ISO 6611:1992
(Main)Milk and milk products — Enumeration of colony-forming units of yeasts and/or moulds — Colony-count technique at 25 degrees C
Milk and milk products — Enumeration of colony-forming units of yeasts and/or moulds — Colony-count technique at 25 degrees C
Specifies the principle, the diluents and culture medium, the apparatus and glassware, the sampling and procedure, the expression of results, the repeatability and the test report.
Lait et produits laitiers — Dénombrement des unités formant colonie de levures et/ou moisissures — Comptage des colonies à 25 degrés C
General Information
Relations
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Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL
ISO
STANDARD
6611
First edi tion
1992-02-0 1
Milk and milk products - Enumeration of
colony-forming units of yeasts and/or moulds -
Colony-count technique at 25 “C
Lait et produits laitiers
- D6nombrement des uni& formant colonie de
levures etlou moisissures
- Comptage des colonies h 25 “C
Reference number
ISO 6611:1992(E)
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 6611:1992(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide
federation of national Standards bodies (ISO member bodies). The work
of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Esch member body interested in a subject for
which a technical committee has been established has the right to be
represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the
work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are
circulated to the member bodies for voting. Publication as an Inter-
national Standard requires approval by at least 75 % of the member
bodies casting a vote.
International Standard ISO 6611 was prepared by Technical Committee
ISO/TC 34, Agricultural food products, Sub-Committee SC 5, Milk and
milk products, in collaboration with the International Dairy Federation
(IDF) and the Association of Official Analytical Chemists (AOAC), and
will also be published by these organizations.
Annex A of this International Standard is for information only.
0 ISO 1992
All rights reserved. No part of this publication may be reproduced or utilized in any form
or by any means, electronie or mechanical, including photocopying and microfilm, without
Permission in writing from the publisher.
International Organization for Standardfzation
Case Postale 56 l CH-1214 Geneve 20 l Switzerland
Printed fn Switzerland
ii
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ISO 6611:1992(E)
INTERNATIONAL STANDARD
- Enumeration of colony-forming units
Milk and milk products
of yeasts andlor moulds - Colony-count technique at 25 “C
ISO 72183985, Microbiology - General guidance for
1 Scope
microbiological examinations.
This International Standard specifies a method for
ISO 82613989, Milk and milk products - Preparation
the detection and enumeration of colony-forming
of test samples and dilutions for microbiological ex-
units (CFU) of viable yeasts and/or moulds in milk
amina tion.
and milk products by means of the colony-count
technique at 25 “C.
3 Definition
The method is applicable to
For the purposes of this International Standard, the
-
milk, liquid milk products,
following definition applies.
- dried milk, dried sweet whey, dried buttermilk,
3.1 yeasts and moulds: Micro-organisms which at
lactose,
25 “C form colonies in a selective medium under the
- conditions specified in this International Standard.
cheese,
- acid casein, lactic casein, rennet casein,
4 Principle
-
caseinate, acid whey powder,
4.1 Preparation of poured plates using a specified
- butter,
selective culture medium and a specified quantity
of the test Sample if the initial product is liquid, or
- frozen milk products (including edible ices),
of an initial Suspension in the case of other products.
Preparation of other plates, under the Same condi-
- custard, desserts, fermented milk and cream.
tions, using decimal dilutions of the test Sample or
NOTE 1 This method is not suitable for a large number
of the initial Suspension.
of thermolabile yeasts (in fresh cheese). In such cases the
agar-surface-plating method is preferred.
4.2 Aerobic incubation of the plates at 25 “C for
5 days.
4.3 Calculation of the number of colony-forming
2 Normative references
units (CFU) of yeasts and/or moulds per gram or per
millilitre of product from the number of colonies ob-
The following Standards contain provisions which,
tained on plates Chosen at dilution levels so as to
through reference in this text, constitute provisions
give a significant result.
of this International Standard. At the time of publi-
cation, the editions indicated were valid. All stan-
dards are subject to revision, and Parties to
5 Diluents and culture medium
agreements based on this International Standard
are encouraged to investigate the possibility of ap-
plying the most recent editions of the Standards in-
5.1 General
dicated below. Members of IEC and ISO maintain
For general guidance, see ISO 7218.
registers of currently valid International Standards.
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ISO 6611:1992(E)
5.6.3 Complete medium
5.2 Basic materiais
See ISO 8261.
5.6.3.1 Components
,
5.3 Diiuents for general use r
10 ml
Oxytetracycline hydrochloride
See ISO 8261.
90 ml
Basic medium
5.4 Diluents for special purposes
5.6.3.2 Preparation
See ISO 8261.
Cool the sterilized basic medium (5.6.1) to 45 “C.
5.5 Distribution, sterilization and storage of diluents
Just before use, bring the oxytetracycline Solution
(5.6.2) to 45 OC and add 10 ml of this Solution
See ISO 8261.
aseptically to 90 ml of the basic medium.
extractldextrose/oxytetracycline/agar
5.6 Yeast
5.7 Yeast extract/dextrose/chloramphenicol/agar
medium
medium
5.6.1 Basic medium 5.7.1 Components
56.1 .l Components
Yeast extract powder 590 g
Dextrose (C,H,,O,) 2090 g
Yeast extract powder 590 g
Chloramphenicol (C,,H,,CI,N,O,) 0,l g 1)
Dextrose (C,H120G) 2090 g
12 g to 15 g 2)
Agar
10 g to 15 g 1)
Agar
1 000 ml
Water
900 ml
Water
1) In Order to obtain a final concentration of
1) According to the gel strength of the agar. 100 pg/ml of medium.
2) According to the gel strength of the agar.
5.6.1.2 Preparation
57.2 Preparation
Dissolve the components or dehydrated complete
medium in the water by heating if necessary.
Dissolve the components in the water by heating, if
necessaty.
Adjust the pH, if necessary, so that after sterilization
it is 6,6 at 25 ‘C.
Adjust the pH, if necessary, so that after sterilization
it is 6,6 at 25 “C.
Sterilize in an autoclave (6.1) at 121 OC + 1 OC for
15 min.
Dispense the agar medium into suitable Containers
(6.8).
5.6.2 Oxytetracycline solution
Sterilize in the autoclave (6.1) at 121 “C + - 1 “C for
15 min.
5.6.2.1 Components
6 Apparatus and glassware
Oxytetracycline hydrochloride
CAUTION - Sterilize all apparatus that will come
50 mg
u2-Mw, ,)-HC1
into contact with the test Sample, the diluents, the
50 mg
Water
diilutions or the culture medium in accordance with
ISO 8261:1989, 6.1.
NOTE 2 Disposable apparatus is an acceptable alterna-
5.6.2.2 Preparation
tive to reusable glassware if it has suitable specifkations.
Dissolve the oxytetracycline in the water. The sol-
Usual microbiological laboratory equipment, the ap-
ution shall be freshly prepared before use. Sterilize
paratus required for the preparation of test samples
the Solution by means of filtration.
2
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ISO 6611:1992(E)
and dilutions as specified in ISO 8261 and, in partic- CAUTION - Usual aseptic precautions shall be
ular, the following. taken. The operations described in 8.1 and 8.2 shall
not be carried out in sunlight.
6.1 Apparatus for dry sterilization (oven) or wet
8.1 Preparation of the test Sample and
sterilization (autoclave)
primary dflution
See ISO 7218.
See ISO 8261.
6.2 Incubator, capable of operating at
25 ‘C + 1 OC. 8.2 Further decimal dilutions
-
See ISO 8261.
6.3 Petri dishes, of 90 mm to 100 mm diameter.
8.3 Duration of the procedure
6.4 Graduated pipettes, plugged with cotton wool,
cali brated to deliver 1 ml + 0,02 ml, or
See ISO 8261:1989, 8.3.
IO ml + 0,2 ml or 11 ml - + 0,2 mlY
-
8.4 Inoculation and incubation
6.5 Water-bath, capable of operating at
45 “C + 1 “C.
-
8.4.1 Take two sterile Petri dishes (6.3). Transfer to
each dish,
...
NORME ISO
INTERNATIONALE
6611
Première édition
1992-02-O 1
Lait et produits laitiers - Dénombrement des
unités formant colonie de levures et/ou
moisissures - Comptage des colonies à 25 “C
Milk and milk products - Enumeration of colony-forming units of yeasts
andlor moulds - Colony-Count technique at 25 “C
Numéro de référence
ISO 6611:1992(F)
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 6611:1992(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres
de I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre inté-
ressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique créé
à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux tra-
vaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique
internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotech-
nique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techni-
ques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins
des comités membres votants.
La Norme internationale ISO 6611 a été élaborée par le comité techni-
que ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comité SC 5, Lait
et produits laitiers, en collaboration avec la Fédération internationale
de laiterie (FIL) et l’Association des chimistes analytiques officiels
(AOAC) et sera également publiée par ces organisations.
L’annexe A de la présente Norme internationale est donnée uniquement
à titre d’information.
0 ISO 1992
Droits de reproduction réservés. Aucune partie de cette publication ne peut être repro-
duite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou
mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit de l’éditeur.
Organisation internationale de normalisation
Case Postale 56 l CH-121 1 Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse
ii
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NORME INTERNATIONALE ISO 6611:1992(F)
Lait et produits laitiers - Dénombrement des unités formant
colonie de levures etlou moisissures - Comptage des
colonies à 25 “C
Toute norme est sujette à révision et les parties
1 Domaine d’application
prenantes des accords fondés sur la présente
Norme internationale sont invitées à rechercher la
La présente Norme internationale prescrit une mé-
possibilité d’appliquer les éditions les plus récentes
thode de dénombrement des unités formant colo-
des normes indiquées ci-après. Les membres de la
nies (UFC) de levures et/ou moissisures dans le lait
CEI et de I’ISO possèdent le registre des Normes
et les produits laitiers par la technique de comptage
internationales en vigueur à un moment donné.
des colonies à 25 “C.
ISO 7218: 1985, Microbiologie - Directives générales
La méthode est applicable aux produits suivants:
pour les examens microbiologiques.
-
lait, produits laitiers liquides,
ISO 8261: 1989, Lait et produits laitiers - Préparation
des échantillons pour essai et des dilutions en vue
-
lait sec, poudre de lactosérum non acide, ba-
de l’examen microbiologique.
beurre en poudre, lactose,
- fromages,
3 Définition
lactique, caséine-
- caséine acide, caséine
présure, Pour les besoins de la présente Norme internatio-
nale, la définition suivante s’applique.
-
caséinates, poudre de lactosérum acide,
3.1 levures et moisissures: Micro-organismes qui,
- beurre,
à 25 OC, forment des colonies dans un milieu sélectif
selon la méthode spécifiée dans la présente Norme
-
produits laitiers congelés (y compris les gl aces
internationale.
de consommation),
- flans, desserts, laits fermentés, crème.
4 Principe
NOTE 1 La méthode n’est pas applicable à la dét ermi-
nation d’un très grand nombre de levures thermolabiles
4.1 Ensemencement en profondeur d’un milieu de
(dans le fromage frais). Dans ce cas, il est préférable
culture sélectif défini, coulé dans des boîtes de Petri
d’utiliser la technique d’ensemencement en surface.
avec une quantité spécifiée de l’échantillon pour
essai, si le produit à examiner est liquide, ou une
quantité déterminée de la suspension mère, dans le
cas d’autres produits.
2 Références normatives
Préparation d’autres boîtes dans les mêmes condi-
tions, en utilisant des dilutions décimales de
Les normes suivantes contiennent des dispositions
l’échantillon pour essai ou de la suspension mère.
qui, par suite de la référence qui en est faite,
constituent des dispositions valables pour la pré-
sente Norme internationale. Au moment de la pu- 4.2 Incubation des boîtes en aérobiose à 25 “C
pendant 5 jours.
blication, les éditions indiquées étaient en vigueur.
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 6611:1992(F)
4.3 Calcul du nombre d’unités formant colonie 56.2 Solution à I’oxytétracycllne
(UFC) et/ou moisissures par gramme ou par millili-
tre d’échantillon en se basant sur le nombre de co- 5.6.2.1 Composants
lonies obtenues sur des boîtes choisies à des
niveaux de dilution permettant d’obtenir un résultat
significatif.
Chlorhydrate d’oxytétracycline
50 mg
(w’,*N,0, ,)*HC’
50 mg
Eau
5 Diluants et milieu de culture
5.1 Généralités
5.6.2.2 Préparation
Pour les pratiques courantes de laboratoire, voir
Dissoudre I’oxytétracycline dans l’eau. La solution
‘SO 7218.
doit être préparée juste avant l’emploi. Stériliser la
solution par filtration.
5.2 Composants de base
5.6.3 Milieu complet
Voir ISO 8261.
5.6.3.1 Composants
5.3 Diluants d’emploi général
Voir ISO 8261.
Chlorhydrate d’oxytétracycline 10 ml
Milieu de base 90 ml
5.4 Dilua& pour les besoins particuliers
Voir ISO 8261.
5.6.3.2 Préparation
5.5 Répartition, stérilisation et conservation des di-
Refroidir le milieu de base stérilisé (5.6-l) à 45 “C.
luants
Juste avant l’emploi, amener la solution
d’oxytétracycline (5.6.2) à 45 “C et ajouter 10 ml de
Voir ISO 8261.
cette solution aseptiquement à 90 ml du milieu de
base.
l’extrait de levure, dextrose,
5.6 Milieu à
oxytétracycline et agar-agar
5.7 Gélose à l’extrait de levure, au glucose et au
chloramphénicol
5.6.1 Milieu de base
5.7.1 Composants
5.6.1 .l Composants
Extrait de levure
590 g
Extrait de levure en poudre 590 g
Glucose (C,H,,O,)
2090 g
Glucose (C,H,,O,) 20,o g
Chloramphénicol (C,,H,2C12N,0,) 0,l g ‘1
10 g à 15 g 1)
Agar-agar
Agar-agar 12 g à 15 g 2)
900 ml
Eau
Eau 1 000 ml
1) Selon le pouvoir gélifiant de I’agar-agar.
1) En vue d’obtenir une concentration finale de
100 pg/ml du milieu.
2) Selon le pouvoir gélifiant de I’agar-agar.
5.6.1.2 Préparation
Dissoudre les composants du milieu de base (5.6)
5.7.2 Préparation
ou du milieu déshydraté en chauffant, si nécessaire.
Dissoudre les composants dans l’eau en chauffant,
Si nécessaire, ajuster le pH de sorte qu’après stéri-
si nécessaire.
lisation, il soit de 6,6 à 25 “C.
Si nécessaire, ajuster le pH de sorte qu’après stéri-
Stériliser à l’autoclave (6.1) à 121 “C + 0,l “C
-
lisation, il soit de 6,6 à 25 “C.
pendant 15 min.
2
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ISO 6611:1992(F)
l’aide d’un scalpel ou d’un couteau stérile, avant de pro-
Répartir le milieu gélosé dans des récipients de ca-
céder à l’échantillonnage.
pacité appropriée (6.8).
Stériliser à l’autoclave (6.1) à 121 “C + 1 “C pen-
-
8 Mode opératoire
dant 15 min.
fidéli té de la
NOTE 5 Afin d’améliorer la méthode, la
préparation des dilutions de vrait etre soi gneusement
6 Appareillage et verrerie
normalisée. facteurs influant sur la fidélité sont les
suivants:
AlTENTiON - Le matériel destiné à entrer en
contact avec l’échantillon pour essai, le diluant, les
-
type d’appareillage pour l’homogénéisation;
dilutions ou le milieu de culture, doit être stérilisé
conformément à ISO 8261:1989, 6.1.
- temps d’homogénéisation;
NOTE 2 Le matériel à usage unique est acceptable au
-
même titre que la verrerie réutilisable, si ses spécifîca-
Cons sont adéquates.
-
temps de décantation des grosses particules;
Matériel courant de laboratoire de microbiologie,
- temps d’agi tation lors de la préparation des dilutions
matériel nécessaire à la préparation des échan-
décimales.
tillons pour essais et aux dilutions, comme spécifié
dans I’ISO 8261, et notamment
ATTENTION - Prendre les précautions courantes
d’asepsie. Ne pas effectuer les opérations décrites
6.1 Appareils pour la stérlikatlon en chaleur sèche en 8.1 et 8.2 à la lumière directe du soleil.
(four) ou en chaleur humide (autoclave)
8.1 Préparation de l’échantillon pour essai et
Voir ISO 72
...
NORME ISO
INTERNATIONALE
6611
Première édition
1992-02-O 1
Lait et produits laitiers - Dénombrement des
unités formant colonie de levures et/ou
moisissures - Comptage des colonies à 25 “C
Milk and milk products - Enumeration of colony-forming units of yeasts
andlor moulds - Colony-Count technique at 25 “C
Numéro de référence
ISO 6611:1992(F)
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ISO 6611:1992(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres
de I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre inté-
ressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique créé
à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux tra-
vaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique
internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotech-
nique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techni-
ques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins
des comités membres votants.
La Norme internationale ISO 6611 a été élaborée par le comité techni-
que ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comité SC 5, Lait
et produits laitiers, en collaboration avec la Fédération internationale
de laiterie (FIL) et l’Association des chimistes analytiques officiels
(AOAC) et sera également publiée par ces organisations.
L’annexe A de la présente Norme internationale est donnée uniquement
à titre d’information.
0 ISO 1992
Droits de reproduction réservés. Aucune partie de cette publication ne peut être repro-
duite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou
mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit de l’éditeur.
Organisation internationale de normalisation
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Imprimé en Suisse
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NORME INTERNATIONALE ISO 6611:1992(F)
Lait et produits laitiers - Dénombrement des unités formant
colonie de levures etlou moisissures - Comptage des
colonies à 25 “C
Toute norme est sujette à révision et les parties
1 Domaine d’application
prenantes des accords fondés sur la présente
Norme internationale sont invitées à rechercher la
La présente Norme internationale prescrit une mé-
possibilité d’appliquer les éditions les plus récentes
thode de dénombrement des unités formant colo-
des normes indiquées ci-après. Les membres de la
nies (UFC) de levures et/ou moissisures dans le lait
CEI et de I’ISO possèdent le registre des Normes
et les produits laitiers par la technique de comptage
internationales en vigueur à un moment donné.
des colonies à 25 “C.
ISO 7218: 1985, Microbiologie - Directives générales
La méthode est applicable aux produits suivants:
pour les examens microbiologiques.
-
lait, produits laitiers liquides,
ISO 8261: 1989, Lait et produits laitiers - Préparation
des échantillons pour essai et des dilutions en vue
-
lait sec, poudre de lactosérum non acide, ba-
de l’examen microbiologique.
beurre en poudre, lactose,
- fromages,
3 Définition
lactique, caséine-
- caséine acide, caséine
présure, Pour les besoins de la présente Norme internatio-
nale, la définition suivante s’applique.
-
caséinates, poudre de lactosérum acide,
3.1 levures et moisissures: Micro-organismes qui,
- beurre,
à 25 OC, forment des colonies dans un milieu sélectif
selon la méthode spécifiée dans la présente Norme
-
produits laitiers congelés (y compris les gl aces
internationale.
de consommation),
- flans, desserts, laits fermentés, crème.
4 Principe
NOTE 1 La méthode n’est pas applicable à la dét ermi-
nation d’un très grand nombre de levures thermolabiles
4.1 Ensemencement en profondeur d’un milieu de
(dans le fromage frais). Dans ce cas, il est préférable
culture sélectif défini, coulé dans des boîtes de Petri
d’utiliser la technique d’ensemencement en surface.
avec une quantité spécifiée de l’échantillon pour
essai, si le produit à examiner est liquide, ou une
quantité déterminée de la suspension mère, dans le
cas d’autres produits.
2 Références normatives
Préparation d’autres boîtes dans les mêmes condi-
tions, en utilisant des dilutions décimales de
Les normes suivantes contiennent des dispositions
l’échantillon pour essai ou de la suspension mère.
qui, par suite de la référence qui en est faite,
constituent des dispositions valables pour la pré-
sente Norme internationale. Au moment de la pu- 4.2 Incubation des boîtes en aérobiose à 25 “C
pendant 5 jours.
blication, les éditions indiquées étaient en vigueur.
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4.3 Calcul du nombre d’unités formant colonie 56.2 Solution à I’oxytétracycllne
(UFC) et/ou moisissures par gramme ou par millili-
tre d’échantillon en se basant sur le nombre de co- 5.6.2.1 Composants
lonies obtenues sur des boîtes choisies à des
niveaux de dilution permettant d’obtenir un résultat
significatif.
Chlorhydrate d’oxytétracycline
50 mg
(w’,*N,0, ,)*HC’
50 mg
Eau
5 Diluants et milieu de culture
5.1 Généralités
5.6.2.2 Préparation
Pour les pratiques courantes de laboratoire, voir
Dissoudre I’oxytétracycline dans l’eau. La solution
‘SO 7218.
doit être préparée juste avant l’emploi. Stériliser la
solution par filtration.
5.2 Composants de base
5.6.3 Milieu complet
Voir ISO 8261.
5.6.3.1 Composants
5.3 Diluants d’emploi général
Voir ISO 8261.
Chlorhydrate d’oxytétracycline 10 ml
Milieu de base 90 ml
5.4 Dilua& pour les besoins particuliers
Voir ISO 8261.
5.6.3.2 Préparation
5.5 Répartition, stérilisation et conservation des di-
Refroidir le milieu de base stérilisé (5.6-l) à 45 “C.
luants
Juste avant l’emploi, amener la solution
d’oxytétracycline (5.6.2) à 45 “C et ajouter 10 ml de
Voir ISO 8261.
cette solution aseptiquement à 90 ml du milieu de
base.
l’extrait de levure, dextrose,
5.6 Milieu à
oxytétracycline et agar-agar
5.7 Gélose à l’extrait de levure, au glucose et au
chloramphénicol
5.6.1 Milieu de base
5.7.1 Composants
5.6.1 .l Composants
Extrait de levure
590 g
Extrait de levure en poudre 590 g
Glucose (C,H,,O,)
2090 g
Glucose (C,H,,O,) 20,o g
Chloramphénicol (C,,H,2C12N,0,) 0,l g ‘1
10 g à 15 g 1)
Agar-agar
Agar-agar 12 g à 15 g 2)
900 ml
Eau
Eau 1 000 ml
1) Selon le pouvoir gélifiant de I’agar-agar.
1) En vue d’obtenir une concentration finale de
100 pg/ml du milieu.
2) Selon le pouvoir gélifiant de I’agar-agar.
5.6.1.2 Préparation
Dissoudre les composants du milieu de base (5.6)
5.7.2 Préparation
ou du milieu déshydraté en chauffant, si nécessaire.
Dissoudre les composants dans l’eau en chauffant,
Si nécessaire, ajuster le pH de sorte qu’après stéri-
si nécessaire.
lisation, il soit de 6,6 à 25 “C.
Si nécessaire, ajuster le pH de sorte qu’après stéri-
Stériliser à l’autoclave (6.1) à 121 “C + 0,l “C
-
lisation, il soit de 6,6 à 25 “C.
pendant 15 min.
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ISO 6611:1992(F)
l’aide d’un scalpel ou d’un couteau stérile, avant de pro-
Répartir le milieu gélosé dans des récipients de ca-
céder à l’échantillonnage.
pacité appropriée (6.8).
Stériliser à l’autoclave (6.1) à 121 “C + 1 “C pen-
-
8 Mode opératoire
dant 15 min.
fidéli té de la
NOTE 5 Afin d’améliorer la méthode, la
préparation des dilutions de vrait etre soi gneusement
6 Appareillage et verrerie
normalisée. facteurs influant sur la fidélité sont les
suivants:
AlTENTiON - Le matériel destiné à entrer en
contact avec l’échantillon pour essai, le diluant, les
-
type d’appareillage pour l’homogénéisation;
dilutions ou le milieu de culture, doit être stérilisé
conformément à ISO 8261:1989, 6.1.
- temps d’homogénéisation;
NOTE 2 Le matériel à usage unique est acceptable au
-
même titre que la verrerie réutilisable, si ses spécifîca-
Cons sont adéquates.
-
temps de décantation des grosses particules;
Matériel courant de laboratoire de microbiologie,
- temps d’agi tation lors de la préparation des dilutions
matériel nécessaire à la préparation des échan-
décimales.
tillons pour essais et aux dilutions, comme spécifié
dans I’ISO 8261, et notamment
ATTENTION - Prendre les précautions courantes
d’asepsie. Ne pas effectuer les opérations décrites
6.1 Appareils pour la stérlikatlon en chaleur sèche en 8.1 et 8.2 à la lumière directe du soleil.
(four) ou en chaleur humide (autoclave)
8.1 Préparation de l’échantillon pour essai et
Voir ISO 72
...
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