ISO 8381:1987
(Main)Milk-based infant foods — Determination of fat content — Röse-Gottlieb gravimetric method (Reference method)
Milk-based infant foods — Determination of fat content — Röse-Gottlieb gravimetric method (Reference method)
Aliments à base de lait pour enfants en bas âge — Détermination de la teneur en matière grasse — Méthode gravimétrique Röse-Gottlieb (Méthode de référence)
General Information
Relations
Buy Standard
Standards Content (Sample)
First edition
1987-12-15
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDDZATDON
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMAUSATION
MEXAYHAPOflHAFl OPTAHM3Ai&ll7 i-l0 CTAH~APTM3A~MM
etermination
aavimetric met
Determination de Ia teneur en matikre
Aiiments 2 base de lait pour enfants en bas 6ge -
grasse - Methode gravimktrique Röse-Gottlieb (Methode de kf&rencel
Reference number
ISO 8381 : 1987 (E)
---------------------- Page: 1 ----------------------
orewor
ISO (the International Organkation for Standardkation) is a worldwide federation of
national Standards bodies (ISO member bedies). The work of preparing International
Standards is normally carried out through ISO technical committees. Esch member
body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International Organkations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take patt in the wo&.
Draft international Standards adopted by the technical committees are ciaculated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the EO Council. Bhey are approved in accordance with ISO procedures requiring at
least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard ISO 838i was prepared by Technical Committee ISO/TC 34,
Agricultural food products, in collaboration with the International Dairy Federation
(IDF) and the Association of Analytical Chemists (AOAC) and will also be published by
these Organkations.
Lkers should note that all International Standards undergo revision from time to time
and, that any reference made herein to any other International Standard implies its
Qatest edition, unless otherwise stated.
0
Bnternational Organization for Standardization, 1987
Printed in Switzerland
---------------------- Page: 2 ----------------------
AT L STA ISO 838II : 1987 (E)
1 Scope and field of application
0 llntroduction
This International Standard has been prepared within the This International Standard specifies the reference method for
framework of producing a series of reference methods, which the determination of the fat content of liquid, concentrated and
are harmonized to the greatest possible extent, for the dried milk-based infant foods containing no or not more than
gravimetric determination of the fat content of milk, milk pro- 5 % (mlm) (in the dry matter) of starch or dextrin, or
ducts and milk-based foods. These methods are based on vegetable, fruit, meat, etc. (Malta-dextrins without higher
either the Röse-Gottlieb (RG), or the Weibull-Berntrop (WB) or molecular mass dextrins, which are often present in infant
the Schmid-Bondzynski-Ratzlaff (SBR) principle. foods, do not disturb the RG extraction even when present in
high percentages.)
For this International Standard, dealing with milk-based infant
foods containing no or not more than 5 % (mlm) (in the dry NOTE - If the product does not dissolve completely in ammonia ow-
ing to the presence of more than a few per cent of starch or dextrin, or
matter) of starch or dextrin, or vegetable, fruit, meat, etc., a
to the presence of hard lumps, or if it contains free fatty acids in signifi-
method based on the RG principle has been Chosen because
cant quantities, the result of the determination will be too low. In the
a) for products containing a high percentage of lactose case of such products, recourse should be made to a method utilizing
the Weibull-Berntrop principle?
and other carbohydrates, such as milk-based infant foods,
an RG procedure with dissolution in ammonia is, in princi-
ple, preferable to a method employing a hydrochloric acid
digestion (Schmid-Bondzynski-Ratzlaff or WeibulkBerntrop
method). This preference is based on the fact that in the
2 References
acid digestion, ether-soluble substances and a great quan-
tity of charred material that impedes the extraction are
ISO 707, Mifk and mifk products - Methods of sampling.
formed from the carbohydrates;
b) many types of infant foods are milk-based and contain
ISO 3889, Milk and milk products - Determination of fat con-
no or not more than a few per cent sf starch or dextrin;
Mojonnier- type fa t extraction flasks.
tent -
therefore they tan be examined by the RG method. In the
case of products containing more than 5 % (mlm) (in the
dry matter) of starch or dextrin, or vegetable, fruit, meat,
etc., recourse has to be made to a method utilizing the
3 Definition
Weibull-Berntrop principlel).
dat content of milk-based infant foods: All the,substances
The details of the determination are based on the revised RG
method for milk specified in ISO 121 I*), comprising a number determined by the method specified in this International Stan-
dard.
of modifications to improve the precision of the method. An
explanation of these modifications is given in the introduction
lt is expressed as a percentage by mass.
to ISO 1211.
Determination of fat content b y the Weibul- Bemtrop gravimetric method (Reference
1) See ISO 8262-1, Mi/k products and mi/k-based foods -
methodj - Part I : Infant foods.
2)
ISO 1211, Mk - Determination sf fat content - Gravimetric method (Reference method).
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X
5 solwen use by mixing
e af u s of the light Petroleum
(5.5).
Extraction of an ammoniacal ethanolic solution of the liquid,
d8eth-d eher and light
difuted or dissolved test
Petroleum, removaf sf the solvents by distillation or evapora-
6 Apparatus
tion, and determination of the mass of the substances extrac-
ted which are soluble in light Petroleum. (This is usually known
WAWMNG - Since the determination inwolves the use od
as the Rose-Gottlieb principle.)
volatile 61ammaMe solvents, electricall apparatus
empioyed may be required to comply with legislation
relating to the hazards in using such solvents.
eagents
Usual laboratory equipment, and in particular
All reagents shall be of recognized anadyticad grade and shall
Beave no appreciable residue when the determination is carried
out by the method specified. The water used shall be distilled
6.1 Analytical balance.
water or water of at least equivalent purity.
6.2 Centrifuge, in which the fat-extraction flasks or tubes
To test the quality of the reagents, carry out a blank test as
(6.6) tan be spun at a rotational frequency of 500 to 600 min - 1
specified in 8.3. Use an empty fat-collecting vessel, prepared as
to produce an acceleration of 80g to 9Og at the outer end sf the
specified in 8.4, for mass control purposes (sec 10.1). The
flasks or tubes.
reagents shall leave no residue greater than O,5 mg.
NOTE - The use of the centrifuge is optional but recommended (sec
ff the residue of the complete reagent blank test is greater than
8.57).
O,5 mg, determine the residue of the solvents separately by dis-
tilling 100 ml of the diethyl ether and light Petroleum respecti-
vely. Use an empty control vessel to obtain the real mass of
6.3 Distillation or evaporation apparatus, to enable the
residue, which shall not exceed 0,5 mg.
solvents and ethanol to be distilled from the fat-collecting flasks
or to be evaporated from beakers and dishes Isee 8.5.10 and
Replace u nsatisfactory reagents or distil the solvents if they do
8.5.14) at a temperature not exceeding IOQ OC.
not meet this requirement.
6.4 Drying oven, electrically heated, with ventilatisn pcrtQs)
5.1 Ammonia solution, containing approximately 25 % (mlm)
fully open, capable of being maintained at 102 k 2 OC
of NW3, &o = 910 g/l.
throughout the working space. The oven shall be fitted with a
suitable thermometer.
NOTE - lf ammonia Solution of this concentration is not available, a
more concentrated Solution 04 known concentration may be used (sec
8.5.2).
6.5 Water-baths, capable of being maintained at the folllow-
ing temperatures :
5.2 Ethanol, or ethanol denatured y methanol, at least
40 to 60 OC (sec 8.1.1);
94 % (WV).
30 to 40 OC (sec 8.12);
(See 10.5.)
to 50 T (sec tL5.1);
60 to 70 OC (sec 8.5.3).
sdution.
6.6 Mojonnier-type fat-extraction flasks, as specified in
Dissolve 1 g of Congo-red in water and dilute to 1
ISO 3889.
OTE - The use of this Solution, which allows the interface between
NOTE - ft is also possible to use fat-extraction tubes (CW fksks)
the solvent and aqueous layers to be seen more clearly, is optional (sec
with Siphon or wash-bettle fittings, but the procedure is then dif-
8.54). Other aqueous colour solutions may be used provided that they
ferent and is that specified in the annex. The long inner limb of the fit-
do not affect the res& sf the determination.
ting may have a hooked end if desired.
oxides (sec 10.3) and con-
The flasks (or tubes, see the note) shall be provided with good
g of antioxidants and com-
quality bark corks or Stoppers of other material (for example
uirements for the blank test (sec the
Silicone rubber or PTf@) unaffected by the reagents used.
introductory Paragraphs to clause 5, and also IO.1 and 10.4).
Bark corks shall be washed with the diethyl ether (5.41, kept in
water at 60 OC or more (but not boiling) for at least 15 min, and
Light petroleum, having any boiling range between 30 shall then be allowed to cool in the water so that they are
saturated when used.
and 68 “C.
Polytetrafkroroethylene
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ISO 8381 : 1987 (E)
6.7 Rack, ts hold the fat-extraction flasks (or tubes) (sec 8.1.2 Viscous 3r pasty products
6.6).
Open the Container and thoroughly mix the contents with a
spoon or spatula. If possible, use an up-and-down rotary move-
6.8 Wash bettle, suitable for use with the mixed solvent
ment in such a way that the top layers and the contents of the
(5.6). A plastic wash bottle shall not be used.
lower corners of the Container are moved and mixed. Take care
to incorporate in the Sample any fat or other constituent adher-
6.9 Fat-collecting vessels, for example boiling flasks (flat-
ing to the wall and ends of the Container. Transfer the product
bottomed) of capacity 125 to 250 ml, conical beakers of ca-
as completely as possible to a second Container (provided with
pacity 250 ml, or metal dishes.
an airtight lid). Close this Container.
16 metal dishes are used, they shall preferably be made of
lf necessary, condition the unopened Container in the water
stainless steel, shall be flat-bottomed, preferably with a spout,
bath (6.5) at 30 to 40 OC. Remove the Container, dry the outside
and shall have a diameter of 80 to 100 mm and a height of ap-
with a tissue and open it. Scrape out all product adhering to the
proximately 50 mm.
interior of the Container, transfer to a dish large enough to per-
mit thorough stirring, and mix until the whole mass is
6.10 Boiling aick, fat-free, of non-porous porcelain or
homogeneous. Transfer the product as completely as possible
Silicon carbide, or glass beads (optional in the case of metal
to a second Container as above. Close this Container.
dishes).
8.13 Dried products
6.11 Measuring cylinders, of capacities 5 and 25 ml.
Mix thoroughly by repeatedly rotating and inverting the con-
’ 6.72 Pipettes, graduated, of capacity 10 ml.
tainer. If necessary, transfer all of the laboratory Sample to a
suitable airtight Container of adequate capacity to allow this
6.13 Tongs, made of metal, suitable for holding flasks,
Operation to be carried out.
beakers or dishes.
8.2 Test portion
7 Sampling
Mix the test Sample (8.1) by gently stirring (in the case of
viscous, pasty or dried products) or by gently inverting the con-
See ISO 707.
tainer three or four times (in the case of liquid products) and im-
mediately weigh to the nearest 1 mg, directly or by differente,
All liquid, viscous or pasty laboratory samples shall be kept at a
into a fat-extraction flask (6.6), 1,5 to 10 g of the test Sample,
temperature of 2 to 4 OC from the time of sampling to the time
corresponding to 1,O to 1,5 g of dry matter.
of commencing the procedure. In the case of a sealed tan or
bottle, store it unopened at a temperature below 20 OC.
The test Portion shall be delivered as completely as possible
into the lower (small) bulb of the extraction flask (6.6).
8 Procedure
8.3 Blank test
NOTE - The alternative procedure using fat-extraction tubes with
Carry out a blank test simultaneously with the determination,
Siphon or wash-bottle fittings (sec the note to 6.6) is described in the
annex.
using the same procedure and same reagents, but replacing the
dissolved test Portion (see 8.5.1) by 10 ml of water (see 10.2).
81 . Preparation of the test sample
8.4 Reparation of fat-collecting vessel
8.1.1 Liquid products
Dry a vessel (6.9) containing a few boiling aids (6.iO) in the
Shake and invert the Container. Open the Container, pour the
oven (6.4), controlled at 102 + 2 OC, for 1 h (sec note 1).
product slowly into a second Container (provided with an air-
tight lid) and mix by repeated transfer, taking care to incor-
Allow the vessel to cool (protected from dust) to the
porate in the Sample any fat or other constituent adhering to
temperature of the weighing room (glass vessel for at least 1 h,
the wall and ends of the first Container. Finally transfer the pro-
metal dish for at least 0,5 h) (sec note 2).
duct as completely as possible to the second Container. Close
this Container.
Using tongs (6.13) (to avoid, in particular, temperature varia-
tions), place the vessel on the balance and weigh to the nearest
116 necessary, condition the unopened Container in the water
0,1 mg.
bath (6.5) at 40 to 60 OC. Remove and Shake the Container
vigorously every 15 min. After 2 h, remove the Container, dry
NOTES
the outside with a tissue and allow to cool to room
1 Boiling aids are desirable to promote gentle boiling during the
temperature. Remove the lid or cap entirely and thoroughly mix
subsequent removal of solvent, especially in the case of glass vessels;
the contents by stirring with a spoon or spatula. (lf fat
their use is optional in the case of metal dishes.
separates out, do not test the Sample.) Transfer the product as
completely as possible to the second Container. Close this con- 2 The vessel should not be placed in a desiccator, to avoid insuf-
ficient cooling or unduly long cooling times.
tainer.
3
---------------------- Page: 5 ----------------------
um (5.5), close the flask
Add 25 ml of the light petr
the rewetted cork or rewett stopper (by dipping in
water),. and Shake the flask gently for 30 s as described in 8.5.5.
5.1 Bf necessary, add water at 65 + 5 OC to the test Portion
to obtain a total volume of 10 to 11 ml, and so as to wash the
8.5.7 Centrifuge the closed flask for 1 to 5 min at a rotational
test Portion into the small bulb sf the flask. Shake gently with
frequency of 500 to 600 min-l (sec 6.2). lf a centrifuge is not
slight warming in a water bath (6.5) controlled at 40 to 50 OC
ersed. Cool in running available, allow the closed flask to stand in the rack (6.7) for at
until the product is completely dis
least 30 min until the supernatant layer is clear and distinctly
water.
separated from the aqueous layer. If necessary, cool the flask in
running water.
e arnmonia solution (5.1), or an
5.2 Add 1,5 ts 2 ml of t
equivalent volume of a more concentrated ammonia Solution
8.5.8 Carefully remove the cork or stopper and rinse it and the
(sec the note to 5.11, and mix thoroughly with the dispersed
inside of the neck of the flask with a little of the mixed solvent
test Portion in the sr-na/% bulb of the flask. After the addition of
so that the rinsings run into the flask or into the fat-collecting
the ammonia, continue the determination without delay.
vessel q
lf the interface is below the bottom of the stem of the flask,
5.3 Weat the flask at 65 + 5 OC in the water bath (6.5) for
raise it slightly above this level by gently adding water down the
15 to 20 min with occasional shaking (optional in the case of
side of the flask (sec figure 1) to facilitate the decantation of
liquid products) and then cool to laboratory temperature.
solvent.
8.5.4 Add IO ml of the ethanol (5.2) and mix gently but NOTE - In figures 1 and 2, one of the three types of flasks as specified
in ISO 3889 is shown, but this does not imply any preference over the
thoroughly by allowing the contents of the flask to flow
other types.
backward and fotward between the two bulbs; avoid bringing
the liquid too near to the neck of the flask. If desired, add
2 drops of the Congo-red Solution (5.3).
8.5.9 Holding the extraction flask by the small bulb, carefully
decant as much as possible of the supernatant layer into the
prepared fat-collecting vessel (sec 8.4) containing a few boiling
5.5 Add 25 ml sf the diethyl ether (5.41, close the flask with
aids (6.10) in the case of flasks (optional with metal dishes),
a cork (sec 6.6) saturated with water or with a stopper wetted
avoiding decantation of any of the aqueous layer (sec figure 2).
with water, and Shake the flask vigorously, but not excessively
(in Order to avoid the formation of persistent emulsions), for
8.5.10 Rinse the outside of the neck of the extraction flask
1 min with the flask in a horizontal Position and the small bulb
xtending upwards, periodically allowing the liquid in the large with a little of the mixed solvent, collecting the rinsings in the
fat-collecting vessel and taking care that the mixed solvent
ulb to run into the small bulb. If necessary, cool the flask in
does not spread over the outside of the extraction flask.
nning water, then carefully remove the cork or stopper and
rinse it and th
...
IS0
NORME INTERNATIONALE 8381
Première édition
1987-12-1 5
__-
rm= -
- INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXAYHAPOAHAR OPTAHM3AuMR Il0 CTAHAAPTM3AL&lM
Aliments à base de lait pour enfants en bas âge -
Détermination de la teneur en matière grasse -
Méthode gravimétrique Rose-Gottlieb (Méthode de
référence)
Milk-based infant foods - Determination of fat content - Rose-Gottlieb gravimetric method
(Reference method)
Numéro de référence
IS0 8381 : 1987 (F)
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Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d'organismes nationaux de normalisation (comités membres de I'ISO). L'élaboration
des Normes internationales est normalement confiée aux comités techniques de I'ISO.
Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I'ISO participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I'ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I'ISO qui requièrent l'approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale IS0 8381 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires, en collaboration avec la FIL (Fédération internationale
de laiterie) et I'AOAC (Association des chimistes analytiques officiels) et sera égale-
ment publiée par ces organisations.
L'attention des utilisateurs est attirée sur le fait que toutes les Normes internationales
sont de temps en temps soumises à révision et que toute référence faite à une autre
Norme internationale dans le présent document implique qu'il s'agit, sauf indication
contraire, de la dernière édition.
O Organisation internationale de normalisation, 1987 0
Imprimé en Suisse
---------------------- Page: 2 ----------------------
IS0 8381 : 1987 (FI
NORM E I NTE RN AT1 ON ALE
Aliments à base de lait pour enfants en bas âge -
Détermination de la teneur en matière grasse -
Méthode gravimétrique Rose-Gottlieb (Méthode de
référence)
O Introduction nant des modifications en vue d'améliorer la fidélité de la
méthode. Une explication de ces modifications est donnée
La présente Norme internationale a été établie en vue de dispo- dans l'introduction de I'ISO 121 1.
ser d'une série de méthodes de référence, harmonisées le
mieux possible, pour la détermination gravimétrique de la
1 Objet et domaine d'application
teneur en matière grasse du lait, des produits laitiers et des pro-
duits à base de lait. Ces méthodes reposent soit sur le principe
La présente Norme internationale spécifie une méthode de réfé-
de Rose-Gottlieb (RG), soit sur celui de Weibull-Berntrop
rence pour la détermination de la teneur en matière grasse des
(WB), soit encore sur celui de Schmid-Bondzynski-Ratzlaff
aliments à base de lait liquides, concentrés et séchés pour
(SBR).
enfants en bas âge, ne contenant pas ou ne contenant pas plus
de 5 % (rn/rn) (de la matière sèche) d'amidon, de dextrines, de
Pour cette Norme internationale, concernant les aliments à
légumes, de fruits, de viandes, etc. (Les malto-dextrines ne
base de lait pour enfants en bas âge ne contenant pas, ou ne
contenant pas de dextrines de haut poids moléculaire, souvent
contenant pas plus de 5 % (rn/rn) (de la matière sèche) d'ami-
présentes dans les aliments pour enfants en bas âge, ne trou-
don, de dextrines, de légumes, de fruits, de viande, etc., une
blent pas l'extraction par la méthode Rose-Gottlieb, même si
méthode basée sur le principe RG a été retenue pour les raisons
elles sont présentes en pourcentage élevé.)
suivantes :
NOTE - Si le produit ne se dissout pas complètement dans I'ammo-
a) pour des produits à teneur élevée en lactose et autres
niaque, du fait de la présence d'un certain pourcentage d'amidon, de
hydrates de carbone, tels que des aliments à base de lait
dextrines, de grumeaux compacts, ou s'il contient des acides gras
pour enfants en bas âge, la méthode RG impliquant une dis-
libres en quantités notables, le résultat de la détermination sera trop fai-
solution dans l'ammoniaque est, en principe, préférable à
ble. Avec de tels produits, on aura recours à la méthode utilisant le
une méthode mettant en jeu une minéralisation à l'acide
principe Weibull-Berntrop".
chlorhydrique (méthode de Schmid-Bondzynski-Ratzlaff ou
de Weibuil-Berntrop). Cette préférence est basée sur le fait
2 Références
que, lors de la minéralisation acide, les composés solubles
dans l'éther et une quantité importante de matière carboni-
IS0 707, Lait et produits laitiers - Méthodes d'échantiffon-
sée sont formés à partir des hydrates de carbone et gênent
nage.
l'extraction ;
b) de nombreux types d'aliments pour enfants en bas âge
IS0 3889, Lait et produits laitiers - Détermination de fa teneur
sont des aliments à base de lait qui ne contiennent pas ou ne
en matière grasse - Fioles d'extraction, type Mojonnier.
contiennent pas plus de quelques pourcents d'amidon ou de
dextrines; ainsi, ils peuvent être examinés selon la méthode
RG. Dans le cas de produits contenant plus de 5 % (rn/rn) 3 Définition
(de la matière sèche) d'amidon, de dextrines, de légumes,
de fruits ou de viande, etc., il faut avoir recours à la
teneur en matière grasse dans les aliments pour enfants
méthode utilisant le principe de Weibull-Berntrop').
en bas âge: Toutes les substances déterminées selon la
méthode spécifiée dans la présente Norme internationale.
Les détails de la détermination sont basés sur la méthode Rose-
Gottlieb révisée pour le lait, décrite dans I'ISO 121 1 2), compre-
Elle est exprimée en pourcentage en masse.
Voir IS0 8261-1, Produits laitiers et aliments à base de lait - Détermination de la teneur en matière grasse par la méthode gravimétrique Weibull-
1 )
Berntrop (Méthode de référence) - Partie 1: Aliments pour enfants en bas âge.
IS0 121 1, Lait - Détermination de la teneur en matière grasse - Méthode gravimétrique (Méthode de référence).
2)
1
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: 1987 (FI
IS0 838
4 Principe 5.6 Mélange de solvants, préparé peu de temps avant
emploi par mélange à volume égal d'oxyde diéthylique (5.4) et
Extraction d'une solution ammoniaco-éthanolique d'une prise
d'éther de pétrole (5.5).
d'essai liquide, diluée ou dissoute, au moyen d'oxyde diéthyli-
que et d'éther de pétrole, élimination des solvants par distilla-
tion ou évaporation, et détermination de la masse des substan-
6 Appareillage
ces extraites qui sont solubles dans l'éther de pétrole.
(Méthode habituellement connue sous le nom de Rose-
AVERTISSEMENT - Pour les déterminations requérant
Gottlieb.)
l'utilisation de solvants volatils inflammables, I'appareil-
lage électrique utilisé devra satisfaire, le cas échéant, à la
législation en matière de risques liés à l'utilisation de ces
5 Réactifs
solvants.
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue et
Matériel courant de laboratoire, et notamment:
ne doivent pas laisser de résidu appréciable lorsque la détermi-
nation est effectuée selon la méthode spécifiée. L'eau utilisée
6.1 Balance analytique.
doit être de l'eau distillée ou de l'eau de pureté au moins équiva-
lente.
6.2 Centrifugeuse, dans laquelle les fioles ou les tubes (6.6)
d'extraction peuvent être centrifugés à une fréquence de rota-
Pour vérifier la qualité des réactifs, effectuer un essai à blanc
tion de 500 à 600 min - ', afin d'obtenir une accélération de 80g
comme mentionné en 8.3. Pour les contrôles de masses, utiliser
à 9Og à l'extrémité extérieure des fioles ou des tubes.
un récipient vide de récupération de la matière grasse, préparé
e
comme décrit en 8.4. Les réactifs ne doivent pas laisser de rési-
NOTE - L'utilisation d'une centrifugeuse est facultative mais recom-
dus supérieurs à 0,5 mg (voir 10.1).
mandée (voir 8.5.7).
Si les résidus des réactifs de l'essai à blanc complet sont supé-
rieurs à 0,5 mg, déterminer les résidus des solvants séparément
6.3 Appareil de distillation ou d'évaporation, permettant
en distillant respectivement 100 ml d'oxyde diéthylique et de distiller les solvants et l'éthanol des fioles de récupération de
d'éther de pétrole. Utiliser un récipient de contrôle vide pour la matière grasse, ou de les évaporer des béchers et des capsu-
obtenir la masse réelle de résidus qui ne doit pas être supérieure les (voir 8.5.10 et 8.5.14) à une température n'excédant pas
à 0.5 mg. 100 OC.
Remplacer les réactifs ou solvants non satisfaisants, ou distiller
6.4 Étuve à dessiccation, à chauffage électrique, munie
les solvants qui ne remplissent pas cette condition.
d'ouïes de ventilation complètement ouvertes, réglable à une
température de 102 f 2 OC, uniforme en tous points. L'étuve
Hydroxyde d'ammonium, solution à environ
5.1
doit être munie d'un thermomètre approprié.
25 % (rnlrn) de NH,, Q~~ = 910 gll.
6.5 Bains d'eau, réglables aux températures suivantes:
NOTE - Si l'on ne dispose pas d'une solution d'hydroxyde d'ammo-
nium à cette concentration, une solution plus concentrée, de concen-
40 à 60 OC (voir 8.1.1);
tration connue, peut être utilisée (voir 8.5.21.
30 à 40 OC (voir 8.1.2);
Éthanol, ou éthanol dénaturé au méthanol, à au
5.2
40 à 50 OC (voir 8.5.1);
moins 94 % (VIP').
O
60 à 70 OC (voir 8.5.3).
(Voir 10.5.)
6.6 Fioles d'extraction de la matière grasse, type
5.3 Solution de rouge Congo.
Mojonnier, telles que décrites dans I'ISO 3889.
Dissoudre dans l'eau 1 g de rouge Congo et diluer à 100 ml.
NOTE - On peut également utiliser des tubes (ou des fioles)
d'extraction de la matière grasse munis d'un siphon ou d'un
NOTE - L'utilisation de cette solution, qui permet de mieux voir
système d'aspiration par le vide, mais le mode opératoire est alors
l'interface entre le solvant et la couche aqueuse, est facultative (voir
différent et est décrit dans l'annexe. La longue tubulure à l'intérieur de
8.5.4). D'autres solutions aqueuses de colorants peuvent être utilisées
la fiole peut présenter une extrémité recourbée en crochet, si on le
pourvu qu'elles ne modifient pas le résultat de la détermination.
désire.
5.4 Oxyde diéthylique, exempt de peroxydes (voir 10.3). ne Les fioles (ou les tubes, voir la note) doivent être munis de bou-
contenant pas, ou contenant pas plus de 2 mglkg d'antioxygè-
chons en liège de bonne qualité, ou de bouchons en une autre
nes et en se conformant aux prescriptions de l'essai à blanc matière [par exemple, caoutchouc siliconé ou PTFE ')I inaltéra-
(voir les paragraphes d'introduction au chapitre 5, et aussi 10.1
bles aux réactifs utilisés. Les bouchons en liège doivent être
et 10.4). lavés à l'oxyde diéthylique (5.41, maintenus dans l'eau à 60 OC
ou plus (mais non à l'ébullition) pendant au moins 15 min et
Éther de pétrole, ayant un point d'ébullition entre 30 ensuite mis à refroidir dans l'eau de façon à en être imprégnés
5.5
au moment de l'emploi.
et 60 OC.
1 ) Polytétrafluoroéthylène
2
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IS0 8381 : 1987
F)
6.7 Support, pour maintenir les fioles (ou les tubes) de 2 h, retirer le récipient, sécher l'extérieur avec du papier
Joseph et le laisser refroidir à température ambiante. Ôter entiè-
d'extraction de la matière grasse (voir 6.6).
rement le couvercle et mélanger avec soin le contenu à l'aide
d'une cuillère ou d'une spatule. (Si la matière grasse se sépare,
le mélange de solvants (5.6). Ne
6.8 Flacon de lavage, pour
ne pas tester l'échantillon.) Transvaser le produit aussi complè-
pas utiliser de flacon de lavage en plastique.
tement que possible dans le second récipient. Fermer ce réci-
pient.
6.9 Récipients de récupération de la matière grasse, par
exemple fioles à ébullition (fioles à fond plat) de capacité 125 à
8.1.2 Produits visqueux ou pâteux
250 ml, fioles coniques de capacité 250 ml ou capsules métalli-
ques.
Ouvrir le récipient et mélanger les contenus avec soin à l'aide
d'une cuillère ou d'une spatule. Utiliser, si possible, un mouve-
Lorsqu'on utilise des capsules métalliques, elles doivent être de
ment de rotation de haut en bas, afin que les couches supérieu-
préférence en acier inoxydable, à fond plat, avec un bec, et doi-
res et le contenu des coins inférieurs du récipient soient remués
vent avoir un diamètre de 80 à 100 mm, avec une hauteur
et mélangés. Faire attention d'incorporer à l'échantillon de la
d'environ 50 mm.
à la paroi et aux
matière grasse ou d'autres composés adhérant
extrémités du récipient. Transvaser le produit aussi complète-
6.10 Régulateurs d'ébullition, exempts de matière grasse,
ment que possible dans un second récipient (muni d'un couver-
en porcelaine non poreuse ou en carbure de silicium, ou billes
cle étanche). Fermer ce récipient.
de verre (facultatif dans le cas des capsules métalliques).
Si nécessaire, conditionner le récipient qui n'a pas été ouvert,
dans un bain d'eau (6.5), réglé entre 30 et 40 OC. Retirer le réci-
Éprouvettes graduées, de 5 et 25 ml de capacité.
6.11
pient, sécher l'extérieur avec du papier Joseph et l'ouvrir.
Racler tout le produit adhérant à l'intérieur du récipient, le
Pipettes graduées, de 10 ml de capacité.
6.12
transvaser dans une capsule suffisamment large pour permettre
une agitation minutieuse et mélanger jusqu'à obtenir une
masse homogène. Transvaser le produit, aussi complètement
6.13 Pinces métalliques, appropriées pour tenir les fioles,
béchers ou capsules. que possible dans un second récipient, comme précédemment.
Fermer ce récipient.
7 Échantillonnage 8.1.3 Produits secs
Voir IS0 707. Mélanger soigneusement par rotations et retournements du
récipient. Transvaser, si nécessaire, l'échantillon pour labora-
Tous les échantillons pour laboratoire liquides, visqueux ou
toire dans un récipient approprié, hermétique à l'air, de capacité
pâteux doivent être conservés à une température comprise
adéquate pour permettre le mélange.
entre 2 et 4 OC à partir du moment de l'échantillonnage
jusqu'au début du mode opératoire. Dans le cas d'une boîte de
8.2 Prise d'essai
conserve scellée ou d'une bouteille, la conserver fermée à une
température inférieure à 20 OC.
Mélanger l'échantillon pour essai (8.1 ) par agitation douce
(dans le cas de produits visqueux, pâteux ou secs) ou soigneu-
sement par retournements de la bouteille trois ou quatre fois
8 Mode opératoire
(dans le cas de produits liquides), puis peser immédiatement
dans une fiole conique (6.6). directement ou par différence, à
NOTE - Un autre mode opératoire utilisant des tubes d'extraction de
1 mg près, 1,5 à 10 g de l'échantillon pour essai correspondant
la matière grasse munis d'un siphon ou d'un système d'aspiration par le
à 1,0-1,5 g de matière sèche.
vide (voir la note en 6.6) est décrit dans l'annexe.
La prise d'essai doit être placée aussi complètement que possi-
8.1 Préparation de l'échantillon pour essai ble dans le bulbe inférieur (étroit) de la fiole d'extraction (6.61.
8.1.1 Produits liquides
8.3 Essai à blanc
Secouer et retourner le récipient. Ouvrir le récipient, verser
Effectuer un essai à blanc simultanément à la détermination, en
doucement le produit dans un second récipient (muni d'un cou-
utilisant le même mode opératoire et les mêmes réactifs, mais
vercle étanche) et mélanger par transvasements répétés, en fai-
en remplacant la prise d'essai diluée comme décrit en 8.5.1, par
sant attention d'incorporer dans l'échantillon, de la matière
10 ml d'eau (voir 10.2).
grasse ou d'autres constituants adhérants à la paroi ou aux
extrémités du premier récipient. Enfin, transvaser le produit
aussi complètement que possible dans le second récipient. Fer- 8.4 Préparation du récipient de récupération de
mer ce récipient. la matière grasse
Si nécessaire, conditionner le récipient qui n'a pas été ouvert Sécher le récipient (6.9) contenant quelques régulateurs d'ébul-
dans le bain d'eau (6.51, réglé entre 40 et 60 OC. Retirer et (6.10) pendant 1 h dans l'étuve (6.4) réglée à 102 $: 2 OC
lition
secouer le récipient vigoureusement toutes les 15 min. Au bout (voir note 1).
3
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IS0 8381 : 1987 (FI
de fermeture réhumidifié (par trempage dans l’eau), et agiter
Laisser refroidir le récipient (protégé de la poussière) à la tem-
doucement la fiole pendant 30 s comme décrit en 8.5.5.
pérature de la salle des balances [récipients en verre pendant au
moins 1 h, capsules métalliques pendant au moins 0,5 h (voir
note 211. 8.5.7 Centrifuger la fiole bouchée pendant 1 à 5 min à une fré-
quence de rotation de 500 à 600 min-I (voir 6.2). Si l’on ne dis-
Placer le récipient sur la balance à l‘aide des pinces (6.13) (pour pose pas de centrifugeuse, laisser la fiole bouchée reposer sur
éviter, en particulier, des variations de température), et peser à le support (6.7) pendant au moins 30 min, jusqu‘à ce que la
0,l mg près. couche surnageante soit claire et nettement séparée de la cou-
che aqueuse. Si nécessaire, refroidir la fiole sous l‘eau cou-
NOTES rante.
1 Les régulateurs d’ébullition sont nécessaires pour permettre une
8.5.8 Enlever avec précaution le bouchon en liège ou le dispo-
ébullition modérée pendant l‘élimination du solvant, spécialement dans
le cas des récipients en verre; leur utilisation est facultative dans le cas
sitif de fermeture et le rincer, ainsi que l‘intérieur du col de la
des capsules métalliques.
fiole, avec un peu de mélange de solvants, de façon que les
liquides de rinçage coulent dans la fiole ou le récipient préparé
2 Le récipient ne doit pas être placé dans un dessiccateur, afin d‘évi-
pour la récupération de la matière grasse.
ter un refroidissement insuffisant ou des temps de refroidissement
excessifs.
Si l’interface se situe au-dessous du fond du col de la fiole, le
faire monter à ce niveau en ajoutant doucement de l’eau par le
8.5 Détermination côté de la fiole (voir figure I), afin de faciliter la décantation du
solvant. .
8.5.1 Ajouter à la prise d‘essai, si nécessaire, de l‘eau à
NOTE - Aux figures 1 et 2, l’un des trois types de fioles spécifiées
65 f 5 OC, pour obtenir un volume total de 10 à 11 ml, et de
I’ISO 3889 a été choisi, mais aucune préférence n‘est donnée à ce
dans
façon à entraîner la prise d’essai dans le bulbe étroit de la fiole.
type.
Secouer soigneusement en réchauffant légèrement dans un
(6.5) réglé à 4-50 OC, jusqu’à ce que le produit soit
bain d’eau
8.5.9 En tenant la fiole d’extraction par le bulbe étroit, décan-
complètement dispersé. Refroidir sous l’eau courante.
ter avec soin le plus possible de la couche surnageante dans le
récipient préparé, destiné à la récupération de la matière grasse
8.5.2 Ajouter 1.5 à 2 ml de la solution d’hydroxyde d‘ammo- (voir 8.41, contenant quelques régulateurs d‘ébullition (6. IO)
nium (5.1) ou un volume équivalent d‘une solution plus concen- dans le cas des fioles (facultatif avec les capsules métalliques),
en évitant de décanter une partie quelconque de la couche
trée (voir la note en 5.1). Mélanger vigoureusement avec la
prise d’essai dispersée dans le bulbe étroit de la fiole. Après aqueuse (voir figure 2).
addition de l‘hydroxyde d’ammonium, continuer la détermina-
tion sans attendre. 8.5.10 Rincer l’extérieur du col de la fiole d‘extraction avec un
peu de mélange de solvants, en recueillant les liquides de rin-
çage dans le récipient de récupération de la matière grasse et en
8.5.3 Chauffer la fiole dans le bain d‘eau (6.5) à 65 f 5 OC
le mélange de solvants ne soit pas projeté sur
prenant soin que
pendant 15 à 20 min, en agitant de temps en temps (facultatif
l‘extérieur de la fiole d’extraction.
dans le cas de produits liquides), puis laisser refroidir à la tem-
pérature du laboratoire.
Si on le désire, les solvants ou une partie des solvants peuvent
être éliminés du récipient, par distillation ou évaporation,
8.5.4 Ajouter 10 ml d’éthanol (5.2). Mélanger doucement
comme décrit en 8.5.14.
mais complètement le contenu de la fiole en lui imprimant un
mouvement de va-et-vient entre les deux bulbes; éviter d’ame-
8.5.11 Ajouter 5 ml d’éthanol (5.2) aux contenus de la fiole
ner le liquide trop près du col de la fiole. Ajouter, si on le désire,
d’extraction en se servant de l’éthanol pour rincer l’intérieur du
2 gouttes de solution de rouge Congo (5.3).
col de la fiole et mélanger comme décrit en 8.5.4.
8.5.5 Ajouter 25 ml d’oxyde diéthylique (5.41, boucher la fiole
8.5.12 Effectuer une secqnde extraction (sans addition
avec un bouchon en liège (voir 6.
...
Questions, Comments and Discussion
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