ISO 14673-2:2004

Milk and milk products — Determination of nitrate and nitrite contents — Part 2: Method using segmented flow analysis (Routine method)

ISO 14673-2|IDF 189-2:2004 specifies a routine method for the determination of the nitrate and nitrite contents of milk and milk products by segmented flow analysis. The method is applicable to milk, cheese, and liquid and dried milk products and infant foods.

Lait et produits laitiers — Détermination des teneurs en nitrates et en nitrites — Partie 2: Méthode d'analyse par flux continus segmentés (Méthode de routine)

L'ISO 14673-2|FIL 189-2:2004 décrit une méthode de routine pour la détermination des teneurs en nitrates et en nitrites du lait et des produits laitiers par analyse par flux continus segmentés. La méthode est valable pour le lait, les fromages, les produits laitiers secs et liquides et les aliments pour bébés.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 01-Feb-2004
• ICS: 67.100.01 - Milk and milk products in general
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Current Stage: 9093 - International Standard confirmed
• Completion Date: 15-Nov-2019

Relations

• Consolidates: ISO/IEC 13818-1:1996 - Information technology — Generic coding of moving pictures and associated audio information: Systems
• Effective Date: 06-Jun-2022
• Revises: ISO 14673-2:2001 - Milk and milk products — Determination of nitrate and nitrite contents — Part 2: Method using segmented flow analysis (Routine method)
• Effective Date: 15-Apr-2008
• Revises: ISO 14673-2:2001/Cor 1:2002 - Milk and milk products — Determination of nitrate and nitrite contents — Part 2: Method using segmented flow analysis (Routine method) — Technical Corrigendum 1
• Effective Date: 15-Apr-2008
• Consolidated By: ISO 15512:2014 - Plastics — Determination of water content
• Effective Date: 06-Jun-2022

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 14673-2
IDF
189-2
Second edition
2004-02-01


Milk and milk products — Determination
of nitrate and nitrite contents —
Part 2:
Method using segmented flow analysis
(Routine method)
Lait et produits laitiers — Détermination des teneurs en nitrates et en
nitrites —
Partie 2: Méthode d'analyse par flux continus segmentés (Méthode de
routine)




Reference numbers
ISO 14673-2:2004(E)
IDF 189-2:2004(E)
©
ISO and IDF 2004

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ISO 14673-2:2004(E)
IDF 189-2:2004(E)
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©  ISO and IDF 2004
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Published in Switzerland

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ISO 14673-2:2004(E)
IDF 189-2:2004(E)
Contents Page
Foreword. iv
1 Scope. 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions. 1
4 Principle . 2
4.1 Nitrate determination . 2
4.2 Nitrite determination . 2
5 Reagents . 2
6 Apparatus. 5
7 Sampling . 5
8 Preparation of test sample. 6
8.1 Cheese. 6
8.2 Dried milk products and infant food . 6
8.3 Milk and liquid milk products. 6
9 Procedure. 6
9.1 Preparation of the reduction column . 6
9.2 Checking the reducing capacity of the column . 7
9.3 Determination of nitrate content . 7
9.4 Determination of nitrite content . 8
9.5 Calibration curve. 9
9.6 Checking the drift of standard solutions. 9
10 Calculation and expression of results . 9
10.1 Calculation. 9
10.2 Expression of results. 10
11 Precision . 10
11.1 General. 10
11.2 Nitrite content. 10
11.3 Nitrate content. 10
12 Test report. 11
Bibliography . 14

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ISO 14673-2:2004(E)
IDF 189-2:2004(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has
been established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental
and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 14673-2IDF 189-2 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee
SC 5, Milk and milk products, and the International Dairy Federation (IDF), in collaboration with AOAC
International. It is being published jointly by ISO and IDF and separately by AOAC International.
This second edition cancels and replaces the first (ISO 14673-2IDF 189-2:2001), of which it constitutes a
minor revision.
ISO 14673IDF 189 consists of the following parts, under the general title Milk and milk products —
Determination of nitrate and nitrite contents:
— Part 1: Method using cadmium reduction and spectrometry
— Part 2: Method using segmented flow analysis (Routine method)
— Part 3: Method using cadmium reduction and flow injection analysis with in-line dialysis (Routine method)

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ISO 14673-2:2004(E)
IDF 189-2:2004(E)
Foreword
IDF (the International Dairy Federation) is a worldwide federation of the dairy sector with a National
Committee in every member country. Every National Committee has the right to be represented on the IDF
Standing Committees carrying out the technical work. IDF collaborates with ISO and AOAC International in
the development of standard methods of analysis and sampling for milk and milk products.
Draft International Standards adopted by the Action Teams and Standing Committees are circulated to the
National Committees for voting. Publication as an International Standard requires approval by at least 50 % of
the National Committees casting a vote.
ISO 14673-2IDF 189-2 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee
SC 5, Milk and milk products, and the International Dairy Federation (IDF), in collaboration with AOAC
International. It is being published jointly by ISO and IDF and separately by AOAC International.
All work was carried out by the Joint ISO/IDF/AOAC Action Team, Minerals and minor compounds, of the
Standing Committee on Minor components characterization of physical properties, under the aegis of its
project leader, Mr G. Bråthen (NO).
This second edition, together with ISO 14673-1IDF 189-1 and ISO 14673-3IDF 189-3, cancels and replaces
IDF 84A:1984, IDF 95A:1982, IDF 96A:1987, IDF 97A:1985 and IDF 120:1984, which have been technically
revised.

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ISO 14673-2:2004(E)
INTERNATIONAL STANDARD
IDF 189-2:2004(E)

Milk and milk products — Determination of nitrate and nitrite
contents —
Part 2:
Method using segmented flow analysis (Routine method)
WARNING — The use of this International Standard may involve hazardous materials, operations and
equipment. This standard does not purport to address all the safety problems associated with its use.
It is the responsibility of the user of this standard to establish safety and health practices and
determine the applicability of regulatory limitations prior to use.
1 Scope
This part of ISO 14673IDF 189 specifies a routine method for the determination of the nitrate and nitrite
contents of milk and milk products by segmented flow analysis. The method is applicable to milk, cheese, and
liquid and dried milk products and infant foods.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 648, Laboratory glassware — One-mark pipettes
ISO 835-1, Laboratory glassware — Graduated pipettes — Part 1: General requirements
ISO 1042, Laboratory glassware — One-mark volumetric flasks
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
nitrate content
mass fraction of nitrate determined by the procedure specified in this part of ISO 14673IDF 189
–
NOTE The nitrate content is expressed as the mass in milligrams of nitrate ions (NO ) per kilogram of product.
3
3.2
nitrite content
mass fraction of nitrite determined by the procedure specified in this part of ISO 14673IDF 189
–
NOTE The nitrite content is expressed as the mass in milligrams of nitrite ions (NO ) per kilogram of product.
2
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ISO 14673-2:2004(E)
IDF 189-2:2004(E)
4 Principle
4.1 Nitrate determination
A test portion is suspended in water. Part of the suspension is transferred to the analyser for dialysis. The
nitrate ions are reduced to nitrite. The nitrite content is determined by a spectrometric method.
Standard nitrate solutions are determined by the same procedure. The nitrate content is calculated by
comparing the reading obtained from the test portion with the readings from the standard solutions.
NOTE Any nitrite present is determined as nitrate. The amount of nitrite is generally small compared to the amount of
nitrate. Infant food based on soy-proteins can be an exception to the rule. A correction for the nitrite present can be
applied after determination of the nitrite content.
4.2 Nitrite determination
A test portion is suspended in a solution of ammonium and sodium chloride. Part of the suspension is
transferred to the analyser for dialysis. The nitrite content is determined by a spectrometric method.
Standard nitrite solutions are determined by the same procedure. The nitrite content is calculated by
comparing the reading obtained from the test portion with that from the standard solution.
5 Reagents
Use only reagents of recognized analytical grade unless otherwise specified.
5.1 Water, distilled or deionized, or water of equivalent purity, free from nitrate and nitrite ions.
To avoid the possible inclusion of small gas bubbles in the copperized cadmium column (6.9), freshly boil the
distilled or deionized water and cool to room temperature. Use the thus-prepared water for the preparation of
the column (9.1), to check the reducing capacity of the column (9.2), and for regeneration of the column.
5.2 Cadmium granules, of diameter 0,3 mm to 0,8 mm.
Prepare cadmium granules, if not available commercially, as follows.
Place a suitable number of zinc rods in a beaker. Cover the rods with cadmium sulfate solution (5.3). Scrape
the cadmium sponge from the rods from time to time over a period of 24 h. Remove the zinc rods and decant
the liquid until only sufficient remains to cover the cadmium sponge. Wash the sponge two or three times with
water. Transfer the cadmium sponge to a laboratory blender together with 400 ml of the dilute hydrochloric
acid (5.6) and blend for a few seconds to obtain granules of the required size. Return the contents of the
blender to the beaker and leave to stand for several hours, while stirring occasionally to remove bubbles.
Decant most of the liquid and immediately copperize the granules as described in 9.1.2.
WARNING — Because of its toxicity, the used cadmium should be delivered as chemical waste to the
relevant authorities.
5.3 Cadmium sulfate solution, c(CdSO ⋅8H O) = 40 g/l.
4 2
Dissolve 40 g of cadmium sulfate in water in a 1 000 ml volumetric flask (6.4). Dilute to the mark with water
and mix.
5.4 Copper(II) sulfate solution, c(CuSO ⋅5H O) = 20 g/l.
4 2
Dissolve 2 g of copper(II) sulfate in water in a 100 ml volumetric flask (6.4). Dilute to the mark with water and mix.
5.5 Hydrochloric acid (HCl), (ρ = 1,19 g/ml).
20
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ISO 14673-2:2004(E)
IDF 189-2:2004(E)
5.6 Dilute hydrochloric acid, c(HCl) ≈ 1 mol/l.
Carefully add 80 ml of hydrochloric acid (5.5) to about 700 ml water in a 1 000 ml volumetric flask (6.4) while
regularly swirling the contents. Cool the contents to room temperature. Dilute to the mark with water and mix
carefully.
5.7 Disodium ethylenediaminetetraacetate dihydrate (EDTA) solution (Na C H N O ⋅2H O).
2 10 14 2 8 2
Dissolve 33,5 g of EDTA in about 900 ml water in a 1 000 ml volumetric flask (6.4). Dilute to the mark with
water and mix.
5.8 Poly(oxyethylene lauryl ether) solution, 30 % mass fraction.
5.9 Ammonium and sodium chloride solution I.
Dissolve 40 g of ammonium chloride (NH Cl) and 200 g of sodium chloride (NaCl) in about 950 ml water in a
4
1 000 ml volumetric flask (6.4). Use concentrated ammonia to adjust the pH to 8,5. Dilute to the mark with
water. Add 2 ml of poly(oxyethylene lauryl ether) solution (5.8) and mix.
5.10 Ammonium and sodium chloride solution II.
Dissolve 10 g of ammonium chloride (NH Cl) and 50 g of sodium chloride (NaCl) in 950 ml water in a 1 000 ml
4
volumetric flask (6.4). Add 20 ml EDTA solution (5.7) and mix. Use concentrated ammonia to adjust the pH to
8,5. Dilute to the mark with water. Add 2 ml of poly(oxyethylene lauryl ether) solution (5.8) and mix.
5.11 Ammonium and sodium chloride solution III.
Dissolve 10 g of ammonium chloride (NH Cl) and 50 g of sodium chloride (NaCl) in 950 ml water in a 1 000 ml
4
volumetric flask (6.4). Use concentrated ammonia to adjust the pH to 8,5. Dilute the contents to the 1 000 ml
mark with water. Add 2 ml of poly(oxyethylene lauryl ether) solution (5.8) and mix.
5.12 Phosphoric acid solution (H PO ), 85 %, (ρ = 1,71 g/ml).
3 4 20
5.13 Colour reagent.
Add 100 ml of phosphoric acid solution (5.12) to 800 ml water in a 1 000 ml volumetric flask (6.4). Add in the
following order: 10 g sulfanilamide (NH C H SO NH) and 0,5 g N-1-naphthylethylene diamine
2 6 4 2 2
dihydrochloride (C H NHCH CH NH ⋅2HCl) and mix. Dilute to the mark with water. Add 0,5 ml of
10 7 2 2 2
poly(oxyethylene lauryl ether) solution (5.8) and mix again.
If stored in a refrigerator, the colour reagent solution may be kept for up to 1 month.
–
5.14 Sodium nitrate stock solution (NaNO ), c(NO ) = 0,400 g/l.
3 3
Dry an amount of sodium nitrate in the oven (6.18) set at 110 °C to 120 °C for 2 h. Dissolve 0,548 4 g of the
dry sodium nitrate in water in a 1 000 ml volumetric flask (6.4). Dilute to the mark with water and mix.
–
5.15 Sodium nitrate working solution, c(NO ) = 40 µg/ml.
3
Pipette (6.5) 10 ml of the sodium nitrate stock solution (5.14) into a 100 ml volumetric flask (6.4). Dilute to the
mark with water and mix.
5.16 Sodium nitrate calibration solutions.
Prepare a series of sodium nitrate calibration solutions with an increasing concentration of nitrate by pipetting
into six 200 ml volumetric flasks respectively, 1 ml, 2 ml, 3 ml, 6 ml, 9 ml and 12 ml of the sodium nitrate
–
working solution (5.15). Dilute each solution to the mark with water and mix. The nitrate (NO ) contents of the
3
obtained sodium nitrate calibration solutions are 0,2 µg/ml, 0,4 µg/ml, 0,6 µg/ml, 1,2 µg/ml, 1,8 µg/ml and
2,4 µg/ml respectively.
© ISO and IDF 2004 – All rights reserved 3

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ISO 14673-2:2004(E)
IDF 189-2:2004(E)
5.17 Sodium nitrite stock solutions (NaNO ).
2
Dry an amount of sodium nitrite in the oven (6.18) set at 110 °C to 120 °C for 2 h.
–
5.17.1 Sodium nitrite stock solutions I, c(NO ) = 0,297 mg/ml.
2
Dissolve 0,445 g of the dry sodium nitrite (5.17) in water in a 1 000 ml volumetric flask (6.4). Dilute to the mark
with
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 14673-2
FIL
189-2
Deuxième édition
2004-02-01


Lait et produits laitiers — Détermination
des teneurs en nitrates et en nitrites —
Partie 2:
Méthode d'analyse par flux continus
segmentés (Méthode de routine)
Milk and milk products — Determination of nitrate and nitrite contents —
Part 2: Method using segmented flow analysis (Routine method)




Numéros de référence
ISO 14673-2:2004(F)
FIL 189-2:2004(F)
©
ISO et FIL 2004

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 14673-2:2004(F)
FIL 189-2:2004(F)
PDF – Exonération de responsabilité
Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
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déclinent toute responsabilité en la matière.
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quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
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ISO copyright office Fédération Internationale de Laiterie
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Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail [e-mail] E-mail [e-mail]
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Publié en Suisse

ii © ISO et FIL 2004 – Tous droits réservés

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ISO 14673-2:2004(F)
FIL 189-2:2004(F)
Sommaire Page
Avant-propos. iv
1 Domaine d'application. 1
2 Références normatives. 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
4.1 Détermination des nitrates. 2
4.2 Détermination des nitrites. 2
5 Réactifs . 2
6 Appareillage. 5
7 Échantillonnage . 6
8 Préparation de l'échantillon pour essai. 6
8.1 Fromage . 6
8.2 Produits à base de lait sec et aliments pour bébés . 6
8.3 Lait et produits à base de lait liquide. 7
9 Mode opératoire . 7
9.1 Préparation de la colonne de réduction . 7
9.2 Contrôle du pouvoir réducteur de la colonne. 7
9.3 Détermination de la teneur en nitrates . 7
9.4 Détermination de la teneur en nitrites . 8
9.5 Courbe d'étalonnage. 9
9.6 Contrôle de la dérive des solutions pour étalonnage . 9
10 Calcul et expression des résultats. 10
10.1 Calcul. 10
10.2 Expression des résultats. 11
11 Fidélité. 11
11.1 Généralités. 11
11.2 Teneur en nitrites . 11
11.3 Teneur en nitrates . 11
12 Rapport d'essai . 12
Bibliographie . 14

© ISO et FIL 2004 – Tous droits réservés iii

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ISO 14673-2:2004(F)
FIL 189-2:2004(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 14673-2FIL 189-2 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires,
sous-comité SC 5, Lait et produits laitiers, et la Fédération internationale de laiterie (FIL), en collaboration
avec l'AOAC International. Elle est publiée conjointement par l'ISO et la FIL, et séparément par l'AOAC
International.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 14673-2FIL 189-2:2001), dont elle
constitue une révision mineure.
L'ISO 14673FIL 189 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Lait et produits
laitiers — Détermination des teneurs en nitrates et en nitrites:
— Partie 1: Méthode par réduction au cadmium et spectrométrie
— Partie 2: Méthode d'analyse par flux continus segmentés (Méthode de routine)
— Partie 3: Méthode par réduction au cadmium et d'analyse par injection de flux avec dialyse en ligne
(Méthode de routine)

iv © ISO et FIL 2004 – Tous droits réservés

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ISO 14673-2:2004(F)
FIL 189-2:2004(F)
Avant-propos
La FIL (Fédération internationale de laiterie) est une fédération mondiale du secteur laitier avec un Comité
National dans chacun de ses pays membres. Chaque Comité National a le droit de faire partie des Comités
permanents de la FIL auxquels sont confiés les travaux techniques. La FIL collabore avec l'ISO et avec
l'AOAC International pour l'élaboration de méthodes normalisées d'analyse et d'échantillonnage pour le lait et
les produits laitiers.
Les projets de Normes internationales adoptés par les Équipes d'Action et les Comités permanents sont
soumis aux Comités Nationaux pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert
l'approbation de 50 % au moins des Comités Nationaux votants.
L'ISO 14673-2FIL 189-2 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires,
sous-comité SC 5, Lait et produits laitiers, et la Fédération internationale de laiterie (FIL), en collaboration
avec l'AOAC International. Elle est publiée conjointement par l'ISO et la FIL, et séparément par l'AOAC
International.
L'ensemble des travaux a été confié à l'Équipe d'Action mixte ISO/FIL/AOAC, Composants azotés dans le lait
et les produits laitiers, du Comité permanent chargé des Composants mineurs du lait et de la caractérisation
des propriétés physiques, sous la conduite de son chef de projet, Monsieur G. Bråthen (NO).
Cette deuxième édition, ainsi que l'ISO 14673-1FIL 189-1 et l'ISO 14673-3FIL 189-3, annule et remplace la
FIL 84A:1984, la FIL 95A:1982, la FIL 96A:1987, la FIL 97A:1985 et la FIL 120:1984, dont elle constitue une
révision technique.

© ISO et FIL 2004 – Tous droits réservés v

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ISO 14673-2:2004(F)
NORME INTERNATIONALE
FIL 189-2:2004(F)

Lait et produits laitiers — Détermination des teneurs en nitrates
et en nitrites —
Partie 2:
Méthode d'analyse par flux continus segmentés (Méthode de
routine)
AVERTISSEMENT — L'utilisation de la présente Norme internationale peut impliquer l'emploi de
produits, d'opérations et d'équipements à caractère dangereux. La présente Norme internationale ne
prétend pas aborder tous les problèmes de sécurité qui sont, le cas échéant, liés à son utilisation. Il
incombe à l'utilisateur d'établir des pratiques appropriées en matière d'hygiène et de sécurité, et de
s'assurer du respect de la réglementation nationale en vigueur.
1 Domaine d'application
La présente partie de l'ISO 14673FIL 189 décrit une méthode de routine pour la détermination des teneurs
en nitrates et en nitrites du lait et des produits laitiers par analyse par flux continus segmentés. La méthode
est valable pour le lait, les fromages, les produits laitiers secs et liquides et les aliments pour bébés.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 648, Verrerie de laboratoire — Pipettes à un trait
ISO 835-1, Verrerie de laboratoire — Pipettes graduées — Partie 1: Spécifications générales
ISO 1042, Verrerie de laboratoire — Fioles jaugées à un trait
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
teneur en nitrates
fraction massique des nitrates déterminée par le mode opératoire décrit dans la présente partie de
l'ISO 14673FIL 189
–
NOTE La teneur en nitrates est exprimée sous forme de masse, en milligrammes d'ions nitrate (NO ) par
3
kilogramme de produit.
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ISO 14673-2:2004(F)
FIL 189-2:2004(F)
3.2
teneur en nitrites
fraction massique des nitrites déterminée par le mode opératoire décrit dans la présente partie de
l'ISO 14673FIL 189
–
NOTE La teneur en nitrites est exprimée sous forme de masse, en milligrammes d'ions nitrite (NO ) par kilogramme
2
de produit.
4 Principe
4.1 Détermination des nitrates
Une prise d'essai est suspendue dans de l'eau. Une partie de la suspension est transférée pour dialyse dans
l'analyseur. Les ions nitrate sont convertis en nitrites et la teneur en nitrites est déterminée par spectrométrie.
Les solutions étalons de nitrate sont déterminées en utilisant le même mode opératoire. La teneur en nitrates
est calculée par comparaison des résultats de la prise d'essai avec ceux des solutions étalons.
NOTE Tout le nitrite présent est considéré comme du nitrate. La quantité de nitrites présents est généralement faible
comparée à la quantité de nitrates. Les aliments pour bébés à base de protéines de soja peuvent être considérés comme
une exception à cette règle. La correction portant sur le nitrite présent peut être appliquée après avoir déterminé la teneur en
nitrites.
4.2 Détermination des nitrites
Une prise d'essai est suspendue dans une solution de chlorure d'ammonium et de chlorure de sodium. Une
partie de cette suspension est transférée dans l'analyseur pour dialyse. La teneur en nitrites est déterminée
par spectrométrie.
Les solutions étalons de nitrite sont déterminées en utilisant le même mode opératoire. La teneur en nitrites
est calculée par comparaison des résultats de la prise d'essai avec ceux de la solution étalon.
5 Réactifs
Sauf spécification contraire, utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique reconnue.
5.1 Eau, distillée ou déionisée, ou eau de pureté équivalente, exempte d'ions nitrate et nitrite.
Dans le but d'éviter l'inclusion de petites bulles de gaz dans la colonne de cadmium cuivré (6.9), faire bouillir
de l'eau distillée ou déionisée et la refroidir à température ambiante. Utiliser l'eau ainsi obtenue pour la
préparation de la colonne (9.1), pour le contrôle du pouvoir réducteur de la colonne (9.2) et pour la
régénération de la colonne.
5.2 Cadmium sous forme de granulés, diamètre de 0,3 mm à 0,8 mm.
S'il n'est pas possible de se procurer dans le commerce des granulés de cadmium, ceux-ci peuvent être
préparés de la manière suivante.
Placer dans un bécher un nombre convenable de baguettes de zinc. Recouvrir ces baguettes avec une
solution de sulfate de cadmium (5.3). Au cours des 24 h suivantes, gratter de temps en temps le cadmium
spongieux déposé sur les baguettes. Retirer les baguettes de zinc et décanter le liquide jusqu'à ce qu'il en
reste une quantité minimale suffisante pour recouvrir le cadmium spongieux. Laver deux ou trois fois le
cadmium spongieux avec de l'eau. Transférer le cadmium spongieux dans un broyeur de laboratoire avec
400 ml de solution d'acide chlorhydrique diluée (5.6) et broyer pendant quelques secondes afin d'obtenir des
granulés de la dimension requise. Replacer le contenu du broyeur dans le bécher et l'y maintenir pendant
plusieurs heures en agitant de temps en temps pour chasser les bulles. Décanter la majeure partie du liquide
et procéder immédiatement au cuivrage des granulés comme décrit en 9.1.2.
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ISO 14673-2:2004(F)
FIL 189-2:2004(F)
AVERTISSEMENT — En raison de sa toxicité, il convient de remettre aux autorités compétentes le
cadmium utilisé, en tant que déchet chimique.
5.3 Sulfate de cadmium, solution, c(CdSO ,8H O) = 40 g/l.
4 2
Dissoudre 40 g de sulfate de cadmium dans de l'eau dans une fiole jaugée (6.4) de 1 000 ml. Compléter à
1 000 ml avec de l'eau et mélanger.
5.4 Sulfate de cuivre(II), solution, c(CuSO ,5H O) = 20 g/l.
4 2
Dissoudre 2 g de sulfate de cuivre(II) dans de l'eau dans une fiole jaugée (6.4) de 100 ml. Compléter à 100 ml
avec de l'eau et mélanger.
5.5 Acide chlorhydrique (HCl), (ρ = 1,19 g/ml).
20
5.6 Acide chlorhydrique, solution diluée, c(HCl) ≈ 1 mol/l.
Ajouter avec soin 80 ml d'acide chlorhydrique (5.5) à environ 700 ml d'eau dans une fiole jaugée de 1 000 ml
(6.4) tout en agitant régulièrement le contenu. Refroidir le contenu à température ambiante. Compléter à
1 000 ml avec de l'eau et mélanger avec soin.
5.7 Éthylènedinitrilotétraacétate disodique dihydraté (EDTA), solution, (Na C H N O ,2H O).
2 10 14 2 8 2
Dissoudre 33,5 g d'EDTA dans environ 900 ml d'eau dans une fiole jaugée (6.4) de 1 000 ml. Compléter à
1 000 ml avec de l'eau et mélanger.
5.8 Polyoxyéthylène lauryléther, solution, à 30 % en fraction massique.
5.9 Chlorure d'ammonium et chlorure de sodium, solution I.
Dissoudre 40 g de chlorure d'ammonium (NH CI) et 200 g de chlorure de sodium (NaCl) dans environ 950 ml
4
d'eau dans une fiole jaugée de 1 000 ml (6.4). Utiliser de l'hydroxyde d'ammonium concentré pour ajuster le
pH à 8,5. Compléter à 1 000 ml avec de l'eau. Ajouter 2 ml de la solution de polyoxyéthylène lauryléther (5.8)
et mélanger.
5.10 Chlorure d'ammonium et chlorure de sodium, solution II.
Dissoudre 10 g de chlorure d'ammonium (NH CI) et 50 g de chlorure de sodium (NaCl) dans environ 950 ml
4
d'eau dans une fiole jaugée de 1 000 ml (6.4). Ajouter 20 ml de la solution d'EDTA (5.7) et mélanger. Utiliser
de l'hydroxyde d'ammonium concentré pour ajuster le pH à 8,5. Compléter à 1 000 ml avec de l'eau. Ajouter
2 ml de la solution de polyoxyéthylène lauryléther (5.8) et mélanger.
5.11 Chlorure d'ammonium et chlorure de sodium, solution III.
Dissoudre 10 g de chlorure d'ammonium (NH CI) et 50 g de chlorure de sodium (NaCl) dans environ 950 ml
4
d'eau dans une fiole jaugée de 1 000 ml (6.4). Utiliser de l'hydroxyde d'ammonium concentré pour ajuster le
pH à 8,5. Compléter à 1 000 ml avec de l'eau. Ajouter 2 ml de la solution de polyoxyéthylène lauryléther (5.8)
et mélanger.
5.12 Acide phosphorique, solution (H PO ), 85 %, (ρ = 1,71 g/ml).
3 4 20
5.13 Réactif de coloration.
Ajouter 100 ml de la solution d'acide phosphorique (5.12) à 800 ml d'eau dans une fiole jaugée de 1 000 ml
(6.4). Ajouter, dans l'ordre suivant, 10 g de sulfanilamide (NH C H SO NH ) et 0,5 g de dihydrochlorure de
2 6 4 2 2
N-(naphtyl-1)-éthylènediamine (C H NHCH CH NH ,2HCl) et mélanger. Compléter à 1 000 ml avec de l'eau.
10 7 2 2 2
Ajouter 0,5 ml de la solution de polyoxyéthylène lauryléther (5.8) et mélanger de nouveau.
La solution de réactif de coloration peut être conservée au maximum pendant un mois au réfrigérateur.
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–
5.14 Nitrate de sodium (NaNO ), solution mère, c(NO ) = 0,400 g/l.
3 3
Sécher une quantité de nitrate de sodium dans un four (6.18) à une température comprise entre 110 °C à
120 °C pendant deux heures. Dissoudre 0,548 4 g de nitrate de sodium, préalablement séché, dans de l'eau
dans une fiole jaugée de 1 000 ml (6.4). Compléter à 1 000 ml avec de l'eau et mélanger.
–
5.15 Nitrate de sodium, solution de travail, c(NO ) = 40 µg/ml.
3
Transférer, à l'aide d'une pipette (6.5), 10 ml de solution mère (5.14) dans une fiole jaugée de 100 ml (6.4).
Compléter à 100 ml avec de l'eau et mélanger.
5.16 Solutions pour étalonnage de nitrate de sodium.
Préparer une série de solutions pour étalonnage de nitrate de sodium à concentration croissante en nitrates
en prélevant à la pipette 1 ml, 2 ml, 3 ml, 6 ml, 9 ml et 12 ml de la solution de travail de nitrate de sodium
(5.15) et les introduire dans six fioles jaugées de 200 ml distinctes. Compléter à 200 ml chaque solution avec
–
de l'eau et mélanger. Les teneurs en nitrate (NO ) de ces solutions pour étalonnage de nitrate de sodium
3
sont respectivement de 0,2 µg/ml, 0,4 µg/ml, 0,6 µg/ml, 1,2 µg/ml, 1,8 µg/ml et 2,4 µg/ml.
5.17 Nitrite de sodium (NaNO ), solutions mères.
2
Sécher une quantité de nitrite de sodium dans un four (6.18) à une température comprise entre 110 °C et
120 °C pendant 2 h.
–
5.17.1 Nitrite de sodium, solution mère I, c(NO ) = 0,297 mg/ml.
2
Dissoudre 0,445 g de nitrite de sodium préalablement séché (5.17) dans de l'eau dans une fiole jaugée de
1 000 ml (6.4). Compléter à 1 000 ml avec de l'eau et mélanger. La solution mère I peut être conservée au
maximum pendant un jour.
–
5.17.2 Nitrite de sodium, solution mère II, c(NO ) = 1,001 mg/ml.
2
Dissoudre 1,502 g de nitrite de sodium (5.17) dans de l'eau, dans une fiole jaugée de 1 000 ml (6.4).
Compléter à 1 000 ml avec de l'eau et mélanger. La solution mère II peut être conservée au maximum
pendant un mois au réfrigérateur.
5.18 Nitrite de sodium, solutions de travail.
–
...