ISO 6739:1988
(Main)Whey cheese — Determination of nitrate and nitrite contents — Method by cadmium reduction and spectrometry
Whey cheese — Determination of nitrate and nitrite contents — Method by cadmium reduction and spectrometry
Is suitable for all kinds of whey cheese. The principle of determination consists in extracting the whey cheese with warm water, precipitating the fat and proteins, filtering and reducing the nitrate in a portion of the filtrate to nitrite by means of copperized cadmium. The apparatus for nitrate reduction is shown in a figure.
Fromage de sérum — Détermination des teneurs en nitrates et en nitrites — Méthode par réduction au cadmium et spectrométrie
General Information
Relations
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Standards Content (Sample)
IS0
INTERNATIONAL STANDARD
6739
Second edition
1988-09-01
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXAYHAPO,QHAfl OPTAHM3A~MR I-IO CTAH~APTM3A~MM
Determination of nitrate and nitrite
Whey cheese -
contents - Method by cadmium reduction and
spectrometry
DtG termination des teneurs en nitrates et en nitrites - IL& thode par
Fromage de s&urn -
rt$duction au cadmium et spectromktrie
Reference number
IS0 6739: 1988 (E)
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IS0 6739 : 1988 E)
Foreword
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national standards bodies (IS0 member bodies). The work of preparing International
Standards is normally carried out through IS0 technical committees. Each member
body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. IS0
collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all
matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the IS0 Council. They are approved in accordance with IS0 procedures requiring at
least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard IS0 6739 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34,
Agricultural food products, in collaboration with the International Dairy Federation
(IDF) and the Association of Analytical Chemists (AOAC) and will also be published by
these organizations.
This second edition cancels and replaces the first edition (IS0 : 19821, of which it
6739
constitutes a minor revision.
0 International Organization for Standardization, 1988 0
Printed in Switzerland
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IS0 6739 : 1988 (E)
INTERNATIONAL STANDARD
Determination of nitrate and nitrite
Whey cheese -
by cadmium reduction and
contents - Method
spectrometry
Calculation of the nitrite content of the sample and of the total
1 Scope
nitrite content after reduction of nitrate, by comparing the
This International Standard specifies a method for the deter- measured absorbances with those of a series of standard
mination of the nitrate and nitrite contents of whey cheese. sodium nitrite solutions; calculation of the nitrate content from
the difference between these two contents.
The method is suitable for all kinds of whey cheese.
The detection limits of the method are 5 mg of nitrate per
5 Reagents
kilogram and 0,5 mg of nitrite per kilogram.
All reagents shall be of recognized analytical grade. The water
used shall be distilled or deionized water, free from nitrate and
2 Normative reference
nitrite.
The following standard contains provisions which, through
NOTE - In order to avoid possible inclusion of small gas bubbles in the
reference in this text, constitute provisions of this International
copperized cadmium column (6.1 l), the distilled or deionized water
Standard. At the time of publication, the edition indicated was
used for the preparation of the column (94, for checking the reducing
valid. All standards are subject to revision, and parties to
capacity of the column (9.2) and for regeneration of the column (9.3)
agreements based on this International Standard are encour-
should preferably be freshly boiled and afterwards cooled to room
aged to investigate the possibility of applying the most recent
temperature.
edition of the standard listed below. Members of IEC and IS0
maintain registers of currently valid International Standards.
5.1 Cadmium, granules, of 0,3 mm to 0,8 mm diameter.
IS0 707 : 1985, Milk and milk products - Methods of sam-
not
pling. If cadmium granules are available corn mercially, they may
be prepared as follows.
Place a suitable number of zinc rods in a beaker and cover
3 Definition
with a 40 g/l solution of cadmium sulfate octahydrate
For the purposes of this International Standard, the following (CdS04m8H20). From time to time, scrape the cadmium
definition applies.
sponge from the rods over a period of 24 h. Remove the zinc
rods and decant the liquid until only sufficient remains to cover
nitrate and nitrite contents of whey cheese : The mass
the cadmium. Wash the sponge two or three times with dis-
fractions of substances determined by the procedure specified
tilled water. Transfer the cadmium to a laboratory blender
in this International Standard.
together with 400 ml of 0,l mol/l hydrochloric acid solution
and blend for a few seconds to obtain granules of the required
They are expressed respectively as milligrams of nitrate ion
size. Return the contents of the blender to the beaker and leave
(NO;) and of nitrite ion (NOi) per kilogram.
to stand for several hours, occasionally stirring to remove bub-
bles. Decant most of the liquid and immediately copperize as
described in 9.1 .l to 9.1.5.
4 Principle
Extraction of the whey cheese with warm water, precipitation
5.2 Copper sulfate solution.
of the fat and proteins, and filtration.
Dissolve 20 g of copper sulfate pentahydrate (CuS04- 5H20)
Reduction of the nitrate in a portion of the filtrate to nitrite, by
in water and dilute to 1000 ml.
means of copperized cadmium.
5.3 Buffer solution, pH 9,6 to 9,7.
Development of a red colour, in portions of both the unreduced
filtrate and the reduced solution, by addition of sulfanilamide
and N-1 -naphthyl-ethylenediamine dihydrochloride, and spec- Dilute 50 ml of concentrated hydrochloric acid [em I,19 g/ml,
trometric measurement at a wavelength of 538 nm. about 38% (m/m) solution] with 600 ml of water. After mixing,
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IS0 6739 : 1988 (El
5.9 Sodium nitrite, standard solution corresponding to
add 135 ml of ammonium hydroxide solution [ezO 091 g/ml,
0,001 g of nitrite ion per litre.
about 25 % (m/m) solution]. Dilute to 1000 ml with water
and mix.
On the day of use, dissolve in water 0,150 g of sodium nitrite
(NaNO$ dried to constant mass at 110 OC to 120 OC, dilute to
NOTE - If ammonium hydroxide solution of this concentration is not
available, an equivalent amount of a more concentrated solution may 1000 ml with water in a one-mark volumetric flask and mix.
be used, for example 100 ml of 35 % (m/m) solution (~20 0,88 g/ml).
Dilute 10 ml of this solution with 20 ml of the buffer solution
Adjust the pH to 9,6 to 9,7 if necessary.
(5.3) and dilute further to 1000 ml with water in a one-mark
volumetric flask. Mix.
5.4 Hydrochloric acid, about 2 mol/l solution.
1 ml of this standard solution contains I,00 pg of NOS.
Dilute 160 ml of concentrated hydrochloric acid (em 1 ,I9 g/ml)
to 1000 ml with water.
5.10 Potassium nitrate, standard solution corresponding to
0,004 5 g of nitrate ion per Iitre.
5.5 Hydrochloric acid, about 0,l mol/l solution.
Dissolve in water 1,468 g of potassium nitrate (KNO& dried to
constant mass at 110 OC to 120 OC, dilute to 1000 ml with
Dilute 50 ml of the hydrochloric acid solution (5.4) to 1000 ml
water in a one-mark volumetric flask and mix.
with water.
On the day of use, dilute 5 ml of this solution with 20 ml of the
56 . Solutions for precipitation of proteins and fat.
buffer solution (5.3) and dilute further to 1000 ml with water in
a one-mark volumetric flask. Mix.
5.6.1 Zinc sulfate solution.
1 ml of this standard solution contains 450 lug of NO:.
Dissolve 53,5 g of zinc sulfate heptahydrate (ZnS04m 7H20) in
water and dilute to 100 ml.
6 Apparatus
5.6.2 Potassium hexacyanoferrate(ll) solution.
All glassware shall be thoroughly cleaned and rinsed with dis-
tilled water to ensure that it is free from nitrate and nitrite.
Dissolve 17,2 g of potassium hexacyanoferrate( II) trihydrate
[K,Fe(CN)Gm3H20] in water and dilute to 100 ml.
Usual laboratory apparatus and, in particular, the following.
5.7 EDTA solution. 6.1 Analytical balance.
Dissolve 33,5 g of disodium ethylenediaminetetraacetate
62 . Appropriate grinding device.
dihydrate (Na2C,0H,4N208~2H20) in water and dilute to
1000 ml.
6.3 Sample container, provided with an airtight lid.
5.8 Solutions for colour development.
6.4 Suitable laboratory mixer/horn ogenizer, with glass
containers of 250 ml or 400 ml capacity.
5.8.1 Solution I.
6.5 Conical flasks, of 250 ml capacity.
Dissolve, by heating on a water-bath, 0,5 g of sulfanilamide
(NH2C6H4S02NH2) in a mixture of 75 ml of water and 5 ml of
concentrated hydrochloric acid (ezO I,19 g/ml). Cool to room 6.6 Volumetric flasks, of 100, 500 and 1000 ml capacity,
complying with the requirements of IS0 1042 : 1983, Labora-
temperature and dilute to 100 ml with water. Filter if necessary.
tory glassware - One-mark volumetric flasks, class B.
5.8.2 Solution II.
6.7 Pipettes, to deliver 2,4, 5, 6,8, 10, 12,20,25 and 50 ml,
complying with the requirements of IS0 648 : 1977, Laboratory
Dilute 450 ml of concentrated hydrochloric acid (~20 I,19 g/ml)
glassware - One-mark p/;oettes, class A, or IS0 835 : 1981,
to 1000 ml with water.
Laboratory glassware - Graduated pipettes.
5.8.3 Solution I I I.
NOTE - Where appropriate, burettes may be used instead of pipettes.
Dissolve 0,l g of /V-l -naphthyl-ethylenediamine dihydrochloride
6.8 Graduated cylinders, of 5, 10, 25, 100,
250, 500 and
(C,,H7NHCH$H2NHzm2HCI) in water. Dilute to 100 ml with
1000 ml capacity.
water. Filter if necessary.
The solution may 6.9 Glass funnels, of diameter about 7 cm, with a short
be stored for uptol week in a well-stoppered
brown bottle in a refrigerator. stem.
2
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IS0 6739 : 1988 E)
9.1.7 Transfer the copperized cadmium into the glass column
6.10 Filter paper, medium grade, of diameter about 15 cm,
with minimum exposure to air. The height of the copperized
free from nitrate and nitrite.
cadmium should be 15 cm to 20 cm.
6.11 Reduction column (for example as shown in figure 1).
NOTES
1 Avoid trapping air bubbles
between the copperized cadmium
suitable for making readings at a
6.12 Spectrometer,
granules.
wavelength of 538 nm, equipped with cells of 1 cm to 2 cm
Take care that the level
2 of the liquid does not fall below the top of
thickness,
the copperized cadmium.
9.1.8 Condition the newly prepared column by running
7 Sampling
through it a mixture of 750 ml of water, 225 ml of the standard
potassium nitrate solution (5.101, 20 ml of the buffer solution
7.1 Sampling shall be carried out in accordance with
(5.3) and 20 ml of the EDTA solution (5.7), at a flow-rate not
IS0 707.
ex
...
ISO
6739
NORME INTERNATIONALE
Deuxième édition
1988-09-01
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXJJYHAPOAHAR OPTAHM3A~klR Il0 CTAHJJAPTM3A~MM
Détermination des teneurs en
Fromage de sérum -
Méthode par réduction au
nitrates et en nitrites -
cadmium et spectrométrie
Whey cheese - Determina tion of nitrate and nitrite contents - Method b y cadmium
reduction and spectrometry
Numéro de référence
ISO 6739: 1988 (F)
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ISO 6739 : 1988 (FI
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est en général confiée aux comités techniques de I’ISO.
Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO col-
labore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requiérent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 6799 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires, en collaboration avec la Fédération internationale de
laiterie (FIL) et l’Association des chimistes analytiques officiels (AOAC) et sera égale-
ment publiée par ces organisations.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 6739 : 19821, dont
elle constitue une révision mineure.
0 Organisation internationale de normalisation, 1988 0
Imprimé en Suisse
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NORME INTERNATIONALE
ISO 6739 : 1988 (F)
Détermination des teneurs en
Fromage de sérum -
nitrates et en nitrites - Méthode par réduction au
cadmium cadmium et et spectrométrie spectrométrie
Développement d’une coloration rouge à partir de portions de
1 1 Domaine Domaine d’application d’application
filtrat non réduit et à partir de portions de filtrat réduit, par addi-
tion de sulfanilamide et de dichlorhydrate de N-(naphtyl-1)
La La présente présente Norme Norme internationale internationale prescrit prescrit une une méthode méthode pour pour la la
détermination détermination des des teneurs teneurs en en nitrates nitrates et et en en nitrites nitrites du du fromage fromage éthylène diamine, puis mesurage spectrométrique à une lon-
de de sérum. sérum. gueur d’onde de 538 nm.
La La méthode méthode est est applicable applicable à à toutes toutes les les sortes sortes de de fromage fromage de de
Calcul de la teneur en nitrites de l’échantillon et de la teneur
sérum. sérum. totale en nitrites aprés réduction des nitrates, par comparaison
des absorbantes mesurées avec celles d’une série de solutions
Les Les limites limites de de détection détection de de la la méthode méthode sont sont de de 5 5 mg mg de de nitrates nitrates
étalons de nitrite de sodium; calcul de la teneur en nitrates à
par par kilogramme kilogramme et et de de 0,5 0,5 mg mg de de nitrites nitrites par par kilogramme. kilogramme.
partir de la différence entre ces deux teneurs.
2 2 Référence Référence normative normative
5 Réactifs
La La norme norme suivante suivante contient contient des des dispositions dispositions qui, qui, par par suite suite de de la la
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue.
référence référence qui qui en en est est faite, faite, constituent constituent des des dispositions‘valables dispositions‘valables
L’eau utilisée doit être de l’eau distillée ou déionisée, exempte
pour pour la la présente présente Norme Norme internationale. internationale. Au Au moment moment de de la la publi- publi-
de nitrates et de nitrites.
cation cation de de cette cette norme, norme, l’édition l’édition indiquée indiquée était était en en vigueur. vigueur. Toute Toute
norme norme est est sujette sujette à à révision révision et et les les parties parties prenantes prenantes des des accords accords
NOTE - Dans le but d’éviter l’inclusion de petites bulles de gaz dans la
fondés fondés sur sur cette cette Norme Norme internationale internationale sont sont invitées invitées à à recher- recher-
colonne de cadmium cuivré (6.1 l), il convient que l’eau distillée ou
cher cher la la possibilité possibilité d’appliquer d’appliquer l’édition l’édition la la plus plus . . récente récente de de la la
déionisée, utilisée pour la préparation de la colonne (9.1), pour la vérifi-
norme norme indiquée indiquée ci-aprés. ci-aprés. Les Les membres membres de de la la CEI CEI et et de de I’ISO I’ISO
cation du pouvoir réducteur de la colonne (9.2) et pour la régénération
possèdent possèdent le le registre registre des des Normes Normes internationales internationales en en vigueur vigueur à à
de la colonne (9.31, soit de préférence récemment bouillie puis refroidie
à la température ambiante.
un un moment moment donné. donné.
ISO ISO 707 707 : : 1985, 1985, Lait Lait et et produits produits laitiers laitiers - - Méthodes Méthodes d%chantiI- d%chantiI-
5.1 Cadmium, sous forme de granulés de diamètre 0,3 mm
lonnage. lonnage.
è 0,8 mm.
S’il n’est pas possible de se procurer dans le commerce des gra-
3 3 Définition Définition
nulés de cadmium, ceux-ci peuvent être préparés de la manière
suivante.
Pour Pour les les besoins besoins de de la la présente présente Norme Norme internationale, internationale, la la défini- défini-
tion tion suivante suivante s’applique. s’applique.
I I
Placer, dans un bécher, un nombre convenable de baguettes de
zinc et les recouvrir avec une solution de sulfate de cadmium
teneurs teneurs en en nitrates nitrates et et nitrites nitrites du du fromage fromage de de sérum sérum : : Frac- Frac-
octohydraté (CdSO,+ 8H20) à 40 g/l. Gratter de temps en
tions tions en en masse masse des des substances substances déterminées déterminées selon selon la la méthode méthode
temps le cadmium spongieux déposé sur les baguettes et cela
spécifiée spécifiée dans dans la la présente présente Norme Norme internationale. internationale.
durant une période de 24 h. Retirer les baguettes de zinc et
décanter le liquide jusqu’à ce qu’il en reste seulement une quan-
Elles Elles sont sont exprimées exprimées respectivement respectivement en en milligrammes milligrammes d’ion d’ion
tité suffisante pour recouvrir le cadmium. Laver deux ou trois
nitrate nitrate (NO$ (NO$ et et d’ion d’ion nitrite nitrite (NO$ (NO$ par par kilogramme. kilogramme.
fois le cadmium spongieux avec de l’eau. Transférer le cad-
mium dans un broyeur de laboratoire avec 400 ml de solution
d’acide chlorhydrique à 0,l mol/1 et broyer durant quelques
4 4 Principe Principe
secondes afin d’obtenir des granulés de la dimension requise.
Replacer le contenu du broyeur dans le bécher et l’y maintenir
Extraction Extraction du du fromage fromage de de sérum sérum avec avec de de l’eau l’eau chaude, chaude, précipi- précipi-
durant plusieurs heures en agitant de temps en temps pour
tation tation de de la la matière matière grasse grasse et et des des protéines, protéines, et et filtration. filtration.
chasser les bulles. Décanter la majeure partie du liquide et pro-
Sur Sur une une portion portion du du filtrat, filtrat, réduction, réduction, a a l’état l’état de de nitrites, nitrites, des des ceder immédiatement au cuivrage comme décrit de 9.1 .l
nitrates nitrates extraits, extraits, au au moyen moyen de de cadmium cadmium cuivré. cuivré. à 9.1.5.
1
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ISO 6739 : 1988 0
5.8.3 Solution I I 1.
5.2 Sulfate de cuivre(R), solution.
Dissoudre 20 g de sulfate de cuivre(ll) pentahydraté (CuS04, Dissoudre 0,l g de dichlorhydrate de Wnaphtyl-1) éthylène
5H20) dans de l’eau et compléter à 1000 ml. diamine (C10H7NHCH2CH2NH2, 2HCI) dans de l’eau. Complé-
ter à 100 ml avec de l’eau. Filtrer si nécessaire.
5.3 Solution tampon, de pH 9,6 à 9,7.
La solution peut être conservée jusqu’à 1 semaine au réfrigéra-
teur, dans un récipient en verre bien bouché.
Diluer 50 ml d’acide chlorhydrique concentré [eZO 1,W g/ml;
solution à environ 33% bnlm)l avec 600 ml d’eau. Après
mélange, ajouter 135 ml de solution d’hydroxyde d’ammonium
5.9 Nitrite de sodium, solution étalon correspondant à
QzO 0,91 g/ml; solution à environ 25% (mlm)]. Compléter à
0,001 g d’ion nitrite par litre.
1000 ml avec de l’eau et homogénéiser.
Le jour de l’utilisation, dissoudre 0,150 g de nitrite de sodium
Si la solution d’hydroxyde d’ammonium n’est pas disponible
NOTE -
(NaNO+, préalablement séché de 110 OC à 120 OC jusqu’à
à cette concentration, une quantité équivalente d’une solution plus
masse constante, dans de l’eau; compléter à 1000 ml avec de
concentrée peut être utilisée, par exemple 100 ml de solution à 35 %
l’eau dans une fiole jaugée et homogénéiser.
hlm) (~20 0,88 g/mlL
Diluer 10 ml de cette solution avec 20 ml de la solution tampon
Ajuster le pH de 9,6 à 9,7 si nécessaire.
(5.3), compléter ensuite à 1000 ml avec de l’eau dans une fiole
jaugée et homogénéiser.
5.4 Acide chlorhydrique, solution à environ 2 mol/l.
1 ml de cette solution étalon contient 1,OO pg de NOS.
Diluer 160 ml d’acide chlorhydrique concentré (e2o 1,19 g/ml) à
1000 ml avec de l’eau.
Nitrate de potassium, solution n correspondant à
5.10
5 g d’ion nitrate par litre.
0,004
5.5 Acide chlorhydrique, solution à environ 0,l mol/l.
Dissoudre 1,469 g de nitrate de potassium (KNO,), préalable-
Diluer 50 ml de la solution d’acide chlorhydrique (5.4) à 1000 ml
ment séché à 110 OC à 120 OC jusqu’à masse constante, dans
avec de l’eau.
de l’eau; compléter à 1000 ml avec de l’eau dans une fiole jau-
gée et homogénéiser.
pour la précipitation des protéi nes et de la
5.6 Solutions
matière grasse.
Le jour de l’utilisation, diluer 5 ml de cette solution avec 20 ml
de la solution tampon (5.3), compléter ensuite à 1000 ml avec
de l’eau dans une fiole jaugée et homogénéiser.
5.6.1 Sulfate de zinc, solution.
Dissoudre 53,5 g de sulfate de zinc heptahydraté
1 ml de cette solution étalon contient 450 Fg de NO$
(ZnS&, 7H2C) dans de l’eau et compléter à 100 ml.
6 Appareillage
5.6.2 Hexacyanoferrate(II1 de potassium, solution.
Dissoudre 17,2 g d’hexacyanoferrate( II) de potassium trihy-
Toute la verrerie doit être soigneusement lavée et rincée avec
draté [K4Fe(CN)G, 3H20] dans de l’eau et compléter à 100 ml. de l’eau distillée pour être certain qu’elle est exempte de nitra-
tes et de nitrites.
5.7 EDTA, solution.
Matériel courant de laboratoire, et notamment
Dissoudre 33,5 g d’éthylène diamine tétraacétate disodique
dihydraté (Na2CIoH14N208, 2H20) dans de l’eau et compléter à
6.1 Balance analytique.
1000 ml.
6.2 Dispositif de broyage approprié.
5.8 Solutions pour le développement de la coloration.
6.3 Récipient pour échantillon, muni d’un couvercle étan-
58.1 Solution 1.
che à l’air.
Dissoudre, en chauffant au bain d’eau, 0,5 g de sulfanilamide
(NH2C6H4S02NH2) dans un mélange constitué par 75 ml d’eau 6.4 Mixeur-homogénéiseur de laboratoire, avec réci-
et 5 ml d’acide chlorhydrique concentré (~20 1,19 g/ml). Refroi-
pients en verre de 250 ou 400 ml de capacité.
dir à la température ambiante et compléter à 100 ml avec de
l’eau. Filtrer si nécessaire.
6.5 Fioles coniques, de 250 ml de capacité.
5.8.2 Solution II.
6.6 Fioles jaugées à un trait, de 100, 500 et 1000 ml de
Diluer 450 ml d’acide chlorhydrique concentré (~a 1,19 g/ml) à capacité, conformes aux spécifications de I’ISO 1042 : 1983,
Verrerie de laboratoire - Fioles jaugées à un trait, classe B.
1000 ml avec de l’eau.
2
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ISO 8739 : 1988 V-1
9.1.2 Ajouter une quantité suffisante de la solution d’acide
6.7 Pipettes, permettant de délivrer 2, 4, 5, 6, 8, 10, 12, 20,
chlorhydrique (5.4) pour couvrir le cadmium. Agiter durant
25 et 50 ml, conformes aux spécifications de I’ISO 648 : 1977,
quelques minutes.
Pipettes à un trait, classe A, ou de
Verrerie de laboratoire -
I’ISO 835 : 1981, Verrerie de laboratoire - Pipettes graduées.
Décanter la solution, puis laver à fond le cadmium dans
9. 1.3
NOTE - Le cas échéant, des burettes peuvent être utilisées à la place
la fiole avec de l’eau jusqu’à ce qu’il soit exempt de chlorures.
des pipettes.
9.1.4 Cuivrer les granulés de cadmium par addition de la solu-
6.8 Éprouvettes
graduées, de 5, 10, 25, 100, 250, 500 et
tion de sulfate de cuivre(ll) (5.2) (environ 2,5 ml par gramme de
1000 ml de capacité.
cadmium) et agiter durant 1 min.
6.9 Entonnoirs en verre, d’environ 7 cm de diamétre
...
ISO
6739
NORME INTERNATIONALE
Deuxième édition
1988-09-01
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXJJYHAPOAHAR OPTAHM3A~klR Il0 CTAHJJAPTM3A~MM
Détermination des teneurs en
Fromage de sérum -
Méthode par réduction au
nitrates et en nitrites -
cadmium et spectrométrie
Whey cheese - Determina tion of nitrate and nitrite contents - Method b y cadmium
reduction and spectrometry
Numéro de référence
ISO 6739: 1988 (F)
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ISO 6739 : 1988 (FI
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est en général confiée aux comités techniques de I’ISO.
Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO col-
labore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requiérent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 6799 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires, en collaboration avec la Fédération internationale de
laiterie (FIL) et l’Association des chimistes analytiques officiels (AOAC) et sera égale-
ment publiée par ces organisations.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 6739 : 19821, dont
elle constitue une révision mineure.
0 Organisation internationale de normalisation, 1988 0
Imprimé en Suisse
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NORME INTERNATIONALE
ISO 6739 : 1988 (F)
Détermination des teneurs en
Fromage de sérum -
nitrates et en nitrites - Méthode par réduction au
cadmium cadmium et et spectrométrie spectrométrie
Développement d’une coloration rouge à partir de portions de
1 1 Domaine Domaine d’application d’application
filtrat non réduit et à partir de portions de filtrat réduit, par addi-
tion de sulfanilamide et de dichlorhydrate de N-(naphtyl-1)
La La présente présente Norme Norme internationale internationale prescrit prescrit une une méthode méthode pour pour la la
détermination détermination des des teneurs teneurs en en nitrates nitrates et et en en nitrites nitrites du du fromage fromage éthylène diamine, puis mesurage spectrométrique à une lon-
de de sérum. sérum. gueur d’onde de 538 nm.
La La méthode méthode est est applicable applicable à à toutes toutes les les sortes sortes de de fromage fromage de de
Calcul de la teneur en nitrites de l’échantillon et de la teneur
sérum. sérum. totale en nitrites aprés réduction des nitrates, par comparaison
des absorbantes mesurées avec celles d’une série de solutions
Les Les limites limites de de détection détection de de la la méthode méthode sont sont de de 5 5 mg mg de de nitrates nitrates
étalons de nitrite de sodium; calcul de la teneur en nitrates à
par par kilogramme kilogramme et et de de 0,5 0,5 mg mg de de nitrites nitrites par par kilogramme. kilogramme.
partir de la différence entre ces deux teneurs.
2 2 Référence Référence normative normative
5 Réactifs
La La norme norme suivante suivante contient contient des des dispositions dispositions qui, qui, par par suite suite de de la la
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue.
référence référence qui qui en en est est faite, faite, constituent constituent des des dispositions‘valables dispositions‘valables
L’eau utilisée doit être de l’eau distillée ou déionisée, exempte
pour pour la la présente présente Norme Norme internationale. internationale. Au Au moment moment de de la la publi- publi-
de nitrates et de nitrites.
cation cation de de cette cette norme, norme, l’édition l’édition indiquée indiquée était était en en vigueur. vigueur. Toute Toute
norme norme est est sujette sujette à à révision révision et et les les parties parties prenantes prenantes des des accords accords
NOTE - Dans le but d’éviter l’inclusion de petites bulles de gaz dans la
fondés fondés sur sur cette cette Norme Norme internationale internationale sont sont invitées invitées à à recher- recher-
colonne de cadmium cuivré (6.1 l), il convient que l’eau distillée ou
cher cher la la possibilité possibilité d’appliquer d’appliquer l’édition l’édition la la plus plus . . récente récente de de la la
déionisée, utilisée pour la préparation de la colonne (9.1), pour la vérifi-
norme norme indiquée indiquée ci-aprés. ci-aprés. Les Les membres membres de de la la CEI CEI et et de de I’ISO I’ISO
cation du pouvoir réducteur de la colonne (9.2) et pour la régénération
possèdent possèdent le le registre registre des des Normes Normes internationales internationales en en vigueur vigueur à à
de la colonne (9.31, soit de préférence récemment bouillie puis refroidie
à la température ambiante.
un un moment moment donné. donné.
ISO ISO 707 707 : : 1985, 1985, Lait Lait et et produits produits laitiers laitiers - - Méthodes Méthodes d%chantiI- d%chantiI-
5.1 Cadmium, sous forme de granulés de diamètre 0,3 mm
lonnage. lonnage.
è 0,8 mm.
S’il n’est pas possible de se procurer dans le commerce des gra-
3 3 Définition Définition
nulés de cadmium, ceux-ci peuvent être préparés de la manière
suivante.
Pour Pour les les besoins besoins de de la la présente présente Norme Norme internationale, internationale, la la défini- défini-
tion tion suivante suivante s’applique. s’applique.
I I
Placer, dans un bécher, un nombre convenable de baguettes de
zinc et les recouvrir avec une solution de sulfate de cadmium
teneurs teneurs en en nitrates nitrates et et nitrites nitrites du du fromage fromage de de sérum sérum : : Frac- Frac-
octohydraté (CdSO,+ 8H20) à 40 g/l. Gratter de temps en
tions tions en en masse masse des des substances substances déterminées déterminées selon selon la la méthode méthode
temps le cadmium spongieux déposé sur les baguettes et cela
spécifiée spécifiée dans dans la la présente présente Norme Norme internationale. internationale.
durant une période de 24 h. Retirer les baguettes de zinc et
décanter le liquide jusqu’à ce qu’il en reste seulement une quan-
Elles Elles sont sont exprimées exprimées respectivement respectivement en en milligrammes milligrammes d’ion d’ion
tité suffisante pour recouvrir le cadmium. Laver deux ou trois
nitrate nitrate (NO$ (NO$ et et d’ion d’ion nitrite nitrite (NO$ (NO$ par par kilogramme. kilogramme.
fois le cadmium spongieux avec de l’eau. Transférer le cad-
mium dans un broyeur de laboratoire avec 400 ml de solution
d’acide chlorhydrique à 0,l mol/1 et broyer durant quelques
4 4 Principe Principe
secondes afin d’obtenir des granulés de la dimension requise.
Replacer le contenu du broyeur dans le bécher et l’y maintenir
Extraction Extraction du du fromage fromage de de sérum sérum avec avec de de l’eau l’eau chaude, chaude, précipi- précipi-
durant plusieurs heures en agitant de temps en temps pour
tation tation de de la la matière matière grasse grasse et et des des protéines, protéines, et et filtration. filtration.
chasser les bulles. Décanter la majeure partie du liquide et pro-
Sur Sur une une portion portion du du filtrat, filtrat, réduction, réduction, a a l’état l’état de de nitrites, nitrites, des des ceder immédiatement au cuivrage comme décrit de 9.1 .l
nitrates nitrates extraits, extraits, au au moyen moyen de de cadmium cadmium cuivré. cuivré. à 9.1.5.
1
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ISO 6739 : 1988 0
5.8.3 Solution I I 1.
5.2 Sulfate de cuivre(R), solution.
Dissoudre 20 g de sulfate de cuivre(ll) pentahydraté (CuS04, Dissoudre 0,l g de dichlorhydrate de Wnaphtyl-1) éthylène
5H20) dans de l’eau et compléter à 1000 ml. diamine (C10H7NHCH2CH2NH2, 2HCI) dans de l’eau. Complé-
ter à 100 ml avec de l’eau. Filtrer si nécessaire.
5.3 Solution tampon, de pH 9,6 à 9,7.
La solution peut être conservée jusqu’à 1 semaine au réfrigéra-
teur, dans un récipient en verre bien bouché.
Diluer 50 ml d’acide chlorhydrique concentré [eZO 1,W g/ml;
solution à environ 33% bnlm)l avec 600 ml d’eau. Après
mélange, ajouter 135 ml de solution d’hydroxyde d’ammonium
5.9 Nitrite de sodium, solution étalon correspondant à
QzO 0,91 g/ml; solution à environ 25% (mlm)]. Compléter à
0,001 g d’ion nitrite par litre.
1000 ml avec de l’eau et homogénéiser.
Le jour de l’utilisation, dissoudre 0,150 g de nitrite de sodium
Si la solution d’hydroxyde d’ammonium n’est pas disponible
NOTE -
(NaNO+, préalablement séché de 110 OC à 120 OC jusqu’à
à cette concentration, une quantité équivalente d’une solution plus
masse constante, dans de l’eau; compléter à 1000 ml avec de
concentrée peut être utilisée, par exemple 100 ml de solution à 35 %
l’eau dans une fiole jaugée et homogénéiser.
hlm) (~20 0,88 g/mlL
Diluer 10 ml de cette solution avec 20 ml de la solution tampon
Ajuster le pH de 9,6 à 9,7 si nécessaire.
(5.3), compléter ensuite à 1000 ml avec de l’eau dans une fiole
jaugée et homogénéiser.
5.4 Acide chlorhydrique, solution à environ 2 mol/l.
1 ml de cette solution étalon contient 1,OO pg de NOS.
Diluer 160 ml d’acide chlorhydrique concentré (e2o 1,19 g/ml) à
1000 ml avec de l’eau.
Nitrate de potassium, solution n correspondant à
5.10
5 g d’ion nitrate par litre.
0,004
5.5 Acide chlorhydrique, solution à environ 0,l mol/l.
Dissoudre 1,469 g de nitrate de potassium (KNO,), préalable-
Diluer 50 ml de la solution d’acide chlorhydrique (5.4) à 1000 ml
ment séché à 110 OC à 120 OC jusqu’à masse constante, dans
avec de l’eau.
de l’eau; compléter à 1000 ml avec de l’eau dans une fiole jau-
gée et homogénéiser.
pour la précipitation des protéi nes et de la
5.6 Solutions
matière grasse.
Le jour de l’utilisation, diluer 5 ml de cette solution avec 20 ml
de la solution tampon (5.3), compléter ensuite à 1000 ml avec
de l’eau dans une fiole jaugée et homogénéiser.
5.6.1 Sulfate de zinc, solution.
Dissoudre 53,5 g de sulfate de zinc heptahydraté
1 ml de cette solution étalon contient 450 Fg de NO$
(ZnS&, 7H2C) dans de l’eau et compléter à 100 ml.
6 Appareillage
5.6.2 Hexacyanoferrate(II1 de potassium, solution.
Dissoudre 17,2 g d’hexacyanoferrate( II) de potassium trihy-
Toute la verrerie doit être soigneusement lavée et rincée avec
draté [K4Fe(CN)G, 3H20] dans de l’eau et compléter à 100 ml. de l’eau distillée pour être certain qu’elle est exempte de nitra-
tes et de nitrites.
5.7 EDTA, solution.
Matériel courant de laboratoire, et notamment
Dissoudre 33,5 g d’éthylène diamine tétraacétate disodique
dihydraté (Na2CIoH14N208, 2H20) dans de l’eau et compléter à
6.1 Balance analytique.
1000 ml.
6.2 Dispositif de broyage approprié.
5.8 Solutions pour le développement de la coloration.
6.3 Récipient pour échantillon, muni d’un couvercle étan-
58.1 Solution 1.
che à l’air.
Dissoudre, en chauffant au bain d’eau, 0,5 g de sulfanilamide
(NH2C6H4S02NH2) dans un mélange constitué par 75 ml d’eau 6.4 Mixeur-homogénéiseur de laboratoire, avec réci-
et 5 ml d’acide chlorhydrique concentré (~20 1,19 g/ml). Refroi-
pients en verre de 250 ou 400 ml de capacité.
dir à la température ambiante et compléter à 100 ml avec de
l’eau. Filtrer si nécessaire.
6.5 Fioles coniques, de 250 ml de capacité.
5.8.2 Solution II.
6.6 Fioles jaugées à un trait, de 100, 500 et 1000 ml de
Diluer 450 ml d’acide chlorhydrique concentré (~a 1,19 g/ml) à capacité, conformes aux spécifications de I’ISO 1042 : 1983,
Verrerie de laboratoire - Fioles jaugées à un trait, classe B.
1000 ml avec de l’eau.
2
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ISO 8739 : 1988 V-1
9.1.2 Ajouter une quantité suffisante de la solution d’acide
6.7 Pipettes, permettant de délivrer 2, 4, 5, 6, 8, 10, 12, 20,
chlorhydrique (5.4) pour couvrir le cadmium. Agiter durant
25 et 50 ml, conformes aux spécifications de I’ISO 648 : 1977,
quelques minutes.
Pipettes à un trait, classe A, ou de
Verrerie de laboratoire -
I’ISO 835 : 1981, Verrerie de laboratoire - Pipettes graduées.
Décanter la solution, puis laver à fond le cadmium dans
9. 1.3
NOTE - Le cas échéant, des burettes peuvent être utilisées à la place
la fiole avec de l’eau jusqu’à ce qu’il soit exempt de chlorures.
des pipettes.
9.1.4 Cuivrer les granulés de cadmium par addition de la solu-
6.8 Éprouvettes
graduées, de 5, 10, 25, 100, 250, 500 et
tion de sulfate de cuivre(ll) (5.2) (environ 2,5 ml par gramme de
1000 ml de capacité.
cadmium) et agiter durant 1 min.
6.9 Entonnoirs en verre, d’environ 7 cm de diamétre
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.