Paper and board — Determination of microbiological properties — Part 1: Total bacterial count

Is applicable to most kinds of paper and board, especially food grades, and is not suitable for materials such as vegetable parchment or wet-strength paper which cannot be readily disintegrated.

Papier et carton — Détermination des propriétés microbiologiques — Partie 1: Dénombrement bactériologique total

General Information

Status
Withdrawn
Publication Date
28-Jan-1987
Withdrawal Date
28-Jan-1987
Current Stage
9599 - Withdrawal of International Standard
Completion Date
30-Jun-2005
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ISO 8784-1:1987 - Paper and board -- Determination of microbiological properties
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ISO 8784-1:1987 - Papier et carton -- Détermination des propriétés microbiologiques
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ISO 8784-1:1987 - Papier et carton -- Détermination des propriétés microbiologiques
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Standards Content (Sample)

ISO
INTERNATIONAL STANDARD .
87844
First edition
1987-02-01
INTERNATIONAL ORGANKATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
ME~YHAPOjJHAfi OPrAHM3A~MR I-IO CTAH~APTM3A~MM
Paper and board - Determination of microbiological
properties -
Part 1:
Total bacterial count
Papier et carton - D4 termina tion des propri6 t& microbiologiques -
Partie 1: Dhombrement bacthriologique total
Reference number
ISO 8784-1: 1987 (E)

---------------------- Page: 1 ----------------------
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national Standards bodies (ISO member bedies). The work of preparing International
Standards is normally carried out through ISO technical committees. Esch member
body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison .with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the ISO Council. They are approved in accordance with ISO procedures requiring at
least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard ISO 8784-1 was prepared by Technical Committee ISO/TC 6,
Paper, board and pulps.
Users should note that all International Standards undergo revision from time to time
.
and that any reference made herein to any other International Standard implies its
latest edition, unless otherwise stated.
0 International Organkation for Standardkation, 1987
Printed in Switzeriand

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ISO 87844 : 1987 (E)
INTERNATIONAL STANDARD
Paper and board - Determination of microbiological
properties -
Part 1:
Total bacterial count
0 Introduction 5 Materials
This part of ISO 8784 for the bacterial examination of Paper and
5.1 Alcohol : ethanol, methanol or iso-propanol, for steriliz-
board is broadly based on ISO 4833 and provides specific
ing instruments.
amplification where necessary. lt is intended to deal with the
estimation of the total bacterial content without any attempt to
isolate species of particular public health significance.
5.2 Plugs, of non-absorbent cotton, or disposable
plugs.
Because of the exacting techniques required in bacteriological
procedures, reproducible results tan be secured only by a well-
5.3 Nutrient Substrate: tryptone glucose extract agar shall
trained technician. In addition, health risks may arise from
be used for bacterial counts. This culture medium is available in
employment of inadequately trained staff.
dehydrated form. The formula is given in the annex.
If tryptone glucose extract agar is not available, plate count
1 Scope and field of application
agar or other suitable culture medium may be substituted. The
This part of ISO 8784 specifies a method of determining the use of an alternative nutrient agar shall be stated in the test
total bacterial population in Paper and board (i.e. all bacteria report.
both within and on the surface of the sheet). lt is applicable to
most kinds of Paper and board, especially food grades.
5.4 Dilution fluid : Ringer’s Solution is preferred; however,
other isotonic solutions may be used.
The method is not suitable for materials such as vegetable
parchment or wet-strength Papers which cannot be readily dis-
The selection of a dilution fluid other than Ringer’s Solution
integrated.
shall be stated in the test report. Different dilution fluids shall
not be used in the same test. The formula for Ringer’s Solution
is given in the annex.
2 References
ISO 186, Paper and board - Sampling to determine average
quality.
6 Apparatus and glassware
ISO 4833, Microbiology - General guidance for enumeration
Usual microbiological laboratory equipment, and
of micro-organisms - Colon y coun t technique at 30 OC.
6.1 Balance, accurate to 0,l g, with a pan large enough to
3 Definition
hold a Petri dish.
For the purpose of this International Standard, the following
6.2 Colony-counting equipment, consisting of an illumi-
definition applies.
nated base with a dark background, fitted with a lens having a
total bacterial count: The total number of bacterial colonies
magnifying power of at least 1,5 times. The use of an additional
formed in a Standard culture medium after incubation under the
hand lens in conjunction with the lens on the colony counter
conditions specif ied.
may be necessary to increase the magnification to 8 to 10 times
to facilitate the counting of pin-Point bacterial colony-forming
units.
4 Principle
6.3 Disintegrators, with metal or glass jars of about 500 ml
Preparation of culture plates from specified dilutions of a Paper
capacity, fitted with a high-speed impeller near the bottom and
or board dispersion on a specified culture medium. Aerobic in-
fitted with a cap or lid; or other suitable disintegrator which
cubation of the culture plates for 72 h at 30 OC and calculation
ensures disintegration of the Paper or board. Place a Paper or
of the number of bacteria per gram of Sample from the number
aluminium foil hood over the cap of each disintegrator jar Prior
of colonies counted on selected plates and from the dilution
to sterilization.
factor.
1

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ISO 87844 : 1987 (El
6.4 Incubator, capable of being controiled at a temperature
7 Sterilization of equipment and media
of 30 + 1 OC.
Depending upon the nature of the equipment to be sterilized,
use one of the following three methods.
6.5 pH meter.
7.1 Steam heat (autoclave)
6.6 Autoclave for steam sterilization, capable of Operation
at 120 OC and 100 kPa*.
Sterilize the following for 20 min at 120 OC and 100 kPa :
6.7 Hot-air oven, with thermometer, capable of maintaining a) disintegrator jar assemblies (6.3) ;
165 + 2 OC for 3 h.
b) culture media (5.3);
c) Sample bottles;
6.8 Flaming equipment (alcohol lamp or Bunsen burner).
d) dilution fluid (5.4);
6.9 Knife, preferably a surgical knife with a disposable blade,
e) tongs (6.16) ;
to tut the Paper or board.
f) scissors (6.15).
6.10 Bottles for dilution : 250 ml, narrow-mouthed, glass
7.2 Dry heat
or plastic bottles fitted with screw-taps or with Escher rubber
Stoppers.
Sterilize the following by heating for 3 h at a temperature of
165 + 2 OC:
6.11 Containers for dry samples, of a type that tan be
readily sterilized. a) kraft envelopes (6.11) ;
b) pipettes (6.14) ;
NOTE - Plastics or glass Containers are suitable ; however, Paper
envelopes are most convenient. Use two envelopes, one placed inside
c) knives (6.9).
the other. The larger one may be as large as 230 mm x 300 mm and
. the smaller one may be as large as 160 mm x 240 mm. The envelopes
NOTE - Pipettes should be completely dry before heating. Scorching
should be made from heavy kraft Paper capable of withstanding
the Paper envelopes or wrappers must be avoided.
sterilization in a hot-air oven without undue embrittlement or the
generation of deleterious by-products. After sterilization,. seal the flap
7.3 Flaming
on the outer envelope with an adhesive or pressure-sensitive tape.
Immerse scissors, tongs, knives and similar instruments in
6.12 Flasks: Erlenmeyer flasks or screw-cap bottles for
alcohol (5.1). When needed for cutting or handling samples,
holding sterile media.
remove from the alcohol, allow to drain for a few moments,
then burn off excess alcohol (sec 6.8).
6.13 Petri dishes: dimensions of 100 mm x 15 mm are
recommended.
8 Sampling
6.14 Pipettes, pipette bulb (aspirator) and Containers.
8.1 Sample a sufficient number of units so that the
Graduated 10 ml Mohr pipettes. The 10 ml Mohr pipette, with
specimens are representative of the Paper or board being
the tip tut off to give a 3 mm opening at the delivery end, is
tested. If applicable, follow the sampling frequency given in
best suited for measuring fibre suspensions. 10 ml serological
ISO 186.
pipettes are also satisfactory. Special Mohr pipettes calibrated
from the large end are available and preferable to the usual
NOTE - A specimen should contain more +han one sheet of Paper or
Mohr pipette. Enclose them in metal boxes or wrap them in a
board.
heavy kraft wrapper for sterilization.
8.2 Use either a Single sterile envelope or two sterile
Suitable sized syringes with Single-use pipettes are also
envelopes, one within the other, for each specimen (sec note to
suitable.
6.11). From each unit tut away several top layers of the Paper
or board to be sampled and discard them to eliminate surface
All pipettes should be plugged with cotton at the mouth end
contaminat
...

ISO
NORME INTERNATIONALE
87844
Première édition
1987-02-01
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
. ME~YHAPOAHAR OPTAHM3A~MR Il0 CTAH~APTM3A~Wl
,
Papier et carton - Détermination des propriétés
microbiologiques -
Partie 1 :
Dénombrement bactériologique total
Paper and board - Determination of microbio/ogical properties -
Part 1: Total bacterial Count
Numéro de référence
ISO 87844 : 1987 (E)

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Avant-propos
LIS0 (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est normalement confiée aux comités techniques de I’ISO.
Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique cr& à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mement aux procédures de I’ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 8784-l a été élaborée par le comité technique ISO/TC 6,
Papiers, cartons et pâtes.
L’attention des utilisateurs est attirée sur le fait que toutes les Normes internationales
sont de temps en temps soumises à révision et que toute référence faite à une autre
Norme internationale dans le présent document implique qu’il s’agit, sauf indication
contraire, de la derni&re édition.
0
@ Organisation internationale de normalisation, 1987
Imprimé en Suisse

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NORME INTERNATIONALE ISO8784-1 : 1987 (F)
Papier et carton - Détermination des propriétés
microbiologiques -
Partie 1 :
Dénombrement bactériologique total
4 Principe
0 Introduction
Préparation de boîtes de culture à partir de dilutions spécifiées
La présente partie de I’ISO 8784 pour l’examen bactériologique
de papier ou de carton dans un milieu de culture spécifié. Incu-
du papier et du carton est fondée en gros sur I’ISO 4833 en
bation des boîtes à l’air pendant 72 h à 30 OC et calcul du
donnant des précisions particulières lorsque cela s’avère néces-
nombre de bactéries par gramme d’échantillon à partir du
saire. II est prévu de ne prendre en considération que la teneur
nombre de colonies comptées dans les boîtes choisies et du
totale en bactéries sans chercher à isoler des souches ayant une
facteur de dilution.
importance pour la santé publique.
Compte tenu de la particularité des techniques en bactériolo-
gie, on ne peut attendre de résultats reproductibles qu’avec un 5 Matériaux
personnel qualifié. De plus, du personnel non qualifie peut
s’exposer à des risques pour la sante.
5.1 Alcool bthylique, mbthylique ou isopropylique, pour
désinfecter les instruments.
5.2 Tampons en coton non absorbant ou tampons
1 Objet et domaine d’application
jetables.
La présente partie de I’ISO 8784 spécifie une méthode de déter-
5.3 Milieu de culture : mélange tryptone-glucose-agar pour
mination de la population bactérienne totale des papiers et des
comptage des bactéries. Ce milieu de culture existe sous forme
cartons (c’est-à-dire toutes les bactéries présentes à la fois sur
déshydratée. La formule est donnée dans l’annexe.
et dans la feuille de papier ou de carton). Elle est applicable à la
plupart des papiers et des cartons, particulierement les classes
Si on ne peut se procurer ce mélange, on peut utiliser le
aliments.
mélange agar-agar pour comptage ou tout autre milieu. L’utili-
sation d’un mélange autre que le mélange tryptone-glucose-
La méthode ne convient pas à des matériaux tels que le papier
agar doit être mentionnée dans le pro&-verbal d’essai.
sulfurisé ou le papier résistant à l’état humide qui ne peuvent
pas être entièrement désintégrés.
5.4 Diluant: on préférera la solution de Ringer mais on peut
utiliser toute solution isotonique.
2 Références
Le choix d’une solution autre que la solution de Ringer doit être
mentionné dans le procès-verbal d’essai. On ne peut utiliser de
ISO 186, Papier et carton - Échantillonnage pour dhterminer la
solutions différentes au cours du même essai. La formule de la
qualité moyenne.
solution de Ringer est donnée dans l’annexe.
ISO 4833, Microbiologie - Directives gt!nérales pour le dénom-
brement des micro-organismes - M&hode par comptage des
6 Appareillage et verrerie
colonies obtenues à 30 OC.
Matériel courant de laboratoire de microbiologie, et
6.1 Balance, précise à 0,l g, munie d’un plateau assez large
3 Définition
pour recevoir une boîte de Petri.
Dans le cadre de la présente partie de I’ISO 8784, la définition
suivante est applicable : 6.2 Appareil de comptage des colonies, comportant à la
base un système d’éclairage à fond noir équipé d’une lentille
grossissant au moins 1,5 fois. II peut être nécessaire de s’aider
dénombrement bactériologique total : Nombre total de
colonies bactériennes qui se sont formées dans un milieu de d’une loupe afin d’augmenter le grossissement jusqu’à 8 ou 10
culture étalon après incubation dans des conditions spécifiées. fois pour faciliter le comptage des colonies de batteries.
1

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ISO 8784-l : 1987 (F)
6.3 Désintégrateurs, à cuve en métal ou en verre d’une Toutes les pipettes doivent être bouchées avec du coton côté
succion avant d’être stérilisées.
capacité d’environ 500 ml, munis d’une hélice tournant à
grande vitesse ou de tout autre systéme permettant de déchi-
queter le papier ou le carton. Mettre un capuchon en papier ou
6.15 Ciseaux, de préférence avec un côté coupant de
en feuille d’aluminium sur le bouchon de chaque cuve avant de
100 mm à 160 mm.
la porter à la stérilisation.
Pi
6.16 nces, permettant de manipuler des échantillons de
6.4 Incubateur, pouvant être régulé à 30 + 1 OC.
papier ou de carton.
6.5 pH-mètre.
7 Stérilisation du matériel
6.6 Autoclave pour stérilisation à la vapeur, pouvant tra-
vailler à 120 OC sous 100 kPa*.
Selon la nature du matériel stériliser,
à procéder selon l’une des
trois méthodes suivantes.
6.7 Étuve, munie d’un thermomètre, pouvant être mainte-
nue à 165 + 2 OC pendant 3 h.
7.1 Stérilisation à la vapeur (autoclave)
6.8 Équipement permettant le flambage (lampe à alcool
Stériliser le matériel ci-après à 120 OC pendant 20 min sous
ou bec Bunsen).
100 kPa:
a) cuves du désintégrateur (6.3);
6.9 Couteau, de préférence un scalpel à lame jetable pour
découper le papier ou le carton
b) milieux de culture (5.3);
c) bouteilles pour échantillon ;
6.10 Flacons pour diluer, de 250 ml à goulot étroit : bou-
teilles en verre ou en matière plastique fermées à vis ou à l’aide
d) solution pour dilution (5.4);
de bouchons en caoutchouc d’Escher.
e) pinces (6.16) ;
f) ciseaux (6.15).
11 Récipients pour échantillons secs, convenables pour
6
stérilisation.
la
7.2 Stérilisation à la chaleur sèche
NOTE - Des récipients en plastique ou en verre conviennent mais des
enveloppes en papier sont préférables. Utiliser deux enveloppes, l’une
Stériliser le matériel ci-après à 165 k 2 OC pendant 3 h :
à l’intérieur de l’autre. La grande enveloppe peut avoir comme dimen-
sions 230 mm x 300 mm et la petite 160 mm x 240 mm. Elles
devraient être en papier kraft épais résistant à la stérilisation dans une a) enveloppes en papier kraft (6. Il ) ;
étuve à air chaud sans présenter de fragilisation, ni engendrer de sous-
b) pipettes (6.14) ;
produits toxiques. Après l’opération de stérilisation, coller la patte de
l’enveloppe extérieure avec un adhésif ou un ruban adhésif sensible à la
c) scalpels (6.9).
pression.
NOTE - Les pipettes doivent être parfaitement sèches avant d’être
stérilisées.
6.12 Fioles : fioles coniques ou bouteilles fermées à vis pou- On évitera de laisser e roussir les enveloppes.
vant contenir des produits stériles.
7.3 Flambage
6.13 Boîtes de Petri, de préférence 100 mm x 15 mm.
Laisser les ciseaux, pinces, scalpels et autres instruments dans
l’alcool (5.1). Les retirer de l’alcool au moment de l’emploi, les
6.14 Pipettes, bulbe de pipette (aspirateur) et réci-
laisser égoutter et brûler (voir 6.8) l’alcool restant.
pients. Pipettes de Mohr graduées de 10 ml. La pipette de
Mohr de 10 ml, dont le bout a été coupe pour donner une
ouverture de 3 mm, est celle qui convient le mieux pour mesu-
rer des suspensions de fibres ; des pipettes de 10 ml pour séro-
8 Échantillonnage
logie conviennent également. Des pipettes de Mohr spéciales
calibrées à partir de la plus grosse extrémité conviennent et
8.1 Choisir un nombre d’échantillons représentatif du lot de
sont à préférer aux pipettes de Mohr classiques. Elles doivent
papier ou de carton soumis à l’essai, selon I’ISO 186. Suivre la
être placées dans des boîtes métalliques ou enveloppées de
fréquence d’échantillonnage selon I’ISO 186.
papier kraft épais résistant à la stérilisation.
réutili- NOTE - Un échantillon peut contenir plus d’une feuille de papier ou de
Des seringues de taille convenable avec des pipettes non
carton.
sables conviennent également.
* 100 kPa = 1 bar
2

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ISO8784-1 : 1987 (FI
8.2 Utiliser soit une enveloppe stérile,
...

ISO
NORME INTERNATIONALE
87844
Première édition
1987-02-01
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
. ME~YHAPOAHAR OPTAHM3A~MR Il0 CTAH~APTM3A~Wl
,
Papier et carton - Détermination des propriétés
microbiologiques -
Partie 1 :
Dénombrement bactériologique total
Paper and board - Determination of microbio/ogical properties -
Part 1: Total bacterial Count
Numéro de référence
ISO 87844 : 1987 (E)

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Avant-propos
LIS0 (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est normalement confiée aux comités techniques de I’ISO.
Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique cr& à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mement aux procédures de I’ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 8784-l a été élaborée par le comité technique ISO/TC 6,
Papiers, cartons et pâtes.
L’attention des utilisateurs est attirée sur le fait que toutes les Normes internationales
sont de temps en temps soumises à révision et que toute référence faite à une autre
Norme internationale dans le présent document implique qu’il s’agit, sauf indication
contraire, de la derni&re édition.
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@ Organisation internationale de normalisation, 1987
Imprimé en Suisse

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NORME INTERNATIONALE ISO8784-1 : 1987 (F)
Papier et carton - Détermination des propriétés
microbiologiques -
Partie 1 :
Dénombrement bactériologique total
4 Principe
0 Introduction
Préparation de boîtes de culture à partir de dilutions spécifiées
La présente partie de I’ISO 8784 pour l’examen bactériologique
de papier ou de carton dans un milieu de culture spécifié. Incu-
du papier et du carton est fondée en gros sur I’ISO 4833 en
bation des boîtes à l’air pendant 72 h à 30 OC et calcul du
donnant des précisions particulières lorsque cela s’avère néces-
nombre de bactéries par gramme d’échantillon à partir du
saire. II est prévu de ne prendre en considération que la teneur
nombre de colonies comptées dans les boîtes choisies et du
totale en bactéries sans chercher à isoler des souches ayant une
facteur de dilution.
importance pour la santé publique.
Compte tenu de la particularité des techniques en bactériolo-
gie, on ne peut attendre de résultats reproductibles qu’avec un 5 Matériaux
personnel qualifié. De plus, du personnel non qualifie peut
s’exposer à des risques pour la sante.
5.1 Alcool bthylique, mbthylique ou isopropylique, pour
désinfecter les instruments.
5.2 Tampons en coton non absorbant ou tampons
1 Objet et domaine d’application
jetables.
La présente partie de I’ISO 8784 spécifie une méthode de déter-
5.3 Milieu de culture : mélange tryptone-glucose-agar pour
mination de la population bactérienne totale des papiers et des
comptage des bactéries. Ce milieu de culture existe sous forme
cartons (c’est-à-dire toutes les bactéries présentes à la fois sur
déshydratée. La formule est donnée dans l’annexe.
et dans la feuille de papier ou de carton). Elle est applicable à la
plupart des papiers et des cartons, particulierement les classes
Si on ne peut se procurer ce mélange, on peut utiliser le
aliments.
mélange agar-agar pour comptage ou tout autre milieu. L’utili-
sation d’un mélange autre que le mélange tryptone-glucose-
La méthode ne convient pas à des matériaux tels que le papier
agar doit être mentionnée dans le pro&-verbal d’essai.
sulfurisé ou le papier résistant à l’état humide qui ne peuvent
pas être entièrement désintégrés.
5.4 Diluant: on préférera la solution de Ringer mais on peut
utiliser toute solution isotonique.
2 Références
Le choix d’une solution autre que la solution de Ringer doit être
mentionné dans le procès-verbal d’essai. On ne peut utiliser de
ISO 186, Papier et carton - Échantillonnage pour dhterminer la
solutions différentes au cours du même essai. La formule de la
qualité moyenne.
solution de Ringer est donnée dans l’annexe.
ISO 4833, Microbiologie - Directives gt!nérales pour le dénom-
brement des micro-organismes - M&hode par comptage des
6 Appareillage et verrerie
colonies obtenues à 30 OC.
Matériel courant de laboratoire de microbiologie, et
6.1 Balance, précise à 0,l g, munie d’un plateau assez large
3 Définition
pour recevoir une boîte de Petri.
Dans le cadre de la présente partie de I’ISO 8784, la définition
suivante est applicable : 6.2 Appareil de comptage des colonies, comportant à la
base un système d’éclairage à fond noir équipé d’une lentille
grossissant au moins 1,5 fois. II peut être nécessaire de s’aider
dénombrement bactériologique total : Nombre total de
colonies bactériennes qui se sont formées dans un milieu de d’une loupe afin d’augmenter le grossissement jusqu’à 8 ou 10
culture étalon après incubation dans des conditions spécifiées. fois pour faciliter le comptage des colonies de batteries.
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ISO 8784-l : 1987 (F)
6.3 Désintégrateurs, à cuve en métal ou en verre d’une Toutes les pipettes doivent être bouchées avec du coton côté
succion avant d’être stérilisées.
capacité d’environ 500 ml, munis d’une hélice tournant à
grande vitesse ou de tout autre systéme permettant de déchi-
queter le papier ou le carton. Mettre un capuchon en papier ou
6.15 Ciseaux, de préférence avec un côté coupant de
en feuille d’aluminium sur le bouchon de chaque cuve avant de
100 mm à 160 mm.
la porter à la stérilisation.
Pi
6.16 nces, permettant de manipuler des échantillons de
6.4 Incubateur, pouvant être régulé à 30 + 1 OC.
papier ou de carton.
6.5 pH-mètre.
7 Stérilisation du matériel
6.6 Autoclave pour stérilisation à la vapeur, pouvant tra-
vailler à 120 OC sous 100 kPa*.
Selon la nature du matériel stériliser,
à procéder selon l’une des
trois méthodes suivantes.
6.7 Étuve, munie d’un thermomètre, pouvant être mainte-
nue à 165 + 2 OC pendant 3 h.
7.1 Stérilisation à la vapeur (autoclave)
6.8 Équipement permettant le flambage (lampe à alcool
Stériliser le matériel ci-après à 120 OC pendant 20 min sous
ou bec Bunsen).
100 kPa:
a) cuves du désintégrateur (6.3);
6.9 Couteau, de préférence un scalpel à lame jetable pour
découper le papier ou le carton
b) milieux de culture (5.3);
c) bouteilles pour échantillon ;
6.10 Flacons pour diluer, de 250 ml à goulot étroit : bou-
teilles en verre ou en matière plastique fermées à vis ou à l’aide
d) solution pour dilution (5.4);
de bouchons en caoutchouc d’Escher.
e) pinces (6.16) ;
f) ciseaux (6.15).
11 Récipients pour échantillons secs, convenables pour
6
stérilisation.
la
7.2 Stérilisation à la chaleur sèche
NOTE - Des récipients en plastique ou en verre conviennent mais des
enveloppes en papier sont préférables. Utiliser deux enveloppes, l’une
Stériliser le matériel ci-après à 165 k 2 OC pendant 3 h :
à l’intérieur de l’autre. La grande enveloppe peut avoir comme dimen-
sions 230 mm x 300 mm et la petite 160 mm x 240 mm. Elles
devraient être en papier kraft épais résistant à la stérilisation dans une a) enveloppes en papier kraft (6. Il ) ;
étuve à air chaud sans présenter de fragilisation, ni engendrer de sous-
b) pipettes (6.14) ;
produits toxiques. Après l’opération de stérilisation, coller la patte de
l’enveloppe extérieure avec un adhésif ou un ruban adhésif sensible à la
c) scalpels (6.9).
pression.
NOTE - Les pipettes doivent être parfaitement sèches avant d’être
stérilisées.
6.12 Fioles : fioles coniques ou bouteilles fermées à vis pou- On évitera de laisser e roussir les enveloppes.
vant contenir des produits stériles.
7.3 Flambage
6.13 Boîtes de Petri, de préférence 100 mm x 15 mm.
Laisser les ciseaux, pinces, scalpels et autres instruments dans
l’alcool (5.1). Les retirer de l’alcool au moment de l’emploi, les
6.14 Pipettes, bulbe de pipette (aspirateur) et réci-
laisser égoutter et brûler (voir 6.8) l’alcool restant.
pients. Pipettes de Mohr graduées de 10 ml. La pipette de
Mohr de 10 ml, dont le bout a été coupe pour donner une
ouverture de 3 mm, est celle qui convient le mieux pour mesu-
rer des suspensions de fibres ; des pipettes de 10 ml pour séro-
8 Échantillonnage
logie conviennent également. Des pipettes de Mohr spéciales
calibrées à partir de la plus grosse extrémité conviennent et
8.1 Choisir un nombre d’échantillons représentatif du lot de
sont à préférer aux pipettes de Mohr classiques. Elles doivent
papier ou de carton soumis à l’essai, selon I’ISO 186. Suivre la
être placées dans des boîtes métalliques ou enveloppées de
fréquence d’échantillonnage selon I’ISO 186.
papier kraft épais résistant à la stérilisation.
réutili- NOTE - Un échantillon peut contenir plus d’une feuille de papier ou de
Des seringues de taille convenable avec des pipettes non
carton.
sables conviennent également.
* 100 kPa = 1 bar
2

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ISO8784-1 : 1987 (FI
8.2 Utiliser soit une enveloppe stérile,
...

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