ISO 6579:2002
(Main)Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the detection of Salmonella spp.
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the detection of Salmonella spp.
ISO 6579:2002 specifies a horizontal method for the detection of Salmonella, including Salmonella Typhi and Salmonella Paratyphi. It is applicable to products intended for human consumption and the feeding of animals, and to environmental samples in the area of food production and food handling.
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour la recherche des Salmonella spp.
La présente Norme internationale spécifie une méthode horizontale de recherche des Salmonella, incluant Salmonella Typhi et Salmonella Paratyphi. La présente Norme internationale est applicable aux produits destinés à la consommation humaine ou à l'alimentation animale.
General Information
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Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 6579
Fourth edition
2002-07-15
Microbiology of food and animal feeding
stuffs — Horizontal method for the
detection of Salmonella spp.
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour la recherche des
Salmonella spp.
Reference number
©
ISO 2002
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Contents Page
Foreword.iv
Introduction.v
1 Scope .1
2 Normative references.1
3 Terms and definitions .1
4 Principle.2
4.1 General.2
4.2 Pre-enrichment in non-selective liquid medium .2
4.3 Enrichment in selective liquid media .2
4.4 Plating out and identification .2
4.5 Confirmation of identity .2
5 Culture media, reagents and sera.3
5.1 General.3
5.2 Culture media and reagents .3
5.3 Sera .4
6 Apparatus and glassware .4
7 Sampling.5
8 Preparation of test sample.5
9 Procedure (see diagram in annex A).5
9.1 Test portion and initial suspension .5
9.2 Non-selective pre-enrichment .6
9.3 Selective enrichment.6
9.4 Plating out and identification .6
9.5 Confirmation .6
10 Expression of results .10
11 Test report .10
12 Quality assurance.11
Annex A (normative) Diagram of procedure .12
Annex B (normative) Composition and preparation of culture media and reagents.14
Annex C (informative) Results of interlaboratory trial .24
Bibliography.27
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO
member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical
committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in
liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 3.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards adopted
by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an International
Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this International Standard may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 6579 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9, Microbiology.
This fourth edition cancels and replaces the third edition (ISO 6579:1993), which has been technically revised.
Annexes A and B form a normative part of this Interntional Standard. Annex C is for information only.
iv © ISO 2002 – All rights reserved
Introduction
Because of the large variety of food and feed products, this horizontal method may not be appropriate in every
detail for certain products. In this case, different methods, which are specific to these products, may be used if
absolutely necessary for justified technical reasons. Nevertheless, every attempt should be made to apply this
horizontal method as far as possible.
When this International Standard is next reviewed, account will be taken of all information then available regarding
the extent to which this horizontal method has been followed and the reasons for deviations from this method in the
case of particular products.
The harmonization of test methods cannot be immediate, and for certain groups of products International
Standards and/or national standards may already exist that do not comply with this horizontal method. It is hoped
that when such standards are reviewed they will be changed to comply with this International Standard so that
eventually the only remaining departures from this horizontal method will be those necessary for well-established
technical reasons.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 6579:2002(E)
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal
method for the detection of Salmonella spp.
WARNING — In order to safeguard the health of laboratory personnel, it is essential that tests for detecting
Salmonella, and especially Salmonella Typhi and Salmonella Paratyphi, are only undertaken in properly
equipped laboratories, under the control of a skilled microbiologist, and that great care is taken in the
disposal of all incubated materials.
1 Scope
This International Standard specifies a horizontal method for the detection of Salmonella, including Salmonella
Typhi and Salmonella Paratyphi.
Subject to the limitations discussed in the Introduction, this International Standard is applicable to
products intended for human consumption and the feeding of animals;
environmental samples in the area of food production and food handling.
WARNING — The method may not recover all Salmonella Typhi and Paratyphi.
2 Normative references
The following normative documents contain provisions which, through reference in this text, constitute provisions of
this International Standard. For dated references, subsequent amendments to, or revisions of, any of these
publications do not apply. However, parties to agreements based on this International Standard are encouraged to
investigate the possibility of applying the most recent editions of the normative documents indicated below. For
undated references, the latest edition of the normative document referred to applies. Members of ISO and IEC
maintain registers of currently valid International Standards.
ISO 6887-1, Microbiology of food and animal feeding stuffs — Preparation of test samples, initial suspension and
decimal dilutions for microbiological examination — Part 1: General rules for the preparation of the initial
suspension and decimal dilutions
ISO 7218:1996, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General rules for microbiological examinations
ISO 8261, Milk and milk products — General guidance for the preparation of test samples, initial suspensions and
decimal dilutions for microbiological examination
3 Terms and definitions
For the purposes of this International Standard, the following terms and definitions apply.
3.1
Salmonella
microorganisms which form typical or less typical colonies on solid selective media and which display the
biochemical and serological characteristics described when tests are carried out in accordance with this
International Standard
3.2
detection of Salmonella
determination of the presence or absence of Salmonella (3.1), in a particular mass or volume of product, when
tests are carried out in accordance with this International Standard
4 Principle
4.1 General
The detection of Salmonella necessitates four successive stages (see also annex A).
NOTE The Salmonella may be present in small numbers and are often accompanied by considerably larger numbers of
other Enterobacteriaceæ or other families. Furthermore, pre-enrichment is necessary to permit the detection of low numbers of
Salmonella or injured Salmonella.
4.2 Pre-enrichment in non-selective liquid medium
Buffered peptone water is inoculated at ambient temperature with the test portion, then incubated at 37 °C ± 1 °C
for 18 h ± 2 h.
For certain foodstuffs the use of other pre-enrichment procedures is necessary. See 9.1.2.
For large quantities, the buffered peptone water should be heated to 37 °C ± 1 °C before inoculation with the test
portion.
4.3 Enrichment in selective liquid media
Rappaport-Vassiliadis medium with soya (RVS broth) and Muller-Kauffmann tetrathionate/novobiocin broth (MKTTn
broth) are inoculated with the culture obtained in 4.2.
The RVS broth is incubated at 41,5 °C ± 1 °C for 24 h ± 3 h, and the MKTTn broth at 37 °C ± 1 °C for 24 h ± 3 h.
4.4 Plating out and identification
From the cultures obtained in 4.3, two selective solid media are inoculated:
xylose lysine deoxycholate agar (XLD agar);
any other solid selective medium complementary to XLD agar and especially appropriate for the isolation of
lactose-positive Salmonella and Salmonella Typhi and Salmonella Paratyphi strains; the laboratory may
choose which medium to use.
The XLD agar is incubated at 37 °C ± 1 °C and examined after 24 h ± 3 h. The second selective agar is incubated
according to the manufacturer's recommendations.
NOTE For information, Brilliant green agar (BGA), bismuth sulfite agar, etc., could be used as the second plating-out
medium.
4.5 Confirmation of identity
Colonies of presumptive Salmonella are subcultured, then plated out as described in 4.4, and their identity is
confirmed by means of appropriate biochemical and serological tests.
2 © ISO 2002 – All rights reserved
5 Culture media, reagents and sera
5.1 General
For current laboratory practice, see ISO 721
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 6579
Quatrième édition
2002-07-15
Microbiologie des aliments — Méthode
horizontale pour la recherche des
Salmonella spp.
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the
detection of Salmonella spp.
Numéro de référence
©
ISO 2002
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Imprimé en Suisse
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Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction.v
1 Domaine d'application .1
2 Références normatives .1
3 Termes et définitions.2
4 Principe.2
4.1 Généralités .2
4.2 Préenrichissement en milieu non sélectif liquide .2
4.3 Enrichissement en milieux sélectifs liquides .2
4.4 Isolement et identification .2
4.5 Confirmation .3
5 Milieux de culture, réactifs et sérum .3
5.1 Généralités .3
5.2 Milieux de culture et réactifs .3
5.3 Sérums.4
6 Appareillage et verrerie.4
7 Échantillonnage .5
8 Préparation de l'échantillon pour essai .5
9 Mode opératoire (voir le schéma en annexe A).5
9.1 Prise d'essai et suspension mère.5
9.2 Préenrichissement non sélectif .6
9.3 Enrichissement sélectif.6
9.4 Isolement et identification .6
9.5 Confirmation .7
10 Expression des résultats .11
11 Rapport d'essai.11
12 Assurance de la qualité.11
Annexe A (normative) Schéma du mode opératoire .12
Annexe B (normative) Composition et préparation des milieux de culture et des réactifs .14
Annexe C (informative) Résultats de l'essai interlaboratoires .24
Bibliographie.27
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en
liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec la Commission
électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 3.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments de la présente Norme internationale peuvent faire
l'objet de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de
ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 6579 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 9,
Microbiologie.
Cette quatrième édition annule et remplace la troisième édition (ISO 6579:1993), qui a fait l'objet d'une révision
technique.
Les annexes A et B constituent des éléments normatifs de la présente Norme internationale. L'annexe C est
donnée uniquement à titre d'information.
iv © ISO 2002 – Tous droits réservés
Introduction
En raison de la diversité des produits alimentaires, il est possible que cette méthode horizontale ne soit pas
applicable dans tous ses détails à certains d'entre eux. Dans ce cas, des méthodes différentes, spécifiques à ces
produits, pourront être utilisées si cela s'avère absolument nécessaire pour des raisons techniques justifiées.
Néanmoins, tous les efforts doivent être faits pour appliquer cette méthode horizontale chaque fois que possible.
Lors du réexamen périodique de la présente Norme internationale, il sera tenu compte de toutes les évolutions
intervenues depuis sa publication et, notamment, dans quelle mesure cette méthode horizontale aura été suivie
ainsi que les raisons des dérogations dans le cas de produits particuliers.
L'harmonisation de toutes les méthodes d'essai ne peut être réalisée de façon immédiate; de ce fait, il peut déjà
exister des Normes internationales et/ou nationales pour certains groupes de produits qui ne concordent pas avec
cette méthode horizontale. Lorsque de telles normes viendront en révision, il serait souhaitable de les aligner avec
les prescriptions de la présente Norme internationale et de ne conserver que les seules divergences justifiées
indispensables pour des raisons techniques.
NORME INTERNATIONALE ISO 6579:2002(F)
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour la
recherche des Salmonella spp.
AVERTISSEMENT — Afin de sauvegarder la santé du personnel de laboratoire, il est essentiel que les
essais de recherche des Salmonella, et particulièrement des Salmonella Typhi et des Salmonella Paratyphi,
ne soient réalisés que dans des laboratoires équipés à cet effet, sous la surveillance d’un microbiologiste
expérimenté, et qu’un grand soin soit pris pour se débarrasser de tous les éléments incubés.
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale spécifie une méthode horizontale de recherche des Salmonella, incluant
Salmonella Typhi et Salmonella Paratyphi.
Compte tenu des remarques signalées dans l'introduction, la présente Norme internationale est applicable aux
produits destinés à la consommation humaine ou à l'alimentation animale;
échantillons environnementaux dans le domaine de la production et de la manutention de produits
alimentaires.
AVERTISSEMENT — Cette méthode peut ne pas permettre de retrouver toutes les Salmonella Typhi et
Paratyphi.
2 Références normatives
Les documents normatifs suivants contiennent des dispositions qui, par suite de la référence qui y est faite,
constituent des dispositions valables pour la présente Norme internationale. Pour les références datées, les
amendements ultérieurs ou les révisions de ces publications ne s'appliquent pas. Toutefois, les parties prenantes
aux accords fondés sur la présente Norme internationale sont invitées à rechercher la possibilité d'appliquer les
éditions les plus récentes des documents normatifs indiqués ci-après. Pour les références non datées, la dernière
édition du document normatif en référence s'applique. Les membres de l'ISO et de la CEI possèdent le registre des
Normes internationales en vigueur.
ISO 6887-1, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des dilutions
décimales en vue de l’examen microbiologique — Partie 1: Règles générales pour la préparation de la suspension
mère et des dilutions décimales
ISO 7218, Microbiologie des aliments — Règles générales pour les examens microbiologiques
ISO 8261, Lait et produits laitiers — Lignes directrices générales pour la préparation des échantillons pour essai,
de la suspension mère et des dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique
3 Termes et définitions
Pour les besoins de la présente Norme internationale, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
Salmonella
micro-organismes formant des colonies typiques ou moins typiques sur des milieux sélectifs solides et possédant
les caractéristiques biochimiques et sérologiques décrites lorsque l'essai est exécuté selon la présente Norme
internationale
3.2
recherche des Salmonella
détermination de la présence ou de l'absence de Salmonella (3.1), dans une quantité déterminée de produit,
lorsque l'essai est exécuté selon la présente Norme internationale
4 Principe
4.1 Généralités
La recherche de Salmonella nécessite quatre phases successives (voir également annexe A).
NOTE Les Salmonella peuvent, en effet, être présentes en petit nombre et sont souvent accompagnées d'un nombre
beaucoup plus grand d'autres micro-organismes appartenant à la famille des Enterobacteriaceæ ou à d'autres familles. En
conséquence, un enrichissement sélectif est nécessaire; de plus, un préenrichissement est aussi souvent nécessaire afin de
pouvoir rechercher les Salmonella en nombre restreint ou les Salmonella ayant subi une altération.
4.2 Préenrichissement en milieu non sélectif liquide
Ensemencement de la prise d'essai dans de l'eau peptonée tamponnée à température ambiante, puis incubation à
37 °C ± 1 °C pendant 18 h ± 2 h.
Pour certains aliments, l'utilisation d'autres modalités de préenrichissement est nécessaire. Voir 9.1.2.
En cas de grandes quantités, il convient de chauffer l’eau peptonée tamponnée à 37 °C ± 1 °C avant
l’ensemencement avec la prise d’essai.
4.3 Enrichissement en milieux sélectifs liquides
Ensemencement du bouillon Rappaport-Vassiliadis avec soja (bouillon RVS) et d'un bouillon Muller-Kauffmann au
tétrathionate-novobiocine (MKTTn) avec la culture obtenue en 4.2.
Incubation du bouillon RVS à 41,5 °C ± 1 °C pendant 24 h ± 3 h et du bouillon MKTTn à 37 °C ± 1°C pendant
24 h ± 3 h.
4.4 Isolement e
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.