ISO 22634-2:2019

Cigarettes — Determination of benzo[a]pyrene in cigarette mainstream smoke using GC/MS — Part 2: Method using cyclohexane as extraction solvent

This document specifies a method for the determination of benzo[a]pyrene (B[a]P) in the total particulate matter (TPM) of cigarette mainstream smoke using gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS) with cyclohexane as extraction solvent. This method is specified using ISO 3308 smoking parameters. This document provides an alternative method to that specified in ISO 22634-1, with a different clean-up, and a shorter total analytical run allowing a potential increase of sample throughput in comparison with ISO 22634-1.

Cigarettes — Dosage du benzo[a]pyrène dans le courant principal de la fumée de cigarette par CG/SM — Partie 2: Méthode utilisant du cyclohexane comme solvant d'extraction

Le présent document spécifie une méthode de dosage du benzo[a]pyrène (B[a]P) dans la matière particulaire totale (MPT) du courant principal de la fumée de cigarette par chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (CG/SM) en utilisant du cyclohexane comme solvant d'extraction. Cette méthode est spécifiée en utilisant les paramètres de fumage de l'ISO 3308. Le présent document définit une méthode alternative à l'ISO 22634-1, avec une étape de purification différente et une durée totale d'analyse réduite, qui permet une augmentation potentielle de la cadence des échantillons par comparaison avec l'ISO 22634-1.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 03-Dec-2019
• ICS: 65.160 - Tobacco, tobacco products and related equipment
• Technical Committee: ISO/TC 126 - Tobacco and tobacco products
• Drafting Committee: ISO/TC 126 - Tobacco and tobacco products
• Current Stage: 6060 - International Standard published
• Start Date: 04-Dec-2019
• Due Date: 22-Jun-2021
• Completion Date: 04-Dec-2019

Relations

• Revises: ISO 22634-2:2017 - Cigarettes — Determination of benzo[a]pyrene in cigarette mainstream smoke using GC/MS — Part 2: Method using cyclohexane as extraction solvent
• Effective Date: 30-Jun-2018

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 22634-2
Second edition
2019-12
Cigarettes — Determination
of benzo[a]pyrene in cigarette
mainstream smoke using GC/MS —
Part 2:
Method using cyclohexane as
extraction solvent
Cigarettes — Dosage du benzo[a]pyrène dans le courant principal de
la fumée de cigarette par CG/SM —
Partie 2: Méthode utilisant du cyclohexane comme solvant
d'extraction
Reference number
ISO 22634-2:2019(E)
©
ISO 2019

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ISO 22634-2:2019(E)

COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
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Published in Switzerland
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ISO 22634-2:2019(E)

Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 1
5 Apparatus . 2
6 Reagents . 2
7 Standards . 3
7.1 General . 3
7.2 Primary B[a]P-d12 stock solution: 100 µg/ml . 3
7.3 Secondary B[a]P-d12 spiking solution: 40 ng/ml . 3
7.4 Primary B[a]P stock solution: 100 µg/ml . 3
7.5 Secondary B[a]P stock solution: 1 000 ng/ml . 3
7.6 Working standard solutions . 3
7.7 Storage of standard solutions. 3
8 Preparation of sample . 4
8.1 Sampling . 4
8.2 Smoking . 4
8.3 Glass-fibre filter pad extraction . 4
8.4 Sample clean-up . 4
8.5 Blank solution . 5
9 Determination . 5
9.1 GC/MS operating conditions . 5
9.2 Calibration . 6
9.3 Determination of B[a]P . 6
9.4 Calculation . 6
10 Repeatability and reproducibility . 6
11 Test report . 7
11.1 General . 7
11.2 Characteristic data about the cigarette . 7
11.3 Data about sampling . 8
11.4 Description of the test . 8
11.5 Test results. 8
Annex A (informative) Example of a chromatogram of a cigarette smoke extract .9
Bibliography .10
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ISO 22634-2:2019(E)

Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/ directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/ patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see the following
URL: www .iso .org/ iso/ foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 126, Tobacco and tobacco products.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 22634-2:2017), which has been
technically revised.
The main changes compared to the previous edition are as follows:
— reagents have modified by adding nitrogen;
— storage of standard solutions has been modified;
— sample clean-up has been modified;
— vortex mixer has been added;
— Bibliography has been extended.
A list of all parts in the ISO 22634 series can be found on the ISO website.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/ members .html.
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ISO 22634-2:2019(E)

Introduction
This document, produced through collaborative experiments involving many laboratories in many
countries, provides a procedure for the determination of B[a]P in cigarette mainstream smoke. The
repeatability and reproducibility of this method have been assessed according to ISO recommendations
and are included.
No machine smoking regime can represent all human smoking behaviours.
— It is recommended that cigarettes also be tested under conditions of a different intensity of machine
smoking than those specified in this document.
— Machine smoking testing is useful to characterize cigarette emissions for design and regulatory
purposes, but communication of machine measurements to smokers can result in misunderstandings
about differences in exposure and risk across brands.
— Smoke emission data from machine measurements may be used as inputs for product hazard
assessment, but they are not intended to be nor are they valid measures of human exposure or
risks. Communicating differences between products in machine measurements as differences in
exposure or risk is a misuse of testing using ISO standards.
© ISO 2019 – All rights reserved v

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INTERNATIONAL STANDARD ISO 22634-2:2019(E)
Cigarettes — Determination of benzo[a]pyrene in cigarette
mainstream smoke using GC/MS —
Part 2:
Method using cyclohexane as extraction solvent
WARNING — The use of this document can involve hazardous materials, operations and
equipment. This document does not purport to address all the safety problems associated with
its use. It is the responsibility of the user of this document to establish appropriate safety and
health practices and determine the applicability of regulatory limitations prior to use.
1 Scope
This document specifies a method for the determination of benzo[a]pyrene (B[a]P) in the total particulate
matter (TPM) of cigarette mainstream smoke using gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS)
with cyclohexane as extraction solvent.
This method is specified using ISO 3308 smoking parameters. This document provides an alternative
method to that specified in ISO 22634-1, with a different clean-up, and a shorter total analytical run
allowing a potential increase of sample throughput in comparison with ISO 22634-1.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 3308, Routine analytical cigarette-smoking machine — Definitions and standard conditions
ISO 3402, Tobacco and tobacco products — Atmosphere for conditioning and testing
ISO 4387, Cigarettes — Determination of total and nicotine-free dry particulate matter using a routine
analytical smoking machine
ISO 8243, Cigarettes — Sampling
3 Terms and definitions
No terms and definitions are listed in this document.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at http:// www .electropedia .org/
4 Principle
— Sampling of the test cigarettes according to the sampling procedure specified in ISO 8243.
— Conditioning of the test cigarettes according to the conditioning procedure specified in ISO 3402.
— Smoking of the test cigarettes according to the smoking procedure specified in ISO 4387.
© ISO 2019 – All rights reserved 1

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ISO 22634-2:2019(E)

— Extraction of the TPM, collected on the appropriate glass-fibre filter pad, with cyclohexane.
— Sample clean-up using solid phase extraction (SPE).
— Analytical determination of B[a]P by gas chromatography/mass spectrometry.
5 Apparatus
The usual laboratory apparatus and equipment and, in particular, the following.
5.1 Routine analytical cigarette-smoking machine, complying with the requirements of ISO 3308
and equipped for smoking in accordance with ISO 4387.
5.2 Gas chromatograph with a mass selective detector, equipped with its computerized control
and data acquisition and processing system. This system shall be
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 22634-2
Deuxième édition
2019-12
Cigarettes — Dosage du benzo[a]
pyrène dans le courant principal de la
fumée de cigarette par CG/SM —
Partie 2:
Méthode utilisant du cyclohexane
comme solvant d'extraction
Cigarettes — Determination of benzo[a]pyrene in cigarette
mainstream smoke using GC/MS —
Part 2: Method using cyclohexane as extraction solvent
Numéro de référence
ISO 22634-2:2019(F)
©
ISO 2019

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ISO 22634-2:2019(F)

DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
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Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
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Publié en Suisse
ii © ISO 2019 – Tous droits réservés

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ISO 22634-2:2019(F)

Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Appareillage . 2
6 Réactifs . 3
7 Étalons . 3
7.1 Généralités . 3
7.2 Solution mère primaire de B[a]P-d12: 100 µg/ml . 3
7.3 Solution de dopage secondaire de B[a]P-d12: 40 ng/ml . 3
7.4 Solution mère primaire de B[a]P: 100 µg/ml . 3
7.5 Solution mère secondaire de B[a]P: 1 000 ng/ml . . 4
7.6 Solutions étalons de travail . 4
7.7 Stockage des solutions étalons . 4
8 Préparation de l’échantillon . 4
8.1 Échantillonnage . 4
8.2 Fumage . 4
8.3 Extraction sur filtre en fibre de verre . 4
8.4 Purification de l’échantillon. 5
8.5 Essai à blanc . 5
9 Dosage . 5
9.1 Conditions de fonctionnement CG/SM . 5
9.2 Étalonnage . 6
9.3 Dosage du B[a]P . 6
9.4 Calcul . 6
10 Répétabilité et reproductibilité . 7
11 Rapport d’essai . 7
11.1 Généralités . 7
11.2 Données caractéristiques concernant la cigarette . 8
11.3 Données concernant l’échantillonnage . 8
11.4 Description de l’essai . 8
11.5 Résultats de l’essai . 9
Annexe A (informative) Exemple de chromatogramme d’un extrait de fumée de cigarette .10
Bibliographie .11
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ISO 22634-2:2019(F)

Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/ directives).
L’attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion
de l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/ iso/ fr/ avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 126, Tabac et produits du tabac.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 22634-2:2017), qui a fait l’objet
d’une révision technique.
Les principales modifications par rapport à l’édition précédente sont les suivantes:
— les réactifs ont été modifiés par ajout d’azote;
— le stockage des solutions étalons a été modifié;
— la purification de l’échantillon a été modifiée;
— l’agitateur Vortex a été ajouté;
— la Bibliographie a été étendue.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 22634 se trouve sur le site web de l’ISO.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/ fr/ members .html.
iv © ISO 2019 – Tous droits réservés

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ISO 22634-2:2019(F)

Introduction
Le présent document, qui est le fruit d’expériences collectives impliquant de nombreux laboratoires
dans de nombreux pays, propose un mode opératoire pour le dosage du B[a]P dans le courant principal
de la fumée de cigarette. La répétabilité et la reproductibilité de cette méthode ont été évaluées
conformément aux recommandations de l’ISO et sont incluses dans le présent document.
Aucun régime de fumage mécanique ne peut reproduire parfaitement le comportement des fumeurs.
— Il est recommandé que les cigarettes soient aussi soumises à essai sous les conditions d’une différente
intensité de fumage mécanique que celles spécifiées dans le présent document.
— L’essai de fumage mécanique permet de caractériser les émissions des cigarettes pour des besoins
de conception et de réglementation, mais communiquer aux fumeurs les résultats des mesures sur
machine peut susciter des malentendus sur les niveaux d’exposition et de risque selon les marques.
— Les données concernant l’émission de fumées obtenues par des mesurages mécaniques peuvent
être utilisées comme des données de base pour l’évaluation des dangers du produit, mais elles ne
constituent pas des mesures valables de l’exposition des individus et des risques et ce n’est pas
leur but. C’est faire un usage impropre des essais réalisés conformément aux Normes ISO que de
communiquer que les différences de mesures mécaniques entre différents produits correspondent
à des différences de niveaux d’exposition ou de risque.
© ISO 2019 – Tous droits réservés v

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NORME INTERNATIONALE ISO 22634-2:2019(F)
Cigarettes — Dosage du benzo[a]pyrène dans le courant
principal de la fumée de cigarette par CG/SM —
Partie 2:
Méthode utilisant du cyclohexane comme solvant
d'extraction
AVERTISSEMENT — L’utilisation du présent document peut impliquer l’utilisation de produits
et la mise en œuvre de modes opératoires et d’appareillages à caractère dangereux. Le
présent document n’a pas pour but de traiter tous les problèmes de sécurité qui sont liés à
son utilisation. Il incombe à l’utilisateur du présent document d’établir, avant de l’utiliser, des
pratiques d’hygiène et de sécurité appropriées et de déterminer l’applicabilité des restrictions
réglementaires.
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie une méthode de dosage du benzo[a]pyrène (B[a]P) dans la matière
particulaire totale (MPT) du courant principal de la fumée de cigarette par chromatographie en phase
gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (CG/SM) en utilisant du cyclohexane comme solvant
d’extraction.
Cette méthode est spécifiée en utilisant les paramètres de fumage de l’ISO 3308. Le présent document
définit une méthode alternative à l’ISO 22634-1, avec une étape de purification différente et une durée
totale d’analyse réduite, qui permet une augmentation potentielle de la cadence des échantillons par
comparaison avec l’ISO 22634-1.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 3308, Machine à fumer analytique de routine pour cigarettes — Définitions et conditions normalisées
ISO 3402, Tabac et produits du tabac — Atmosphère de conditionnement et d'essai
ISO 4387, Cigarettes — Détermination de la teneur en matière particulaire totale et en matière particulaire
anhydre et exempte de nicotine au moyen d'une machine à fumer analytique de routine
ISO 8243, Cigarettes — Échantillonnage
3 Termes et définitions
Aucun terme n’est défini dans le présent document.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http:// www .electropedia .org/
© ISO 2019 – Tous droits réservés 1

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ISO 22634-2:2019(F)

4 Principe
— Échantillonnage des cigarettes pour essai conformément au mode opératoire d’échantillonnage
spécifié dans l’ISO 8243.
— Conditionnement des cigarettes pour essai conformément au mode opératoire de conditionnement
spécifié dans l’ISO 3402.
— Fumage des cigarettes pour essai conformément au mode opératoire de fumage spécifié dans
l’ISO 4387.
— Extraction au cyclohexane de la MPT, recueillie sur le filtre en fibre de verre approprié.
— Purification de l’échantillon par extraction en phase solide (SPE).
— Dosage analytique du B[a]P par chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie
de masse.
5 Appareillage
Appareillage et matériel courants de laboratoire et, en particulier, ce qui suit.
5.1 Machine à fumer analytique de routine pour cigarettes, conforme aux exigences de l’ISO 3308
et équipée pour le fumage selon l’ISO 4387.
5.2 Chromatographe en phase gazeuse doté d’un détecteur sélectif de masse, équipé de son
système informatisé de pilotage, de collecte et de traitement des données. Ce système doit être capable
de piloter le spectromètre de masse pour obtenir des données chromatographiques en mode de
détection SIM («Single Ion Monitoring» suivi d’ion sélectionné). Le chromatographe en phase gazeuse
doit être configuré pour effectuer des injections en mode splitless «sans division» sur une colonne
capillaire. Il est recommandé d’équiper le chromatographe en phase gazeuse d’un passeur automatique
d’échantillons pour l’injection des échantillons.
5.3 Colonne capillaire en silice fondue; par exemple, une phase station
...