ISO 16000-36:2018

Indoor air — Part 36: Standard method for assessing the reduction rate of culturable airborne bacteria by air purifiers using a test chamber

This document specifies a method to evaluate the capacity of air purifiers to reduce the concentration of airborne culturable bacteria. The test is applicable to air purifiers commonly used in single room spaces.

Air intérieur — Partie 36: Méthode normalisée d'évaluation du taux d'abattement de bactéries cultivables aéroportées par des purificateurs d'air en utilisant une chambre d'essai

Le présent document spécifie une méthode d'évaluation de la capacité des purificateurs d'air à réduire la concentration de bactéries cultivables aéroportées. Cet essai s'applique aux purificateurs d'air couramment utilisés dans des espaces ne comportant qu'une seule pièce.

Notranji zrak - 36. del: Standardna metoda s preskusno komoro za ocenjevanje učinkovitosti čistilnikov zraka, ki znižujejo koncentracijo bakterij v zraku

Ta dokument določa metodo za oceno zmogljivosti čistilnika zraka za zmanjšanje koncentracije bakterij, ki se lahko gojijo v zraku.
Preskus se uporablja za čistilnike zraka, ki se običajno uporabljajo v posameznih prostorih.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 01-Oct-2018
• ICS: 13.040.20 - Ambient atmospheres
• Technical Committee: ISO/TC 146/SC 6 - Indoor air
• Drafting Committee: ISO/TC 146/SC 6/WG 10 - Microbial contaminants
• Current Stage: 6060 - International Standard published
• Due Date: 14-Jan-2018
• Completion Date: 02-Oct-2018
• Ref Project: SIST ISO 16000-36:2019 - Indoor air - Part 36: Standard method for assessing the reduction rate of culturable airborne bacteria by air purifiers using a test chamber

Relations

• Consolidated By: ISO 21809-3:2016/Amd 1:2020 - Petroleum and natural gas industries — External coatings for buried or submerged pipelines used in pipeline transportation systems — Part 3: Field joint coatings — Amendment 1: Introduction of mesh-backed coating systems
• Effective Date: 06-Jun-2022

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16000-36
First edition
2018-10
Corrected version
2019-03
Indoor air —
Part 36:
Standard method for assessing the
reduction rate of culturable airborne
bacteria by air purifiers using a test
chamber
Air intérieur —
Partie 36: Méthode normalisée d'évaluation du taux d'abattement
de bactéries cultivables aéroportées par des purificateurs d'air en
utilisant une chambre d'essai
Reference number
ISO 16000-36:2018(E)
ISO 2018
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 16000-36:2018(E)
COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
© ISO 2018

All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may

be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting

on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address

below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: [phone]
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Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2018 – All rights reserved
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 16000-36:2018(E)
Contents Page

Foreword ........................................................................................................................................................................................................................................iv

Introduction ..................................................................................................................................................................................................................................v

1 Scope ................................................................................................................................................................................................................................. 1

2 Normative references ...................................................................................................................................................................................... 1

3 Terms and definitions ..................................................................................................................................................................................... 1

4 Principle ........................................................................................................................................................................................................................ 2

5 Apparatus and materials.............................................................................................................................................................................. 2

5.1 Apparatus .................................................................................................................................................................................................... 2

5.2 Materials ....................................................................................................................................................................................................... 5

5.2.1 Test bacteria ......................................................................................................................................................................... 5

5.2.2 Culture media and reagents ................................................................................................................................... 5

6 Preparation of the stock cultures and working cultures of the test bacteria ........................................6

6.1 Preparation and maintenance of stock culture ........................................................................................................... 6

6.2 Preparation and maintenance of working cultures of the test bacteria on agar plates ........... 6

6.3 Preparation of working culture suspensions ................................................................................................................ 6

7 Procedures .................................................................................................................................................................................................................. 6

7.1 General ........................................................................................................................................................................................................... 6

7.2 Step 1 — Measurement of the concentration of culturable test bacteria, c , without

operating the air purifier ............................................................................................................................................................... 7

7.2.1 General...................................................................................................................................................................................... 7

7.2.2 Preparation of the air purifier and the test chamber ....................................................................... 7

7.2.3 Measurement of bacterial background concentration in the test chamber .................. 7

7.2.4 Nebulizing test bacterial suspension ............................................................................................................. 7

7.2.5 Measurement of the initial concentration of culturable bacteria inside the

test chamber after nebulizing ............................................................................................................................... 7

7.2.6 Measurement of the concentration of culturable bacteria inside the test

chamber after a defined time ................................................................................................................................ 8

7.2.7 Post-test actions ............................................................................................................................................................... 8

7.3 Step 2 — Measurement of the concentration of culturable test bacteria, c , after

operating the air purifier ............................................................................................................................................................... 8

8 Calculation and expression of results ............................................................................................................................................. 8

8.1 Calculation of the concentration of airborne culturable bacteria ............................................................... 8

8.2 Conditions for a valid test .............................................................................................................................................................. 9

8.3 Reduction rate of bacteria ............................................................................................................................................................. 9

9 Test report ................................................................................................................................................................................................................... 9

10 Quality assurance .............................................................................................................................................................................................10

Annex A (informative) Test chamber ................................................................................................................................................................11

Annex B (informative) Natural decay rate according to the operating mode of air purifier ...................14

Annex C (informative) Homogeneity of airborne culturable bacteria in the test chamber .....................16

Bibliography .............................................................................................................................................................................................................................17

© ISO 2018 – All rights reserved iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 16000-36:2018(E)
Foreword

ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards

bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out

through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical

committee has been established has the right to be represented on that committee. International

organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.

ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of

electrotechnical standardization.

The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are

described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the

different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the

editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).

Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of

patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of

any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or

on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).

Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not

constitute an endorsement.

For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and

expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the

World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see www .iso

.org/iso/foreword .html.

This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 146, Air quality, Subcommittee SC 6,

Indoor air.
A list of all parts in the ISO 16000 series can be found on the ISO website.

Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A

complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.

This corrected version of ISO 16000-36:2018 incorporates the following corrections:

3 3 9 9

— In 6.3, the values 1,0 × 10 to 3,5 × 10 have been changed to 1,0 × 10 to 9,0 × 10 ;

3 3 4 4

— In 7.2.5, the values 1,0 × 10 and 3,2 × 10 have been changed to 1,0 × 10 and 3,2 × 10 ;

3 3 4 4

— In 8.2, the values 1,0 × 10 to 3,2 × 10 have been changed to 1,0 × 10 to 3,2 × 10 .

iv © ISO 2018 – All rights reserved
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ISO 16000-36:2018(E)
Introduction

An indoor microbial environment is important to the health of occupants, particularly with regard to

increased time spent indoors.

Air purifiers are used to reduce the concentration of microorganisms in indoor air.

The efficiency of such air purifiers to reduce airborne microorganisms can be investigated in test

chambers at constant temperature and relative air humidity.
© ISO 2018 – All rights reserved v
---------------------- Page: 5 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD ISO 16000-36:2018(E)
Indoor air —
Part 36:
Standard method for assessing the reduction rate of
culturable airborne bacteria by air purifiers using a test
chamber

WARNING — The test given in this document shall be performed by expert staff trained and

certified to handle microorganism-related techniques. The test bacterium Staphylococcus aureus

is a facultative pathogen for human and animals. National and international safety procedures

for working with infectious biomaterials shall be followed to prevent any contamination of

apparatus, working place or environment. The examination and preparation of the cultures

should be carried out in a microbiological safety cabinet class II.
1 Scope

This document specifies a method to evaluate the capacity of air purifiers to reduce the concentration

of airborne culturable bacteria.
The test is applicable to air purifiers commonly used in single room spaces.
2 Normative references

The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content

constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For

undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.

ISO 3696, Water for analytical laboratory use — Specification and test methods

ISO 16000-9:2006, Indoor air — Part 9: Determination of the emission of volatile organic compounds from

building products and furnishing — Emission test chamber method
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.

ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:

— ISO Online browsing platform: available at https: //www .iso .org/obp
— IEC Electropedia: available at http: //www .electropedia .org/
3.1
air purifier

electrically-powered device that is basically built of a fan and a set of components possessing the ability

to capture and/or (partially or totally) destroy air pollutants
3.2
colony forming unit
cfu
unit by which the number of culturable bacteria (3.3) is expressed
[SOURCE: EN 13098:2000, modified]
© ISO 2018 – All rights reserved 1
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 16000-36:2018(E)
3.3
bacteria
procaryotic, single-celled, microscopic organism with peptidoglycan cell wall
3.4
background concentration

concentration of culturable airborne bacteria (3.3) inside the test chamber prior to testing

3.5
natural decay rate

reduction rate of culturable bacteria (3.3), which is measured by comparing the concentration of

bacteria immediately after nebulizing a bacterial suspension inside the chamber with the concentration

counted after a defined time (testing time) without running the air purifier (3.1)

Note 1 to entry: Natural decay rate is expressed in per cent.
3.6
bacterial reduction rate

reduction rate of culturable bacteria (3.3), which is measured by comparing the concentration of

bacteria immediately after nebulizing a bacterial suspension inside the chamber with the concentration

counted after a defined running time (testing time) of the air purifier (3.1)
Note 1 to entry: Bacterial reduction rate is expressed in per cent.
3.7
impaction

sampling of airborne culturable bacteria (3.3) by inertial separation on a solid agar surface

4 Principle

The efficiency of air purifiers is tested using nebulized bacterial suspensions inside a test chamber at

constant temperature and relative air humidity. The efficiency is calculated by the reduction rate of

culturable airborne bacteria in a defined period of time, considering homogeneity and natural decay

rate of the bacteria.
5 Apparatus and materials
5.1 Apparatus
5.1.1 Test chamber.

The chamber shall be made from suitable material, i.e. one that emits minimal pollutant is corrosion

proof, such as stainless steel. It shall maintain sufficient airtight capacity.

The volume of the chamber should reflect the later application of the air purifier. The minimum volume

3 3 3
shall not be below be 8 m and is typically between 15 m and 30 m .

Install a HEPA filter unit for cleaning air by removing particles, an air conditioning unit to control the

temperature and humidity, and a system to decontaminate the air inside the test chamber. Particularly

for larger test chambers, a fan is needed for homogenous distribution of the bacteria.

The test environment shall be kept clean and free from microbial contamination. It shall have a suitable

environmental control system to maintain a constant temperature and humidity. To achieve this, the

test chamber should include the following:

— a system capable of removing contamination and maintaining aseptic condition inside the chamber,

such as an UV lamp;
2 © ISO 2018 – All rights reserved
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ISO 16000-36:2018(E)

— a facility to transfer items into and out of the chamber without cross-contamination (this can include

a special system, such as a glove box);
— a facility to control power inside the chamber from outside;

— a facility to generate an aerosol of test bacteria inside the chamber and to ensure its homogeneity

(this can be achieved by using a spray inlet through which bacteria are nebulised connected to a

spray nozzle in the chamber, with a fan to ensure homogeneous distribution of the bacteria inside

the chamber);

— an air conditioning system inside the chamber capable of controlling temperature and relative

humidity in a stable and precise manner; the air conditioning system shall be switched off during

the test;

— a facility to use negative pressure air flow to flush the chamber post-testing;

— an indicator to display main environmental factors of the test, including flow rate, temperature and

relative humidity;
— a filter to prevent contamination from the outside during ventilation.
A test system using a test chamber is shown in Figure 1.
Key
1 air purifier 6 dehumidifier
2 air intake of air purifier 7 nebulizer
3 3A, 3B, 3C position of impactors 8 filter (to supply clean air)
4 stand for the air purifier 9 pressure pump
5 the inlet of spray 10 test chamber
Figure 1 — Schematic diagram of test system using a test chamber
Example photos of a test chamber are given in Annex A.
© ISO 2018 – All rights reserved 3
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ISO 16000-36:2018(E)
In accordance with ISO 16000-9:2006, 8.1:
— the test temperature and acceptable range of variation shall be (23 ± 2) °C;
— the test humidity and acceptable range of variation shall be (50 ± 5) %.

In addition, the test may be performed under other conditions. These conditions shall be documented.

After each test, the interior space of the test chamber is decontaminated using an UV lamp, 70 % ethanol

(5.1.12) or adopting other decontamination methods in order to prevent contamination after a test.

5.1.2 Nebulizer.

The nebulizer shall be capable of nebulizing culture medium into particles (0,05 µm to 5 µm) to produce,

as far as possible, individual bacterial particles. It typically comprises a pump to generate a defined air

pressure to nebulize, a clean air supplying unit and a dehumidifier to remove excess water from the

generated culture medium.
5.1.3 Impactor for sampling of bacteria.

The impaction method described in this document is only applicable for relatively low concentrations of

culturable bacteria and small chambers, e.g. 8 m .

The initial concentration shall be below the upper detection limit of the sampling method. For

impaction with a 300 holes sampler and a sampling volume of 100 l or 50 l, the upper detection limit is

4 3 4 3

approximately 1,6 × 10 cfu/m or approximately 3,2 × 10 cfu/m , respectively (299 of 300 possible

colonies).
5.1.4 Stand, to position the impactor at the sampling height needed.

5.1.5 Autoclave, thermostatically controlled at (121 ± 3) °C and a pressure of (103 ± 5) kPa.

5.1.6 Incubator, thermostatically controlled at (36 ± 2) °C.
5.1.7 Deep freezer, thermostatically controlled at (–70 ± 10) °C.
5.1.8 Microbiological safety cabinet class II.
5.1.9 Balance, capable
...

SLOVENSKI STANDARD
SIST ISO 16000-36:2019
01-september-2019
Notranji zrak - 36. del: Standardna metoda s preskusno komoro za ocenjevanje
učinkovitosti čistilnikov zraka, ki znižujejo koncentracijo bakterij v zraku

Indoor air - Part 36: Standard method for assessing the reduction rate of culturable

airborne bacteria by air purifiers using a test chamber

Air intérieur - Partie 36: Méthode normalisée d'évaluation du taux de réduction des

bactéries cultivables en suspension par des purificateurs d'air en utilisant une chambre

d'essai
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 16000-36:2018
ICS:
13.040.20 Kakovost okoljskega zraka Ambient atmospheres
SIST ISO 16000-36:2019 en,fr

2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

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SIST ISO 16000-36:2019
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SIST ISO 16000-36:2019
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16000-36
First edition
2018-10
Corrected version
2019-03
Indoor air —
Part 36:
Standard method for assessing the
reduction rate of culturable airborne
bacteria by air purifiers using a test
chamber
Air intérieur —
Partie 36: Méthode normalisée d'évaluation du taux d'abattement
de bactéries cultivables aéroportées par des purificateurs d'air en
utilisant une chambre d'essai
Reference number
ISO 16000-36:2018(E)
ISO 2018
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SIST ISO 16000-36:2019
ISO 16000-36:2018(E)
COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
© ISO 2018

All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may

be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting

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SIST ISO 16000-36:2019
ISO 16000-36:2018(E)
Contents Page

Foreword ........................................................................................................................................................................................................................................iv

Introduction ..................................................................................................................................................................................................................................v

1 Scope ................................................................................................................................................................................................................................. 1

2 Normative references ...................................................................................................................................................................................... 1

3 Terms and definitions ..................................................................................................................................................................................... 1

4 Principle ........................................................................................................................................................................................................................ 2

5 Apparatus and materials.............................................................................................................................................................................. 2

5.1 Apparatus .................................................................................................................................................................................................... 2

5.2 Materials ....................................................................................................................................................................................................... 5

5.2.1 Test bacteria ......................................................................................................................................................................... 5

5.2.2 Culture media and reagents ................................................................................................................................... 5

6 Preparation of the stock cultures and working cultures of the test bacteria ........................................6

6.1 Preparation and maintenance of stock culture ........................................................................................................... 6

6.2 Preparation and maintenance of working cultures of the test bacteria on agar plates ........... 6

6.3 Preparation of working culture suspensions ................................................................................................................ 6

7 Procedures .................................................................................................................................................................................................................. 6

7.1 General ........................................................................................................................................................................................................... 6

7.2 Step 1 — Measurement of the concentration of culturable test bacteria, c , without

operating the air purifier ............................................................................................................................................................... 7

7.2.1 General...................................................................................................................................................................................... 7

7.2.2 Preparation of the air purifier and the test chamber ....................................................................... 7

7.2.3 Measurement of bacterial background concentration in the test chamber .................. 7

7.2.4 Nebulizing test bacterial suspension ............................................................................................................. 7

7.2.5 Measurement of the initial concentration of culturable bacteria inside the

test chamber after nebulizing ............................................................................................................................... 7

7.2.6 Measurement of the concentration of culturable bacteria inside the test

chamber after a defined time ................................................................................................................................ 8

7.2.7 Post-test actions ............................................................................................................................................................... 8

7.3 Step 2 — Measurement of the concentration of culturable test bacteria, c , after

operating the air purifier ............................................................................................................................................................... 8

8 Calculation and expression of results ............................................................................................................................................. 8

8.1 Calculation of the concentration of airborne culturable bacteria ............................................................... 8

8.2 Conditions for a valid test .............................................................................................................................................................. 9

8.3 Reduction rate of bacteria ............................................................................................................................................................. 9

9 Test report ................................................................................................................................................................................................................... 9

10 Quality assurance .............................................................................................................................................................................................10

Annex A (informative) Test chamber ................................................................................................................................................................11

Annex B (informative) Natural decay rate according to the operating mode of air purifier ...................14

Annex C (informative) Homogeneity of airborne culturable bacteria in the test chamber .....................16

Bibliography .............................................................................................................................................................................................................................17

© ISO 2018 – All rights reserved iii
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SIST ISO 16000-36:2019
ISO 16000-36:2018(E)
Foreword

ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards

bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out

through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical

committee has been established has the right to be represented on that committee. International

organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.

ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of

electrotechnical standardization.

The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are

described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the

different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the

editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).

Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of

patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of

any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or

on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).

Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not

constitute an endorsement.

For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and

expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the

World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see www .iso

.org/iso/foreword .html.

This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 146, Air quality, Subcommittee SC 6,

Indoor air.
A list of all parts in the ISO 16000 series can be found on the ISO website.

Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A

complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.

This corrected version of ISO 16000-36:2018 incorporates the following corrections:

3 3 9 9

— In 6.3, the values 1,0 × 10 to 3,5 × 10 have been changed to 1,0 × 10 to 9,0 × 10 ;

3 3 4 4

— In 7.2.5, the values 1,0 × 10 and 3,2 × 10 have been changed to 1,0 × 10 and 3,2 × 10 ;

3 3 4 4

— In 8.2, the values 1,0 × 10 to 3,2 × 10 have been changed to 1,0 × 10 to 3,2 × 10 .

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SIST ISO 16000-36:2019
ISO 16000-36:2018(E)
Introduction

An indoor microbial environment is important to the health of occupants, particularly with regard to

increased time spent indoors.

Air purifiers are used to reduce the concentration of microorganisms in indoor air.

The efficiency of such air purifiers to reduce airborne microorganisms can be investigated in test

chambers at constant temperature and relative air humidity.
© ISO 2018 – All rights reserved v
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 16000-36:2018(E)
Indoor air —
Part 36:
Standard method for assessing the reduction rate of
culturable airborne bacteria by air purifiers using a test
chamber

WARNING — The test given in this document shall be performed by expert staff trained and

certified to handle microorganism-related techniques. The test bacterium Staphylococcus aureus

is a facultative pathogen for human and animals. National and international safety procedures

for working with infectious biomaterials shall be followed to prevent any contamination of

apparatus, working place or environment. The examination and preparation of the cultures

should be carried out in a microbiological safety cabinet class II.
1 Scope

This document specifies a method to evaluate the capacity of air purifiers to reduce the concentration

of airborne culturable bacteria.
The test is applicable to air purifiers commonly used in single room spaces.
2 Normative references

The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content

constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For

undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.

ISO 3696, Water for analytical laboratory use — Specification and test methods

ISO 16000-9:2006, Indoor air — Part 9: Determination of the emission of volatile organic compounds from

building products and furnishing — Emission test chamber method
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.

ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:

— ISO Online browsing platform: available at https: //www .iso .org/obp
— IEC Electropedia: available at http: //www .electropedia .org/
3.1
air purifier

electrically-powered device that is basically built of a fan and a set of components possessing the ability

to capture and/or (partially or totally) destroy air pollutants
3.2
colony forming unit
cfu
unit by which the number of culturable bacteria (3.3) is expressed
[SOURCE: EN 13098:2000, modified]
© ISO 2018 – All rights reserved 1
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SIST ISO 16000-36:2019
ISO 16000-36:2018(E)
3.3
bacteria
procaryotic, single-celled, microscopic organism with peptidoglycan cell wall
3.4
background concentration

concentration of culturable airborne bacteria (3.3) inside the test chamber prior to testing

3.5
natural decay rate

reduction rate of culturable bacteria (3.3), which is measured by comparing the concentration of

bacteria immediately after nebulizing a bacterial suspension inside the chamber with the concentration

counted after a defined time (testing time) without running the air purifier (3.1)

Note 1 to entry: Natural decay rate is expressed in per cent.
3.6
bacterial reduction rate

reduction rate of culturable bacteria (3.3), which is measured by comparing the concentration of

bacteria immediately after nebulizing a bacterial suspension inside the chamber with the concentration

counted after a defined running time (testing time) of the air purifier (3.1)
Note 1 to entry: Bacterial reduction rate is expressed in per cent.
3.7
impaction

sampling of airborne culturable bacteria (3.3) by inertial separation on a solid agar surface

4 Principle

The efficiency of air purifiers is tested using nebulized bacterial suspensions inside a test chamber at

constant temperature and relative air humidity. The efficiency is calculated by the reduction rate of

culturable airborne bacteria in a defined period of time, considering homogeneity and natural decay

rate of the bacteria.
5 Apparatus and materials
5.1 Apparatus
5.1.1 Test chamber.

The chamber shall be made from suitable material, i.e. one that emits minimal pollutant is corrosion

proof, such as stainless steel. It shall maintain sufficient airtight capacity.

The volume of the chamber should reflect the later application of the air purifier. The minimum volume

3 3 3
shall not be below be 8 m and is typically between 15 m and 30 m .

Install a HEPA filter unit for cleaning air by removing particles, an air conditioning unit to control the

temperature and humidity, and a system to decontaminate the air inside the test chamber. Particularly

for larger test chambers, a fan is needed for homogenous distribution of the bacteria.

The test environment shall be kept clean and free from microbial contamination. It shall have a suitable

environmental control system to maintain a constant temperature and humidity. To achieve this, the

test chamber should include the following:

— a system capable of removing contamination and maintaining aseptic condition inside the chamber,

such as an UV lamp;
2 © ISO 2018 – All rights reserved
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SIST ISO 16000-36:2019
ISO 16000-36:2018(E)

— a facility to transfer items into and out of the chamber without cross-contamination (this can include

a special system, such as a glove box);
— a facility to control power inside the chamber from outside;

— a facility to generate an aerosol of test bacteria inside the chamber and to ensure its homogeneity

(this can be achieved by using a spray inlet through which bacteria are nebulised connected to a

spray nozzle in the chamber, with a fan to ensure homogeneous distribution of the bacteria inside

the chamber);

— an air conditioning system inside the chamber capable of controlling temperature and relative

humidity in a stable and precise manner; the air conditioning system shall be switched off during

the test;

— a facility to use negative pressure air flow to flush the chamber post-testing;

— an indicator to display main environmental factors of the test, including flow rate, temperature and

relative humidity;
— a filter to prevent contamination from the outside during ventilation.
A test system using a test chamber is shown in Figure 1.
Key
1 air purifier 6 dehumidifier
2 air intake of air purifier 7 nebulizer
3 3A, 3B, 3C position of impactors 8 filter (to supply clean air)
4 stand for the air purifier 9 pressure pump
5 the inlet of spray 10 test chamber
Figure 1 — Schematic diagram of test system using a test chamber
Example photos of a test chamber are given in Annex A.
© ISO 2018 – All rights reserved 3
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SIST ISO 16000-36:2019
ISO 16000-36:2018(E)
In accordance with ISO 16000-9:2006, 8.1:
— the test temperature and acceptable range of variation shall be (23 ± 2) °C;
— the test humidity and acceptable range of variation shall be (50 ± 5) %.

In addition, the test may be performed under other conditions. These conditions shall be documented.

After each test, the interior space of the test chamber is decontaminated using an UV lamp, 70 % ethanol

(5.1.12) or adopting other decontamination methods in order to prevent contamination after a test.

5.1.2 Nebulizer.

The nebulizer shall be capable of nebulizing culture medium into particles (0,05 µm to 5 µm) to produce,

as far as possible, individual bacterial particles. It typically comprises a pump to generate a defined air

pressure to nebulize, a clean air supplying unit and a dehumidifier to remove excess water from the

generated culture medium.
5.1.3 Impactor for sampling of bacteria.

The impaction method described in this document is only applicable for relatively low concentrations of

culturable bacteria and small chambers, e.g. 8 m .

The initial concentration shall be below the upper detection limit of the sampling method. For

impaction with a 300 holes sampler and a samp
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 16000-36
Première édition
2018-10
Version corrigée
2019-03
Air intérieur —
Partie 36:
Méthode normalisée d'évaluation
du taux d'abattement de bactéries
cultivables aéroportées par des
purificateurs d'air en utilisant une
chambre d'essai
Indoor air —
Part 36: Standard method for assessing the reduction rate of
culturable airborne bacteria by air purifiers using a test chamber
Numéro de référence
ISO 16000-36:2018(F)
ISO 2018
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ISO 16000-36:2018(F)
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,

y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut

être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.

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Publié en Suisse
ii © ISO 2018 – Tous droits réservés
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ISO 16000-36:2018(F)
Sommaire Page

Avant-propos ..............................................................................................................................................................................................................................iv

Introduction ..................................................................................................................................................................................................................................v

1 Domaine d'application ................................................................................................................................................................................... 1

2 Références normatives ................................................................................................................................................................................... 1

3 Termes et définitions ....................................................................................................................................................................................... 1

4 Principe .......................................................................................................................................................................................................................... 2

5 Appareillage et matériel ............................................................................................................................................................................... 2

5.1 Appareillage............................................................................................................................................................................................... 2

5.2 Matériel ......................................................................................................................................................................................................... 5

5.2.1 Bactéries pour essai ...................................................................................................................................................... 5

5.2.2 Milieux de culture et réactifs ................................................................................................................................. 5

6 Préparation des cultures mères et des cultures de travail des bactéries pour essai ....................6

6.1 Préparation et conservation de la culture mère......................................................................................................... 6

6.2 Préparation et conservation des cultures de travail des bactéries pour essai sur

des boîtes de gélose ............................................................................................................................................................................ 7

6.3 Préparation de suspensions de cultures de travail .................................................................................................. 7

7 Modes opératoires .............................................................................................................................................................................................. 7

7.1 Généralités .................................................................................................................................................................................................. 7

7.2 Étape 1 — Mesurage de la concentration de bactéries pour essai cultivables, c ,

avec le purificateur d’air à l’arrêt ............................................................................................................................................ 7

7.2.1 Généralités ............................................................................................................................................................................ 7

7.2.2 Préparation du purificateur d’air et de la chambre d’essai......................................................... 7

7.2.3 Mesurage de la concentration bactérienne de fond dans la chambre d’essai ............. 8

7.2.4 Nébulisation de la suspension bactérienne pour essai .................................................................. 8

7.2.5 Mesurage de la concentration initiale de bactéries cultivables à l’intérieur

de la chambre après nébulisation ..................................................................................................................... 8

7.2.6 Mesurage de la concentration de bactéries cultivables à l’intérieur de la

chambre d’essai au bout d’un temps donné ............................................................................................. 9

7.2.7 Actions à entreprendre à l’issue de l’essai ................................................................................................. 9

7.3 Étape 2 — Mesurage de la concentration de bactéries pour essai cultivables, c ,

après fonctionnement du purificateur d’air .................................................................................................................. 9

8 Calcul et expression des résultats ...................................................................................................................................................... 9

8.1 Calcul de la concentration de bactéries cultivables aéroportées ................................................................. 9

8.2 Conditions de validité de l’essai ............................................................................................................................................10

8.3 Taux d’abattement des bactéries ..........................................................................................................................................10

9 Rapport d'essai ...................................................................................................................................................................................................10

10 Assurance qualité .............................................................................................................................................................................................11

Annexe A (informative) Chambre d'essai .....................................................................................................................................................12

Annexe B (informative) Taux de décomposition naturelle en fonction du mode de

fonctionnement du purificateur d’air .........................................................................................................................................15

Annexe C (informative) Homogénéité des bactéries cultivables aéroportées dans la

chambre d’essai ..................................................................................................................................................................................................17

Bibliographie ...........................................................................................................................................................................................................................19

© ISO 2018 – Tous droits réservés iii
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ISO 16000-36:2018(F)
Avant-propos

L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes

nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est

en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude

a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,

gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.

L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui

concerne la normalisation électrotechnique.

Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont

décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents

critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été

rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www

.iso .org/directives).

L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de

droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable

de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant

les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de

l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de

brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).

Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données

pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un

engagement.

Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions

spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion

de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles

techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/iso/fr/avant -propos.

Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 146, Qualité de l’air, sous-comité SC 6,

Air intérieur.

Une liste de toutes les parties de la série ISO 16000 se trouve sur le site Web de l’ISO.

Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent

document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes

se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.

La présente version corrigée de l'ISO 16000-36:2018 inclut les corrections suivantes:

3 3 9 9

— En 6.3, les valeurs 1,0 × 10 à 3,5 × 10 ont été remplacées par 1,0 × 10 à 9,0 × 10 ;

3 3 4 4

— En 7.2.5, les valeurs 1,0 × 10 et 3,2 × 10 ont été remplacées par 1,0 × 10 et 3,2 × 10 ;

3 3 4 4

— En 8.2, les valeurs 1,0 × 10 à 3,2 × 10 ont été remplacées par 1,0 × 10 à 3,2 × 10 .

iv © ISO 2018 – Tous droits réservés
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ISO 16000-36:2018(F)
Introduction

L’environnement microbien intérieur est important pour la santé des occupants, notamment au vu du

temps de plus en plus long passé à l'intérieur.

Les purificateurs d’air sont utilisés pour réduire la concentration des microorganismes dans l’air

intérieur.

L’efficacité de ces purificateurs d’air en matière d’abattement des microorganismes aéroportés peut

être examinée dans des chambres d’essai à température et humidité relative de l'air constantes.

© ISO 2018 – Tous droits réservés v
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NORME INTERNATIONALE ISO 16000-36:2018(F)
Air intérieur —
Partie 36:
Méthode normalisée d'évaluation du taux d'abattement
de bactéries cultivables aéroportées par des purificateurs
d'air en utilisant une chambre d'essai

AVERTISSEMENT — L’essai décrit dans le présent document doit être réalisé par du personnel

expert, formé et qualifié aux techniques microbiologiques. La bactérie d’essai, Staphylococcus

aureus, est une bactérie facultative pathogène pour l’homme et les animaux. Les consignes de

sécurité nationales et internationales concernant les travaux réalisés avec des biomatériaux

infectieux doivent être respectés pour prévenir toute contamination des appareils, du poste de

travail ou de l’environnement. Il convient de réaliser l’examen et la préparation des cultures

dans un poste de sécurité microbiologique de classe II.
1 Domaine d'application

Le présent document spécifie une méthode d'évaluation de la capacité des purificateurs d’air à réduire

la concentration de bactéries cultivables aéroportées.

Cet essai s’applique aux purificateurs d’air couramment utilisés dans des espaces ne comportant qu'une

seule pièce.
2 Références normatives

Les documents suivants cités dans le texte constituent, pour tout ou partie de leur contenu, des

exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour les

références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les éventuels

amendements).

ISO 3696, Eau pour laboratoire à usage analytique — Spécification et méthodes d’essai

ISO 16000-9:2006, Air intérieur — Partie 9: Dosage de l’émission de composés organiques volatils de

produits de construction et d’objets d’équipement — Méthode de la chambre d’essai d’émission

3 Termes et définitions

Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.

L'ISO et l'IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en

normalisation, consultables aux adresses suivantes:

— ISO Online browsing platform: disponible à l'adresse http: //www .iso .org/obp.

— IEC Electropedia: disponible à l'adresse http: //www .electropedia .org/
3.1
purificateur d’air

dispositif électrique composé principalement d’un ventilateur et d’un ensemble de composants ayant la

capacité de capturer et/ou de détruire (partiellement ou en totalité) les polluants de l’air

© ISO 2018 – Tous droits réservés 1
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ISO 16000-36:2018(F)
3.2
unité formant colonie
ufc
unité dans laquelle est exprimé le nombre de bactéries (3.3) cultivables
[SOURCE: EN 13098:2000, modifiée]
3.3
bactérie

organisme microscopique procaryote, unicellulaire, à paroi constituée de peptidoglycane

3.4
concentration de fond

concentration de bactéries (3.3) cultivables aéroportées à l’intérieur de la chambre d’essai avant l’essai

3.5
taux de décomposition naturelle

taux d’abattement de bactéries (3.3) cultivables, mesuré en comparant la concentration de bactéries

aussitôt après la nébulisation d’une suspension bactérienne à l’intérieur de la chambre à la concentration

relevée après un laps de temps défini (durée d’essai), le purificateur d’air (3.1) étant à l’arrêt

Note 1 à l'article: Le taux de décomposition naturelle est exprimé en pourcentage.

3.6
taux d’abattement bactérien

taux d’abattement de bactéries (3.3) cultivables, mesuré en comparant la concentration de bactéries

aussitôt après la nébulisation d’une suspension bactérienne à l’intérieur de la chambre) à la concentration

relevée après une durée de fonctionnement (durée d’essai) donnée du purificateur d’air (3.1)

Note 1 à l'article: Le taux d’abattement bactérien est exprimé en pourcentage.
3.7
impaction

échantillonnage de bactéries (3.3) cultivables aéroportées par séparation inertielle sur une surface

solide de gélose
4 Principe

L’efficacité des purificateurs d’air est évaluée en utilisant des suspensions bactériennes nébulisées dans

une chambre d’essai à température et humidité relative de l'air constantes. L’efficacité est calculée à

partir du taux d’abattement des bactéries cultivables aéroportées sur une période de temps donnée, en

tenant compte de l’homogénéité et du taux de décomposition naturelle des bactéries.

5 Appareillage et matériel
5.1 Appareillage
5.1.1 Chambre d’essai

La chambre d’essai doit être fabriquée dans un matériau approprié, c’est-à-dire émettant un minimum

de polluants, résistant à la corrosion, comme l’acier inoxydable. Elle doit conserver une capacité

d’étanchéité à l’air suffisante.

Il convient que le volume de la chambre corresponde à l'application future du purificateur d’air. Le

3 3 3

volume minimal ne doit pas être inférieur à 8 m et se situe habituellement entre 15 m et 30 m .

Installer un filtre HEPA de purification de l'air pour ôter les particules, une unité de conditionnement de

l’air pour réguler la température et l'humidité et un système de décontamination de l’air de la chambre

2 © ISO 2018 – Tous droits réservés
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ISO 16000-36:2018(F)

d’essai. En ce qui concerne notamment les chambres d’essai plus grandes, un ventilateur s’avère

nécessaire pour une répartition homogène des bactéries.

L’environnement d’essai doit être maintenu dans un bon état de propreté et être exempt de

contamination microbienne. Il doit être équipé d’un système de contrôle de l’environnement approprié

pour maintenir une température et une humidité constantes. Pour ce faire, il convient que la chambre

d’essai comporte:

— un système capable d’éliminer la contamination et de maintenir des conditions d'asepsie dans la

chambre, par exemple une lampe à UV;

— un dispositif permettant le transfert des objets dans et hors de la chambre sans contamination

croisée (celui-ci peut comporter un dispositif spécial tel qu’une boîte à gants);

— un dispositif permettant de contrôler l’alimentation électrique dans la chambre depuis l’extérieur;

— un dispositif permettant de générer un aérosol de bactéries pour essai à l’intérieur de la chambre et

de garantir son homogénéité (ce résultat peut être obtenu en utilisant un orifice de vaporisation à

travers lequel les bactéries sont nébulisées, relié à une buse de vaporisation dans la chambre, et un

ventilateur pour garantir une répartition homogène des bactéries dans la chambre);

— un système de conditionnement d’air à l'intérieur de la chambre, à même de contrôler la température

et l’humidité relative de façon stable et précise; le système de conditionnement d’air doit être à

l’arrêt pendant l’essai;

— un dispositif permettant d’utiliser un débit d’air à pression négative pour procéder au nettoyage de

la chambre après l’essai;

— un indicateur permettant d’afficher les principaux facteurs environnementaux de l’essai, y compris

le débit, la température et l’humidité relative;

— un filtre permettant de prévenir, pendant la ventilation, une contamination venant de l’extérieur.

Un dispositif d’essai avec chambre d’essai est présenté à la Figure 1.
© ISO 2018 – Tous droits réservés 3
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ISO 16000-36:2018(F)
Légende
1 purificateur d’air 6 déshumidificateur
2 prise d’air du purificateur 7 nébuliseur
3 3A, 3B, 3C position des impacteurs 8 filtre (pour délivrer un air purifié)
4 support du purificateur d’air 9 pompe à pression
5 orifice de vaporisation 10 chambre d’essai

Figure 1 — Représentation schématique d’un dispositif d’essai avec chambre d’essai

Des photos d’exemples de chambres d’essai sont fournies à l’Annexe A.
Conformément à l’ISO 16000-9:2006, 8.1:

— la température d'essai et la plage de variation acceptable doivent être de (23 ± 2) °C;

— l’humidité d’essai et la plage de variation acceptable doivent être de (50 ± 5) %.

En outre, l’essai peut être réalisé dans d’autres conditions. Ces conditions doivent être documentées.

À l’issue de chaque essai, décontaminer l’espace intérieur de la chambre d’essai en utilisant une lampe

à UV ou de l’éthanol à 70% (5.1.12), ou en adoptant d’autres méthodes de décontamination afin de

prévenir toute contamination après essai.
5.1.2 Nébuliseur

Le nébuliseur doit pouvoir nébuliser un milieu de culture en particules (de 0,05 µm à 5 µm) pour

produire, dans la mesure du possible, des particules bactériennes isolées. De façon générale, il comporte

une pompe pour générer une pression d’air donnée en vue de la nébulisation, une unité d’alimentation

en air purifié et un déshumidificateur pour retirer l’eau en excès du milieu de culture généré.

5.1.3 Impacteur pour l’échantillonnage des bactéries

La méthode d’impaction décrite dans le présent document n’est applicable que pour des concentrations

relativement faibles de bactéries cultivables et pour des chambres de petit volume, par exemple de 8 m .

4 © ISO 2018 – Tous droits réservés
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ISO 16000-36:2018(F)

La concentration initiale doit être inférieure à la limite de détection supérieure de la méthode

d’échantillonnage. Pour une impaction avec un échantillonneur à 300 orifices et un volume

4 3

d’échantillonnage de 100 l ou de 50 l, la limite de détection supérieure est d’environ 1,6 x 10 ufc/m ou

4 3
d’environ 3,2 x 10 ufc/m , respectivement (299 sur 300 colonies possibles).
5.1.4 Support pour placer l'impacteur à la hauteur d’échantillonnage nécessaire.

5.1.5 Autoclave, à régulation thermostatique, réglé à (121 ± 3) °C et à une pression de (103 ± 5) kPa.

5.1.6 Étuve, à régulation thermostatique, réglée à (36 + 2) °C.
5.1.7 Congélateur, à régulation thermostatique, réglé à (–70 ± 10) °C.
5.1.8 Poste de sécurité microbiologique de classe II.
5.1.9 Balance, pouvant peser à ± 0,01 g près.
5.1.10 Anse d’ensemencement, boucle de 4 mm de diamètre, stérile.
5.1.11 Boîtes de Pétri, ventilées, stériles, d’un diamètre de 9
...