SIST ISO 1871:2011

Food and feed products -- General guidelines for the determination of nitrogen by the Kjeldahl method

This International Standard provides general guidelines for the determination of nitrogen by the Kjeldahl method. It applies to food and feed products containing nitrogenous compounds that can be directly determined by the Kjeldahl method.
NOTE This measurement principle does not take into account the nitrogen from nitrates and nitrites.

Produits alimentaires et aliments des animaux -- Lignes directrices générales pour le dosage de l'azote selon la méthode de Kjeldahl

L'ISO 1871:2009 fournit des lignes directrices g�n�rales pour le dosage de l'azote selon la m�thode de Kjeldahl. Elle est applicable aux produits contenant des compos�s azot�s directement dosables selon la m�thode de Kjeldahl. L'azote issu des nitrates et des nitrites n'est pas pris en compte par ce principe de dosage.

Kmetijski pridelki in živilski proizvodi - Splošna navodila za določanje dušika s Kjeldahlovo metodo

Ta mednarodni standard zagotavlja splošna navodila za določanje dušika s Kjeldahlovo metodo. Velja za hrano in krmne proizvode, ki vsebujejo dušikove spojine, ki so lahko neposredno določene s Kjeldahlovo metodo.
OPOMBA: To načelo merjenja ne upošteva dušika iz nitratov in nitridov.

General Information

• Status: Published
• Public Enquiry End Date: 09-May-2011
• Publication Date: 15-May-2011
• ICS: 67.050 - General methods of tests and analysis for food products
• Technical Committee: KŽP - Agricultural food products
• Current Stage: 6060 - National Implementation/Publication (Adopted Project)
• Start Date: 06-May-2011
• Due Date: 11-Jul-2011
• Completion Date: 16-May-2011
• Directive: TP012 - Pravilnik o metodah za določanje kakovosti žit, ki so predmet intervencijskega nakupa
• Ref Project: ISO 1871:2009 - Food and feed products -- General guidelines for the determination of nitrogen by the Kjeldahl method

RELATIONS

• Replaces: SIST ISO 1871:1995 - Agricultural food products -- General directions for the determination of nitrogen by the Kjeldahl method
• Effective Date: 01-Jun-2011

Standards Content (sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 1871
Second edition
2009-09-01
Food and feed products — General
guidelines for the determination of
nitrogen by the Kjeldahl method
Produits alimentaires et aliments des animaux — Lignes directrices
générales pour le dosage de l'azote selon la méthode de Kjeldahl
Reference number
ISO 1871:2009(E)
ISO 2009
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 1871:2009(E)
PDF disclaimer

This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but

shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In

downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. The ISO Central Secretariat

accepts no liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.

Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation

parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies. In

the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.

COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
© ISO 2009

All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,

electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or

ISO's member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2009 – All rights reserved
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 1871:2009(E)
Foreword

ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies

(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO

technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been

established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and

non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the

International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.

International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.

The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards

adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an

International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.

Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent

rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.

ISO 1871 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products.

This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 1871:1975), which has been technically revised.

© ISO 2009 – All rights reserved iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 1871:2009(E)
Introduction

The analysis of products of animal or plant origin, such as those used in food and feed products, often

includes determining their nitrogen content according to the Kjeldahl method.

This method can be standardized in principle, as it is generally accepted that different apparatus or operating

methods are equivalent if their results are similar.

The purpose of this document is to describe the various stages of the method, the associated critical points

and the minimum objectives to be achieved to ensure that the method is applied correctly.

This document provides general guidelines; it is not intended to replace existing International Standards which

are in use.
iv © ISO 2009 – All rights reserved
---------------------- Page: 4 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD ISO 1871:2009(E)
Food and feed products — General guidelines for the
determination of nitrogen by the Kjeldahl method

WARNING — The use of this International Standard may involve hazardous materials, operations and

equipment. This International Standard does not purport to address all the safety problems associated

with its use. It is the responsibility of the user of this International Standard to establish appropriate

safety and health practices and determine the applicability of regulatory limitations prior to use.

1 Scope

This International Standard provides general guidelines for the determination of nitrogen by the Kjeldahl

method. It applies to food and feed products containing nitrogenous compounds that can be directly

determined by the Kjeldahl method.

NOTE This measurement principle does not take into account the nitrogen from nitrates and nitrites.

2 Principle

Digestion of a test portion with concentrated sulfuric acid in the presence of catalysts to convert the organic

nitrogen into ammonium sulfate. Excess sodium hydroxide is added to the cooled digest to release the

ammonia. The released ammonia is distilled into an excess of boric acid solution and then titrated with a

standard solution of sulfuric or hydrochloric acid. The nitrogen content is calculated from the quantity of

ammonia produced.
NOTE In the following text, the term “nitrogen” refers to organic nitrogen.
3 Reagents

Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise specified, and distilled or demineralized

water or water of equivalent purity.

3.1 Sulfuric acid, virtually free from nitrogenous compounds and of mass density ρ = 1,83 g/ml to

1,84 g/ml.
3.2 Catalysts (see 5.2.1).

3.3 Boric acid solution (10 g/l to 40 g/l depending on the apparatus used). If using the colorimetric

end-point titration, boric acid solution shall contain indicator (the pH or colour of this mixed solution shall be

adjusted before use).

3.4 Standard hydrochloric acid (0,02 mol/l to 0,50 mol/l) or sulfuric acid solution (0,01 mol/l to

0,25 mol/l). The titre of the solution, c , shall be known to at least within 0,001 mol/l.

3.5 Indicators, which should change colour between pH 4 and pH 5.

NOTE Various indicators are available. A methyl red and bromocresol green mixed indicator is most commonly used.

Ready-to-use boric acid solutions containing mixed indicators are available.
© ISO 2009 – All rights reserved 1
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 1871:2009(E)
3.6 Hydrogen peroxide (H O ), min. 30 % mass fraction.
2 2
3.7 Sodium hydroxide solution, min. 30 % mass fraction.
3.8 Antifoaming agents.
EXAMPLE Silicone, liquid paraffin.
3.9 Ammonium sulfate or ammonium chloride (minimum purity 99,9 %).

Immediately before use, dry the ammonium sulfate or ammonium chloride at 104 °C ± 4 °C for at least 2 h.

Allow it to cool at ambient temperature in a desiccator.
NOTE Solutions of known concentration can be used.

3.10 Tryptophan or acetanilide or lysine hydrochloride (minimum purity 99 % mass fraction).

These reagents should be kept away from humidity.
WARNING — Do not dry these reagents in an oven before use.
3.11 Sucrose, with nitrogen content less than a mass fraction of 0,002 %.
WARNING — Do not dry sucrose in an oven before use.
4 Apparatus and materials
Usual laboratory apparatus and, in particular, the following.
4.1 Analytical balance, capable of weighing to the nearest 0,001 g.
4.2 Digestion, steam distillation and titration systems.

They are used to perform the operations described in Clause 5 and to ensure that the performance objectives

described in 5.5.3 and 5.5.4 are met.

4.3 Boiling point regulators (if needed), for example pumice grains, glass beads, aluminium oxide

(corundum) or silicon carbide.

4.4 Weighing paper or medium, free from nitrogenous compounds and suitable for the test portion and

type of product.
5 Operating method

NOTE According to the nature of the sample, it may be necessary to prepare the test portion in advance to obtain a

homogeneous sample (grinding, homogenization, etc.).
5.1 Test portion

The test portion, the quantity of which depends on the presumed nitrogen content determined by the Kjeldahl

method, shall be representative of the sample and contain between 0,005 g and 0,2 g of nitrogen.

The test portion can be obtained by weighing with the analytical balance (4.1), to give mass, m, in grams or by

using a pipette, to give volume, V , in millilitres.
2 © ISO 2009 – All rights reserved
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 1871:2009(E)
The test portion can be inserted into the tube directly or via a support (4.4).

The quantity of test portion can be adjusted according to the composition of the product under test and the

quantity of sulfuric acid (see 5.2.2).
5.2 Digestion
5.2.1 Catalysts

It is important to differentiate between the substances used to raise the boiling point of the liquid during

digestion and the catalysts themselves that facilitate digestion. The former are usually potassium sulfate or,

possibly, sodium sulfate. They are introduced in sufficient quantity to raise the boiling point of the acid to

between 380 °C and 430 °C. The most commonly used catalyst is copper in the form of copper sulfate alone

or mixed with titanium oxide.
The optional
...

SLOVENSKI STANDARD
SIST ISO 1871:2011
01-junij-2011
1DGRPHãþD
SIST ISO 1871:1995

.PHWLMVNLSULGHONLLQåLYLOVNLSURL]YRGL6SORãQDQDYRGLOD]DGRORþDQMHGXãLNDV

.MHOGDKORYRPHWRGR

Food and feed products -- General guidelines for the determination of nitrogen by the

Kjeldahl method

Produits alimentaires et aliments des animaux -- Lignes directrices générales pour le

dosage de l'azote selon la méthode de Kjeldahl
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 1871:2009
ICS:
67.050 Splošne preskusne in General methods of tests and
analizne metode za živilske analysis for food products
proizvode
SIST ISO 1871:2011 en

2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

---------------------- Page: 1 ----------------------
SIST ISO 1871:2011
---------------------- Page: 2 ----------------------
SIST ISO 1871:2011
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 1871
Second edition
2009-09-01
Food and feed products — General
guidelines for the determination of
nitrogen by the Kjeldahl method
Produits alimentaires et aliments des animaux — Lignes directrices
générales pour le dosage de l'azote selon la méthode de Kjeldahl
Reference number
ISO 1871:2009(E)
ISO 2009
---------------------- Page: 3 ----------------------
SIST ISO 1871:2011
ISO 1871:2009(E)
PDF disclaimer

This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but

shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In

downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. The ISO Central Secretariat

accepts no liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.

Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation

parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies. In

the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.

COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
© ISO 2009

All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,

electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or

ISO's member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2009 – All rights reserved
---------------------- Page: 4 ----------------------
SIST ISO 1871:2011
ISO 1871:2009(E)
Foreword

ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies

(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO

technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been

established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and

non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the

International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.

International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.

The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards

adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an

International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.

Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent

rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.

ISO 1871 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products.

This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 1871:1975), which has been technically revised.

© ISO 2009 – All rights reserved iii
---------------------- Page: 5 ----------------------
SIST ISO 1871:2011
ISO 1871:2009(E)
Introduction

The analysis of products of animal or plant origin, such as those used in food and feed products, often

includes determining their nitrogen content according to the Kjeldahl method.

This method can be standardized in principle, as it is generally accepted that different apparatus or operating

methods are equivalent if their results are similar.

The purpose of this document is to describe the various stages of the method, the associated critical points

and the minimum objectives to be achieved to ensure that the method is applied correctly.

This document provides general guidelines; it is not intended to replace existing International Standards which

are in use.
iv © ISO 2009 – All rights reserved
---------------------- Page: 6 ----------------------
SIST ISO 1871:2011
INTERNATIONAL STANDARD ISO 1871:2009(E)
Food and feed products — General guidelines for the
determination of nitrogen by the Kjeldahl method

WARNING — The use of this International Standard may involve hazardous materials, operations and

equipment. This International Standard does not purport to address all the safety problems associated

with its use. It is the responsibility of the user of this International Standard to establish appropriate

safety and health practices and determine the applicability of regulatory limitations prior to use.

1 Scope

This International Standard provides general guidelines for the determination of nitrogen by the Kjeldahl

method. It applies to food and feed products containing nitrogenous compounds that can be directly

determined by the Kjeldahl method.

NOTE This measurement principle does not take into account the nitrogen from nitrates and nitrites.

2 Principle

Digestion of a test portion with concentrated sulfuric acid in the presence of catalysts to convert the organic

nitrogen into ammonium sulfate. Excess sodium hydroxide is added to the cooled digest to release the

ammonia. The released ammonia is distilled into an excess of boric acid solution and then titrated with a

standard solution of sulfuric or hydrochloric acid. The nitrogen content is calculated from the quantity of

ammonia produced.
NOTE In the following text, the term “nitrogen” refers to organic nitrogen.
3 Reagents

Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise specified, and distilled or demineralized

water or water of equivalent purity.

3.1 Sulfuric acid, virtually free from nitrogenous compounds and of mass density ρ = 1,83 g/ml to

1,84 g/ml.
3.2 Catalysts (see 5.2.1).

3.3 Boric acid solution (10 g/l to 40 g/l depending on the apparatus used). If using the colorimetric

end-point titration, boric acid solution shall contain indicator (the pH or colour of this mixed solution shall be

adjusted before use).

3.4 Standard hydrochloric acid (0,02 mol/l to 0,50 mol/l) or sulfuric acid solution (0,01 mol/l to

0,25 mol/l). The titre of the solution, c , shall be known to at least within 0,001 mol/l.

3.5 Indicators, which should change colour between pH 4 and pH 5.

NOTE Various indicators are available. A methyl red and bromocresol green mixed indicator is most commonly used.

Ready-to-use boric acid solutions containing mixed indicators are available.
© ISO 2009 – All rights reserved 1
---------------------- Page: 7 ----------------------
SIST ISO 1871:2011
ISO 1871:2009(E)
3.6 Hydrogen peroxide (H O ), min. 30 % mass fraction.
2 2
3.7 Sodium hydroxide solution, min. 30 % mass fraction.
3.8 Antifoaming agents.
EXAMPLE Silicone, liquid paraffin.
3.9 Ammonium sulfate or ammonium chloride (minimum purity 99,9 %).

Immediately before use, dry the ammonium sulfate or ammonium chloride at 104 °C ± 4 °C for at least 2 h.

Allow it to cool at ambient temperature in a desiccator.
NOTE Solutions of known concentration can be used.

3.10 Tryptophan or acetanilide or lysine hydrochloride (minimum purity 99 % mass fraction).

These reagents should be kept away from humidity.
WARNING — Do not dry these reagents in an oven before use.
3.11 Sucrose, with nitrogen content less than a mass fraction of 0,002 %.
WARNING — Do not dry sucrose in an oven before use.
4 Apparatus and materials
Usual laboratory apparatus and, in particular, the following.
4.1 Analytical balance, capable of weighing to the nearest 0,001 g.
4.2 Digestion, steam distillation and titration systems.

They are used to perform the operations described in Clause 5 and to ensure that the performance objectives

described in 5.5.3 and 5.5.4 are met.

4.3 Boiling point regulators (if needed), for example pumice grains, glass beads, aluminium oxide

(corundum) or silicon carbide.

4.4 Weighing paper or medium, free from nitrogenous compounds and suitable for the test portion and

type of product.
5 Operating method

NOTE According to the nature of the sample, it may be necessary to prepare the test portion in advance to obtain a

homogeneous sample (grinding, homogenization, etc.).
5.1 Test portion

The test portion, the quantity of which depends on the presumed nitrogen content determined by the Kjeldahl

method, shall be representative of the sample and contain between 0,005 g and 0,2 g of nitrogen.

The test portion can be obtained by weighing with the analytical balance (4.1), to give mass, m, in grams or by

using a pipette, to give volume, V , in millilitres.
2 © ISO 2009 – All rights reserved
---------------------- Page: 8 ----------------------
SIST ISO 1871:2011
ISO 1871:2009(E)
The test portion can be inserted into the tube directly or via a support (4.4).

The quantity of test portion can be adjusted according to the composition of the product under test and the

quantity of sulfu
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 1871
Deuxième édition
2009-09-01
Produits alimentaires et aliments des
animaux — Lignes directrices générales
pour le dosage de l'azote selon la
méthode de Kjeldahl
Food and feed products — General guidelines for the determination of
nitrogen by the Kjeldahl method
Numéro de référence
ISO 1871:2009(F)
ISO 2009
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 1871:2009(F)
PDF – Exonération de responsabilité

Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier

peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence

autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées

acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO décline toute

responsabilité en la matière.
Adobe est une marque déposée d'Adobe Systems Incorporated.

Les détails relatifs aux produits logiciels utilisés pour la création du présent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info

du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir

l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO. Dans le cas peu probable où surviendrait un problème d'utilisation,

veuillez en informer le Secrétariat central à l'adresse donnée ci-dessous.
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2009

Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous

quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit

de l'ISO à l'adresse ci-après ou du comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.

ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2009 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 1871:2009(F)
Avant-propos

L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de

normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée

aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du

comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non

gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec

la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.

Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,

Partie 2.

La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes

internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur

publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres

votants.

L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de

droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne

pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.

L'ISO 1871 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires.

Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 1871:1975), qui a fait l'objet d'une

révision technique.
© ISO 2009 – Tous droits réservés iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 1871:2009(F)
Introduction

L'analyse des produits d'origine animale ou végétale, notamment ceux utilisés dans des denrées alimentaires

et aliments des animaux, comporte souvent le dosage de l'azote selon la méthode de Kjeldahl.

Cette méthode peut être normalisée en principe car il est possible d'admettre que divers appareils ou modes

opératoires sont équivalents s'ils aboutissent à des résultats équivalents.

Le présent document a pour but de décrire les différentes étapes de la méthode, les points critiques associés

et les objectifs minimaux à atteindre pour une bonne application de la méthode.

Le présent document fournit des lignes directrices générales; il n'est pas destiné à remplacer les Normes

internationales qui sont en cours d'utilisation.
iv © ISO 2009 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 4 ----------------------
NORME INTERNATIONALE ISO 1871:2009(F)
Produits alimentaires et aliments des animaux — Lignes
directrices générales pour le dosage de l'azote selon la
méthode de Kjeldahl

AVERTISSEMENT — L'utilisation de la présente Norme internationale peut impliquer l'utilisation de

produits et la mise en œuvre de modes opératoires et d'appareillages à caractère dangereux. La

présente Norme internationale n'a pas pour but d'aborder tous les problèmes de sécurité liés à son

utilisation. Il incombe à l'utilisateur d'établir, avant de l'utiliser, des pratiques d'hygiène et de sécurité

appropriées et de déterminer l'applicabilité des restrictions réglementaires.
1 Domaine d'application

La présente Norme internationale fournit des lignes directrices générales pour le dosage de l'azote selon la

méthode de Kjeldahl. Elle est applicable aux produits alimentaires et aux aliments des animaux contenant des

composés azotés directement dosables selon la méthode de Kjeldahl.

NOTE L'azote issu des nitrates et des nitrites n'est pas pris en compte par ce principe de dosage.

2 Principe

Minéralisation d'une prise d'essai par l'acide sulfurique concentré en présence de catalyseurs pour convertir

l'azote organique présent en sulfate d'ammonium. Addition d'hydroxyde de sodium en excès au minéralisat

refroidi pour libérer de l'ammoniac. Distillation de l'ammoniac libéré dans une solution d'acide borique en

excès puis titrage par une solution titrée d'acide sulfurique ou chlorhydrique. Calcul de la teneur en azote à

partir de la quantité d'ammoniac produite.
NOTE Dans la suite du texte, le terme azote désigne l'azote organique.
3 Réactifs

Utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique reconnue, sauf spécification contraire, et de l'eau

distillée ou déminéralisée ou de l'eau de pureté équivalente.

3.1 Acide sulfurique, pratiquement exempt de composés azotés et de masse volumique ρ = 1,83 g/ml à

1,84 g/ml.
3.2 Catalyseurs (voir 5.2.1).

3.3 Solution d'acide borique (10 g/l à 40 g/l suivant l'appareillage utilisé). Si un point final de titrage

colorimétrique est utilisé, la solution d'acide borique doit contenir un indicateur (le pH ou la couleur de cette

solution de mélange doit être ajusté avant son utilisation).

3.4 Solution titrée d'acide chlorhydrique (0,02 mol/l à 0,50 mol/l) ou d'acide sulfurique (0,01 mol/l à

0,25 mol/l). Le titre de la solution, c , doit être connu au minimum à 0,001 mol/l près.

© ISO 2009 – Tous droits réservés 1
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 1871:2009(F)
3.5 Indicateurs colorés, dont le domaine de virage est situé entre pH 4 et pH 5.

NOTE Divers indicateurs colorés sont disponibles. Le plus utilisé est une association de rouge de méthyle et de vert

de bromocrésol. Il existe des solutions d'acide borique prêtes à l'emploi contenant le mélange d'indicateurs.

3.6 Peroxyde d'hydrogène (H O ), de fraction massique de 30 % minimum.
2 2
3.7 Solution d'hydroxyde de sodium, de fraction massique de 30 % minimum.
3.8 Antimousses.
EXEMPLE Silicone, huile de paraffine.
3.9 Sulfate d'ammonium ou chlorure d'ammonium (pureté minimale 99,9 %).

Immédiatement avant l'emploi, sécher le sulfate d'ammonium ou le chlorure d'ammonium à 104 °C ± 4 °C

pendant au moins 2 h. Laisser refroidir à température ambiante dans un dessiccateur.

NOTE L'utilisation de solutions de concentration connue est possible.

3.10 Tryptophane ou acétanilide ou hydrochlorure de lysine (pureté minimale 99 % en fraction

massique).
Il convient de conserver ces réactifs à l'abri de l'humidité.
AVERTISSEMENT — Ne pas sécher ces réactifs dans une étuve avant l'emploi.

3.11 Saccharose, dont la teneur en azote est inférieure à 0,002 % (fraction massique).

AVERTISSEMENT — Ne pas sécher le saccharose dans une étuve avant l'emploi.
4 Appareillage et matériaux
Matériel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit.
4.1 Balance analytique, capable de peser à 0,001 g près.
4.2 Systèmes de minéralisation, de distillation à la vapeur et de titrage.

Ils permettent de réaliser les opérations décrites dans l'Article 5 et de satisfaire aux objectifs de performance

décrits en 5.5.3 et 5.5.4.

4.3 Régulateurs d'ébullition (si nécessaire), par exemple pierre ponce en grain, billes en verre, oxyde

d'aluminium (corindon) ou carbure de silicium.

4.4 Papier ou support de pesée, exempt de composés azotés et adaptés à la prise d'essai et à la nature

du produit.
2 © ISO 2009 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 1871:2009(F)
5 Mode opératoire

NOTE Suivant la nature de l'échantillon, une préparation préalable de la prise d'essai peut être nécessaire afin

d'obtenir un échantillon homogène (broyage, homogénéisation, etc.).
5.1 Prise d'essai

La prise d'essai, d'une quantité variable selon la teneur présumée en azote dosable selon la méthode de

Kjeldahl, doit être représentative de l'échantillon et renfermer entre 0,005 g et 0,2 g d'azote.

La prise d'essai peut être effectuée soit par pesée à l'aide de la balance analytique (4.1), pour obtenir une

masse, m, en grammes, soit à l'aide d'une pipette, pour obtenir un volume, V , en millilitres.

La prise d'essai peut être introduite directement dans le tube ou à l'aide d'un support (4.4).

La quantité de la prise d'essai pourra être ajustée en fonction de la composition du produit soumis à essai et

de la quantité d'acide sulfurique (voir 5.2.2).
5.2 Minéralisation
5.2.1 Catalyseurs

Il y a lieu de distinguer les substances destinées à élever la température d'ébullition du liquide pendant la

minéralisation et les catalyseurs proprement dits qui facilitent cette minéralisation. Les premières de ces

substances sont généralement du sulfate de potassium ou, éventuellement, du sulfate de sodium. Elles sont

introduites en quantité suffisante pour élever la température d'ébullition de l'acide à une valeur comprise entre

380 °C et 430 °C. Le catalyseur le plus fréquemment utilisé est le cuivre sous forme de sulfate de cuivre seul

ou associé à de l'oxyde de titane.
L'addition facultative de peroxyde d'hydrogène (3.6), à raison de 3 ml à 5 ml p
...