SIST ISO 11734:1998
(Main)Water quality -- Evaluation of the "ultimate" anaerobic biodegradability of organic compounds in digested sludge -- Method by measurement of the biogas production
Water quality -- Evaluation of the "ultimate" anaerobic biodegradability of organic compounds in digested sludge -- Method by measurement of the biogas production
Gives a method for the evaluation of the ultimate biodegradability of organic compounds in digested sludge at a given concentration by anaerobic microorganisms.
Qualité de l'eau -- Évaluation de la biodégradabilité anaérobie "ultime" des composés organiques dans les boues de digesteurs -- Méthode par mesurage de la production de biogaz
Kakovost vode - Vrednotenje popolne anaerobne biološke razgradljivosti organskih snovi v pregnitem blatu - Metoda z merjenjem pridelave bioplina
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SLOVENSKI STANDARD
SIST ISO 11734:1998
01-januar-1998
Kakovost vode - Vrednotenje popolne anaerobne biološke razgradljivosti
organskih snovi v pregnitem blatu - Metoda z merjenjem pridelave bioplina
Water quality -- Evaluation of the "ultimate" anaerobic biodegradability of organic
compounds in digested sludge -- Method by measurement of the biogas production
Qualité de l'eau -- Évaluation de la biodégradabilité anaérobie "ultime" des composés
organiques dans
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 11734
Premiére édition
1995-12-15
Qualité de l’eau - Évaluation de la
biodégradabilité anaérobie «ultime» des
composés organiques dans les boues de
digesteurs - Méthode par mesurage de la
production de biogaz
Wa ter quality - Evaluation of the “ultima te ” anaerobic biodegradability
of organic compounds in digested sludge - Method by measurement of
the biogas production
Numéro de réfbrence
ISO 11734:1995(F)
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 11734:1995(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de
I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre intéressé par une
étude a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les
organisations internationales, gouvernementales et non gouvernemen-
tales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO colla-
bore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI)
en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques
sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des co-
mités membres votants.
La Norme internationale ISO 11734 a été élaborée par le comité technique
lSO/TC 147, Qualité de l’eau, sous-comité SC 5, Méthodes biologiques.
Les annexes A, B, C et D de la présente Norme internationale sont don-
nées uniquement à titre d’information.
0 ISO 1995
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publi-
cation ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun pro-
cédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord
écrit de l’éditeur.
internationale de normali
Organisation sation
Case Postale 56 l CH-121 1 G enève 2 0 l Suisse
Imprimé en Suisse
ii
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NORME INTERNATIONALE 0 BO
60 11734:1995(F)
Qualité de l’eau - Évaluation de la biodégradabilité
anaérobie «ultime» des composés organiques dans les
boues de digesteurs - Méthode par mesurage de la
production de biogaz
AVERTISSEMENT
- Les boues provenant d’eaux usées peuvent contenir des organismes
potentiellement pathogènes. II convient donc de manipuler de telles boues avec les précautions
appropriées. La digestion de ces boues d’eaux usées produit des gaz inflammables présentant des
risques d’explosion et d’incendie. II convient donc de prendre des précautions lors du transport et
du stockage de ces boues. Les substances chimiques d’essai toxiques ou celles dont les propriétés
ne sont pas connues doivent être manipulées avec soin. Le manomètre et les microseringues
doivent être manipulées avec précaution afin d’éviter les blessures pouvant être causées par les
aiguilles. Les aiguilles contaminées doivent être éliminées en prenant toutes les précautions
nécessaires.
- n’ont pas d’effet inhibiteur sur les micro-
1 Domaine d’application
organismes d’essai aux concentrations choisies
pour l’essai; les effets inhibiteurs peuvent être
La présente Norme internationale prescrit une mé-
déterminés par des essais séparés ou par un té-
thode de tri pour l’évaluation de la biodégradabilité
moin supplémentaire de l’inhibition.
des composés organiques à des concentrations don-
nées sous l’effet de micro-organismes anaérobies. Pour les substances volatiles, une décision au cas par
Les conditions décrites dans le présent essai ne cor- cas est nécessaire. Certaines peuvent être soumises
respondent par nécessairement aux conditions opti- à l’essai si elles sont manipulées avec précaution,
males permettant d’obtenir une biodégradation
comme d’éviter par exemple tout dégagement de
maximale, dans la mesure où une boue diluée est .
gaz
utilisée avec une substance chimique d’essai à une
concentration relativement élevée. L’essai permet
une exposition de la boue à la substance chimique
2 Références normatives
pendant une période pouvant aller jusqu’à 60 jours,
durée supérieure au temps de rétention normal des
Les normes suivantes contiennent des dispositions
boues (25 jours à 30 jours) dans les digesteurs
qui, par suite de la référence qui en est faite, consti-
anaérobies, bien que des digesteurs sur les sites in-
tuent des dispositions valables pour la présente
dustriels puissent avoir des temps de rétention supé-
Norme internationale. Au moment de la publication,
neurs.
les éditions indiquées étaient en vigueur. Toute
norme est sujette à révision et les parties prenantes
La méthode est applicable à des composés organi-
des accords fondés sur la présente Norme internatio-
ques de teneur en carbone connue et qui
nale sont invitées à rechercher la possibilité d’appli-
quer les éditions les plus récentes des normes
- sont solubles dans l’eau;
indiquées ci-après. Les membres de la CEI et de I’ISO
- sont peu solubles dans l’eau, à condition qu’une possèdent le registre des Normes internationales en
méthode de dosage exact soit applicable; vigueur à un moment donné.
1
---------------------- Page: 3 ----------------------
0 ISO
ISO 11734:1995(F)
(CH,). Une quantité importante de dioxyde de carbone
ISO 1063411995, Qualité de l’eau - Lignes directri-
ces pour la préparation et le traitement des composés est dissoute dans l’eau et transformée en hydrogé-
organiques peu solubles dans l’eau en vue de nocarbonate ou en carbonate dans les conditions de
l‘évaluation de leur biodégradabilité en milieu aqueux. l’essai. Ce carbone inorganique (CI) est mesuré à la
fin de l’essai.
ISO 11923:- 1), Qualité de l’eau - Dosage des ma-
Calcul de la quantité de carbone produite par action
tières en suspension par filtration sur filtre en fibres
microbiologique à partir de la production nette de gaz
de verre.
et de la formation nette de Cl en excès par rapport
aux valeurs à blanc. Calcul du taux de biodégradation
3 Définitions
à partir de la formation de Cl total et de la quantité
mesurée ou calculée de carbone ajouté comme com-
Pour les besoins de la présente Norme internationale,
posé à expérimenter.
les définitions suivantes s’appliquent.
Le processus de biodégradation peut être suivi en ef-
3.1 biodégradation anaérobie ultime: Niveau de
fectuant des mesurages intermédiaires de la produc-
dégradation atteint lorsque le composé à expérimen-
tion de gaz uniquement. En outre, la biodégradation
ter a été totalement transformé par les micro-
primaire peut être déterminée par analyse spécifique
organismes anaérobies en dioxyde de carbone,
au début et à la fin de l’essai.
méthane, sels minéraux et nouveaux constituants
cellulaires microbiens (biomasse).
5 Environnement d’essai
3.2 biodégradation anaérobie primaire: Niveau de
dégradation atteint lorsque le composé à expérimen- L’incubation doit être menée dans des récipients
hermétiquement clos, à une température constante
ter a subi sous l’action de micro-organismes
de 35 “C + 2 “C, température normale de digesteur
anaérobies, une transformation structurelle quelcon- -
anaérobie, en l’absence d’oxygène et, au départ, en
que autre que la minéralisation complète.
atmosphère azotée pure.
3.3 boue de digesteurs: Mélange des phases
décantées d’eaux usées et de boues activées, qui a
6 Réactifs
été incubé dans un digesteur anaérobie à environ
35 “C afin de réduire la biomasse et les problèmes
6.1 Eau distillée ou déionisée, contenant moins de
d’odeur et d’améliorer la déshydratation de la boue.
2 mg/1 de COD.
La boue de digesteurs contient un ensemble de bac-
téries anaérobies de fermentation et méthanogènes
produisant du dioxyde de carbone et du méthane.
6.2 Milieu d’essai.
3.4 concentration en matières solides totales:
6.2.1 Milieu
Quantité de matières solides obtenues par séchage
d’un volume connu de boue, dans des conditions dé-
Utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique
finies, à environ 105 “C jusqu’à masse constante.
reconnue. Préparer un milieu dilué contenant les
constituants suivants aux quantités indiquées.
4 Principe
Dihydrogénophosphate de potassium
Dilution à partir de boue de digesteurs lavée conte- anhydre (KH,PO,)
027 g
nant du carbone inorganique (CI) en quantité très fai-
Monohydrogénophosphate de sodium
ble, à une concentration en matières solides totales
dodécahydraté (Na,HPO,,12H,O) Ll2 g
de 1 g/l à 3 g/l et incubation à 35 “C + 2 “C dans des
Chlorure d’ammonium (NH,(J)
0’53 g
récipients hermétiquement clos en présence d’une
substance chimique d’essai à une concentration en Chlorure de calcium dihydraté
0,075 g
carbone organique (CO) de 20 mg/1 à 100 mg/1 pen- (CaCl,,2H,O)
dant une période pouvant aller jusqu’à 60 jours.
Chlorure de magnésium hexahydraté
(MgCI,,GH,O) OJO g
Mesurage, dans l’espace de tête des récipients d’es-
Chlorure de fer(ll) tétrahydraté
sai, de l’augmentation de la pression due à la produc-
(FeCl,,4H,O)
tion de dioxyde de carbone (CO,) et de méthane ao2 g
1) À publier.
2
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0 ISO ISO 11734:1995(F)
inhibiteur vis-à-vis de la production de méthane, tel
Résazurine (indicateur d’oxygène) 0,001 g
que le chloroforme ou le tétrachlorure de carbone.
Sulfure de sodium nonahydraté
(Na,S,SH,O) (voir note 1)
OJ g NOTE 2 Si des solvants sont utilisés, un témoin conte-
nant le solvant seul est recommandé.
Solution mère d’éléments traces
10 ml
(facultative)
6.4 Substances de référence
1 litre
Eau désoxygénée (6.1), q.s.p.
Des substances de référence telles que le benzoate
Afin d’atteindre des conditions anaérobies, faire pas-
de sodium, le phénol ou le polyéthylène glycol 400
ser un courant d’azote dans le milieu pendant 20 min
sont permises. Ces substances sont censées pré-
immédiatement avant l’utilisation afin d’éliminer
senter un taux de biodégradation supérieur à 60 %.
l’oxygène.
Préparer une solution mère suivant la même méthode
que pour le composé à expérimenter.
Si nécessaire, ajuster le pH à 7 & 0,2, à l’aide d’une
solution d’acide minéral ou de base.
6.5 Témoin de l’inhibition (facultatif)
NOTE 1 Utiliser du sulfure de sodium préparé extem-
Ajouter, dans un récipient contenant le milieu d’essai
poranément ou le laver et le sécher avant utilisation, afin
d’assurer une capacité de réduction suffisante. (6.2), le composé à expérimenter et la substance de
référence en concentrations identiques à celles ajou-
tées en (6.3) et, respectivement, (6.4).
6.2.2 Solution mère d’éléments traces
(facultative)
6.6 Boue de digesteurs
II est recommandé d’ajouter au milieu d’essai les élé-
Recueillir la boue de digesteurs dans le digesteur
ments traces suivants afin d’améliorer les processus
d’une usine de traitement des eaux usées spécialisée
de dégradation anaérobie, notamment lorsque des
dans le traitement des eaux usées domestiques. Uti-
concentrations faibles en inoculum sont utilisées.
liser des flacons à col large en polyéthylène haute
densité ou tout matériau similaire pouvant se dilater.
Chlorure de manganèse tétrahydraté
(MnCl,,4H,O)
0,05 g
AVERTISSEMENT - Pour des raisons de sécurité,
Acide orthoborique (H,BO,) 0,005 g
l’usage du verre doit être exclu.
Chlorure de zinc (ZnCI,) 0,005 g
Remplir les flacons jusqu’à 1 cm du bord supérieur
Chlorure de cuivre(ll) (CuCI,) 0,003 g
et les fermer hermétiquement. Après leur transport
Molybdate disodique dihydraté
au laboratoire, les utiliser directement ou les placer
(Na,MoO,,2H,O) 0,001 g
dans un digesteur de laboratoire. Libérer l’excès de
Chlorure de cobalt hexahydraté
biogaz.
(C0CI,,6H*0)
or1 g
Une boue anaérobie préparée en laboratoire peut
Chlorure de nickel hexahydraté
également être utilisée comme inoculum.
(NiCI,,GH,O) w1 g
Envisager de prédigérer la boue afin de réduire toute
Sélénite disodique (Na,SeO,) 0,005 g
production de gaz non spécifique et diminuer I’influ-
Eau (6.1), q.s.p. 1 litre
ence des blancs. Laisser la boue digérer sans ajouter
de nutriments ou de substrats, à 35 “C + 2 “C pen-
6.3 Composé à expérimenter
dant 7 jours maximum.
Ajouter le composé à expérimenter sous forme de
NOTE 3 II a été démontré qu’une prédigestion d’environ
solution mère, suspension ou émulsion, ou direc-
5 jours donne une diminution optimale de la production de
tement sous forme solide ou liquide afin d’obtenir une
gaz du blanc sans donner lieu à un allongement inacceptable
concentration d’essai en carbone organique de des temps de latente ou d’incubation durant l’essai.
100 mg/l. Si les solutions mères sont utilisées, pré-
parer avec de l’eau (6.1) une solution appropriée Pour les composés à expérimenter dont on sait qu’ils
suffisament concentrée pour que le volume ajouté sont faiblement biodégradables, envisager une pré-
soit inférieur à 5 % du volume total du mélange réac- exposition de la boue à la substance à expérimenter
tif. Pour les composés à expérimenter qui ne sont pas afin d’obtenir un inoculum mieux adapté. Dans ce cas,
suffisamment solubles dans l’eau, se référer à ajouter la substance d’essai à une concentration en
I’ISO 10634, mais ne pas utiliser un solvant organique carbone organique comprise entre 5 mg/1 et 20 mg/1
3
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ISO 11734:1995(F)
à la boue de digesteurs. Laver soigneusement la boue aussi faible que possible, de sorte que les erreurs in-
troduites en négligeant le volume de l’appareillage
prédigérée avant l’utilisation. Indiquer la préexposition
dans le rapport d’essai. soient non significatives.
7.4 Analyseur de carbone, approprié pour le do-
6.7 Inoculum
sage direct du carbone inorganique dans une gamme
Laver la boue (6.6) juste avant l’utilisation afin de ré-
de concentrations allant de 1 mg/1 à 200 mg/l.
duire la concentration en Cl à moins de 10 mg/1 dans
la solution d’essai finale, en centrifugeant d’abord les
8 Mode opératoire
tubes hermétiquement clos à une vitesse relative-
ment faible (par exemple 3 000 g) jusqu’à 5 min.
Effectuer les étapes préliminaires suivantes tout en
Mettre en suspension les matières solides dans un
veillant à ce que le contact entre la boue digérée et
milieu d’essai sans oxygène (6.21, centrifuger et reje-
l’oxygène soit aussi faible que possible, par exemple
ter les lavages. Si la concentration en Cl n’a pas suf-
en travaillant avec une boîte à gants dans une atmos-
fisamment diminué, laver la boue jusqu’à deux fois.
phère azotée, ou en purgeant les flacons avec de
Finalement, mettre en suspension les matières soli-
l’azote.
des dans le volume requis de milieu d’essai et déter-
miner la concentration en matières solides totales
8.1 Préparation des échantillons pour essai
(3.4). La concentration finale en matières solides dans
et des échantillons témoins
les récipients d’essai doit être de 1 g/l à 3 g/l. Mener
ces opérations de sorte que la boue soit le moins
Préparer les récipients d’essai (7.2) au moins en triple
possible en contact avec l’oxygène (en utilisant, par
exemplaire pour le composé à expérimenter (6.3) et
exemple, une atmosphère sous azote).
le blanc et au moins un récipient pour chaque sub-
stance de référence (6.4) et pour le témoin de I’inhi-
7 Appareillage
bition (6.5) (facultatif). Les essais à blanc peuvent être
utilisés pour plusieurs composés à expérimenter au
Matériel courant de laboratoire et, en particulier, ce
cours du même essai. Préparer I’inoculum dilué (6.7)
qui suit.
avant de l’ajouter aux récipients. Ajouter des parties
aliquotes de I’inoculum de façon à ce que la concen-
7.1 Incubateur ou bain d’eau ou de sable, contrôlé tration finale en matières solides totales soit comprise
thermostatiquement à 35 “C + 2 “C. entre 1 g/l et 3 g/l et soit la même dans tous les ré-
cipients. Ajouter les solutions mères du composé à
expérimenter et de la substance de référence. La
7.2 Récipients d’essai, en verre résistant à la pres-
concentration d’essai en carbone doit normalement
sion, de 0,i litre à 1 litre de capacités nominales,
être de 100 mg/l. Si les substances à expérimenter
munis des septums étanches aux gaz, capables de
sont toxiques, elle peut être ramenée à 20 mg/1 de
résister à une pression d’environ 2 bar (voir l’exemple
carbone organique ou moins s’il s’agit de n’expéri-
de l’annexe A). Le volume de l’espace de tête doit
menter que la biodégradation primaire à l’aide d’ana-
représenter environ 10 % à 30 % du volume total. Si
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 11734
Premiére édition
1995-12-15
Qualité de l’eau - Évaluation de la
biodégradabilité anaérobie «ultime» des
composés organiques dans les boues de
digesteurs - Méthode par mesurage de la
production de biogaz
Wa ter quality - Evaluation of the “ultima te ” anaerobic biodegradability
of organic compounds in digested sludge - Method by measurement of
the biogas production
Numéro de réfbrence
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Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de
I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre intéressé par une
étude a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les
organisations internationales, gouvernementales et non gouvernemen-
tales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO colla-
bore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI)
en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques
sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des co-
mités membres votants.
La Norme internationale ISO 11734 a été élaborée par le comité technique
lSO/TC 147, Qualité de l’eau, sous-comité SC 5, Méthodes biologiques.
Les annexes A, B, C et D de la présente Norme internationale sont don-
nées uniquement à titre d’information.
0 ISO 1995
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publi-
cation ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun pro-
cédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord
écrit de l’éditeur.
internationale de normali
Organisation sation
Case Postale 56 l CH-121 1 G enève 2 0 l Suisse
Imprimé en Suisse
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Qualité de l’eau - Évaluation de la biodégradabilité
anaérobie «ultime» des composés organiques dans les
boues de digesteurs - Méthode par mesurage de la
production de biogaz
AVERTISSEMENT
- Les boues provenant d’eaux usées peuvent contenir des organismes
potentiellement pathogènes. II convient donc de manipuler de telles boues avec les précautions
appropriées. La digestion de ces boues d’eaux usées produit des gaz inflammables présentant des
risques d’explosion et d’incendie. II convient donc de prendre des précautions lors du transport et
du stockage de ces boues. Les substances chimiques d’essai toxiques ou celles dont les propriétés
ne sont pas connues doivent être manipulées avec soin. Le manomètre et les microseringues
doivent être manipulées avec précaution afin d’éviter les blessures pouvant être causées par les
aiguilles. Les aiguilles contaminées doivent être éliminées en prenant toutes les précautions
nécessaires.
- n’ont pas d’effet inhibiteur sur les micro-
1 Domaine d’application
organismes d’essai aux concentrations choisies
pour l’essai; les effets inhibiteurs peuvent être
La présente Norme internationale prescrit une mé-
déterminés par des essais séparés ou par un té-
thode de tri pour l’évaluation de la biodégradabilité
moin supplémentaire de l’inhibition.
des composés organiques à des concentrations don-
nées sous l’effet de micro-organismes anaérobies. Pour les substances volatiles, une décision au cas par
Les conditions décrites dans le présent essai ne cor- cas est nécessaire. Certaines peuvent être soumises
respondent par nécessairement aux conditions opti- à l’essai si elles sont manipulées avec précaution,
males permettant d’obtenir une biodégradation
comme d’éviter par exemple tout dégagement de
maximale, dans la mesure où une boue diluée est .
gaz
utilisée avec une substance chimique d’essai à une
concentration relativement élevée. L’essai permet
une exposition de la boue à la substance chimique
2 Références normatives
pendant une période pouvant aller jusqu’à 60 jours,
durée supérieure au temps de rétention normal des
Les normes suivantes contiennent des dispositions
boues (25 jours à 30 jours) dans les digesteurs
qui, par suite de la référence qui en est faite, consti-
anaérobies, bien que des digesteurs sur les sites in-
tuent des dispositions valables pour la présente
dustriels puissent avoir des temps de rétention supé-
Norme internationale. Au moment de la publication,
neurs.
les éditions indiquées étaient en vigueur. Toute
norme est sujette à révision et les parties prenantes
La méthode est applicable à des composés organi-
des accords fondés sur la présente Norme internatio-
ques de teneur en carbone connue et qui
nale sont invitées à rechercher la possibilité d’appli-
quer les éditions les plus récentes des normes
- sont solubles dans l’eau;
indiquées ci-après. Les membres de la CEI et de I’ISO
- sont peu solubles dans l’eau, à condition qu’une possèdent le registre des Normes internationales en
méthode de dosage exact soit applicable; vigueur à un moment donné.
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(CH,). Une quantité importante de dioxyde de carbone
ISO 1063411995, Qualité de l’eau - Lignes directri-
ces pour la préparation et le traitement des composés est dissoute dans l’eau et transformée en hydrogé-
organiques peu solubles dans l’eau en vue de nocarbonate ou en carbonate dans les conditions de
l‘évaluation de leur biodégradabilité en milieu aqueux. l’essai. Ce carbone inorganique (CI) est mesuré à la
fin de l’essai.
ISO 11923:- 1), Qualité de l’eau - Dosage des ma-
Calcul de la quantité de carbone produite par action
tières en suspension par filtration sur filtre en fibres
microbiologique à partir de la production nette de gaz
de verre.
et de la formation nette de Cl en excès par rapport
aux valeurs à blanc. Calcul du taux de biodégradation
3 Définitions
à partir de la formation de Cl total et de la quantité
mesurée ou calculée de carbone ajouté comme com-
Pour les besoins de la présente Norme internationale,
posé à expérimenter.
les définitions suivantes s’appliquent.
Le processus de biodégradation peut être suivi en ef-
3.1 biodégradation anaérobie ultime: Niveau de
fectuant des mesurages intermédiaires de la produc-
dégradation atteint lorsque le composé à expérimen-
tion de gaz uniquement. En outre, la biodégradation
ter a été totalement transformé par les micro-
primaire peut être déterminée par analyse spécifique
organismes anaérobies en dioxyde de carbone,
au début et à la fin de l’essai.
méthane, sels minéraux et nouveaux constituants
cellulaires microbiens (biomasse).
5 Environnement d’essai
3.2 biodégradation anaérobie primaire: Niveau de
dégradation atteint lorsque le composé à expérimen- L’incubation doit être menée dans des récipients
hermétiquement clos, à une température constante
ter a subi sous l’action de micro-organismes
de 35 “C + 2 “C, température normale de digesteur
anaérobies, une transformation structurelle quelcon- -
anaérobie, en l’absence d’oxygène et, au départ, en
que autre que la minéralisation complète.
atmosphère azotée pure.
3.3 boue de digesteurs: Mélange des phases
décantées d’eaux usées et de boues activées, qui a
6 Réactifs
été incubé dans un digesteur anaérobie à environ
35 “C afin de réduire la biomasse et les problèmes
6.1 Eau distillée ou déionisée, contenant moins de
d’odeur et d’améliorer la déshydratation de la boue.
2 mg/1 de COD.
La boue de digesteurs contient un ensemble de bac-
téries anaérobies de fermentation et méthanogènes
produisant du dioxyde de carbone et du méthane.
6.2 Milieu d’essai.
3.4 concentration en matières solides totales:
6.2.1 Milieu
Quantité de matières solides obtenues par séchage
d’un volume connu de boue, dans des conditions dé-
Utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique
finies, à environ 105 “C jusqu’à masse constante.
reconnue. Préparer un milieu dilué contenant les
constituants suivants aux quantités indiquées.
4 Principe
Dihydrogénophosphate de potassium
Dilution à partir de boue de digesteurs lavée conte- anhydre (KH,PO,)
027 g
nant du carbone inorganique (CI) en quantité très fai-
Monohydrogénophosphate de sodium
ble, à une concentration en matières solides totales
dodécahydraté (Na,HPO,,12H,O) Ll2 g
de 1 g/l à 3 g/l et incubation à 35 “C + 2 “C dans des
Chlorure d’ammonium (NH,(J)
0’53 g
récipients hermétiquement clos en présence d’une
substance chimique d’essai à une concentration en Chlorure de calcium dihydraté
0,075 g
carbone organique (CO) de 20 mg/1 à 100 mg/1 pen- (CaCl,,2H,O)
dant une période pouvant aller jusqu’à 60 jours.
Chlorure de magnésium hexahydraté
(MgCI,,GH,O) OJO g
Mesurage, dans l’espace de tête des récipients d’es-
Chlorure de fer(ll) tétrahydraté
sai, de l’augmentation de la pression due à la produc-
(FeCl,,4H,O)
tion de dioxyde de carbone (CO,) et de méthane ao2 g
1) À publier.
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0 ISO ISO 11734:1995(F)
inhibiteur vis-à-vis de la production de méthane, tel
Résazurine (indicateur d’oxygène) 0,001 g
que le chloroforme ou le tétrachlorure de carbone.
Sulfure de sodium nonahydraté
(Na,S,SH,O) (voir note 1)
OJ g NOTE 2 Si des solvants sont utilisés, un témoin conte-
nant le solvant seul est recommandé.
Solution mère d’éléments traces
10 ml
(facultative)
6.4 Substances de référence
1 litre
Eau désoxygénée (6.1), q.s.p.
Des substances de référence telles que le benzoate
Afin d’atteindre des conditions anaérobies, faire pas-
de sodium, le phénol ou le polyéthylène glycol 400
ser un courant d’azote dans le milieu pendant 20 min
sont permises. Ces substances sont censées pré-
immédiatement avant l’utilisation afin d’éliminer
senter un taux de biodégradation supérieur à 60 %.
l’oxygène.
Préparer une solution mère suivant la même méthode
que pour le composé à expérimenter.
Si nécessaire, ajuster le pH à 7 & 0,2, à l’aide d’une
solution d’acide minéral ou de base.
6.5 Témoin de l’inhibition (facultatif)
NOTE 1 Utiliser du sulfure de sodium préparé extem-
Ajouter, dans un récipient contenant le milieu d’essai
poranément ou le laver et le sécher avant utilisation, afin
d’assurer une capacité de réduction suffisante. (6.2), le composé à expérimenter et la substance de
référence en concentrations identiques à celles ajou-
tées en (6.3) et, respectivement, (6.4).
6.2.2 Solution mère d’éléments traces
(facultative)
6.6 Boue de digesteurs
II est recommandé d’ajouter au milieu d’essai les élé-
Recueillir la boue de digesteurs dans le digesteur
ments traces suivants afin d’améliorer les processus
d’une usine de traitement des eaux usées spécialisée
de dégradation anaérobie, notamment lorsque des
dans le traitement des eaux usées domestiques. Uti-
concentrations faibles en inoculum sont utilisées.
liser des flacons à col large en polyéthylène haute
densité ou tout matériau similaire pouvant se dilater.
Chlorure de manganèse tétrahydraté
(MnCl,,4H,O)
0,05 g
AVERTISSEMENT - Pour des raisons de sécurité,
Acide orthoborique (H,BO,) 0,005 g
l’usage du verre doit être exclu.
Chlorure de zinc (ZnCI,) 0,005 g
Remplir les flacons jusqu’à 1 cm du bord supérieur
Chlorure de cuivre(ll) (CuCI,) 0,003 g
et les fermer hermétiquement. Après leur transport
Molybdate disodique dihydraté
au laboratoire, les utiliser directement ou les placer
(Na,MoO,,2H,O) 0,001 g
dans un digesteur de laboratoire. Libérer l’excès de
Chlorure de cobalt hexahydraté
biogaz.
(C0CI,,6H*0)
or1 g
Une boue anaérobie préparée en laboratoire peut
Chlorure de nickel hexahydraté
également être utilisée comme inoculum.
(NiCI,,GH,O) w1 g
Envisager de prédigérer la boue afin de réduire toute
Sélénite disodique (Na,SeO,) 0,005 g
production de gaz non spécifique et diminuer I’influ-
Eau (6.1), q.s.p. 1 litre
ence des blancs. Laisser la boue digérer sans ajouter
de nutriments ou de substrats, à 35 “C + 2 “C pen-
6.3 Composé à expérimenter
dant 7 jours maximum.
Ajouter le composé à expérimenter sous forme de
NOTE 3 II a été démontré qu’une prédigestion d’environ
solution mère, suspension ou émulsion, ou direc-
5 jours donne une diminution optimale de la production de
tement sous forme solide ou liquide afin d’obtenir une
gaz du blanc sans donner lieu à un allongement inacceptable
concentration d’essai en carbone organique de des temps de latente ou d’incubation durant l’essai.
100 mg/l. Si les solutions mères sont utilisées, pré-
parer avec de l’eau (6.1) une solution appropriée Pour les composés à expérimenter dont on sait qu’ils
suffisament concentrée pour que le volume ajouté sont faiblement biodégradables, envisager une pré-
soit inférieur à 5 % du volume total du mélange réac- exposition de la boue à la substance à expérimenter
tif. Pour les composés à expérimenter qui ne sont pas afin d’obtenir un inoculum mieux adapté. Dans ce cas,
suffisamment solubles dans l’eau, se référer à ajouter la substance d’essai à une concentration en
I’ISO 10634, mais ne pas utiliser un solvant organique carbone organique comprise entre 5 mg/1 et 20 mg/1
3
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0 ISO
ISO 11734:1995(F)
à la boue de digesteurs. Laver soigneusement la boue aussi faible que possible, de sorte que les erreurs in-
troduites en négligeant le volume de l’appareillage
prédigérée avant l’utilisation. Indiquer la préexposition
dans le rapport d’essai. soient non significatives.
7.4 Analyseur de carbone, approprié pour le do-
6.7 Inoculum
sage direct du carbone inorganique dans une gamme
Laver la boue (6.6) juste avant l’utilisation afin de ré-
de concentrations allant de 1 mg/1 à 200 mg/l.
duire la concentration en Cl à moins de 10 mg/1 dans
la solution d’essai finale, en centrifugeant d’abord les
8 Mode opératoire
tubes hermétiquement clos à une vitesse relative-
ment faible (par exemple 3 000 g) jusqu’à 5 min.
Effectuer les étapes préliminaires suivantes tout en
Mettre en suspension les matières solides dans un
veillant à ce que le contact entre la boue digérée et
milieu d’essai sans oxygène (6.21, centrifuger et reje-
l’oxygène soit aussi faible que possible, par exemple
ter les lavages. Si la concentration en Cl n’a pas suf-
en travaillant avec une boîte à gants dans une atmos-
fisamment diminué, laver la boue jusqu’à deux fois.
phère azotée, ou en purgeant les flacons avec de
Finalement, mettre en suspension les matières soli-
l’azote.
des dans le volume requis de milieu d’essai et déter-
miner la concentration en matières solides totales
8.1 Préparation des échantillons pour essai
(3.4). La concentration finale en matières solides dans
et des échantillons témoins
les récipients d’essai doit être de 1 g/l à 3 g/l. Mener
ces opérations de sorte que la boue soit le moins
Préparer les récipients d’essai (7.2) au moins en triple
possible en contact avec l’oxygène (en utilisant, par
exemplaire pour le composé à expérimenter (6.3) et
exemple, une atmosphère sous azote).
le blanc et au moins un récipient pour chaque sub-
stance de référence (6.4) et pour le témoin de I’inhi-
7 Appareillage
bition (6.5) (facultatif). Les essais à blanc peuvent être
utilisés pour plusieurs composés à expérimenter au
Matériel courant de laboratoire et, en particulier, ce
cours du même essai. Préparer I’inoculum dilué (6.7)
qui suit.
avant de l’ajouter aux récipients. Ajouter des parties
aliquotes de I’inoculum de façon à ce que la concen-
7.1 Incubateur ou bain d’eau ou de sable, contrôlé tration finale en matières solides totales soit comprise
thermostatiquement à 35 “C + 2 “C. entre 1 g/l et 3 g/l et soit la même dans tous les ré-
cipients. Ajouter les solutions mères du composé à
expérimenter et de la substance de référence. La
7.2 Récipients d’essai, en verre résistant à la pres-
concentration d’essai en carbone doit normalement
sion, de 0,i litre à 1 litre de capacités nominales,
être de 100 mg/l. Si les substances à expérimenter
munis des septums étanches aux gaz, capables de
sont toxiques, elle peut être ramenée à 20 mg/1 de
résister à une pression d’environ 2 bar (voir l’exemple
carbone organique ou moins s’il s’agit de n’expéri-
de l’annexe A). Le volume de l’espace de tête doit
menter que la biodégradation primaire à l’aide d’ana-
représenter environ 10 % à 30 % du volume total. Si
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.