Caseins and caseinates — Determination of lactose content — Photometric method

Specifies a method for determining the lactose and other soluble carbohydrates content of caseins and caseinates containing less than 2.0 % of total soluble carbohydrates. Before precipitation of the casein with acetic acid and sodium acetate solution and subsequent filtration a test portion is dissolved either in hot water in the case of caseinates or in hot water with the addition of sodium hydrogen carbonate in the case of acid caseins or in hot water with the addition of pentasodium triphosphate in the case of rennet casein. The content of total soluble carbohydrates is expressed as anhydrous lactose as a percentage by mass.

Caséines et caséinates — Détermination de la teneur en lactose — Méthode photométrique

La présente Norme internationale spécifie une méthode photométrique de détermination de la teneur en lactose et autres hydrates de carbone solubles des caséines et caséinates contenant moins de 2,0 % d'hydrates de carbone solubles totaux.

General Information

Status
Withdrawn
Publication Date
30-Sep-1980
Withdrawal Date
30-Sep-1980
Current Stage
9599 - Withdrawal of International Standard
Completion Date
25-Nov-2004
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ISO 5548:1980 - Caseins and caseinates -- Determination of lactose content -- Photometric method
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ISO 5548:1980 - Caséines et caséinates -- Détermination de la teneur en lactose -- Méthode photométrique
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ISO 5548:1980 - Caséines et caséinates -- Détermination de la teneur en lactose -- Méthode photométrique
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Standards Content (Sample)

International Standard
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION.ME~YHAPO~HAR OPrAHM3A~MR I-IO CTAHAAPTM3A~WWORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Caseins and caseinates - Determination of lactose
content -
Photometric method
Cas&bes et cashhates - Determination de Ia teneur en lactose - AMhode photom&rique
,
First edition - 1980-10-15
UDC 637.147.2 : 543.42 : 637.145
Ref. No. ISO 5548-1980 (E)
w
-
Descriptors : agricultural products, dairy products, caseins, Chemical analysis, determination of content, lactose, spectrophotometric analysis,
I
test specimen conditioning.
3
m
0
cn
Price based on 3 pages

---------------------- Page: 1 ----------------------
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national Standards institutes (ISO member bodies). The work of developing Inter-
national Standards is carried out through ISO technical com.mittees. Every member
body interested in a subject for which a technical committee has been set up has the
right to be represented on that committee. International organizations, governmental
and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the ISO Council.
International Standard ISO 5548 was developed by Technical Committee lSO/TC 34,
Agricultural food products, and was circulated to the member bodies in March 1979.
lt has been approved by the member bodies of the following countries :
Australia France New Zealand
Austria Germany, F. R. Romania
Belgium Hungary South Africa, Rep. of
Bulgaria India Spain
Canada Israel Thailand
Chile Kenya Turkey
Cyprus Korea, Rep. of United Kingdom
Czechoslovakia Libyan Arab Jamahiriya Y ugoslavia
Egypt, Arab Rep. of Malaysia
Ethiopia Netherlands
No member body expressed disapproval of the document.
0 International Organkation for Standardkation,, 1980
Printed in Switzerland

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 5548-1980 (E)
INTERNATIONAL STANDARD
Caseins and caseinates - Determination of lactose
content - Photometric method
5.1 Sodium hydrogen carbonate (NaHC03) (for analysis
1 Scope and field of application
of acid casein).
This International Standard specifies a photometric method for
the determination of the lactose and other soluble car-
5.2 Pentasodium triphosphate (NaF,PsOlo) (for analysis of
bohydrates content of caseins and caseinates containing less
rennet casein).
than 20 % of total soluble carbohydrates.
5.3 Hydrochioric acid or sulphuric acid, c(HCI) or
cW2 H,SOa) = 0,l mol/l.
2 References
ISO/ R 707, Mifk and mik products - Sampling.
5.4 Acetic acid, 100 g/l Solution.
ISO 3310/1, Test sieves - Technical requiremen ts and testing
5.5 Sodium acetate Solution,
- Part 7 : Metal wire cloth.
c(CH$OONa) = 1 mol/l.
3 Definition 5.6 Phenol, 80 % (mlm) solution.
lactose content of caseins and caseinates : The content of Heat a mixture of 8 g of Phenol and 2 g of water until the mix-
total soluble carbohydrates, expressed as anhydrous lactose as ture is homogeneous.
a percentage by mass, determined by the procedure described
in this International Standard.
5.7 Sulphuric acid, concentrated, (eZO 1,84 g/ml).
5.8 Lactose, 20 g/l solution.
4 Principle
Weigh 2,105 -f- 0,001 g of lactose monohydrate, correspon-
Dissolution of a test Portion
ding to 2,00 g of anhydrous lactose, into a 100 ml volumetric
flask, dissolve in water, make up to volume and mix weil. Store
a) in hot water in the case of caseinates;
the Solution at 0 OC.
b) in hot water with the addition of sodium hydrogen car-
bonate in the case of acid caseins;
c) in hot water with the addition of pentasodium
triphosphate in the case of rennet casein. 6 Apparatus
Precipitation of the casein with acetic acid and sodium acetate Usual laboratory equipment, and in particular :
Solution at pH 4,6, followed by filtration to obtain a Protein-free
Solution of the carbohydrates. Addition of Phenol Solution and
6.1 Analytical balance.
concentrated sulphuric acid to an aliquot Portion of the filtrate,
thus producing a colour which is proportional to the amount of
6.2 Conical flasks, of capacity 100 ml.
carbohydrate present, and photometric measurement at a
wavelength of 490 nm.
6.3 One-mark pipettes, of capacity 1, 2 and 10 ml.
5 Reagents
6.4 Micropipettes, of capacity 0,2 ml, with 0,001 mI divi-
sions.
All reagents shall be of recognized analytical quality. The water
used shall be distilled water or water of at least equivalent
purity. 6.5 Graduated pipettes, of capacity 25 mI.

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 5548-1980 (El
8.2 Preparation of a blank sdution
6.6 Test tubes, of capacity about 40 ml, with ground necks
and fitted with ground glass Stoppers.
Prepare a blank Solution containing 0,l + 0,001 g of sodium
hydrogen carbonate or 0,l + 0,001 g of pentasodium
6.7 Autom atic dispenser, capable of dispensing 5 ml of
triphosphate, as appropriate, using the same apparatus, the
concentrated sulphuric acid wi thin 1 s.
same reagents in the same amounts, and the same procedure
as described in 8.4.2 to 8.5.1 inclusive, but omitting the test
6.8 Water bath, capable of being controlled at 60 to 70 OC.
Portion and omitting those operations in connection with the
presence of a test Portion.
6.9 Photometer, suitable for making measurements at a
NOTE - For the most accurate results, prepare the blank Solution, the
wavelength of 490 nm, provided with cells of Optical path
test Solution and the Standard solutions for the calibration graph
length 1 to 2 cm.
(see 8.6) simultaneously.
6.10 Mixer, suitable for mixing inside the test tubes (6.61,
8.3 Test Portion
with a stirrer resistant to strong acid.
Weigh, to the nearest 1 mg, about 1 g of the test Sample (8.1)
Grinding device, for grinding the laboratory Sample, if
6.11
into a conical flask (6.2).
necessary Isee 8.1.41, without development of undue heat and
without loss of moisture. A hammer-mill shall not be used.
8.4 Test solution
wire cloth, diameter 200 mm, nomina
...

Norme internationale
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION.ME~YHAPO~HAfl OPTAHMSAl&lR ll0 CTAH~APTM3A~MM@ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Détermination de la teneur en
Caséines et caséinates -
lactose - Méthode photométrique
Caseins and caseinates - Determination of lactose content - Photometric method
Première édition - 1980-10-15
CDU 637.147.2 : 543.42 : 637.145
Réf. no : BO 5548-1980 (F)
iz
Y
Descripteurs : produit agricole, produit laitier, caséine, analyse chimique, dosage,
lactose, analyse spectrophotométrique, préparation de
spécimen d’essai.
Prix basé sur 3 pages

---------------------- Page: 1 ----------------------
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
correspondant. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I’ISO, participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO.
La Norme internationale ISO 5548 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires, et a été soumise aux comités membres en mars 1979.
Les comités membres des pays suivants l’ont approuvée :
Afrique du Sud, Rép. d’ Égypte, Rép. arabe d’ Nouvelle-Zélande
Allemagne, R. F. Espagne Pays-Bas
Australie
Ethiopie Roumanie
Autriche France Royaume-Uni
Belgique Hongrie Tchécoslovaquie
Bulgarie Inde
Thailande
Canada Israël Turquie
Chili Jamahiriya arabe libyenne Yougoslavie
Chypre Kenya
Corée, Rép. de Malaisie
Aucun comité membre ne l’a désapprouvée.
0 Organisation internationale de normalisation, 1980
Imprimé en Suisse

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60 5548-1980 (F)
NORME INTERNATIONALE
Caséines et caséinates - Détermination de la teneur en
lactose - Méthode photométrique
1 Objet et domaine d’application 5 Réactifs
La présente Norme internationale spécifie une méthode photo- Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue.
métrique de détermination de la teneur en lactose et autres L’eau utilisée doit être de l’eau distillée ou de l’eau de pureté au
hydrates de carbone solubles des caséines et caseinates conte- moins équivalente.
nant moins de 20 % d’hydrates de carbone solubles totaux,
5.1 Hydrogénocarbonate de sodium (NaHCO$ (pour
l’analyse des caséines acides).
2 Références
5.2 Triphosphate pentasodique (NasPaOlo) (pour l’analyse
des caséines présures).
ISO/R 707, Lait et produits laitiers - M&ode d’échanttilon-
nage.
5.3 Acide chlorhydrique ou acide sulfurique, solution,
ISO 331011, Tamis de contrôle - Exigences techniques et véri-
C(H~I) ou cW2 H2S04) = 0,l mol/l.
fica tions - Partie I : Toiles métalliques.
5.4 Acide acétique, solution à 100 g/l.
5.5 Ac&ate de sodium, solution,
3 Définition
cKH&OONa) = 1 mol/l.
teneur en lactose des caséines et des caséinates : Teneur
en hydrates de carbone solubles totaux, exprimée en pourcen-
5.6 Phénol, solution à 80 % (mlm).
tage en masse de lactose anhydre, déterminée selon le mode
opératoire décrit dans la présente Norme internationale.
Chauffer un mélange formé de 8 g de phénol et de 2 g d’eau,
jusqu’à obtention d’un mélange homogéne.
5.7 Acide sulfurique, concentré, ~20 1,84 g/ml.
4 Principe
Dissolution d’une prise d’essai
5.8 Lactose, solution à 20 g/l.
a) dans de l’eau chaude, dans le cas des caséinates;
Peser 2,105 i: 0,001 g de lactose monohydraté, correspondant
à 2,00 g de lactose anhydre, dans une fiole jaugée de 100 ml,
b) dans de l’eau chaude additionnée d’hydrogénocarbo-
dissoudre dans de l’eau, compléter au trait repère et bien
nate de sodium, dans le cas des caséines acides;
mélanger.
c) dans de l’eau chaude additionnée de triphosphate pen-
Conserver la solution à 0 OC.
tasodique, dans le cas des caséines présures.
Précipitation de la caséine au moyen d’une solution d’acide
6 Appareillage
acétique et d’acétate de sodium, à pH 4,6, puis filtration pour
obtenir une solution d’hydrates de carbone exempte de protéi-
Matériel courant de laboratoire, et notamment :
nes. Addition d’une solution de phénol et d’acide sulfurique
concentre à une partie aliquote du filtrat provoquant I’appari-
6.1 Balance analytique.
tion d’une coloration proportionnelle à la quantité d’hydrates de
carbone présente, et mesurage photométrique à la longueur
6.2 Fioles coniques, de 100 ml de capacité.
d’onde de 490 nm.

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ISO 55484980 (F)
6.3 Pipettes à un trait, de 1, 2 et 10 ml de capacité.
8.1.4 Dans le cas contraire, broyer cette fraction de 50 g au
moyen du dispositif de broyage (6.11) jusqu’à ce qu’elle passe
complètement à travers le tamis. Transvaser immédiatement
6.4 Micropipettes, d
e 0,2 ml de capacité, graduées en
l’échantillon tamisé dans un récipient étanche à l’air, de capa-
0,001 ml.
cité suffisante, et bien mélanger au moyen d’agitations et de
retournements répétés. Au cours de ces opérations, prendre
6.5 Pipette graduée, de 25 ml de capacité.
toutes précautions utiles en vue.d’éviter une modification de la
teneur en eau du produit.
6.6 Tubes à essais, d’environ 40 ml de capacité, à cols
rodés et munis de bouchons en verre rodés.
8.1.5 Procéder à la détermination (8.5) dés que possible après
la préparation de l’échantillon pour essai.
6.7 Système utomatique, permettant de délivrer 5 ml
d’acide sulfuriqu concentré en moins de 1 s.
8.2 Essai à blanc
Préparer une solution à blanc contenant 0,l + 0,001 g
6.8 Bain d’eau, réglable de 60 à 70 OC.
d’hydrogénocarbonate de sodium ou 0,l -t 0,001 g de triphos-
phate pentasodique, selon le cas, en utilisant le même appareil-
6.9 Photomètre, permettant des mesurages à 490 nm,’
lage, les mêmes réactifs en quantités identiques et le même
équipé de cuves de 1 à 2 cm de parc0 urs optique.
mode opératoire que celui décrit de 8.4.2 à 8.5.1 inclus, mais en
omettant la prise d’essai et les opérations dues à la présence
6.10 Mélangeur, approprié au mélange à l’intérieur des
d’une prise d’essai.
tubes à essais (6.61, avec agitateur résistant aux acides forts.
NOTE - En vue d’obtenir des résultats plus précis, préparer simultané-
ment la solution à blanc, la solution d’essai et les solutions étalons pour
6.11 Dispositif de broyage, permettant, si nécessaire
la courbe d’étalonnage (voir 8.6).
(voir
...

Norme internationale
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Détermination de la teneur en
Caséines et caséinates -
lactose - Méthode photométrique
Caseins and caseinates - Determination of lactose content - Photometric method
Première édition - 1980-10-15
CDU 637.147.2 : 543.42 : 637.145
Réf. no : BO 5548-1980 (F)
iz
Y
Descripteurs : produit agricole, produit laitier, caséine, analyse chimique, dosage,
lactose, analyse spectrophotométrique, préparation de
spécimen d’essai.
Prix basé sur 3 pages

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Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
correspondant. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I’ISO, participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO.
La Norme internationale ISO 5548 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires, et a été soumise aux comités membres en mars 1979.
Les comités membres des pays suivants l’ont approuvée :
Afrique du Sud, Rép. d’ Égypte, Rép. arabe d’ Nouvelle-Zélande
Allemagne, R. F. Espagne Pays-Bas
Australie
Ethiopie Roumanie
Autriche France Royaume-Uni
Belgique Hongrie Tchécoslovaquie
Bulgarie Inde
Thailande
Canada Israël Turquie
Chili Jamahiriya arabe libyenne Yougoslavie
Chypre Kenya
Corée, Rép. de Malaisie
Aucun comité membre ne l’a désapprouvée.
0 Organisation internationale de normalisation, 1980
Imprimé en Suisse

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NORME INTERNATIONALE
Caséines et caséinates - Détermination de la teneur en
lactose - Méthode photométrique
1 Objet et domaine d’application 5 Réactifs
La présente Norme internationale spécifie une méthode photo- Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue.
métrique de détermination de la teneur en lactose et autres L’eau utilisée doit être de l’eau distillée ou de l’eau de pureté au
hydrates de carbone solubles des caséines et caseinates conte- moins équivalente.
nant moins de 20 % d’hydrates de carbone solubles totaux,
5.1 Hydrogénocarbonate de sodium (NaHCO$ (pour
l’analyse des caséines acides).
2 Références
5.2 Triphosphate pentasodique (NasPaOlo) (pour l’analyse
des caséines présures).
ISO/R 707, Lait et produits laitiers - M&ode d’échanttilon-
nage.
5.3 Acide chlorhydrique ou acide sulfurique, solution,
ISO 331011, Tamis de contrôle - Exigences techniques et véri-
C(H~I) ou cW2 H2S04) = 0,l mol/l.
fica tions - Partie I : Toiles métalliques.
5.4 Acide acétique, solution à 100 g/l.
5.5 Ac&ate de sodium, solution,
3 Définition
cKH&OONa) = 1 mol/l.
teneur en lactose des caséines et des caséinates : Teneur
en hydrates de carbone solubles totaux, exprimée en pourcen-
5.6 Phénol, solution à 80 % (mlm).
tage en masse de lactose anhydre, déterminée selon le mode
opératoire décrit dans la présente Norme internationale.
Chauffer un mélange formé de 8 g de phénol et de 2 g d’eau,
jusqu’à obtention d’un mélange homogéne.
5.7 Acide sulfurique, concentré, ~20 1,84 g/ml.
4 Principe
Dissolution d’une prise d’essai
5.8 Lactose, solution à 20 g/l.
a) dans de l’eau chaude, dans le cas des caséinates;
Peser 2,105 i: 0,001 g de lactose monohydraté, correspondant
à 2,00 g de lactose anhydre, dans une fiole jaugée de 100 ml,
b) dans de l’eau chaude additionnée d’hydrogénocarbo-
dissoudre dans de l’eau, compléter au trait repère et bien
nate de sodium, dans le cas des caséines acides;
mélanger.
c) dans de l’eau chaude additionnée de triphosphate pen-
Conserver la solution à 0 OC.
tasodique, dans le cas des caséines présures.
Précipitation de la caséine au moyen d’une solution d’acide
6 Appareillage
acétique et d’acétate de sodium, à pH 4,6, puis filtration pour
obtenir une solution d’hydrates de carbone exempte de protéi-
Matériel courant de laboratoire, et notamment :
nes. Addition d’une solution de phénol et d’acide sulfurique
concentre à une partie aliquote du filtrat provoquant I’appari-
6.1 Balance analytique.
tion d’une coloration proportionnelle à la quantité d’hydrates de
carbone présente, et mesurage photométrique à la longueur
6.2 Fioles coniques, de 100 ml de capacité.
d’onde de 490 nm.

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ISO 55484980 (F)
6.3 Pipettes à un trait, de 1, 2 et 10 ml de capacité.
8.1.4 Dans le cas contraire, broyer cette fraction de 50 g au
moyen du dispositif de broyage (6.11) jusqu’à ce qu’elle passe
complètement à travers le tamis. Transvaser immédiatement
6.4 Micropipettes, d
e 0,2 ml de capacité, graduées en
l’échantillon tamisé dans un récipient étanche à l’air, de capa-
0,001 ml.
cité suffisante, et bien mélanger au moyen d’agitations et de
retournements répétés. Au cours de ces opérations, prendre
6.5 Pipette graduée, de 25 ml de capacité.
toutes précautions utiles en vue.d’éviter une modification de la
teneur en eau du produit.
6.6 Tubes à essais, d’environ 40 ml de capacité, à cols
rodés et munis de bouchons en verre rodés.
8.1.5 Procéder à la détermination (8.5) dés que possible après
la préparation de l’échantillon pour essai.
6.7 Système utomatique, permettant de délivrer 5 ml
d’acide sulfuriqu concentré en moins de 1 s.
8.2 Essai à blanc
Préparer une solution à blanc contenant 0,l + 0,001 g
6.8 Bain d’eau, réglable de 60 à 70 OC.
d’hydrogénocarbonate de sodium ou 0,l -t 0,001 g de triphos-
phate pentasodique, selon le cas, en utilisant le même appareil-
6.9 Photomètre, permettant des mesurages à 490 nm,’
lage, les mêmes réactifs en quantités identiques et le même
équipé de cuves de 1 à 2 cm de parc0 urs optique.
mode opératoire que celui décrit de 8.4.2 à 8.5.1 inclus, mais en
omettant la prise d’essai et les opérations dues à la présence
6.10 Mélangeur, approprié au mélange à l’intérieur des
d’une prise d’essai.
tubes à essais (6.61, avec agitateur résistant aux acides forts.
NOTE - En vue d’obtenir des résultats plus précis, préparer simultané-
ment la solution à blanc, la solution d’essai et les solutions étalons pour
6.11 Dispositif de broyage, permettant, si nécessaire
la courbe d’étalonnage (voir 8.6).
(voir
...

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