ISO/TS 27265:2009
(Main)Dried milk — Enumeration of the specially thermoresistant spores of thermophilic bacteria
Dried milk — Enumeration of the specially thermoresistant spores of thermophilic bacteria
ISO/TS 27265|IDF/RM 228:2009 specifies a method for the enumeration of colony-forming units (CFU) of specially thermoresistant spores of thermophilic bacteria in dried milk products by using a colony-count technique at 55 °C after heating the sample at 106 °C. The applicability of ISO/TS 27265|IDF/RM 228:2009 is limited to dried whole milk, skim milk, and buttermilk products that are destined to be recombined and used in the manufacture of sterilized (e.g. UHT or retort-treated) milk products.
Lait sec — Dénombrement des spores spécialement thermorésistantes des bactéries thermophiles
General Information
- Status
- Withdrawn
- Publication Date
- 27-Jul-2009
- Technical Committee
- ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
- Drafting Committee
- ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
- Current Stage
- 9599 - Withdrawal of International Standard
- Start Date
- 14-May-2026
- Completion Date
- 16-May-2026
Relations
- Effective Date
- 06-Jun-2022
Overview
ISO/TS 27265:2009 (IDF/RM 228:2009) specifies a microbiological colony-count method for the enumeration of specially thermoresistant spores of thermophilic bacteria in dried milk products. The method uses a heat treatment of 106 °C for 30 minutes followed by plating and incubation at 55 °C for 48 hours to count colony-forming units (CFU). Its scope is limited to dried whole milk, skim milk and buttermilk powders destined to be recombined for manufacture of sterilized products (e.g., UHT or retort-treated milk).
Key topics and requirements
- Target organisms: spores that survive 106 °C for 30 min and form colonies aerobically at 55 °C.
- Sample preparation: primary dilution prepared per ISO 6887-5; representative sampling recommended (see ISO 707/IDF 50).
- Heat treatment: samples heated in a pressure vessel or small autoclave; pilot tube monitoring required; time-to-temperature must be ≤ 6 min to reach 105.5 °C, then hold at 106 °C ± 0.5 °C for 30 min.
- Culture medium: plate count skim milk agar (PCSM) with 0.2% starch and bromocresol purple indicator to aid colony visibility.
- Plating & incubation: pour plates using specified volumes and dilutions; incubate aerobically at 55 °C ± 1 °C for 48 h ± 2 h; count all colonies (including pinpoint) and record CFU/g following ISO 7218 calculation guidance.
- Apparatus & controls: details provided for incubator, water baths, digital thermometer, pressure vessel modification and sterility controls; control plates required.
- Interpretation rules: handling of spreading colonies, replicate plate counting (three plates for undiluted), and documentation of counts, including counts outside statistical range.
Applications
- Quality control of dried milk powders intended for recombination into sterilized milk products (UHT, retort).
- Microbiological assurance for ingredient suppliers and dairy processors to assess risk of thermoresistant spore survival through commercial sterilization.
- Regulatory testing and validation of supplier specifications where thermophilic spore loads are a critical parameter.
Who should use this standard
- Dairy laboratories and QA/QC personnel performing microbiological testing on milk powders.
- Ingredient manufacturers supplying powdered milk for sterilized milk production.
- Food safety auditors and regulatory bodies assessing compliance for sterilized dairy product supply chains.
Related standards
- ISO 7218 - General microbiology requirements and guidance for examinations
- ISO 6887-5 - Preparation of test samples, dilutions for milk and milk products
- ISO/TS 11133-1 - Culture media preparation and quality assurance
- ISO 707 / IDF 50 - Recommended sampling of milk and milk products
Keywords: ISO/TS 27265:2009, dried milk, thermoresistant spores, thermophilic bacteria, enumeration, CFU, UHT, plate count skim milk agar.
Buy Documents
ISO/TS 27265:2009 - Dried milk — Enumeration of the specially thermoresistant spores of thermophilic bacteria Released:7/28/2009
ISO/TS 27265:2009 - Dried milk — Enumeration of the specially thermoresistant spores of thermophilic bacteria Released:4/24/2012
Get Certified
Connect with accredited certification bodies for this standard

BSI Group
BSI (British Standards Institution) is the business standards company that helps organizations make excellence a habit.

Bureau Veritas
Bureau Veritas is a world leader in laboratory testing, inspection and certification services.

DNV
DNV is an independent assurance and risk management provider.
Sponsored listings
Frequently Asked Questions
ISO/TS 27265:2009 is a technical specification published by the International Organization for Standardization (ISO). Its full title is "Dried milk — Enumeration of the specially thermoresistant spores of thermophilic bacteria". This standard covers: ISO/TS 27265|IDF/RM 228:2009 specifies a method for the enumeration of colony-forming units (CFU) of specially thermoresistant spores of thermophilic bacteria in dried milk products by using a colony-count technique at 55 °C after heating the sample at 106 °C. The applicability of ISO/TS 27265|IDF/RM 228:2009 is limited to dried whole milk, skim milk, and buttermilk products that are destined to be recombined and used in the manufacture of sterilized (e.g. UHT or retort-treated) milk products.
ISO/TS 27265|IDF/RM 228:2009 specifies a method for the enumeration of colony-forming units (CFU) of specially thermoresistant spores of thermophilic bacteria in dried milk products by using a colony-count technique at 55 °C after heating the sample at 106 °C. The applicability of ISO/TS 27265|IDF/RM 228:2009 is limited to dried whole milk, skim milk, and buttermilk products that are destined to be recombined and used in the manufacture of sterilized (e.g. UHT or retort-treated) milk products.
ISO/TS 27265:2009 is classified under the following ICS (International Classification for Standards) categories: 67.100.10 - Milk and processed milk products. The ICS classification helps identify the subject area and facilitates finding related standards.
ISO/TS 27265:2009 has the following relationships with other standards: It is inter standard links to ISO/TS 27265:2026. Understanding these relationships helps ensure you are using the most current and applicable version of the standard.
ISO/TS 27265:2009 is available in PDF format for immediate download after purchase. The document can be added to your cart and obtained through the secure checkout process. Digital delivery ensures instant access to the complete standard document.
Standards Content (Sample)
TECHNICAL ISO/TS
SPECIFICATION 27265
IDF/RM
First edition
2009-08-01
Dried milk — Enumeration of the
specially thermoresistant spores of
thermophilic bacteria
Lait sec — Dénombrement des spores spécialement thermorésistantes
des bactéries thermophiles
Reference numbers
IDF/RM 228:2009(E)
©
ISO and IDF 2009
IDF/RM 228:2009(E)
PDF disclaimer
This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but
shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In
downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. Neither the ISO Central
Secretariat nor the IDF accepts any liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.
Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation
parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies
and IDF national committees. In the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the ISO Central Secretariat at the
address given below.
© ISO and IDF 2009
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO or IDF at the respective
address below.
ISO copyright office International Dairy Federation
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20 Diamant Building • Boulevard Auguste Reyers 80 • B-1030 Brussels
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail copyright@iso.org E-mail info@fil-idf.org
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Published in Switzerland
ii © ISO and IDF 2009 – All rights reserved
IDF/RM 228:2009(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has
been established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental
and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
In other circumstances, particularly when there is an urgent market requirement for such documents, a
technical committee may decide to publish other types of document:
— an ISO Publicly Available Specification (ISO/PAS) represents an agreement between technical experts in
an ISO working group and is accepted for publication if it is approved by more than 50 % of the members
of the parent committee casting a vote;
— an ISO Technical Specification (ISO/TS) represents an agreement between the members of a technical
committee and is accepted for publication if it is approved by 2/3 of the members of the committee
casting a vote.
An ISO/PAS or ISO/TS is reviewed after three years in order to decide whether it will be confirmed for a
further three years, revised to become an International Standard, or withdrawn. If the ISO/PAS or ISO/TS is
confirmed, it is reviewed again after a further three years, at which time it must either be transformed into an
International Standard or be withdrawn.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO/TS 27265⎪IDF/RM 228 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee
SC 5, Milk and milk products, and the International Dairy Federation (IDF). It is being published jointly by ISO
and IDF.
IDF/RM 228:2009(E)
Foreword
IDF (the International Dairy Federation) is a non-profit organization representing the dairy sector worldwide.
IDF membership comprises National Committees in every member country as well as regional dairy
associations having signed a formal agreement on cooperation with IDF. All members of IDF have the right to
be represented on the IDF Standing Committees carrying out the technical work. IDF collaborates with ISO in
the development of standard methods of analysis and sampling for milk and milk products.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the Action Teams and Standing Committees are circulated to the National Committees for voting.
Publication as an International Standard requires approval by at least 50 % of the IDF National Committees
casting a vote.
In other circumstances, particularly when there is an urgent market requirement for such documents, a
Standing Committee may decide to publish an other type of normative document which is called by IDF:
Reviewed method. Such a method represents an agreement between the members of a Standing Committee
and is accepted for publication if it is approved by at least 50 % of the committee members casting a vote.
A Reviewed method is equal to an ISO/PAS or ISO/TS and will, therefore, also be published jointly under ISO
conditions.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. IDF shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO/TS 27265⎪IDF/RM 228 was prepared by the International Dairy Federation (IDF) and Technical
Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5, Milk and milk products. It is being published
jointly by IDF and ISO.
All work was carried out by the Joint ISO-IDF Action Team on Harmonization of the Standing Committee on
Microbiological methods of analysis under the aegis of its project leaders, Ms S. Miller (NZ) and Mr B. Hill
(NZ).
iv © ISO and IDF 2009 – All rights reserved
TECHNICAL SPECIFICATION
IDF/RM 228:2009(E)
Dried milk — Enumeration of the specially thermoresistant
spores of thermophilic bacteria
1 Scope
This Technical Specification specifies a method for the enumeration of colony-forming units (CFU) of specially
thermoresistant spores of thermophilic bacteria in dried milk products by using a colony-count technique at
55 °C after heating the sample at 106 °C.
The applicability of this Technical Specification is limited to dried whole milk, skim milk, and buttermilk
products that are destined to be recombined and used in the manufacture of sterilized (e.g. UHT or retort-
treated) milk products.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 7218, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements and guidance for
microbiological examinations
ISO 6887-5, Microbiology of food and animal feeding stuffs — Preparation test samples, initial suspension and
decimal dilutions for microbiological examination — Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk
1)
products
ISO/TS 11133-1, Microbiology of food and animal feeding stuffs — Guidelines on preparation and production
of culture media — Part 1: General guidelines on quality assurance for the preparation of culture media in the
laboratory
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
specially thermoresistant spores of thermophilic bacteria
bacterial spores surviving a heat treatment of 106 °C for 30 min forming colonies aerobically at 55 °C in a
non-selective medium under the conditions specified in this Technical Specification
1) Supersedes ISO 8261⎪IDF 122.
IDF/RM 228:2009(E)
4 Principle
A specified quantity of an initial suspension of the test sample is heat treated at 106 °C for 30 min.
Poured Petri dishes are prepared using a specified non-selective culture medium and a specified quantity of
the heat-treated initial suspension.
Other dishes may be prepared, under the same conditions, using decimal dilutions of the heat-treated initial
suspension.
The dishes are incubated aerobically at 55 °C for 48 h.
The number of CFU of specially thermoresistant spores of thermophilic bacteria per gram of product is
calculated from the number of colonies on dishes chosen at dilution levels so as to give a significant result.
The specially thermoresistant spores of thermophilic bacteria enumerated by the method have the potential to
survive commercial sterilization processes (e.g. UHT or retort processing).
5 BCP plate count skim milk agar with 0,2 % mass fraction starch
For general guidance, see ISO 7218.
During the analysis, unless otherwise stated, use only reagents of recognized analytical grade and distilled or
demineralized water or water of equivalent purity.
5.1 Bromocresol purple
5.1.1 Components
Bromocresol purple 4 g
Ethanol 95 % volume fraction 100 ml
5.1.2 Preparation
Dissolve the bromocresol purple in the ethanol. Store the solution in a securely stoppered bottle to prevent
evaporation.
5.2 Complete medium
5.2.1 Components
Tryptone 5,0 g
Yeast extract 2,5 g
Glucose monohydrate 1,0 g
a
Skimmed milk powder 1,0 g
b
Agar 8 g to 15 g
c
Starch, soluble 2,0 g
c
Bromocresol purple (5.1) 1 ml
Water 1 000 ml
a
The skimmed milk powder shall be free from inhibitory substances.
b
Depending on the gel strength of the agar.
c
Additional components added to plate count skim milk agar.
2 © ISO and IDF 2009 – All rights reserved
IDF/RM 228:2009(E)
5.2.2 Preparation
Dissolve each component in the water by heating to boiling while stirring frequently until all are completely
dissolved.
Adjust the pH, if necessary, so that after sterilization it is 7,0 ± 0,2 at 25 °C. Sterilize in an autoclave at 121 °C
± 1 °C for 15 min.
The medium may also be prepared from a suitable commercial, dehydrated plate count skim milk agar to
which the additional components are added.
6 Apparatus
Usual microbiological laboratory apparatus, the apparatus required for the preparation of test samples and
dilutions as specified in ISO 7218 and ISO 6887-5 and, in particular the following.
Disposable apparatus is an acceptable alternative to reusable glassware if it has suitable specifications.
6.1 Incubator, capable of being maintained at 55 °C ± 1 °C.
6.2 Water baths, capable of being maintained at temperatures of between 15 °C and 25 °C and at
45 °C ± 1 °C.
6.3 pH-meter, temperature-compensated, capable of being read to ± 0,1 pH units at 25 °C.
6.4 Sample heating equipment, pressure vessel or small autoclave capable of raising the sample
temperature from 100 °C to 105,5 °C in < 6 min, and of maintaining the temperature of a pilot tube at
106 °C ± 0,5 °C throughout the treatment period. The pressure vessel shall be capable of being rapidly cooled
to 100 °C after completion of the heat treatment. Generally that requires this vessel has a steam vent.
Unless already installed, the pressure vessel requires modification (e.g. by attaching a compression fitting with
rubber seals t
...
ТЕХНИЧЕСКИЕ ISO/TS
УСЛОВИЯ 27265
IDF/RM
Первое издание
2009-08-01
Молоко сухое. Подсчет особо
теплостойких спор термофильных
бактерий
Dried milk — Enumeration of the specially thermoresistant spores of the
thermophilic bacteria
Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочные номера
IDF/RM 228:2009(R)
©
ISO и IDF 2009
IDF/RM 228:2009(R)
Отказ от ответственности при работе в PDF
Настоящий файл PDF может содержать интегрированные шрифты. В соответствии с условиями лицензирования, принятыми
фирмой Adobe, этот файл можно распечатать или вывести на экран, но его нельзя изменить, пока не будет получена
лицензия на загрузку интегрированных шрифтов в компьютер, на котором ведется редактирование. В случае загрузки
настоящего файла заинтересованные стороны принимают на себя ответственность за соблюдение лицензионных условий
фирмы Adobe. Ни Центральный секретариат ISO, ни IDF не несут никакой ответственности в этом отношении.
Adobe торговый знак фирмы Adobe Systems Incorporated.
Подробности, относящиеся к программным продуктам, использованным для создания настоящего файла PDF, можно найти в
рубрике General info файла; параметры создания PDF были оптимизированы для печати. Были приняты во внимание все
меры предосторожности с тем, чтобы обеспечить пригодность настоящего файла для использования комитетами-членами
ISO и национальными комитетами IDF. В редких случаях возникновения проблемы, связанной со сказанным выше, просьба
проинформировать Центральный секретариат по адресу, приведенному ниже.
ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ
© ISO и IDF 2009
Все права сохраняются. Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO или IDF по соответствующему адресу, указанному ниже.
ISO copyright office International Dairy Federation
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20 Diamant Building • Boulevard Auguste Reyers 80 • B-1030 Brussels
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail copyright@iso.org E-mail info@fil-idf.org
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO и IDF 2009 – Все права сохраняются
IDF/RM 228:2009(R)
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией
национальных организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных
стандартов обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член,
заинтересованный в деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть
представленным в этом комитете. Международные правительственные и неправительственные
организации, имеющие связи с ISO, также принимают участие в работах. Что касается стандартизации
в области электротехники, ISO работает в тесном сотрудничестве с Международной
электротехнической комиссией (IEC).
Проекты международных стандартов разрабатываются по правилам, указанным в Директивах ISO/IEC,
Часть 2.
Главная задача технических комитетов состоит в разработке международных стандартов. Проекты
международных стандартов, принятые техническими комитетами, рассылаются комитетам-членам на
голосование. Их опубликование в качестве международных стандартов требует одобрения, по
меньшей мере, 75 % комитетов-членов, принимающих участие в голосовании
При других обстоятельствах, особенно когда существует срочная потребность рынка в таких
документах, технический комитет может принять решение о публикации других типов нормативного
документа:
— общедоступные технические условия ISO (ISO/PAS) представляют собой соглашение между
техническими экспертами в рабочей группе ISO и принимаются к публикации после одобрения
более чем 50 % членов основного комитета, участвующих в голосовании;
— технические условия ISO (ISO/TS) представляют собой соглашение между членами технического
комитета и принимаются к публикации после одобрения 2/3 членов комитета, участвующих в
голосовании.
ISO/PAS или ISO/TS пересматриваются каждые три года для принятия решения либо о продлении их
действия на следующие три года, либо о переработке для придания им статуса международного
стандарта, либо о прекращении срока действия. Если принимается решение о продлении действия
ISO/PAS или ISO/TS, они снова пересматриваются через следующие три года и тогда должны быть
или преобразованы в международный стандарт или отменены.
Обращается внимание на то, что некоторые элементы данного документа могут быть объектом
патентных прав. ISO не несет ответственности за идентификацию какого-либо или всех таких
патентных прав.
ISO/TS 27265⎪IDF/RM 228 были разработаны Техническим комитетом ISO/TC 34, Пищевые продукты,
Подкомитетом SC 5, Молоко и молочные продукты, и Международной молочной федерацией (IDF).
Они издаются совместно ISO и IDF.
© ISO и IDF 2009 – Все права сохраняются iii
IDF/RM 228:2009(R)
Предисловие
Международная молочная федерация (IDF) является некоммерческой организацией,
представляющей мировой молочный сектор. Членами IDF являются национальные комитеты в каждой
стране-члене, а также региональные молочные ассоциации, подписавшие официальное соглашение о
сотрудничестве с IDF. Все члены IDF имеют право быть представленными в постоянных комитетах
IDF, выполняющих техническую работу. IDF сотрудничает с ISO в разработке стандартных методов
анализа и отбора проб молока и молочных продуктов.
Главной задачей постоянных комитетов является разработка международных стандартов. Проекты
международных стандартов, принятые рабочими группами и постоянными комитетами рассылаются
национальным комитетам на голосование. Их опубликование в качестве международных стандартов
требует одобрения не менее 50% национальных комитетов, принимающих участие в голосовании.
При других обстоятельствах, особенно когда существует срочная потребность рынка в таких
документах, Постоянный комитет может принять решение о публикации другого типа нормативного
документа, называемого IDF: Пересмотренный метод. Такой метод представляет соглашение между
членами Постоянного комитета и принимается для публикации при одобрении не менее 50 % членов
комитета, принимающих участие в голосовании. Пересмотренный метод аналогичен ISO/PAS или
ISO/TS и поэтому также будет опубликован совместно на условиях ISO.
Обращается внимание на то, что некоторые элементы данного документа могут быть объектом
патентных прав. ISO не несет ответственности за идентификацию какого-либо одного или всех
патентных прав.
ISO/TS 27265⏐IDF/RM 228 были подготовлены Международной молочной федерацией (IDF) и
Техническим комитетом ISO/TC 34 Пищевые продукты, Подкомитетом SC 5 Молоко и молочные
продукты. Этот документ публикуется совместно IDF и ISO.
Вся работа была проделана Совместной инициативной группой ISO-IDF по Гармонизации Постоянного
комитета по Микробиологическим методам анализа под руководством руководителей проекта S. Miller
(Новая Зеландия) и B. Hill (Новая Зеландия).
iv © ISO и IDF 2009 – Все права сохраняются
ТЕХНИЧЕСКИЕ УСЛОВИЯ
IDF/RM 228:2009(R)
Молоко сухое. Подсчет особо теплостойких спор
термофильных бактерий
1 Область применения
Настоящие технические условия устанавливают метод для подсчета колониеобразующих единиц
(CFU) особо теплостойких спор термофильных бактерий в продуктах из сухого молока, используя
метод определения количества колоний при 55 °C после нагрева пробы при 106 °C.
Применение этих технических условий ограничено сухим цельным молоком, обезжиренным молоком и
пахтой, которые предназначены для рекомбинирования и использования в производстве
стерилизованных (например, путем пастеризации (UHT) или автоклавирования) молочных продуктах.
2 Нормативные ссылки
Следующие ссылочные нормативные документы являются обязательными при применении данного
документа. Для жестких ссылок применяется только цитированное издание документа. Для плавающих
ссылок необходимо использовать самое последнее издание нормативного ссылочного документа
(включая любые изменения).
ISO 7218, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие требования и
рекомендации по микробиологическим исследованиям
ISO 6887-5, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Приготовление проб для
анализа, первоначальных суспензий и десятичных разведений для микробиологического
1)
исследования. Часть 5. Специальные правила для приготовления молока и молочных продуктов
ISO/TS 11133-1, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Правила
приготовления и производства питательных сред. Часть 1. Общие правила по обеспечению
качества приготовления питательных сред в лаборатории
3 Термины и определения
Применительно к этому документу используются следующие термины и определения.
3.1
особо теплостойкие споры термофильных бактерий
specially thermoresistant spores of thermophilic bacteria
бактериальные споры, выживающие после термообработки при 106 °C в течение 30 мин, аэробно
образуя колонии при 55 °C в неселективной среде при условиях, установленных в этих технических
условиях
1) Заменяет ISO 8261⎪IDF 122.
© ISO и IDF 2009 – Все права сохраняются 1
IDF/RM 228:2009(R)
4 Сущность метода
Установленное количество исходной суспензии анализируемой пробы подвергают тепловой обработке
при 106 °C в течение 30 мин.
Залитые чашки Петри готовят, используя установленную неселективную питательную среду и
установленное количество термообработанной исходной суспензии.
Другие чашки можно готовить в таких же условиях, используя десятичные разведения
термообработанной исходной суспензии.
Чашки инкубируют аэробно при 55 °C в течение 48 ч.
Количество CFU особо теплостойких спор термофильных бактерий на грамм продукта вычисляют из числа
колоний на чашках, выбранных при уровнях разведения, позволяющих получить значимый результат.
Особо теплостойкие споры термофильных бактерий, вычисленные данным методом, способны
выживать в промышленных процессах стерилизации (например, UHT или автоклавирование).
5 Чашечный подсчет бактерий с использованием агара BCP (бромкрезоловый
пурпурный) с массовой долей крахмала 0,2 % и обезжиренного молока
Общее руководство см. в ISO 7218.
Для анализа, если нет других указаний, используются реактивы только признанной аналитической
чистоты и дистиллированная или деминерализованная вода или вода аналогичной чистоты.
5.1 Бромкрезоловый пурпурный
5.1.1 Компоненты
Бромкрезоловый пурпурный 4 г
Объемная доля этанола 95 % 100 мл
5.1.2 Приготовление
Бромкрезоловый пурпурный растворяют в этаноле. Хранят раствор в надежно закупоренной бутылке
для предотвращения испарения.
5.2 Полная среда
5.2.1 Компоненты
Триптон 5,0 г
Дрожжевой экстракт 2,5 г
Моногидрат глюкозы 1,0 г
a
Обезжиренное сухое молоко 1,0 г
b
Агар 8 г до 15 г
c
Крахмал, растворимый 2,0 г
c
Бромкрезоловый пурпурный 1 мл
(5.1)
1 000 мл
Вода
a
Обезжиренное сухое молоко должно быть свободно от ингибиторов.
b
В зависимости от желирующей способности агара (прочность геля).
c
Дополнительные компоненты, добавляемые к молочному агару для чашечного
подсчета микроорганизмов.
2 © ISO и IDF 2009 – Все права сохраняются
IDF/RM 228:2009(R)
5.2.2 Приготовление
Растворяют каждый компонент в воде, нагревая до кипения при частом перемешивании до полного
растворения.
Если необходимо, регулируют pH, так чтобы после стерилизации он был 7,0 ± 0,2 при 25 °C.
Стерилизуют в автоклаве при 121 °C ± 1 °C в течение 15 мин.
Питательную среду можно также приготовить из подходящего промышленного дегидрированного агара
с обезжиренным молоком для чашечного подсчета, к которому добавляются дополнительные
компоненты.
6 Оборудование
Используется обычное микробиологическое лабораторное оборудование, в том числе требуемое для
приготовления испытательных образцов и разведений по ISO 7218 и ISO 6887-5, и, в частности,
следующее.
Вместо многоразовой стеклянной посуды можно использовать оборудование одноразового
использования, если это соответствует техническим условиям.
6.1 Инкубатор, обеспечивающий поддержание температуры при 55 °C ± 1 °C.
6.2 Водяные бани, обеспечивающие поддержание температур от 15 °C до 25 °C и при 45 °C ± 1 °C.
6.3 pH-метр, с температурной компенсацией, обеспечивающий считывание до ± 0,1 pH единиц при
25 °C.
6.4 Оборудование для подогрева пробы, резервуар высокого давления или небольшой автоклав,
обеспечивающий повышение температуры пробы от 100 °C до 105,5 °C через < 6 мин и поддержание
температуры контрольной пробирки при 106 °C ± 0,5 °C в течение всего периода обработки. Резервуар
высокого давления должен обеспечивать быстрое охлаждение до 100 °C после завершения
термообработки. Обычно для этого требуется наличие парового кл
...







