SIST ISO 10707:1997
(Main)Water quality -- Evaluation in an aqueous medium of the "ultimate" aerobic biodegradability of organic compounds -- Method by analysis of biochemical oxygen demand (closed bottle test)
Water quality -- Evaluation in an aqueous medium of the "ultimate" aerobic biodegradability of organic compounds -- Method by analysis of biochemical oxygen demand (closed bottle test)
Specifies a method, by analysis of biochemical oxygen demand, for the evaluation in an aqueous medium of the "ultimate" biodegradability of organic compounds at a given concentration by aerobic microorganisms. The method applies to all organic compounds which are sufficiently water soluble to prepare a stock solution or poorly water soluble when using special dosing techniques.
Qualité de l'eau -- Évaluation en milieu aqueux de la biodégradabilité aérobie "ultime" des composés organiques -- Méthode par analyse de la demande biochimique en oxygène (essai en fiole fermée)
La présente Norme internationale prescrit une méthode, par analyse de la demande biochimique en oxygène, d'évaluation de la biodégradabilité «ultime» de composés organiques présents à une concentration donnée sous l'action de micro-organismes aérobies. Les conditions décrites dans la présente Norme internationale ne correspondent pas nécessairement aux conditions optimales d'obtention de la biodégradation maximale. La méthode s'applique à tout composé organique suffisamment soluble dans l'eau pour préparer une solution mère ou peu soluble dans l'eau à l'aide de techniques de dosage particulières. En général, en raison de la faible concentration en composé à expérimenter au début de l'essai, il n'est pas nécessaire de prendre des précautions spéciales relatives à la toxicité du composé à expérimenter vis-à-vis des micro-organismes de l'inoculum. Si nécessaire, un essai d'inhibition peut être effectué en parallèle.
Kakovost vode - Vrednotenje popolne aerobne biološke razgradljivosti organskih snovi v vodnem okolju - Analiziranje biokemijske potrebe po kisiku (preskus v zaprtih steklenicah)
General Information
Relations
Buy Standard
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL
ISO
STANDARD
10707
First edition
1994-10-15
Water quality - Evaluation in an aqueous
medium of the “ultimate” aerobic
biodegradability of organic compounds -
Method by analysis of biochemical Oxygen
demand (closed bottle test)
Quake de I’eau - i%aluation en milieu aqueux de Ia biodegradabilitk
akobie wltime)) des composes organiques - Methode par analyse de
Ia demande biochimique en oxygkne (essai en fiole fermee)
Reference number
ISO 10707:1994(E)
---------------------- Page: 1 ----------------------
EO ?0707:1994(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide
federation of national Standards bodies (ISO member bodies). The work
of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Esch member body interested in a subject for
which a technical committee has been established has the right to be
represented on that committee. International organizations, governmental
and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO
collaborates closely with the International Electrotechnical Commission
(1 EC) on all matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are
circulated to the member bodies for voting. Publication as an International
Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting
a vote.
International Standard ISO 10707 was prepared by Technical Committee
lSO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 5, Biological methods.
Annexes A, B and C of this International Standard are for information only.
0 ISO 1994
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced
or utilized in any form or by any means, electronie or mechanicai, Inciudrng phorocopying and
mtcrofilm, without permrssion In writing from the publisher.
International Organization for Standardization
Case Postale 56 l CH-l 211 Geneve 20 l Switzerland
Printed rn Switzerland
ii
---------------------- Page: 2 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD 0 ISO
ISO 10707:1994(E)
Water quality - Evaluation in an aqueous medium of
the “ultimate” aerobic biodegradability of organic
compounds - Method by analysis of biochemical
Oxygen demand (closed bottle test)
WARNING - SAFETY PRECAUTIONS - Activated sludge and sewage may contain potentially
pathogenic organisms. Therefore appropriate precautions should be taken when handling them.
Toxic test compounds and those whose properties are unknown should be handled with care.
are subject to revision, and Parties to agreements
1 Scope
based on this International Standard are encouraged
to investigate the possibility of applying the most re-
This International Standard specifies a method, by
cent editions of the Standards indicated below.
analysis of biochemical Oxygen demand, for the
Members of IEC and ISO maintain registers of cur-
evaluation in an aqueous medium of the “ultimate”
rently valid International Standards.
biodegradability of organic compounds at a given
concentration by aerobic microorganisms.
ISO 58137 983, Water quality - Determination of
dissolved Oxygen - lodome tric me thod.
The conditions described in this International Standard
do not necessarily always correspond to the optimal
ISO 5814:1990, Water quality - Determination of
conditions for allowing the maximum value of bio-
dissolved Oxygen
- Electrochemical probe method.
degradation to occur.
ISO 60603 989, Water quality - Determination of the
The method applies to all organic compounds which
are sufficiently water soluble to prepare a stock sol- Chemical Oxygen demand.
ution or poorly water soluble when using special dos-
ISO 9887:1992, Water quality - Evaluation of the
ing techniques.
aerobic biodegradability of organic compounds in an
Due to the low concentration of test compound at the
aqueous medium - Semi-continuous activated
beginning of the test, normally no special precautions
sludge method (SCAS).
for the toxicity of the test compound to the micro-
oroanisms of the inoculum is necessary; if required a ISO 9888: 1991, Wa ter quality - Evaluation of the
parallel inhibition test tan be performed. aerobic biodegradability of organic compounds in an
aqueous medium
- Static test (Zahn-WeIlens
me thod).
2 Normative references
ISO 10304-2: --J), Water quality - Determination of
dissolved anions by liquid chromatography of ions -
The following Standards contain provisions which,
Part 2: Determination o f bromide, chloride, nitra te,
through reference in this text, constitute provisions
nitrite, orthophosphate and sulfite in vvaste vvater.
sf this International Standard. At the time of publi-
cation, the editions indicated were valid. All Standards
1) To be published.
---------------------- Page: 3 ----------------------
63 ISO
ISO 10707:1994(E)
ISO 10634:-IJ, Water quality - Guidance for the of dissolved Oxygen over a period of 28 d. The
amount of Oxygen taken up by the test Chemical
evaluation in an aqueous medium of the “ultjmate ”
soluble organic (BOD), corrected for uptake by the blank inoculum run
biodegradability of poorly
compounds. in parallel, is expressed as percentage of ThOD or
COD.
3 Definitions
5 Test environment
For the purposes of this International Standard, the
Incubation shall take place in the dark in an enclosure
following definitions apply.
which is maintained at a constant temperature (within
+ 1 “C) between 20 “C and 25 “C.
-
3.1 ultimate biodegradation: The level of degra-
dation achieved when the test compound is totally
utilized by microorganisms resulting in the production
6 Reagents
of carbon dioxide, water, mineral salts and new
microbial cellular constituents (biomass). Use only reagents of recognized analytical grade.
3.2 biochemical Oxygen demand (BOD): The mass
6.1 Water
concentration of dissolved Oxygen consumed under
specified conditions by the biological Oxidation of or-
Distilled or deionized water free from inhibitory con-
ganic and/or inorganic matter in water and is ex-
centrations of toxic substances containing less than
pressed in this case as milligrams of Oxygen uptake
10 % of the initial DOC content introduced by the
per milligram or gram of test compound.
compounds to be tested. For each series of tests, use
only one batch of water.
3.3 Chemical Oxygen demand (COD): The amount
of Oxygen consumed during Oxidation of a test com-
6.2 Test medium
pound with hot, acidic dichromate. lt provides a
measure of the amount of oxidizable matter present
and is expressed in this case as milligrams of Oxygen 6.2.1 Composition
consumed per milligram or gram of test compound.
6.2.1 . ‘l Solution a)
3.4 theoretical Oxygen demand (ThOD): The total
amount of Oxygen required to oxidize a Chemical
Anhydrous potassium dihydrogenphosphate
completely. lt is calculated from the molecular formula
KH,PO,) 65 g
and is expressed in this case as milligrams of Oxygen
Anhydrous dipotassium hydrogenphosphate
required per milligram or gram of test compound.
Zl,75 g
K2HP0,)
Disodium hydrogenphosphate dihydrate
3.5 pre-exposure (or pre-adaptation): The pre-
33,4 g
(Na,HPO,.ZH,O)
incubation of an inoculum in the presence of the test
Ammonium chloride (NH,CI)
Q5 g
compound, with the aim of enhancing the ability of
the inoculum to degrade the test compound. If the
Dissolve the ingredients in water (6.1) and make up
aim is achieved, the inoculum is said to be adapted.
to 1 000 ml.
3.6 pre-conditioning (or pre-acclimatization): The
NOTE ‘1 The correct composition of the medium tan be
pre-incubation of an inoculum under the conditions of
checked by the measurement of the pH-value, which should
the test in the absence of the test compound, to im- be 7.4.
prove the Performance of the test.
6.2.1.2 Solution b)
Dissolve 22,5 g of magnesium sulfate heptahydrate
4 Principle
(MgS0,.7H,O) in water (6.1) and dilute to 1 000 ml.
A Solution of the organic test compound in a mineral
medium as the sole Source of carbon and energy is
6.2A.3 Solution c)
inoculated with a relatively small number of micro-
Drssolve 27,5 g of anhydrous Calcium chlonde (CaCl,
organisms from a mixed population and kept in com-
pletely full, closed bottles in the dark at a constant or 36,4 g of calcrum chloride dihydrate iCaCl,.2H,O
temperature. Biodegradation is followed by analysis in water (6.11 and dilute to 1 000 ml.
2
---------------------- Page: 4 ----------------------
0 ISO ISO 10707:1994(E)
bottles (7.3) containing a known volume of test me-
6.2.1.4 Solution d)
dium (6.2.2) so that the final concentration of the
Dissolve 0,25 g of iron(lll) chloride hexahydrate Chemical is normally 2 mg/l. This concentration is in
(FeCI,.GH,O) in water (6.1) and dilute to 1 000 ml. general suitable to ensure that the concentration of
Oxygen does not fall below 0,5 mg/1 during the test
In Order to avoid having to prepare this Solution im-
and the inoculum activity is not limited. For poorly
mediately before use, add one drop of concentrated
biodegradable compounds and those with a low
hydrochloric acid (HCI) or 0,4 g of ethylenediamine-
ThOD, up to IO mg/1 may be used.
tetraacetic acid (EDTA) (disodium salt) per Iitre.
In some cases, for example if a poor or partial degra-
dation is expected, it would be advisable to run paral-
6.2.2 Preparation of the test medium
lel series of test Chemical at two different
For 1 litre of test medium, add 1 ml of each of the
concentrations, for example 2 mg/1 and 5 mg/l.
solutions a) to d) (6.2.1) to about 500 ml of water
Normally, calculate the ThOD on the basis of forma-
(6.1) and adjust the volume to 1 000 ml.
tion of ammonium salts but, if nitrification is expected
or known to occur, calculate the ThOD on the basis
Strongly aerate the test medium for at least 20 min.
of the formation of nitrate. However, if nitrification is
Carry out each series of tests with test medium de-
not complete but does occur, correct for the changes
rived from the same batch. Generally, the medium is
in concentration of nitrite and nitrate, determined by
ready for use after standing for 20 h at the test tem-
analysis (see annex C).
perature. Determine the concentration of dissolved
Oxygen for control purposes; the value should be
In the case of test compounds that are very poorly
about 9 mg/1 at 20 “C. Conduct all transfer and filling
soluble in water for which no stock Solution tan be
operations of the air-saturated medium bubble-free, prepared, add the test compound in the required
for example, by the use of Siphons. quantity directly to the BOD bottles (7.1). Use the
large bottles (7.3) only to add inoculated test medium
(6.2.2). Avoid loss of test medium and test compound
7 Apparatus
when stoppering the bottles. For alternatives or more
details see ISO 10634.
Usual laboratory equipment, and
8.2 Preparation of reference compound
with glass Stoppers, of c apacity
7.1 BOD bottles
The bottles tan be made airtight Solution
250 ml to 300 ml.
case, only grease which is free of
by greasing. In this
Prepare a stock Solution of a known biodegradable
hall be
organic carbon, for . example Silicon grease, s
organic substance, for example sodium acetate,
used.
sodium benzoate or aniline, in the test medium
(6.2.2). In the same way as with the test compound,
7.2 Water bath or incubator, for keeping bottles
add a sufficient amount of the stock Solution to the
at a constant test temperature with the exclusion of
.
large bottles (7.3) to give a test concentration of
Irght .
2 mg/l.
7.3 Large glass bottles, of capacity 2 litres to
8.3 Preparation of inhibition control
5 litres, for the preparation of media and for filling the
BOD bottles.
If the toxicity of the test compound is to be investi-
gated (for example in the case of a previous low bio-
meter, or equ ipmen t for
7.4 Oxygen electrode and
degradability value having been found), another series
iodo metric Oxygen determina tion.
of bottles is necessary. Prepare another large bottle
(7.3) containing aerated mineral medium plus test
7.5 pH-meter.
compound and reference compound at final concen-
trations that are the same as those in the other large
bottles. Add the mixture to the BOD bottles (7.1).
8 Procedure
8.4 Preparation of the inoculum
8.1 Preparation of test compound solution
In this test use an inoculum without sludge flocs. lt
Prepare a stock Solution of the test compound in wa-
should be derived from the secondary effluent 0% a
ter (6.1) or test medium (6.2.2) (e.g. i g/l). Add a suf-
treatment plant or laboratory-scale unit receiving pre-
ficient amount of the stock Solution to the large
3
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ISO %0707: ‘P994(E)
- at least IO bottles containing reference compound
dominantly domestic sewage or from surface watet-.
Mixtures from these different sources may also be and inoculum (FC);
used.
- at least IO bottles containing only inoculum (blank)
.
Collect a fresh Sample and keep it aerobic during
(FM I
transport. If suspended solids are present, allow to
settle for 1 h or filter through a coarse filter Paper and
and if necessary
keep the Sample under aerobic conditions until it is
required. - at least 6 bottles containing test compound, refer-
ence compound and inoculum (inhibition control)
Use a suitable volume of these samples, ranging from
.
F-1)
one drop (about 0,05 ml) up to 5 ml per litre, to in-
oculate the large bottles. Trials may be needed to Add fully aerated mineral medium (6.2.2) to large
discover the Optimum volume. If necessary, concen- bottles (7.3) so that they are about one-third full. Then
trate the inoculum by filtration or centrifugation. add a sufficient amount of the stock solutions of the
test compound and reference compound to separate
NOTES
large bottles to resch the desired final concentration
of the chemicals. DO not add any chemicals to the
Suitable volume means:
blank control medium contained in another large bot-
tle. Inoculate the large bottles with a suitable volume
sufficient to give a population which offers enough bio-
of inoculum (8.4), dilute the solutions to volume with
degradation activity,
aerated test mediu
...
SLOVENSKI STANDARD
SIST ISO 10707:1997
01-avgust-1997
Kakovost vode - Vrednotenje popolne aerobne biološke razgradljivosti organskih
snovi v vodnem okolju - Analiziranje biokemijske potrebe po kisiku (preskus v
zaprtih steklenicah)
Water quality -- Evaluation in an aqueous medium of the "ultimate" aerobic
biodegradability of organic compounds -- Method by analysis of biochemical oxygen
demand (closed bottle test)
Qualité de l'eau -- Évaluation en milieu aqueux de la biodégradabilité aérobie "ultime"
des composés organiques -- Méthode par analyse de la demande biochimique en
oxygène (essai en fiole fermée)
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 10707:1994
ICS:
13.060.70 Preiskava bioloških lastnosti Examination of biological
vode properties of water
SIST ISO 10707:1997 en
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.
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SIST ISO 10707:1997
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SIST ISO 10707:1997
INTERNATIONAL
ISO
STANDARD
10707
First edition
1994-10-15
Water quality - Evaluation in an aqueous
medium of the “ultimate” aerobic
biodegradability of organic compounds -
Method by analysis of biochemical Oxygen
demand (closed bottle test)
Quake de I’eau - i%aluation en milieu aqueux de Ia biodegradabilitk
akobie wltime)) des composes organiques - Methode par analyse de
Ia demande biochimique en oxygkne (essai en fiole fermee)
Reference number
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Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide
federation of national Standards bodies (ISO member bodies). The work
of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Esch member body interested in a subject for
which a technical committee has been established has the right to be
represented on that committee. International organizations, governmental
and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO
collaborates closely with the International Electrotechnical Commission
(1 EC) on all matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are
circulated to the member bodies for voting. Publication as an International
Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting
a vote.
International Standard ISO 10707 was prepared by Technical Committee
lSO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 5, Biological methods.
Annexes A, B and C of this International Standard are for information only.
0 ISO 1994
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced
or utilized in any form or by any means, electronie or mechanicai, Inciudrng phorocopying and
mtcrofilm, without permrssion In writing from the publisher.
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ISO 10707:1994(E)
Water quality - Evaluation in an aqueous medium of
the “ultimate” aerobic biodegradability of organic
compounds - Method by analysis of biochemical
Oxygen demand (closed bottle test)
WARNING - SAFETY PRECAUTIONS - Activated sludge and sewage may contain potentially
pathogenic organisms. Therefore appropriate precautions should be taken when handling them.
Toxic test compounds and those whose properties are unknown should be handled with care.
are subject to revision, and Parties to agreements
1 Scope
based on this International Standard are encouraged
to investigate the possibility of applying the most re-
This International Standard specifies a method, by
cent editions of the Standards indicated below.
analysis of biochemical Oxygen demand, for the
Members of IEC and ISO maintain registers of cur-
evaluation in an aqueous medium of the “ultimate”
rently valid International Standards.
biodegradability of organic compounds at a given
concentration by aerobic microorganisms.
ISO 58137 983, Water quality - Determination of
dissolved Oxygen - lodome tric me thod.
The conditions described in this International Standard
do not necessarily always correspond to the optimal
ISO 5814:1990, Water quality - Determination of
conditions for allowing the maximum value of bio-
dissolved Oxygen
- Electrochemical probe method.
degradation to occur.
ISO 60603 989, Water quality - Determination of the
The method applies to all organic compounds which
are sufficiently water soluble to prepare a stock sol- Chemical Oxygen demand.
ution or poorly water soluble when using special dos-
ISO 9887:1992, Water quality - Evaluation of the
ing techniques.
aerobic biodegradability of organic compounds in an
Due to the low concentration of test compound at the
aqueous medium - Semi-continuous activated
beginning of the test, normally no special precautions
sludge method (SCAS).
for the toxicity of the test compound to the micro-
oroanisms of the inoculum is necessary; if required a ISO 9888: 1991, Wa ter quality - Evaluation of the
parallel inhibition test tan be performed. aerobic biodegradability of organic compounds in an
aqueous medium
- Static test (Zahn-WeIlens
me thod).
2 Normative references
ISO 10304-2: --J), Water quality - Determination of
dissolved anions by liquid chromatography of ions -
The following Standards contain provisions which,
Part 2: Determination o f bromide, chloride, nitra te,
through reference in this text, constitute provisions
nitrite, orthophosphate and sulfite in vvaste vvater.
sf this International Standard. At the time of publi-
cation, the editions indicated were valid. All Standards
1) To be published.
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63 ISO
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ISO 10634:-IJ, Water quality - Guidance for the of dissolved Oxygen over a period of 28 d. The
amount of Oxygen taken up by the test Chemical
evaluation in an aqueous medium of the “ultjmate ”
soluble organic (BOD), corrected for uptake by the blank inoculum run
biodegradability of poorly
compounds. in parallel, is expressed as percentage of ThOD or
COD.
3 Definitions
5 Test environment
For the purposes of this International Standard, the
Incubation shall take place in the dark in an enclosure
following definitions apply.
which is maintained at a constant temperature (within
+ 1 “C) between 20 “C and 25 “C.
-
3.1 ultimate biodegradation: The level of degra-
dation achieved when the test compound is totally
utilized by microorganisms resulting in the production
6 Reagents
of carbon dioxide, water, mineral salts and new
microbial cellular constituents (biomass). Use only reagents of recognized analytical grade.
3.2 biochemical Oxygen demand (BOD): The mass
6.1 Water
concentration of dissolved Oxygen consumed under
specified conditions by the biological Oxidation of or-
Distilled or deionized water free from inhibitory con-
ganic and/or inorganic matter in water and is ex-
centrations of toxic substances containing less than
pressed in this case as milligrams of Oxygen uptake
10 % of the initial DOC content introduced by the
per milligram or gram of test compound.
compounds to be tested. For each series of tests, use
only one batch of water.
3.3 Chemical Oxygen demand (COD): The amount
of Oxygen consumed during Oxidation of a test com-
6.2 Test medium
pound with hot, acidic dichromate. lt provides a
measure of the amount of oxidizable matter present
and is expressed in this case as milligrams of Oxygen 6.2.1 Composition
consumed per milligram or gram of test compound.
6.2.1 . ‘l Solution a)
3.4 theoretical Oxygen demand (ThOD): The total
amount of Oxygen required to oxidize a Chemical
Anhydrous potassium dihydrogenphosphate
completely. lt is calculated from the molecular formula
KH,PO,) 65 g
and is expressed in this case as milligrams of Oxygen
Anhydrous dipotassium hydrogenphosphate
required per milligram or gram of test compound.
Zl,75 g
K2HP0,)
Disodium hydrogenphosphate dihydrate
3.5 pre-exposure (or pre-adaptation): The pre-
33,4 g
(Na,HPO,.ZH,O)
incubation of an inoculum in the presence of the test
Ammonium chloride (NH,CI)
Q5 g
compound, with the aim of enhancing the ability of
the inoculum to degrade the test compound. If the
Dissolve the ingredients in water (6.1) and make up
aim is achieved, the inoculum is said to be adapted.
to 1 000 ml.
3.6 pre-conditioning (or pre-acclimatization): The
NOTE ‘1 The correct composition of the medium tan be
pre-incubation of an inoculum under the conditions of
checked by the measurement of the pH-value, which should
the test in the absence of the test compound, to im- be 7.4.
prove the Performance of the test.
6.2.1.2 Solution b)
Dissolve 22,5 g of magnesium sulfate heptahydrate
4 Principle
(MgS0,.7H,O) in water (6.1) and dilute to 1 000 ml.
A Solution of the organic test compound in a mineral
medium as the sole Source of carbon and energy is
6.2A.3 Solution c)
inoculated with a relatively small number of micro-
Drssolve 27,5 g of anhydrous Calcium chlonde (CaCl,
organisms from a mixed population and kept in com-
pletely full, closed bottles in the dark at a constant or 36,4 g of calcrum chloride dihydrate iCaCl,.2H,O
temperature. Biodegradation is followed by analysis in water (6.11 and dilute to 1 000 ml.
2
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SIST ISO 10707:1997
0 ISO ISO 10707:1994(E)
bottles (7.3) containing a known volume of test me-
6.2.1.4 Solution d)
dium (6.2.2) so that the final concentration of the
Dissolve 0,25 g of iron(lll) chloride hexahydrate Chemical is normally 2 mg/l. This concentration is in
(FeCI,.GH,O) in water (6.1) and dilute to 1 000 ml. general suitable to ensure that the concentration of
Oxygen does not fall below 0,5 mg/1 during the test
In Order to avoid having to prepare this Solution im-
and the inoculum activity is not limited. For poorly
mediately before use, add one drop of concentrated
biodegradable compounds and those with a low
hydrochloric acid (HCI) or 0,4 g of ethylenediamine-
ThOD, up to IO mg/1 may be used.
tetraacetic acid (EDTA) (disodium salt) per Iitre.
In some cases, for example if a poor or partial degra-
dation is expected, it would be advisable to run paral-
6.2.2 Preparation of the test medium
lel series of test Chemical at two different
For 1 litre of test medium, add 1 ml of each of the
concentrations, for example 2 mg/1 and 5 mg/l.
solutions a) to d) (6.2.1) to about 500 ml of water
Normally, calculate the ThOD on the basis of forma-
(6.1) and adjust the volume to 1 000 ml.
tion of ammonium salts but, if nitrification is expected
or known to occur, calculate the ThOD on the basis
Strongly aerate the test medium for at least 20 min.
of the formation of nitrate. However, if nitrification is
Carry out each series of tests with test medium de-
not complete but does occur, correct for the changes
rived from the same batch. Generally, the medium is
in concentration of nitrite and nitrate, determined by
ready for use after standing for 20 h at the test tem-
analysis (see annex C).
perature. Determine the concentration of dissolved
Oxygen for control purposes; the value should be
In the case of test compounds that are very poorly
about 9 mg/1 at 20 “C. Conduct all transfer and filling
soluble in water for which no stock Solution tan be
operations of the air-saturated medium bubble-free, prepared, add the test compound in the required
for example, by the use of Siphons. quantity directly to the BOD bottles (7.1). Use the
large bottles (7.3) only to add inoculated test medium
(6.2.2). Avoid loss of test medium and test compound
7 Apparatus
when stoppering the bottles. For alternatives or more
details see ISO 10634.
Usual laboratory equipment, and
8.2 Preparation of reference compound
with glass Stoppers, of c apacity
7.1 BOD bottles
The bottles tan be made airtight Solution
250 ml to 300 ml.
case, only grease which is free of
by greasing. In this
Prepare a stock Solution of a known biodegradable
hall be
organic carbon, for . example Silicon grease, s
organic substance, for example sodium acetate,
used.
sodium benzoate or aniline, in the test medium
(6.2.2). In the same way as with the test compound,
7.2 Water bath or incubator, for keeping bottles
add a sufficient amount of the stock Solution to the
at a constant test temperature with the exclusion of
.
large bottles (7.3) to give a test concentration of
Irght .
2 mg/l.
7.3 Large glass bottles, of capacity 2 litres to
8.3 Preparation of inhibition control
5 litres, for the preparation of media and for filling the
BOD bottles.
If the toxicity of the test compound is to be investi-
gated (for example in the case of a previous low bio-
meter, or equ ipmen t for
7.4 Oxygen electrode and
degradability value having been found), another series
iodo metric Oxygen determina tion.
of bottles is necessary. Prepare another large bottle
(7.3) containing aerated mineral medium plus test
7.5 pH-meter.
compound and reference compound at final concen-
trations that are the same as those in the other large
bottles. Add the mixture to the BOD bottles (7.1).
8 Procedure
8.4 Preparation of the inoculum
8.1 Preparation of test compound solution
In this test use an inoculum without sludge flocs. lt
Prepare a stock Solution of the test compound in wa-
should be derived from the secondary effluent 0% a
ter (6.1) or test medium (6.2.2) (e.g. i g/l). Add a suf-
treatment plant or laboratory-scale unit receiving pre-
ficient amount of the stock Solution to the large
3
---------------------- Page: 7 ----------------------
SIST ISO 10707:1997
ISO %0707: ‘P994(E)
- at least IO bottles containing reference compound
dominantly domestic sewage or from surface watet-.
Mixtures from these different sources may also be and inoculum (FC);
used.
- at least IO bottles containing only inoculum (blank)
.
Collect a fresh Sample and keep it aerobic during
(FM I
transport. If suspended solids are present, allow to
settle for 1 h or filter through a coarse filter Paper and
and if necessary
keep the Sample under aerobic conditions until it is
required. - at least 6 bottles containing test compound, refer-
ence compound and inoculum (inhibition control)
Use a suitable volume of these samples, ranging from
.
F-1)
one drop (about 0,05 ml) up to 5 ml per litre, to in-
oculate the large bottles. Trials may be needed to Add fully aerated mineral medium (6.2.2) to large
discover the Optimum volu
...
NORME IS0
I NTER NAT I O NALE
"I 0707
Première édition
1994-1 0-1 5
Qualité de l'eau - Évaluation en milieu
aqueux de la biodégradabilité aérobie
wltime,, des composés organiques -
Méthode par analyse de la demande
biochimique en oxygène (essai en fiole
fermée)
Water quality - Evaluation in an aqueous medium of the "ultimate "
aerobic biodegradability of organic compounds - Method by analysis of
biochemical oxygen demand (closed bottle test)
Numéro de reference
IS0 10707:1994(F)
---------------------- Page: 1 ----------------------
IS0 10707:1994(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d'organismes nationaux de normalisation (comités membres de
I'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de I'ISO. Chaque comité membre intéressé par une
étude a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les
organisations internationales, gouvernementales et non gouvernemen-
tales, en liaison avec I'ISO participent également aux travaux. L'ISO colla-
bore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI)
en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques
sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l'approbation de 75 YO au moins des co-
mités membres votants.
La Norme internationale IS0 10707 a été élaborée par le comité technique
lSO/TC 147, Qualité de /'eau, sous-comité SC 5, Méthodes biologiques.
Les annexes A, B et C de la présente Norme internationale sont données
uniquement à titre d'information.
Q IS0 1994
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publi-
cation ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun pro-
céd6, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord
écrit de I'éditeur.
Organisation internationale de normalisation
Case Postale 56 CH-1 21 1 Genève 20 Suisse
Version française tide en 1995
Imprimé en Suisse
II
---------------------- Page: 2 ----------------------
NORME INTERNATIONALE 0 IS0 IS0 10707:1994(F)
Qualité de l'eau - Évaluation en milieu aqueux de la
biodégradabilité aérobie wltimell des composés
organiques - Méthode par analyse de la demande
biochimique en oxygène (essai en fiole fermée)
AVERTISSEMENT - PRÉCAUTIONS DE SÉCURITÉ - Les boues activées et les eaux d'égout
peuvent contenir des organismes potentiellement pathogènes. II convient donc de prendre des
précautions appropriées en les manipulant. II convient de manipuler avec précaution les composés
toxiques et ceux dont on ne connaît pas les propriétés.
tuent des dispositions valables pour la présente
1 Domaine d'application
Norme internationale. Au moment de la publication,
les éditions indiquées étaient en vigueur. Toute
La présente Norme internationale prescrit une mé-
norme est sujette à révision et les parties prenantes
thode, par analyse de la demande biochimique en
des accords fondés sur la présente Norme internatio-
oxygène, d'évaluation de la biodégradabilité ((ultime))
nale sont invitées à rechercher la possibilité d'appli-
de composés organiques présents à une concen-
quer les éditions les plus récentes des normes
tration donnée sous l'action de micro-organismes aé-
indiquées ci-après. Les membres de la CE1 et de I'ISO
robies.
possèdent le registre des Normes internationales en
Les conditions décrites dans la présente Norme vigueur à un moment donné.
internationale ne correspondent pas nécessairement
IS0 5813:1983, Qualité de l'eau - Dosage de
aux conditions optimales d'obtention de la biodégra-
l'oxygène dissous - Méthode iodométrique.
dation maximale.
La méthode s'applique à tout composé organique
IS0 5814:1990, Qualité de l'eau - Dosage de
suffisamment soluble dans l'eau pour préparer une
l'oxygène dissous - Méthode électrochimique à la
solution mère ou peu soluble dans l'eau à l'aide de
sonde.
techniques de dosage particulières.
IS0 6060:1989, Qualité de l'eau - Détermination de
En général, en raison de la faible concentration en
la demande chimique en oxygène.
composé à expérimenter au début de l'essai, il n'est
pas nécessaire de prendre des précautions spéciales
IS0 9887:1992, Qualité de l'eau - Évaluation, en mi-
relatives à la toxicité du composé à expérimenter y&
lieu aqueux, de la biodégradabilité aérobie des com-
à-vis des micro-oraanismes de I'inoculum. Si néces-
posés organiques - Méthode semi-continue par
saire, un essai d'inhibition peut être effectué en
boues activées (Méthode SCAS).
parallèle.
IS0 9888:1991, Qualité de l'eau - Évaluation, en mi-
lieu aqueux, de la biodégradabilité aérobie des com-
posés organiques - Essai statique (Méthode
2 Références normatives
Zahn- Wellens).
Les normes suivantes contiennent des dispositions
qui, par suite de la référence qui en est faite, consti-
1
---------------------- Page: 3 ----------------------
Q IS0
IS0 10707:1994(F)
d'essai, mais en l'absence du composé à expérimen-
IS0 10304-2:--", Qualité de l'eau - Dosage des
ter, destinée à améliorer l'efficacité de l'essai.
anions dissous par chromatographie des ions en
phase liquide - Partie 2: Dosage des ions bromure,
chlorure nitrate, nitrite, orthophosphate et sulfate
4 Principe
dans les eaux usées.
Une solution du composé organique à expérimenter
IS0 10634:--", Qualité de l'eau - Lignes directrices
en milieu minéral constituant la seule source de car-
pour la préparation et le traitement des composés or-
bone et d'énergie est inoculée à l'aide d'un nombre
ganiques peu solubles dans l'eau en vue de l'éva-
relativement faible de micro-organismes provenant
luation de leur biodégradabilité en milieu aqueux.
d'une population mixte, et conservée à température
constante, à l'obscurité, dans des fioles fermées
complètement remplies. La biodégradation est suivie
3 Définitions
à l'aide d'une analyse de l'oxygène dissous sur une
période de 28 jours. La quantité d'oxygène consom-
Pour les besoins de la présente Norme internationale,
mée par la substance chimique à expérimenter (DBO),
les définitions suivantes s'appliquent.
après correction par comparaison avec le contrôle de
I'inoculum effectué en parallèle, est exprimée en
3.1 biodégradation ultime: Niveau de dégradation
pourcentage de la DThO ou de la DCO.
atteint lorsque le composé soumis à l'essai a été to-
talement transformé par les micro-organismes en
dioxyde de carbone, eau, sels minéraux et nouveaux
5 Environnement d'essai
constituants cellulaires microbiens (biomasse).
L'incubation doit être menée à l'obscurité dans une
3.2 demande biochimique en oxygène (DBO):
enceinte maintenue à température constante
Concentration en masse de l'oxygène dissous
(-t 1 OC) comprise entre 20 "C et 25 "C.
consommé, dans des conditions définies, lors de
l'oxydation biologique de matières organiques et/ou
inorganiques contenues dans l'eau. Elle s'exprime ici
6 Réactifs
en milligrammes d'oxygène consommé par milli-
gramme ou par gramme de composé à expérimenter.
Utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique
reconnue.
3.3 demande chimique en oxygène (DCO): Quan-
tité d'oxygène consommée lors de l'oxydation d'un
6.1 Eau
composé à expérimenter avec du dichromate acide à
chaud. Elle permet de mesurer la quantité de matières
Eau distillée ou déionisée exempte de concentrations
oxydables présentes et s'exprime ici en milligrammes
inhibitrices de substances toxiques contenant moins
d'oxygène consommé par milligramme ou par
de 10 % de la concentration initiale en COD apporté
gramme de composé à expérimenter.
par le composé à expérimenter. Pour chaque série
d'essais, n'utiliser qu'un seul volume d'eau.
3.4 demande théorique en oxygène (DThO):
Quantité totale d'oxygène nécessaire pour oxyder
complètement une substance chimique. Elle se cal-
6.2 Milieu d'essai
cule à partir de la formule moléculaire, et est expri-
mée ici en milligrammes d'oxygène requis par
6.2.1 Composition
milligramme ou par gramme de composé à expéri-
menter.
6.2.1.1 Solution a)
3.5 préexposition (ou préadaptation): Préincu-
Dihydrogenophosphate de potassium anhydre
bation d'un inoculum en présence du composé à ex-
(KHZPO,) 83 g
périmenter, destinée à accroître l'aptitude de
Monohydrogenophosphate de potassium
I'inoculum à dégrader le composé. Si ce but est at-
anhydre (K2HP0,) 21,75 g
teint, I'inoculum est considéré comme adapté.
Monohydrogenophosphate de sodium
dihydrate (Na2HP0,,2H,0)
33,4 g
3.6 préconditionnement (ou préacclimatation):
Chlorure d'ammonium (NH,CI)
Preincubation d'un inoculum dans les conditions 05 g
1) A publier
2
---------------------- Page: 4 ----------------------
m
0 IS0 IS0 10707:1994(F)
7.2 Bain d'eau ou incubateur, permettant de
Dissoudre les composants dans l'eau (6.1) et com-
maintenir les fioles à température d'essai constante
pléter à 1 O00 ml.
et à l'abri de la lumière.
NOTE 1 La composition correcte du milieu peut être ve-
rifiée en mesurant la valeur du pH. Il convient que cette
7.3 Fioles de grande capacité en verre, de 2 litres
valeur soit de 7.4.
à 5 litres, pour la préparation du milieu et le remplis-
sage des fioles DBO.
6.2.1.2 Solution bl
Dissoudre dans l'eau (6.1) 22,5 g de sulfate de ma-
7.4 Échelle de mesure et électrode à oxygène, ou
gnésium heptahydraté (MgS0,,7H,O) et compléter à
appareillage et réactifs pour dosage de Winkler.
1 O00 MI.
6.2.1.3 Solution c) 7.5 pH-mètre.
Dissoudre 27,5 g de chlorure de calcium anhydre
(CaCI,) ou 36,4 g de chlorure de calcium dihydraté
8 Mode opératoire
(CaC1,,2H20) dans l'eau (6.1) et compléter à
1 O00 ml.
8.1 Préparation de la solution du compose
à expérimenter
6.2.1.4 Solution d)
Préparer une solution mère du composé à expéri-
Dissoudre 0,25 g de chlorure de fer(lll) hexahydrate
menter dans de l'eau (6.1) ou dans le milieu d'essai
(FeCI3,6H,O) dans l'eau (6.1) et compléter à
(6.2.2) (par exemple 1 g/l). Ajouter une quantité suffi-
1 O00 MI.
sante de la solution mère dans les fioles de grande
Pour éviter d'avoir à préparer cette solution juste
capacité (7.3) contenant un volume connu du milieu
avant l'emploi, ajouter une goutte d'acide chlorhy-
d'essai (6.2.2) de sorte que la concentration finale de
drique concentré (HCI) ou 0,4 g/l d'acide
la substance chimique soit de 2 mg/l. Cette concen-
éthylènediaminetétraacétique (EDTA) (sel disodique).
tration permet en general de garantir que la concen-
tration en oxygène ne tombe pas pendant la durée de
6.2.2 Préparation du milieu d'essai l'essai au dessous de 0,5 mg/l et que l'activité de
I'inoculum ne soit pas limitée. Pour les composés peu
Pour 1 litre de milieu d'essai, ajouter à 500 mI d'eau
biodégradables et ceux ayant une faible DThO, on
(6,1), 1 ml de chacune des solutions a) à d) (6.2.1) et peut utiliser jusqu'à 1 O mg/l.
compléter le volume à 1 O00 ml.
Dans certains cas, par exemple si on s'attend à ce
Bien a&er le milieu d'essai pendant 20 min au moins.
que le taux de dégradation soit faible ou partiel, il est
Effectuer chaque série d'essais avec un milieu d'essai
conseillé d'effectuer en parallèle une série d'essais
provenant du même lot. En général, le milieu est prêt
de la substance chimique à deux concentrations dif-
à l'emploi après l'avoir décanté pendant 20 h à la
férentes, par exemple 2 mg/l et 5 mg/l. En général, la
température d'essai. Déterminer la concentration en DThO est calculée sur la base de la formation de sels
oxygène dissous pour vérification; il convient que la d'ammonium mais, si une nitrification est susceptible
valeur soit d'environ 9 mg/l à 20 OC. Mener toutes les
de se produire, ou attendue, calculer la DThO sur la
opérations de transfert et de remplissage des fioles
base de la formation de nitrate. Cependant, si la
avec le milieu saturé d'air et exempt de bulles en uti-
nitrification se produit, mais de façon incomplète,
lisant des siphons, par exemple.
corriger les modifications de concentration en nitrite
et nitrate, déterminées par l'analyse (voir annexe C).
7 Appareillage
Dans le cas de composés très peu solubles dans l'eau
pour lesquels la préparation de solutions mères n'est
Matériel courant de laboratoire, et
pas possible, ajouter la quantité requise de composé
à expérimenter dans les fioles DBO. N'utiliser les
7.1 Fioles DBO munies de bouchons en verre, fioles de grande capacité (7.3) que pour ajouter du
d'une capacité de 250 ml à 300 ml. Les fioles peuvent milieu d'essai inoculé (6.2.2). Éviter toute perte de
être rendues étanches à l'air par graissage. Dans ce milieu d'essai et de composé à expérimenter en bou-
cas, utiliser une graisse exempte de carbone organi- chant les fioles. Pour des techniques alternatives ou
que, par exemple une graisse de silicium. des compléments d'information, voir I'ISO 10634.
3
---------------------- Page: 5 ----------------------
E
Q IS0
IS0 10707:1994(F)
3 Si la consommation d'oxyghne dans les fioles pour es-
8.2 Préparation du composé de référence
sais 8 blanc ne contenant pas de composé à expérimenter
est trop élevée (> 1,5 mg/l 8 la fin de l'essai), il est recom-
Préparer dans le milieu d'essai (6.2.2) une solution
mandé de procéder 8 un préconditionnement en aérant
mère d'une substance organique de biodégradabilité
l'inoculum pendant 1 jour 8 7 jours. Ceci peut permettre de
connue tel que l'acétate de sodium, le benzoate de
réduire la consommation en oxygbne des micro-organismes
sodium ou l'aniline. De même que pour le composé
présents dans le blanc.
d'essai, ajouter une quantité suffisante de la solution
mère dans les fioles de grande capacité (7.3) de façon 4 Dans certaines circonstances, il est admis d'utiliser des
inocula préexposés, 8 condition que cela soit clairement
à obtenir une concentration d'essai de 2 mg/l.
mentionné dans les résultats d'essai (par exemple, pour-
centage de biodégradation = x %, avec inocula préexposés),
8.3 Préparation du contrôle de l'inhibition et que la méthode de préexposition soit détaillée dans le
rapport d'essai. Des inocula préexposés peuvent être obte-
nus 8 partir d'essais de biodégradation en laboratoire effec-
Si la toxicité du composé à expérimenter doit être
tués dans différentes conditions, selon le cas [par exemple,
évaluée (par exemple, en présence d'une valeur de
essai de Zahn-Wellens (IS0 9888) ou essai SCAS
biodégradabilité faible préalablement obtenue), il est
(IS0 988711 ou à partir d'échantillons prélevés à des empla-
nécessaire de procéder à une nouvelle série d'essais.
cements où sont réunies les conditions d'environnement
Dans une autre fiole de grande capacité (7.31, préparer
appropriées (par exemple, usine assurant le traitement de
une solution contenant un milieu minéral aéré, le
composés identiques ou zone contaminée).
composé à expérimenter et le composé de référence,
à des concentrations finales normalement identiques
à celles des autres fioles de grande capacité. Ajouter
8.5 Préparation des fioles d'essai
le mélange dans les fioles DBO (7.1).
Préparer pour la détermination, des groupes de fioles
DBO en parallèle incluant le composé à expérimenter
8.4 Préparation de I'inoculum
et le composé de référence, le contrôle d'inhibition
Pour cet essai, utiliser un inoculum sans flocs de et le contrôle à blanc, pour des séries menées simul-
boue. II convient qu'il provienne de l'effluent secon- tanément. Rassembler un nombre suffisant de fioles
DBO afin de permettre d'effectuer au moins des me-
daire d'une usine de traitement des eaux résiduaires
surages en double de la consommation en oxygène,
ou d'un laboratoire traitant principalement des eaux
à la fréquence souhaitée, en général au moins après
usées domestiques ou des eaux de surface. Un mé-
O jour, 7 jours, 14 jours, 21 jours et 28 jours.
lange de ces différentes sources peut également être
utilisé.
Une série type comprend les fioles suivantes:
Prélever un échantillon et le conserver dans des
- au moins 10 fioles contena
...
NORME
Iso
INTERNATIONALE
10707
Première édition
1994-10-15
Qualité de l’eau - Évaluation en milieu
aqueux de la biodégradabilité aérobie
«ultime» des composés organiques -
Méthode par analyse de la demande
biochimique en oxygène (essai en fiole
fermée)
Wa ter quality - Evaluation in an aqueous medium of the “ultima te ”
aerobic biodegradability of organic compounds - Method by analysis of
biochemical oxygen demand (closed bo ttle test)
Numéro de référence
ISO 10707:1994(F)
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ISO 10707:1994(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de
I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre intéressé par une
étude a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les
organisations internationales, gouvernementales et non gouvernemen-
tales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO colla-
bore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI)
en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques
sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des co-
mités membres votants.
La Norme internationale ISO 10707 a été élaborée par le comité technique
lSO/TC 147, Qualité de l’eau, sous-comité SC 5, Méthodes biologiques.
Les annexes A, B et C de la présente Norme internationale sont données
uniquement à titre d’information.
0 ISO 1994
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publi-
cation ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun pro-
cédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord
écrit de l’éditeur.
Organisation internationale de normalisation
l CH-121 1 Genève 20 l Suisse
Case Postale 56
Version française tirée en 1995
Imprimé en Suisse
ii
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ISO 10707:1994(F)
NORME INTERNATIONALE 0 ISO
Évaluation en milieu aqueux de la
Qualité de l’eau -
biodégradabilité aérobie «ultime» des composés
organiques - Méthode par analyse de la demande
biochimique en oxygène (essai en fiole fermée)
AVERTISSEMENT - PRÉCAUTIONS DE SÉCURITÉ - Les boues activées et les eaux d’égout
peuvent contenir des organismes potentiellement pathogènes. II convient donc de prendre des
précautions appropriées en les manipulant. II convient de manipuler avec précaution les composés
toxiques et ceux dont on ne connaît pas les propriétés.
tuent des dispositions valables pour la présente
1 Domaine d’application
Norme internationale. Au moment de la publication,
les éditions indiquées étaient en vigueur. Toute
La présente Norme internationale prescrit une mé-
norme est sujette à révision et les parties prenantes
thode, par analyse de la demande biochimique en
des accords fondés sur la présente Norme internatio-
oxygène, d’évaluation de la biodégradabilité «ultime»
nale sont invitées à rechercher la possibilité d’appli-
de composés organiques présents à une concen-
quer les éditions les plus récentes des normes
tration donnée sous l’action de micro-organismes aé-
indiquées ci-après. Les membres de la CEI et de I’ISO
robies.
possèdent le registre des Normes internationales en
vigueur à un moment donné.
Les conditions décrites dans la présente Norme
internationale ne correspondent pas nécessairement
ISO 5813:1983, Qualité de l’eau - Dosage de
aux conditions optimales d’obtention de la biodégra-
l’oxygène dissous - Méthode iodométrique.
dation maximale.
La méthode s’applique à tout composé organique ISO 5814:1990, Qualité de l’eau - Dosage de
suffisamment soluble dans l’eau pour préparer une l’oxygène dissous - Méthode électrochimique à la
solution mère ou peu soluble dans l’eau à l’aide de
sonde.
techniques de dosage particulières.
ISO 6060:1989, Qualité de l’eau - Détermination de
En général, en raison de la faible concentration en
la demande chimique en oxygène.
composé à expérimenter au début de l’essai, il n’est
pas nécessaire de prendre des précautions spéciales
ISO 9887:1992, Qualité de l’eau - Évaluation, en mi-
relatives à la toxicité du composé à expérimenter vis-
lieu aqueux, de la biodégradabilité aérobie des com-
à-vis des micro-orqanismes de I’inoculum. Si néces-
posés organiques -
Méthode semi-con tinue par
saire, un essai d’inhibition peut être effectué en
boues activées (Méthode SCAS).
parallèle.
ISO 9888:1991, Qualité de l’eau - Évaluation, en mi-
lieu aqueux, de la biodégradabilité aérobie des com-
posés organiques -
Essai statique (Méthode
2 Références normatives
Zahn- Wellens).
Les normes suivantes contiennent des dispositions
qui, par suite de la référence qui en est faite, consti-
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0 ISO
ISO 10707:1994(F)
d’essai, mais en l’absence du composé à expérimen-
ISO 10304-2:-1), Qualité de l’eau - Dosage des
ter, destinée à améliorer l’efficacité de l’essai.
anions dissous par chromatographie des ions en
phase liquide - Partie 2: Dosage des ions bromure,
chlorure nitrate, nitrite, orthophosphate et sulfate
4 Principe
dans les eaux usées.
Une solution du composé organique à expérimenter
ISO 10634:- ‘), Qualité de l’eau - Lignes directrices
en milieu minéral constituant la seule source de car-
pour la préparation et le traitement des composés or-
bone et d’énergie est inoculée à l’aide d’un nombre
ganiques peu solubles dans l’eau en vue de I’éva-
relativement faible de micro-organismes provenant
luation de leur biodégradabilité en milieu aqueux.
d’une population mixte, et conservée à température
constante, à l’obscurité, dans des fioles fermées
complètement remplies. La biodégradation est suivie
3 Définitions
à l’aide d’une analyse de l’oxygène dissous sur une
période de 28 jours. La quantité d’oxygène consom-
Pouf les besoins de la présente Norm e internationale,
mée par la substance chimique à expérimenter (DBO),
les défin itions suivantes s’appliquent.
après correction par comparaison avec le contrôle de
I’inoculum effectué en parallèle, est exprimée en
3.1 biodégradation ultime: Niveau de dégradation
pourcentage de la DThO ou de la DCO.
atteint lorsque le composé soumis à l’essai a été to-
talement transformé par les micro-organismes en
dioxyde de carbone, eau, sels minéraux et nouveaux
5 Environnement d’essai
constituants cellulaires microbiens (biomasse).
L’incubation doit être menée à l’obscurité dans une
3.2 demande biochimique en oxygène (DBO):
enceinte maintenue à température
constante
Concentration en masse de l’oxygène dissous
(+ 1 “C) comprise entre 20 “C et 25 “C.
-
consommé, dans des conditions définies, lors de
l’oxydation biologique de matières organiques et/ou
inorganiques contenues dans l’eau. Elle s’exprime ici
6 Réactifs
en milligrammes d’oxygène consommé par milli-
gramme ou par gramme de composé à expérimenter.
Utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique
reconnue.
3.3 demande chimique en oxygène (DCO): Quan-
tité d’oxygène consommée lors de l’oxydation d’un
6.1 Eau
composé à expérimenter avec du dichromate acide à
chaud. Elle permet de mesurer la quantité de matières
Eau distillée ou déionisée exempte de concentrations
oxydables présentes et s’exprime ici en milligrammes
inhibitrices de substances toxiques contenant moins
d’oxygène consommé par milligramme ou par
de 10 % de la concentration initiale en COD apporté
gramme de composé à expérimenter.
par le composé à expérimenter. Pour chaque série
d’essais, n’utiliser qu’un seul volume d’eau.
3.4 demande théorique en oxygène (DThO):
Quantité totale d’oxygène nécessaire pour oxyder
complètement une substance chimique. Elle se cal- 6.2 Milieu d’essai
cule à partir de la formule moléculaire, et est expri-
mée ici en milligrammes d’oxygène requis par
6.2.1 Composition
milligramme ou par gramme de composé à expéri-
menter.
6.2.1 .l Solution a)
3.5 préexposition (ou préadaptation): Préincu-
Dihydrogénophosphate de potassium anhydre
bation d’un inoculum en présence du composé à ex-
KH,PO,)
8,s g
périmenter, destinée à accroître l’aptitude de
Monohydrogénophosphate de potassium
I’inoculum à dégrader le composé. Si ce but est at-
anhydre (K,HPO,)
21,75 g
teint, I’inoculum est considéré comme adapté.
Monohydrogénophosphate de sodium
dihydraté (Na,HP0,,2H,O)
3384 g
3.6 préconditionnement (ou préacclimatation):
Chlorure d’ammonium (NH,CI)
Préincubation d’un inoculum dans les conditions
0,5 g
1) À publier.
2
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0 ISO ISO 10707:1994(F)
7.2 Bain d’eau ou incubateur, permettant de
Dissoudre les composants dans l’eau (6.1) et com-
maintenir les fioles à température d’essai constante
pléter à 1 000 ml.
et à l’abri de la lumière.
NOTE 1 La composition correcte du milieu peut être vé-
rifiée en mesurant la valeur du pH. II convient que cette
7.3 Fioles de grande capacité en verre, de 2 litres
valeur soit de 7,4.
à 5 litres, pour la préparation du milieu et le remplis-
sage des fioles DBO.
6.2.1.2 Solution b)
Dissoudre dans l’eau (6.1) 22’5 g de sulfate de ma-
7.4 Échelle de mesure et électrode à oxygène, ou
gnésium heptahydraté (MgSO,,7H,O) et compléter à
appareillage et réactifs pour dosage de Winkler.
1 000 ml.
6.2.1.3 Solution c) 7.5 pH-mètre.
Dissoudre 27’5 g de chlorure de calcium anhydre
(CaCI,) ou 36,4 g de chlorure de calcium dihydraté
8 Mode opératoire
(CaCl,,2H,O) dans l’eau (6.1) et compléter à
1 000 ml.
8.1 Préparation de la solution du composé
à expérimenter
6.2.1.4 Solution d)
Préparer une solution mère du composé à expéri-
Dissoudre OI25 g de chlorure de fer(lll) hexahydraté
menter dans de l’eau (6.1) ou dans le milieu d’essai
ans l’eau (6.1) et compléter à
(FeCI,,GH,O) d
(6.2.2) (par exemple 1 g/l). Ajouter une quantité suffi-
1 000 ml.
sante de la solution mère dans les fioles de grande
Pour éviter d’avoir à préparer cette solution juste
capacité (7.3) contenant un volume connu du milieu
avant l’emploi, ajouter une goutte d’acide chlorhy-
d’essai (6.2.2) de sorte que la concentration finale de
(HCI) ou OI4 g/l d’acide
drique concentré
la substance chimique soit de 2 mg/l. Cette concen-
éthylènediaminetétraacétique (EDTA) (sel disodique).
tration permet en général de garantir que la concen-
tration en oxygène ne tombe pas pendant la durée de
l’essai au dessous de OI5 mg/1 et que l’activité de
6.2.2 Préparation du milieu d’essai
I’inoculum ne soit pas limitée. Pour les composés peu
Pour 1 litre de milieu d’essai, ajouter à 500 ml d’eau biodégradables et ceux ayant une faible DThO, on
(6.1) 1 ml de chacune des solutions a) à d) (6.2.1) et peut utiliser jusqu’à 10 mg/l.
compléter le volume à 1 000 ml.
Dans certains cas, par exemple si on s’attend à ce
Bien aérer le milieu d’essai pendant 20 min au moins. que le taux de dégradation soit faible ou partiel, il est
Effectuer chaque série d’essais avec un milieu d’essai conseillé d’effectuer en parallèle une série d’essais
provenant du même lot. En général, le milieu est prêt de la substance chimique à deux concentrations dif-
à l’emploi après l’avoir décanté pendant 20 h à la
férentes, par exemple 2 mg/1 et 5 mg/l. En général, la
température d’essai. Déterminer la concentration en DThO est calculée sur la base de la formation de sels
oxygène dissous pour vérification; il convient que la d’ammonium mais, si une nitrification est susceptible
valeur soit d’environ 9 mg/1 à 20 “C. Mener toutes les de se produire, ou attendue, calculer la DThO sur la
opérations de transfert et de remplissage des fioles base de la formation de nitrate. Cependant, si la
avec le milieu saturé d’air et exempt de bulles en uti-
nitrification se produit, mais de façon incomplète,
lisant des siphons, par exemple.
corriger les modifications de concentration en nitrite
et nitrate, déterminées par l’analyse (voir annexe C).
7 Appareillage
Dans le cas de composés très peu solubles dans l’eau
pour lesquels la préparation de solutions mères n’est
Matériel courant de laboratoire, et
pas possible, ajouter la quantité requise de composé
à expérimenter dans les fioles DBO. N’utiliser les
fioles de grande capacité (7.3) que pour ajouter du
7.1 Fioles DB0 munies de bouchons en verre,
milieu d’essai inoculé (6.2.2). Éviter toute perte de
d’une capacité de 250 ml à 300 ml. Les fioles peuvent
milieu d’essai et de composé à expérimenter en bou-
être rendues étanches à l’air par graissage. Dans ce
cas, utiliser une graisse exempte de carbone organi- chant les fioles. Pour des techniques alternatives ou
que, par exemple une graisse de silicium. des compléments d’information, voir I’ISO 10634.
3
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0 ISO
ISO 10707:1994(F)
3 Si la consommation d’oxygène dans les fioles pour es-
8.2 Préparation du composé de référence
sais a blanc ne contenant pas de composé à expérimenter
est trop élevée (> 1,5 mg/1 a la fin de l’essai), il est recom-
Préparer dans le milieu d’essai (6.2.2) une solution
mande de procéder à un préconditionnement en aérant
mère d’une substance organique de biodégradabilité
I’inoculum pendant 1 jour à 7 jours. Ceci peut permettre de
connue tel que l’acétate de sodium, le benzoate de
réduire la consommation en oxygéne des micro-organismes
sodium ou I’aniline. De même que pour le composé
présents dans le blanc.
d’essai, ajouter une quantité suffisante de la solution
mère dans les fioles de grande capacité (7.3) de façon 4 Dans certaines circonstances, il est admis d’utiliser des
inocula préexposés, a condition que cela soit clairement
à obtenir une concentration d’essai de 2 mg/l.
mentionne dans les résultats d’essai (par exemple, pour-
centage de biodégradation = x %, avec inocula préexposés),
et que la méthode de préexposition soit détaillée dans le
8.3 Préparation du contrôle de l’inhibition
rapport d’essai. Des inocula préexposés peuvent être obte-
nus a partir d’essais de biodégradation en laboratoire effec-
Si la toxicité du composé à expérimenter doit être
tués dans différentes conditions, selon le cas [par exemple,
évaluée (par exemple, en présence d’une valeur de
essai de Zahn-Wellens (ISO 9888) ou essai SCAS
biodégradabilité faible préalablement obtenue), il est
(ISO 9887)] ou a partir d’échantillons prélevés à des empla-
nécessaire de procéder à une nouvelle série d’essais.
cements où sont réunies les conditions d’environnement
Dans une autre fiole de grande capacité (7.3)’ préparer
appropriées (par exemple, usine assurant le traitement de
une solution contenant un milieu minéral aéré, le
composés identiques ou zone contaminée).
composé à expérimenter et le composé de référence,
à des concentrations finales normalement identiques
à celles des autres fioles de grande capacité. Ajouter
8.5 Préparation des fioles d’essai
le mélange dans les fioles DB0 (7.1).
Préparer .pour la détermination, des groupes de fioles
DB0 en parallèle incluant le composé à expérimenter
8.4 Préparation de I’inoculum
et le composé de référence, le contrôle d’inhibition
et le contrôle à blanc, pour des séries menées simul-
Pour cet essai, utiliser un inoculum sans flots de
boue. II convient qu’il provienne de I’effluent secon- tanément. Rassembler un nombre suffisant de fioles
DB0 afin de permettre d’effectuer au moins des me-
daire d’une usine de traitement des eaux résiduaires
surages en double de la consommation en oxygène,
ou d’un laboratoire traitant principalement des eaux
à la fréquence souhaitée, en général au moins après
usées domestiques ou des eaux de surface. Un mé-
0 jour, 7 jours, 14 jours, 21 jours et 28 jours.
lange de ces différentes sources peut également être
utilisé.
Une série type comprend les fioles suivantes:
Prélever un échantillon et le conserver dans des
- au moins 10 fioles contenant le composé à expé-
conditions aérobies pendant le transport. S’il contient
rimenter et I’inoculum (FT);
des
...
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