possible to gain evidence of adverse effects
of soils on plants that could not be highlighted by the rate of germination or biomass. Additionally, for in
situ assessment purposes, it can be difficult to observe evident effects on the rate of germination and/
or biomass of plants.
It should be noted that from a practical point of view, especially with plant species harvested in the
field, and in comparison with other bio-indicators, the Omega-3 index presents several advantages.
— For fatty acid analysis, only 20 mg to 50 mg of fresh leaf tissues per sample are needed. Hence, this
is not destructive for plants, and there is not a problem with getting enough tissues of one species
from a given area.
— Samples of plant tissues can be stored in methanol for several days at room temperature prior to
analyses.
— It is not necessary to find a particular species at a site, and that a priori any species (often chosen
among the most representative) can be sampled (Clause 6).
The results of a ring test performed by six individual laboratories to assess the reproducibility and the
repeatability of the method are shown in Annex A. The results obtained by the same investigator with
the same sample and the same measuring instrument over a short period of time are shown in Annex B.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 21479:2019(E)
Soil quality — Determination of the effects of pollutants on
soil flora — Leaf fatty acid composition of plants used to
assess soil quality
WARNING — Contaminated soils can contain unknown mixtures of toxic, mutagenic, or
otherwise harmful chemicals or infectious micro-organisms. Occupational health risks can
arise from dust or evaporated chemicals. Furthermore, plants might take up chemicals from the
soil and safety measures should also be considered when handling the test plants.
1 Scope
This document describes a method to compare the quality of soils by determining the fatty acid
composition of the leaves of plant species grown in these soils.
This method does not make it possible to determine an optimal value of the Omega-3 index and,
therefore, cannot be used to determine the intrinsic quality of a soil from a specific area (regarded as
homogeneous). The method can only be used to compare the quality of soils between various areas.
This method is applicable to:
— soils from contaminated sites;
— amended soils;
— soils after remediation;
— soil with waste products (e.g. slurry, manure, sludge or composts).
Alternatively, the quality of soils can be assessed by determining the Omega-3 index of Lactuca sativa
seedlings grown in these soils under controlled conditions (i.e. phytotronic chamber) and by comparing
these values to those obtained from control soils (see Annex B).
2 Normative references
There are no normative references in this document.
3 Terms, definitions and abbreviated terms
3.1 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addres
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 21479
Première édition
2019-06
Qualité du sol — Détermination des
effets des polluants sur la flore du sol
— Composition en acides gras foliaires
des plantes utilisées pour évaluer la
qualité du sol
Soil quality — Determination of the effects of pollutants on soil flora
— Leaf fatty acid composition of plants used to assess soil quality
Numéro de référence
©
ISO 2019
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2019
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
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Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2019 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes, définitions et abréviations . 1
3.1 Termes et définitions . 1
3.2 Abréviations . 2
4 Principe . 2
5 Appareillage et réactifs . 2
5.1 Appareillage. 2
5.2 Réactifs . 3
6 Stratégies d’échantillonnage . 3
7 Échantillonnage des tissus foliaires . 3
8 Obtention, extraction et analyses des FAME . 4
8.1 Contrôle de la contamination . 4
8.2 Obtention et extraction des FAME des feuilles de végétaux . 4
8.3 Analyse des FAME . 5
9 Rapport d'essai . 6
9.1 Référence au présent document, c’est-à-dire l'ISO 21479 . 6
9.2 Description du site et des zones analysées . 6
9.3 Échantillonnage des feuilles . 6
9.4 Composition en acides gras . 6
9.5 Conclusion . 6
Annexe A (informative) Résultats de l’essai interlaboratoires . 7
Annexe B (informative) Évaluation de la qualité du sol par détermination de l’indice
Oméga-3 de plantules de Lactuca sativa cultivées ex situ dans des conditions contrôlées .14
Annexe C (informative) Espèces végétales utilisées précédemment avec succès pour
évaluer les sols de sites contaminés (par des composés organiques et/ou des métaux) .16
Annexe D (informative) Variation de l’indice Oméga-3 en fonction de l’heure de récolte, de
la taille des végétaux et du développement foliaire .17
Annexe E (informative) Effet de la quantité de tissus foliaires sur la composition en FAME.19
Annexe F (informative) Exemple de chromatogramme obtenu après l'analyse FAME de
tissus foliaires .20
Annexe G (informative) Méthode mathématique recommandée pour noter les sols de zones
lorsque certaines espèces végétales échantillonnées ne sont pas trouvées dans
toutes les zones .21
Bibliographie .24
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, de la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute autre information au sujet de
l’adhésion de l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les
obstacles techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/iso/fr/avant -propos .html.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous-comité SC 4,
Caractérisation biologique.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
iv © ISO 2019 – Tous droits réservés
Introduction
Sur plus de 150 normes ISO élaborées relatives à la qualité du sol, moins de 40 concernent les organismes
vivants, et parmi celles-ci, seules cinq traitent des végétaux supérieurs, et ce malgré l’importance de la
surveillance des effets indésirables de la qualité du sol sur les organismes vivants.
[1]
L’une de ces cinq normes concerne la génotoxicité , et quatre d’entre elles, l’inhibition de l’émergence
[2-5]
et/ou de la croissance . Il semble donc que ces Normes internationales ciblent un effet très spécifique
(génotoxicité) ou des effets suffisamment importants pour induire des phénotypes développementaux
(et donc visibles): inhibition de l’émergence ou de la croissance de jeunes plantules poussant sur des
sols prélevés sur site. Dès lors, des biomarqueurs plus sensibles/précoces des effets indésirables des
polluants sur les végétaux, tels que «l’indice Oméga-3», sont nécessaires.
L'évaluation des effets d’une contamination du sol par l’indice Oméga-3 repose sur la composition en
acides gras foliaires d’angiospermes poussant sur les sites étudiés. L’utilisation de l’indice Oméga-3 s’est
révélée appropriée pour mettre en évidence la présence de contaminants métalliques et organiques
(herbicides, etc.) dans les sols. Dans cette perspective, il convient également de déterminer les
propriétés physiques et chimiques (pH, teneur en N/P/K) des sols car la composition en acides gras
[12]
foliaires peut varier en fonction de la teneur en nutriments , et le pH peut influencer la biodisponibilité
des composés chimiques. Il est à noter que ce biomarqueur s’est souvent avéré plus sensible (c’est-à-dire
répondant à de plus faibles doses de contaminants) que les paramètres biométriques que sont le taux
[6][14]
de germination et la biomasse . Il permet donc de mettre en évidence des effets indésirables des
sols sur les végétaux qui ne pourraient pas être démontrés par le taux de germination ou la biomasse.
De plus, pour l’évaluation in situ, il peut être difficile d’observer des effets visibles sur le taux de
germination et/ou la biomasse des plantes.
Il convient de noter que, d'un point de vue pratique, notamment avec les espèces végétales récoltées sur
site, et en comparaison d’autres biomarqueurs, l’indice Oméga-3 présente plusieurs avantages.
— Pour l’analyse des acides gras, seuls 20 mg à 50 mg de tissus foliaires frais par échantillon sont
nécessaires. Par conséquent, ceci n’est pas destructif pour les végétaux et il n’est pas difficile
d’obtenir suffisamment de tissus d’une espèce sur une zone donnée.
— Les tissus végétaux prélevés peuvent être conservés dans du méthanol pendant plusieurs jours à
température ambiante avant les analyses.
— Il n’est pas nécessaire de trouver des espèces particulières sur un site et, a priori, n’importe quelle
espèce (souvent choisie parmi les plus représentatives) peut être prélevée (Article 6).
Les résultats d’un essai interlaboratoires effectué par six laboratoires afin d’évaluer la reproductibilité
et la répétabilité de la méthode sont indiqués à l’Annexe A. Les résultats obtenus par le même
investigateur avec le même échantillon et le même instrument de mesure sur une courte période de
temps sont donnés à l’Annexe B
NORME INTERNATIONALE ISO 21479:2019(F)
Qualité du sol — Détermination des effets des polluants
sur la flore du sol — Composition en acides gras foliaires
des plantes utilisées pour évaluer la qualité du sol
AVERTISSEMENT — Les sols contaminés peuvent contenir des mélanges inconnus de substances
chimiques toxiques, mutagènes ou autrement dangereuses ou des micro-organismes infectieux.
La poussière ou les produits chimiques évaporés peuvent entraîner des risques pour la santé
au travail. De plus, les végétaux peuvent absorber des substances chimiques présentes dans le
sol. Il convient donc de prendre les mesures de sécurité appropriées lors de la manipulation des
végétaux soumis à essai.
1 Domaine d’application
Le présent document décrit une méthode visant à comparer la qualité des sols en déterminant la
composition en acides gras des feuilles d’espèces végétales poussant sur ces sols.
Cette méthode ne permet pas de déterminer une valeur optimale de l’indice Oméga-3 et ne peut donc pas
être utilisée pour déterminer la qualité intrinsèque d
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 21479
Première édition
2019-06
Qualité du sol — Détermination des
effets des polluants sur la flore du sol
— Composition en acides gras foliaires
des plantes utilisées pour évaluer la
qualité du sol
Soil quality — Determination of the effects of pollutants on soil flora
— Leaf fatty acid composition of plants used to assess soil quality
Numéro de référence
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ISO 2019
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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ii © ISO 2019 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes, définitions et abréviations . 1
3.1 Termes et définitions . 1
3.2 Abréviations . 2
4 Principe . 2
5 Appareillage et réactifs . 2
5.1 Appareillage. 2
5.2 Réactifs . 3
6 Stratégies d’échantillonnage . 3
7 Échantillonnage des tissus foliaires . 3
8 Obtention, extraction et analyses des FAME . 4
8.1 Contrôle de la contamination . 4
8.2 Obtention et extraction des FAME des feuilles de végétaux . 4
8.3 Analyse des FAME . 5
9 Rapport d'essai . 6
9.1 Référence au présent document, c’est-à-dire l'ISO 21479 . 6
9.2 Description du site et des zones analysées . 6
9.3 Échantillonnage des feuilles . 6
9.4 Composition en acides gras . 6
9.5 Conclusion . 6
Annexe A (informative) Résultats de l’essai interlaboratoires . 7
Annexe B (informative) Évaluation de la qualité du sol par détermination de l’indice
Oméga-3 de plantules de Lactuca sativa cultivées ex situ dans des conditions contrôlées .14
Annexe C (informative) Espèces végétales utilisées précédemment avec succès pour
évaluer les sols de sites contaminés (par des composés organiques et/ou des métaux) .16
Annexe D (informative) Variation de l’indice Oméga-3 en fonction de l’heure de récolte, de
la taille des végétaux et du développement foliaire .17
Annexe E (informative) Effet de la quantité de tissus foliaires sur la composition en FAME.19
Annexe F (informative) Exemple de chromatogramme obtenu après l'analyse FAME de
tissus foliaires .20
Annexe G (informative) Méthode mathématique recommandée pour noter les sols de zones
lorsque certaines espèces végétales échantillonnées ne sont pas trouvées dans
toutes les zones .21
Bibliographie .24
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, de la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute autre information au sujet de
l’adhésion de l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les
obstacles techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/iso/fr/avant -propos .html.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous-comité SC 4,
Caractérisation biologique.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
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Introduction
Sur plus de 150 normes ISO élaborées relatives à la qualité du sol, moins de 40 concernent les organismes
vivants, et parmi celles-ci, seules cinq traitent des végétaux supérieurs, et ce malgré l’importance de la
surveillance des effets indésirables de la qualité du sol sur les organismes vivants.
[1]
L’une de ces cinq normes concerne la génotoxicité , et quatre d’entre elles, l’inhibition de l’émergence
[2-5]
et/ou de la croissance . Il semble donc que ces Normes internationales ciblent un effet très spécifique
(génotoxicité) ou des effets suffisamment importants pour induire des phénotypes développementaux
(et donc visibles): inhibition de l’émergence ou de la croissance de jeunes plantules poussant sur des
sols prélevés sur site. Dès lors, des biomarqueurs plus sensibles/précoces des effets indésirables des
polluants sur les végétaux, tels que «l’indice Oméga-3», sont nécessaires.
L'évaluation des effets d’une contamination du sol par l’indice Oméga-3 repose sur la composition en
acides gras foliaires d’angiospermes poussant sur les sites étudiés. L’utilisation de l’indice Oméga-3 s’est
révélée appropriée pour mettre en évidence la présence de contaminants métalliques et organiques
(herbicides, etc.) dans les sols. Dans cette perspective, il convient également de déterminer les
propriétés physiques et chimiques (pH, teneur en N/P/K) des sols car la composition en acides gras
[12]
foliaires peut varier en fonction de la teneur en nutriments , et le pH peut influencer la biodisponibilité
des composés chimiques. Il est à noter que ce biomarqueur s’est souvent avéré plus sensible (c’est-à-dire
répondant à de plus faibles doses de contaminants) que les paramètres biométriques que sont le taux
[6][14]
de germination et la biomasse . Il permet donc de mettre en évidence des effets indésirables des
sols sur les végétaux qui ne pourraient pas être démontrés par le taux de germination ou la biomasse.
De plus, pour l’évaluation in situ, il peut être difficile d’observer des effets visibles sur le taux de
germination et/ou la biomasse des plantes.
Il convient de noter que, d'un point de vue pratique, notamment avec les espèces végétales récoltées sur
site, et en comparaison d’autres biomarqueurs, l’indice Oméga-3 présente plusieurs avantages.
— Pour l’analyse des acides gras, seuls 20 mg à 50 mg de tissus foliaires frais par échantillon sont
nécessaires. Par conséquent, ceci n’est pas destructif pour les végétaux et il n’est pas difficile
d’obtenir suffisamment de tissus d’une espèce sur une zone donnée.
— Les tissus végétaux prélevés peuvent être conservés dans du méthanol pendant plusieurs jours à
température ambiante avant les analyses.
— Il n’est pas nécessaire de trouver des espèces particulières sur un site et, a priori, n’importe quelle
espèce (souvent choisie parmi les plus représentatives) peut être prélevée (Article 6).
Les résultats d’un essai interlaboratoires effectué par six laboratoires afin d’évaluer la reproductibilité
et la répétabilité de la méthode sont indiqués à l’Annexe A. Les résultats obtenus par le même
investigateur avec le même échantillon et le même instrument de mesure sur une courte période de
temps sont donnés à l’Annexe B
NORME INTERNATIONALE ISO 21479:2019(F)
Qualité du sol — Détermination des effets des polluants
sur la flore du sol — Composition en acides gras foliaires
des plantes utilisées pour évaluer la qualité du sol
AVERTISSEMENT — Les sols contaminés peuvent contenir des mélanges inconnus de substances
chimiques toxiques, mutagènes ou autrement dangereuses ou des micro-organismes infectieux.
La poussière ou les produits chimiques évaporés peuvent entraîner des risques pour la santé
au travail. De plus, les végétaux peuvent absorber des substances chimiques présentes dans le
sol. Il convient donc de prendre les mesures de sécurité appropriées lors de la manipulation des
végétaux soumis à essai.
1 Domaine d’application
Le présent document décrit une méthode visant à comparer la qualité des sols en déterminant la
composition en acides gras des feuilles d’espèces végétales poussant sur ces sols.
Cette méthode ne permet pas de déterminer une valeur optimale de l’indice Oméga-3 et ne peut donc pas
être utilisée pour déterminer la qualité intrinsèque d
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.