ISO 6461-1:1986
(Main)Water quality — Detection and enumeration of the spores of sulfite-reducing anaerobes (clostridia) — Part 1: Method by enrichment in a liquid medium
Water quality — Detection and enumeration of the spores of sulfite-reducing anaerobes (clostridia) — Part 1: Method by enrichment in a liquid medium
The procedure is applicable to all types of water, including turbid water. The principle covers several steps from selection by applying heat to destroy vegetative bacteria to the indication by inoculating volumes of the sample into media followed by incubation at 27 ± °C in anaerobic conditions.
Qualité de l'eau — Recherche et dénombrement des spores de micro-organismes anaérobies sulfito-réducteurs (clostridia) — Partie 1: Méthode par enrichissement dans un milieu liquide
La présente partie de l'ISO 6461 spécifie une méthode pour la recherche et le dénombrement des spores de micro-organismes anaérobies sulfito-réducteurs (clostridia) par enrichissement dans un milieu liquide. Le principe de la méthode est applicable à tous les types d'eau, y compris les eaux troubles.
General Information
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International Standard 646111
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION.MEHt~YHAPO~HAR OPrAHkl3AL&lR I-IO CTAHAAPTM3AUMM~ORGANlSATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Qetection and enumeration of the spores
Water quality -
of sulfite-reducing anaerobes (clostridia) -
Part 1 : Method by enrichment in a liquid medium
Qual&! de l’eau - Recherche et denombrement des spores de micro-organismes anakrobies sulfito-r6ducteurs (clostridia) -
Partie I : M&hode par enrichkement dans un milieu liquide
First edition - 1986-02-01
w
-
UDC 543.39 : 579.852.13 Ref. No. ISO 6461/1-1986 (E)
ca
8
Descriptors : water, quality, tests, microbiological analysis, determination, micro-organisms, sulphite reducing bacteria.
Price based on 3 pages
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Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national Standards bodies (ISO member bedies). The work of preparing International
Standards is normally carried out through ISO technical committees. Esch member
body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the ISO Council. They are approved in accordance with ISO procedures requiring at
least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard ISO 6461/1 was prepared by Technical Committee
ISO/TC 147, Water guality.
Users should note that all International Standards undergo revision from time to time
and that any reference made herein to any other International Standard implies its
latest edition, unless othetwise stated.
International Organkation for Standardkation, 1986
Printed in Switzerland
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 6461/1-1986 (E)
Detection and enumeration of the spores
Water quality -
of sulfite-reducing anaerobes (clostridia) -
Part 1 : Method by enrichment in a liquid medium
4 Definition
0 Introduction
The spores of sulfite-reducing anaerobes (clostridia) are wide- For the purpose of this part of ISO 6461, the following defi-
nition applies.
spread in the environment. They are present in human and
animal faecal matter, in waste water and in soil. Unlike
Escherichia co/i and other coliform organisms, the spores sur-
ciostridia : Sulfite-reducing, Spore-forming, anaerobic micro-
vive in water for long periods as they are more resistant than
organisms which belong to the Bacillaceae family and the
vegetative forms to the action of Chemical and physical factors.
genus Clostridium.
They may thus give an indication of remote or intermittent
pollution. They may even be resistant to chlorination at levels
which are normally used for the treatment of water, and they
5 Principle
are thus useful for control purposes.
The detection of spores of sulfite-reducing anaerobes
ISO 6461 consists of the following Parts:
(clostridia) in a specified volume of a water Sample requires the
following Steps.
Part 1 : Method by enrichment in a liquid medium.
Part 2: Method by membrane filtration.
5.1 Selection of spores
1 Scope Selection of spores in the Sample by applying heat for a period
of time sufficient to destroy vegetative bacteria.
This part of ISO 6461 specifies a method for the detection and
enumeration of the spores of sulfite-reducing anaerobes
5.2 Enrichment culture
(clostridia) by enrichment in a liquid medium.
Detection and enumeration of spores of sulfite-reducing
anaerobes by inoculating volumes of the Sample into liquid
2 Field of application
enrichment media, followed by incubation at 37 + 1 OC for
44 + 4 h in anaerobic conditions.
The method is applicable to all types of water, including turbid
water.
6 Culture media and reagents
3 References
ISO 3696, Water for laboratory use - Specifications. 6.1 Basic materials
In Order to improve the reproducibility of the results, it is
ISO 5667, Water qua!‘@ - Sampling -
recommended that, for the preparation of the diluents and
Part 2: Guidance on sampling techniques.
culture media, dehydrated basic components or complete
Part 3: Guidance on the preservation and handling of dehydrated media be used. Similarly, commercially prepared
reagents may also be used. The manufacturer’s instructions
samples.
shall be rigorously followed.
ISO 8199, Water qualiiy - General guidance for
microbiological examina tion b y enumeration of micro- The Chemical products used for the preparation of the culture
media and the reagents shall be of recognized analytical quality.
organisms on culture media. ’ )
---
1) At present at the Stage of draft.
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ISO 6461/1-1986 (E)
Store at between 2 and 5 OC.
The water used shall be distilled or deionized water, free from
substances that might inhibit the growth of micro-organisms
lt is advisable to prepare a fresh Solution every 14 days.
under the test conditions (sec ISO 3696).
Measurements of pH shall be made using meter,
a PH
6.24 Irodlll) citrate &H50,Fe), 7 % (mlm) Solution.
measurements being referred to a tempe rature of 25 O C.
Dissolve 7 g of iron(lll) citrate in 100 ml of water. Sterilize by
If the prepared culture media are not used immediately, they
filtration.
shall, unless otherwise stated, be stored in the dark
...
Norme internationale
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION.MEX)(CIYHAPO~HAR OPTAHM3AL&lR Il0 CTAH~APTM3Al@lM*ORGANISAilON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Qualité de l’eau - Recherche et dénombrement des
spores de micro-organismes anaérobies sulfito-réducteurs
(clostridia) -
Partie 1 : Méthode par enrichissement dans un milieu
liquide
.Water quality - Detection and enumeration of the spores of sulfite-reducing anaerobes (clostridia) - Part 7 : Method by
enrichment in a liguid medium
Première édition - 1986-02-01
G:
CDU 543.39: 579.852.13 Réf. no : ISO 6461/1-1986 (FI
2;
Descripteurs : eau, qualité, essai, analyse microbiologique, détermination, microorganisme, bactérie sulfito-réductrice.
Prix basé sur 3 pages
---------------------- Page: 1 ----------------------
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont ap’brouvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 6461 /l a été élaborée par le comité technique
ISO/TC 147, Qualité de l’eau.
L’attention des utilisateurs est attirée sur le fait que toutes les Normes internationales
sont de temps en temps soumises à révision et que toute référence faite à une autre
Norme internationale dans le présent document implique qu’il s’agit, sauf indication
contraire, de la dernière édition.
0 Organisation internationale de normalisation, 1986
Imprimé en Suisse
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ISO 6461/1-1986 (F)
NORME INTERNATIONALE
Recherche et dénombrement des
Qualité de l’eau -
spores de micro-organismes anaérobies sulfito-réducteurs
(clostridia) -
Partie 1 : Méthode par enrichissement dans un milieu
liquide
ISO 8199, Qualité de l’eau - Directives générales pour
0 Introduction
l’analyse microbiologique par dénombrement des micro-
Les spores de micro-organismes anaérobies sulfito-réducteurs organismes sur milieu de culture. ‘)
(clostridia) sont largement répandues dans l’environnement.
Elles sont présentes dans les matières fécales humaines et ani-
4 Définition
males, ainsi que dans les eaux usées et le sol. À la différence
des Escherichia Co/i et des autres organismes coliformes, les
Dans le cadre de la présente partie de I’ISO 6461, la définition
spores survivent dans l’eau pendant longtemps, car elles sont
suivante est applicable.
plus résistantes que les formes végétatives à l’action des fac-
teurs chimiques et physiques. Elles peuvent ainsi fournir des
indications sur une pollution éloignée ou intermittente. Elles clostridia : Micro-organismes anaérobies formant des spores
peuvent même être résistantes à la chloration dans les propor-
et sulfito-réducteurs, appartenant à la famille des Bacillacées et
tions habituellement utilisées pour le traitement des eaux, et au genre Clostridium.
sont donc ainsi utiles pour les besoins des contrôles.
5 Principe
ISO 6461 comprend les parties suivantes:
La recherche des spores d’organismes anaérobies sulfito-
Partie 1 : Méthode par enrichissement dans un milieu
réducteurs (clostridia) dans un échantillon d’eau de volume
liquide.
déterminé, passe par les étapes suivantes.
Partie 2: Méthode par filtration sur membrane.
5.1 Sélection des spores
1 Objet
Sélection des spores dans l’échantillon, par chauffage pendant
une période de temps suffisante pour que les bactéries végéta-
La présente partie de I’ISO 6461 spécifie une méthode pour la
tives soient détruites.
recherche et le dénombrement des spores de micro-organismes
anaérobies sulfito-réducteurs (clostridia) par enrichissement
dans un milieu liquide. 5.2 Culture par enrichissement
Recherche et énumération des spores des organismes anaéro-
bies sulfito-réducteurs par inoculation de volumes de l’échantil-
2 Domaine d’application
lon dans les milieux liquides d’enrichissement, suivie de I’incu-
Le principe de la méthode est applicable à tous les types d’eau,
bation à 37 + 1 OC pendant 44 + 4 h dans des conditions
y compris les eaux troubles. anaérobies.
6 Milieux de culture et réactifs
3 Références
6.1 Principaux matériaux
ISO 3696, Eau à usage de laboratoire - Spécifications.
Pour améliorer la reproductibilité des résultats, il est recom-
ISO 5667, Qualité de l’eau - Échantillonnage -
mandé d’utiliser, pour la préparation des diluants et des milieux
Partie 2: Guide général sur les techniques d’échantiflon-
de culture, des composants de base déshydratés ou des milieux
nage.
complets déshydratés. De la même facon, des préparations
Partie 3 : Guide général pour la conservation et la manipula- commerciales de réactifs peuvent être utilisées. Les prescrip-
tions du fabricant doivent être suivies scrupuleusement.
tion des échan tilfons.
1) Actuellement au stade de projet.
---------------------- Page: 3 ----------------------
SO 6461/1-1986 (FI
6.2.2.2 Milieu de base double concentration
Préparer le milieu de base double concentration comme en
6.2.2.1, mais réduire le volume d’eau distillé de moitié.
L’eau utilisée doit être de l’eau distillée ou déminéralisée,
Transvaser des aliquotes, respectivement, de 10 ml et de 50 ml
exempte de substances susceptibles d’inhiber la croissance des
du milieu, dans des flacons avec bouchons à vis, de capacités
dans les conditions de l’essai (voir
micro-organismes
respectivement de 25 ml et 100 ml.
ISO 3696).
Stériliser à l’autoclave à 121 + 1 OC pendant 15 min.
Les mesures du pH doivent être effectuées au pH-mètre, et rap-
portées à la température de 25 OC.
6.2.3 Sulfite de sodium (Na2S03), solution à 4 % (mlm).
Si les mi
...
Norme internationale
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION.MEX)(CIYHAPO~HAR OPTAHM3AL&lR Il0 CTAH~APTM3Al@lM*ORGANISAilON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Qualité de l’eau - Recherche et dénombrement des
spores de micro-organismes anaérobies sulfito-réducteurs
(clostridia) -
Partie 1 : Méthode par enrichissement dans un milieu
liquide
.Water quality - Detection and enumeration of the spores of sulfite-reducing anaerobes (clostridia) - Part 7 : Method by
enrichment in a liguid medium
Première édition - 1986-02-01
G:
CDU 543.39: 579.852.13 Réf. no : ISO 6461/1-1986 (FI
2;
Descripteurs : eau, qualité, essai, analyse microbiologique, détermination, microorganisme, bactérie sulfito-réductrice.
Prix basé sur 3 pages
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Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont ap’brouvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 6461 /l a été élaborée par le comité technique
ISO/TC 147, Qualité de l’eau.
L’attention des utilisateurs est attirée sur le fait que toutes les Normes internationales
sont de temps en temps soumises à révision et que toute référence faite à une autre
Norme internationale dans le présent document implique qu’il s’agit, sauf indication
contraire, de la dernière édition.
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NORME INTERNATIONALE
Recherche et dénombrement des
Qualité de l’eau -
spores de micro-organismes anaérobies sulfito-réducteurs
(clostridia) -
Partie 1 : Méthode par enrichissement dans un milieu
liquide
ISO 8199, Qualité de l’eau - Directives générales pour
0 Introduction
l’analyse microbiologique par dénombrement des micro-
Les spores de micro-organismes anaérobies sulfito-réducteurs organismes sur milieu de culture. ‘)
(clostridia) sont largement répandues dans l’environnement.
Elles sont présentes dans les matières fécales humaines et ani-
4 Définition
males, ainsi que dans les eaux usées et le sol. À la différence
des Escherichia Co/i et des autres organismes coliformes, les
Dans le cadre de la présente partie de I’ISO 6461, la définition
spores survivent dans l’eau pendant longtemps, car elles sont
suivante est applicable.
plus résistantes que les formes végétatives à l’action des fac-
teurs chimiques et physiques. Elles peuvent ainsi fournir des
indications sur une pollution éloignée ou intermittente. Elles clostridia : Micro-organismes anaérobies formant des spores
peuvent même être résistantes à la chloration dans les propor-
et sulfito-réducteurs, appartenant à la famille des Bacillacées et
tions habituellement utilisées pour le traitement des eaux, et au genre Clostridium.
sont donc ainsi utiles pour les besoins des contrôles.
5 Principe
ISO 6461 comprend les parties suivantes:
La recherche des spores d’organismes anaérobies sulfito-
Partie 1 : Méthode par enrichissement dans un milieu
réducteurs (clostridia) dans un échantillon d’eau de volume
liquide.
déterminé, passe par les étapes suivantes.
Partie 2: Méthode par filtration sur membrane.
5.1 Sélection des spores
1 Objet
Sélection des spores dans l’échantillon, par chauffage pendant
une période de temps suffisante pour que les bactéries végéta-
La présente partie de I’ISO 6461 spécifie une méthode pour la
tives soient détruites.
recherche et le dénombrement des spores de micro-organismes
anaérobies sulfito-réducteurs (clostridia) par enrichissement
dans un milieu liquide. 5.2 Culture par enrichissement
Recherche et énumération des spores des organismes anaéro-
bies sulfito-réducteurs par inoculation de volumes de l’échantil-
2 Domaine d’application
lon dans les milieux liquides d’enrichissement, suivie de I’incu-
Le principe de la méthode est applicable à tous les types d’eau,
bation à 37 + 1 OC pendant 44 + 4 h dans des conditions
y compris les eaux troubles. anaérobies.
6 Milieux de culture et réactifs
3 Références
6.1 Principaux matériaux
ISO 3696, Eau à usage de laboratoire - Spécifications.
Pour améliorer la reproductibilité des résultats, il est recom-
ISO 5667, Qualité de l’eau - Échantillonnage -
mandé d’utiliser, pour la préparation des diluants et des milieux
Partie 2: Guide général sur les techniques d’échantiflon-
de culture, des composants de base déshydratés ou des milieux
nage.
complets déshydratés. De la même facon, des préparations
Partie 3 : Guide général pour la conservation et la manipula- commerciales de réactifs peuvent être utilisées. Les prescrip-
tions du fabricant doivent être suivies scrupuleusement.
tion des échan tilfons.
1) Actuellement au stade de projet.
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SO 6461/1-1986 (FI
6.2.2.2 Milieu de base double concentration
Préparer le milieu de base double concentration comme en
6.2.2.1, mais réduire le volume d’eau distillé de moitié.
L’eau utilisée doit être de l’eau distillée ou déminéralisée,
Transvaser des aliquotes, respectivement, de 10 ml et de 50 ml
exempte de substances susceptibles d’inhiber la croissance des
du milieu, dans des flacons avec bouchons à vis, de capacités
dans les conditions de l’essai (voir
micro-organismes
respectivement de 25 ml et 100 ml.
ISO 3696).
Stériliser à l’autoclave à 121 + 1 OC pendant 15 min.
Les mesures du pH doivent être effectuées au pH-mètre, et rap-
portées à la température de 25 OC.
6.2.3 Sulfite de sodium (Na2S03), solution à 4 % (mlm).
Si les mi
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Questions, Comments and Discussion
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