ISO 7218:1996/Amd 1:2001
(Amendment)Microbiology of food and animal feeding stuffs — General rules for microbiological examinations — Amendment 1
Microbiology of food and animal feeding stuffs — General rules for microbiological examinations — Amendment 1
Microbiologie des aliments — Règles générales pour les examens microbiologiques — Amendement 1
General Information
Relations
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 7218
Second edition
1996-02-15
AMENDMENT 1
2001-04-01
Microbiology of food and animal feeding
stuffs — General rules for microbiological
examinations
AMENDMENT 1
Microbiologie des aliments — Règles générales pour les examens
microbiologiques —
AMENDEMENT 1
Reference number
ISO 7218:1996/Amd.1:2001(E)
©
ISO 2001
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ISO 7218:1996/Amd.1:2001(E)
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ISO 7218:1996/Amd.1:2001(E)
Foreword
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committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in
liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 3.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting.
Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this Amendment may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Amendment 1 to International Standard ISO 7218:1996 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food
products, Subcommittee SC 9, Microbiology.
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ISO 7218:1996/Amd.1:2001(E)
Microbiology of food and animal feeding stuffs — General rules for
microbiological examinations
AMENDMENT 1
Page 24
Replace subclause 9.3.4 by the following text.
9.3.4 Counting of colonies
Following the period of incubation stated in the specific standard, count the colonies (total colonies, typical colonies
or presumed suspect colonies) for each dish containing less than 300 colonies (or any other number stated in the
specific standard).
The different methods of calculation defined in 9.3.5 shall take account of dishes containing 0 colonies if these
dishes have been retained.
When counting typical or presumed suspect colonies, the maximum number of all typical or atypical colonies
present on a dish shall not exceed 300 (or any other number stated in the specific standard).
NOTE 1 In certain cases, it may be difficult to count the colonies (for example where spreading microorganisms are present).
These cases are dealt with in the specific standards.
NOTE 2 When counting typical or presumed suspect colonies, the description of the colonies will possibly be given in the
specific standard.
Pages 25 and 26
Replace subclause 9.3.5 by following text.
9.3.5 Expression of results
9.3.5.1 General
9.3.5.1.1 In this subclause, the cases dealt with correspond to the following general cases:
� inoculation of two Petri dishes, 90 mm in diameter, per dilution;
� maximum number for the counting of total colonies is 300 per dish;
� maximum number of all typical and atypical colonies present on a dish when counting typical or presumed
suspect colonies is 300 per dish;
� maximum number for the counting of typical or presumed suspect colonies is 150 per dish;
� number of presumed suspect colonies (9.3.5.3) inoculated for identification or confirmation, from each dish
retained is 5;
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ISO 7218:1996/Amd.1:2001(E)
� minimum number of colonies [total colonies, typical colonies or colonies complying with identification or
confirmation criteria (9.3.5.3)] on at least one dish is 15.
These figures will be defined in the specific standards.
When dishes with a diameter different from 90 mm are used, the maximum number of colonies shall be increased
proportionately to the surface area of the dishes.
9.3.5.1.2 The methods of calculation defined below take account of the cases which occur most frequently when
tests are carried out in accordance with good laboratory practice. Rare special cases may occur (for example,
significant discrepancy between the number of colonies in two dishes with the same dilution, or a very different
ratio to that of the dilution factor between the dishes of two successive dilutions) and it is therefore necessary that
results obtained from counting be examined, interpreted or possibly refused by a qualified microbiologist.
9.3.5.2 Method of calculation: General case (counting of total colonies or typical colonies)
For a result to be valid, it is generally considered necessary to count the colonies on at least one dish containing a
minimum of 15 colonies [total colonies, typical colonies or colonies complying with identification or confirmation
criteria (9.3.5.3)].
Calculate the number N of microorganisms present in the test sample as a weighted mean from two successive
dilutions using the following equation:
C
�
N= (1)
Vn��[(+0,1n)]�d
12
where
C is the sum of the colonies counted on all the dishes retained from two successive dilutions, and where
�
at least one contains a minimum of 15 colonies;
V is the volume of inoculum applied to each dish, in millilitres;
n is the number of dishes retained at the first dilution;
1
n is the number of dishes retained at the second dilution;
2
d is the dilution factor corresponding to the first dilution retained [d = 1 when the undiluted liquid product
(test sample) is used].
Round off the results calculated to two significant figures. In order to do this, if the third figure is less than 5 do not
modify the preceding figure; if the third figure is greater than or equal to 5, increase the preceding figure by one
unit.
Take as the result a number preferably between 1,0 and 9,9 multiplied by the appropriate power of 10, or a whole
number with two significant figures.
Express the result as follows:
� number N of microorganisms per millilitre (liquid products) or per gram (other products).
EXAMPLE Counting has produced the following results:
–2
� at the first dilution (10 ) retained: 168 and 215 colonies;
–3
� at the second dilution (10 ) retained: 14 and 25 colonies.
2 © ISO 2001 – All rights reserved
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ISO 7218:1996/Amd.1:2001(E)
C
� 168��215 14� 25 422
19 182
N�� ��
–2
0,022
Vn����0,1�n �d ��
� � 12��0,1�2 �10
��
12
��
��
4
By rounding off the result as recommended above, the number of microorganisms is 19 000 or 1,9� 10 per millilitre or per
gram of product.
9.3.5.3 Method of calculation: Case after identification or confirmation
When the method used requires identification or confirmation, a given number, A (generally 5), of presumed
suspect colonies is inoculated from each of the dishes retained for the counting of colonies. After identification or
confirmation, calculate, for each of the dishes, the number, a, of colonies complying with identification or
confirmation criteria, using the following equation:
b
aC�� (2)
A
where
b is the number of colonies complying with identification or confirmation criteria among the inoculated
colonies, A;
C is the total number of presumed suspect colonies counted on the dish.
Round off the results calculated to the nearest whole number. In order to do this, if the first figure after the decimal
point is less than 5, do not modify the preceding figure; if the first figure after the decimal point is greater than or
equal to 5, increase the preceding figure by one unit.
Calculate the number N, N or N' of identified or confirmed microorganisms present in the test sample, by replacing
E
�C by�a using the formulae provided in 9.3.5.2, 9.3.5.4.1 and 9.3.5.5.3, respectively.
Round off the result as recommended in 9.3.5.2.
Express the result as recommended in 9.3.5.2, 9.3.5.4.1 and 9.3.5.5.3, respectively.
EXAMPLE Counting has produced the following results:
–3
� at the first dilution (10 ) retained: 66 and 80 colonies;
–4
� at the second dilution (10 ) retained: 4 and 7 colonies.
Testing of selected colonies was carried out:
� for 66 colonies, 8 colonies, 6 of which complied with the criteria; hence a = 50;
� for 80 colonies, 9 colonies, 6 of which complied with the criteria; hence a = 53;
� for 7 colonies, 5 colonies, 4 of which complied with
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 7218
Deuxième édition
1996-02-15
AMENDEMENT 1
2001-04-01
Microbiologie des aliments — Règles
générales pour les examens
microbiologiques —
AMENDEMENT 1
Microbiology of food and animal feeding stuffs — General rules for
microbiological examinations —
AMENDMENT 1
Numéro de référence
ISO 7218:1996/Amd.1:2001(F)
©
ISO 2001
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ISO 7218:1996/Amd.1:2001(F)
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ISO 7218:1996/Amd.1:2001(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiéeaux
comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude aledroit de fairepartie ducomité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en
liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec la Commission
électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI, Partie 3.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour
vote. Leur publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités
membres votants.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent Amendement peuvent faire l’objet de droits
de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir
identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L’Amendement 1 à la Norme internationale ISO 7218:1996 a étéélaboré par le comité technique ISO/TC 34,
Produits alimentaires, sous-comité SC 9, Microbiologie.
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ISO 7218:1996/Amd.1:2001(F)
Microbiologie des aliments — Règles générales pour les examens
microbiologiques
AMENDEMENT 1
Page 28
Remplacer l’ensemble du paragraphe 9.3.4 par le texte suivant.
9.3.4 Comptage des colonies
Aprèsla période d’incubation mentionnée dans la norme spécifique, procéder au comptage des colonies (colonies
en totalité, colonies caractéristiques ou colonies caractéristiques présumées) pour chaque boîte contenant moins
de 300 colonies (ou tout autre nombre indiqué dans la norme spécifique).
Si elles font partie des boîtes retenues, les boîtes contenant 0 colonie doivent être prises en compte dans les
différents modes de calcul définis dans l'article 9.3.5.
Dans le cas de comptage de colonies caractéristiques ou caractéristiques présumées, le nombre maximal de
l’ensemble des colonies caractéristiques et non caractéristiques présentes sur une boîte ne doit pas dépasser 300
(ou tout autre nombre indiqué dans la norme spécifique).
NOTE 1 Dans certains cas, les colonies peuvent être difficiles à compter (par exemple en présence de microorganismes
envahissants). Ces cas sont traités dans les normes spécifiques.
NOTE 2 Dans le cas de comptage de colonies caractéristiques ou caractéristiques présumées, la description des colonies
est éventuellement à préciser dans la norme spécifique.
Pages 28 à 30
Remplacer l’ensemble du paragraphe 9.3.5 par le texte suivant.
9.3.5 Expression des résultats
9.3.5.1 Généralités
9.3.5.1.1 Dans le présent paragraphe, les cas traités correspondent aux cas généraux suivants:
� ensemencement de deux boîtes dePetri,dediamètre 90 mm, par dilution;
� nombre maximal pour le comptage des colonies en totalité: 300 par boîte;
� nombre maximal de l’ensemble des colonies caractéristiques et non caractéristiques présentes sur une boîte
dans le cas de comptage de colonies caractéristiques ou caractéristiques présumées: 300 par boîte;
� nombre maximal pour le comptage des colonies caractéristiques ou caractéristiques présumées: 150 par
boîte;
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ISO 7218:1996/Amd.1:2001(F)
� nombre de colonies caractéristiques présumées (9.3.5.3) repiquées pour identification, à partir de chaque
boîte retenue: 5;
� nombre minimal de colonies [colonies en totalité, colonies caractéristiques ou colonies répondant à des
critères d’identification ou de confirmation (9.3.5.3)] sur au moins 1 boîte: 15.
Ces nombres doivent être fixés dans les normes spécifiques.
Lorsque des boîtes d’un diamètre différent de 90 mm sont utilisées, pondérer les nombres maximaux de colonies
par l’aire des boîtes.
9.3.5.1.2 Les modes de calculs définis ci-après prennent en compte les cas les plus fréquemment rencontrés,
lors d’une exécution des essais selon de bonnes pratiques de laboratoire. Des cas particuliers, assez improbables,
peuvent se présenter (par exemple, des nombres de colonies trèsdifférents entre les deux boîtes d’une même
dilution ou dans un rapport trèsdifférent de celui du facteur de dilution entre les boîtesdedeuxdilutions
successives); il est alors nécessaire que les résultats des comptages soient examinés, interprétéset
éventuellement refusés par un microbiologiste compétent.
9.3.5.2 Mode de calcul: Cas général (comptage des colonies en totalité ou des colonies
caractéristiques)
Pour qu’un résultat soit valable, on estime en général qu’il est nécessaire de compter les colonies sur au moins
1boîte contenant au minimum 15 colonies [colonies en totalité, colonies caractéristiques ou colonies répondant
aux critères d’identification ou de confirmation (9.3.5.3)].
Calculer le nombre N de microorganismes présents dans l’échantillon pour essai, en tant que moyenne pondérée à
partir de deux dilutions successives, à l’aide de l'équation suivante:
C
�
N � (1)
��
Vn����0,1�n �d
12
��
où
C est la somme des colonies comptées sur toutes les boîtes retenues de deux dilutions successives et
�
dont au moins une contient au minimum 15 colonies;
V est le volume de l’inoculum appliquéà chaque boîte, en millilitres;
n est le nombre des boîtes retenues à la première dilution;
1
n est le nombre des boîtes retenues à la deuxième dilution;
2
d est le taux de dilution correspondant à la première dilution retenue [d = 1 dans le cas où l’échantillon
pour essai (produits liquides) ensemencé directement est retenu].
Arrondir le résultat calculéà deux chiffres significatifs. Pour cela, si le troisième chiffre est inférieur à 5, le chiffre
précédent n’est pas modifié;siletroisième chiffre est supérieur ou égal à 5, le chiffre précédent est augmenté
d’une unité.
Retenir comme résultat un nombre compris de préférence entre 1,0 et 9,9 multiplié par la puissance appropriéede
10, ou un nombre entier avec 2 chiffres significatifs.
Exprimer le résultat comme suit:
� nombre N de microorganismes par millilitre (produits liquides) ou par gramme (autres produits).
2 © ISO 2001 – Tous droits réservés
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ISO 7218:1996/Amd.1:2001(F)
EXEMPLE Un dénombrement a donné les résultats suivants:
–2
� à la première dilution (10 ) retenue: 168 colonies et 215 colonies;
–3
� à la deuxième dilution (10 ) retenue: 14 colonies et 25 colonies.
C
168��215 14� 25 422
�
N�� �� 19 182
�2
Vn������0,1�n �d 0,022
120����,1�2 �10
��12 ��
��
4
En arrondissant le résultat tel que prescrit ci-dessus, le nombre de microorganismes est 19 000 ou 1,9� 10 par millilitre ou par
gramme de produit.
9.3.5.3 Mode de calcul: Cas après identification ou après confirmation
Dans le cas où la méthode utiliséenécessite une identification ou une confirmation, un nombre déterminé, A (en
général 5), de colonies caractéristiques présumées sont repiquées à partir de chacune des boîtes retenues pour le
comptage des colonies. Après identification ou confirmation, calculer, pour chacune des boîtes, le nombre, a,de
colonies répondant aux critères d’identification ou de confirmation, à l’aide de l’équation suivante:
b
aC�� (2)
A
où
b est le nombre de colonies répondant aux critères d’identification ou de confirmation parmi les A colonies
repiquées;
C est le nombre total de colonies caractéristiques présumées dénombrées sur la boîte.
Arrondir à un nombre entier de colonies. Pour cela, si le premier chiffre après la virgule est inférieur à 5, le chiffre
précédent n’est pas modifié; si le premier chiffre après la virgule est supérieur ou égal à 5, le chiffre précédent est
augmenté d’une unité.
Calculer le nombre N, N ou N� de microorganismes identifiés ou confirmésprésents dans l’échantillon pour essai,
E
en remplaçant�C par�a à l’aide des formules données respectivement en 9.3.5.2, 9.3.5.4.1, et 9.3.5.5.3.
Arrondir le résultat tel que décrit en 9.3.5.2.
Exprimer le résultat tel que prescrit respectivement en 9.3.5.2, 9.3.5.4.1, et 9.3.5.5.3.
EXEMPLE Un dénombrement a donné les résultats suivants:
–3
� à la première dilution (10 ) retenue: 66 colonies et 80 colonies;
–4
� à la deuxième dilution (10 ) retenue: 4 colonies et 7 colonies.
Ont été repiquées:
� pour 66 colonies: 8 colonies, dont 6 ont répondu aux critères; d’où a =50;
� po
...
Questions, Comments and Discussion
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