ISO 18743:2015
(Main)Microbiology of the food chain — Detection of Trichinella larvae in meat by artificial digestion method
Microbiology of the food chain — Detection of Trichinella larvae in meat by artificial digestion method
ISO 18743:2015 specifies a method of detection of Trichinella spp. muscle stage larvae in meat of individual animal carcasses intended for human consumption. It is applicable to the examination of meat from domestic and sylvatic animal species, which can be infected by nematodes of the genus Trichinella. This method does not allow the identification of the species or genotype of detected parasites; species or genotype identification can be carried out by molecular methods. The method described in this International Standard is intended to be used in conjunction with the guidelines in the OIE Manual of Diagnostic Tests and Vaccines and by the International Commission on Trichinellosis (ICT) for Trichinella testing and the inspection of carcasses intended for human consumption, unless it has been demonstrated by other means that the animal was not at risk for exposure to Trichinella. The artificial digestion/magnetic stirrer method is considered to be the standard method because it has proven to give the most reliable results in validation studies. NOTE Provided equivalence with the method described within this International Standard can be documented, alternative methods can be used for analysis.
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Recherche des larves de Trichinella dans la viande par une méthode de digestion artificielle
ISO 18743:2015 décrit une méthode de détection de larves musculaires de Trichinella spp. dans la viande provenant de carcasses individuelles d'animaux destinées à la consommation humaine. Elle est applicable à l'examen de viande d'espèces animales domestiques et sauvages qui peuvent être infectées par des nématodes du genre Trichinella. Cette méthode ne permet pas d'identifier l'espèce ou le génotype des parasites détectés; l'identification de l'espèce ou du génotype peut être réalisée à l'aide de méthodes moléculaires. La méthode décrite dans la présente Norme internationale est destinée à être utilisée en association avec les lignes directrices du Manuel des tests de diagnostic et des vaccins de l'OIE et celles émises par la Commission internationale sur la trichinellose (ICT) pour la recherche de Trichinella et l'inspection de carcasses destinées à la consommation humaine, sauf s'il a été prouvé par d'autres moyens que l'animal ne risquait pas d'avoir été exposé à Trichinella. La méthode de digestion artificielle utilisant un agitateur magnétique est considérée comme la méthode normalisée puisqu'il a été démontré, lors d'études de validation, qu'elle donne les résultats les plus fiables. NOTE Si l'équivalence avec la méthode décrite dans la présente Norme internationale peut être documentée, d'autres méthodes peuvent être utilisées pour l'analyse.
General Information
Relations
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 18743
First edition
2015-09-15
Microbiology of the food chain —
Detection of Trichinella larvae in meat
by artificial digestion method
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Recherche des larves de
Trichinella dans la viande par une méthode de digestion
artificielle
Reference number
©
ISO 2015
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Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
4.1 General . 2
4.2 Sample size . 2
4.3 Blending/grinding of the muscle sample . 2
4.4 Preparation of the digest fluid . 2
4.5 Digestion of the chopped meat . 2
4.6 Filtration of the digest fluid . 3
4.7 Sedimentation of the digest fluid . 3
4.8 Microscopic examination . 3
4.9 Verification of findings . 3
5 Reagents . 3
6 Apparatus . 4
7 Sampling, labelling, and transport . 5
8 Sample preparation . 5
9 Procedure. 5
9.1 General . 5
9.2 Blending/grinding . 5
9.3 Preparation of the digest fluid . 6
9.4 Digestion of the chopped meat in the glass beaker . 6
9.5 Filtration of the digest fluid . 6
9.6 Sedimentation of the digest fluid in the separatory funnel . 7
9.7 Collection of the primary and secondary sediment . 7
9.8 Microscopic examination . 7
10 Documentation . 8
11 Expression of the results . 8
12 Safety measures . 8
Annex A (normative) Sample collection . 9
Annex B (normative) Frozen samples .11
Annex C (informative) Artificial digestion magnetic stirrer method .12
Annex D (informative) Example of a laboratory worksheet for recording data when testing
pooled samples by digestion assay .14
Bibliography .15
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the meaning of ISO specific terms and expressions related to conformity
assessment, as well as information about ISO’s adherence to the WTO principles in the Technical
Barriers to Trade (TBT) see the following URL: Foreword - Supplementary information
The committee responsible for this document is ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9,
Microbiology.
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Introduction
Trichinella spp. are the causative agents of human trichinellosis, a disease which is a public health
hazard and, as a result, also represents an economic problem in porcine animal production. Due to
the zoonotic importance of this infection in many countries, the main efforts have focused on control
and/or eradication of Trichinella from domestic pigs, the most important source of human infection
worldwide. Digestion methods for detection of Trichinella larvae in muscle samples from pigs and other
susceptible animal species intended for human consumption (e.g. horses, wild boars, walruses, and
bears), are effective for preventing clinical trichinellosis in humans. Due to the limits of sensitivity of
digestion methods, these methods might not detect infected animals with very small numbers of larvae
in muscle samples, that can pose a risk for subclinical infections in humans.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 18743:2015(E)
Microbiology of the food chain — Detection of Trichinella
larvae in meat by artificial digestion method
WARNING — Persons using this International Standard should be familiar with normal laboratory
practice. This International Standard does not purport to address all of the safety problems, if
any, associated with its use. It is the responsibility of the user to establish appropriate safety and
health practices and to ensure compliance with any national regulatory conditions.
1 Scope
This International Standard specifies a method of detection of Trichinella spp. muscle stage larvae in meat
of individual animal carcasses intended for human consumption. It is applicable to the examination of meat
from domestic and sylvatic animal species, which can be infected by nematodes of the genus Trichinella.
This method does not allow the identification of the species or genotype of detected parasites; species
or genotype identification can be carried out by molecular methods.
The method described in this International Standard is intended to be used in conjunction with the
guidelines in the OIE Manual of Diagnostic Tests and Vaccines and by the International Commission
on Trichinellosis (ICT) for Trichinella testing and the inspection of carcasses intended for human
consumption, unless it has been demonstrated by other means that the animal was not at risk for
exposure to Trichinella.
The artificial digestion/magnetic stirrer method is considered to be the standard method because it
has proven to give the most reliable results in validation studies.
NOTE Provided equivalence with the method described within this International Standard can be
documented, alternative methods can be used for analysis.
2 Normative references
The following documents, in whole or in part, are normatively referenced in this document and are
indispensable for the application of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 7218:2007, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements and guidance for
microbiological examinations
International Commission on Trichinellosis (ICT), “Quality Assurance in Digestion Testing Programs
for Trichinella”, Recommendations and Guidelines. 2012
World Organisation for Animal Health (OIE), Chapter 2.1.16 — “Trichinellosis”, Manual of Diagnostic
Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. 7th ed. 2012
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
Trichinella muscle larvae
ML
first larval stage (L1) of nematodes belonging to the genus Trichinella, which is located in striated
muscles of animals worldwide and can infect humans
Note 1 to entry: These larvae are approximately 0,7 mm to 1,1 mm in length and 0,03 mm in width.
3.2
digestion assay
method to detect Trichinella larvae in muscle tissue by an enzymatic digestion step to release larvae
from muscle tissues followed by filtration and sedimentation steps, and detection of recovered larvae
by microscopy
3.3
larvae per gram
lpg
number of Trichinella larvae present i
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 18743
Première édition
2015-09-15
Microbiologie de la chaîne
alimentaire — Recherche des larves
de Trichinella dans la viande par une
méthode de digestion artificielle
Microbiology of the food chain — Detection of Trichinella larvae
in meat by artificial digestion method
Numéro de référence
©
ISO 2015
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ii © ISO 2015 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
4.1 Généralités . 2
4.2 Taille de l’échantillon . 2
4.3 Broyage de l’échantillon de muscle . 2
4.4 Préparation du liquide de digestion . 3
4.5 Digestion de la viande hachée . 3
4.6 Filtration du liquide de digestion . 3
4.7 Sédimentation du liquide de digestion . 3
4.8 Examen microscopique . 3
4.9 Vérification des résultats . 4
5 Réactifs . 4
6 Appareillage . 4
7 Prélèvement d’échantillons, étiquetage et transport . 5
8 Préparation des échantillons . 5
9 Mode opératoire. 6
9.1 Généralités . 6
9.2 Broyage . 6
9.3 Préparation du liquide de digestion . 6
9.4 Digestion de la viande hachée dans le bécher en verre . 6
9.5 Filtration du liquide de digestion . 7
9.6 Sédimentation du liquide de digestion dans l’ampoule à décanter. 7
9.7 Collecte des sédiments primaire et secondaire . 7
9.8 Examen microscopique . 8
10 Documentation . 8
11 Expression des résultats. 9
12 Mesures de sécurité . 9
Annexe A (normative) Prélèvement d’échantillons .10
Annexe B (normative) Échantillons congelés .12
Annexe C (informative) Méthode de digestion artificielle utilisant l’agitateur magnétique .13
Annexe D (informative) Exemple de fiche technique de laboratoire pour consigner les
données lors de la recherche par digestion d’échantillons regroupés .15
Bibliographie .16
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www.
iso.org/directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www.iso.org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer
un engagement.
Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l’ISO liés à
l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion de l’ISO aux principes
de l’OMC concernant les obstacles techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: Avant-propos —
Informations supplémentaires.
Le comité chargé de l’élaboration du présent document est l’ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 9, Microbiologie.
iv © ISO 2015 – Tous droits réservés
Introduction
Le genre Trichinella spp. est l’agent pathogène responsable de la trichinellose humaine, une maladie
qui présente un risque pour la santé publique et, par conséquent, représente également un problème
économique dans le domaine de la production porcine. En raison de l’importance zoonotique de cette
infection dans de nombreux pays, les efforts se sont essentiellement concentrés sur la maîtrise et/ou
l’éradication de Trichinella chez le porc domestique, qui est la principale source d’infection humaine
dans le monde. Les méthodes de digestion permettant la détection des larves de Trichinella dans les
échantillons de muscle de porcs et d’autres espèces animales sensibles destinées à la consommation
humaine (par exemple, chevaux, sangliers, morses et ours) sont efficaces pour prévenir la trichinellose
clinique chez l’homme. En raison des limites de sensibilité des méthodes de digestion, il est possible
que ces dernières ne détectent pas les animaux infectés par un très petit nombre de larves dans les
échantillons de muscle, ce qui peut constituer un risque d’infections subcliniques chez l’homme.
NORME INTERNATIONALE ISO 18743:2015(F)
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Recherche des
larves de Trichinella dans la viande par une méthode de
digestion artificielle
AVERTISSEMENT — Il convient que l’utilisateur de la présente Norme internationale connaisse
bien les pratiques courantes de laboratoire. La présente Norme internationale n’a pas pour but de
traiter de tous les problèmes de sécurité qui sont, le cas échéant, liés à son utilisation. Il incombe
à l’utilisateur de la présente norme d’établir des pratiques appropriées en matière d’hygiène et
de sécurité et de s’assurer de la conformité à la réglementation nationale en vigueur.
1 Domaine d’application
La présente Norme internationale décrit une méthode de détection de larves musculaires de Trichinella
spp. dans la viande provenant de carcasses individuelles d’animaux destinées à la consommation
humaine. Elle est applicable à l’examen de viande d’espèces animales domestiques et sauvages qui
peuvent être infectées par des nématodes du genre Trichinella.
Cette méthode ne permet pas d’identifier l’espèce ou le génotype des parasites détectés; l’identification
de l’espèce ou du génotype peut être réalisée à l’aide de méthodes moléculaires.
La méthode décrite dans la présente Norme internationale est destinée à être utilisée en association
avec les lignes directrices du Manuel des tests de diagnostic et des vaccins de l’OIE et celles émises par
la Commission internationale sur la trichinellose (ICT) pour la recherche de Trichinella et l’inspection de
carcasses destinées à la consommation humaine, sauf s’il a été prouvé par d’autres moyens que l’animal
ne risquait pas d’avoir été exposé à Trichinella.
La méthode de digestion artificielle utilisant un agitateur magnétique est considérée comme la méthode
normalisée puisqu’il a été démontré, lors d’études de validation, qu’elle donne les résultats les plus fiables.
NOTE Si l’équivalence avec la méthode décrite dans la présente Norme internationale peut être documentée,
d’autres méthodes peuvent être utilisées pour l’analyse.
2 Références normatives
Les documents ci-après, dans leur intégralité ou non, sont des références normatives indispensables à
l’application du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour les
références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les éventuels
amendements).
ISO 7218:2007, Microbiologie des aliments — Exigences générales et recommandations
Commission internationale sur la trichinellose (ICT), « Quality Assurance in Digestion Testing Programs
for Trichinella », Recommendations and Guidelines. 2012
Organisation mondiale de la santé animale (OIE), chapitre 2.1.16 — « Trichinellose », Manuel des tests de
ème
diagnostic et des vaccins pour les animaux terrestres 7 éd. 2012
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.