ISO 8534:2017

Animal and vegetable fats and oils - Determination of water content - Karl Fischer method (pyridine free)

ISO 8534:2017 specifies a method for the determination of the water content of animal and vegetable fats and oils (hereinafter referred to as fats) using Karl Fischer apparatus and a reagent which is free of pyridine. Milk and milk products (or fat coming from milk and milk products) are excluded from the scope of this document.

Corps gras d'origines animale et végétale — Détermination de la teneur en eau — Méthode de Karl Fischer (sans pyridine)

ISO 8534:2017 spécifie une méthode de détermination de la teneur en eau des corps gras d'origines animale et végétale (appelés « corps gras » dans la présente Norme internationale) à l'aide de l'appareil Karl Fischer et d'un réactif sans pyridine. Le lait et les produits laitiers (ou les corps gras issus du lait et des produits laitiers) sont exclus du domaine d'application du présent document.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 31-Jan-2017
• ICS: 67.200.10 - Animal and vegetable fats and oils
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 11 - Animal and vegetable fats and oils
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 11 - Animal and vegetable fats and oils
• Current Stage: 9093 - International Standard confirmed
• Start Date: 08-Nov-2022
• Completion Date: 13-Dec-2025

Relations

• Consolidates: ISO/IEC TR 29110-3-1:2015 - Systems and software engineering - Lifecycle profiles for Very Small Entities (VSEs) - Part 3-1: Assessment guide
• Effective Date: 06-Jun-2022
• Revises: ISO 8534:2008 - Animal and vegetable fats and oils - Determination of water content - Karl Fischer method (pyridine free)
• Effective Date: 07-May-2016

Overview

ISO 8534:2017 specifies a pyridine‑free Karl Fischer method for determining the water content of animal and vegetable fats and oils. The standard covers the volumetric Karl Fischer titration (primary method) for samples containing between 1 mg and 100 mg water and includes an informative Annex B describing the coulometric method for lower moisture levels (10 µg to 10 mg). Milk and milk‑derived fats are explicitly excluded.

Key topics and requirements

• Scope: Water determination in animal and vegetable fats and oils using Karl Fischer reagents that are free of pyridine.
• Methods:
  • Volumetric titration (main text) - suitable for higher water contents.
  • Coulometric titration (Annex B) - for trace water measurement and greater sensitivity.
• Reagents: One‑component (all reactants in titrant) or two‑component systems. Absolute methanol is the solvent of choice; for fats and oils a methanol–chloroform mixture is recommended (methanol ≥ 25 % vol, ideally ~50 %). Titrants with titres of about 1–2 mg H2O/mL are recommended.
• Apparatus & accessories: Karl Fischer titrator (airtight vessel), platinum electrodes, analytical balance (0.1 mg readability), gas‑tight syringes (1–20 mL). Instruments must be set up and maintained per manufacturer instructions.
• Sampling & sample prep: Prepare test samples per ISO 661; sampling recommendations referenced from ISO 5555.
• Procedure highlights: Daily titre determination using a certified water standard, careful sample mass by difference (syringe technique), titration to a stable dry endpoint, and guidance on solvent volumes and number of test portions per solvent charge. Tabled test portion sizes are provided to match expected % water (e.g., ~5 g for ~0.1 % water; ~1 g for ~1 %).
• Quality & performance: The standard includes precision data (repeatability and reproducibility) and prescribes reporting requirements.

Practical applications and users

• Who uses it: Food and oil testing laboratories, QC/QA teams in edible oil and fat processing, vegetable oil refiners, animal fat processors, contract testing labs and regulators.
• Why use it: Accurate moisture determination is critical for product quality, shelf life, processing control (e.g., refining, deodorization), adulteration detection, labeling compliance and trade specifications. The pyridine‑free reagents reduce operator exposure to hazardous solvents and align with modern safety preferences.

Related standards

• ISO 661 - Preparation of test sample for oils and fats (referenced).
• ISO 5555 - Recommended sampling methods (referenced).

ISO 8534:2017 (Karl Fischer method, pyridine free) is the authoritative method for routine, reproducible water determination in non‑milk animal and vegetable fats and oils, with both volumetric and coulometric options to cover a wide range of moisture levels.

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 8534
Third edition
2017-02
Animal and vegetable fats and oils —
Determination of water content —
Karl Fischer method (pyridine free)
Corps gras d’origines animale et végétale — Détermination de la
teneur en eau — Méthode de Karl Fischer (sans pyridine)
Reference number
©
ISO 2017
© ISO 2017, Published in Switzerland
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form
or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior
written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below or ISO’s member body in the country of
the requester.
ISO copyright office
Ch. de Blandonnet 8 • CP 401
CH-1214 Vernier, Geneva, Switzerland
Tel. [phone]
Fax [phone]
[e-mail]
www.iso.org
ii © ISO 2017 – All rights reserved

Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 1
5 Reagents . 1
6 Apparatus . 2
7 Sampling . 2
8 Preparation of the test sample . 2
9 Procedure. 3
9.1 Titre . 3
9.2 Test portion . 4
9.3 Determination . 5
10 Expression of results . 5
11 Precision of the method . 6
11.1 Interlaboratory test. 6
11.2 Repeatability . 6
11.3 Reproducibility . 6
12 Test report . 6
Annex A (informative) Results of interlaboratory tests. 7
Annex B (informative) Information and precision data on the use of the coulometric method .8
Bibliography .10
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www. iso. org/d irectives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www. iso. org/p atents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the meaning of ISO specific terms and expressions related to conformity assessment,
as well as information about ISO’s adherence to the World Trade Organization (WTO) principles in the
Technical Barriers to Trade (TBT) see the following URL: ww w .iso. org/iso / foreword. html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 11,
Animal and vegetable fats and oils.
This third edition cancels and replaces the second edition (ISO 8534:2008), of which it constitutes a
minor revision to exclude the applicability for fat coming from milk and milk products.
iv © ISO 2017 – All rights reserved

Introduction
The determination of the water content of fats and oils according to Karl Fischer is carried out by two
different procedures. This document specifies the volumetric Karl Fischer method for the determination
of higher milligram levels of water (high level moisture). It is used for samples having between 1 mg
and 100 mg of water in the sample.
Annex B specifies a coulometric titration, which requires between 10 µg and 10 mg water in the sample.
The coulometric method is more sensitive than the volumetric method and permits the determination
of lower water contents.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 8534:2017(E)
Animal and vegetable fats and oils — Determination of
water content — Karl Fischer method (pyridine free)
1 Scope
This document specifies a method for the determination of the water content of animal and vegetable
fats and oils (hereinafter referred to as fats) using Karl Fischer apparatus and a reagent which is free of
pyridine.
Milk and milk products (or fat coming from milk and milk products) are excluded from the scope of this
document.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 661, Animal and vegetable fats and oils — Preparation of test sample
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— IEC Electropedia: available at http:// www .electropedia .org/
— ISO Online browsing platform: available at http:// www .iso .org/ obp
3.1
water content
mass, in grams per 100 g of sample, of water as determined in accordance with the method specified in
this document
Note 1 to entry: The water content is expressed as a percentage mass fraction.
4 Principle
Dissolved fat is titrated against an iodine solution and sulfur dioxide (SO ) is oxidized by iodine in the
presence of water. In principle, the chemical reaction in Formula (1) takes place:
HO++ISOC++HOHR32NR→ NH SO CH + RNHI (1)
[] []
22 23 43
The alcohol reacts with SO and a nitrogenous base (RN) to form an intermediate alkylsulfite salt, which
is then oxidized by iodine to an alkylsulfate salt. This oxidation reaction consumes water contained in
the sample. The end point is monitored potentiometrically.
5 Reagents
WARNING — Comply with any local regulations which specify the handling of hazardous
substances. Technical, organizational and personal safety measures shall be followed.
It is recommended that “ready for use” working solvents be used, either one-component reagents (5.1.1)
or two-component reagents (5.1.2). Reagents with a titre of 1 mg and 2 mg water per millilitre are
required for acceptable performance.
5.1 Karl Fischer reagents, consist of one-component reagents or two-component reagents for
volumetric determination.
5.1.1 One-component reagents, contain all the reactant in the titrant solution: iodine, sulfur dioxide,
and imidazole, dissolved in a suitable alcohol. Methanol is typically used as the working medium in the
titration cell.
Absolute methanol is the solvent of choice. But for fats and oils, use a mixture of absolute methanol and
absolute chloroform (the methanol content should be at least 25 % volume fraction, or optimally 50 %
volume fraction).
5.1.2 Two-component reagents, consist of all necessary reactants for the titration, but in two
different solutions. The titrating agent (usually known as the titrant) contains only iodine and methanol,
while the solvent containing the other Karl Fischer reaction components is used as the working medium
in the titration cell.
5.2 Water standard, commercially prepared standard with a certified concentration of 10 mg/g
(1,0 % mass fraction).
6 Apparatus
Usual laboratory apparatus and, in particular the following.
6.1 Karl Fischer apparatus, set up according to the manufacturer’s recommendations for the
determination of water in fats and oils. Set up and conduct protocols for routine maintenance as
recommended by the manufacturer. Use an airtight vessel and do not place the instrument in high
humidity areas. Do not place instruments or handle samples near water sources, such as taps, sinks, and
dishwashers in the laboratory.
6.2 Analytical balance, readable to the nearest 0,1 mg.
6.3 Syringes, of capacity 1 ml, 2 ml, 5 ml, 10 ml, and 20 ml.
To ensure accurate and reproducible results from the water standard, use a glass gastight syringe. For
water standard 10,0, use a 10 ml syringe and for either the water standard 1,00 or 0,10, use a 5 ml
syringe. In addition to the appropriate size syringe, use a needle that is long enough to allow for a
subsurface injection when injecting through the instrument’s septum.
7 Sampling
A representative sample should have been sent to the laboratory. It should not have been damaged or
changed during transport or storage.
Sampling is not part of the method specified in this document. A recommended sampling method is
given in ISO 5555.
8 Preparation of the test sample
Prepare the test sample in accordance with ISO 661.
2 © ISO 2017 – All rights reserved

The determination of water is conducted by adjusting the sample size to have between 1 mg and 100 mg
water for the volumetric titration (the main body of this document) and between 10 µg and 10 mg for
the coulometric titration (Annex B) using Karl Fischer instruments and reagents which have been
validated with standard water solutions over the necessary range. For the volumetric determination, a
minimum amount of 0,5 ml Karl Fischer reagent shall be us
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 8534
Troisième édition
2017-02
Corps gras d’origines animale et
végétale — Détermination de la teneur
en eau — Méthode de Karl Fischer
(sans pyridine)
Animal and vegetable fats and oils — Determination of water content
— Karl Fischer method (pyridine free)
Numéro de référence
©
ISO 2017
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2017, Publié en Suisse
Droits de reproduction réservés. Sauf indication contraire, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée
sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie, l’affichage sur
l’internet ou sur un Intranet, sans autorisation écrite préalable. Les demandes d’autorisation peuvent être adressées à l’ISO à
l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Ch. de Blandonnet 8 • CP 401
CH-1214 Vernier, Geneva, Switzerland
Tel. [phone]
Fax [phone]
[e-mail]
www.iso.org
ii © ISO 2017 – Tous droits réservés

Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 1
5 Réactifs . 2
6 Appareillage . 2
7 Échantillonnage . 2
8 Préparation de l’échantillon pour essai . 3
9 Mode opératoire. 3
9.1 Titre . 3
9.2 Prise d’essai . 4
9.3 Détermination . 5
10 Expression des résultats. 5
11 Fidélité de la méthode . 6
11.1 Essai interlaboratoires . 6
11.2 Répétabilité . 6
11.3 Reproductibilité . 6
12 Rapport d’essai . 6
Annexe A (informative) Résultats des essais interlaboratoires . 7
Annexe B (informative) Informations et données de fidélité sur l’emploi de la
méthode coulométrique . 8
Bibliographie .10
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/ directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation
de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion de l’ISO aux principes de l’OMC
concernant les obstacles techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: w w w . i s o .org/ iso/ avant
-propos .html.
Le présent document a été élaboré par le comité technique l’ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 11, Corps gras d’origines animale et végétale.
Cette troisième édition annule et remplace la deuxième édition (ISO 8534:2008), dont elle constitue une
révision mineure afin d’exclure l’applicabilité pour les corps gras issus du lait et des produits laitiers.
iv © ISO 2017 – Tous droits réservés

Introduction
La détermination de la teneur en eau des corps gras selon la méthode de Karl Fischer s’effectue selon
deux modes opératoires différents. Le présent document spécifie la méthode volumétrique permettant
de déterminer des teneurs en eau relativement élevées, en milligrammes (fort taux d’humidité). Cette
méthode est utilisée pour les échantillons ayant une teneur en eau comprise entre 1 mg et 100 mg.
L’Annexe B spécifie un titrage coulométrique nécessitant une teneur en eau de l’échantillon comprise
entre 10 µg et 10 mg. La méthode coulométrique est plus sensible que la méthode volumétrique et
permet la détermination de teneurs en eau plus faibles.
NORME INTERNATIONALE ISO 8534:2017(F)
Corps gras d’origines animale et végétale — Détermination
de la teneur en eau — Méthode de Karl Fischer (sans
pyridine)
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie une méthode de détermination de la teneur en eau des corps gras
d’origines animale et végétale (appelés « corps gras » dans la présente Norme internationale) à l’aide de
l’appareil Karl Fischer et d’un réactif sans pyridine.
Le lait et les produits laitiers (ou les corps gras issus du lait et des produits laitiers) sont exclus du
domaine d’application du présent document.
2 Références normatives
Les documents suivants cités dans le texte constituent, pour tout ou partie de leur contenu, des
exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour les
références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les éventuels
amendements).
ISO 661, Corps gras d’origines animale et végétale — Préparation de l’échantillon pour essai
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http:// www .electropedia .org/
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse http:// www .iso .org/ obp
3.1
teneur en eau
masse d’eau, en grammes par 100 g d’échantillon, déterminée conformément à la méthode spécifiée
dans le présent document
Note 1 à l’article: La teneur en eau est exprimée en fraction massique, en pourcentage.
4 Principe
Le corps gras dissous est titré à l’aide d’une solution d’iode et le dioxyde de soufre (SO ) est oxydé par
l’iode en présence d’eau. En principe, il se produit la réaction chimique donnée par la Formule (1):
HO++ISOC++HOHR32NR→ NH SO CH + RNHI (1)
[] []
22 23 43
L’alcool réagit avec le dioxyde de soufre (SO ) et la base azotée (RN) pour former un sel d’alkylsulfite
intermédiaire, qui est ensuite oxydé par l’iode en un sel d’alkylsulfate. Cette réaction d’oxydation
consomme l’eau contenue dans l’échantillon. Le point d’arrêt est contrôlé par potentiométrie.
5 Réactifs
AVERTISSEMENT — S’assurer du respect de la réglementation nationale en vigueur concernant
la manipulation des substances dangereuses. Les mesures de sécurité sur les plans technique,
organisationnel et personnel doivent être suivies.
Il est recommandé d’utiliser des solvants de travail « prêts à l’emploi », soit des réactifs monocomposant
(5.1.1), soit des réactifs bicomposants (5.1.2). Pour obtenir des résultats acceptables, des réactifs ayant
un titre de 1 mg et 2 mg d’eau par millilitre sont nécessaires.
5.1 Réactifs de Karl Fischer, qui recouvrent les réactifs monocomposant ou bicomposants utilisés
pour la détermination volumétrique.
5.1.1 Réactifs monocomposant, contenant tous les réactifs présents dans la solution de titrage: iode,
dioxyde de soufre et imidazole, dissous dans un alcool approprié. Le méthanol est généralement utilisé
comme milieu de travail dans la cellule de titrage.
Le solvant de choix est le méthanol absolu. Cependant, pour les corps gras et les huiles, il est nécessaire
d’utiliser un mélange de méthanol absolu et de chloroforme absolu (il convient que la fraction volumique
de méthanol soit au moins égale à 25 %, et de préférence à 50 %).
5.1.2 Réactifs bicomposants, comportant tous les réactifs nécessaires au titrage, mais dans deux
solutions distinctes. L’agent de titrage (généralement appelé « solution de titrage ») contient seulement
de l’iode et du méthanol, et le solvant contenant les autres composés de la réaction de Karl Fischer est
utilisé comme milieu de travail dans la cellule de titrage.
5.2 Étalon d’eau, préparation du commerce ayant une concentration certifiée de 10 mg/g (fraction
massique = 1,0 %).
6 Appareillage
Matériel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit.
6.1 Appareil Karl Fischer, réglé conformément aux recommandations du fabricant pour la
détermination de la teneur en eau des corps gras et des huiles. Mettre en place et mener les protocoles
de maintenance de routine comme recommandé par le fabricant. Utiliser un récipient hermétique et ne
pas placer l’instrument dans une zone de forte humidité. Ne pas placer les instruments ni manipuler les
échantillons à proximité de sources d’eau telles que robinets, éviers et lave-vaisselle dans le laboratoire.
6.2 Balance analytique, avec une précision de lecture de 0,1 mg.
6.3 Seringues, d’une capacité de 1 ml, 2 ml, 5 ml, 10 ml et 20 ml.
Pour obtenir des résultats exacts et reproductibles avec l’étalon d’eau, utiliser une seringue en verre
étanche aux gaz. Pour l’étalon d’eau 10,0 utiliser une seringue de 10 ml, et pour l’étalon d’eau 1,00 ou
0,10 utiliser une seringue de 5 ml. Outre le choix d’une seringue de dimension appropriée, utiliser une
aiguille suffisamment longue pour permettre une injection sous la surface du liquide en cas d’injection
à travers le septum de l’instrument.
7 Échantillonnage
Il convient que le laboratoire reçoive un échantillon représentatif, n’ayant pas été endommagé ou
modifié pendant le transport ou l’entreposage.
L’échantillonnage ne fait pas partie de la méthode spécifiée dans le présent document. Une méthode
d’échantillonnage recommandée est indiquée dans l’ISO 5555.
2 © ISO 2017 – Tous droits réservés

8 Préparation de l’échantillon pour essai
Préparer l’échantillon pour essai conformément à l’ISO 661.
Déterminer la teneur en eau en ajustant la taille de l’échantillon pour avoir entre 1 mg et 100 mg d’eau
pour le titrage volumétrique (corps du présent document) et entre 10 µg et 10 mg pour le titrage
coulométrique (Annexe B), en utilisant un appareil Karl Fischer et des réactifs qui ont été validés avec
des solutions d’eau étalons couvrant toute la plage nécessaire. Pour la détermination volumétrique, une
quantité minimale de 0,5 ml de réactif de Karl Fischer doit être utilisée pour le titrage.
9 Mode opératoire
9.1 Titre
9.1.1 Le titre doit être déterminé quotidiennement pou
...