ISO 30024:2024

Animal feeding stuffs — Determination of phytase activity

This document specifies the determination of phytase activity in feeding stuff samples, including feed raw materials from plant origin, compound feeds (complete, complementary, mineral feeds), premixtures and feed additives. The method is applicable to, and is collaboratively validated for, the determination of phytase activity in complete feed, complementary feed including mineral feed, premixtures and feed additives. The method does not distinguish between phytase added as a feed additive and endogenous phytase already present in the feed materials. Therefore, the method is also applicable for feed materials from plant origin. The method does not apply to evaluating or comparing the in vivo efficacy of the phytase product. It is not a predictive method of the in vivo efficacy of phytases present on the market as they can develop different in vivo efficacy per unit of activity.

Alimentation animale — Détermination de l'activité phytasique

Le présent document spécifie la détermination de l’activité phytasique dans les échantillons d’aliments pour animaux, y compris dans les matières premières d’origine végétale, aliments composés (complets, complémentaires et minéraux), prémélanges et additifs destinés à l’alimentation animale. La méthode est applicable et validée de manière collaborative pour la détermination de l’activité phytasique dans les aliments complets, les aliments complémentaires, y compris les aliments minéraux, les prémélanges et les additifs, destinés à l’alimentation animale. La méthode ne fait pas la distinction entre la phytase ajoutée en tant qu’additif destiné à l’alimentation animale et la phytase endogène déjà présente dans les matières premières pour l’alimentation animale. Par conséquent, la méthode est également applicable aux matières premières d’origine végétale pour l’alimentation animale. La méthode ne s’applique pas pour évaluer ou comparer l’efficacité in vivo des phytases. Il ne s’agit pas d’une méthode prédictive de l’efficacité in vivo des phytases disponibles sur le marché, car celles-ci peuvent développer une efficacité in vivo différente par unité d’activité.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 18-Apr-2024
• ICS: 65.120 - Animal feeding stuffs
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 10 - Animal feeding stuffs
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 10 - Animal feeding stuffs
• Current Stage: 6060 - International Standard published
• Start Date: 19-Apr-2024
• Due Date: 17-Mar-2024
• Completion Date: 19-Apr-2024

Standards Content (Sample)

International
Standard
ISO 30024
Second edition
Animal feeding stuffs —
2024-04
Determination of phytase activity
Alimentation animale — Détermination de l'activité phytasique
Reference number
© ISO 2024
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CH-1214 Vernier, Geneva
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Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Reagents . 3
6 Apparatus . 5
7 Sampling and sample preparation . 5
8 Sample extractions . 6
8.1 For compound feeds (excluding mineral feeds) .6
8.2 For mineral feeds and premixtures .6
8.3 For feed additives .6
9 Procedure . 7
9.1 General .7
9.2 Blank solution .7
9.3 Standards .7
9.3.1 Phosphate standard solution.7
9.3.2 Phytase level control.7
9.4 Standard curve .7
9.5 Phytase level control .8
9.6 For compound feed (excluding mineral feeds) .9
9.7 For mineral feeds and premixtures .10
9.8 For feed additives .10
10 Calculations .11
10.1 Formulation of standard curve .11
10.2 Calculation of phytase activity. 12
10.3 Correction for phytic acid purity and water content . 13
10.4 Interference with blank values .14
11 Precision . 14
11.1 Limit of detection and limit of quantification .14
11.2 Interlaboratory tests .14
11.3 Repeatability .14
11.4 Reproducibility . 15
12 Test report .15
Annex A (informative) Interlaboratory study results for compound feeds (excluding mineral
feeds) . 16
Annex B (informative) Interlaboratory study results for mineral feeds and premixtures . 19
Annex C (informative) Interlaboratory study results for feed additives .20
Bibliography .22

iii
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee
has been established has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely
with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described
in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the different types
of ISO document should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the
ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
ISO draws attention to the possibility that the implementation of this document may involve the use of (a)
patent(s). ISO takes no position concerning the evidence, validity or applicability of any claimed patent
rights in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a)
patent(s) which may be required to implement this document. However, implementers are cautioned that
this may not represent the latest information, which may be obtained from the patent database available at
www.iso.org/patents. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and expressions
related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the World Trade
Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 10,
Animal feeding stuffs, in collaboration with the European Committee for Standardization (CEN) Technical
Committee CEN/TC 327, Animal feeding stuffs - Methods of sampling and analysis, in accordance with the
Agreement on technical cooperation between ISO and CEN (Vienna Agreement).
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 30024:2009), which has been technically
revised.
The main changes are as follows:
— the scope has been extended to include complementary compound feeds, mineral feeds, premixtures and
feed additives;
— phytic acid (phytate substrate) specifications have been added.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.

iv
Introduction
This document quantifies phytase products in feeding stuff samples to control the phytase content of animal
feed products. However, the method cannot be used to evaluate the in vivo efficacy of the phytase products.

v
International Standard ISO 30024:2024(en)
Animal feeding stuffs — Determination of phytase activity
1 Scope
This document specifies the determination of phytase activity in feeding stuff samples, including feed raw
materials from plant origin, compound feeds (complete, complementary, mineral feeds), premixtures and
feed additives.
The method is applicable to, and is collaboratively validated for, the determination of phytase activity in
complete feed, complementary feed including mineral feed, premixtures and feed additives.
The method does not distinguish between phytase added as a feed additive and endogenous phytase already
present in the feed materials. Therefore, the method is also applicable for feed materials from plant origin.
The method does not apply to evaluating or comparing the in vivo efficacy of the phytase product. It is not a
predictive method of the in vivo efficacy of phytases present on the market as they can develop different in
vivo efficacy per unit of activity.
2 Normative references
There are no normative references in this document.
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminology databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at https:// www .electropedia .org/
3.1
phytase unit
U
amount of enzyme that releases 1 µmol of inorganic phosphate from phytate per minute in acetate buffer at
pH 5,5 and 37 °C
Note 1 to entry: This is determined by the reaction conditions specified in this document.
3.2
premixture
premix
uniform mixture of one or more micro-ingredients/feed additives (3.4) with a diluent and/or carrier, and
that is not intended for direct feeding to animals
Note 1 to entry: Premixtures are used to facilitate the uniform dispersion of the micro-ingredients/additives in a
larger mix.
[SOURCE: ISO 20588:2019, 3.2.39]
...

Norme
internationale
ISO 30024
Deuxième édition
Alimentation animale —
2024-04
Détermination de l'activité
phytasique
Animal feeding stuffs — Determination of phytase activity
Numéro de référence
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: [phone]
E-mail: [e-mail]
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe. 3
5 Réactifs . 3
6 Appareillage . 5
7 Échantillonnage et préparation des échantillons . 6
8 Extraction des échantillons . 6
8.1 Pour les aliments composés (hors aliments minéraux) .6
8.2 Pour les aliments minéraux et les prémélanges .7
8.3 Pour les additifs .7
9 Mode opératoire . 7
9.1 Généralités .7
9.2 Solution à blanc .8
9.3 Étalons .8
9.3.1 Solution étalon de phosphate .8
9.3.2 Témoin de niveau d’activité phytasique .8
9.4 Courbe d’étalonnage .8
9.5 Témoin de niveau d’activité phytasique.9
9.6 Pour les aliments composés (hors aliments minéraux) .10
9.7 Pour les aliments minéraux et les prémélanges .11
9.8 Pour les additifs .11
10 Calculs .12
10.1 Formule de la courbe d’étalonnage . 12
10.2 Calcul de l’activité phytasique . 13
10.3 Correction relative à la pureté et à la teneur en eau de l’acide phytique . 13
10.4 Interférence avec les valeurs de blanc .14
11 Fidélité . 14
11.1 Limite de détection et limite de quantification .14
11.2 Essais interlaboratoires . 15
11.3 Répétabilité . 15
11.4 Reproductibilité . 15
12 Rapport d’essai .15
Annexe A (informative) Résultats des études interlaboratoires pour les aliments composés
(hors aliments minéraux) . 17
Annexe B (informative) Résultats de l’étude interlaboratoires pour les aliments minéraux et
les prémélanges .21
Annexe C (informative) Résultats des études interlaboratoires pour les additifs .22
Bibliographie .24

iii
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a
été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir
www.iso.org/directives).
L’ISO attire l’attention sur le fait que la mise en application du présent document peut entraîner l’utilisation
d’un ou de plusieurs brevets. L’ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité et à l’applicabilité de
tout droit de brevet revendiqué à cet égard. À la date de publication du présent document, l’ISO n'avait pas
reçu notification qu’un ou plusieurs brevets pouvaient être nécessaires à sa mise en application. Toutefois,
il y a lieu d’avertir les responsables de la mise en application du présent document que des informations
plus récentes sont susceptibles de figurer dans la base de données de brevets, disponible à l'adresse
www.iso.org/brevets. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir identifié tout ou partie de
tels droits de propriété.
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données pour
information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion de
l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au
commerce (OTC), voir www.iso.org/avant-propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité
SC 10, Aliments des animaux, en collaboration avec le comité technique CEN/TC 327, Alimentation animale -
Méthodes d’échantillonnage et d’analyse, du Comité européen de normalisation (CEN) conformément à
l’Accord de coopération technique entre l’ISO et le CEN (Accord de Vienne).
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 30024:2009), qui a fait l’objet d’une
révision technique.
Les principales modifications sont les suivantes:
— le domaine d’application a été élargi aux aliments composés complémentaires, aliments minéraux,
prémélanges et additifs destinés à l’alimentation animale;
— les spécifications de l’acide phytique (substrat de phytate) ont été ajoutées.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes se
trouve à l’adresse www.iso.org/fr/members.html.

iv
Introduction
Le présent document a été élaboré en vue de quantifier les préparations commerciales de phytases dans les
échantillons de l’alimentation animale afin d’y contrôler la teneur en phytase. Toutefois, la méthode ne peut
pas être utilisée pour évaluer l’efficacité in vivo des phytases.

v
Norme internationale ISO 30024:2024(fr)
Alimentation animale — Détermination de l'activité
phytasique
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie la détermination de l’activité phytasique dans les échantillons d’aliments
pour animaux, y compris dans les matières premières d’origine végétale, aliments composés (complets,
complémentaires et minéraux), prémélanges et additifs destinés à l’alimentation animale.
La méthode est applicable et validée de manière collaborative pour la détermination de l’activité phytasique
dans les aliments complets, les aliments complémentaires, y compris les aliments minéraux, les prémélanges
et les additifs, destinés à l’alimentation animale.
La méthode ne fait pas la distinction entre la phytase ajoutée en tant qu’additif destiné à l’alimentation
animale et la phytase endogène déjà présente dans les matières premières pour l’alimentation animale.
Par conséquent, la méthode est également applicable aux matières premières d’origine végétale pour
l’alimentation animale.
La méthode ne s’applique pas pour évaluer ou comparer l’efficacité in vivo des phytases. Il ne s’agit pas
d’une méthode prédictive de l’efficacité in vivo des phytases disponibles sur le marché, car celles-ci peuvent
développer une efficacité in vivo différente par unité d’activité.
2 Références normatives
Le présent document ne contient aucune référence normative.
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
...