Soil quality — Inhibition of reproduction of the soil mite (Hypoaspis aculeifer) by soil contaminants

This document specifies a chronic test method for evaluating the habitat function of soils and determining effects of soil contaminants and substances on the reproduction of Hypoaspis aculeifer by ? mainly ? alimentary uptake. This method is applicable to soils and soil materials of unknown quality, e.g. from contaminated sites, amended soils, soils after remediation, industrial, agricultural or other sites under concern and waste materials (e.g. dredged material, municipal sludge from a wastewater treatment plant, composed material, or manure, especially those for possible land disposal). The reproduction (= number of juveniles) is the measured parameter of the test. The test reflects the bioavailability of a mixture of contaminants in natural soils (contaminated site soils) to a species which represents a trophic level which is not covered by other ISO standards. This test is not intended to replace the earthworm (see ISO 11268-2) or Collembola (see ISO 11267) reproduction tests since this species belongs not only to a different trophic group but also a different taxonomic group (= mites; i.e. arachnids) than those used usually. Effects of substances are assessed using a standard soil, preferably a defined artificial soil substrate. For contaminated soils, the effects are determined in the soil to be tested and in a control soil. Depending on the objective of the study, the control and dilution substrate (dilution series of contaminated soil) are either an uncontaminated soil comparable to the soil to be tested (reference soil) or a standard soil (e.g. artificial soil). This document provides information on how to use this method for testing samples (soils or substances) under temperate conditions. This document is not applicable to substances for which the air/soil partition coefficient is greater than one, or to substances with vapour pressure exceeding 300 Pa at 25 °C. NOTE The stability of the test substance cannot be ensured over the test period. No provision is made in the test method for monitoring the persistence of the substance under test.

Qualité du sol — Inhibition de la reproduction de l'acarien prédateur (Hypoaspis aculeifer) par des contaminants du sol

Le présent document décrit une méthode d'essai chronique pour évaluer la fonction d'habitat des sols et déterminer les effets des contaminants du sol et des substances sur la reproduction de l'espèce Hypoaspis aculeifer par — principalement — absorption par voie alimentaire. Cette méthode est applicable aux sols et matériaux du sol de qualité inconnue, par exemple, provenant de sites contaminés, de sols amendés, de sols ayant fait l'objet d'une remédiation, de sites industriels, agricoles et autres, et aux déchets (par exemple, matériau de dragage, boue résiduaire des stations d'épuration des eaux usées, engrais ou fumier, notamment ceux pour épandage éventuel). La reproduction (= nombre de juvéniles) est le paramètre mesuré au cours de l'essai. L'essai reflète la biodisponibilité d'un mélange de contaminants dans les sols naturels (sols de sites contaminés) vis-à-vis d'une espèce qui représente un niveau trophique qui n'est pas couvert par les autres normes ISO. Il n'est pas prévu d'utiliser cet essai pour remplacer les essais de reproduction vis-à-vis des vers de terre (voir ISO 11268-2) ou des collemboles (voir ISO 11267) car cette espèce appartient non seulement à un autre groupe trophique, mais également à un autre groupe taxonomique (= acariens; c'est-à-dire, arachnides) que les autres espèces utilisées habituellement. Les effets des substances sont évalués en utilisant un sol standard, de préférence un substrat défini de sol artificiel. Pour les sols contaminés, les effets sont déterminés dans le sol à analyser et dans un sol témoin. Selon l'objectif de l'étude, le substrat témoin et le substrat de dilution (séries de dilutions du sol contaminé) sont soit un sol non contaminé comparable au sol à analyser (sol de référence), soit un sol standard (par exemple, sol artificiel). Le présent document fournit des informations sur la façon d'utiliser cette méthode pour analyser des échantillons (sols ou substances) dans des conditions tempérées. Il n'est pas applicable aux substances pour lesquelles le coefficient de partage air/sol est supérieur à 1, ou aux substances dont la tension de vapeur dépasse 300 Pa à 25 °C. NOTE La stabilité de la substance d'essai ne peut pas être assurée tout au long de la période d'essai. La méthode d'essai ne prévoit pas de contrôler la persistance de la substance soumise à essai.

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Publication Date
25-Apr-2019
Current Stage
9060 - Close of review
Start Date
02-Dec-2029
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ISO 21285:2019 - Soil quality — Inhibition of reproduction of the soil mite (Hypoaspis aculeifer) by soil contaminants Released:4/26/2019
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ISO 21285:2019 - Soil quality -- Inhibition of reproduction of the soil mite (Hypoaspis aculeifer) by soil contaminants
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 21285
First edition
2019-04
Soil quality — Inhibition of
reproduction of the soil mite
(Hypoaspis aculeifer) by soil
contaminants
Qualité du sol — Inhibition de la reproduction de l'acarien prédateur
(Hypoaspis aculeifer) par des contaminants du sol
Reference number
©
ISO 2019
© ISO 2019
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
Email: copyright@iso.org
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2019 – All rights reserved

Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 2
4 Principle . 3
5 Reagents and material . 4
5.1 Biological material . 4
5.2 Test mixtures . 4
5.3 Reference substance . 5
6 Apparatus . 6
7 Procedure. 6
7.1 Experimental design . 6
7.1.1 General. 6
7.1.2 Range-finding test (preliminary test) . 7
7.1.3 Definitive test . 7
7.1.4 Limit test . 7
7.2 Preparation of test mixtures . 8
7.2.1 Testing contaminated soil . 8
7.2.2 Testing substances added to the test substrate . 8
7.2.3 Preparation of control containers . 9
7.3 Addition of the biological material . 9
7.4 Test conditions and measurements . 9
7.5 Feeding of the mites. 9
7.6 Determination of surviving predatory mites .10
8 Calculation and expression of results .10
8.1 Calculation .10
8.2 Expression of results .10
9 Validity of the test .10
10 Statistical analysis .11
10.1 General .11
10.2 Single-concentration tests .11
10.3 Multi-concentration tests.11
10.3.1 Range-finding test .11
10.3.2 Definitive test .11
11 Test report .12
Annex A (informative) Techniques for rearing and breeding of predatory mites .14
Annex B (normative) Determination of water-holding capacity .16
Annex C (informative) Guidance on adjustment of pH of artificial soil .17
Annex D (informative) Extraction and counting of predatory mites .18
Annex E (informative) Basic information on the biology of Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer .19
Bibliography .20
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see www .iso
.org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 190, Soil quality, Subcommittee SC 4,
Biological characterization.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.
iv © ISO 2019 – All rights reserved

Introduction
Ecotoxicological test systems are applied to obtain information about the effects of contaminants in
soil and are proposed to complement conventional chemical analysis (see ISO 15799 and ISO 17616).
ISO 15799 includes a list and short characterization of recommended and standardized test systems
and ISO 17616 gives guidance on the choice and evaluation of the bioassays. Aquatic test systems with
soil eluate are applied to obtain information about the fraction of contaminants potentially reaching
the groundwater by the water path (retention function of soils), whereas terrestrial test systems are
used to assess the habitat function of soils.
Mites (Acari) are a world-wide and diverse group of arthropods belonging to the class Arachnida with
over 40 000 species recorded, divided into two super-orders (Acariformes and Parasitiformes). Due to
their relative small size (a few µm to a few cm), they occupy specific ecological niches on plants as well
as in soils (see Reference [13]).
Among soil-inhabiting mites, the role of predation is ensured by, for example, Hypoaspis sp. (Laelapidae).
Because they are exposed to chemical contamination, mites are already considered in the environmental
risk assessment of pesticides, as non-target organisms (see Reference [10]). Indeed, among the data
required for active substances of pesticides, effects on predatory mites are assessed, i.e. for the plant-
inhabitant Typhlodromus pyri (Phytoseiidae) and the soil-inhabitant Hypoaspis aculeifer (Laelapidae)
(see Reference [6]).
[23][17]
The first authors introducing H. aculeifer as a test organism in ecotoxicological studies were later
proposed a two-species test system in the European project SECOFASE (Sublethal Effects of Chemicals
on Fauna in the Soil Ecosystem), including the collembolan Folsomia fimetaria as prey. In the context
of the development of an ecotoxicological test for the assessment of plant protection products on non-
target arthropods (see References [5][6]), a protocol on soil predatory mites using H. aculeifer was
further proposed. More recently, a standard test protocol for the assessment of chemicals was developed
for this species by OECD in 2008 and revised in 2016. The results of the associated international ring-
test were published in Reference [25].
Among mites, the predator Hypoaspis aculeifer is the most studied species in laboratory. The reproduction
end point was found in general to be more sensitive than mortality and avoidance. Compared to other
soil meso-fauna invertebrates, mites were found in general less sensitive than or as sensitive as other
test species, depending on the end points and chemicals studied. Considering semi-field studies,
H. aculeifer was used as a top predator whereas other soil invertebrates, mainly springtails, were
ranked in the grazer group. In these studies, mites showed to be quite tolerant towards anthropogenic
contamination. This statement was also corroborated by field surveys. However, the applicability of
laboratory test methods for the assessment of environmental samples (contaminated soils, wastes etc.)
with mites is emphasized, as to date a limited number of studies are available.
This document describes a method that is based on the determination of lethal and subl
...


INTERNATIONAL ISO
STANDARD 21285
First edition
2019-04
Soil quality — Inhibition of
reproduction of the soil mite
(Hypoaspis aculeifer) by soil
contaminants
Qualité du sol — Inhibition de la reproduction de l'acarien prédateur
(Hypoaspis aculeifer) par des contaminants du sol
Reference number
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Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 2
4 Principle . 3
5 Reagents and material . 4
5.1 Biological material . 4
5.2 Test mixtures . 4
5.3 Reference substance . 5
6 Apparatus . 6
7 Procedure. 6
7.1 Experimental design . 6
7.1.1 General. 6
7.1.2 Range-finding test (preliminary test) . 7
7.1.3 Definitive test . 7
7.1.4 Limit test . 7
7.2 Preparation of test mixtures . 8
7.2.1 Testing contaminated soil . 8
7.2.2 Testing substances added to the test substrate . 8
7.2.3 Preparation of control containers . 9
7.3 Addition of the biological material . 9
7.4 Test conditions and measurements . 9
7.5 Feeding of the mites. 9
7.6 Determination of surviving predatory mites .10
8 Calculation and expression of results .10
8.1 Calculation .10
8.2 Expression of results .10
9 Validity of the test .10
10 Statistical analysis .11
10.1 General .11
10.2 Single-concentration tests .11
10.3 Multi-concentration tests.11
10.3.1 Range-finding test .11
10.3.2 Definitive test .11
11 Test report .12
Annex A (informative) Techniques for rearing and breeding of predatory mites .14
Annex B (normative) Determination of water-holding capacity .16
Annex C (informative) Guidance on adjustment of pH of artificial soil .17
Annex D (informative) Extraction and counting of predatory mites .18
Annex E (informative) Basic information on the biology of Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer .19
Bibliography .20
Foreword
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bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
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Introduction
Ecotoxicological test systems are applied to obtain information about the effects of contaminants in
soil and are proposed to complement conventional chemical analysis (see ISO 15799 and ISO 17616).
ISO 15799 includes a list and short characterization of recommended and standardized test systems
and ISO 17616 gives guidance on the choice and evaluation of the bioassays. Aquatic test systems with
soil eluate are applied to obtain information about the fraction of contaminants potentially reaching
the groundwater by the water path (retention function of soils), whereas terrestrial test systems are
used to assess the habitat function of soils.
Mites (Acari) are a world-wide and diverse group of arthropods belonging to the class Arachnida with
over 40 000 species recorded, divided into two super-orders (Acariformes and Parasitiformes). Due to
their relative small size (a few µm to a few cm), they occupy specific ecological niches on plants as well
as in soils (see Reference [13]).
Among soil-inhabiting mites, the role of predation is ensured by, for example, Hypoaspis sp. (Laelapidae).
Because they are exposed to chemical contamination, mites are already considered in the environmental
risk assessment of pesticides, as non-target organisms (see Reference [10]). Indeed, among the data
required for active substances of pesticides, effects on predatory mites are assessed, i.e. for the plant-
inhabitant Typhlodromus pyri (Phytoseiidae) and the soil-inhabitant Hypoaspis aculeifer (Laelapidae)
(see Reference [6]).
[23][17]
The first authors introducing H. aculeifer as a test organism in ecotoxicological studies were later
proposed a two-species test system in the European project SECOFASE (Sublethal Effects of Chemicals
on Fauna in the Soil Ecosystem), including the collembolan Folsomia fimetaria as prey. In the context
of the development of an ecotoxicological test for the assessment of plant protection products on non-
target arthropods (see References [5][6]), a protocol on soil predatory mites using H. aculeifer was
further proposed. More recently, a standard test protocol for the assessment of chemicals was developed
for this species by OECD in 2008 and revised in 2016. The results of the associated international ring-
test were published in Reference [25].
Among mites, the predator Hypoaspis aculeifer is the most studied species in laboratory. The reproduction
end point was found in general to be more sensitive than mortality and avoidance. Compared to other
soil meso-fauna invertebrates, mites were found in general less sensitive than or as sensitive as other
test species, depending on the end points and chemicals studied. Considering semi-field studies,
H. aculeifer was used as a top predator whereas other soil invertebrates, mainly springtails, were
ranked in the grazer group. In these studies, mites showed to be quite tolerant towards anthropogenic
contamination. This statement was also corroborated by field surveys. However, the applicability of
laboratory test methods for the assessment of environmental samples (contaminated soils, wastes etc.)
with mites is emphasized, as to date a limited number of studies are available.
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INTERNATIONALE 21285
Première édition
2019-04
Qualité du sol — Inhibition de la
reproduction de l'acarien prédateur
(Hypoaspis aculeifer) par des
contaminants du sol
Soil quality — Inhibition of reproduction of the soil mite (Hypoaspis
aculeifer) by soil contaminants
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Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Web: www.iso.org
Publié en Suisse
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Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d'application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 2
4 Principe . 3
5 Réactifs et matériel . 4
5.1 Matériel biologique . 4
5.2 Mélanges d’essai . 4
5.3 Substance de référence . 6
6 Appareillage . 6
7 Mode opératoire. 7
7.1 Plan d’expérience . 7
7.1.1 Généralités . 7
7.1.2 Essai préliminaire . 7
7.1.3 Essai définitif . 7
7.1.4 Essai limite . 8
7.2 Préparation des mélanges d’essai . 8
7.2.1 Essai sur sol contaminé . . 8
7.2.2 Essai sur substances ajoutées au substrat d’essai . 9
7.2.3 Préparation des récipients témoins . 9
7.3 Ajout du matériel biologique .10
7.4 Conditions d’essai et mesurages .10
7.5 Alimentation des acariens .10
7.6 Détermination du nombre d’acariens prédateurs survivants .11
8 Calcul et expression des résultats .11
8.1 Calcul .11
8.2 Expression des résultats .11
9 Validité de l’essai .11
10 Analyse statistique .11
10.1 Généralités .11
10.2 Essais à une seule concentration .12
10.3 Essais à plusieurs concentrations.12
10.3.1 Essai préliminaire .12
10.3.2 Essai définitif .12
11 Rapport d'essai .13
Annexe A (informative) Techniques d’élevage des acariens prédateurs .15
Annexe B (normative) Détermination de la capacité de rétention d’eau .17
Annexe C (informative) Recommandations relatives à l’ajustement du pH d’un sol artificiel .19
Annexe D (informative) Extraction et comptage des acariens prédateurs .20
Annexe E (informative) Informations générales sur la biologie de Hypoaspis (Geolaelaps)
aculeifer .21
Bibliographie .22
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir www .iso .org/avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous-comité SC 4,
Caractérisation biologique.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
iv © ISO 2019 – Tous droits réservés

Introduction
Les systèmes d’essais écotoxicologiques sont mis en œuvre pour obtenir des informations sur les
effets des contaminants présents dans les sols et sont proposés pour compléter l’analyse chimique
conventionnelle (voir ISO 15799 et ISO 17616). L’ISO 15799 contient une liste et une brève caractérisation
des systèmes d’essai recommandés et normalisés et l’ISO 17616 donne des recommandations sur le
choix et l’évaluation des essais biologiques. Les systèmes d’essai aquatiques avec un éluat de sol sont mis
en œuvre pour obtenir des informations sur la fraction des contaminants susceptibles d’être entraînés
jusque dans les eaux souterraines par le cheminement de l’eau (fonction de rétention des sols), alors que
les systèmes d’essai terrestres sont utilisés pour évaluer la fonction d’habitat des sols.
Les acariens représentent un groupe divers d’arthropodes, présent dans le monde entier, appartenant
à la classe des Arachnides, avec plus de 40 000 espèces comptabilisées, divisé en deux super-ordres
(Acariformes et Parasitiformes). En raison de leur taille relativement petite (de quelques micromètres à
quelques centimètres), ils occupent des niches écologiques spécifiques sur les végétaux et dans les sols
(voir Référence [13]).
Chez les acariens terricoles, le rôle de prédation est assuré, par exemple, par Hypoaspis sp. (Laelapidae).
Étant donné qu’ils sont exposés à une contamination chimique, les acariens sont déjà pris en compte
dans l’évaluation des risques environnementaux des pesticides, au titre d’organismes non cibles (voir
Référence [10]). En effet, parmi les données requises pour les substances actives pesticides, les effets sur
les acariens prédateurs sont évalués, à savoir pour l’espèce planticole Typhlodromus pyri (Phytoseiidae)
et l’espèce terricole Hypoaspis aculeifer (Laelapidae) (voir Référence [6]).
Les premiers auteurs à avoir introduit l’espèce H. aculeifer comme organisme d’essai lors d’études
[23][17]
écotoxicologiques ont ensuite proposé un système d’essai à deux espèces dans le cadre du projet
européen SECOFASE (Sublethal Effects of Chemicals on Fauna in the Soil Ecosystem), avec le collembole
Folsomia fimetaria comme proie. Lors de l’élaboration d’un essai écotoxicologique pour l’évaluation
de produits phytopharmaceutiques sur des arthropodes non cibles (voir Références [5], [6]), un autre
protocole relatif aux acariens prédateurs du sol utilisant H. aculeifer a été proposé. Plus récemment, un
protocole d’essai standardisé pour l’évaluation des produits chimiques a été mis au point pour cette
espèce par l’OCDE en 2008 et a été révisé en 2016. Les résultats de l’essai interlaboratoires international
associé ont été publiés dans la Référenc
...


NORME ISO
INTERNATIONALE 21285
Première édition
2019-04
Qualité du sol — Inhibition de la
reproduction de l'acarien prédateur
(Hypoaspis aculeifer) par des
contaminants du sol
Soil quality — Inhibition of reproduction of the soil mite (Hypoaspis
aculeifer) by soil contaminants
Numéro de référence
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ISO 2019
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© ISO 2019
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d'application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 2
4 Principe . 3
5 Réactifs et matériel . 4
5.1 Matériel biologique . 4
5.2 Mélanges d’essai . 4
5.3 Substance de référence . 6
6 Appareillage . 6
7 Mode opératoire. 7
7.1 Plan d’expérience . 7
7.1.1 Généralités . 7
7.1.2 Essai préliminaire . 7
7.1.3 Essai définitif . 7
7.1.4 Essai limite . 8
7.2 Préparation des mélanges d’essai . 8
7.2.1 Essai sur sol contaminé . . 8
7.2.2 Essai sur substances ajoutées au substrat d’essai . 9
7.2.3 Préparation des récipients témoins . 9
7.3 Ajout du matériel biologique .10
7.4 Conditions d’essai et mesurages .10
7.5 Alimentation des acariens .10
7.6 Détermination du nombre d’acariens prédateurs survivants .11
8 Calcul et expression des résultats .11
8.1 Calcul .11
8.2 Expression des résultats .11
9 Validité de l’essai .11
10 Analyse statistique .11
10.1 Généralités .11
10.2 Essais à une seule concentration .12
10.3 Essais à plusieurs concentrations.12
10.3.1 Essai préliminaire .12
10.3.2 Essai définitif .12
11 Rapport d'essai .13
Annexe A (informative) Techniques d’élevage des acariens prédateurs .15
Annexe B (normative) Détermination de la capacité de rétention d’eau .17
Annexe C (informative) Recommandations relatives à l’ajustement du pH d’un sol artificiel .19
Annexe D (informative) Extraction et comptage des acariens prédateurs .20
Annexe E (informative) Informations générales sur la biologie de Hypoaspis (Geolaelaps)
aculeifer .21
Bibliographie .22
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir www .iso .org/avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous-comité SC 4,
Caractérisation biologique.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
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Introduction
Les systèmes d’essais écotoxicologiques sont mis en œuvre pour obtenir des informations sur les
effets des contaminants présents dans les sols et sont proposés pour compléter l’analyse chimique
conventionnelle (voir ISO 15799 et ISO 17616). L’ISO 15799 contient une liste et une brève caractérisation
des systèmes d’essai recommandés et normalisés et l’ISO 17616 donne des recommandations sur le
choix et l’évaluation des essais biologiques. Les systèmes d’essai aquatiques avec un éluat de sol sont mis
en œuvre pour obtenir des informations sur la fraction des contaminants susceptibles d’être entraînés
jusque dans les eaux souterraines par le cheminement de l’eau (fonction de rétention des sols), alors que
les systèmes d’essai terrestres sont utilisés pour évaluer la fonction d’habitat des sols.
Les acariens représentent un groupe divers d’arthropodes, présent dans le monde entier, appartenant
à la classe des Arachnides, avec plus de 40 000 espèces comptabilisées, divisé en deux super-ordres
(Acariformes et Parasitiformes). En raison de leur taille relativement petite (de quelques micromètres à
quelques centimètres), ils occupent des niches écologiques spécifiques sur les végétaux et dans les sols
(voir Référence [13]).
Chez les acariens terricoles, le rôle de prédation est assuré, par exemple, par Hypoaspis sp. (Laelapidae).
Étant donné qu’ils sont exposés à une contamination chimique, les acariens sont déjà pris en compte
dans l’évaluation des risques environnementaux des pesticides, au titre d’organismes non cibles (voir
Référence [10]). En effet, parmi les données requises pour les substances actives pesticides, les effets sur
les acariens prédateurs sont évalués, à savoir pour l’espèce planticole Typhlodromus pyri (Phytoseiidae)
et l’espèce terricole Hypoaspis aculeifer (Laelapidae) (voir Référence [6]).
Les premiers auteurs à avoir introduit l’espèce H. aculeifer comme organisme d’essai lors d’études
[23][17]
écotoxicologiques ont ensuite proposé un système d’essai à deux espèces dans le cadre du projet
européen SECOFASE (Sublethal Effects of Chemicals on Fauna in the Soil Ecosystem), avec le collembole
Folsomia fimetaria comme proie. Lors de l’élaboration d’un essai écotoxicologique pour l’évaluation
de produits phytopharmaceutiques sur des arthropodes non cibles (voir Références [5], [6]), un autre
protocole relatif aux acariens prédateurs du sol utilisant H. aculeifer a été proposé. Plus récemment, un
protocole d’essai standardisé pour l’évaluation des produits chimiques a été mis au point pour cette
espèce par l’OCDE en 2008 et a été révisé en 2016. Les résultats de l’essai interlaboratoires international
associé ont été publiés dans la Référenc
...

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