ISO 11268-3:2014
(Main)Soil quality — Effects of pollutants on earthworms — Part 3: Guidance on the determination of effects in field situations
Soil quality — Effects of pollutants on earthworms — Part 3: Guidance on the determination of effects in field situations
ISO 11268-3: 2014 specifies techniques for determining the effects of substances on earthworms in the field and provides a basis for determining the effects of chemicals applied to or incorporated into soil, including soil injections or drilled pelleted formulations.
Qualité du sol — Effets des polluants vis-à-vis des vers de terre — Partie 3: Lignes directrices relatives à la détermination des effets sur site
ISO 11268-3:2014 décrit des techniques utilisées pour étudier les effets de substances sur les vers de terre sur le terrain et constitue une base pour la détermination des effets des produits chimiques appliqués ou incorporés au sol, y compris des injections dans le sol ou l'enfouissement de granulés par semoirs.
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 11268-3
Second edition
2014-10-15
Soil quality — Effects of pollutants
on earthworms —
Part 3:
Guidance on the determination of
effects in field situations
Qualité du sol — Effets des polluants vis-à-vis des vers de terre —
Partie 3: Lignes directrices relatives à la détermination des effets sur site
Reference number
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ISO 2014
© ISO 2014
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Published in Switzerland
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Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Units . 1
4 Principle . 1
5 Reagents and material . 2
6 Apparatus . 2
7 Procedure. 2
7.1 Sampling of earthworm populations . 2
7.2 Preservation . 3
7.3 Determination of biomass . 3
8 Preparation for the test . 3
8.1 Test site . 3
9 Procedure. 6
9.1 Application of test substance . . 6
9.2 Sampling dates . 6
9.3 Reference substance . 7
10 Data assessment. 7
10.1 End points . 7
10.2 Identification of earthworm species . 8
10.3 Determination of biomass with gut content . 8
11 Calculation and expression of results . 8
12 Validity of the test . 8
13 Test report . 9
Annex A (informative) Additional requirements of pesticide testing .10
Annex B (informative) Information on specific earthworm species or communities in
different climatic or geographic regions .11
Bibliography .12
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of any
patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or on
the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the meaning of ISO specific terms and expressions related to conformity
assessment, as well as information about ISO’s adherence to the WTO principles in the Technical Barriers
to Trade (TBT) see the following URL: Foreword - Supplementary information
The committee responsible for this document is ISO/TC 190, Soil quality, Subcommittee SC 4,
Biological methods.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 11268-3:1999), which has been
technically revised.
ISO 11268 consists of the following parts, under the general title Soil quality — Effects of pollutants
on earthworms:
— Part 1: Determination of acute toxicity to Eisenia fetida/Eisenia andrei
— Part 2: Determination of effects on reproduction to Eisenia fetida/Eisenia andrei
— Part 3: Guidance on the determination of effects in field situations
iv © ISO 2014 – All rights reserved
Introduction
The earthworm field test is based on a method being developed by the German Federal Biological
[6]
Research Centre for Agriculture and Forestry for the testing of pesticides. Later, it was internationally
standardized by the International Organization for Standardization (ISO), taking into account
[7]
results and recommendations of an international workshop in 1991 in Sheffield, United Kingdom,
“Ecotoxicology of Earthworms”, as a tool for characterizing soil quality. Growing experience has shown
that the practical performance of the test can be improved. In two meetings organized by the Federal
Biological Research Centre for Agriculture and Forestry (Braunschweig, 2002) and by the German
Federal Agency for Consumer Protection and Food Safety (Lille, 2005), an ad-hoc working group of
experts from various countries and institutions proposed recommendations that should be taken into
account if revision has been approved by voting in the periodical review. A report of the discussions,
[8]
comments, and recommendations has been published.
In cases where earthworms and other organisms are used as bioindicators to assess the soil quality of a
site as a habitat for soil organisms, guidance for extraction procedures and advice for planning a survey
is given in ISO 23611-1 to ISO 23611-6.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 11268-3:2014(E)
Soil quality — Effects of pollutants on earthworms —
Part 3:
Guidance on the determination of effects in field situations
1 Scope
This part of ISO 11268 specifies techniques for determining the effects of substances on earthworms
in the field and provides a basis for determining the effects of chemicals applied to or incorporated into
soil, including soil injections or drilled pelleted formulations.
2 Normative references
The following documents, in whole or in part, are normatively referenced in this document and are
indispensable for its application. For dated references, only the edition cited applies. For undated
references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 10390, Soil quality — Determination of pH
ISO 10694, Soil quality — Determination of organic and total carbon after dry combustion (elementary analysis)
ISO 11274, Soil quality — Determination of the water-retention characteristic — Laboratory methods
ISO 11277, Soil quality — Determination of particle size distribution in mineral soil material — Method by
sieving and sedimentation
ISO 23611-1, Soil quality — Sampling of soil invertebrates — Part 1: Hand-sorting and formalin extraction
of earthworms
3 Units
Rates of application of test substances are expressed in kilograms per hectare (kg/ha) or litres per
hectare (l/ha) of the substance applied. When this is a formulated material, the application rate is
expressed in terms of the amount of active ingredient applied.
The concentrations of test substances incorporated in the soil are given in mg active ingredient (a.i.)/
kg soil dry mass, d . The same units are used when comparing the results of this field test with those
m
gained in laboratory studies.
4 Principle
Species, numbers, and biomass of earthworms collected by sampling plots treated with a test substance
are compared with those collected from treated control and reference plots. Sampling is performed as
specified in ISO 23611-1. The duration of the study depends on the characteristics of the test substance
but is usually of one year’s duration. Sampling dates are chosen to lie within the periods of activity of
the earthworms.
The test is of a randomized complete block design with four replicates per treatment. Statistical analysis
of numbers of each species collected at each sampling occasion is used to determine the effects of
treatments by comparing abundance, biomass, and diversity between control and treated plots.
NOTE The test also generates samples of earthworms from treated plots for residue analysis where such
information is appropriate.
5 Reagents and material
5.1 Formalin [formaldehyde solution, 4 % (volume fraction)].
5.2 Formalin [formaldehyde solution, 37 % (volume fraction)].
5.3 Ethanol, 70 % (volume fraction).
1)
5.4 Carbendazim, e.g. applied as Derosal® formulation (360 g a.i./l) as reference substance.
6 Apparatus
Use standard laboratory equipment and the following.
6.1 Plastic vessel, (250 ml and 500 ml) for storing the worms.
6.2 Plastic hand gloves.
6.3 Forceps.
2 2
6.4 Piece of thick plastic (1 m to 2 m ).
6.5 Spade or shovel.
6.6 Dissecting microscope, with low magnification (10× to 40×).
6.7 Balance (0,01 g to 200 g).
6.8 Water-can, (preferably 20 l) with water (20 l per sampling plot).
6.9 Pencil, note book, water resistant marker, labels.
6.10 Thermometer, e.g. for measuring air temperature.
6.11 Drying cabinet, for soil water content determination.
7 Procedure
7.1 Sampling of earthworm populations
Sampling of earthworms is done by a combination of two different methods: hand-sorting and formalin
extraction. Based on several comparative
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 11268-3
Deuxième édition
2014-10-15
Qualité du sol — Effets des polluants
vis-à-vis des vers de terre —
Partie 3:
Lignes directrices relatives à la
détermination des effets sur site
Soil quality — Effects of pollutants on earthworms —
Part 3: Guidance on the determination of effects in field situations
Numéro de référence
©
ISO 2014
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l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Publié en Suisse
ii © ISO 2014 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Unités . 1
4 Principe . 1
5 Réactifs et matériel . 2
6 Appareillage . 2
7 Mode opératoire. 3
7.1 Échantillonnage des populations de vers de terre . 3
7.2 Conservation . 3
7.3 Détermination de la biomasse . 3
8 Préparation de l’essai . 3
8.1 Site d’essai . 3
8.1.1 Sélection et description . 3
8.1.2 Conception expérimentale . 4
8.1.3 Entretien des terrains d’essai . 6
9 Mode opératoire. 6
9.1 Application de la substance d’essai . 6
9.2 Dates d’échantillonnage . 7
9.3 Substance de référence . 7
10 Évaluation des données . 8
10.1 Effets . 8
10.2 Identification des espèces de vers de terre . 8
10.3 Détermination de la biomasse avec le contenu du tube digestif . 9
11 Calcul et expression des résultats . 9
12 Validité de l’essai
.................................................................................................................................................................................................. 9
13 Rapport d’essai . 9
Annexe A (informative) Exigences supplémentaires pour les essais de pesticides .11
Annexe B (informative) Informations concernant les espèces ou communautés spécifiques
de vers de terre dans différentes régions climatiques ou géographiques .12
Bibliographie .13
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne
la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www.
iso.org/directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant les
références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de l’élaboration
du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de brevets reçues par
l’ISO (voir www.iso.org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation
de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion de l’ISO aux principes de l’OMC
concernant les obstacles techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: Avant-propos - Informations
supplémentaires.
Le comité chargé de l’élaboration du présent document est l’ISO/TC 190, Qualité du sol, sous–comité SC 4,
Méthodes biologiques.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 11268-3:1999), qui a fait l’objet
d’une révision technique.
L’ISO 11268 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Qualité du sol — Effets des
polluants vis-à-vis des vers de terre:
— Partie 1: Détermination de la toxicité aiguë vis-à-vis de Eisenia fetida/Eisenia andrei
— Partie 2: Détermination des effets sur la reproduction de Eisenia fetida/Eisenia andrei
— Partie 3: Lignes directrices relatives à la détermination des effets sur site
iv © ISO 2014 – Tous droits réservés
Introduction
L’essai sur le terrain relatif aux vers de terre est fondé sur une méthode développée pour les essais
[6]
de pesticides par le Centre fédéral allemand de recherches biologiques dans les domaines agricole
et forestier. Il a ensuite été normalisé à l’échelle internationale par l’Organisation Internationale de
Normalisation (ISO) en tenant compte des résultats et des recommandations d’un atelier international
[7]
sur l’« Écotoxicologie des vers de terre », qui s’est tenu à Sheffield (Royaume-Uni) en 1991, afin
de servir d’outil pour la caractérisation de la qualité du sol. L’expérience acquise a démontré que la
performance pratique de l’essai peut être améliorée. Lors de deux réunions organisées par le Centre
fédéral de recherches biologiques dans les domaines agricole et forestier (Braunschweig, 2002) et par
l’Agence fédérale allemande de protection des consommateurs et de salubrité des aliments (Lille, 2005),
un groupe de travail ad hoc constitué d’experts provenant de différents pays et institutions a présenté des
recommandations à prendre en compte si la révision est approuvée par vote lors de la revue périodique.
[8]
Un compte-rendu des discussions, des commentaires et des recommandations a été publié .
Lorsque des vers de terre et d’autres organismes sont utilisés comme bio-indicateurs pour évaluer la
qualité du sol d’un site en tant qu’habitat pour les organismes du sol, des lignes directrices concernant
les modes opératoires d’extraction et des conseils pour planifier une étude sont donnés dans les normes
ISO 23611-1 à ISO 23611-6.
NORME INTERNATIONALE ISO 11268-3:2014(F)
Qualité du sol — Effets des polluants vis-à-vis des vers de
terre —
Partie 3:
Lignes directrices relatives à la détermination des effets
sur site
1 Domaine d’application
La présente partie de l’ISO 11268 décrit des techniques utilisées pour étudier les effets de substances
sur les vers de terre sur le terrain et constitue une base pour la détermination des effets des produits
chimiques appliqués ou incorporés au sol, y compris des injections dans le sol ou l’enfouissement de
granulés par semoirs.
2 Références normatives
Les documents ci-après, dans leur intégralité ou non, sont des références normatives indispensables à
l’application du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour les
références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les éventuels
amendements).
ISO 10390, Qualité du sol — Détermination du pH
ISO 10694, Qualité du sol — Dosage du carbone organique et du carbone total après combustion sèche
(analyse élémentaire)
ISO 11274, Qualité du sol — Détermination des caractéristiques de la rétention en eau — Méthodes de
laboratoire
ISO 11277, Qualité du sol — Détermination de la répartition granulométrique de la matière minérale des
sols — Méthode par tamisage et sédimentation
ISO 23611-1, Qualité du sol — Prélèvement des invertébrés du sol — Partie 1: Tri manuel et extraction au
formol des vers de terre
3 Unités
Les taux d’application des substances d’essai sont exprimés en kilogrammes par hectare (kg/ha) ou
en litres par hectare (l/ha) de substance appliquée. Lorsqu’il s’agit d’un matériau composé, le taux
d’application est exprimé en fonction de la quantité de matière active appliquée.
Les concentrations de substances d’essai incorporées dans le sol sont données en mg de matière active
(m.a.)/kg de masse sèche du sol, d . Les mêmes unités sont utilisées pour comparer les résultats du
m
présent essai sur le terrain avec ceux obtenus lors d’études en laboratoire.
4 Principe
Les espèces, le nombre et la biomasse de vers de terre recueillis par parcelles d’échantillonnage traitées
avec la substance d’essai sont comparés à ceux recueillis dans les parcelles témoins et dans les parcelles
traitées de référence. L’échantillonnage est effectué comme spécifié dans l’ISO 23611-1. La durée de
l’étude dépend des caractéristiques de la substance d’essai, mais elle est généralement fixée à 1 année.
Les dates d’échantillonnage sont choisies pour coïncider avec les périodes d’activité des vers de terre.
L’essai est réalisé avec un plan d’expérience complet
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.