ISO 17126:2005
(Main)Soil quality — Determination of the effects of pollutants on soil flora — Screening test for emergence of lettuce seedlings (Lactuca sativa L.)
Soil quality — Determination of the effects of pollutants on soil flora — Screening test for emergence of lettuce seedlings (Lactuca sativa L.)
ISO 17126:2005 specifies test procedures for the determination of effects of contaminated soils or other contaminated samples on the emergence of lettuce seeds. ISO 17126:2005 is applicable to contaminated soils, soil materials, compost, sludge and chemical testing. It is applicable to the measurement of effects of substances deliberately added to the soil and to the comparison of soils of known and unknown quality. ISO 17126:2005 is not applicable to volatile contaminants.
Qualité du sol — Détermination des effets des polluants sur la flore du sol — Essai de détection de l'émergence des plantules de laitue (Lactuca sativa L.)
L'ISO 17126:2005 spécifie le mode opératoire pour la détermination des effets de sols contaminés ou d'autres échantillons contaminés vis-à-vis de l'émergence des semences de laitue. L'ISO 17126:2005 est applicable aux sols contaminés, aux matériaux du sol, au compost, aux boues et aux produits chimiques. Elle s'applique au mesurage des effets de substances ajoutées intentionnellement au sol et à la comparaison de sols de qualité connue et inconnue. L'ISO 17126:2005 ne s'applique pas aux contaminants volatils.
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 17126
First edition
2005-02-01
Soil quality — Determination of the
effects of pollutants on soil flora —
Screening test for emergence of lettuce
seedlings (Lactuca sativa L.)
Qualité du sol — Détermination des effets des polluants sur la flore du
sol — Essai de détection de l'émergence des plantules de laitue
(Lactuca sativa L.)
Reference number
©
ISO 2005
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Contents Page
Foreword. iv
Introduction . v
1 Scope. 1
2 Normative references. 1
3 Terms and definitions. 1
4 Principle. 2
5 Materials. 2
6 Apparatus. 2
7 Procedure. 3
7.1 Testing of samples of soil and other test materials . 3
7.2 Testing of chemicals. 3
7.3 Temperature and light regime . 4
7.4 Water content. 4
7.5 Reference substance. 4
7.6 Preparation and start of test dishes. 4
7.7 Test duration. 5
7.8 Measurements. 5
7.9 Recordings. 5
8 Expression of results. 5
9 Validity of the test . 6
10 Test report. 6
Bibliography . 7
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 17126 was prepared by Technical Committee ISO/TC 190, Soil quality, Subcommittee SC 4, Biological
methods.
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Introduction
For the assessment of the suitability of soil to sustain living organisms, there is a need for simple, rapid,
inexpensive biological test methods as a complement to chemical analysis. The method described in this
International Standard has been developed for the testing of contaminated soil as well as other contaminated
samples. It is cost effective and can be conducted within a short period of time. Furthermore, the test
organism is easily available, it does not require advanced equipment for measurements or for growing plants,
and it can be conducted by any skilled laboratory technician without special training.
[1]
This International Standard is based on US EPA 600/3-88-029 (1989) .
INTERNATIONAL STANDARD ISO 17126:2005(E)
Soil quality — Determination of the effects of pollutants on soil
flora — Screening test for emergence of lettuce seedlings
(Lactuca sativa L.)
1 Scope
This International Standard specifies test procedures for the determination of effects of contaminated soils or
other contaminated samples on the emergence of lettuce seeds.
This International Standard is applicable to contaminated soils, soil materials, compost, sludge and chemical
testing. It is applicable to the measurement of effects of substances deliberately added to the soil and to the
comparison of soils of known and unknown quality.
This International Standard is not applicable to volatile contaminants.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 10381-6, Soil quality — Sampling — Part 6: Guidance on the collection, handling and storage of soil for
the assessment of aerobic microbial processes in the laboratory
ISO 10390, Soil quality — Determination of pH
ISO 11265, Soil quality — Determination of the specific electrical conductivity
ISO 11267:1999, Soil quality — Inhibition of reproduction of Collembola (Folsomia candida) by soil pollutants
ISO 11274, Soil quality — Determination of the water-retention characteristic – Laboratory methods
ISO 11465, Soil quality — Determination of dry matter and water content on a mass basis — Gravimetric
method
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
seedling emergence
appearance of the seedling (i.e. visible seedling) above the surface of the cover material
3.2
ECx
concentration of test material (or test substance) estimated to reduce the seedling emergence by x % as
compared to the control
3.3
test material
material to be tested
EXAMPLES Soils, soil materials, compost, sludge.
3.4
test mixture
mixture of test material (or test substance) and growth medium
4 Principle
Lettuce seeds are exposed to the test material under investigation in a geometric dilution series with test
material and growth medium. Incubation takes place under controlled conditions of light and temperature, and
lasts usually 5 days (120 h). It is also possible to use this International Standard for chemical testing. In this
case, seeds are planted in control pots and in pots containing soil to which the test chemical has been added.
At the end of the test, the number of seedlings visible above the sand are counted and recorded. The effect on
seedling emergence is expressed as EC50 (possibly EC20), calculated from numbers of emerged seedlings in
the control pots (pure growth medium) and in pots containing the test material (or test substance).
5 Materials
5.1 Biological material, in this case lettuce seeds, Lactuca sativa L.
Seeds coated with insecticides and/or fungicides (“dressed” seeds) should be avoided.
After purchase, examine the seeds and remove any trash, empty hulls and damaged seeds. A uniform
emergence is dependent on uniform seed size. To reduce variability of emergence, the seed batch may be
sized before use by means of four sieves with oblong holes (see 6.4) placed on top of each other. In this case,
select for testing the fraction with the largest number of seeds.
Pack the seeds in small portions in air-tight containers. The storage time of the seeds should not exceed the
expiration date given by the supplier.
Storage at 4 °C is recommended but good emergence may also be accomplished by storage in the dark at
18 °C.
The seeds should not be soaked in water before testing.
5.2 Growth medium, in this case washed, fine quartz sand, e.g. with grain size 0,4 mm to 0,8 mm.
5.3 Cover material, in this case washed, coarse quartz sand, e.g. with grain size 0,7 mm to 1,2 mm
(possibly 0,8 mm to 1,4 mm).
The coarse quality of the cover material ensures air exchange between the growth medium and the
surroundings.
6 Apparatus
Standard laboratory equipment (pH-meter, thermometer, pipettes, etc.) including the following.
6.1 Balance, with an accuracy of 0,1 g.
6.2 Lower parts of plastic Petri dishes (diameter 15 cm), or other containers with similar surface area, for
use as test containers.
2 © ISO 2005 – All rights reserved
6.3 Re-sealable polyethylene bags that fit the test containers (20 cm × 25 cm for a 15 cm Petri dish).
6.4 Sieves for seeds, with oblong mesh dimensions of 0,75 mm × 10 mm, 0,8 mm × 10 mm,
0,85 mm × 10 mm and 0,9 mm × 10 mm.
6.5 Sieve for contaminated soil, stainless steel, with mesh size 2 mm.
6.6 Controlled environment chamber:
6.7 Magnifier
7 Procedure
7.1 Testing of samples of soil and other test materials
Usually the test material is not dried before the test. If necessary, upon reception air-dry it at room
temperature to a water content that enables sieving. Immediately thereafter, sieve the test material through a
stainless steel sieve (6.5) and store in the dark at 4 °C ± 2 °C until testing (in accordance with ISO 10381-6).
Preferentially, storage should not exceed three months but if prolonged storage is necessary, it shall be stored
at − 18 °C. For sieving, a mesh size of 2 mm is preferable but if this is not possible, coarser sieves (e.g. 5 mm)
may be used.
Determine the following properties of the sieved test material and register them prior to the test:
water content (in accordance with ISO 11465);
water-holding capacity (in accordance with ISO 11274, or alternatively Annex C of ISO 11267:1999);
conductivity (in accordance with ISO 11265);
pH (in accordance with ISO 10390).
The water content and water-holding capacity of the test material and the water-holding capacity of the growth
medium are used for calculation of the amounts of water to be used for the test. Before the test, weigh and
mix the moist test material and the dry growth medium.
Use a geometric dilution series between test material and growth medium (minimum of 5 concentrations), for
which the dilution factor should not exceed two. The range of concentrations should include those at which 0
(or minimum) and 100 % emergence are expected, e.g. based on a preliminary test (7.6.1).
The calculations are based on dry mass, and the concentrations are calculated and expressed as grams dry
mass test material per gram dry mass test mixture (i.e. test material and growth medium).
NOTE A commonly used dilution factor is 10 which is approximately 1,8, resulting in concentrations of e.g. 10, 18,
32, 56, 100.
7.2 Testing of chemicals
7.2.1 General
For testing of chemicals, the test is basically conducted with growth medium only and the chemical is added to
the growth medium. The concentrati
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 17126
Première édition
2005-02-01
Qualité du sol — Détermination des effets
des polluants sur la flore du sol — Essai
de détection de l'émergence des
plantules de laitue (Lactuca sativa L.)
Soil quality — Determination of the effetcs of pollutants on soil flora —
Screening test for emergence of lettuce seedlings (Lactuca sativa L.)
Numéro de référence
©
ISO 2005
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Publié en Suisse
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Sommaire Page
Avant-propos. iv
Introduction . v
1 Domaine d'application. 1
2 Références normatives. 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Matériel. 2
6 Appareilage. 3
7 Mode opératoire . 3
7.1 Essais des échantillons de sol et d’autres matériaux soumis à essai. 3
7.2 Essais des produits chimiques . 4
7.3 Température et régime lumineux . 4
7.4 Teneur en eau. 4
7.5 Substance de référence. 4
7.6 Préparation et démarrage des boîtes d’essai . 5
7.7 Durée de l’essai. 5
7.8 Mesurages. 6
7.9 Enregistrements. 6
8 Expression des résultats. 6
9 Validité de l’essai . 6
10 Rapport d’essai . 7
Bibliographie . 8
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 17126 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous-comité SC 4, Méthodes
biologiques.
iv © ISO 2005 – Tous droits réservés
Introduction
Il existe un besoin de méthodes d’essais biologiques peu onéreuses, simples et rapides, complémentaires
des analyses chimiques, pour évaluer la capacité d’un sol à assurer la subsistance d’organismes vivants. La
méthode décrite dans la présente Norme internationale a été développée pour soumettre à essai les sols et
autres échantillons contaminés. Elle est économique et peut se réaliser sur une courte période. De plus,
l’organisme d’essai est facilement disponible, n’exige aucun matériel sophistiqué pour les mesurages ou pour
la croissance des plantes et l’essai peut être réalisé par tout technicien de laboratoire qualifié sans formation
préalable.
[1]
La présente Norme internationale se fonde sur l’US EPA 600/3-88-029 (1989) .
NORME INTERNATIONALE ISO 17126:2005(F)
Qualité du sol — Détermination des effets des polluants sur la
flore du sol — Essai de détection de l'émergence des plantules
de laitue (Lactuca sativa L.)
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale spécifie le mode opératoire pour la détermination des effets de sols
contaminés ou d’autres échantillons contaminés vis-à-vis de l’émergence des semences de laitue.
La présente Norme internationale est applicable aux sols contaminés, aux matériaux du sol, au compost, aux
boues et aux produits chimiques. Elle s’applique au mesurage des effets de substances ajoutées
intentionnellement au sol et à la comparaison de sols de qualité connue et inconnue.
La présente Norme internationale ne s’applique pas aux contaminants volatils.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 10381-6, Qualité du sol — Échantillonnage — Partie 6: Lignes directrices pour la collecte, la manipulation
et la conservation de sols destinés à une étude en laboratoire des processus microbiens aérobies
ISO 10390, Qualité du sol — Détermination du pH
ISO 11265, Qualité du sol — Détermination de la conductivité électrique spécifique
ISO 11267:1999, Qualité du sol — Inhibition de la reproduction de Collembola (Folsomia candida) par des
polluants du sol
ISO 11274, Qualité du sol — Détermination de la caractéristique de la rétention en eau — Méthodes de
laboratoire
ISO 11465, Qualité du sol — Détermination de la teneur pondérale en matière sèche et en eau — Méthode
gravimétrique
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
émergence des plantules
apparition de la plantule (c’est-à-dire plantule visible) à la surface du matériau de couverture
3.2
CEx
concentration du matériau soumis à essai (ou de la substance soumise à essai) estimé(e) réduire
l’émergence des plantules de x % par rapport au témoin
3.3
matériau soumis à essai
à soumettre à essai
EXEMPLE Sols, matériaux du sol, compost, boues.
3.4
mélange d’essai
mélange de matériau soumis à essai (ou de la substance soumise à essai) avec le milieu de croissance
4 Principe
Des semences de laitue sont exposées au matériau soumis à essai suivant une gamme de dilutions de
celui-ci avec le milieu de croissance selon une progression géométrique. L’incubation est réalisée dans des
conditions contrôlées d’éclairage et de température et dure généralement 5 jours (120 h). Il est également
possible d’utiliser la présente Norme internationale pour soumettre à essai les produits chimiques. Les graines
sont alors semées, à la fois dans des pots contenant le sol auquel le produit chimique soumis à essai a été
ajouté, et dans des pots témoins. À la fin de l’essai, les plantules qui sont visibles à la surface du sable sont
comptées et leur nombre est consigné. L’effet vis-à-vis de l’émergence des plantules est exprimé sous forme
de CE50 (éventuellement CE20), calculée à partir du nombre de graines émergées dans les témoins (milieu
de croissance seul) et dans les récipients contenant le matériau soumis à essai (ou la substance soumise à
essai).
5 Matériel
5.1 Matériel biologique, dans le cas présent constitué de graines de laitue, Lactuca sativa L.
Il convient d’éviter les graines traitées avec des insecticides et/ou des fongicides (graines «enrobées»).
Après achat, examiner et trier les graines pour retirer les enveloppes vides et les graines endommagées.
L’uniformité de l’émergence dépend de l’uniformité de la taille des graines. Afin de réduire la variabilité en
terme d’émergence, il est possible de déterminer la taille du lot des graines avant utilisation au moyen de
quatre tamis à mailles rectangulaires (voir 6.4) empilés les uns au-dessus des autres. Dans ce cas,
sélectionner la fraction contenant le plus grand nombre de graines pour les essais.
Conditionner les graines en petits lots dans des récipients étanches à l’air. Il convient que la durée de
conservation des graines ne dépasse pas la date d’expiration indiquée par le fournisseur.
La conservation à 4 °C est recommandée, mais une émergence convenable peut tout aussi bien être obtenue
après conservation à 18 °C à l’abri de la lumière.
Il convient de ne pas imbiber les graines avec de l’eau avant l’essai.
5.2 Milieu de croissance, dans le cas présent sable quartzique fin lavé, par exemple d’une granulométrie
comprise entre 0,4 mm et 0,8 mm.
5.3 Matériau de couverture, dans le cas présent sable quartzique plus grossier, lavé, par exemple de
granulométrie comprise entre 0,7 mm et 1,2 mm (éventuellement entre 0,8 mm et 1,4 mm).
La qualité grossière du matériau de couverture garantit l’échange d’air entre le milieu de croissance et le
milieu environnant.
2 © ISO 2005 – Tous droits réservés
6 Appareilage
L’équipement courant de laboratoire (dont pH-mètre, thermomètre, pipettes, etc.) est le suivant.
6.1 Balance, d’une précision de 0,1 g.
6.2 Fonds de boîtes de Pétri en plastique (15 cm de diamètre), ou d’autres récipients d’une surface
comparable doivent être utilisés comme récipients d’essai.
6.3 Sacs en polyéthylène refermables, pouvant contenir les récipients d’essai (20 cm × 25 cm pour une
boîte de Pétri de 15 cm).
6.4 Tamis pour les graines, dont les tailles des mailles sont les suivantes: 0,75 mm × 10 mm,
0,8 mm × 10 mm, 0,85 mm × 10 mm et 0,9 mm × 10 mm.
6.5 Tamis, pour le sol contaminé, dont la taille des mailles est de 2 mm, en acier inoxydable.
6.6 Enceinte à atmosphère contrôlée.
6.7 Loupe.
7 Mode opératoire
7.1 Essais des échantillons de sol et d’autres matériaux soumis à essai
Le matériau à soumettre à essai n’est pas séché avant la réalisation de l’essai. Au besoin, à sa réception, il
est séché à l’air, à température ambiante jusqu’à obtention d’une teneur en eau adéquate pour le tamisage.
Immédiatement après, tamiser le matériau soumis à essai au moyen d’un tamis en acier inoxydable (6.5) et
conserver à l’abri de la lumière à 4 °C ± 2 °C jusqu’au moment de l’essai (conformément à l’ISO 10381-6). Il
convient, de préférence, que la période de conservation ne dépasse pas trois mois, mais dans le cas où un
stockage prolongé se révèle nécessaire, une cons
...
Questions, Comments and Discussion
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