ISO 2450:1985
(Main)Cream — Determination of fat content — Gravimetric method (Reference method)
Cream — Determination of fat content — Gravimetric method (Reference method)
Crème — Détermination de la teneur en matière grasse — Méthode gravimétrique (Méthode de référence)
General Information
Relations
Buy Standard
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL STANDARD ISO 2450-1972 (EVERRATUM
Published 1980-09-01
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATIONWlE~YHAPOAHAR OPI-AHM3AUMR fl0 CTAHL1APTM3ALWWORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Cream - Determination of fat content (reference method)
ERRATUM
Inside front cover
Delete the last line of the note, and Substitute :
“Methods of Analysis, 12th Edition, No. 16.138).”
---------------------- Page: 1 ----------------------
This page intentionally left blank
---------------------- Page: 2 ----------------------
International Standard
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION.MEX~YHAPOJJHAR OPl-AHM3AlJMR fl0 CTAHfiAPTti3AWM~ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Cream - Determination of fat content - Gravimetric
method (Reference method)
- Determination de Ia teneur en matikre grasse - NIethode gravimhtrigue (M&hode de reference)
Cr&me
Second edition - 1985-12-15
UDC 637.148 : 543.85
Ref. No. ISO 24504985 (EI
Descriptors : agricultural products, dairy products, creams, Chemical analysis, determination of content, fats, apparatus, gravimetric analysis.
Price based on 8 pages
---------------------- Page: 3 ----------------------
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national Standards bodies (ISO member bodies). The work of preparing International
Standards is normally carried out through ISO technical committees. Esch member
body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the ISO Council. They are approved in accordance with ISO procedures requiring at
least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard ISO 2450 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34,
Agricultural food produc ts.
This second editio n ca ncels and replaces the first (ISO 2450- 1972) (sec the In-
troduction).
NOTE - The method specified in this International Standard has been developed jointly with the
International Dairy Federation (IDF) and the Association of Official Analytical Chemists (AOAC)
and will also be published by these Organkations.
Users should note that all International Standards undergo revision from time to time
and that any reference made herein to any other International Standard implies its
latest edition, unless otherwise stated.
0 International Organkation for Standardkation, 1985 0
Printed in Switzerland
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 2450-1985 (E)
INTERNATIONAL STANDARD
Determination of fat content - Gravimetric
Cream -
method (Reference method)
0 lntroduction 3 Definition
This second edition of ISO 2450 has been prepared within the fat content of cream: All the substances determined by the
method specified in this International Standard.
framework of producing a series of methods, which are har-
monized to the greatest possible extent, for the gravimetric
lt is expressed as a percentage by mass.
determination of the fat content of milk, milk products and
milk-based foods.
This revision is based on the revised Röse-Gottlieb method‘ for
4 Principle
milk specified in ISO 12111), comprising a number of modifi-
cations to improve the precision of that method.
Extraction of an ammoniacal ethanolic Solution of a test Portion
with diethyl ether and light Petroleum, removal of the solvents
A more complete explanation of these modifications to the by distillation or evaporation, and determination of the mass of
basic Röse-Gottlieb procedure is given in the introduction to
the substances extracted which are soluble in light petroleum.
ISO 1211. (This is usually known as the Röse-Gottlieb principle.)
The addition of 5 ml of ethanol before the second extraction
(see 8.5.10), in line with other revised methods, has made the
5 Reagents
dilution with 0,5 % (mlm) salt Solution as prescribed in the first
edition superfluous and has therefore been replaced by a
All reagents shall be of recognized analytical grade and shall
dilution with water (see 8.5.1). leave no appreciable residue when the determination is carried
out by the method specified. The water used shall be distilled
water or water of at least equivalent purity.
To test the quality of the reagents, carry out a blank test as
1 Scope and field of application
specified in 8.3. Use an empty fat-collecting vessel, prepared as
specified in 8.4, for mass control purposes. The reagents shall
This International Standard specifies the reference method for
leave no residue greater than 0,5 mg (see 10.1).
the determination of the fat content of raw, processed and
cultured cream in which no appreciable splitting of fat has oc-
If the residue of the complete reagent blank test is greater than
curred.
0,5 mg, determine the residue of the solvents separately by
distilling 100 ml of the diethyl ether and light Petroleum respec-
NOTE - The method is not suitable for sour creams with starch or
tively. Use an empty control vessel to obtain the real mass of
other thickening agents. In this case, and when splitting of fat occurs,
recourse has to be made to a method utilizing the Weibull-Berntrop residue, which shall not exceed 0,5 mg.
principle as in ISO 8262/3*).
Replace unsatisfactory reagents or solvents, or redistil
solvents.
2 References
5.1 Ammonia solution, containing approximately 25 %
(mhd of NH3, ~~~ = 910 g/l.
ISO 707, Milk and milk products - Methods of sampling.
NOTE - If ammonia Solution of this concentration is not available, a
ISO 3889, Milk and milk products - Determination of fat con-
more concentrated Solution of known concentration may be used (sec
8.5.2).
tent - Mojonnier- type fa t ex trat tion flasks.
1) ISO 1211, /Vi& - Determination of fat content - Gra vime tric me thod (Reference me thodl.
2) ISO 826213, Mifk products and mifk-based foods - Determination o f fa t con tent b y the Weibul- Bern trop gravimetric method (Reference
Part 3: Special cases. (At present at the Stage of draft.)
methodl -
1
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 24504985 (E)
5.2 Ethanol, or ethanol denatured by methanol, at least 6.5 Water-bath, capable of being maintained at 40 to 50 OC.
94 % WV).
6.6 Mojonnier-type fat-extraction flasks, as specified in
(See 10.5.)
ISO 3889.
5.3 Congo-red Solution.
- lt is also possible to use fat-extraction tubes (or flasks)
NOTE
with Siphon or wash-bottle fittings, but the procedure is then dif-
Dissolve 1 g of Congo-red in water and dilute to 100 ml.
ferent and is specified in the annex. The long inner limb of the fitting
may have a hooked end if desired.
NOTE - The use of this Solution, which allows the interface between
the solvent and aqueous layers to be seen more clearly, is optional (sec
The flasks (or tubes, see the note) shall be provided with good
8.5.3). Other aqueous colour solutions may be used provided that they
quality bark corks or Stoppers of other material (for example
do not affect the result of the determination.
Silicone rubber or PTFEl)) unaffected by the reagents used.
Bark corks shall be extracted with the diethyl ether (5.41, kept in
5.4 Diethyl ether, free from Peroxides (see 10.3) and con-
water at 60 OC or more for at least 15 min, and shall then be
taining no or not more than 2 mg/kg of antioxidants and com- allowed to cool in the water so that they are saturated when
plying with the requirements for the blank test (see clause 5,
used.
and also 10.1 and 10.4).
5.6 Mixed solvent, prepared shortly before use by mixing
6.8 Wash bottle, suitable for use with the mixed solvent
equal volumes of the diethyl ether (5.4) and the light Petroleum
(5.6). A plastic wash bottle shall not be used.
(5.5).
6.9 Fat-collecting vessels, for example boiling flasks (flat-
6 Apparatus bottomed) of capacity 125 to 250 ml, conical beakers of ca-
pacity 250 ml, or metal dishes. If metal dishes are used, they
WARNING - Since the determination involves theuse of
shall preferably be of stainless steel, shall be flat-bottomed,
volatile flammable solvents, electrical apparatus preferably with a spout, and shall have a diameter of 80 to
employed may be required to comply with legislation 100 mm and a height of approximately 50 mm.
relating to the hazards in using such solvents.
6.10 Boiling aids, fat-free, of non-porous porcelain or
Usual laboratory equipment, and in particular
Silicon carbide, or glass beads (optional in the case of metal
dishes).
6.1 Analytical balance.
6.11 Measuring cylinders, of capacities 5 and 25 ml.
6.2 Centrifuge, in which the fat-extraction flasks or tubes
(6.6) tan be spun at a rotational frequency of 500 to 600 min -l
to produce a gravitational field of 80g to 9Og at the outer end of
6.12 Pipettes, graduated, of capacity 10 ml.
the flasks or tubes.
The use of the centrifuge is optional but recommended (see
NOTE -
6.13 Tongs, made of metal, suitable for holding flasks,
8.5.6).
beakers or dishes.
6.3 Distillation or evaporation apparatus, to enable the
solvents and ethanol to be distilled from fat-collecting flasks or
7 Sampling
to be evaporated from beakers and dishes (see 8.5.9 and
8.5.13) at a temperature not exceeding 100 OC.
See also ISO 707.
6.4 Drying oven, electrically heated, with Ventilation Port(s)
All laboratory samples shall be kept at a temperature of 0 to
fully open, capable of being maintained at 102 k 2 OC
4 OC from the time of sampling to the time of commencing the
throughout the working space. The oven shall be fitted with a
procedure.
suitable thermometer.
Polytetrafluoroethylene
1)
2
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 24504985 (El
8.5 Determination
8 Procedure
NOTE - The alternative procedure using fat-extraction tubes with
8.53 Add water at about 50 OC to the test Portion so as to
Siphon or wash-bottle fittings (sec the note to 6.6) is described in the
obtain a total volume of 10 to 11 ml and to wash the test por-
annex.
tion into the small bulb of the flask, and mix thoroughly in the
small bulb. Cool in running water.
81 . Preparation of the test Sample
Adjust the temperature of the laboratory Sample (clause 7) to
8.5.2 Add 2 ml of the ammonia Solution (5.1), or an
35 to 40 OC, by means of the water-bath (6.5) if necessary. Mix equivalent volume of a more concentrated ammonia Solution
the Sample thoroughly, but gently, by repeatedly inverting the
(see the note to 5.1). Mix thoroughly with the diluted test por-
Sample bottle, or, if the cream is very thick, by stirring with a tion in the small bulb of the flask. After the addition of the am-
spatula, without causing frothing or churning, and cool quickly
monia, continue the determination without delay.
to approximately 20 OC.
NOTES 8.5.3 Add 10 ml of the ethanol (5.2) and mix gently but
thoroughly by allowing the contents of the flask to flow
should thoroughly
1 Sour cream should not be warmed but be
backward and forward between the two bulbs; avoid bringing
stirred.
the liquid too near to the neck of the flask. If desired, add two
2 Churned cream should not be cooled as it has to be weighed at 30
drops of the Congo-red Solution (5.3).
to
40 OC.
3 A reliable value for the fat content cannot be expected :
8.5.4 Add 25 ml of the diethyl ether (5.4), close the flask with
a cork (see 6.6) saturated with water or with a stopper wetted
if a distinct smell of free fatty acids is perceptible ;
a)
with water, and Shake the flask vigourously, but not excess-
b) if during, or after, preparation of the Sample, white pat-ticles
ively (in Order to avoid the formation of persistent emulsions),
are visible on the Walls of the Sample bottle or fat droplets float on
for 1 min with the flask in a horizontal Position and the small
the surface of the Sample.
bulb extending upwards, periodically allowing the liquid in the
large bulb to run into the small bulb. If necessary, cool the flask
8.2 Test Portion
in running water, then carefully remove the cork or stopper and
rinse it and the neck of the flask with a Iittle of the mixed sol-
Mix the test Sample (8.1) by gently stirring or rotating and
vent (5.6) using the wash bottle (6.8) so that the rinsings run in-
inverting the bottle and immediately weigh, to the nearest
to the flask or the prepared fat-collecting vessel (see 8.4).
1 mg, directly or by differente, into a fat-extraction flask (6.6),
a test Portion yielding 0,3 to 0,6 g of extracted fat (depending
8.5.5 Add 25 ml of the light Petroleum (5.5), close the flask
on the fat content of the cream).
with the rewetted cork or rewetted stopper (by dipping in
water), and Shake the flask gently for 30 s as described in 8.5.4.
possi ble
The test Portion shall be delivered as completely as
into the lower (small) bulb of the extraction flask.
Centrifuge the closed flask for 1 to 5 min at a rotational
8.5.6
frequency of 500 to 600 min - 1 (see 6.2). If a centrifuge is not
8.3 Blank test
available, allow the closed flask to stand in the rack (6.7) for at
least 30 min until the supernatant layer is clear and distinctly
Carry out a blank test simultaneously with the determination,
using the same procedure and same reagents, but replacing the separated from the aqueous layer. If necessary, cool the flask in
running water.
dispersed test Portion as in 8.5.1 by 10 ml of water (see 10.2).
8.5.7 Carefully remove the cork or stopper and rinse it and the
8.4 Preparation of fat-collecting vessel
inside of the neck of the flask with a little of the mixed solvent
so that the rinsings run into the flask or the fat-collecting
Dry a vessel (6.9) with a few boiling aids (6.10) in the oven (6.4)
vessel.
for 1 h (see note 1).
If the interface is below the bottom of the stem of the flask,
Allow the vessel to cool (protected from dust) to the
raise it slightly above this level by gently adding water down the
temperature of the weighing room (glass vessel for at least 1 h,
side of the flask (see figure 1) to facilitate the decantation of
metal dish for at least 0,5 h) (see note 2).
solvent.
Using tongs (6.13) (to avoid, in particular, temperature varia-
NOTE - In figures 1 and 2, one of the three types of flasks as specified
tions), place the vessel on the balance and weigh to the nearest
in ISO 3889 has been Chosen, but this does not imply any preference
0,l mg.
over the other types.
NOTES
1 Boiling aids are desirable to promote gentle boiling during the 8.5.8 Holding the extraction flask by the small bulb, carefully
subsequent removal of solvent,. especially in the case of glass vessels ; decant as much as possible of the supernatant layer into the
their use is optional in the case of metal dishes.
prepared fat-collecting vessel (see 8.4) containing a few boiling
aids (6.10) in the case of flasks (optional with metal dishes),
insuf-
2 The vessel should not be placed in a desiccator, to avoid
avoiding decantation of any of the aqueous layer (see figure 2).
or unduly long cooling times.
ficient cooling
3
---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 24504985 (E)
second and
At second and
d extraction
third extraction
IntPrfaPP - ti
dqueous layer
Figure 1 - Before decantation Figure 2 - After decantation
(8.5.7, 8.5.11, 8.5.12) (8.5.8, 8.5.11, 8.5.12)
8.5.9 Rinse the outside of the neck of the extraction flask with
8.5.14 Heat the fat-collecting vessel (flask placed on .its side
a little of the mixed solvent, collecting the rinsings in the fat-
to allow solvent vapour to escape) for 1 h in the drying oven
collecting vessel and taking care that the mixed solvent does
(6.4), controlled at 102 & 2 OC. Remove the fat-collecting
not spread over the outside of the extraction flask.
...
Norme internationale @ 2450
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDlZATION*MEXJlYHAPOL1HAR OPrAHH3AUMR no CTAHAAPTM3AUHH*ORGANlSATlON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Crème - Détermination de la teneur en matière grasse -
L
Méthode gravimétrique (Méthode de référence)
Cream - Determination of fat content - Gravimetric method (Reference method)
Deuxième édition - 1985-12-15
iî CDU 637.148:543.85 Réf. no : IS0 2450-1985 (FI
-
Descripteurs : produit agricole, produit laitier, crème, analyse chimique, dosage, corps gras, appareil, méthode gravimétrique.
8 c
O
5 Prix basé sur 8 pages
---------------------- Page: 1 ----------------------
Avant-propos
L‘ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I‘ISO). L’élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
créé 3 cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I‘ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale IS0 2450 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles, alimentaires.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (IS0 2450-1972) (voir
l’Introduction i.
NOTE - La méthode spécifiée dans la présente Norme internationale a été élaborée conjointe-
ment avec la FIL (Fédération internationale de laiterie) et I‘AOAC (Association des chimistes
analytiques officiels) et sera également publiée par ces organisations.
L‘attention des utilisateurs est attirée sur le fait que toutes les Normes internationales
sont de temps en temps soumises à révision et que toute référence faite à une autre
Norme internationale dans le présent document implique qu‘il s’agit, sauf indication
contraire, de la dernière édition.
O Organisation internationale de normalisation, 1985 O
Imprimé en Suisse
---------------------- Page: 2 ----------------------
NORME INTERNATIONALE IS0 2450-1985 (F)
Crème - Détermination de la teneur en matière grasse -
Méthode gravimétrique (Méthode de référence)
O Introduction 3 Définition
La deuxième édition de I’ISO 2450 est préparée en vue de dis- teneur en matière grasse de la crème: Toutes les substan-
poser d‘une série de méthodes, harmonisées le plus possible, ces déterminées selon la méthode spécifiée dans la présente
sur la détermination gravimétrique de la matière grasse du lait, Norme internationale.
des produits laitiers et des aliments à base de lait.
Elle est exprimée en pourcentage en masse.
Cette révision est basée sur la méthode Rose-Gottlieb révisée
pour le lait spécifiée dans 1’1S0 1211 ’); elle comprend un cer-
tain nombre de modifications pour améliorer la fidélité de cette
4 Principe
méthode.
Extraction d’une solution ammoniaco-éthanolique d’une prise
Une explication plus complète de ces modifications à la
d’essai au moyen d‘oxyde diéthylique et d’éther de pétrole,
méthode de base Rose-Gottlieb est donnée dans l‘introduction
élimination des solvants par distillation ou évaporation, et
I’ISO 121 1.
de
détermination de la masse des substances extraites qui sont
solubles dans l’éther de pétrole. (Méthode habituellement dite
L’addition de 5 ml d’éthanol avant la seconde extraction
de Rose Gottlieb.)
(voir 8.5.101, en accord avec les autres méthodes révisées, qui
donne une solution à 0,5 % de solution salée, comme décrit
dans la première édition, est superflue et a donc été remplacée
5 Réactifs
par une dilution avec de l’eau (voir 8.5.1).
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue et
ne doivent pas laisser de résidu appréciable lorsque la détermi-
1 Objet et domaine d’application
nation est effectuée selon la méthode décrite. L‘eau utilisée doit
être de l‘eau distillée ou de l’eau de pureté au moins
La présente Norme internationale décrit une méthode de réfé-
.-
équivalente.
rence pour la détermination de la teneur en matière grasse de la
crème crue traitée et ensemencée, dans laquelle aucune sépa-
Pour vérifier la qualité des réactifs, effectuer un essai à blanc
ration sensible de la matière grasse n‘intervient.
comme mentionné en 8.3. Pour les contrôles de masses, utiliser
un récipient de récupération de la matière grasse vide, préparé
NOTE - La méthode n’est pas applicable aux crèmes acides contenant
comme décrit en 8.4. Les réactifs ne doivent pas laisser de rési-
de l‘amidon ou d‘autres agents épaississants. Dans ce cas, et lorsqu’il y
dus supérieurs à 0,5 mg (voir 10.1).
a séparation de la matière grasse, on aura recours à une méthode utili-
sant le principe de Weibull-Berntrop, comme dans I’ISO 8262/3*’.
Si les résidus des réactifs de l’essai à blanc complet sont supé-
rieurs à 0,5 mg, déterminer les résidus des solvants séparément
en distillant respectivement 100 ml d‘oxyde diéthylique et
2 Références
d’éther de pétrole. Utiliser un récipient de contrôle vide pour
obtenir la masse réelle de résidus qui ne doit pas être supérieure
IS0 707, Lait et produits laitiers - Méthodes d‘échantillon-
à 0.5 mg.
nage.
Remplacer les réactifs ou solvants non satisfaisants, ou redistil-
IS0 3889, Lait et produits laitiers - Détermination de la teneur
ler les solvants.
en matière grasse - Fioles d‘extraction, type Mojonnier.
IS0 121 1, Lait - Détermination de la teneur en matière grasse - Méthode gravimétrique (Méthode de référence).
1)
2) IS0 826213. Produits laitiers et aliments à base de lait - Détermination de la teneur en matière grasse par la méthode gravimétrique Weibull-
Berntrop (Méthode de référence) - Parlie 3: Cas spéciaux. (Actuellement au stade de projet.)
1
---------------------- Page: 3 ----------------------
IS0 2450-1985 (FI
à environ la matière grasse, ou de les évaporer des béchers et des capsu-
5.1 Hydroxyde d'ammonium, solution
les (voir 8.5.9 et 8.5.13) à une température n'excédant pas
25 % (rn/rn) de NH,, 0, = 910 g/l.
100 OC.
NOTE - Si l'on ne dispose pas d'une solution d'hydroxyde d'ammo-
nium à cette concentration, une solution plus concentrée, de concen-
6.4 Étuve à dessiccation, à chauffage électrique, munie
tration connue, peut être utilisée (voir 8.5.2).
d'ouïes de ventilation complètement ouvertes, réglée jusqu'à
une température de 102 I 2 OC pendant toute la durée de son
Éthanol, ou éthanol dénaturé au méthanol, au moins fonctionnement. L'étuve doit être munie d'un thermomètre
5.2
approprié.
94 % (Vlv).
(Voir 10.5.)
Bain d'eau, permettant de maintenir une température de
6.5
40 à50 OC.
5.3 Solution de rouge Congo.
6.6 Fioles d'extraction de la matière grasse, type
Dissoudre dans l'eau 1 g de rouge Congo et diluer à 100 ml.
Mojonnier, telles que décrites dans I'ISO 3889.
NOTE - L'utilisation de cette solution, qui permet de mieux voir
NOTE - On peut également utiliser des tubes (ou des fioles)
l'interface entre le solvant et la couche aqueuse, est facultative (voir
d'extraction de la matière grasse munis d'un siphon ou d'un
8.5.3). D'autres solutions aqueuses de colorants peuvent être utilisées
système d'aspiration par le vide, mais le mode opératoire est alors
pourvu qu'elles ne modifient pas le résultat de la détermination.
à l'intérieur de
différent et est décrit dans l'annexe, La longue tubulure
la fiole peut présenter une extrémité recourbée en crochet, si on le
désire.
5.4 Oxyde diéthylique, exempt de peroxydes (voir 10.3). ne
contenant pas, ou contenant pas plus de 2 mg/kg d'antioxy-
Les fioles (ou les tubes, voir la note) doivent être munis de bou-
et en se conformant aux prescriptions de l'essai à blanc
chons en liège de bonne qualité, ou de bouchons en une autre
voir chapitre 5, et aussi 10.1 et 10.4).
matière [par exemple, caoutchouc siliconé ou PTFE ')I inaltéra-
(L
bles aux réactifs utilisés. Les bouchons en liège doivent être
lavés à l'oxyde diéthylique (5.41, maintenus dans l'eau à 60 OC
5.5 Éther de pétrole, ayant un point d'ébullition entre 30
ou plus pendant au moins 15 min et ensuite mis à refroidir dans
et 60 OC.
l'eau de facon à en être imprégnés au moment de l'emploi.
5.6 Mélange de solvants, préparé peu de temps avant
6.7 Support, pour maintenir les fioles (ou les tubes)
emploi par mélange à volume égal d'oxyde diéthylique (5.4) et
d'extraction de la matière grasse (voir 6.6).
d'éther de pétrole (5.5).
Flacon de lavage, pour le mélange de solvants (5.6). Ne
6.8
pas utiliser de flacon de lavage en plastique.
6 Appareillage
6.9 Récipients de récupération de la matière grasse, par
AVERTISSEMENT - Pour les déterminations requérant
exemple fioles à ébullition (fioles à fond plat) de capacité 125 à
l'utilisation de solvants volatils inflammables, I'appareil-
250 ml, fioles coniques de capacité 250 ml ou capsules métalli-
lage électrique utilisé devra satisfaire, le cas échéant, à la
ques.
législation en matière de risques liés à l'utilisation de ces
solvants.
Lorsqu'on utilise des capsules métalliques, elles doivent être de
préférence en acier inoxydable, à fond plat, avec un bec, et doi-
Matériel courant de laboratoire, et notamment :
vent avoir un diamètre de 80 à 100 mm, avec une hauteur
d'environ 50 mm.
6.1 Balance analytique
6.10 Régulateurs d'ébullition, exempts de matière grasse,
6.2 Centrifugeuse, dans laquelle les fioles ou les tubes (6.6)
en porcelaine non poreuse ou en carbure de silicium, ou billes
d'extraction peuvent être centrifugés à une fréquence de rota-
de verre (facultatif dans le cas des capsules métalliques).
tion de 500-600 tr/min, afin d'obtenir un champ de gravitation
de 803 à 903 à l'extrémité extérieure des fioles ou des tubes.
6.11 Éprouvettes graduées, de 5 et 25 ml de capacités.
NOTE - L'utilisation d'une centrifugeuse est facultative mais recom-
mandée (voir 8.5.6).
6.12 Pipettes graduées, de 10 ml de capacité.
Pinces métalliques, appropriées pour tenir tes fioles,
6.3 Appareil de distillation ou d'évaporation, permettant 6.13
de distiller les solvants et l'éthanol des fioles de récupération de béchers ou capsules.
1) Polytétrafluoroéthylène
2
---------------------- Page: 4 ----------------------
IS0 2450-1985 (FI
Laisser refroidir le récipient (protégé de la poussière) à la tem-
7 Échantillonnage
pérature de la salle des balances [récipients en verre pendant au
moins 1 h, capsules métalliques pendant au moins 0.5 h (voir
Voir IS0 707.
note 211.
Tous les échantillons pour laboratoire doivent être conservés à
Placer le récipient sur la balance à l'aide des pinces (6.13) (pour
une température comprise entre O et 4 OC à partir du moment
de l'échantillonnage jusqu'au commencement du mode opéra- éviter, en particulier, des variations de température), et peser à
0,l mg près.
toire.
NOTES
1 Les régulateurs d'ébullition sont nécessaires pour permettre une
ébullition modérée pendant l'élimination du solvant, spécialement dans
8 Mode opératoire
le cas des récipients en verre; leur utilisation est facultative dans le cas
des capsules métalliques.
NOTE - Un autre mode opératoire utilisant des tubes d'extraction de
la matière grasse munis d'un siphon ou d'un système d'aspiration par le
2 Le récipient ne doit pas être placé dans un dessiccateur, afin d'évi-
vide (voir la note en 6.6) est décrit dans l'annexe.
ter un refroidissement insuffisant ou des temps de refroidissement
excessifs.
8.1 Préparation de l'échantillon pour essai
8.5 Détermination
5 Amener la température de l'échantillon pour laboratoire
L
(chapitre 7) à 35 à 40 OC, en utilisant le bain d'eau (6.5) si
8.5.1 Ajouter à la prise d'essai, de l'eau à environ 50 OC, de
nécessaire. Bien mélanger l'échantillon, mais doucement, par
facon à obtenir un volume total de 10 à 11 ml et à entraîner la
retournements répétés du récipient, sans produire de mousse
totalité de la prise d'essai dans le bulbe étroit de la fiole, et
ou de barattage, et refroidir rapidement à environ 20 OC.
mélanger vigoureusement jusqu'à ce que le produit soit com-
plètement dispersé. Refroidir sous l'eau courante.
NOTES
1 La crème acide ne doit pas être chauffée, mais doit être bien
8.5.2 Ajouter 2 ml de solution d'hydroxyde d'ammonium (5.1 1
remuée.
ou un volume équivalent d'une solution plus concentrée (voir la
La crème barattée ne doit pas être refroidie, du fait qu'elle doit être
2
note en 5.1). Mélanger vigoureusement avec la prise d'essai
pesée à la température de 30 à 40 OC.
diluée dans le bulbe étroit de la fiole. Après addition de
Il ne faut pas s'attendre à avoir une valeur correcte de la teneur en l'hydroxyde d'ammonium, continuer la détermination sans
3
matière grasse :
attendre.
ai si une odeur distincte d'acides gras libres est perceptible :
8.5.3 Ajouter 10 ml d'éthanol (5.2). Mélanger doucement
b) si pendant, ou après, la préparation de l'échantillon pour essai,
mais complètement le contenu de la fiole en lui imprimant un
des particules blanches sont visibles sur les parois du récipient de
mouvement de va-et-vient entre les deux bulbes ; éviter d'ame-
à la surface de
l'échantillon ou des gouttelettes de matière grasse
l'échantillon. ner le liquide trop près du col de la fiole. Ajouter, si on le désire,
2 gouttes de solution de rouge Congo (5.3).
8.2 Prise d'essai
8.5.4 Ajouter 25 ml d'oxyde diéthylique (5.41, boucher la fiole
. __
Mélanger doucement l'échantillon pour essai (8.11 par retour- avec un bouchon en liège (voir 6.6) saturé d'eau, ou un autre
nements et rotations du récipient et peser immédiatement à dispositif de fermeture imprégné d'eau, et agiter la fiole vigou-
1 mg près, directement ou par différence, dans une fiole reusement mais sans excès (de facon à éviter la formation
d'extraction de !a matière grasse (6.61, une prise d'essai don- d'émulsions persistantes), pendant 1 min en position horizon-
nant une extraction de la matière grasse de 0,3 à 0,6 g (selon la tale, le bulbe étroit étant en haut, en laissant de temps en
teneur en matière grasse de la crème). temps le liquide du bulbe large passer dans le bulbe étroit. Si
nécessaire, refroidir la fiole sous l'eau courante, puis retirer
Les prises d'essai doivent être placées aussi complètement que avec précaution le bouchon en liège ou le dispositif de ferme-
possible dans le bulbe inférieur (étroit) de la fiole d'extraction. ture et le rincer, ainsi que le col de la fiole, avec une petite quan-
tité de mélange de solvants (5.6). en se servant du flacon de
lavage (6.81, de facon que les liquides de rincage coulent dans
8.3 Essai 8 blanc
la fiole ou le récipient préparé (voir 8.4) pour la récupération de
la matière grasse.
Effectuer un essai à blanc simultanément à la détermination, en
utilisant le même mode opératoire et les mêmes réactifs, mais
en remplacant la prise d'essai dispersée comme décrit en 8.5.1, 8.5.5 Ajouter 25 ml d'éther de pétrole (5.51, boucher la fiole
avec le bouchon en liège humidifié à nouveau, ou le dispositif
par 10 ml d'eau (voir 10.2).
de fermeture réhumidifié (par trempage dans l'eau), et agiter
doucement la fiole pendant 30 s comme décrit en 8.5.4.
8.4 Préparation du récipient de récupération de
la matière grasse
8.5.6 Centrifuger la fiole bouchée pendant 1 à 5 min à une fré-
quence de rotation de 500-600 tr/min (voir 6.2). Si l'on ne dis-
Sécher le récipient (6.9) avec quelques régulateurs d'ébullition
pose pas de centrifugeuse, laisser la fiole bouchée reposer sur
(6.10) pendant 1 h dans l'étuve (6.4) (voir note 1).
3
---------------------- Page: 5 ----------------------
IS0 2450-1985
le support (6.7) pendant au moins 30 min, jusqu‘à ce que la 8.5.11 Effectuer une seconde extraction en recommencant les
couche surnageante soit claire et nettement séparée de la COU- opérations décrites de 8.5.4 à 8.5.9 inclus, mais en utilisant seu-
Che aqueuse. Si nécessaire, refroidir la fiole sous l’eau COU- lement 15 ml d‘oxyde diéthylique (5.4) et 15 ml d’éther de
rante. pétrole (5.5) ; utiliser l’oxyde diéthylique pour rincer l’intérieur
du col de la fiole d’extraction.
8.5.7 Enlever avec précaution le bouchon en liège ou le dispo-
Si nécessaire, faire monter l‘interface légèrement au-dessus du
sitif de fermeture et le rincer, ainsi que l’intérieur du col de la
milieu du col de la fiole (voir figure 1) pour permettre à la
fiole, avec un peu de mélange de solvants, de facon que les
décantation finale des solvants d’être aussi complète que possi-
liquides de rincage coulent dans la fiole ou le récipient préparé
ble (voir figure 2).
pour la récupération de la matière grasse.
Si l’interface se situe au-dessous du fond du col de la fiole, le
8.5.12 Effectuer une troisième extraction, sans addition
faire monter à ce niveau en ajoutant doucement de l‘eau par le d‘éthanol, en répétant de nouveau les opérations décrites de
côté de la fiole (voir figure 11, afin de faciliter la décantation du
8.5.4 à 8.5.8 inclus, mais en utilisant seulement 15 ml d’oxyde
solvant. diéthylique (5.4) et 15 ml d‘éther de pétrole (5.5); utiliser
l’oxyde diéthylique pour rincer l‘intérieur du col de la fiole
NOTE - Aux figures 1 et 2, l‘un des trois types de fioles spécifiées
d’extraction.
dans I’ISO 3889 a été choisi, mais aucune préférence n’est donnée à ce
type.
Si nécessaire, faire monter l‘interface légèrement au-dessus du
milieu du col de la fiole (voir figure 1) pour permettre à la
décantation finale des solvants d’être aussi complète que possi-
8.5.8 En tenant la fiole d’extraction par le bulbe étroit, décan-
ble (voir figure 2).
ter avec soin le plus possible de la couche surnageante dans le
récipient préparé, destiné à la récupération de la matière grasse
(voir 8.41, contenant quelques régulateurs d’ébullition (6.10)
8.5.13 Éliminer les solvants (éthanol compris) aussi complète-
dans le cas des fioles (facultatif
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.