ISO 18184:2019
(Main)Textiles — Determination of antiviral activity of textile products
Textiles — Determination of antiviral activity of textile products
This document specifies testing methods for the determination of the antiviral activity of the textile products against specified viruses. Due to the individual sensitivities, the results of one test virus cannot be transposed to other viruses. The textile products include woven and knitted fabrics, fibres, yarns, braids, etc.
Textiles — Détermination de l'activité virucide de produits textiles
Le présent document spécifie des méthodes d'essai permettant d'évaluer l'activité virucide des produits textiles contre des virus spécifiés. En raison des différences de sensibilité, les résultats obtenus avec un virus d'essai ne peuvent pas être transposés à d'autres virus. Les produits textiles incluent les tissus, les tricots, les fibres, les fils, les tresses, etc.
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Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 18184
Second edition
2019-06
Textiles — Determination of antiviral
activity of textile products
Textiles — Détermination de l'activité virucide de produits textiles
Reference number
ISO 18184:2019(E)
©
ISO 2019
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ISO 18184:2019(E)
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ISO 18184:2019(E)
Contents Page
Foreword .v
Introduction .vi
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 3
5 Virus and host cell . 3
6 Warning . 3
7 Apparatus . 3
8 Sterilization of apparatus . 6
9 Reagent and medium . 6
10 Preparation .11
10.1 Restoration of host cell from cryopreservation .11
10.2 Subculture of host cell .12
10.3 Cell culture for the infectious virus titre assay .13
10.4 Preparation for test virus .13
10.4.1 General.13
10.4.2 Influenza virus .13
10.4.3 Feline calicivirus.14
10.4.4 Infectivity titre of the test viruses .15
10.5 Preparation for test specimen .16
10.5.1 Control fabric .16
10.5.2 Preparation of test specimens .16
10.5.3 Sterilization of specimens .16
10.6 Control test .16
10.6.1 General.16
10.6.2 Verification of cytotoxicity by cell sensitivity to virus and the inactivation
of antiviral activity .17
11 Test procedure .17
11.1 Preparation of specimen.17
11.2 Deposit of virus to the specimens .17
11.3 Contacting time.17
11.4 Wash-out of virus immediately after deposit .18
11.5 Wash-out of virus after contacting time.18
12 Preparation of the series of the dilution for the virus suspension .18
13 Determination of the infectious titre .18
13.1 Plaque assay .18
13.2 TCID method .19
50
14 Calculation of infectivity titre .19
14.1 Plaque assay .19
14.2 TCID method .19
50
14.2.1 Behrens and Karber method .19
14.2.2 Example of calculation .20
14.3 Test result .22
14.3.1 Verification of this test .22
14.3.2 Calculation of antiviral activity value .22
15 Test report .22
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ISO 18184:2019(E)
Annex A (informative) Virus strains and host cells .23
Annex B (normative) Infectivity titre test: Plaque assay .24
Annex C (normative) Infectivity titre test: TCID method .26
50
Annex D (informative) Composition of media .27
Annex E (informative) Testing method using specific pathogen free (SPF) embryonated
hen's eggs .30
Annex F (informative) Antiviral efficacy — Antiviral performance of the products.35
Annex G (informative) Interlaboratory test result (1) .36
Annex H (informative) Interlaboratory test result (2) .38
Bibliography .41
iv © ISO 2019 – All rights reserved
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ISO 18184:2019(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to
the World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see
www .iso .org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 38, Textile.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 18184:2014), which has been technically
revised. The main changes compared to the previous edition are as follows:
— Clause 1 has been updated;
— in Clause 5, viruses and host cells used in this document has been changed to examples of species;
— in 10.6, "Verification of cytotoxic effect” has been removed;
— 11.1, “Preparation of specimen” has been updated;
— 14.3.2, “Calculation of antiviral activity value” has been updated;
— Annex E (Additional virus: Polio virus) has been removed.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.
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Introduction
Recently, along with the global improvement in the level of living, consumers are showing the trend to
seek healthcare or health protective products. Also, an increase in the people’s interest for protection
against epidemic diseases has been noted, as the overcrowded commuting train car where the
commuters experience every day, the hospitals, nursing homes, etc.
Being supported by the processing technology of textile products to provide a high performance which
has been highly developed recently, the health protective and hygiene relating products have been
advancing into the market.
Because those products are relatively new and included the technical aspects out of textile technology,
the testing methods have been developed by the individual producers to evaluate the product
performance. That has resulted in inexistence of a unified test method, hindering for both consumers
and producers a true explanation or understanding of those high functional products.
The antiviral product is one of those products and includes the technical fields of the textile technology
and the biotechnology.
The demand to establish an international standard has been growing in the consumers, retailers,
producers, etc. as the stakeholders in the market.
Antiviral textile products are textiles capable of reducing the number of infective virus particles that
contact the surface of the textile. This document provides a quantitative test method to assess the
antiviral performance of such products.
The data obtained in an objective manner by this document give the common knowledge to all the
stake holders such as consumers, producers, retailers, etc. to understand the correct performance of
the antiviral textile products.
There are two methods to quantify the number of infective virus, as infective virus titre in this
document, which are the plaque method and the TCID method. The method used can be selected by
50
the experience and the convenience of each testing house. Any appropriate cellular system can be used
and that the testing conditions when used should be reported.
See Annexes G and H for interlaboratory test results.
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 18184:2019(E)
Textiles — Determination of antiviral activity of textile
products
1 Scope
This document specifies testing methods for the determination of the antiviral activity of the textile
products against specified viruses. Due to the individual sensitivities, the results of one test virus
cannot be transposed to other viruses.
The textile products include woven and knitted fabrics, fibres, yarns, braids, etc.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 105-F02, Textiles — Tests for colour fastness — Part F02: Specification for cotton and viscose
adjacent fabrics
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https: //www .iso .org/obp
— IEC Electropedia: available at http: //www .electropedia .org/
3.1
virus
original biological entity which has a single type of nucleic acid (DNA or RNA), specific structure
that opposes the virus to living organisms with a cellular structure (prokaryotes and eukaryotes),
and reproduces from its genetic material by replication within the host cell, and leads to absolute
intracellular parasitism
Note 1 to entry: The virion is the infectious viral particle.
3.2
virus activity
ability to replicate in the susceptible and permissive host cells
3.3
antiviral activity
property of any substance (chemical or otherwise) producing a modification of one of the elements of
the virion structure which induces the latter's inability to replicate
Note 1 to entry: Property that reduces the viral activity, generally through morphological change or structural
damage to the surface protein of the virus.
Note 2 to entry: It is not necessarily to imply that the change of antigenic response or the change of constituent
element is the reduction of virus infectivity.
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ISO 18184:2019(E)
3.4
antiviral chemicals
inorganic or organic chemicals able to reduce virus activity (3.2)
Note 1 to entry: The organic antiviral chemicals give the change to the surface protein of virus by the chemical
adsorption. The inorganic metallic antiviral substances destroy or change the morphology of the virus by the
extraction of hydrogen atom in the virus protein by OH radicals which are generated by the radical reaction.
3.5
control fabric
fabric used to verify the stability of the test virus on a textile fabric
Note 1 to entry: The fabrics before the antivirus treatment should be used as a control fabric with the same
condition described in 3.5.
Note 2 to entry: In the absence of a control fabric as described in Note 1, the 100 % cotton cloth described in
ISO 105-F02 should be used without any chemical treatments such as the fluorescent bleach, etc.
3.6
control test
test to confirm that a specimen does not affect the host cell
Note 1 to entry: This test is performed as same as actual test, but without virus.
Note 2 to entry: Also referred to as control test of specimen,
3.7
cytopathic effect
cytopathic effect (CPE) caused by virus
effect appears as morphological change or destruction of the host cells as a result of the virus
multiplication
3.8
infectivity titre of virus
number of infectious viral particles present per unit volume in a cell lysate or in viral suspension
3.9
plaque
area of lysed cells in a monolayer cell culture
3.10
plaque forming units
PFU
unit expressed as the concentration of the infectious virus per unit volume
3.11
plaque assay
assay to determine the infectivity titre of virus (3.8) from PFU by using the series of dilution
3.12
TCID
50
50 % infectious dose of a wash-out virus suspension or the dilution of the virus suspension that induces
a CPE in 50 % of cell culture units
Note 1 to entry: See 3.7.
3.13
TCID method
50
assay to determine the infectivity titre of virus (3.8) from TCID50 by using the series of dilution
2 © ISO 2019 – All rights reserved
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ISO 18184:2019(E)
3.14
cytotoxicity
morphological alteration of cells and/or their destruction or the reduction of their sensitivity to the
multiplication of viruses induced by a product
4 Principle
The viruses are deposited onto a specimen. After specific contact time, the remaining infectious virus
is counted, and the reduction rate is calculated by the comparison between the antiviral product test
specimen and the control specimen by common logarithm. There are two methods to quantify the
infectious virus titre. One method is the plaque assay and the other is the TCID method. The selection
50
of the method depends on the convenience and experience of the testing organization.
5 Virus and host cell
Examples of species of viruses and host cells are shown in Annex A.
Other species of viruses and host cells can be used after appropriate validations, as the important virus
may differ depending on target application. If the other species are used, the name of the species and
the specific reason for their use shall be included in the test report.
NOTE Reference viruses are listed in EN 14476 and EN 14675.
6 Warning
This document calls for use of the infectious viruses or substances/procedures that may be injurious
to the health/environment if appropriate conditions are not observed. It refers only to technical
suitability and does not absolve the user from legal obligations relating to health and safety/
environment at any stage.
The warning is extended as the following. The virus in the standard shall be the one of biotechnology
safety level class II classified by the directives of WHO as stated. The user of this document shall have
enough knowledge and experience of the microbiology. Moreover, users shall comply strictly to the
safety standard of the manufacturers and the domestic regulation.
7 Apparatus
7.1 High pressure steam sterilizer: Autoclave, capable of operating at a temperature of (121 ± 2) °C.
NOTE The autoclave is described in EN 12353.
7.2 Dry heat sterilizer: Ovens, capable of operating at a temperature of (180 ± 2) °C and (160 ± 2) °C.
NOTE The hot air ovens are described in EN 12353.
7.3 Measuring flask, with capacity of 1 l.
7.4 Scale, with the available range of 0,01 g to 100 g with accuracy of 1,0 %.
7.5 Pipette, of various capacities with accuracy of 10 % of the nominal volume.
7.6 Washing machine.
7.7 Pipetter, capable of mounting the glass or plastic pipettes.
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7.8 Micropipette, having the most suitable volume for each use, with a tip made of glass or plastic,
and with a tolerance of 0,5 % or less.
7.9 Water bath, capable of maintaining at a temperature of (37 ± 1) °C, (50 ± 1) °C and (56 ± 1) °C.
1)
7.10 Vortex® -type mixer, used for microbial testing.
7.11 Freezer, capable of operating at a temperature of (–80 ± 2) °C or (–20 ± 2) °C.
7.12 Liquid nitrogen bath, for the preservation approximately at −196 °C.
7.13 Membrane filtration device, with a pore size of 0,22 μm.
7.14 Refrigerator, capable of operating at a temperature between 2 °C and 8 °C.
7.15 pH meter, having an inaccuracy of calibration ±0,1 pH units at (20 ± 1) °C.
NOTE The pH meters are described in EN 12353.
7.16 Inverted microscope, capable of being used for cultured cells observation.
7.17 Tweezers, capable of being sterilized.
7.18 Centrifuge, capable of being operated at a temperature of (4 ± 2) °C, and relative centrifugal force
of approximately 1 000 g.
7.19 Biological safety cabinet, class II.
7.20 Vial container, with a capacity of 30 ml and closed with the screw cap. The gasket is made of
perfluoroethylene or silicone and the cap is made of polypropylene.
7.21 96 wells microplate with the gamma radiation sterilization, for TCID method.
50
96 wells microplates with other sterilization finish may be used after appropriate validation for the
growth of cells. See Figure 1.
1) This information is given for the convenience of users of this document and does not constitute an endorsement
of ISO by this product.
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ISO 18184:2019(E)
Figure 1 — 96 wells microplate for TCID method
50
7.22 6 wells plastic plate with the gamma radiation sterilization, for plaque assay.
6 wells plates with other sterilization finish may be used after appropriate validation for the growth of
cells. See Figure 2.
Figure 2 — 6 wells plastic plate for plaque assay
7.23 Flask, for cell culture use with the gamma radiation sterilization finish, with an adherent type,
2
a cell culture area of 75 cm and with the vent cap. The vent cap can exchange abacterial air through
0,2 μm filter. See Figure 3.
Flask with other sterilization finish may be used after appropriate validation for the growth of cells.
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ISO 18184:2019(E)
Figure 3 — Flask for cell culture use
7.24 CO incubator, capable of maintaining an atmosphere with 5 % CO , at a temperature of (34 ± 1) °C
2 2
and (37 ± 1) °C.
NOTE Certain CO incubators are described in EN 12353.
2
7.25 Incubator, capable of maintaining at a temperature of (25 ± 1) °C, (35 ± 1) °C and (37 ± 1) °C.
NOTE Certain incubators are described in EN 12353.
7.26 Centrifuge tube.
7.27 Culture container.
7.28 Test tube.
7.29 Beaker.
8 Sterilization of apparatus
Sterilize all apparatus which come in contact with the cells, the chemicals, or test specimen. The
sterilization method shall be used by high pressure steam or dry heat method.
— High pressure steam sterilization: by an autoclave (7.1) at a temperature of 121 °C and a pressure of
103 kPa for 15 min.
— Dry-heat sterilization: by a dry heat sterilizer (7.2) at a temperature of 180 °C for 30 min or 160 °C
for 2 h.
In case of plastics products, heat-resistant plastics products or sterilization finish plastics products
may be used.
9 Reagent and medium
All reagents shall have the quality suitable for virological needs, i.e. free of toxic substances for testing
microorganisms. Some of the media are available in the market.
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ISO 18184:2019(E)
9.1 Water, which shall be analytical-grade water for microbiological media preparation, which is ion-
exchanged and/or freshly distilled and/or ultra-filtered and/or filtered with RO (reverse osmosis).
9.2 Eagle's minimum essential medium (EMEM), Roswell Park Memorial Institute medium
(RPMI), available in the market. The composition is described in Annex D. If there are any components
missing from the composition, add them according to the composition table.
9.3 7,5 % sodium bicarbonate solution.
9.3.1 Sterilize sodium bicarbonate, 75 g in autoclave in a culture container with a cap closed tightly.
9.3.2 Water is also sterilized by autoclave.
9.3.3 Dissolve sodium bicarbonate in the sterilized water of 1 000 ml well.
Alternative preparation (replacing 9.3.1, 9.3.2, and 9.3.3) as follows. Prepare 7,5 % sodium bicarbonate
solution by dissolving 75 g of sodium bicarbonate in 1 000 ml of water. Sterilize the solution by using
0,22 μm membrane filter.
9.4 Formaldehyde solution.
Prepare a formaldehyde solution at the concentration of 3,7 % in water.
The other solution for cell fixation may be used after appropriate validation for the cell fixation.
9.5 Methylene blue solution.
9.5.1 Prepare a measuring flask (7.3) of 1 l, then, put the following materials in the flask:
— Water, 1 000 ml;
— Methylene blue, 0,375 g;
— 1 mol/l sodium hydroxide solutions 62,5 μl.
9.5.2 Dissolve and mix well.
9.6 Inactivated fetal bovine serum (FBS)
9.6.1 Put the freezed cryopreserved fetal bovine serum in a package in the water bath (7.9) at a
temperature of 37 °C and keep it until defrosting.
9.6.2 Then, raise the temperature of the water bath to 56 °C and keep it for 30 min to inactivate.
9.6.3 Divide it into several tubes. Put them in the freezer (7.11) at a temperature lower than –20 °C
until usage for testing.
9.6.4 Just before use, put it in the water bath at a temperature of 37 °C and keep it until defrosting.
9.7 Growth medium.
9.7.1 Prepare a measuring flask (7.3) of 1 l, and put the following materials into the flask:
— Water, 800 ml;
© ISO 2019 – All rights reserved 7
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 18184
Deuxième édition
2019-06
Textiles — Détermination de l'activité
virucide de produits textiles
Textiles — Determination of antiviral activity of textile products
Numéro de référence
ISO 18184:2019(F)
©
ISO 2019
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ISO 18184:2019(F)
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
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y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
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Publié en Suisse
ii © ISO 2019 – Tous droits réservés
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ISO 18184:2019(F)
Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction .vi
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 3
5 Virus et cellule hôte . 3
6 Avertissement . 3
7 Appareillage . 3
8 Stérilisation de l’appareillage . 6
9 Réactif et milieu de culture . 6
10 Préparation .11
10.1 Restauration de la cellule hôte cryoconservée .11
10.2 Sous-culture de cellules hôtes .12
10.3 Culture cellulaire pour détermination du titre infectieux d’une suspension virale .13
10.4 Préparation du virus à soumettre à essai .13
10.4.1 Généralités .13
10.4.2 Virus Influenza .13
10.4.3 Calicivirus félin .14
10.4.4 Titre infectieux des virus soumis à essai .15
10.5 Préparation des éprouvettes .16
10.5.1 Tissu témoin .16
10.5.2 Préparation des éprouvettes .16
10.5.3 Stérilisation des éprouvettes .16
10.6 Essai témoin .17
10.6.1 Généralités .17
10.6.2 Vérification de la cytotoxicité par la sensibilité des cellules au virus et
l’inactivation de l’activité virucide .17
11 Mode opératoire d’essai.17
11.1 Préparation des éprouvettes .17
11.2 Dépôt du virus dans les éprouvettes .17
11.3 Durée de contact .18
11.4 Élimination du virus immédiatement après dépôt .18
11.5 Élimination du virus après la durée de contact .18
12 Préparation pour dilutions en série de la suspension virale .18
13 Détermination du titre infectieux .19
13.1 méthode des plages de lyse .19
13.2 Méthode DICT .
50 19
14 Calcul du titre infectieux .19
14.1 Méthode des plages de lyse .19
14.2 Méthode DICT .
50 19
14.2.1 Méthode de Behrens et Kärber .19
14.2.2 Exemple de calcul .20
14.3 Résultat d’essai .22
14.3.1 Vérification de cet essai.22
14.3.2 Calcul de la valeur de l’activité virucide .22
15 Rapport d’essai .22
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ISO 18184:2019(F)
Annexe A (informative) Souches virales et cellules hôtes .23
Annexe B (normative) Détermination du titre infectieux: méthode des plages de lyse .24
Annexe C (normative) Détermination du titre infectieux: méthode DICT .26
50
Annexe D (informative) Composition des milieux.27
Annexe E (informative) Méthode d’essai avec des œufs de poule fécondés exempts d’agents
pathogènes (SPF) .30
Annexe F (informative) Efficacité virucide — Performances virucides des produits .35
Annexe G (informative) Résultats des essais interlaboratoires (1) .36
Annexe H (informative) Résultats des essais interlaboratoires (2) .38
Bibliographie .41
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ISO 18184:2019(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L’attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion
de l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/iso/fr/avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 38, Textiles.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 18184:2014), qui a fait l’objet d’une
révision technique. Les principales modifications par rapport à l’édition précédente sont les suivantes:
— l’Article 1 a été mis à jour;
— à l’Article 5, les virus et les cellules hôtes mentionnés dans le présent document ont été remplacés
par des exemples d’espèces;
— en 10.6, « Vérification de l’effet cytotoxique » a été supprimé;
— en 11.1, « Préparation des éprouvettes » a été mis à jour;
— en 14.3.2, « Calcul de la valeur de l’activité virucide » a été mis à jour;
— l’Annexe E (Autre virus: virus de la poliomyélite) a été supprimée.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse https: //www .iso .org/fr/members .html.
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ISO 18184:2019(F)
Introduction
Au cours de ces dernières années, le niveau de vie de la population mondiale a connu une nette
amélioration et les consommateurs tendent aujourd’hui à rechercher des produits de soin ou de
protection de la santé. Cette tendance s’accompagne d’un intérêt accru de la population pour la
protection contre des maladies épidémiques, notamment dans les trains de banlieue bondés que les
voyageurs empruntent quotidiennement, dans les hôpitaux, dans les maisons médicalisées, etc.
Grâce à la récente accélération du développement de techniques ultra performantes pour le traitement
des produits textiles, les produits d’hygiène et de protection de la santé occupent une place de plus en
plus importante sur le marché.
Ces produits relativement nouveaux ont bénéficié des avancées techniques réalisées dans le domaine
des technologies textiles et les fabricants ont individuellement développé des méthodes d’essai afin
d’évaluer les performances des produits. Cependant, aucune méthode d’essai unifiée n’a été élaborée et
les consommateurs et les fabricants ne disposent à ce jour d’aucune information claire sur ces produits
hautement fonctionnels.
Les produits à propriétés virucides figurent parmi ces produits et intègrent les domaines techniques
des technologies textiles et des biotechnologies.
Dans ce contexte, la nécessité d’élaborer une Norme internationale s’impose aux consommateurs,
distributeurs, fabricants ou autres intervenants, en tant que parties prenantes de ce marché.
Les produits textiles à propriétés virucides sont des textiles capables de réduire le nombre de virus
infectieux qui entrent en contact avec leur surface. Le présent document établit une méthode d’essai
quantitative permettant d’évaluer les performances virucides de ces produits.
Les données objectives obtenues grâce au présent document permettent à tous les acteurs
(consommateurs, fabricants, distributeurs, etc.) de déterminer de manière correcte la performance des
produits textiles antiviraux.
Deux méthodes permettent de quantifier le nombre de virus infectieux (titre infectieux dans le présent
document): la méthode directe des plages de lyse et la méthode DICT . La méthode utilisée peut être
50
choisie en fonction de l’expertise et des capacités techniques de chaque centre d’essai. Tout système
cellulaire approprié peut être utilisé et il convient de consigner les conditions d’essai dans le rapport
d’essai.
Voir l'Annexes G et H pour les résultats des essais interlaboratoires.
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NORME INTERNATIONALE ISO 18184:2019(F)
Textiles — Détermination de l'activité virucide de produits
textiles
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie des méthodes d’essai permettant d’évaluer l’activité virucide des produits
textiles contre des virus spécifiés. En raison des différences de sensibilité, les résultats obtenus avec un
virus d’essai ne peuvent pas être transposés à d’autres virus.
Les produits textiles incluent les tissus, les tricots, les fibres, les fils, les tresses, etc.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 105-F02, Textiles — Essais de solidité des teintures — Partie F02: Spécifications pour les tissus témoins
en coton et en viscose
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https: //www .iso .org/obp;
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http: //www .electropedia .org/.
3.1
virus
entité biologique originale qui possède un unique type d’acide nucléique (ADN ou ARN), une structure
spécifique qui oppose le virus aux organismes vivants possédant une structure cellulaire (procaryotes
et eucaryotes) et qui se reproduit par réplication à partir de son matériel génétique à l’intérieur de la
cellule hôte pour conduire à un parasitisme intracellulaire absolu
Note 1 à l'article: La particule virale infectieuse est appelée virion.
3.2
activité virale
capacité d’un virus à se répliquer dans les cellules hôtes sensibles et permissives
3.3
activité virucide
propriété de toute substance (chimique ou non) entraînant une modification d’un des éléments de la
structure du virion qui induit l’incapacité de ce dernier à se répliquer
Note 1 à l'article: Il s’agit d’une propriété qui réduit l’activité virale, généralement par une modification
morphologique ou une altération structurelle de la surface protéique du virus.
Note 2 à l'article: La modification de la réponse antigénique ou la modification d’un élément constitutif n’implique
pas nécessairement une diminution de la virulence d’un virus.
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ISO 18184:2019(F)
3.4
substances chimiques virucides
substances chimiques inorganiques ou organiques capables de réduire l’activité virale (3.2)
Note 1 à l'article: Les substances chimiques virucides organiques modifient la surface protéique du virus par
adsorption chimique. Les substances virucides métalliques inorganiques détruisent ou modifient la morphologie
du virus par arrachement d’un atome d’hydrogène de la protéine virale, grâce à des radicaux OH générés par
réaction radicalaire.
3.5
tissu témoin
tissu utilisé pour vérifier la stabilité du virus soumis à essai sur une étoffe textile
Note 1 à l'article: Il convient d’utiliser les tissus avant traitement virucide comme tissu témoin dans les mêmes
conditions que celles décrites en 3.5.
Note 2 à l'article: En l’absence de tissu témoin comme décrit dans la Note 1, il convient d’utiliser le tissu 100 % coton
décrit dans l’ISO 105-F02 sans traitement chimique (blanchiment optique, etc.).
3.6
essai témoin
essai destiné à vérifier qu’une éprouvette n’a aucune influence sur la cellule hôte
Note 1 à l'article: Cet essai est effectué dans les mêmes conditions que l’essai réel, mais sans le virus.
Note 2 à l'article: Également appelé essai témoin d’une éprouvette.
3.7
effet cytopathogène
effet cytopathogène (ECP) du virus
effet qui se manifeste sous la forme d’une altération morphologique ou d’une destruction des cellules
hôtes provoquée par la multiplication des virus
3.8
titre infectieux du virus
nombre de particules virales infectieuses présent par unité de volume dans un lysat cellulaire ou dans
une suspension virale
3.9
plage de lyse
surface de cellules lysées dans une culture cellulaire monocouche
3.10
unité formant plage
UFP
unité exprimée en concentration de virus infectieux par unité de volume
3.11
méthode des plages de lyse
méthode destinée à déterminer le titre infectieux du virus (3.8) à partir du nombre d’UFP en utilisant
des dilutions successives
3.12
DICT
50
dose infectieuse à 50 % d’une suspension virale de rinçage ou d’une dilution de suspension virale qui
induit un ECP dans 50 % des cultures cellulaires
Note 1 à l'article: Voir 3.7.
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ISO 18184:2019(F)
3.13
méthode DICT
50
méthode destinée à déterminer le titre infectieux du virus (3.8) à partir de la DICT en utilisant des
50
dilutions successives
3.14
cytotoxicité
altération morphologique des cellules et/ou leur destruction ou la réduction de leur sensibilité à la
multiplication de virus induite par un produit
4 Principe
Les virus sont déposés sur une éprouvette. Une fois le temps de contact écoulé, la quantité restante du
virus infectieux est déterminée et le taux de réduction est calculé en comparant l’éprouvette d’essai
du produit virucide et l’éprouvette témoin sur une échelle logarithmique décimale. Deux méthodes
permettent de quantifier le titre infectieux d’un virus. La première est la méthode des plages de lyse et
l’autre la méthode DICT . Le choix de la méthode est fonction de l’expertise et des capacités du centre
50
d’essai.
5 Virus et cellule hôte
L’Annexe A donne des exemples d’espèces virales et de cellules hôtes.
Il est possible d’employer d’autres espèces virales et d’autres cellules hôtes après validation appropriées
car le virus important peut changer en fonction de l’application cible. Si d’autres espèces sont utilisées, le
nom de l’espèce et la raison spécifique de son utilisation doivent être consignés dans le rapport d’essai.
NOTE La liste des virus de référence est donnée dans l’EN 14476 et dans l’EN 14675.
6 Avertissement
Le présent document nécessite l’utilisation de virus infectieux ou de substances et/ou modes opératoires
qui peuvent être préjudiciables à la santé et à l’environnement si les conditions appropriées ne sont pas
respectées. Elle se réfère uniquement à l’aptitude technique et ne dispense nullement l’utilisateur de
satisfaire, à tout moment, aux obligations légales en matière de santé, de sécurité et d’environnement.
L’avertissement est également applicable aux éléments suivants. Le virus utilisé dans le cadre de la
présente norme doit être un virus de niveau de sécurité biotechnologique de classe II, désigné comme
tel par les directives de l’OMS. L’utilisateur du présent document doit disposer de connaissances et d’une
expertise suffisantes en matière de microbiologie. Par ailleurs, les utilisateurs doivent rigoureusement
se conformer à la norme de sécurité des fabricants et à la réglementation locale applicable.
7 Appareillage
7.1 Stérilisateur sous vapeur à haute pression: autoclave capable de fonctionner à une température
de (121 ± 2) °C.
NOTE L’autoclave est décrit dans l’EN 12353.
7.2 Stérilisateur à chaleur sèche: fours capables de fonctionner à des températures de (180 ± 2) °C
et de (160 ± 2) °C.
NOTE Les fours à air chaud sont décrits dans l’EN 12353.
7.3 Fiole jaugée d’une capacité de 1 l.
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ISO 18184:2019(F)
7.4 Balance offrant une plage de mesure de 0,01 g à 100 g avec une précision de 1,0 %.
7.5 Pipettes de différents volumes avec une précision de 10 % du volume nominal.
7.6 Machine à laver.
7.7 Pipeteur capable de recevoir les pipettes en verre ou en plastique.
7.8 Micropipette de volume parfaitement adapté à chaque utilisation, à extrémité en verre ou en
plastique, avec une tolérance inférieure ou égale à 0,5 %.
7.9 Bain-marie capable de maintenir des températures de (37 ± 1) °C, (50 ± 1) °C et (56 ± 1) °C.
1)
7.10 Agitateur de type Vortex® utilisé pour les essais microbiens.
7.11 Congélateur réglable à une température de (–80 ± 2) °C ou (–20 ± 2) °C.
7.12 Bain d’azote liquide pour la conservation à –196 °C environ.
7.13 Appareil de filtration sur membrane avec un diamètre de pore de 0,22 μm.
7.14 Réfrigérateur réglable à une température comprise entre 2 °C et 8 °C.
7.15 pH-mètre avec incertitude d’étalonnage ± 0,1 unité de pH à (20 ± 1) °C.
NOTE Les pH-mètres sont décrits dans l’EN 12353.
7.16 Microscope inversé pour l’observation des cultures cellulaires.
7.17 Pinces stérilisables.
7.18 Centrifugeuse réglable à une température de (4 ± 2) °C et générant une force centrifuge relative
d’environ 1 000 g.
7.19 Poste de sécurité biologique de classe II.
7.20 Flacon d’une capacité de 30 ml avec bouchon à vis. Le joint est en tétrafluoroéthylène ou en
silicone, et le bouchon en polypropylène.
7.21 Microplaque à 96 puits à stérilisation par rayonnement gamma pour la méthode DICT .
50
Des microplaques à 96 puits avec d’autres traitements de stérilisation peuvent être utilisées après
validation appropriée de la croissance cellulaire. Voir la Figure 1.
1) Ces informations sont données aux utilisateurs du présent document à titre indicatif et ne constituent en
aucun cas une recommandation de l’ISO pour les produits concernés.
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ISO 18184:2019(F)
Figure 1 — Microplaque à 96 puits pour la méthode DICT50
7.22 Plaque en plastique à 6 puits à stérilisation par rayonnement gamma pour la méthode des
plages de lyse.
Des plaques à 6 puits avec d’autres traitements de stérilisation peuvent être utilisées après validation
appropriée de la croissance cellulaire. Voir la Figure 2.
Figure 2 — Plaque en plastique à 6 puits pour la méthode des plages de lyse
7.23 Fiole pour la culture cellulaire, stérilisée aux rayonnements gamma, traitée pour faciliter
2
l’adhérence cellulaire, avec une zone de culture cellulaire de 75 cm et un bouchon d’aération. Le bouchon
d’aération peut laisser passer de l’air sans bactéries par un filtre à pores de 0,2 μm. Voir la Figure 3.
Une fiole avec d’autres traitements de stérilisation peut être utilisée après validation appropriée de la
croissance cellulaire.
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ISO 18184:2019(F)
Figure 3 — Fiole pour culture cellulaire
7.24 Incubateur à CO capable de maintenir une atmosphère contenant 5 % de CO à une température
2 2
de (34 ± 1) °C et de (37 ± 1) °C.
NOTE Certains incubateurs à CO sont décrits dans l’EN 12353.
2
7.25 Incubateur capable de maintenir une température de (25 ± 1) °C, (35 ± 1) °C et (37 ± 1) °C.
NOTE Certains incubateurs sont décrits dans l’EN 12353.
7.26 Tube à centrifuger.
7.27 Boîte de culture cellulaire.
7.28 Tube à essai.
7.29 Bécher.
8 Stérilisation de l’appareillage
Stériliser tous les équipements destinés à entrer en contact avec les cellules, les substances chimiques
ou les éprouvettes. La stérilisation doit être effectuée à la vapeur d’eau ou par chaleur sèche.
— Stérilisation à la vapeur d’eau: en autoclave (7.1) à une température de 121 °C et une pression
de 103 kPa pendant 15 min.
— Stérilisation par chaleur sèche: en stérilisateur à chaleur sèche (7.2) à une température de 180 °C
pendant 30 min ou à 160 °C pendant 2 h.
Pour les produits en plastique, des articles résistants à la chaleur ou stérilisés peuvent être utilisés.
9 Réactif et milieu de culture
Tous les réactifs doivent être d’une qualité adaptée aux besoins virologiques, c’est-à-dire sans substance
toxique pour les essais microbiens. Certains milieux de culture sont disponibles dans le commerce.
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ISO 18184:2019(F)
9.1 Eau qui doit être de qualité analytique pour la préparation de milieux de culture microbiologiques,
qui est fraîchement distillée ou traitée par échange d’ions, par ultrafiltra
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.