ISO 3890-1:2000
(Main)Milk and milk products — Determination of residues of organochlorine compounds (pesticides) — Part 1: General considerations and extraction methods
Milk and milk products — Determination of residues of organochlorine compounds (pesticides) — Part 1: General considerations and extraction methods
Lait et produits laitiers — Détermination des résidus de composés organochlorés (pesticides) — Partie 1: Considérations générales et méthodes d'extraction
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 3890-1
First edition
2000-07-01
Milk and milk products — Determination of
residues of organochlorine compounds
(pesticides) —
Part 1:
General considerations and extraction
methods
Lait et produits laitiers — Détermination des résidus de composés
organochlorés (pesticides) —
Partie 1: Considérations générales et méthodes d'extraction
Reference number
ISO 3890-1:2000(E)
©
ISO 2000
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ISO 3890-1:2000(E)
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ISO 3890-1:2000(E)
Contents Page
Foreword.v
1 Scope .1
2 Normative references .2
3 Term and definition .2
4 Principle.2
4.1 Extraction .2
4.2 Clean-up.2
4.3 Determination.2
4.4 Confirmation.2
5 Requirements for reagents and materials.3
5.1 General.3
5.2 Check for purity of reagents.3
6 Requirements for apparatus.4
6.1 General.4
6.2 Gas-liquid chromatography apparatus .5
7 Sampling.6
8 Preparation of test sample.6
8.1 Milk.6
8.2 Evaporated milk .6
8.3 Sweetened condensed milk.6
8.4 Powdered milk products .6
8.5 Butter and butterfat .6
8.6 Cheese .6
8.7 Other milk products.7
9 Procedure .7
9.1 General.7
9.2 Extraction .7
9.3 Clean up.7
10 Preliminary tests.7
11 Quantitative determination .8
12 Confirmatory tests.8
13 Evaluation of results .8
13.1 Calculation of results .8
13.2 Presentation and expression of results .8
14 Precision.9
14.1 Evaluation of precision .9
14.2 Repeatability.9
14.3 Reproducibility.9
14.4 Limit of determination .10
15 Test report .10
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ISO 3890-1:2000(E)
Annex A (normative) Extraction of fat and organochlorine compounds and determination of fat
content .11
Annex B (informative) Analysis in the presence of polychlorinated biphenyl (PCBs).15
Bibliography .16
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ISO 3890-1:2000(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO
member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical
committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in
liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 3.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting.
Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this part of ISO 3890 may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
International Standard ISO 3890-1 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Agricultural food products,
Subcommittee SC 5, Milk and milk products, in collaboration with the International Dairy Federation (IDF) and
AOAC International, and will also be published by these organizations.
ISO 3890 consists of the following parts, under the general title Milk and milk products — Determination of residues
of organochlorine compounds (pesticides):
— Part 1: General considerations and extraction methods
— Part 2: Test methods for crude extract purification and confirmation
Annex A forms a normative part of this part of ISO 3890. Annex B is for information only.
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 3890-1:2000(E)
Milk and milk products — Determination of residues of
organochlorine compounds (pesticides) —
Part 1:
General considerations and extraction methods
WARNING — The use of this part of ISO 3890 may involve hazardous materials, operations and equipment.
This standard does not purport to address all the safety problems associated with its use. It is the
responsibility of the user of this standard to establish safety and health practices and determine the
applicability of regulatory limitations prior to use.
1 Scope
This part of ISO 3890 describes general considerations and extraction methods for the determination of residues of
organochlorine pesticides in milk and milk products.
Annex A specifies a method for high-fat products.
Guidance is given on the conduct of analyses in the presence of polychlorinated biphenyls (PCBs) in annex B.
The applicability of the various methods is given in Table 1.
Table 1 — Application of methods to various compounds
DDT
Heptachlor Chlordane Delta-
Aldrin/ DDE
Method ��-HCH ß-HCH ��-HCH Heptachlor- Oxy- Endrin keto- HCB
�� ��
dieldrin TDE
epoxide chlordane endrin
isomers
A + + + ++ ++ + –
B + + + ++ ++ + –
C + + + ++ ++ + +
D + + + ++ ++ + +
E + + + ++ ++ + +
F + + + ++ ++ + + +
G + + + ++ ++ + + +
H + + + ++ ++ + +
Key: + applicable
– not applicable
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ISO 3890-1:2000(E)
2 Normative references
The following normative documents contain provisions which, through reference in this text, constitute provisions of
this part of ISO 3890. For dated references, subsequent amendments to, or revisions of, any of these publications
do not apply. However, parties to agreements based on this part of ISO 3890 are encouraged to investigate the
possibility of applying the most recent editions of the normative documents indicated below. For undated
references, the latest edition of the normative document referred to applies. Members of ISO and IEC maintain
registers of currently valid International Standards.
ISO 3890-2, Milk and milk products — Determination of residues of organochlorine compounds (pesticides) —
Part 2: Crude extract purification and confirmation test methods.
ISO 5725-1:1994, Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results — Part 1: General
principles and definitions.
ISO 5725-2:1994, Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results — Part 2: Basic method
for the determination of repeatability and reproducibility of a standard measurement method.
3 Term and definition
For the purposes of this part of ISO 3890, the following term and definition applies.
3.1
contents of organochlorine compounds
mass fraction of substances determined using the procedures specified in this part of ISO 3890
NOTE It is expressed in milligrams per kilogram, either on a fat basis or on a product basis (for low fat products).
4Principle
NOTE The methods are based on a four-stage process; two stages may sometimes be combined, in whole or in part.
4.1 Extraction
Residues from the sample substrate are extracted by appropriate solvents, so as to obtain the maximum efficiency
of extraction of the residues and minimum co-extraction of any substances which may give rise to interference in
the determination.
4.2 Clean-up
Interfering materials are removed from the extract to obtain a solution of the extracted residue in a solvent which is
suitable for quantitative examination by the selected method of determination.
4.3 Determination
The content of organochlorine compounds is determined by gas-liquid chromatography with electron-capture
detection.
4.4 Confirmation
The identity of the observed pesticide residues is confirmed, particularly in those cases where it would appear that
the maximum permitted level has been exceeded.
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ISO 3890-1:2000(E)
Interference of PCBs and pesticides is a well-know problem in packed columns and to a lesser extent in with
capillary columns. In the case of relatively high levels of PCBs, it is recommended to determine PCBs according to
IDF 130A [14].
5 Requirements for reagents and materials
5.1 General
Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise specified, and distilled or demineralized water
or water of equivalent purity. Redistil water and solvents used and check their purity (see 5.2). The limit of the
impurity of each of the used reagents shall not exceed the limit of determination defined in 14.4. The total impurity
of all reagents used in the method, however, may exceed that limit. Purify and periodically activate adsorbents
according to the requirements of the different analytical methods. Check their purity (see 5.2.5).
Every precaution shall be taken to avoid possible contamination of water, solvents, adsorbents, etc. by plastic or
rubber materials.
Store all purified reagents, adsorbents etc. in glass bottles with glass stoppers or with PTFE wads in the caps. Do
not leave them exposed to the atmosphere after purification. Acetone-washed aluminium foil provides suitable
protection in many situations.
5.2 Check for purity of reagents
5.2.1 Solvents
Concentrate solvents by the factor involved in the method to be used. Test for purity by GLC (see 6.2). The
chromatogram shall not show any interfering impurity whose concentration exceeds the limit of determination
defined in 14.4. Extract or concentrate acetonitrile, dimethylformamide (DMF) and methylene chloride in the same
volumes as used in the method and examine the resulting solution by gas chromatography.
5.2.2 Water
Extract 10 parts (by volume) of water with 1 part (by volume) of n-hexane or light petroleum. Separate the organic
phase. Concentrate by the factor involved in the method used and test for purity by GLC (see 6.2).
The chromatogram shall not show any interfering impurity whose concentration exceeds the limits of determination
defined in 14.4.
5.2.3 Inorganic salts
Extract inorganic salts (e.g. sodium chloride), after purification according to the requirements of the different
analytical methods, and any aqueous solutions used with n-hexane or light petroleum. Concentrate the extract by
the factor involved in the method used and test by GLC. The chromatogram shall not show any interfering impurity
whose concentration exceeds the limit of determination defined in 14.4.
5.2.4 Cotton wool, glass wool and quartz wool
Extract these with n-hexane and acetone using a Soxhlet extractor, until they are sufficiently free from interfering
substances.
5.2.5 Adsorbents
Elute an amount of adsorbent equal to that used in the analytical method with the corresponding type and volume
of solvent mixture. Concentrate the eluate as indicated in the analytical method and test for purity by GLC (see
6.2). The chromatogram shall not show any interfering impurity whose concentration exceeds the limit of
determination defined in 14.4. Check the activity of adsorbents regularly.
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5.2.6 Standard solutions
Use materials of at least 95 % purity to prepare standard solutions for pesticide residue analysis.
If stored at –20�C, they are generally stable for at least 1 or 2 years. Stock solutions of concentration 1 mg/ml, kept
in a refrigerator at about 4�C, are usually stable for 2 to 3 months. Prepare diluted solutions freshly each day.
NOTE Changes in volume by solvent evaporation, for example through the pores between a glass stopper and the neck of
a flask, might be a source of error.
Store standard solutions in glass bottles in a refrigerator and take every precaution to avoid possible contamination
by plastic or rubber materials. Do not expose standard solutions to sunlight or ultraviolet light for extended periods.
Mass spectrometry and gas-liquid chromatography may be used to examine analytical standards for impurities.
Experience has shown that faults introduced in the preparation, handling and storage of standards and standard
solutions are a major source of error.
6 Requirements for apparatus
6.1 General
Thoroughly clean all glassware used for residue analysis. Hot chromic/sulfuric acid solution may be used for
cleaning. If this solution is used, wash the glassware well afterwards with distilled water and acetone before drying.
Immediately before use, rinse the glassware again with the solvent to be used.
Do not use ordinary plastics stoppers [e.g. polyvinyl chloride (PVC)] in vessels for storing standards as they may
lead to contamination. Glass or polytetrafluoroethylene (PTFE) stoppers are necessary. Similarly, do not use
separating funnels with plastic stoppers or stopcocks. Wash bottles shall be all glass. Replace ordinary stoppers
with glass or PTFE stoppers.
Most methods specify particular chromatographic columns, which shall be specially made and have glass or PTFE
stopcocks. The tops of the columns shall have ground-glass joints to permit attachment of a solvent reservoir or
pressure adapter. Occasionally a ground-glass joint below the tap may be useful for applying suction using a
suitable Büchner flask.
1)
Two types of solvent evaporators may be used. First, the Kuderna-Danish (or its equivalent) evaporator (see
reference [1]) which may be used with or without its fractionating column and which is heated on a steam bath.
Secondly, the various types of rotary film evaporators (marketed commercially), which require a source of vacuum,
preferably a water vacuum pump, and which can be heated to a temperature above 50�C. Theeffect of thetype of
solvent evaporator on the loss of volatile pesticides should be checked periodically. A "keeper" (propylene glycol,
n-undecane or hexadecane) may be used to minimize loss of pesticides.
If homogenizers are used, take care to ensure that they are kept free of contamination. Check bottom-drive
macerators for leaks around the drive. The various seals can be a source of contamination.
Tapered tubes fitted with 14 mm standard ground-glass joints and having a capacity of about 15 ml (that is 80 mm
1)
to 90 mm long) are required for final concentrations. These may be fitted with micro-Snyder columns (see
reference [2]). Solutions are often reduced to a final small volume by passing a stream of air or nitrogen over them.
Do not use rubber or PVC tubing for this purpose: PTFE or nylon tubing usually presents the least danger of
contamination.
It may be necessary to extract filter papers with solvent.
1) These are examples of suitable products available commercially. This information is given for the convenience of users of
this part of ISO 3890 and does not constitute an endorsement by ISO of these products.
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ISO 3890-1:2000(E)
Steam baths and water baths are also required with adequate support for the apparatus used in them.
–1
Centrifuges capable of handling several hundred millilitres of emulsion at rotational frequencies of 2 000 min to
–1
4000 min are sometimes required.
6.2 Gas-liquid chromatography apparatus
A suitable GLC system shall be used, preferably equipped with separate heaters for the injector, detector and
column oven. The facility to inject directly on to the GLC column is generally an advantage. Although the choice of
the different parts of the GLC system is a matter for the experience of the analyst, the following recommendations
are made.
3 63
a) Electron capture detectors ( H, Ni) have proved to be most useful for the determination of organochlorine
compounds. Adjust the detectors according to the manufacturers' instructions. Check the variations in detector
sensitivity periodically by verifying the linearity of the calibration graphs using standard solutions of pesticides
3
(see 5.2.6). Do not use H detectors if temperatures above 225 °C are required.
b) Fused silica or glass columns of length between 1,5 m and 3 m and of internal diameter 2 mm to 6 mm are
preferred.
c) Use good quality, suitable support materials. (Support materials such as Gaschrom Q, Chromosorb W-HP,
1)
Anachrom Q in 60/80, 80/100 and 100/120 mesh ranges have been successfully employed.)
d) A variety of stationary phases and stationary phase mixtures have been used successfully depending upon the
amount and type of organochlorine pesticide, including, for example:
� hydrocarbon: Apiezon L
� methylsilicones: DC-11, DC-200, OV-1, QC-101, SP-2100, SE-30
� methylphenylsilicones: OV-17, OV-61, OV-25, SP-2250, SE-52
� trifluoropropylmethylsilicones: QF-1, OV-210, SP-2401
� phenylcyanopropylmethylsilicones: OV-225, XE-60
Deposit stationary phases on the support with care; the ratio depends on the support/phase combination chosen. In
all cases, condition newly filled columns for at least 24 h at a temperature near the maximum compatible with the
type of stationary phase used. Test their efficiency and selectivity at the required operating temperature using
standard mixtures of organochlorine compounds.
Capillary gas chromatography is an important technique with a separation power superior to that of packed
columns. The capillary technique is recommended especially in the case of complex extracts. Care shall be taken,
however, to use capillaries with inactive glass walls, otherwise, at the picogram level, compounds of interest will be
lost due to adsorption on the glass surface. To avoid that problem, it is recommended to use fused silica columns.
Use pure, dry nitrogen (oxygen-free, when using an electron-capture detector), or an argon/methane mixture (when
using a pulsed EC-detector) as carrier gas for packed columns, with a flow rate depending on the size and type of
columns used. Control the flow rates according to the column and detector characteristics. Generally, ensure that
gas flow rates are controlled as accurately as possible [� (0,5 to 1,0) % of the flow rate]. Install molecular sieve
filters in all supply circuits and regenerate them periodically. To summarize, make sure that the GLC conditions (i.e.
column length, stationary phase type, injector, detector, column temperatures, gas flow rates, etc.) are such that
separation of the organochlorine compounds likely to be present is as complete as possible.
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ISO 3890-1:2000(E)
7 Sampling
Sampling is not part of the method specified in this part of ISO 3890. A recommended sampling method is given in
ISO 707 [3].
It is important the laboratory receive a sample which is truly representative and has not been damaged or changed
during transport and storage.
8 Preparation of test sample
8.1 Milk
Adjust the temperature of the test sample to 35�Cto 40�C, by means of a water bath if necessary. Mix the test
sample thoroughly, but gently, by repeatedly inverting the test sample bottle without causing frothing or churning,
and cool quickly to approximately 20�C.
8.2 Evaporated milk
Shake and invert the container. Open the container, pour the test sample slowly into a second container (provided
with an airtight lid) and mix by repeated transfer, taking care to incorporate in the test sample any fat or other
constituent adhering to the wall and ends of the first container. Finally, transfer the test sample as completely as
possible to the second container.
In the case of test samples in sealed cans, condition the unopened container in a water bath at between 40�Cto
60�C, if necessary. Remove and shake the can vigorously every 15 min. Remove the can after 2 h and allow to
cool to room temperature. Remove the lid entirely and thoroughly mix the contents by stirring with a spoon or
spatula.
8.3 Sweetened condensed milk
Open the container and mix its contents thoroughly with a spoon or spatula. Use an up-and-down rotary movement
in such a way that the top layers and the contents of the lower corners of the container are moved and mixed. Take
care to incorporate in the test sample any milk adhering to the wall and ends of the container. Transfer the test
sample as completely as possible to a second container (provided with an airtight lid). Close the container.
In the case of test samples in sealed cans, condition the unopened can in a water bath at between 30�Cand
40�C, if necessary. Open the can, transfer to a dish large enough to permit stirring thoroughly, then mix until the
whole mass is homogeneous.
In the case of a test sample in a collapsible tube, open the tube and transfer the contents to a jar. Then cut open
the tube, scrape out all material adhering to the interior and add this to the contents of the jar.
8.4 Powdered milk products
Thoroughly mix the test sample by repeatedly rotating and inverting the container. Transfer all of the test sample to
an airtight container of sufficient capacity, if necessary for this.
8.5 Butter and butterfat
Heat the test sample to about 60�C until the fat separates. Decant through a plug of glass wool into a preheated
glass funnel.
8.6 Cheese
Separate the fat from the test sample as specified in ISO 3890-2.
6 © ISO 2000 – All rights reserved
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ISO 3890-1:2000(E)
8.7 Other milk products
Ensure that the test sample is homogeneous.
9 Procedure
9.1 General
Operators shall thoroughly familiarize themselves with the method before starting regulatory analyses. Run reagent
blanks until the reagents are found to be satisfactory.
Also carry out "spiked" recovery experiments at levels appropriate to the maximum permitted level until they are
found to be satisfactory (see clause 13). Follow exactly the same procedure for each analysis without introducing
any variation.
If it is not possible to complete the analyses in one day and it is necessary to interrupt them for the night, store the
sample extract in the form of a solution in an anhydrous solvent in a well-stoppered vessel in a refrigerator at
between 0�C and 5�C. Do not interrupt the extraction, column chromatography, etc.
NOTE The use of other, more up-to-date or new techniques leading to the same or even improved results should always
be considered.
9.2 Extraction
Weigh a specified amount of test samples, preferably in whole grams (� 1 %). Allow frozen material to thaw before
maceration as in some cases frozen samples can give problems in extraction. Each period of maceration shall be
of at least 2 min.
9.3 Clean up
Carry out separations in a separating funnel for at least 2 min each, with vigorous shaking and occasional release
of pressure by opening the stopcock with the funnel inverted. If vigorous shaking produces very stable emulsions,
gentle shaking for longer periods may be p
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 3890-1
Première édition
2000-07-01
Lait et produits laitiers — Détermination
des résidus de composés organochlorés
(pesticides) —
Partie 1:
Considérations générales et méthodes
d’extraction
Milk and milk products — Determination of residues of organochlorine
compounds (pesticides) —
Part 1: General considerations and extraction methods
Numéro de référence
ISO 3890-1:2000(F)
©
ISO 2000
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ISO 3890-1:2000(F)
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Imprimé en Suisse
ii © ISO 2000 – Tous droits réservés
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ISO 3890-1:2000(F)
Sommaire Page
Avant-propos.v
1 Domaine d'application.1
2Références normatives .2
3 Terme et définition.2
4 Principe.2
4.1 Extraction .2
4.2 Purification .2
4.3 Détermination.2
4.4 Confirmation.2
5 Exigences relatives aux réactifs et aux matériaux.3
5.1 Généralités .3
5.2 Contrôle de pureté des réactifs.3
6 Exigences relatives à l’appareillage .4
6.1 Généralités .4
6.2 Appareil de chromatographie en phase gazeuse.5
7 Échantillonnage .6
8Préparation des échantillons pour essai .6
8.1 Lait.6
8.2 Lait en poudre .6
8.3 Lait concentré sucré.6
8.4 Produits laitiers en poudre .7
8.5 Beurre et matière grasse laitière.7
8.6 Fromage.7
8.7 Autres produits laitiers .7
9 Mode opératoire.7
9.1 Généralités .7
9.2 Extraction .7
9.3 Purification .7
10 Essais préliminaires .8
11 Détermination quantitative .8
12 Essais de confirmation .8
13 Évaluation des résultats .8
13.1 Calcul des résultats.8
13.2 Présentation et expression des résultats .9
14 Fidélité .9
14.1 Évaluation de la fidélité.9
14.2 RépétabiIité.9
14.3 Reproductibilité.10
14.4 Limite de détermination .10
15 Rapport d'essai .11
© ISO 2000 – Tous droits réservés iii
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ISO 3890-1:2000(F)
Annexe A (normative) Extraction de la matière grasse et des composés organochloréset
détermination de la teneur en matière grasse .12
Annexe B (informative) Analyse en présencedebiphényls polychlorés (PCB).16
Bibliographie .17
iv © ISO 2000 – Tous droits réservés
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ISO 3890-1:2000(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiéeaux
comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude aledroit de faire partie ducomité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en
liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec la Commission
électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 3.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour
vote. Leur publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités
membres votants.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments delaprésente partie de l’ISO 3890 peuvent faire
l’objet de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de
ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
La Norme internationale ISO 3890-1 a étéélaboréepar le comité technique ISO/TC 34, Produits agricoles
alimentaires, sous-comité SC 5, Lait et produits laitiers, en collaboration avec la Fédération internationale de
laiterie (FIL) et l'AOAC International (Association des chimistes analytiques officiels); elle sera également publiée
par ces deux organisations.
L'ISO 3890 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Lait et produits laitiers —
Détermination des résidus de composés organochlorés (pesticides):
— Partie 1: Considérations générales et méthodes d'extraction
— Partie 2: Méthodes d’essai pour la purification des extraits bruts et tests de confirmation
L’annexe A constitue un élément normatif de la présentepartiedel’ISO 3890. L’annexe B est donnée uniquement
à titre d’information.
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NORME INTERNATIONALE ISO 3890-1:2000(F)
Lait et produits laitiers — Détermination des résidus de composés
organochlorés (pesticides) —
Partie 1:
Considérations générales et méthodes d'extraction
AVERTISSEMENT — L’utilisation de la présente partie de l’ISO 3890 peut impliquer l’emploi de produits,
d’opérations et d’équipements à caractère dangereux. La présente partie de l’ISO 3890 ne prétend pas
aborder tous les problèmes de sécurité qui sont, le cas échéant, liés à son utilisation. Il incombe à
l’utilisateur d’établir des pratiques appropriées en matière d’hygiène et de sécurité,et des’assurer du
respect delaréglementation nationale en vigueur.
1 Domaine d'application
La présente partie de l'ISO 3890 donne des considérations générales et spécifie des méthodes d'extraction
applicables à la détermination des résidus de pesticides organochlorés dans le lait et les produits laitiers.
L’annexe A spécifie une méthode destinée aux produits à teneur élevéeen matière grasse.
Des lignes directrices sont données dans l’annexe B pour la réalisation des analyses en présencedebiphényls
polychlorés (PCB).
Le domaine d'application des diverses méthodes est donné dans le Tableau 1.
Tableau 1 — Application des méthodes aux différents composés
Composé
Heptachlore / Isomères de Chlordane /
Méthode
Aldrine / Delta-kéto-
����-HCH ����-HCH ����-HCH heptachlore DDT, DDE, oxy- Endrine HCB
dieldrine endrine
époxide TDE chlordane
A ++++ + + + + –
B ++++ + + + + –
C ++++ + + + + +
D ++++ + + + + +
E ++++ + + + + +
F ++++ + + + + + +
G ++++ + + + + + +
H ++++ + + + + +
Légende: + = applicable
– = non applicable
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2Références normatives
Les documents normatifs suivants contiennent des dispositions qui, par suite de la référence qui y est faite,
constituent des dispositions valables pour la présente partie de l'ISO 3890. Pour les références datées, les
amendements ultérieurs ou les révisions de ces publications ne s’appliquent pas. Toutefois, les parties prenantes
aux accords fondés sur la présente partie de l'ISO 3890 sont invitées à rechercher la possibilité d'appliquer les
éditions les plus récentes des documents normatifs indiqués ci-après. Pour les références non datées, la dernière
édition du document normatif en référence s’applique. Les membres de l'ISO et de la CEI possèdent le registre des
Normes internationales en vigueur.
ISO 3890-2, Laits et produits laitiers — Lignes directrices pour la détermination des composés organochlorés
(pesticides) — Partie 2: Méthodes d’essai pour la purification des extraits bruts et tests de confirmation.
ISO 5725-1:1994, Exactitude (justesse et fidélité) des résultats et méthodes de mesure — Partie 1: Principes
généraux et définitions.
ISO 5725-2:1994, Exactitude (justesse et fidélité) des résultats et méthodes de mesure — Partie 2: Méthode de
base pour la déterminationdelarépétabilité et de la reproductibilité d'une méthode de mesure normalisée.
3 Terme et définition
Pour les besoins de la présente partie de l'ISO 3890, le terme et la définition suivants s'appliquent.
3.1
teneur en composés organochlorés
fraction massique de substances, déterminéepar les méthodes spécifiées dans la présente partie de l'ISO 3890
NOTE La teneur en composés organochlorés est exprimée en milligrammes par kilogramme, soit par rapport à la matière
grasse, soit par rapport au produit (pour les produits à faible teneur en matière grasse).
4Principe
NOTE Les méthodes sont basées sur un procédé comportant quatre étapes; deux étapes peuvent parfois être combinées
entièrement ou partiellement.
4.1 Extraction
Extraction des résidus du substrat échantillon à l'aide de solvants appropriés afin d'obtenir une extraction maximale
des résidus et une coextraction minimale de tout constituant pouvant provoquer des interférences dans la
détermination.
4.2 Purification
Élimination de l'extrait des matériaux risquant d'interférer afin d’obtenir une solution du résidu extrait dans un
solvant adaptéà l'évaluation quantitative, par la méthode de détermination retenue.
4.3 Détermination
La teneur en composés organochlorésest déterminée par chromatographie en phase gazeuse avec détection par
capture d'électrons.
4.4 Confirmation
L’identité des résidus de pesticides détectés est confirmée, en particulier dans les cas où le niveau maximum
autorisé semble avoir été dépassé.
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Les interférences dues aux PCB et aux pesticides sont un problème bien connu lors de l'utilisation de colonnes
remplies et, dans une moindre mesure, de colonnes capillaires. Dans le cas de niveaux relativement élevésde
PCB, il est recommandé de déterminer les PCB selon l'IDF 130A:1991 (voir la référence [14] dans la bibliographie).
5 Exigences relatives aux réactifs et aux matériaux
5.1 Généralités
Sauf indication différente, utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique reconnue et de l'eau distilléeou
déminéralisée, ou de l'eau de puretééquivalente.
Redistiller l'eau et les solvants utiliséset vérifier leur pureté (voir 5.2). La limite des impuretés éventuellement
présentes dans chacun des réactifs utilisés ne doit pas être supérieure à la limite de détermination définie en 14.4.
Les impuretés totales de tous les réactifs utilisés dans la méthode peuvent toutefois excéder cette limite. Purifier et
activer périodiquement les adsorbants selon les exigences spécifiées par les différentes méthodes analytiques.
Vérifier leur pureté (voir 5.2.5).
Prendre toute précaution pour éviter une contamination possible de l'eau, des solvants, des adsorbants etc. par le
matériel en plastique ou en caoutchouc.
Une fois purifiés, conserver tous les réactifs, adsorbants, etc. dans des flacons en verre munis de bouchons en
verre ou de capsules garnies d'un tampon en PTFE. Ne pas les laisser exposés à l'atmosphère après purification.
Du papier aluminium lavéà l'acétone procure une protection adéquate dans de nombreuses situations.
5.2 Contrôle de pureté des réactifs
5.2.1 Solvants
Concentrer les solvants en tenant compte du facteur indiqué dans la méthode utilisée. Effectuer un test de pureté
par chromatographie en phase gazeuse (voir 6.2). Le chromatogramme ne doit montrer aucune impureté
interférante dont la concentration excède la limite de détermination définie en 14.4. Extraire ou concentrer
l'acétonitrile, le diméthylformamide (DMF) et le chlorure de méthylène dans les mêmes volumes que ceux utilisés
dans la méthode et examiner la solution résultante par chromatographie en phase gazeuse.
5.2.2 Eau
Extraire 10 parties (en volume) d'eau avec 1 partie (en volume) de n-hexaneoud'éther de pétrole. Séparer la
phase organique, la concentrer en tenant compte du facteur indiqué dans la méthode utilisée et effectuer un test
de pureté par chromatographie en phase gazeuse (voir 6.2).
Le chromatogramme ne doit montrer aucune impureté interférante dont la concentration excède la limite de
détermination définie en 14.4.
5.2.3 Sels inorganiques
Extraire les sels inorganiques (par exemple le chlorure de sodium), après purification dans les conditions des
différentes méthodes analytiques, et toute solution aqueuse utilisée à l'aide de n-hexane ou d'éther de pétrole.
Concentrer l'extrait en tenant compte du facteur indiqué dans la méthode utilisée et effectuer un test de pureté par
chromatographie en phase gazeuse. Le chromatogramme ne doit montrer aucune impureté interférante dont la
concentration excède la limite de détermination définie en 14.4.
5.2.4 Laine de coton, laine de verre et laine de quartz
Extraire celles-ci au n-hexane et à l'acétone à l'aide d'un extracteur Soxhlet jusqu'à obtention d'un matériau
suffisamment exempt de substances interférantes.
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5.2.5 Adsorbants
Éluer une quantité d'adsorbant égale à celle utilisée dans la méthode analytique avec le type et le volume
correspondants de mélange de solvants. Concentrer l'éluat comme indiqué dans la méthode analytique et effectuer
un test de pureté par chromatographie en phase gazeuse (voir 6.2). Le chromatogramme ne doit montrer aucune
impureté interférante dont la concentration excède la limite de détermination définie en 14.4. Vérifier régulièrement
l'activité des adsorbants.
5.2.6 Solutions étalons
Utiliser comme étalons des produits ayant au moins 95 % de pureté pour l'analyse des résidus de pesticides.
Conservés à une température de –20 °C, ils sont généralement stables pendant au moins un an ou deux. Les
solutions mères ayant une concentration de 1 mg/ml et conservées au réfrigérateur à environ 4 °C sont habituelle-
ment stables pendant 2 à3mois.Préparer les solutions diluées le jour même de l'utilisation.
NOTE Une modification de volume causée par l'évaporation du solvant, par exemple à travers les pores entre un bouchon
en verre et le col d'une fiole, peut être une source d'erreur.
Conserver les solutions étalons au réfrigérateur dans des flacons en verre et prendre toute précaution pour éviter
une contamination possible par du matériel en plastique ou en caoutchouc. N'exposer les solutions étalons ni à la
lumière solaire, ni à la lumière ultraviolette de façon prolongée. La spectrométrie de masse et la chromatographie
en phase gazeuse peuvent être utilisées pour détecter les impuretésdes étalons analytiques. L'expérience a
montré que les fautes commises lors de la préparation, manipulation et conservation des étalons sont une source
majeure d'erreur.
6 Exigences relatives à l’appareillage
6.1 Généralités
Nettoyer soigneusement toute la verrerie utilisée pour l'analyse des résidus. Une solution sulfochromique peut être
utilisée pour le nettoyage. Toutefois, si une telle solution est utilisée, la verrerie doit être lavée ensuite avec de
l'eau distilléeet de l'acétone avant d'être séchée. Juste avant l'emploi, rincer à nouveau la verrerie avec le solvant
qui sera utilisé.
Les bouchons en matière plastique ordinaire [par exemple en chlorure de polyvinyle (PVC)] ne doivent pas être
utilisés avec les flacons servant à la conservation des étalons, car ils peuvent entraîner une contamination. Des
bouchons en verre ou en polytétrafluoroéthylene (PTFE) sont nécessaires. De même, les ampoules à décanter
avec des bouchons ou des robinets en matière plastique ne doivent pas être utilisés. Les récipients de lavage
doivent être entièrement en verre. Remplacer les bouchons ordinaires par des bouchons en verre ou en PTFE.
La plupart des méthodes préconisent l'utilisation de colonnes chromatographiques particulières qui doivent être
fabriquées spécialement et comporter des robinets en verre ou en PTFE. L'extrémité supérieure des colonnes doit
comporter un joint en verre rodé pour permettre de relier un réservoir de solvant ou un adaptateur de pression.
Parfois, il peut être utile de disposer sous le robinet d'un joint en verre rodé, afin de pouvoir appliquer une pression
réduite en utilisant une fiole de Büchner appropriée.
1)
Deux types d'évaporateurs de solvant peuvent être utilisés. En premier lieu, l'évaporateur Kuderna-Danish (ou
son équivalent) (voir référence [1�), qui peut être utilisé avec ou sans sa colonne de rectification et qui est chauffé
sur bain de vapeur. En second lieu, les différents types d'évaporateurs rotatifs (disponibles sur le marché) qui
exigent une source de vide, de préférence une pompe à eau, et qui peuvent être chauffés à une température
supérieure à 50 °C. Il convient de vérifier périodiquement l'incidence du type d'évaporateur de solvant sur la perte
1) Exemples de produits appropriés disponibles sur le marché. Cette information est donnée à l'intention des utilisateurs de la
présente partie de l'ISO 3890 et ne signifie nullement que l'ISO approuve ou recommande l'emploi exclusif des produits ainsi
désignés.
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des pesticides volatils. Un «conservateur» (propylène glycol, n-undécane ou hexadécane) peut être utilisé pour
réduire les pertes en pesticides.
Dans le cas où des homogénéisateurs sont utilisés, des précautions doivent être prises pour s'assurer qu'ils
n'entraînent aucune contamination. L'absence de fuite autour de l'hélice située dans le fond de certains
macérateurs doit être vérifiée. Les différents joints peuvent être une source de contamination
Des tubes à robinet comportant des joints en verre rodé normalisés de 14 mm et ayant une capacité d'environ
15 ml (ayant donc une longueur de 80 mm à 90 mm) sont nécessaires pour les concentrations finales. Ils peuvent
1)
être adaptés à des microcolonnes Snyder (voir référence �2�). Les solutions sont souvent réduites à un faible
volume final par évaporation sous courant d'air ou d'azote. Ne pas utiliser des tubes en caoutchouc ou en PVC
pour cette opération; les tubes en PTFE ou en nylon présentent en général le plus faible risque de contamination.
Les papiers-filtres peuvent nécessiter une extraction avec du solvant.
Des bains de vapeur et d'eau sont aussi nécessaires; ils doivent être équipés de supports permettant d'y placer les
appareillages qui y sont introduits.
Des centrifugeuses permettant de centrifuger plusieurs centaines de millilitres d'émulsion à une fréquence de
–1 –1
rotation de 2 000 min à4000min sont parfois nécessaires.
6.2 Appareil de chromatographie en phase gazeuse
Utiliser un système approprié de chromatographie en phase gazeuse comportant de préférence un chauffage
séparé de l'injecteur, du détecteur et du four contenant la colonne. La possibilité d'effectuer l'injection directement
sur la colonne constitue généralement un avantage. Bien que le choix des différentes parties de l'ensemble de
chromatographie en phase gazeuse soit fonction de l'expérience de l'analyste, il est bon de rappeler quelques
conseils de portéegénérale.
3 63
a) Les détecteurs à capture d'électrons ( H, Ni) ont été reconnus comme convenant le mieux pour la
détermination des composés organochlorés. Régler les détecteurs selon les instructions du fabricant.
Contrôler périodiquement les variations de sensibilité du détecteur en vérifiant la linéarité des courbes
d'étalonnage obtenues à partir des solutions étalons de pesticides (voir 5.2.6). Ne pas utiliser les détecteurs à
3
capture d’électrons Hsides températures supérieures à 225 °C sont requises.
b) Privilégier les colonnes en verre ou en silice d'une longueur comprise entre 1,5 m et 3 m et d'un diamètre
intérieur de 2 mm à 6 mm.
c) Utiliser un support de bonne qualité et bien adapté.(Des matériaux tels que le Gaschrom Q, le Chromosorb
W-HP, l'Anachrom Q, ayant des plages de granulométrie de 60/80 mesh, 80/100 mesh et 100/120 mesh, ont
1)
été utilisésavecsuccès.)
d) Diverses phases stationnaires (ou mélanges de phases) ont été utilisées avec succès en fonction de la
quantité et du type de composés organochlorés, comprenant, entre autres:
� hydrocarbure: Apiezon L
� méthylsilicones: DC-11, DC-200, OV-1, QC-101, SP-2100, SE-30
� méthylphénylsilicones: OV-17, OV-61, OV-25, SP-2250, SE-52
� trifluoropropylméthylsilicones: QF-1, OV-210, SP-2401
� phénylcyanopropylméthylsilicones: OV-225, XE-60
Déposer les phases stationnaires sur le support avec soin, le rapport dépendant de la combinaison support/phase
choisie. Dans tous les cas, conditionner les colonnes nouvellement remplies pendant au moins 24 h à une
température proche du maximum compatible avec le type de phase stationnaire utilisé. Testerleurefficacité et leur
sélectivitéà la température d'utilisation requise à l'aide de mélanges étalons de composés organochlorés.
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ISO 3890-1:2000(F)
La chromatographie en phase gazeuse sur colonnes capillaires, dont le pouvoir de séparation est supérieur au
pouvoir de séparation des colonnes remplies, est devenue une technique importante. La technique capillaire est
conseilléespécialement dans le cas des extraits complexes. Cependant, des précautions doivent être prises pour
utiliser des capillaires aux parois en verre inerte, autrement, au niveau du picogramme, les composésintéressants
seront perdus à cause de l'adsorption sur la surface de verre. Pour éviter ce problème, il est recommandé d'utiliser
des colonnes en silice.
Utiliser de l'azote sec et pur (sans oxygène lorsqu'on utilise un détecteur à capture d'électrons), ou un mélange de
méthane et d'argon (lorsqu'on utilise un détecteur à capture d'électrons pulsés) comme gaz vecteurs sur colonnes
remplies, le débit dépendant de la taille et du type des colonnes utilisées. Régler les débits en fonction des
caractéristiques du détecteur. D'une manière générale, veiller à ce que les débits des gaz soient contrôlés aussi
exactement que possible [� (0,5 à 1,0) % du débit]. Installer des filtres de tamis moléculaire dans tous les circuits
d'arrivée de gaz et les régénérer périodiquement. En résumé, il faut s'assurer que les conditions de l'analyse par
chromatographie en phase gazeuse (c'est-à-dire la longueur de la colonne, le type de phase stationnaire, les
températures de la colonne, du détecteur et de l'injecteur, les débits de gaz, etc.) soient telles que la séparation
des composés organochlorés susceptibles d'être présents soit aussi complète que possible.
7 Échantillonnage
L'échantillonnage ne fait pas partie de la méthode spécifiée dans la présente partie de l'ISO 3890. Une méthode
d'échantillonnage recommandée est donnéedans l'ISO707�3�.
Il est important que le laboratoire reçoive un échantillon réellement représentatif, non endommagé ou modifié lors
du transport et de l'entreposage.
8Préparation des échantillons pour essai
8.1 Lait
Amener l'échantillon pour essai à une température de 35 °C à 40 °C, au moyend'unbain d'eau si nécessaire. Bien
mélanger l'échantillon, mais doucement, au moyen de retournements répétésdu récipient contenant l'échantillon,
sans créer de mousse ou de barattage, puis refroidir rapidement l'échantillon pour essai à environ 20 °C.
8.2 Lait en poudre
Secouer et retourner le récipient. Ouvrir le récipient, verser l'échantillon pour essai doucement dans un deuxième
récipient (pourvu d'un couvercle étanche) et m
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.