ISO 6639-4:2025

Cereals and pulses - Determination of hidden insect infestation - Part 4: Rapid methods

1.1 This document specifies four rapid methods for estimating the degree of, or detecting the presence of, hidden insect infestation with sampling (see Clauses 4 to 6) or without sampling (on-site probing, see Clause 7) in a cereal or pulse lot. NOTE The characteristics leading to the choice of rapid method are summarized in ISO 6639-1:2025, Table 1. 1.2 The method by determination of carbon dioxide production (see Clause 4) is applicable to testing whole grains. It does not apply to testing: a) finely ground grain products, as there is a risk that particles of material will be sucked up with air samples; or b) grain products with moisture contents greater than a mass fraction of 15 %, because of the risk of carbon dioxide produced by the products themselves and by microorganisms interfering with the results. In addition, the method does not apply to the rapid testing of grain products onto which carbon dioxide has already been adsorbed in large quantities (e.g. grain stored in a confined atmosphere, when there are clear external indications of heavy infestation). The method is applicable to coarsely milled or kibbled grain products, provided that they have been sieved before testing to remove fine particles and loose insects. The method does not permit the presence of dead adults. 1.3 The whole grain flotation method (see Clause 5) is applicable to detecting hidden infestation in most cereals and pulses but only on a qualitative basis. 1.4 The acoustic method operating on a grain sample (see Clause 6) is applicable to detecting living (and active) insects (larvae and adults before their emergence from a kernel) inside grains in a sample. It does not permit dead adults and larvae or living eggs and pupae (non-feeding stages) to be detected. 1.5 The on-site assessment acoustic method (see Clause 7) is applicable to detecting adult insects and larvae feeding on the grain inside without taking samples. It does not apply to detecting inactive stages (eggs, nymph and moulting).

Céréales et légumineuses — Détermination de l'infestation cachée par les insectes — Partie 4: Méthodes rapides

1.1 Le présent document spécifie quatre méthodes rapides pour estimer le degré ou détecter la présence d’une infestation cachée d’insectes avec échantillonnage (voir les Articles 4 à 6) ou sans échantillonnage (détection sur site, voir l’Article 7) dans un lot de céréales ou de légumineuses. NOTE Les caractéristiques guidant le choix d’une méthode rapide sont résumées dans l’ISO 6639-1:2025, Tableau 1. 1.2 La méthode par détermination du dégagement de dioxyde de carbone (voir l’Article 4) est applicable à l’essai des grains entiers. Elle ne s’applique pas aux essais sur: a) les produits dérivés de grains finement broyés, car il existe un risque d’aspiration de particules du produit avec les échantillons d’air; ou b) les grains et leurs produits, quand ils ont une teneur en eau supérieure à une fraction massique de 15 %, à cause du risque d’interférence avec les résultats de la mesure du dioxyde de carbone produit par les grains et les micro-organismes. De plus, la méthode ne s’applique pas à la mesure rapide sur des grains et leurs produits sur lesquels le dioxyde de carbone est déjà adsorbé en grande quantité (par exemple pour les grains stockés en atmosphère confinée, lorsqu’il existe des signes extérieurs évidents de forte infestation). La méthode est applicable au grain broyé grossièrement ou concassé, pourvu que le produit ait été tamisé avant l’analyse pour éliminer les particules fines et les insectes libres. La méthode ne permet pas de détecter la présence d’adultes morts. 1.3 La méthode par flottation des grains entiers (voir l’Article 5) est applicable pour détecter l’infestation cachée dans la plupart des céréales et des légumineuses, mais seulement de façon qualitative. 1.4 La méthode acoustique utilisée sur un échantillon de grains (voir l’Article 6) est applicable pour détecter les insectes vivants (et actifs) (larves et adultes avant leur émergence d’un grain) à l’intérieur des grains dans un échantillon. Elle ne permet pas de détecter les larves ou les adultes morts, ni les œufs ou les nymphes (stades inactifs). 1.5 La méthode acoustique d’évaluation sur site (voir l’Article 7) est applicable pour détecter les insectes adultes et les larves se nourrissant à l’intérieur du grain sans prélever d’échantillons. Elle ne s’applique pas à la détection des stades inactifs (œufs, nymphe et mue).

Žito in stročnice - Določanje prikritega napada insektov - 4. del: Hitre metode (ISO 6639-4:2025)

1.1 Ta dokument določa štiri hitre metode za ocenjevanje stopnje ali odkrivanje prisotnosti prikritega napada insektov z vzorčenjem (glej točke 4 do 6) ali brez vzorčenja (sondiranje na kraju samem, glej točko 7) v seriji žit ali stročnic.  OPOMBA: Značilnosti, ki privedejo do odločitve glede hitre metode, so povzete v preglednici 1 standarda ISO 6639-1:2025.  1.2 Metoda z določanjem nastajanja ogljikovega dioksida (glej točko 4) se uporablja za preskušanje celih zrn. Ne uporablja se za preskušanje:  a) fino mletih proizvodov iz žit, ker obstaja tveganje izsesavanja delcev materiala skupaj z vzorci zraka; ali b) proizvodov iz žit z vsebnostjo vlage, večjo od 15 % masnega deleža, ker lahko ogljikov dioksid, ki ga proizvajajo proizvodi in mikroorganizmi, vpliva na rezultate.  Poleg tega se metoda ne uporablja za hitro preskušanje proizvodov iz žit, na katerih se je ogljikov dioksid že adsorbiral v večjih količinah (npr. žito, shranjeno v zaprti atmosferi, pri čemer so jasno vidni zunanji znaki napada insektov).  Metoda se uporablja za grobo mlete ali drobljene proizvode iz žita, pod pogojem, da so bili pred preskusom iz njih s presejanjem odstranjeni drobni delci in ostanki insektov.  Metoda ne dovoljuje prisotnosti mrtvih odraslih insektov.  1.3 Metoda flotacije celih zrn (glej točko 5) se uporablja za odkrivanje prikritega napada pri večini žit in stročnic, vendar le kvalitativno.  1.4 Akustična metoda, ki se izvaja na vzorčenem zrnu (glej točko 6), se uporablja za odkrivanje živih (in aktivnih) insektov (ličink in odraslih insektov, preden prilezejo iz zrna) v zrnih posameznega vzorca. Ne dovoljuje odkrivanja mrtvih odraslih insektov in ličink ali živih jajčec in bub (stadijev, ki se ne hranijo).  1.5 Akustična metoda za ocenjevanje na kraju samem (glej točko 7) se uporablja za odkrivanje odraslih insektov in ličink, ki se hranijo z zrnjem v notranjosti žita, brez vzorčenja. Ne uporablja se za odkrivanje neaktivnih stadijev (jajčeca, nimfe in levitev).

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 11-Jun-2025
• ICS: 67.060 - Cereals, pulses and derived products
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 4 - Cereals and pulses
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 4 - Cereals and pulses
• Current Stage: 6060 - International Standard published
• Start Date: 12-Jun-2025
• Due Date: 24-Oct-2026
• Completion Date: 12-Jun-2025
• Ref Project: SIST ISO 6639-4:2025 - Cereals and pulses - Determination of hidden insect infestation - Part 4: Rapid methods (ISO 6639-4:2025)

Relations

• Revises: ISO 6639-4:1987 - Cereals and pulses - Determination of hidden insect infestation - Part 4: Rapid methods
• Effective Date: 23-Jul-2022

Overview

ISO 6639-4:2025 - Cereals and pulses - Determination of hidden insect infestation - Part 4: Rapid methods specifies four rapid methods to estimate or detect hidden insect infestation in cereal and pulse lots. The standard covers both approaches with sampling (three methods) and without sampling (one on-site probing method), providing practical procedures, instrumentation guidance, result expression and interpretation for fast, field-oriented screening.

Keywords: ISO 6639-4:2025, hidden insect infestation, cereals and pulses, rapid methods, grain testing, acoustic probing.

Key topics and technical requirements

• Scope and methods
  • Defines four rapid methods:
    • Determination of carbon dioxide (CO2) production (Clause 4) - applicable to whole grains and coarsely milled/kibbled products after sieving.
    • Whole grain flotation (Clause 5) - qualitative detection for most cereals and pulses.
    • Acoustic method on a grain sample (Clause 6) - detects living, active larvae and pre-emergent adults in sampled grain.
    • On-site acoustic probing (Clause 7) - in situ detection of adults and feeding larvae without taking samples.
• Limitations and exclusions
  • CO2 method is not suitable for finely ground products, products with moisture > 15% (risk of background CO2), or grain that has been heavily pre-exposed to CO2 (confined atmospheres). CO2 method cannot distinguish dead adults.
  • Acoustic methods do not detect non-feeding or inactive stages (eggs, pupae, moulting) and do not detect dead insects.
  • Flotation provides qualitative results only.
• Test structure
  • Each method includes apparatus specifications, sampling or on-site procedure, determination steps, expression of results, interpretation and reporting requirements (see Clauses 4–7).

Practical applications and who uses this standard

ISO 6639-4:2025 is designed for rapid screening of grain lots in contexts where speed and field deployability matter:

• Grain storage managers and bulk handlers - routine checks in silos, warehouses and transport.
• Quality control and food safety laboratories - quick triage before full reference testing.
• Commodity traders and inspectors - acceptance testing at delivery or transit points.
• Port authorities and quarantine services - on-site rapid assessment to inform phytosanitary decisions.
• Equipment manufacturers - development and validation of CO2 detectors, flotation kits and acoustic probes for grain inspection.

Related standards

• ISO 6639-1:2025 (series overview and method selection guidance)
• ISO 6639-2 (Sampling) and ISO 6639-3 (Reference method)
• ISO 712-1 (Moisture determination), ISO 565 (Test sieves), ISO 12099 (NIR guidelines), ISO 24333 (Cereals sampling)

Using ISO 6639-4:2025 helps organizations implement consistent, rapid screening protocols for hidden insect infestation, enabling faster operational decisions while aligning with the broader ISO 6639 series for sampling and reference testing.

Standards Content (Sample)

SLOVENSKI STANDARD
01-november-2025
Nadomešča:
SIST ISO 6639-4:1997
Žito in stročnice - Določanje prikritega napada insektov - 4. del: Hitre metode (ISO
6639-4:2025)
Cereals and pulses — Determination of hidden insect infestation — Part 4: Rapid
methods (ISO 6639-4:2025)
Céréales et légumineuses — Détermination de l'infestation cachée par les insectes —
Partie 4: Méthodes rapides (ISO 6639-4:2025)
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 6639-4:2025
ICS:
67.060 Žita, stročnice in proizvodi iz Cereals, pulses and derived
njih products
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

International
Standard
ISO 6639-4
Second edition
Cereals and pulses —
2025-06
Determination of hidden insect
infestation —
Part 4:
Rapid methods
Céréales et légumineuses — Détermination de l'infestation
cachée par les insectes —
Partie 4: Méthodes rapides
Reference number
© ISO 2025
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on
the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below
or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: [phone]
Email: [e-mail]
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii
Contents Page
Foreword .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 2
4 Method by determination of carbon dioxide production . 2
4.1 Principle .2
4.2 Apparatus .2
4.3 Sampling .4
4.4 Procedure .4
4.4.1 Preparation of test sample .4
4.4.2 Preparation of container and test portion .4
4.4.3 Carbon dioxide determination .5
4.4.4 Determination times .5
4.5 Expression of results . .5
4.6 Interpretation of results .5
4.7 Test report .5
5 Whole grain flotation method . 6
5.1 Principle .6
5.2 Apparatus .6
5.3 Sampling .6
5.4 Test solution .6
5.5 Procedure .7
5.5.1 Preparation of test sample and test portion .7
5.5.2 Determination .7
5.5.3 Number of determinations .8
5.6 Expression of results . .8
5.6.1 Calculation .8
5.6.2 Repeatability .8
5.7 Interpretation of results .9
5.8 Test report .9
6 Acoustic method operating on a grain sample . 9
6.1 Principle .9
6.2 Apparatus .9
6.3 Sampling .10
6.4 Procedure .10
6.4.1 General .10
6.4.2 Preparation of the test sample and test portion .10
6.4.3 Determination .11
6.4.4 Number of determinations .11
6.5 Expression of results . .11
6.6 Interpretation of results .11
6.7 Test report .11
7 On-site assessment acoustic method.12
7.1 Principle . 12
7.2 Apparatus . 12
7.3 On-site acoustic probing . 12
7.4 Operating method . 12
7.5 Assessment . 12
7.5.1 General . 12
7.5.2 In situ acoustic probing a grain bulk in a means of transport . 12
7.5.3 Operation of on-site acoustic probing in a static grain mass. 13
7.5.4 Number of measurements .14
7.6 Expression of results .14

iii
7.7 Interpretation of results .14
7.8 Test report .14
Bibliography .15

iv
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee
has been established has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely
with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described
in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the different types
of ISO document should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the
ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
ISO draws attention to the possibility that the implementation of this document may involve the use of (a)
patent(s). ISO takes no position concerning the evidence, validity or applicability of any claimed patent
rights in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a)
patent(s) which may be required to implement this document. However, implementers are cautioned that
this may not represent the latest information, which may be obtained from the patent database available at
www.iso.org/patents. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and expressions
related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the World Trade
Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 4, Cereals
and pulses.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 6639-4:1987), which has been technically
revised.
The main changes are as follows:
— the measuring device, method and process in the carbon dioxide detection method have been replaced
with a simpler, faster and more economical alternative;
— the ninhydrin staining method, which has not been used for a long time, has been deleted;
— the X-ray method, which is no longer in use due to its high cost and complicated materials for security
concerns, has been deleted;
— the acoustic method operating on a sample has been improved;
— on-site probing with an acoustic probe has been added.
A list of all parts in the ISO 6639 series can be found on the ISO website.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.

v
International Standard ISO 6639-4:2025(en)
Cereals and pulses — Determination of hidden insect
infestation —
Part 4:
Rapid methods
1 Scope
1.1 This document specifies four rapid methods for estimating the degree of, or detecting the presence
of, hidden insect infestation with sampling (see Clauses 4 to 6) or without sampling (on-site probing, see
Clause 7) in a cereal or pulse lot.
NOTE The characteristics leading to the choice of rapid method are summarized in ISO 6639-1:2025, Table 1.
1.2 The method by determination of carbon dioxide production (see Clause 4) is applicable to testing
whole grains. It does not apply to testing:
a) finely ground grain products, as there is a risk that particles of material will be sucked up with air
samples; or
b) grain products with moisture contents greater than a mass fraction of 15 %, because of the risk of carbon
dioxide produced by the products themselves and by microorganisms interfering with the results.
In addition, the method does not apply to the rapid testing of grain products onto which carbon dioxide has
already been adsorbed in large quantities (e.g. grain stored in a confined atmosphere, when there are clear
external indications of heavy infestation).
The method is applicable to coarsely milled or kibbled grain products, provided that they have been sieved
before testing to remove fine particles and loose insects.
The method does not permit the presence of dead adults.
1.3 The whole grain flotation method (see Clause 5) is applicable to detecting hidden infestation in most
cereals and pulses but only on a qualitative basis.
1.4 The acoustic method operating on a grain sample (see Clause 6) is applicable to detecting living (and
active) insects (larvae and adults before their emergence from a kernel) inside grains in a sample. It does not
permit dead adults and larvae or living eggs and pupae (non-feeding stages) to be detected.
1.5 The on-site assessment acoustic method (see Clause 7) is applicable to detecting adult insects and
larvae feeding on the grain inside without taking samples. It does not apply to detecting inactive stages
(eggs, nymph and moulting).
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content constitutes
requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For undated references,
the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.

ISO 565, Test sieves — Metal wire cloth, perforated metal plate and electroformed sheet — Nominal sizes of
openings
ISO 712-1, Cereals and cereal products — Determination of moisture content — Part 1: Reference method
ISO 6639-2, Cereals and pulses — Determination of hidden insect infestation — Part 2: Sampling
ISO 6639-3, Cereals and pulses — Determination of hidden insect infestation — Part 3: Reference method
ISO 12099, Animal feeding stuffs, cereals and milled cereal products — Guidelines for the application of near
infrared spectrometry
ISO 24333, Cereals and cereal products — Sampling
3 Terms and definitions
No terms and definitions are listed in this document.
ISO and IEC maintain terminology databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at https:// www .electropedia .org/
4 Method by determination of carbon dioxide production
4.1 Principle
Incubation of a test portion of the material at a standard temperature, and estimation, by a mobile carbon
dioxide detector method with recirculation gas sampling, of the amount of carbon dioxide generated during
a standard period as a measure of the total metabolism of the material.
NOTE This method is based on work in which it was shown that respiration can be used to detect insects in
produce and that the volume of airspace is approximately constant in bulk grain packed tight. The metabolic rate
of dry grain, or a grain product, is very low. That of insects is so much higher that the generation of carbon dioxide
in dry grain or grain product can be regarded as a sign of infestation, provided that care has been taken to avoid
contamination with this gas and to ensure that adsorption by the grain is minimized.
4.2 Apparatus
4.2.1 Sieve, of suitable aperture size such that fine particles and insects can pass but the material under
test remains (in accordance with ISO 565).
4.2.2 Balance, accurate to 0,1 g.
4.2.3 Apparatus given in Figure 1.
NOTE Rubber septum, gas tubes, a stop clamp, connecting tubes, etc. can serve as other alternatives with the
same function.
Key
1 empty sample container A sample container
2 rubber septum B rubber septum (side view)
3 sample container in seal state B’ rubber septum (vertical view)
4 sample container in detecting state C gas sampling tube
D gas return tube
E soft connecting tube
F stop clamp
G grain
H hard connecting tube
I gas sample sampling and recirculation tube
J gas return sampling and recirculation tube
K CO detector
Figure 1 — Apparatus for mobile CO detector measurement with re-circulation sampling
4.2.4 Sample container, of capacity not exceeding 750 ml. Each container shall be closed with rubber or
silicon septum B. Two tubes used for recirculating gas sample, i.e. gas sampling tube C and gas return tube D,
shall pass and be sealed through the septum B. For example, wide-mouthed glass jar A has a mouth 80 mm
in diameter and 140 mm in height (see Figure 1). The half-time from 500 Pa to 250 Pa of the sealed condition
should be more than 2 min.
Connect one end of the “U” gauge to the upper end of gas sampling tube C. Connect the special air pump or
the air pump of the CO monitor to the upper end of the gas return tube D. Fill the container with air until
the pressure reaches 550 Pa to 600 Pa. Hold the gas return tube D with a clamp. Observe and record the half-
time from 500 Pa to 250 Pa.
4.2.5 Gas sampling and return tube: Gas sample soft tube C and gas return tube D with an outer
diameter of 4 mm shall be fixed through the rubber septum and sealed by sealant separately. Tube C and D
can be blocked or opened by a clip during gas sample maintaining or gas sampling, or
...

International
Standard
ISO 6639-4
Second edition
Cereals and pulses —
2025-06
Determination of hidden insect
infestation —
Part 4:
Rapid methods
Céréales et légumineuses — Détermination de l'infestation
cachée par les insectes —
Partie 4: Méthodes rapides
Reference number
© ISO 2025
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on
the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below
or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: [phone]
Email: [e-mail]
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii
Contents Page
Foreword .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 2
4 Method by determination of carbon dioxide production . 2
4.1 Principle .2
4.2 Apparatus .2
4.3 Sampling .4
4.4 Procedure .4
4.4.1 Preparation of test sample .4
4.4.2 Preparation of container and test portion .4
4.4.3 Carbon dioxide determination .5
4.4.4 Determination times .5
4.5 Expression of results . .5
4.6 Interpretation of results .5
4.7 Test report .5
5 Whole grain flotation method . 6
5.1 Principle .6
5.2 Apparatus .6
5.3 Sampling .6
5.4 Test solution .6
5.5 Procedure .7
5.5.1 Preparation of test sample and test portion .7
5.5.2 Determination .7
5.5.3 Number of determinations .8
5.6 Expression of results . .8
5.6.1 Calculation .8
5.6.2 Repeatability .8
5.7 Interpretation of results .9
5.8 Test report .9
6 Acoustic method operating on a grain sample . 9
6.1 Principle .9
6.2 Apparatus .9
6.3 Sampling .10
6.4 Procedure .10
6.4.1 General .10
6.4.2 Preparation of the test sample and test portion .10
6.4.3 Determination .11
6.4.4 Number of determinations .11
6.5 Expression of results . .11
6.6 Interpretation of results .11
6.7 Test report .11
7 On-site assessment acoustic method.12
7.1 Principle . 12
7.2 Apparatus . 12
7.3 On-site acoustic probing . 12
7.4 Operating method . 12
7.5 Assessment . 12
7.5.1 General . 12
7.5.2 In situ acoustic probing a grain bulk in a means of transport . 12
7.5.3 Operation of on-site acoustic probing in a static grain mass. 13
7.5.4 Number of measurements .14
7.6 Expression of results .14

iii
7.7 Interpretation of results .14
7.8 Test report .14
Bibliography .15

iv
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee
has been established has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely
with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described
in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the different types
of ISO document should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the
ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
ISO draws attention to the possibility that the implementation of this document may involve the use of (a)
patent(s). ISO takes no position concerning the evidence, validity or applicability of any claimed patent
rights in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a)
patent(s) which may be required to implement this document. However, implementers are cautioned that
this may not represent the latest information, which may be obtained from the patent database available at
www.iso.org/patents. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and expressions
related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the World Trade
Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 4, Cereals
and pulses.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 6639-4:1987), which has been technically
revised.
The main changes are as follows:
— the measuring device, method and process in the carbon dioxide detection method have been replaced
with a simpler, faster and more economical alternative;
— the ninhydrin staining method, which has not been used for a long time, has been deleted;
— the X-ray method, which is no longer in use due to its high cost and complicated materials for security
concerns, has been deleted;
— the acoustic method operating on a sample has been improved;
— on-site probing with an acoustic probe has been added.
A list of all parts in the ISO 6639 series can be found on the ISO website.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.

v
International Standard ISO 6639-4:2025(en)
Cereals and pulses — Determination of hidden insect
infestation —
Part 4:
Rapid methods
1 Scope
1.1 This document specifies four rapid methods for estimating the degree of, or detecting the presence
of, hidden insect infestation with sampling (see Clauses 4 to 6) or without sampling (on-site probing, see
Clause 7) in a cereal or pulse lot.
NOTE The characteristics leading to the choice of rapid method are summarized in ISO 6639-1:2025, Table 1.
1.2 The method by determination of carbon dioxide production (see Clause 4) is applicable to testing
whole grains. It does not apply to testing:
a) finely ground grain products, as there is a risk that particles of material will be sucked up with air
samples; or
b) grain products with moisture contents greater than a mass fraction of 15 %, because of the risk of carbon
dioxide produced by the products themselves and by microorganisms interfering with the results.
In addition, the method does not apply to the rapid testing of grain products onto which carbon dioxide has
already been adsorbed in large quantities (e.g. grain stored in a confined atmosphere, when there are clear
external indications of heavy infestation).
The method is applicable to coarsely milled or kibbled grain products, provided that they have been sieved
before testing to remove fine particles and loose insects.
The method does not permit the presence of dead adults.
1.3 The whole grain flotation method (see Clause 5) is applicable to detecting hidden infestation in most
cereals and pulses but only on a qualitative basis.
1.4 The acoustic method operating on a grain sample (see Clause 6) is applicable to detecting living (and
active) insects (larvae and adults before their emergence from a kernel) inside grains in a sample. It does not
permit dead adults and larvae or living eggs and pupae (non-feeding stages) to be detected.
1.5 The on-site assessment acoustic method (see Clause 7) is applicable to detecting adult insects and
larvae feeding on the grain inside without taking samples. It does not apply to detecting inactive stages
(eggs, nymph and moulting).
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content constitutes
requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For undated references,
the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.

ISO 565, Test sieves — Metal wire cloth, perforated metal plate and electroformed sheet — Nominal sizes of
openings
ISO 712-1, Cereals and cereal products — Determination of moisture content — Part 1: Reference method
ISO 6639-2, Cereals and pulses — Determination of hidden insect infestation — Part 2: Sampling
ISO 6639-3, Cereals and pulses — Determination of hidden insect infestation — Part 3: Reference method
ISO 12099, Animal feeding stuffs, cereals and milled cereal products — Guidelines for the application of near
infrared spectrometry
ISO 24333, Cereals and cereal products — Sampling
3 Terms and definitions
No terms and definitions are listed in this document.
ISO and IEC maintain terminology databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at https:// www .electropedia .org/
4 Method by determination of carbon dioxide production
4.1 Principle
Incubation of a test portion of the material at a standard temperature, and estimation, by a mobile carbon
dioxide detector method with recirculation gas sampling, of the amount of carbon dioxide generated during
a standard period as a measure of the total metabolism of the material.
NOTE This method is based on work in which it was shown that respiration can be used to detect insects in
produce and that the volume of airspace is approximately constant in bulk grain packed tight. The metabolic rate
of dry grain, or a grain product, is very low. That of insects is so much higher that the generation of carbon dioxide
in dry grain or grain product can be regarded as a sign of infestation, provided that care has been taken to avoid
contamination with this gas and to ensure that adsorption by the grain is minimized.
4.2 Apparatus
4.2.1 Sieve, of suitable aperture size such that fine particles and insects can pass but the material under
test remains (in accordance with ISO 565).
4.2.2 Balance, accurate to 0,1 g.
4.2.3 Apparatus given in Figure 1.
NOTE Rubber septum, gas tubes, a stop clamp, connecting tubes, etc. can serve as other alternatives with the
same function.
Key
1 empty sample container A sample container
2 rubber septum B rubber septum (side view)
3 sample container in seal state B’ rubber septum (vertical view)
4 sample container in detecting state C gas sampling tube
D gas return tube
E soft connecting tube
F stop clamp
G grain
H hard connecting tube
I gas sample sampling and recirculation tube
J gas return sampling and recirculation tube
K CO detector
Figure 1 — Apparatus for mobile CO detector measurement with re-circulation sampling
4.2.4 Sample container, of capacity not exceeding 750 ml. Each container shall be closed with rubber or
silicon septum B. Two tubes used for recirculating gas sample, i.e. gas sampling tube C and gas return tube D,
shall pass and be sealed through the septum B. For example, wide-mouthed glass jar A has a mouth 80 mm
in diameter and 140 mm in height (see Figure 1). The half-time from 500 Pa to 250 Pa of the sealed condition
should be more than 2 min.
Connect one end of the “U” gauge to the upper end of gas sampling tube C. Connect the special air pump or
the air pump of the CO monitor to the upper end of the gas return tube D. Fill the container with air until
the pressure reaches 550 Pa to 600 Pa. Hold the gas return tube D with a clamp. Observe and record the half-
time from 500 Pa to 250 Pa.
4.2.5 Gas sampling and return tube: Gas sample soft tube C and gas return tube D with an outer
diameter of 4 mm shall be fixed through the rubber septum and sealed by sealant separately. Tube C and D
can be blocked or opened by a clip during gas sample maintaining or gas sampling, or the half-time test.
4.2.6 Soft connecting tube: Two sections of soft connecting tube E with an inner diameter of 4 mm are
prepared to be connected to tube C and tube D by hard connecting tube H with an outer diameter of 4 mm,
and tube E can be controlled by stop clip if necessary.

4.2.7 Gas sampling and return tube for recirculation: Gas sampling and recirculation
...

Norme
internationale
ISO 6639-4
Deuxième édition
Céréales et légumineuses —
2025-06
Détermination de l'infestation
cachée par les insectes —
Partie 4:
Méthodes rapides
Cereals and pulses — Determination of hidden insect
infestation —
Part 4: Rapid methods
Numéro de référence
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
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Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: [phone]
E-mail: [e-mail]
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii
Sommaire Page
Avant-propos .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 2
4 Méthode par détermination du dégagement de dioxyde de carbone . 2
4.1 Principe .2
4.2 Appareillage .2
4.3 Échantillonnage .4
4.4 Mode opératoire .4
4.4.1 Préparation de l’échantillon pour essai .4
4.4.2 Préparation du récipient et de la prise d’essai .4
4.4.3 Détermination du dioxyde de carbone .5
4.4.4 Temps de détermination . .5
4.5 Expression des résultats .5
4.6 Interprétation des résultats .5
4.7 Rapport d’essai .6
5 Méthode par flottation des grains entiers . 6
5.1 Principe .6
5.2 Appareillage .6
5.3 Échantillonnage .6
5.4 Solution d’essai .7
5.5 Mode opératoire .8
5.5.1 Préparation de l’échantillon pour essai et de la prise d’essai .8
5.5.2 Détermination .8
5.5.3 Nombre de déterminations .9
5.6 Expression des résultats .9
5.6.1 Calcul .9
5.6.2 Répétabilité .9
5.7 Interprétation des résultats .10
5.8 Rapport d’essai .10
6 Méthode acoustique utilisée sur un échantillon de grains .10
6.1 Principe .10
6.2 Appareillage .10
6.3 Échantillonnage .11
6.4 Mode opératoire .11
6.4.1 Généralités .11
6.4.2 Préparation de l’échantillon pour essai et de la prise d’essai . 12
6.4.3 Détermination . 12
6.4.4 Nombre de déterminations . 12
6.5 Expression des résultats . 12
6.6 Interprétation des résultats . 12
6.7 Rapport d’essai . 12
7 Méthode d’évaluation acoustique sur site .13
7.1 Principe . 13
7.2 Appareillage . 13
7.3 Sondage acoustique sur site. 13
7.4 Mode opératoire . 13
7.5 Évaluation .14
7.5.1 Généralités .14
7.5.2 Sondage acoustique sur site dans une masse de grains dans un moyen de
transport .14
7.5.3 Sondage acoustique sur site dans une masse statique de grains . .14
7.5.4 Nombre de mesures . 15

iii
7.6 Expression des résultats . 15
7.7 Interprétation des résultats . 15
7.8 Rapport d’essai .16
Bibliographie . 17

iv
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a
été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir
www.iso.org/directives).
L’ISO attire l’attention sur le fait que la mise en application du présent document peut entraîner l’utilisation
d’un ou de plusieurs brevets. L’ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité et à l’applicabilité de
tout droit de brevet revendiqué à cet égard. À la date de publication du présent document, l’ISO n'avait pas
reçu notification qu’un ou plusieurs brevets pouvaient être nécessaires à sa mise en application. Toutefois,
il y a lieu d’avertir les responsables de la mise en application du présent document que des informations
plus récentes sont susceptibles de figurer dans la base de données de brevets, disponible à l'adresse
www.iso.org/brevets. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir identifié tout ou partie de
tels droits de propriété.
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données pour
information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion de
l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au
commerce (OTC), voir www.iso.org/avant-propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité
SC 4, Céréales et légumineuses.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 6639-4:1987), qui a fait l’objet d’une
révision technique.
Les principales modifications sont les suivantes:
— le dispositif de mesure, la méthode et le procédé dans la méthode de détection du dioxyde de carbone ont
été remplacés par une alternative plus simple, plus rapide et plus économique;
— la méthode de coloration à la ninhydrine, qui n’a pas été utilisée depuis longtemps, a été supprimée;
— la méthode aux rayons X, qui n’est plus utilisée en raison de son coût élevé et du matériel compliqué pour
des raisons de sécurité, a été supprimée;
— la méthode acoustique utilisée sur un échantillon a été améliorée;
— la détection sur site avec une sonde acoustique a été ajoutée.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 6639 se trouve sur le site web de l’ISO.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes se
trouve à l’adresse www.iso.org/fr/members.html.

v
Norme internationale ISO 6639-4:2025(fr)
Céréales et légumineuses — Détermination de l'infestation
cachée par les insectes —
Partie 4:
Méthodes rapides
1 Domaine d’application
1.1 Le présent document spécifie quatre méthodes rapides pour estimer le degré ou détecter la présence
d’une infestation cachée d’insectes avec échantillonnage (voir les Articles 4 à 6) ou sans échantillonnage
(détection sur site, voir l’Article 7) dans un lot de céréales ou de légumineuses.
NOTE Les caractéristiques guidant le choix d’une méthode rapide sont résumées dans l’ISO 6639-1:2025,
Tableau 1.
1.2 La méthode par détermination du dégagement de dioxyde de carbone (voir l’Article 4) est applicable à
l’essai des grains entiers. Elle ne s’applique pas aux essais sur:
a) les produits dérivés de grains finement broyés, car il existe un risque d’aspiration de particules du
produit avec les échantillons d’air; ou
b) les grains et leurs produits, quand ils ont une teneur en eau supérieure à une fraction massique de 15 %,
à cause du risque d’interférence avec les résultats de la mesure du dioxyde de carbone produit par les
grains et les micro-organismes.
De plus, la méthode ne s’applique pas à la mesure rapide sur des grains et leurs produits sur lesquels le
dioxyde de carbone est déjà adsorbé en grande quantité (par exemple pour les grains stockés en atmosphère
confinée, lorsqu’il existe des signes extérieurs évidents de forte infestation).
La méthode est applicable au grain broyé grossièrement ou concassé, pourvu que le produit ait été tamisé
avant l’analyse pour éliminer les particules fines et les insectes libres.
La méthode ne permet pas de détecter la présence d’adultes morts.
1.3 La méthode par flottation des grains entiers (voir l’Article 5) est applicable pour détecter l’infestation
cachée dans la plupart des céréales et des légumineuses, mais seulement de façon qualitative.
1.4 La méthode acoustique utilisée sur un échantillon de grains (voir l’Article 6) est applicable pour
détecter les insectes vivants (et actifs) (larves et adultes avant leur émergence d’un grain) à l’intérieur des
grains dans un échantillon. Elle ne permet pas de détecter les larves ou les adultes morts, ni les œufs ou les
nymphes (stades inactifs).
1.5 La méthode acoustique d’évaluation sur site (voir l’Article 7) est applicable pour détecter les insectes
adultes et les larves se nourrissant à l’intérieur du grain sans prélever d’échantillons. Elle ne s’applique pas à
la détection des stades inactifs (œufs, nymphe et mue).
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour

les références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les éventuels
amendements).
ISO 565, Tamis de contrôle — Tissus métalliques, tôles métalliques perforées et feuilles électroformées —
Dimensions nominales des ouvertures
ISO 712-1, Céréales et produits céréaliers — Détermination de la teneur en eau — Partie 1: Méthode de référence
ISO 6639-2, Céréales et légumineuses — Détermination de l’infestation cachée par les insectes —
Partie 2: Échantillonnage
ISO 6639-3, Céréales et légumineuses — Détermination de l'infestation cachée par les insectes — Partie 3:
Méthode de référence
ISO 12099, Aliments des animaux, céréales et produits de mouture des céréales — Lignes directrices pour
l'application de la spectrométrie dans le proche infrarouge
ISO 24333, Céréales et produits céréaliers — Échantillonnage
3 Termes et définitions
Aucun terme n’est défini dans le présent document.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en normalisation,
consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse https:// www .electropedia .org/
4 Méthode par détermination du dégagement de dioxyde de carbone
4.1 Principe
Incubation d’une prise d’essai du produit à une température donnée, et estimation par une méthode avec
un détecteur de dioxyde de carbone mobile et un échantillonnage par recirculation de gaz, de la quantité de
dioxyde de carbone produite pendant un intervalle de temps donné, assimilée au métabolisme respiratoire
du produit.
NOTE Cette méthode est basée sur un travail de recherche qui a montré que la respiration peut être utilisée
pour détecter les insectes présents dans les produits, et que le volume d’air intergranulaire du grain en vrac tassé est
approximativement constant. La respiration naturelle du grain sec ou d’un produit du grain est très faible. Celle des
insectes est beaucoup plus élevée et le dégagement de dioxyde de carbone dans du grain sec ou dans un produit dérivé
peut être considéré comme un signe d’infestation si toutes les précautions ont été prises pour éviter toute pollution
extérieure et pour s’assurer que l’adsorption du dioxyde de carbone par le grain est réduite au minimum.
4.2 Appareillage
4.2.1 Tamis, ouverture de maille laissant passer les fines particules et les insectes, mais retenant le
produit à analyser (conformément à l’ISO 565).
4.2.2 Balance, précise à 0,1 g près.
4.2.3 Appareillage indiqué à la Figure 1.
NOTE Le septum en caoutchouc, les tubes de gaz, la pince de fermeture, les tubes de raccordement, etc., peuvent
être remplacés par des équipements différents ayant la même fonction.

Légende
1 récipient pour échantillon vide A récipient pour échantillon
2 septum en caoutchouc B septum en caoutchouc (vue latérale)
3 récipient pour échantillon à l’état scellé B' septum en caoutchouc (vue verticale)
4 récipient pour échantillon lors de la détection C tube de prélèvement de gaz
D tube de retour de gaz
E tube de raccordement souple
F pince de fermeture
G grain
H tube de raccordement rigide
I tube de prélèvement et de recirculation de l’échantillon
de gaz
J tube de retour et de recirculation de gaz
K détecteur de CO
Figure 1 — Appareillage pour la mesure par détecteur de CO mobile avec échantillonnage à
recirculation
4.2.4 Récipient pour échantillon, d’une capacité ne dépassant pas 750 ml. Chaque récipient doit être
fermé avec un septum B en caoutchouc ou en silicone. Deux tubes utilisés pour la recirculation de l’échantillon
de gaz, c’est-à-dire le tube de prélèvement de gaz C et le tube de retour de gaz D, doivent passer et être
scellés à travers le septum B. Par exemple, le pot en verre à large ouverture A a une ouverture de 80 mm de
diamètre et 140 mm de hauteur (voir la Figure 1). Il convient que les conditions de scellage permettent un
demi-temps de passage de 500 Pa à 250 Pa supérieur à 2 min.
Connecter une extrémité du manomètre «U» à l’extrémité supérieure du tube de prélèvement de gaz C.
Connecter la pompe à air spéciale ou la pompe à air du moniteur de CO à l’extrémité supérieure du tube
de retour de gaz D. Remplir le récipient d’air jusqu’à ce que la pression atteigne 550 Pa à 600 Pa. Fermer le
tube de retour de gaz D avec une pince. Observer et enregistrer la moitié du temps nécessaire pour passer de
500 Pa à 250 Pa.
4.2.5 Tube de prélèvement et de retour de gaz: Un tube souple C pour l’échantillon de gaz et un tube de
retour de gaz D avec un diamètre extérieur de 4 mm doivent être fixés à travers le septum en caoutchouc
et scellés séparément avec un produit d’étanchéité. Les tubes C et D peuvent être fermés ou ouverts par
une pince pendant la rétention du gaz de l’échantillon, l’échantillonnage de gaz ou l’essai du demi-temps de
transition.
4.2.6 Tube de raccordement souple: Deux sections du tube de raccordement souple E d’un diamètre
intérieur de 4 mm sont préparées pour être connectées au tube C et au tube D par le tube de raccordement
rigide H d’un diamètre extérieur de 4 mm, et le tube E peut être contrôlé par une pince de fermeture si
nécessaire.
4.2.7 Tube de prélèvement et de retour pour la recirculation: Le tube de prélèvement et de recirculation
de gaz I raccordé au détecteur de CO pour la recirculation est identique au tube E. Le tube de retour et de
recirculation de gaz J raccordé au détecteur de CO pour la recirculation est également identique au tube E.
4.2.8 Pince de fermeture, dont les clips peuvent être une pince de fermeture à vis ou à ressort.
4.2.9 Incubateur ou étuve, pouvant être maintenus à 25 °C ± 1 °C.
4.2.10 Détecteur de dioxyde de carbone mobile, de tout type pouvant mesurer la concentration d’une
fraction volumique de 0 % à 3 %, d’une précision correspondant à une erreur de pleine échelle de ±0,01 % en
fraction volumique, à un taux d’échantillonnage de gaz de 500 ml/min et avec un temps de réponse de 30 s.
4.2.11 Local à atmosphère co
...