Animal feeding stuffs -- Qualitative determination of zearalenone

This International Standard specifies a qualitative method for the determination of zearalenone in animal feeding stuffs and, in particular, in maize. This method is for screening purposes only. The limit of determination of zearalenone is approximately 50 μg/kg . NOTE Although sorghum gives interfering fluorescent spots identical to those of zearalenone, the method is still applicable to this feed because Rf the values are different after development of the chromatogram in the second direction. These spots are not developed by the specified confirmation technique.

Aliments des animaux -- Dosage qualitatif de la zéaralénone

La présente Norme internationale spécifie une méthode qualitative de dosage de la zéaralénone dans les aliments des animaux et en particulier dans le maďs. Cette méthode ne sert qu'ŕ des fins de détection. La limite de détermination de la zéaralénone se situe aux environs de 50 μg/kg . NOTE Bien que le sorgho présente des taches parasites de fluorescence identiques ŕ celles de la zéaralénone, la méthode est applicable ŕ cet aliment, car les valeurs de Rf sont différentes aprčs le développement du chromatogramme dans la seconde direction. Ces taches ne sont pas révélées par la technique de confirmation spécifiée.

Krma - Kvalitativno določevanje zearalenona

General Information

Status
Published
Publication Date
29-May-2002
Current Stage
6060 - International Standard published
Start Date
08-Jan-2002
Completion Date
30-May-2002

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ISO 6870:2002 - Animal feeding stuffs -- Qualitative determination of zearalenone
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ISO 6870:2002
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ISO 6870:2002 - Aliments des animaux -- Dosage qualitatif de la zéaralénone
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 6870
Second edition
2002-04-15
Animal feeding stuffs — Qualitative
determination of zearalenone
Aliments des animaux — Dosage qualitatif de la zéaralénone
Reference number
ISO 6870:2002(E)
ISO 2002
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 6870:2002(E)
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© ISO 2002

All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,

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member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56  CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.ch
Web www.iso.ch
Printed in Switzerland
ii ISO 2002 – All rights reserved
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 6870:2002(E)
Foreword

ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO

member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical

committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has

the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in

liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical

Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.

International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 3.

Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting.

Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.

Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this International Standard may be the subject of

patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.

International Standard ISO 6870 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee

SC 10, Animal feeding stuffs.

This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 6870:1985), of which it constitutes a minor revision.

The title has been changed to stress that the method is only qualitative and the scope now states that the method is

for screening purposes only. The temperature range in 3.8.2 has been corrected to 0 °C to 5 °C.

Annex A of this International Standard is for information only.
ISO 2002 – All rights reserved iii
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 6870:2002(E)
Animal feeding stuffs — Qualitative determination of zearalenone
1 Scope

This International Standard specifies a qualitative method for the determination of zearalenone in animal feeding

stuffs and, in particular, in maize. This method is for screening purposes only.
The limit of determination of zearalenone is approximately 50µg/kg.

NOTE Although sorghum gives interfering fluorescent spots identical to those of zearalenone, the method is still applicable to this

feed because the R values are different after development of the chromatogram in the second direction. These spots are not

developed by the specified confirmation technique.
2 Principle

A test portion is extracted with a mixture of acetonitrile and potassium chloride solution, then filtered, and an aliquot

portion is defatted with isooctane, followed by purification in a mixture of acetonitrile, water and lead acetate in the

presence of diatomaceous earth. After filtration, an aliquot portion is extracted with chloroform which is subsequently

evaporated.

The dry extract is dissolved in a mixture of benzene and acetonitrile. Two-dimensional thin-layer chromatography is

performed on an aliquot portion of this solution. The zearalenone content is determined by visual measurement or by

measurement of the intensity of fluorescence of the spot under UV light by comparison with known quantities of

zearalenone applied to the same plate.

The identity of the zearalenone is confirmed using bis-diazotized benzidine reagent.

3Reagents

Use only reagents of recognized analytical grade and distilled or demineralized water or water of equivalent purity.

3.1 Acetonitrile.
3.2 Isooctane.
3.3 Chloroform.

WARNING — Chloroform is a toxic substance. Avoid inhalation of and exposure to chloroform. Work in a

fumehood when handling the solvent and solutions thereof.
98+ 2
3.4 Benzene/acetonitrile, mixture, by volume.

WARNING — Benzene is toxic by inhalation and contact with skin and is highly flammable.

3.5 Developing solvents.
3.5.1 Toluene/ethyl acetate/formic acid, 6+ 3+ 1 mixture, by volume.
3.5.2 Chlorofom/ethanol, 95+ 5 mixture, by volume.
3.6 Potassium chloride, 40 g/lsolution.
ISO 2002 – All rights reserved 1
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 6870:2002(E)
3.7 Lead acetate solution, prepared as follows.

Weigh 200 g of lead acetate into a 1 000 ml one-mark volumetric flask, add 3 ml of acetic acid, dilute to the mark with

water and mix.
3.8 Bis-diazotized benzidine reagent, prepared as follows.

WARNING — Benzidine is a carcinogen, and is toxic by inhalation, contact with the skin and ingestion.

3.8.1 Preparation of 5 g/l benzidine solution

Place 0,5 g of benzidine in a 100 ml flask containing 20 ml of water and 1,5 ml of hydrochloric acid and make up to

volume with water.
Keep this solution protected from light in a brown glass bottle.
3.8.2 Preparation of the reagent

Cool equal volumes of the benzidine solution (3.8.1) and of a 100 g/l sodium nitrite solution to between 0 C and

5 C.

Thoroughly mix the two solutions. The solution obtained is dark purple and turbid. Leave to attain room temperature

(yellow colour) before use.
Prepare this reagent just before use.
3.9 Diatomaceous earth (Celite 545), hydrochloric acid washed.
3.10 Nitrogen.
3.11 Zearalenone, standard solution of concentration 10µg/ml, in benzene.

Determine the absorption spectrum of the solution between 300 nm and 330 nm by means of a spectrometer, using

10 mm silica optical cells and using benzene as reference. Record the maximum absorbance, A, which is close to

317 nm.

Calculate the zearalenone concentration, in micrograms per millilitre, of the solution, by means of the formula

318×A× 1 000
6 060
where
318 is the molar mass of zearalenone;
6 060 is the molar extinction coefficient.
4 Apparatus
Usual laboratory equipment and, in particular, the following.

4.1 Grinder, suitable for preparing a product to pass completely through a sieve of aperture size 1mm.

4.2 Shaker, capable of producing about 100 oscillations per minute.

4.3 Filter papers, medium grade (a rapid grade filter paper gives a turbid solution; a slow grade filter paper will

become clogged).
2 ISO 2002 – All rights reserved
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 6870:2002(E)
4.4 Rotary evaporator with round bottom flask.

4.5 Apparatus for thin-layer chromatography, i.e. apparatus required for the preparation of the plates (4.6) and

application of spots (capillary pipettes or microsyringes), a developing tank, and apparatus for spraying the reagent

(3.8) on the plates.

4.6 Glass plates for thin-layer chromatography, of dimensions 200 mm× 200 mm, prepared as follows (the

quantities indicated are sufficient for the preparation of five plates).

Weigh 30 g of silica gel G-HR into a conical flask, add 60 ml of water, stopper and mix thoroughly for 1 min. Spread

the slurry over the plates in such a way that a uniform layer of thickness 0,25 mm is obtained. Allow to dry in air and

store the plates in a desiccator. Activate the plates before use by placing them in an oven, maintained at

◦ ◦
110 C± 3C1 for h.

Commercially available prepared plates may be used if the results obtained are comparable to the results obtained

with plates prepared as specified in the previous paragraph.
4.7 Short wavelength UV lamp (wavelength 253 nm).

The intensity of irradiation shall be such as to clearly distinguish a spot of 25 ng of zearalenone on thin-layer plate

when the lamp is placed at a distance of 100 mm from the plate.

WARNING — In view of the danger of UV light to the eyes, eye protection shall be worn.

4.8 Test tubes, of capacity 10 ml, with a polyethylene stopper.
4.9 Fluorodensitometer (optional, but desirable).
◦ ◦
4.10 Water bath, capable of being mainta
...

SLOVENSKI STANDARD
SIST ISO 6870:2002
01-november-2002
.UPD.YDOLWDWLYQRGRORþHYDQMH]HDUDOHQRQD
Animal feeding stuffs -- Qualitative determination of zearalenone
Aliments des animaux -- Dosage qualitatif de la zéaralénone
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 6870:2002
ICS:
65.120 Krmila Animal feeding stuffs
SIST ISO 6870:2002 en

2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

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SIST ISO 6870:2002
---------------------- Page: 2 ----------------------
SIST ISO 6870:2002
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 6870
Second edition
2002-04-15
Animal feeding stuffs — Qualitative
determination of zearalenone
Aliments des animaux — Dosage qualitatif de la zéaralénone
Reference number
ISO 6870:2002(E)
ISO 2002
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SIST ISO 6870:2002
ISO 6870:2002(E)
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ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO

member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical

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the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in

liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical

Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.

International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 3.

Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting.

Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.

Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this International Standard may be the subject of

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International Standard ISO 6870 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee

SC 10, Animal feeding stuffs.

This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 6870:1985), of which it constitutes a minor revision.

The title has been changed to stress that the method is only qualitative and the scope now states that the method is

for screening purposes only. The temperature range in 3.8.2 has been corrected to 0 °C to 5 °C.

Annex A of this International Standard is for information only.
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 6870:2002(E)
Animal feeding stuffs — Qualitative determination of zearalenone
1 Scope

This International Standard specifies a qualitative method for the determination of zearalenone in animal feeding

stuffs and, in particular, in maize. This method is for screening purposes only.
The limit of determination of zearalenone is approximately 50µg/kg.

NOTE Although sorghum gives interfering fluorescent spots identical to those of zearalenone, the method is still applicable to this

feed because the R values are different after development of the chromatogram in the second direction. These spots are not

developed by the specified confirmation technique.
2 Principle

A test portion is extracted with a mixture of acetonitrile and potassium chloride solution, then filtered, and an aliquot

portion is defatted with isooctane, followed by purification in a mixture of acetonitrile, water and lead acetate in the

presence of diatomaceous earth. After filtration, an aliquot portion is extracted with chloroform which is subsequently

evaporated.

The dry extract is dissolved in a mixture of benzene and acetonitrile. Two-dimensional thin-layer chromatography is

performed on an aliquot portion of this solution. The zearalenone content is determined by visual measurement or by

measurement of the intensity of fluorescence of the spot under UV light by comparison with known quantities of

zearalenone applied to the same plate.

The identity of the zearalenone is confirmed using bis-diazotized benzidine reagent.

3Reagents

Use only reagents of recognized analytical grade and distilled or demineralized water or water of equivalent purity.

3.1 Acetonitrile.
3.2 Isooctane.
3.3 Chloroform.

WARNING — Chloroform is a toxic substance. Avoid inhalation of and exposure to chloroform. Work in a

fumehood when handling the solvent and solutions thereof.
98+ 2
3.4 Benzene/acetonitrile, mixture, by volume.

WARNING — Benzene is toxic by inhalation and contact with skin and is highly flammable.

3.5 Developing solvents.
3.5.1 Toluene/ethyl acetate/formic acid, 6+ 3+ 1 mixture, by volume.
3.5.2 Chlorofom/ethanol, 95+ 5 mixture, by volume.
3.6 Potassium chloride, 40 g/lsolution.
ISO 2002 – All rights reserved 1
---------------------- Page: 6 ----------------------
SIST ISO 6870:2002
ISO 6870:2002(E)
3.7 Lead acetate solution, prepared as follows.

Weigh 200 g of lead acetate into a 1 000 ml one-mark volumetric flask, add 3 ml of acetic acid, dilute to the mark with

water and mix.
3.8 Bis-diazotized benzidine reagent, prepared as follows.

WARNING — Benzidine is a carcinogen, and is toxic by inhalation, contact with the skin and ingestion.

3.8.1 Preparation of 5 g/l benzidine solution

Place 0,5 g of benzidine in a 100 ml flask containing 20 ml of water and 1,5 ml of hydrochloric acid and make up to

volume with water.
Keep this solution protected from light in a brown glass bottle.
3.8.2 Preparation of the reagent

Cool equal volumes of the benzidine solution (3.8.1) and of a 100 g/l sodium nitrite solution to between 0 C and

5 C.

Thoroughly mix the two solutions. The solution obtained is dark purple and turbid. Leave to attain room temperature

(yellow colour) before use.
Prepare this reagent just before use.
3.9 Diatomaceous earth (Celite 545), hydrochloric acid washed.
3.10 Nitrogen.
3.11 Zearalenone, standard solution of concentration 10µg/ml, in benzene.

Determine the absorption spectrum of the solution between 300 nm and 330 nm by means of a spectrometer, using

10 mm silica optical cells and using benzene as reference. Record the maximum absorbance, A, which is close to

317 nm.

Calculate the zearalenone concentration, in micrograms per millilitre, of the solution, by means of the formula

318×A× 1 000
6 060
where
318 is the molar mass of zearalenone;
6 060 is the molar extinction coefficient.
4 Apparatus
Usual laboratory equipment and, in particular, the following.

4.1 Grinder, suitable for preparing a product to pass completely through a sieve of aperture size 1mm.

4.2 Shaker, capable of producing about 100 oscillations per minute.

4.3 Filter papers, medium grade (a rapid grade filter paper gives a turbid solution; a slow grade filter paper will

become clogged).
2 ISO 2002 – All rights reserved
---------------------- Page: 7 ----------------------
SIST ISO 6870:2002
ISO 6870:2002(E)
4.4 Rotary evaporator with round bottom flask.

4.5 Apparatus for thin-layer chromatography, i.e. apparatus required for the preparation of the plates (4.6) and

application of spots (capillary pipettes or microsyringes), a developing tank, and apparatus for spraying the reagent

(3.8) on the plates.

4.6 Glass plates for thin-layer chromatography, of dimensions 200 mm× 200 mm, prepared as follows (the

quantities indicated are sufficient for the preparation of five plates).

Weigh 30 g of silica gel G-HR into a conical flask, add 60 ml of water, stopper and mix thoroughly for 1 min. Spread

the slurry over the plates in such a way that a uniform layer of thickness 0,25 mm is obtained. Allow to dry in air and

store the plates in a desiccator. Activate the plates before use by placing them in an oven, maintained at

◦ ◦
110 C± 3C1 for h.

Commercially available prepared plates may be used if the results obtained are comparable to the results obtained

with plates prepared as specified in the previous paragraph.
4.7 Short wavelength UV lamp (wavelength 253 nm).
The intensity of irradiation shall be such as to clearly
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 6870
Deuxième édition
2002-04-15
Aliments des animaux — Dosage qualitatif
de la zéaralénone
Animal feeding stuffs — Qualitative determination of zearalenone
Numéro de référence
ISO 6870:2002(F)
ISO 2002
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 6870:2002(F)
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Imprimé en Suisse
ii ISO 2002 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 6870:2002(F)
Avant-propos

L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de

normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée aux

comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité

technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison

avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique

internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.

Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI, Partie 3.

Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour

vote. Leur publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres

votants.

L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments de la présente Norme internationale peuvent faire l'objet

de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas

avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.

La Norme internationale ISO 6870 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-

comité SC 10, Aliments des animaux.

Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 6870:1985), dont elle constitue une révision

mineure. Le titre a été modifé pour souligner le fait que la méthode n’est que qualitative, et dans le domaine

d’application il est maintenant spécifié que la méthode ne sert qu’à des fins de détection. La plage des températures

indiquée en 3.8.2 a été rectifiée pour lire 0 °C à 5 °C.

L'annexe A de la présente Norme internationale est donnée uniquement à titre d'information.

ISO 2002 – Tous droits réservés iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
NORME INTERNATIONALE ISO 6870:2002(F)
Aliments des animaux — Dosage qualitatif de la zéaralénone
1 Domaine d'application

La présente Norme internationale spécifie une méthode qualitative de dosage de la zéaralénone dans les aliments

des animaux et en particulier dans le maïs. Cette méthode ne sert qu'à des fins de détection.

La limite de détermination de la zéaralénone se situe aux environs de 50µg/kg.

NOTE Bien que le sorgho présente des taches parasites de fluorescence identiques à celles de la zéaralénone, la méthode est

applicable à cet aliment, car les valeurs de R sont différentes après le développement du chromatogramme dans la seconde

direction. Ces taches ne sont pas révélées par la technique de confirmation spécifiée.

2Principe

Extraction sur une prise d'essai par un mélange d'acétonitrile et de solution de chlorure de potassium. Filtration,

prélèvement d'une partie aliquote suivi d'une délipidation à l'iso-octane puis d'une purification dans un mélange

d'acétonitrile, d'eau et d'acétate de plomb en présence de terre de diatomées. Après filtration, prélèvement d'une

partie aliquote et extraction dans du chloroforme qui est ensuite évaporé.

Dissolution de l'extrait sec dans un mélange de benzène et d'acétonitrile et chromatographie bidimensionnelle sur

couche mince d'une partie aliquote de cette solution. Détermination de la teneur en zéaralénone par mesure visuelle

ou par mesure, à l'aide d'un fluorodensitomètre, de l'intensité de fluorescence de la tache examinée à la lumière UV,

par comparaison avec des quantités connues d'un étalon de zéaralénone placé sur la même plaque.

Confirmation de l'identité de la zéaralénone à l'aide d'un réactif à la benzidine bis-diazotée.

3Réactifs

Utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique reconnue et de l'eau distillée ou déminéralisée ou de l‘eau de

pureté équivalente.
3.1 Acétonitrile.
3.2 Iso-octane.
3.3 Chloroforme.

AVERTISSEMENT —Le chloroforme est une substance toxique. Éviter l’inhalation de chloroforme et

l’exposition au chloroforme. Travailler sous hotte ventilée lors de la manipulation du solvant ou de ses

solutions.
3.4 Mélange de benzène-acétonitrile, 98+ 2, en volume.

AVERTISSEMENT — Le benzène est une substance toxique par inhalation et contact avec la peau, et très

inflammable.
ISO 2002 – Tous droits réservés 1
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ISO 6870:2002(F)
3.5 Solvants de développement.
3.5.1 Mélange de toluène-acétate d'éthyle-acide formique, 6+ 3+ 1, en volume.
3.5.2 Mélange de chloroforme-éthanol, , 95+ 5en volume.
3.6 Chlorure de potassium, solution à .
40 g/l
3.7 Acétate de plomb, solution préparée comme suit.

Peser dans une fiole de 1 000 ml, 200 g d'acétate de plomb, ajouter 3 ml d'acide acétique, compléter au trait repère

avec de l'eau et homogénéiser.
3.8 Réactif à la benzidine bis-diazotée, préparé comme suit.

AVERTISSEMENT — La benzidine est une substance cancérogène très toxique par inhalation, contact avec

la peau et ingestion.
3.8.1 Préparation d'une solution de benzidine à 5 g/l

Mettre 0,5 g de benzidine dans une fiole de 100 ml contenant 20 ml d'eau et 1,5 ml d'acide chlorhydrique, puis

compléter avec de l'eau.

Conserver cette solution à l'abri de la lumière dans un flacon en verre inactinique.

3.8.2 Préparation du réactif
◦ ◦

Refroidir à une température comprise entre 0C5 et C des volumes égaux de la solution de benzidine (3.8.1) et

d'une solution de nitrite de sodium à .100 g/l

Mélanger avec soin les deux solutions. La solution obtenue est trouble et de couleur pourpre foncé. La laisser se

réchauffer à la température du laboratoire avant utilisation (solution de couleur jaune).

Préparer ce réactif extemporanément.
3.9 Terre de diatomées (Celite 545), lavée à l'acide chlorhydrique.
3.10 Azote.
3.11 Zéaralénone, solution étalon à 10µg/ml dans le benzène.

Déterminer le spectre d'absorption de la solution entre 300 nm et 330 nm, à l'aide d'un spectromètre, dans une cuve

en silice de 10 mm d'épaisseur, par rapport au benzène, et relever le maximum d'absorbance (A) qui est proche de

317 nm.

Calculer la concentration en zéaralénone, en microgrammes par millitre, de la solution, à l'aide de la formule

suivante:
318×A× 1 000
6 060
318 est la masse molaire de la zéaralénone;
6 060 est le coefficient d'extinction molaire.
2 ISO 2002 – Tous droits réservés
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ISO 6870:2002(F)
4 Appareillage
Matériel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit.

4.1 Broyeur, permettant d'obtenir un produit qui passe en totalité au travers d'un tamis de 1mm d'ouverture de

maille.
4.2 Agitateur, permettant d'obtenir environ 100 oscillations par minute.

4.3 Papier-filtre, à filtration moyenne (un papier à filtration rapide donne une solution trouble, et un papier à

filtration lente entraîne des colmatages).

4.4 Appareil rotatif à évaporation sous pression réduite avec ballon à fond rond.

4.5 Appareillage pour chromatographie sur couche mince, à savoir matériel nécessaire à la préparation des

plaques (4.6) et au dépôt des taches (pipettes capillaires ou microseringues), cuve de développement et appareil

pour pulvériser le réactif (3.8) sur les plaques.

4.6 Plaques de verre pour chromatographie sur couche mince, de dimensions 200 mm× 200 mm, préparées

comme suit (les quantités indiquées conviennent pour la préparation de cinq plaques).

Introduire 30 g de gel de silice G-HR dans une fiole conique, ajouter 60 ml d'eau, boucher et agiter pendant 1 min.

Étendre la suspension sur les plaques de manière à obtenir une couche uniforme de 0,25 mm d'épaisseur. Laisser

sécher à l'air et conserver ensuite les plaques dans un dessiccateur. Au moment de l'emploi, activer les plaques en

◦ ◦
les maintenant durant 1h dans l'étuve réglée à .110 C± 3 C

Les plaques prêtes à l'emploi conviennent dans la mesure où elles donnent des résultats semblables à ceux obtenus

avec des plaques préparées comme indiqué ci-dessus.
4.7 Lampe UV à ondes courtes (longueur d'onde 253 nm).

L'intensité d'irradiation doit permettre de distinguer encore nettement une tache de 25 ng de zéaralénone sur une

plaque pour chromatographie sur couche mince, à une distance de 100 mm de la lampe.

AVERTISSEMENT — La lumière UV étant dangereu
...

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