Textiles - Determination of antibacterial activity of textile products (ISO 20743:2021)

Textilien - Bestimmung der antibakteriellen Wirksamkeit von textilen Produkten (ISO 20743:2021)

Dieses Dokument legt quantitative Prüfverfahren zur Bestimmung der antibakteriellen Wirkung aller antibakteriell behandelten textilen Erzeugnisse, einschließlich Vliesstoffe, fest.
Dieses Dokument ist anwendbar auf alle textilen Erzeugnisse, einschließlich Stoffe, Wattierung, Garn und Materialien für Bekleidung, Bettwäsche, Heimtextilien sowie verschiedene Waren, ungeachtet des Typs des verwendeten antibakteriellen Wirkstoffs (organisch, anorganisch, natürlich oder künstlich) oder des Anwendungsverfahrens (eingebaut, Nachbehandlung oder Pfropfen).
Dieses Dokument behandelt drei Inokulationsverfahren zur Bestimmung der antibakteriellen Wirkung:
a) Absorptionsverfahren (ein Bewertungsverfahren, bei dem die bakterielle Prüfsuspension direkt auf Proben geimpft wird);
b) Übertragungsverfahren (ein Bewertungsverfahren, bei dem Prüfbakterien auf eine Agarplatte aufgebracht und auf Proben übertragen werden);
c) Stempelverfahren (ein Bewertungsverfahren, bei dem Prüfbakterien auf ein Filter aufgebracht und auf Proben gestempelt werden).
ANMERKUNG Auf der Grundlage der beabsichtigten Anwendung und der Umgebung, in der das textile Erzeugnis zu verwenden ist, und auch auf Grundlage der Oberflächeneigenschaften der Textilien, kann der Anwender das am besten geeignete Inokulationsverfahren auswählen.
Dieses Dokument legt auch das Kolonie Plattenzählverfahren und das Adenosintri-phosphat  (ATP) Lumineszenzverfahren zum Messen der Bakterienzahl fest.

Textiles - Détermination de l'activité antibactérienne des produits textiles (ISO 20743:2021)

Tekstilije - Ugotavljanje protibakterijske aktivnosti na tekstilnih izdelkih (ISO 20743:2021)

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23-Jun-2021
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23-Jun-2021

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SLOVENSKI STANDARD
SIST EN ISO 20743:2021
01-september-2021
Nadomešča:
SIST EN ISO 20743:2013

Tekstilije - Ugotavljanje protibakterijske aktivnosti na tekstilnih izdelkih (ISO

20743:2021)

Textiles - Determination of antibacterial activity of textile products (ISO 20743:2021)

Textilien - Bestimmung der antibakteriellen Wirksamkeit von textilen Produkten (ISO

20743:2021)

Textiles - Détermination de l'activité antibactérienne des produits textiles (ISO

20743:2021)
Ta slovenski standard je istoveten z: EN ISO 20743:2021
ICS:
07.100.99 Drugi standardi v zvezi z Other standards related to
mikrobiologijo microbiology
59.080.01 Tekstilije na splošno Textiles in general
SIST EN ISO 20743:2021 en,fr,de

2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

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SIST EN ISO 20743:2021
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SIST EN ISO 20743:2021
EN ISO 20743
EUROPEAN STANDARD
NORME EUROPÉENNE
June 2021
EUROPÄISCHE NORM
ICS 07.100.99; 59.080.01 Supersedes EN ISO 20743:2013
English Version
Textiles - Determination of antibacterial activity of textile
products (ISO 20743:2021)

Textiles - Détermination de l'activité antibactérienne Textilien - Bestimmung der antibakteriellen

des produits textiles (ISO 20743:2021) Wirksamkeit von textilen Produkten (ISO 20743:2021)

This European Standard was approved by CEN on 4 June 2021.

CEN members are bound to comply with the CEN/CENELEC Internal Regulations which stipulate the conditions for giving this

European Standard the status of a national standard without any alteration. Up-to-date lists and bibliographical references

concerning such national standards may be obtained on application to the CEN-CENELEC Management Centre or to any CEN

member.

This European Standard exists in three official versions (English, French, German). A version in any other language made by

translation under the responsibility of a CEN member into its own language and notified to the CEN-CENELEC Management

Centre has the same status as the official versions.

CEN members are the national standards bodies of Austria, Belgium, Bulgaria, Croatia, Cyprus, Czech Republic, Denmark, Estonia,

Finland, France, Germany, Greece, Hungary, Iceland, Ireland, Italy, Latvia, Lithuania, Luxembourg, Malta, Netherlands, Norway,

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© 2021 CEN All rights of exploitation in any form and by any means reserved Ref. No. EN ISO 20743:2021 E

worldwide for CEN national Members.
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SIST EN ISO 20743:2021
EN ISO 20743:2021 (E)
Contents Page

European foreword ....................................................................................................................................................... 3

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SIST EN ISO 20743:2021
EN ISO 20743:2021 (E)
European foreword

This document (EN ISO 20743:2021) has been prepared by Technical Committee "NA" in collaboration

with Technical Committee CEN/TC 248 “Textiles and textile products” the secretariat of which is held

by BSI.

This European Standard shall be given the status of a national standard, either by publication of an

identical text or by endorsement, at the latest by December 2021, and conflicting national standards

shall be withdrawn at the latest by December 2021.

Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of

patent rights. CEN shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.

This document supersedes EN ISO 20743:2013.

According to the CEN-CENELEC Internal Regulations, the national standards organizations of the

following countries are bound to implement this European Standard: Austria, Belgium, Bulgaria,

Croatia, Cyprus, Czech Republic, Denmark, Estonia, Finland, France, Germany, Greece, Hungary, Iceland,

Ireland, Italy, Latvia, Lithuania, Luxembourg, Malta, Netherlands, Norway, Poland, Portugal, Republic of

North Macedonia, Romania, Serbia, Slovakia, Slovenia, Spain, Sweden, Switzerland, Turkey and the

United Kingdom.
Endorsement notice

The text of ISO 20743:2021 has been approved by CEN as EN ISO 20743:2021 without any modification.

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SIST EN ISO 20743:2021
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SIST EN ISO 20743:2021
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 20743
Third edition
2021-06
Textiles — Determination of
antibacterial activity of textile
products
Textiles — Détermination de l'activité antibactérienne des produits
textiles
Reference number
ISO 20743:2021(E)
ISO 2021
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SIST EN ISO 20743:2021
ISO 20743:2021(E)
COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
© ISO 2021

All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may

be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting

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Published in Switzerland
ii © ISO 2021 – All rights reserved
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SIST EN ISO 20743:2021
ISO 20743:2021(E)
Contents Page

Foreword ..........................................................................................................................................................................................................................................v

Introduction ................................................................................................................................................................................................................................vi

1 Scope ................................................................................................................................................................................................................................. 1

2 Normative references ...................................................................................................................................................................................... 1

3 Terms and definitions ..................................................................................................................................................................................... 1

4 Safety precaution ................................................................................................................................................................................................. 2

5 Apparatus ..................................................................................................................................................................................................................... 2

6 Reagents and culture media ..................................................................................................................................................................... 4

6.1 Water ............................................................................................................................................................................................................... 4

6.2 Tryptone soya broth (TSB) ........................................................................................................................................................... 4

6.3 Tryptone soya agar (TSA) .............................................................................................................................................................. 4

6.4 Agar for transfer .................................................................................................................................................................................... 5

6.5 Nutrient broth (NB) ............................................................................................................................................................................ 5

6.6 Peptone salt solution ......................................................................................................................................................................... 5

6.7 Physiological saline ............................................................................................................................................................................. 5

6.8 Soybean-Casein Digest Broth with Lecithin & Polysorbate 80 (SCDLP) medium ......................... 5

6.9 Dilution buffer for shake-out bacterial suspension................................................................................................. 6

6.10 Neutralizing solution ......................................................................................................................................................................... 6

6.11 Enumeration agar (EA) .................................................................................................................................................................... 6

6.12 Agar for printing .................................................................................................................................................................................... 7

6.13 Cryoprotective solution for bacterial species ............................................................................................................... 7

6.14 Stock solution of ATP standard reagent ............................................................................................................................ 7

6.15 Buffer solution for ATP luminescent reagent ............................................................................................................... 7

6.16 ATP luminescent reagent ............................................................................................................................................................... 8

6.17 ATP extracting reagent ..................................................................................................................................................................... 8

6.18 ATP eliminating reagent ................................................................................................................................................................. 8

6.19 SCDLP or other medium for preparing ATP reference solution ................................................................... 9

6.20 Shake-out physiological saline .................................................................................................................................................. 9

7 Reference strains ................................................................................................................................................................................................. 9

7.1 Strains ............................................................................................................................................................................................................. 9

7.2 Restoration and storage of strains ......................................................................................................................................... 9

7.2.1 General...................................................................................................................................................................................... 9

7.2.2 Ceramic bead method .................................................................................................................................................. 9

7.2.3 Glycerol suspension method...............................................................................................................................10

8 Test procedures ..................................................................................................................................................................................................10

8.1 Absorption method (see Annex E) ......................................................................................................................................10

8.1.1 Incubation of test strain .........................................................................................................................................10

8.1.2 Preparation of test inoculum ..............................................................................................................................11

8.1.3 Preparation of test specimens ...........................................................................................................................11

8.1.4 Test operation..................................................................................................................................................................12

8.1.5 Test results .........................................................................................................................................................................13

8.2 Transfer method (see Annex E) .............................................................................................................................................15

8.2.1 Preparation of test inoculum ..............................................................................................................................15

8.2.2 Preparation of specimens .....................................................................................................................................15

8.2.3 Test operation..................................................................................................................................................................15

8.2.4 Test results .........................................................................................................................................................................16

8.3 Printing method (see Annex E) ..............................................................................................................................................18

8.3.1 Incubation of test strain .........................................................................................................................................18

8.3.2 Preparation of test inoculum ..............................................................................................................................18

8.3.3 Pretreatment of specimen ....................................................................................................................................18

8.3.4 Test operation..................................................................................................................................................................19

© ISO 2021 – All rights reserved iii
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SIST EN ISO 20743:2021
ISO 20743:2021(E)

8.3.5 Test results .........................................................................................................................................................................21

9 Judgement of antibacterial efficacy ...............................................................................................................................................22

10 Test report ................................................................................................................................................................................................................22

Annex A (normative) Strain numbers ..............................................................................................................................................................23

Annex B (normative) Shaking method ............................................................................................................................................................24

Annex C (normative) Quantitative measurement by plate count method ..................................................................25

Annex D (normative) Quantitative measurement by luminescence method ..........................................................26

Annex E (informative) Testing examples .......................................................................................................................................................28

Annex F (informative) Efficacy of antibacterial activity ................................................................................................................31

Bibliography .............................................................................................................................................................................................................................32

iv © ISO 2021 – All rights reserved
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SIST EN ISO 20743:2021
ISO 20743:2021(E)
Foreword

ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards

bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out

through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical

committee has been established has the right to be represented on that committee. International

organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.

ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of

electrotechnical standardization.

The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are

described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the

different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the

editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/ directives).

Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of

patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of

any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or

on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/ patents).

Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not

constitute an endorsement.

For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and

expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the

World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www .iso .org/

iso/ foreword .html.

This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 38, Textiles, in collaboration with the

European Committee for Standardization (CEN) Technical Committee CEN/TC 248, Textiles and textile

products, in accordance with the Agreement on technical cooperation between ISO and CEN (Vienna

Agreement).

This third edition cancels and replaces the second edition (ISO 20743:2013), which has been technically

revised.
The main changes compared to the previous edition are as follows:
— Clause 2 has been updated;
— some NOTEs have been changed to regular text;
— Annex F has been updated.

Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A

complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/ members .html.
© ISO 2021 – All rights reserved v
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SIST EN ISO 20743:2021
ISO 20743:2021(E)
Introduction

Specialty products of antibacterial-treated textiles have been introduced in the market and are

expanding year by year in various applications. These textiles meet the consumer's requirement to seek

prevention of, and protection from, the negative effects caused by bacteria, which in turn secures the

quality of life.

This established a substantial need for an International Standard which covers test methods to

determine the antibacterial activity for antibacterial textile products.

A qualitative test method for antibacterial activity was developed as ISO 20645. At the time, there

were no testing standards for the quantitative method which gives more objective information for the

antibacterial activity of the textile products.

Although there are 6 ways for the combination of inoculation methods and quantitative measurements

to execute this test, the choice of the ways depends on the user's availability and consensus between

the concerned parties.
vi © ISO 2021 – All rights reserved
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SIST EN ISO 20743:2021
INTERNATIONAL STANDARD ISO 20743:2021(E)
Textiles — Determination of antibacterial activity of textile
products
1 Scope

This document specifies quantitative test methods to determine the antibacterial activity of all

antibacterial textile products including nonwovens.

This document is applicable to all textile products, including cloth, wadding, thread and material for

clothing, bedclothes, home furnishings and miscellaneous goods, regardless of the type of antibacterial

agent used (organic, inorganic, natural or man-made) or the method of application (built-in, after-

treatment or grafting).

This document covers three inoculation methods for the determination of antibacterial activity:

a) absorption method (an evaluation method in which the test bacterial suspension is inoculated

directly onto specimens);

b) transfer method (an evaluation method in which test bacteria are placed on an agar plate and

transferred onto specimens);

c) printing method (an evaluation method in which test bacteria are placed on a filter and printed

onto specimens).

NOTE Based on the intended application and on the environment in which the textile product is to be used,

and also on the surface properties of the textile properties, the user can select the most suitable inoculation

method.

This document also specifies the colony plate count method and the adenosine triphosphate (ATP)

luminescence method for measuring the enumeration of bacteria.
2 Normative references

The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content

constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For

undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.

ISO 6330, Textiles — Domestic washing and drying procedures for textile testing
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.

ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:

— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at http:// www .electropedia .org/
3.1
control fabric

fabric used to validate the growth condition of test bacteria and validate the test

Note 1 to entry: The same fabric as the fabric to be tested but without antibacterial treatment or a 100 % cotton

fabric without fluorescent brighteners or other finish can be used.
© ISO 2021 – All rights reserved 1
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SIST EN ISO 20743:2021
ISO 20743:2021(E)
3.2
antibacterial agent

product designed to prevent or mitigate the growth of bacteria, to reduce the number of bacteria or to

kill bacteria
3.3
antibacterial finish

treatment designed to prevent or mitigate the growth of bacteria, to reduce the number of bacteria or

to kill bacteria
3.4
antibacterial activity

activity of an antibacterial finish (3.3) used to prevent or mitigate the growth of bacteria, to reduce the

number of bacteria or to kill bacteria
3.5
plate count method

method in which the number of bacteria present after incubation is calculated by counting the number

of colonies according to a ten-time dilution method
Note 1 to entry: The results are expressed in “CFU (Colony Forming Unit)”.
3.6
luminescence method
method in which the amount of ATP contained in bacterial cells is measured
Note 1 to entry: The results are expressed in “moles of ATP”.
3.7
neutralizer

chemical agents used to inactivate, neutralize or quench the antibacterial properties of antibacterial

agents (3.2)
4 Safety precaution
The test methods specified in this document require the use of bacteria.

These tests should be carried out by persons with training and experience in the use of microbiological

techniques.

Appropriate safety precautions should be observed with due consideration given to country-specific

regulations.
5 Apparatus
Usual laboratory apparatus and, in particular, the following.

5.1 Spectrophotometer, capable of measuring at a 620 nm to 660 nm wavelength, or McFarland’s

nephelometer.
5.2 Incubator, capable of maintaining a constant temperature of 37 °C ± 2 °C.

5.3 Water baths, one capable of maintaining a constant temperature of 46 °C ± 2 °C and another

capable of maintaining a temperature of 70 °C to 90 °C.
5.4 Mixer, producing a vortex shaking action.
2 © ISO 2021 – All rights reserved
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SIST EN ISO 20743:2021
ISO 20743:2021(E)

5.5 Stomacher, capable of speeds of 6 blows per second to 8 blows per second, with the corresponding

disposable containers.
5.6 Clean bench, for microbial test.
5.7 Washing machine, in accordance with the specifications of ISO 6330.

5.8 Humidity chamber, tropical chamber or other container capable of maintaining a high-humidity

more than 70 % RH atmospheric condition.
−12 −7

5.9 Luminescence photometer, capable of measuring ATP of 10 mol/l to 10 mol/l at 300 nm to

650 nm with a luminescence-measuring reagent.

5.10 Printing apparatus, capable of applying a 4 N load to a test specimen and rotating the specimen

180° in one direction for a period of 3,0 s.

5.11 Refrigerator, capable of maintaining a temperature of between 2 °C and 8 °C.

5.12 Freezers, one adjustable to a temperature below −70 °C and another to a temperature below

−20 °C.
5.13 Balance, with the resolution of 0,01 g or better and 0,1 mg or better

5.14 Filtering apparatus, consisting of an upper container equipped with a membrane filter and a

lower container equipped with a suction opening.

5.15 Pipette, having the most suitable volume for each use, with a tip made of glass or plastic, and with

a tolerance of 0,5 % or less.

5.16 Vials, 30 ml glass bottles, with screw openings, polytetrafluoroethylene or silicone packing and

caps made of polypropylene, polycarbonate or another suitable material.

5.17 Petri dishes, that have been sterilized, made of glass or plastic, in diameter sizes of 90 mm to

100 mm or 55 mm to 60 mm.
5.18 Glass rod, with a diameter of approximately 18 mm.
5.19 Anti-bumping granules (glass beads), with a diameter of 3 mm to 4 mm.
5.20 Erlenmeyer flask, of capacity 100 ml.

5.21 Cutting template, made of a sterilizable material (stainless steel or glass) one with a diameter of

38 mm ± 1 mm and the other with the diameter 60 mm ± 1 mm.

5.22 Disposable plastic bags, sterile bags suitable for containing food products, to be used for one of

the shaking methods of the specimens.
5.23 Tweezers, made of a material which can be sterilized.

5.24 Stainless-steel cylinder, with a mass of 200 g ± 10 g and a diameter of 35 mm ± 1 mm.

5.25 Metal wire basket, for autoclaving.
© ISO 2021 – All rights reserved 3
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SIST EN ISO 20743:2021
ISO 20743:2021(E)
5.26 Aluminium foil.
5.27 Reciprocal incubation shaker.
5.28 Autoclave, capable of sterilizing at 121 °C ± 2 °C and 103 kPa ± 5 kPa.
5.29 pH meter, with a glass electrode detector.
6 Reagents and culture media

Reagents used in tests shall be of analytical quality and/or suited for microbiological purposes.

Dehydrated products available on the commercial market are recommended for use in preparing the

culture media. The manufacturer’s instructions for the preparation of these products should be strictly

followed.
6.1 Water

Water used in tests shall be analytical-grade water for microbiological media preparation, which is

freshly distilled and/or ion-exchanged and/or ultra-filtered and/or filtered with reverse osmosis (RO).

It shall be free from all toxic or bacteria inhibitory substances.
6.2 Tryptone soya broth (TSB)
Tryptone, pancreatic digest of casein 17 g
Soya peptone, papain digest of soya 3 g
Sodium chloride (NaCl) 5 g
Glucose 2,5 g
Dipotassium hydrogen phosphate 2,5 g
Water 1 000 ml
Mix well and adjust pH, 7,2 ± 0,2
then sterilize by autoclave (5.28).
6.3 Tryptone soya agar (TSA)
Tryptone, pancreatic digest of casein 15 g
Soya peptone, papain digest of soya 5 g
Sodium chloride (NaCl) 5 g
Agar 15 g
Water 1 000 ml
Mix well and adjust pH, 7,2 ± 0,2
then sterilize by autoclave (5.28).
4 © ISO 2021 – All rights reserved
---------------------- Page: 16 ----------------------
SIST EN ISO 20743:2021
ISO 20743:2021(E)
6.4 Agar for transfer
Tryptone, pancreatic digest of
...

SLOVENSKI STANDARD
oSIST prEN ISO 20743:2020
01-maj-2020

Tekstilije - Ugotavljanje protibakterijske aktivnosti na tekstilnih izdelkih (ISO/DIS

20743:2020)

Textiles - Determination of antibacterial activity of textile products (ISO/DIS 20743:2020)

Textilien - Bestimmung der antibakteriellen Wirksamkeit von textilen Produkten (ISO/DIS

20743:2020)

Textiles - Détermination de l'activité antibactérienne des produits textiles (ISO/DIS

20743:2020)
Ta slovenski standard je istoveten z: prEN ISO 20743
ICS:
07.100.99 Drugi standardi v zvezi z Other standards related to
mikrobiologijo microbiology
59.080.01 Tekstilije na splošno Textiles in general
oSIST prEN ISO 20743:2020 de

2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

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oSIST prEN ISO 20743:2020
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oSIST prEN ISO 20743:2020
ENTWURF
EUROPÄISCHE NORM
prEN ISO 20743
EUROPEAN STANDARD
NORME EUROPÉENNE
März 2020
ICS 07.100.99; 59.080.01 Vorgesehen als Ersatz für EN ISO 20743:2013
Deutsche Fassung
Textilien - Bestimmung der antibakteriellen Wirksamkeit von
textilen Produkten (ISO/DIS 20743:2020)

Textiles - Determination of antibacterial activity of Textiles - Détermination de l'activité antibactérienne

textile products (ISO/DIS 20743:2020) des produits textiles (ISO/DIS 20743:2020)

Dieser Europäische Norm-Entwurf wird den CEN-Mitgliedern zur parallelen Umfrage vorgelegt. Er wurde vom Technischen

Komitee CEN/TC 248 erstellt.

Wenn aus diesem Norm-Entwurf eine Europäische Norm wird, sind die CEN-Mitglieder gehalten, die CEN-Geschäftsordnung zu

erfüllen, in der die Bedingungen festgelegt sind, unter denen dieser Europäischen Norm ohne jede Änderung der Status einer

nationalen Norm zu geben ist.

Dieser Europäische Norm-Entwurf wurde von CEN in drei offiziellen Fassungen (Deutsch, Englisch, Französisch) erstellt. Eine

Fassung in einer anderen Sprache, die von einem CEN-Mitglied in eigener Verantwortung durch Übersetzung in seine

Landessprache gemacht und dem CEN-CENELEC-Management-Zentrum mitgeteilt worden ist, hat den gleichen Status wie die

offiziellen Fassungen.

CEN-Mitglieder sind die nationalen Normungsinstitute von Belgien, Bulgarien, Dänemark, Deutschland, Estland, Finnland,

Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Kroatien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, den Niederlanden, Norwegen,

Österreich, Polen, Portugal, der Republik Nordmazedonien, Rumänien, Schweden, der Schweiz, Serbien, der Slowakei, Slowenien,

Spanien, der Tschechischen Republik, der Türkei, Ungarn, dem Vereinigten Königreich und Zypern.

Die Empfänger dieses Norm-Entwurfs werden gebeten, mit ihren Kommentaren jegliche relevante Patentrechte, die sie kennen,

mitzuteilen und unterstützende Dokumentationen zur Verfügung zu stellen.

Warnvermerk : Dieses Schriftstück hat noch nicht den Status einer Europäischen Norm. Es wird zur Prüfung und Stellungnahme

vorgelegt. Es kann sich noch ohne Ankündigung ändern und darf nicht als Europäischen Norm in Bezug genommen werden.

EUROPÄISCHES KOMITEE FÜR NORMUNG
EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION
COMITÉ EUROPÉEN DE NORMALISATION
CEN-CENELEC Management-Zentrum: Rue de la Science 23, B-1040 Brüssel

© 2020 CEN Alle Rechte der Verwertung, gleich in welcher Form und in welchem Ref. Nr. prEN ISO 20743:2020 D

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vorbehalten.
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Inhalt
Seite

Europäisches Vorwort .......................................................................................................................................................... 4

Vorwort ...................................................................................................................................................................................... 5

Einleitung .................................................................................................................................................................................. 6

1 Anwendungsbereich ............................................................................................................................................... 7

2 Normative Verweisungen ..................................................................................................................................... 7

3 Begriffe ........................................................................................................................................................................ 7

4 Sicherheitsvorschriften ......................................................................................................................................... 8

5 Geräte ........................................................................................................................................................................... 8

6 Reagenzien und Nährmedien ............................................................................................................................ 10

6.1 Wasser ....................................................................................................................................................................... 10

6.2 Trypton-Soja-Bouillon (TSB) ............................................................................................................................. 10

6.3 Trypton-Soja-Agar (TSA) .................................................................................................................................... 10

6.4 Agar zum Übertragen ........................................................................................................................................... 10

6.5 Nährbouillon (NB) ................................................................................................................................................. 11

6.6 Pepton-Salz-Lösung .............................................................................................................................................. 11

6.7 Physiologische Kochsalzlösung ........................................................................................................................ 11

6.8 SCDLP-Medium ....................................................................................................................................................... 11

6.9 Verdünnungspuffer zum Ausschütteln der suspendierten Bakterien ............................................... 12

6.10 Neutralisierungslösung ....................................................................................................................................... 12

6.11 Zählungsagar (ZA) ................................................................................................................................................. 12

6.12 Agar zum Stempeln ............................................................................................................................................... 13

6.13 Kryoschutzlösung für Bakterienarten ........................................................................................................... 13

6.14 Stammlösung des ATP-Standardreagenz ...................................................................................................... 13

6.15 Pufferlösung für ATP-Lumineszenzreagenz ................................................................................................ 14

6.16 ATP-Lumineszenzreagenz .................................................................................................................................. 14

6.17 ATP-Extraktionsreagenz ..................................................................................................................................... 14

6.18 ATP-Eliminierungswirkstoff.............................................................................................................................. 14

6.19 SCDLP oder ein anderes Medium zum Herstellen einer ATP-Referenzlösung ............................... 15

6.20 Physiologische Ausschüttel-Kochsalzlösung ............................................................................................... 15

7 Referenzstämme .................................................................................................................................................... 15

7.1 Stämme ...................................................................................................................................................................... 15

7.2 Lagerung von Stämmen ....................................................................................................................................... 15

7.2.1 Allgemeines ............................................................................................................................................................. 15

7.2.2 Keramikperlenverfahren ................................................................................................................................... 16

7.2.3 Glycerolsuspension-Verfahren ......................................................................................................................... 16

8 Prüfdurchführungen ............................................................................................................................................ 17

8.1 Absorptionsverfahren (siehe Anhang E) ...................................................................................................... 17

8.1.1 Bebrütung ................................................................................................................................................................. 17

8.1.2 Herstellung des Prüfinokulats .......................................................................................................................... 17

8.1.3 Herstellung der Messproben ............................................................................................................................. 18

8.1.4 Prüfdurchführung ................................................................................................................................................. 19

8.1.5 Prüfergebnisse........................................................................................................................................................ 20

8.2 Übertragungsverfahren (siehe Anhang E) ................................................................................................... 21

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8.2.1 Herstellung des Prüfinokulats .......................................................................................................................... 21

8.2.2 Herstellung der Proben ....................................................................................................................................... 22

8.2.3 Prüfdurchführung ................................................................................................................................................. 22

8.2.4 Prüfergebnisse ....................................................................................................................................................... 23

8.3 Stempelverfahren (siehe Anhang E) ............................................................................................................... 24

8.3.1 Bebrütung................................................................................................................................................................. 24

8.3.2 Herstellung des Prüfinokulats .......................................................................................................................... 25

8.3.3 Vorbehandlung der Probe .................................................................................................................................. 25

8.3.4 Prüfdurchführung ................................................................................................................................................. 26

8.3.5 Prüfergebnisse ....................................................................................................................................................... 28

9 Prüfbericht ............................................................................................................................................................... 29

Anhang A (normativ) Stammnummern ....................................................................................................................... 30

A.1 Allgemeines ............................................................................................................................................................. 30

A.2 Liste der Bakterien ............................................................................................................................................... 30

Anhang B (normativ) Schüttelverfahren .................................................................................................................... 31

B.1 Allgemeines ............................................................................................................................................................. 31

B.2 Schütteln mit dem Vortex-Mischer ................................................................................................................. 31

B.3 Schütteln von Hand ............................................................................................................................................... 31

B.4 Schütteln mit dem Laborhomogenisator ...................................................................................................... 31

Anhang C (normativ) Quantitatives Messverfahren mithilfe des Plattenzählverfahrens ........................ 32

C.1 Allgemeines ............................................................................................................................................................. 32

C.2 Prüfdurchführung ................................................................................................................................................. 32

Anhang D (normativ) Quantitatives Messverfahren mithilfe des Lumineszenzverfahrens .................... 33

D.1 Allgemeines ............................................................................................................................................................. 33

D.2 Prüfdurchführung ................................................................................................................................................. 33

D.2.1 Kalibrierkurvengleichung .................................................................................................................................. 33

D.2.2 ATP-Konzentration der Bakteriensuspension ........................................................................................... 34

Anhang E (informativ) Prüfbeispiele ........................................................................................................................... 35

E.1 Absorptionsverfahren ......................................................................................................................................... 35

E.2 Übertragungsverfahren ...................................................................................................................................... 36

E.3 Stempelverfahren .................................................................................................................................................. 37

Anhang F (informativ) Effektivität der antibakteriellen Wirkung.................................................................... 39

Literaturhinweise ................................................................................................................................................................. 40

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Europäisches Vorwort

Dieses Dokument (prEN ISO 20743:2020) wurde vom Technischen Komitee ISO/TC 38 „Textiles“ in

Zusammenarbeit mit dem Technischen Komitee CEN/TC 248 „Textilien und textile Erzeugnisse“ erarbeitet,

dessen Sekretariat von BSI gehalten wird.
Dieses Dokument ist derzeit zur parallelen Umfrage vorgelegt.
Dieses Dokument wird EN ISO 20743:2013 ersetzen.
Anerkennungsnotiz

Der Text von ISO/DIS 20743:2020 wurde von CEN als prEN ISO 20743:2020 ohne irgendeine Abänderung

genehmigt.
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Vorwort

ISO (die Internationale Organisation für Normung) ist eine weltweite Vereinigung nationaler

Normungsorganisationen (ISO-Mitgliedsorganisationen). Die Erstellung von Internationalen Normen wird

üblicherweise von Technischen Komitees von ISO durchgeführt. Jede Mitgliedsorganisation, die Interesse an

einem Thema hat, für welches ein Technisches Komitee gegründet wurde, hat das Recht, in diesem Komitee

vertreten zu sein. Internationale staatliche und nichtstaatliche Organisationen, die in engem Kontakt mit ISO

stehen, nehmen ebenfalls an der Arbeit teil. ISO arbeitet bei allen elektrotechnischen Themen eng mit der

Internationalen Elektrotechnischen Kommission (IEC) zusammen.

Die Verfahren, die bei der Entwicklung dieses Dokuments angewendet wurden und die für die weitere Pflege

vorgesehen sind, werden in den ISO/IEC-Direktiven, Teil 1 beschrieben. Es sollten insbesondere die

unterschiedlichen Annahmekriterien für die verschiedenen ISO-Dokumentenarten beachtet werden. Dieses

Dokument wurde in Übereinstimmung mit den Gestaltungsregeln der ISO/IEC-Direktiven, Teil 2 erarbeitet

(siehe www.iso.org/directives).

Es wird auf die Möglichkeit hingewiesen, dass einige Elemente dieses Dokuments Patentrechte berühren

können. ISO ist nicht dafür verantwortlich, einige oder alle diesbezüglichen Patentrechte zu identifizieren.

Details zu allen während der Entwicklung des Dokuments identifizierten Patentrechten finden sich in der

Einleitung und/oder in der ISO-Liste der erhaltenen Patenterklärungen (siehe www.iso.org/patents).

Jeder in diesem Dokument verwendete Handelsname dient nur zur Unterrichtung der Anwender und

bedeutet keine Anerkennung.
Das für dieses Dokument verantwortliche Komitee ist ISO/TC 38, Textiles.

Diese zweite Ausgabe ersetzt die erste Ausgabe (ISO 20743:2007), die technisch überarbeitet wurde.

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Einleitung

Spezialerzeugnisse aus antibakteriell behandelten Textilien wurden auf dem Markt eingeführt und

verbreiten sich Jahr für Jahr in verschiedenen Anwendungsbereichen. Diese Textilien erfüllen in gewisser

Hinsicht die Anforderungen des Verbrauchers, Prävention und Schutz vor nachteiligen Einflüssen durch

Bakterien zu bieten und die Lebensqualität zu sichern.

Aus dieser Situation heraus entwickelten sich Prüfverfahren zur Bestimmung der antibakteriellen Wirkung

von antibakteriell ausgerüsteten textilen Erzeugnissen, um den grundlegenden Bedarf an einer

Internationalen Norm zu decken.

Das Prüfverfahren für die antibakterielle Wirkung wurde in Form von ISO 20645 erarbeitet, die ein

qualitatives Prüfverfahren darstellte. Es gibt keine Prüfnormen für das quantitative Verfahren, das

objektivere Informationen über die antibakterielle Wirkung von textilen Erzeugnissen liefert.

Es gibt verschiedene praktische Prüfverfahren zur Bestimmung der quantitativen antibakteriellen Wirkung,

die in der vorliegenden Internationalen Norm festgelegt sind. Die Prüfverfahren bestehen aus zwei

Hauptschritten, d. h. Inokulation von Bakterien und quantitative Messung der Bakterien.

Die Inokulationsverfahren der Bakterien, die in der vorliegenden Internationalen Norm festgelegt sind, sind

das Absorptionsverfahren, das Übertragungsverfahren und das Stempelverfahren.

Die quantitativen Messverfahren der Bakterien, die in der vorliegenden Internationalen Norm festgelegt

sind, sind das Kolonie-Plattenzählverfahren und die ATP-Lumineszenzverfahren (ATP = Adenosin-

triphosphat).

Auch wenn sich daraus sechs verschiedene Möglichkeiten für die Kombination von Inokulationsverfahren

und quantitativen Messverfahren für die Durchführung dieser Prüfung ergeben, hängt die Auswahl von der

Verfügbarkeit und dem Übereinkommen zwischen den betroffenen Parteien ab.
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1 Anwendungsbereich

Die vorliegende Internationale Norm legt quantitative Prüfverfahren zur Bestimmung der antibakteriellen

Wirkung aller antibakteriell behandelten textilen Erzeugnisse, einschließlich Vliesstoffe, fest.

Diese Internationale Norm ist anzuwenden auf alle textilen Erzeugnisse, einschließlich Stoffe, Wattierung,

Garn und Materialien für Bekleidung, Bettwäsche, Heimtextilien sowie verschiedene Waren, ungeachtet des

Typs des verwendeten antibakteriellen Wirkstoffs (organisch, anorganisch, natürlich oder künstlich) oder

des Anwendungsverfahrens (eingebaut, Nachbehandlung oder Pfropfen).

Auf der Grundlage der beabsichtigten Anwendung und der Umgebung, in der das textile Erzeugnis zu

verwenden ist, und auf Grundlage der Oberflächeneigenschaften der textilen Eigenschaften kann der

Anwender aus den folgenden drei Inokulationsverfahren zur Bestimmung der antibakteriellen Wirkung das

am besten geeignete auswählen:

a) Absorptionsverfahren (ein Bewertungsverfahren, bei dem die bakterielle Prüfsuspension direkt auf

Proben geimpft wird);

b) Übertragungsverfahren (ein Bewertungsverfahren, bei dem Prüfbakterien auf eine Agarplatte

aufgebracht und auf Proben übertragen werden);

c) Stempelverfahren (ein Bewertungsverfahren, bei dem Prüfbakterien auf einen Filter aufgebracht und

auf Proben gestempelt werden).

Das Kolonie-Plattenzählverfahren und das ATP-Lumineszenzverfahren (ATP = Adenosintriphosphat)

werden auch zum Messen der Bakterienzahl festgelegt.
2 Normative Verweisungen

Die folgenden Dokumente werden im Text in solcher Weise in Bezug genommen, dass einige Teile davon

oder ihr gesamter Inhalt Anforderungen des vorliegenden Dokuments darstellen. Bei datierten

Verweisungen gilt nur die in Bezug genommene Ausgabe. Bei undatierten Verweisungen gilt die letzte

Ausgabe des in Bezug genommenen Dokuments (einschließlich aller Änderungen).
ISO 6330, Textiles — Domestic washing and drying procedures for textile testing
3 Begriffe
Für die Anwendung dieses Dokuments gelten die folgenden Begriffe.
3.1
Kontrollgewebe

Gewebe, das zur Validierung der Wachstumsbedingungen der Prüfbakterien und zur Validierung der

Prüfung verwendet wird

Anmerkung 1 zum Begriff: Dasselbe Gewebe wie das zu prüfende Flächengebilde, jedoch ohne antibakterielle

Behandlung oder ein 100%iges Baumwollgewebe ohne fluoreszierende Aufheller oder andere Behandlung, kann

verwendet werden.
3.2
antibakterieller Wirkstoff

Erzeugnis zum Verhindern oder Abschwächen des Bakterienwachstums, zum Verringern der Bakterienzahl

oder zum Abtöten von Bakterien
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3.3
antibakterielle Behandlung

Behandlung zum Verhindern oder Abschwächen des Bakterienwachstums, zum Verringern der

Bakterienzahl oder zum Abtöten von Bakterien
3.4
antibakterielle Wirkung

Wirkung einer antibakteriellen Behandlung, die angewendet wird, um das Bakterienwachstum zu

verhindern oder abzuschwächen, die Bakterienzahl zu verringern oder um Bakterien abzutöten

3.5
Plattenzählverfahren

Verfahren, bei dem die nach der Bebrütung vorhandene Bakterienzahl durch Zählen der Kolonien nach

einem Verfahren der zehnfachen Verdünnung berechnet wird

Anmerkung 1 zum Begriff: Die Ergebnisse werden in „KBE“ (koloniebildende Einheit) angegeben.

3.6
Lumineszenzverfahren
Verfahren, bei dem die in Bakterienzellen enthaltene ATP-Menge gemessen wird
Anmerkung 1 zum Begriff: Die Ergebnisse werden in „Mol ATP“ angegeben.
3.7
Neutralisationsmittel

chemisch wirksame Mittel zum Inaktivieren, Neutralisieren oder Löschen der antibakteriellen Eigenschaften

antibakterieller Wirkstoffe
4 Sicherheitsvorschriften

Die in dieser Internationalen Norm festgelegten Prüfverfahren erfordern die Verwendung von Bakterien.

Diese Prüfungen sollten durch geschultes und mit den mikrobiologischen Techniken vertrautes Personal

durchgeführt werden.

Entsprechende Sicherheitsvorschriften sollten unter strikter Berücksichtigung der landesspezifischen

Rechtsvorschriften eingehalten werden.
5 Geräte
Übliche Laborgeräte und insbesondere die Folgenden:

5.1 Spektrophotometer, zum Messen im Wellenlängenbereich von 620 nm bis 660 nm, oder McFarland-

Nephelometer.

5.2 Brutschrank, der eine konstante Temperatur von (37 ± 2) °C aufrechterhalten kann.

5.3 Wasserbäder, eines, das eine konstante Temperatur von (46 ± 2) °C aufrechterhalten kann, und ein

anderes, das eine Temperatur zwischen 70 °C bis 90 °C aufrechterhalten kann.
5.4 Mischer, der eine Vortex-Schüttelwirkung erzeugt.

5.5 Laborhomogenisator (Mastikator), geeignet für Geschwindigkeiten von 6 bis 8 Schlägen/s mit

entsprechenden Einmalbehältern.
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5.6 Sicherheitswerkbank, für mikrobielle Prüfung.
5.7 Waschmaschine, in Übereinstimmung mit den Festlegungen nach ISO 6330.

5.8 Feuchtekammer, Tropenkammer oder ein anderer Behälter, in dem eine hohe atmosphärische

Luftfeuchte von über 70 % RH aufrechterhalten werden kann.
−12 −7

5.9 Lumineszenzphotometer, geeignet zum Messen von ATP von 10 mol/l bis 10 mol/l bei 300 nm

bis 650 nm mit einem die Lumineszenz messenden Reagenz.

5.10 Stempelvorrichtung, mit der eine Last von 4 N auf eine Messprobe aufgebracht werden kann und die

dabei die Probe für 3,0 s in einer Richtung um 180° dreht.

5.11 Kühlschrank, der eine Temperatur zwischen 2 °C und 8 °C aufrechterhalten kann.

5.12 Gefrierschränke, einer, der auf eine Temperatur unter −70 °C eingestellt werden kann und ein

anderer, der auf eine Temperatur unter −20 °C eingestellt werden kann.
5.13 Waage, die auf 0,01 g abgelesen werden kann.

5.14 Filtervorrichtung, die aus einem oberen Behälter mit einem Membranfilter und einem unteren

Behälter mit einer Ansaugöffnung besteht.

5.15 Pipette, mit einem für die festgelegte Verwendung am besten geeigneten Volumen, mit einer Spitze

aus Glas oder Kunststoff und einer Toleranz von 0,5 % oder weniger.

5.16 Probenfläschchen, 30-ml-Glasflaschen mit Schrauböffnungen, Polytetrafluorethylen- oder

Silikondichtung und Deckeln aus Polypropylen, Polycarbonat oder einem anderen geeigneten Material.

5.17 Petrischalen, die sterilisiert wurden, aus Glas oder Kunststoff, mit Durchmessern von 90 mm bis

100 mm oder 55 mm bis 60 mm.
5.18 Glasstab, mit einem Durchmesser von etwa 18 mm.
5.19 Prallkügelchen (Glasperlen), mit einem Durchmesser von 3 mm bis 4 mm.
5.20 Erlenmeyerkolben, mit einem Nenninhalt von 100 ml.

5.21 Schneidvorlage, aus einem sterilisierbaren Material (nichtrostender Stahl oder Glas) mit einem

Durchmesser von (3,8 ± 0,1) cm.

5.22 Einmal-Kunststoffbeutel, sterile Beutel, die für Lebensmittel geeignet sind, zur Verwendung für die

Proben bei einem der Schüttelverfahren.
5.23 Pinzetten, aus einem Material hergestellt, das sterilisiert werden kann.

5.24 Zylinder aus nichtrostendem Stahl, mit einer Masse von (200 ± 10) g und einem Durchmesser von

(3,5 ± 0,1) cm.
5.25 Metalldrahtkorb, zum Autoklavieren.
5.26 Aluminiumfolie.
5.27 Inkubationsschütteltisch.

5.28 Autoklav, geeignet zum Sterilisieren bei (121 ± 2) °C und bei (103 ± 5) kPa.

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6 Reagenzien und Nährmedien

Die in den Prüfungen verwendeten Reagenzien müssen analysenrein und/oder für mikrobiologische Zwecke

geeignet sein.

Kommerziell verfügbare dehydratisierte Erzeugnisse werden für die Herstellung der Nährmedien

empfohlen. Es sollten die Herstelleranweisungen zur Zubereitung dieser Erzeugnisse strikt eingehalten

werden.
6.1 Wasser

Das bei den Prüfungen verwendete Wasser muss analysenreines Wasser zur Herstellung mikrobiologischer

Medien, frisch destilliert und/oder durch Ionenaustausch und/oder Ultrafiltrierung und/oder durch

Umkehrosmose (RO, en: reverse osmosis) aufbereitet sein. Es muss frei von allen toxischen oder

bakterienhemmenden Substanzen sein.
6.2 Trypton-Soja-Bouillon (TSB)
Trypton, Pankreasaufschluss von Casein 17 g
Soja-Pepton, Papainaufschluss von Soja 3 g
Natriumchlorid (NaCl) 5 g
Glucose 2,5 g
Dikaliumhydrogenphosphat 2,5 g
Wasser 1 000 ml
Sorgfältiges Vermischen und Einstellen des pH-Werts, 7,2 ± 0,2
anschließende Sterilisation im Autoklaven (5.28).
6.3 Trypton-Soja-Agar (TSA)
Trypton, Pankreasaufschluss von Casein 15 g
Soja-Pepton, Papainaufschluss von Soja 5 g
Natriumchlorid (NaCl) 5 g
Agar 15 g
Wasser 1 000 ml
Sorgfältiges Vermischen und Einstellen des pH-Werts, 7,2 ± 0,2
anschließende Sterilisation im Autoklaven (5.28).
6.4 Agar zum Übertragen
Trypton, Pankreasaufschluss von Casein 0,75 g
Soja-Pepton, Papainaufschluss von Soja 0,25 g
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Natriumchlorid (NaCl) 5 g
Agar 15 g
Wasser 1 000 ml
Sorgfältiges Vermischen und Einstellen des pH-Werts, 7,2 ± 0,2
anschließende Sterilisation im A
...

Questions, Comments and Discussion

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