ISO 8784-1:2005

Pulp, paper and board — Microbiological examination — Part 1: Total count of bacteria, yeast and mould based on disintegration

ISO 8784-1:2005 specifies a method for determining the total number of colony-forming units of bacteria, yeast and moulds in dry market pulp, paper and paperboard after disintegration. The enumeration relates to specific media. ISO 8784-1:2005 is applicable to most kinds of paper and paperboard, especially those grades intended to come into contact with foodstuffs.

Pâte, papier et carton — Analyse microbienne — Partie 1: Dénombrement total des bactéries, levures et moisissures basé sur la désintégration

L'ISO 8784-1:2005 spécifie une méthode de détermination de la population microbienne des pâtes marchandes sèches, des papiers et des cartons. Le dénombrement utilise des milieux spécifiques. L'ISO 8784-1:2005 s'applique à la plupart des papiers et des cartons, en particulier à ceux de qualités destinées à entrer en contact avec des denrées alimentaires.

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 29-Jun-2005
• Withdrawal Date: 29-Jun-2005
• ICS: 07.100.99 - Other standards related to microbiology
• ICS: 85.040 - Pulps
• ICS: 85.060 - Paper and board
• Technical Committee: ISO/TC 6/SC 2 - Test methods and quality specifications for paper and board
• Drafting Committee: ISO/TC 6/SC 2/WG 26 - Microbiological test methods
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Completion Date: 24-Nov-2014

Relations

• Revised: ISO 8784-1:2014 - Pulp, paper and board — Microbiological examination — Part 1: Enumeration of bacteria and bacterial spores based on disintegration
• Effective Date: 18-Dec-2008
• Revises: ISO 8784-1:1987 - Paper and board — Determination of microbiological properties — Part 1: Total bacterial count
• Effective Date: 15-Apr-2008

Standards Content (Sample)

МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 8784-1
Второе издание
2005-07-01


Бумага, картон и целлюлоза.
Микробиологическое исследование.
Часть 1.
Подсчет общего количества бактерий,
дрожжей и плесени на основе
дезинтеграции
Pulp, paper and board – Microbiological examination –
Part 1:Total count of bacteria, yeast and mould basеd on disintegration



Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочный номер
ISO 8784-1:2005(R)
©
ISO 2005

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 8784-1:2005(R)
Отказ от ответственности при работе в PDF
Настоящий файл PDF может содержать интегрированные шрифты. В соответствии с условиями лицензирования, принятыми
фирмой Adobe, этот файл можно распечатать или смотреть на экране, но его нельзя изменить, пока не будет получена
лицензия на интегрированные шрифты и они не будут установлены на компьютере, на котором ведется редактирование. В
случае загрузки настоящего файла заинтересованные стороны принимают на себя ответственность за соблюдение
лицензионных условий фирмы Adobe. Центральный секретариат ISO не несет никакой ответственности в этом отношении.
Adobe - торговый знак фирмы Adobe Systems Incorporated.
Подробности, относящиеся к программным продуктам, использованные для создания настоящего файла PDF, можно найти в
рубрике General Info файла; параметры создания PDF были оптимизированы для печати. Были приняты во внимание все
меры предосторожности с тем, чтобы обеспечить пригодность настоящего файла для использования комитетами-членами
ISO. В редких случаях возникновения проблемы, связанной со сказанным выше, просьба проинформировать Центральный
секретариат по адресу, приведенному ниже.


ДОКУМЕНТ ОХРАНЯЕТСЯ АВТОРСКИМ ПРАВОМ


© ISO 2005
Все права сохраняются. Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO, которое должно быть получено после запроса о разрешении, направленного по
адресу, приведенному ниже, или в комитет-член ISO в стране запрашивающей стороны.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Опубликовано в Швейцарии

ii © ISO 2005 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 8784-1:2005(R)
Содержание Страница
Предисловие .iv
Введение .v
1 Область применения .1
2 Нормативные ссылки .1
3 Термины и определения .1
4 Принцип.1
5 Субстраты и разбавители.2
6 Оборудование .3
7 Отбор проб.3
8 Приготовление материала для испытания .4
8.1 Определение содержания сухого вещества .4
8.2 Взвешивание .4
9 Методика .4
9.1 Условия .4
9.2 Дигерирование.4
9.3 Культивирование .5
9.4 Инкубация .5
10 Определение количества колоний.5
11 Вычисление и регистрация .5
11.1 Вычисление.5
11.2 Отсутствие колоний.6
11.3 Обработка результатов.6
12 Прецизионность.6
13 Протокол испытания.6
Приложение А (информативное) Жидкость для разбавления .7
Приложение В (информативное) Модель разбавления.8
Библиография.9

© ISO 2005 – Все права сохраняются iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 8784-1:2005(R)
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией национальных
организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных стандартов
обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член, заинтересованный в
деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть представленным в этом
комитете. Международные правительственные и неправительственные организации, имеющие связи с
ISO, также принимают участие в работах. Что касается стандартизации в области электротехники, ISO
работает в тесном сотрудничестве с Международной электротехнической комиссией (IEC).
Проекты международных стандартов разрабатываются по правилам, указанным в Директивах ISO/IEC,
Часть 2.
Главная задача технических комитетов состоит в разработке международных стандартов. Проекты
международных стандартов, принятые техническими комитетами, рассылаются комитетам-членам на
голосование. Их опубликование в качестве международных стандартов требует одобрения, по
меньшей мере, 75 % комитетов-членов, принимающих участие в голосовании.
Обращается внимание на возможность патентования некоторых элементов данного международного
стандарта. ISO не несет ответственности за идентификацию какого-либо или всех таких патентных
прав.
Международный стандарт ISO 8784-1 был подготовлен Техническим комитетом ISO/ТК 6, Бумага,
картон и целлюлоза, Подкомитетом ПК 2, Методы испытания и требования к качеству продукции.
Данное второе издание аннулирует и заменяет первое издание (ISO 8784-1;1987), которое
подверглось техническому пересмотру. Первое издание распространялось только на бумагу и картон,
и только бактериальные колонии были определены. Второе издание распространяется на целлюлозу
(сухую товарную целлюлозу), и также дрожжи и плесень были определены. Условия инкубации были
изменены во втором издании (37 °С, 48 ч для бактерий, 30 °С, 5 дней для дрожжей и плесени) по
сравнению с условиями, установленными в первом издании (30 °С, 72 ч).
ISO 8784 состоит из следующих частей под общим названием Целлюлоза, бумага и картон.
Микробиологическое исследование:
— Часть 1. Подсчет общего количества бактерий, дрожжей и плесени на основе дезинтеграции
— Часть 2. Поверхностный метод для перечисления микробов на картоне
iv © ISO 2005 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 8784-1:2005(R)
Введение
Настоящая часть ISO 8784, которая распространяется на микробиологическое исследование сухой
[1]
товарной целлюлозы, бумаги и картона, в расширительном толковании основана на ISO 4883 , хотя
условия могут являться неидентичными; вместе с тем, она приводит специфическую амплификацию,
где это необходимо. Данная часть предназначена для оценки колониеобразующих единиц (colony-
forming units) (CFU) без каких-либо попыток изолирования видов, имеющих особое значение для
здравоохранения.
По причине точного следования техникам асептических методик воспроизводимые результаты могут
быть получены только квалифицированными микробиологами. Кроме того, в результате привлечения к
работе недостаточно подготовленного персонала может возникнуть опасность для здоровья людей.

© ISO 2005 – Все права сохраняются v

---------------------- Page: 5 ----------------------
МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ ISO 8784-1:2005(R)

Бумага картон и целлюлоза. Микробиологическое
исследование.
Часть 1.
Подсчет общего количества бактерий, дрожжей и плесени
на основе дезинтеграции
1 Область применения
В настоящей части международного стандарта ISO 8784 указан метод определения общего числа
колониеобразующих единиц бактерий, дрожжей и плесени в сухой товарной целлюлозе, бумаге и
картоне после дезинтеграции. Принцип определения связан со специфической средой.
Настоящая часть ISO 8784 распространяется на большинство сортов бумаги и картона, в особенности
на те сорта, которые предназначены для вступления в контакт с пищевыми продуктами.
2 Нормативные ссылки
Следующие нормативные документы являются обязательными для применения с настоящим
международным стандартом. Для жестких ссылок применяются только указанное по тексту издание.
Для плавающих ссылок необходимо использовать самое последнее издание нормативного ссылочного
документа (включая любые изменения).
ISO 186, Бумага и картон. Отбор образцов для определения среднего качества
ISO 287, Бумага и картон. Определение содержания влаги. Метод высушивания в печи
ISO 638, Целлюлоза. Определение содержания сухого вещества
ISO 7213, Целлюлоза. Отбор образцов для испытаний
3 Термины и определения
Исходя из назначения данного документа, применимы следующие термины и определения:
3.1
микробиологический подсчет
microbiological count
число колониеобразующих единиц (CFU), образовавшихся в стандартной культуральной среде после
инкубации при заданных условиях
4 Принцип
Приготовление культуральных планшетов из заданных разбавлений суспензии пробы на заданной
культуральной среде. Для определения бактерий, аэробной инкубации культуральных планшетов в
течение 48 ч при температуре 37 °C. Для определения дрожжей и плесени аэробная инкубация
© ISO 2005 – Все права сохраняются 1

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 8784-1:2005(R)
культуральных планшетов в течение 5 дней при температуре 37 °C. В конце инкубационного периода
определение количества CFU в чашках.
На основании подсчитанных колоний определяется число CFU на грамм пробы.
5 Субстраты и разбавители
Все субстраты и разбавители должны быть соответствующим образом стерилизованы. При
приготовлении питательной среды следует убедиться, что ингредиенты оказались полностью
растворены перед тем, как распределять их по соответствующим емкостям и стерилизацией.
5.1 Питательный субстрат
5.1.1 Триптоноглюкозный агар (TGEA)
Используют TGEA для бактериологического подсчета. Химический состав на литр:
Мясной экстракт 3,0 г
Триптон 5,0 г
Декстроза (d-глюкоза) 1,0 г
Агар
15,0 г
рН готовой среды 7,0
Если TGEA нет в наличии, можно взять агар для подсчета микроорганизмов в чашках (Plate Count
Agar) (PCA). Применение PCA должно быть указано в протоколе испытания. Химический состав среды
из PCA является таким же, как и TGEA, за исключением того, что мясной экстракт (3 г) замещен
дрожжевым экстрактом 2,5 г.
5.1.2 Картофельный агар с декстрозой (PDA)
Используют PDA для бактериологического подсчета. Химический состав на литр:
Картофель, настой из 200 г
Декстроза 20 г
Агар 15 г
рН готовой среды 5,6
Подкисление PDA: Подкисляют среду каплями 10 % стерильной виннокаменной кислоты для
получения рН 3,5 ± 0,1. После добавления виннокаменной кислоты в среду смешивают без
образования пены и приготавливают, как обычно, разлитые чашки. Не нагревают среду после
добавления кислоты, так как нагревание в кислотном состоянии приведен к гидролизу агара и
уничтожит его отверждающие свойства.
При приготовлении дрожжей и плесени часто возникает необходимость в подавлении бактериального
роста путем подкисления среды PDA, и в этой связи рекомендуется, чтобы после стерилизации
реакция среды была доведена до рН (3,5 ± 0,1). Рост бактерий альтернативно может быть заторможен
путем ввода бактерицида. Применение бактерицида должно быть отражено в протоколе испытания.
ПРИМЕЧАНИЕ Триптоноглюкозный агар (TGEA) и картофельный агар с декстрозой (PDA) выпускаются
серийно в обезвоженной форме. При использовании обезвоженной среды следуют инструкциям, указанным на
упаковке.
5.2 Стандартный разбавитель: раствор Ри
...

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 8784-1
Second edition
2005-07-01


Pulp, paper and board — Microbiological
examination —
Part 1:
Total count of bacteria, yeast and mould
based on disintegration
Pâte, papier et carton — Analyse microbienne
Partie 1: Dénombrement total des bactéries, levures et moisissures
basé sur la désintégration




Reference number
ISO 8784-1:2005(E)
©
ISO 2005

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 8784-1:2005(E)
PDF disclaimer
This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but
shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In
downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. The ISO Central Secretariat
accepts no liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.
Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation
parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies. In
the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.


©  ISO 2005
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or
ISO's member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Published in Switzerland

ii © ISO 2005 – All rights reserved

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 8784-1:2005(E)
Contents Page
Foreword. iv
Introduction . v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions. 1
4 Principle. 1
5 Substrates and diluents . 2
6 Equipment . 2
7 Sampling. 3
8 Preparation of the test material. 3
8.1 Determination of dry-matter content . 3
8.2 Weighing. 3
9 Procedure . 4
9.1 Conditions . 4
9.2 Disintegration. 4
9.3 Plating . 4
9.4 Incubation. 5
10 Enumeration of the colonies . 5
11 Calculation and report. 5
11.1 Calculation. 5
11.2 No colonies. 6
11.3 Report . 6
12 Precision. 6
13 Test report . 6
Annex A (informative) Dilution fluid . 7
Annex B (informative) Dilution model . 8
Bibliography . 9

© ISO 2005 – All rights reserved iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 8784-1:2005(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 8784-1 was prepared by Technical Committee ISO/TC 6, Paper, board an pulps, Subcommittee SC 2,
Test methods and quality specifications for paper and board.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 8784-1:1987), which has been technically
revised. The first edition was only applicable to paper and board and only the bacterial colonies were
determined. The second edition is also applicable to pulp (dry market pulp), and yeast and mould as well as
bacteria are determined. The incubation conditions have been changed in the second edition (37 °C, 48 h for
bacteria, 30 °C, 5 days for yeast and mould) compared to the conditions stated in the first edition (30 °C, 72 h).
ISO 8784 consists of the following parts, under the general title Pulp, paper and board — Microbiological
examination:
 Part 1: Total count of bacteria, yeast and mould based on disintegration
 Part 2: Surface method for enumeration of microbes on paperboard
iv © ISO 2005 – All rights reserved

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 8784-1:2005(E)
Introduction
This part of ISO 8784, which deals with the microbiological examination of dry market pulp, paper and
[1]
paperboard, is broadly based on ISO 4833 , although the conditions are not identical: However, it provides
specific amplification where necessary. It is intended for the estimation of colony-forming units, CFU, without
any attempt to isolate species of particular public-health significance.
Because of the exacting techniques required in aseptic procedures, reproducible results can only be secured
by skilled microbiological technicians. In addition, health risks may arise from the employment of inadequately
trained staff.
© ISO 2005 – All rights reserved v

---------------------- Page: 5 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD ISO 8784-1:2005(E)

Pulp, paper and board — Microbiological examination —
Part 1:
Total count of bacteria, yeast and mould based on
disintegration
1 Scope
This part of ISO 8784 specifies a method for determining the total number of colony-forming units of bacteria,
yeast and moulds in dry market pulp, paper and paperboard after desintegration. The enumeration relates to
specific media.
This part of ISO 8784 is applicable to most kinds of paper and paperboard, especially those grades intended
to come into contact with foodstuffs.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 186, Paper and board — Sampling to determine average quality
ISO 287, Paper and board — Determination of moisture content — Oven-drying method
ISO 638, Pulps — Determination of dry matter content
ISO 7213, Pulps — Sampling for testing
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
microbiological count
number of colony-forming units (CFU) formed in a standard culture medium, after incubation under the
conditions specified
4 Principle
Preparation of culture plates from specified dilutions of a suspension of the sample on a specified culture
medium. For the determination of bacteria, aerobic incubation of the culture plates for 48 h at 37 °C. For the
determination of yeast and mould, aerobic incubation of the culture plates for 5 days at 30 °C. At the end of
the incubation time, counting the CFU on the plates.
From the number of colonies counted, the number of CFU per gram of the sample is calculated.
© ISO 2005 – All rights reserved 1

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 8784-1:2005(E)
5 Substrates and diluents
All substrates and diluents shall be appropriately sterilized. When preparing the culture medium, make sure
that the ingredients are completely dissolved prior to dispensing into suitable containers and sterilization.
5.1 Nutrient substrate
5.1.1 Tryptone Glucose Extract Agar (TGEA)
Use TGEA for bacterial counts. Composition per litre:
Beef extract 3,0 g
Tryptone 5,0 g
Dextrose (d-glucose) 1,0 g
Agar 15,0 g
pH of the ready-made medium 7,0
If TGEA is not available, Plate Count Agar (PCA) may be substituted. The use of PCA shall be stated in the
test report. The composition of the PCA medium is the same as TGEA, except that beef extract (3 g) is
substituted with 2,5 g yeast extract.
5.1.2 Potato Dextrose Agar (PDA)
Use PDA for yeast and mould counts. Composition per litre:
Potatoes, infusion from 200 g
Dextrose 20 g
Agar 15 g
pH of the ready-made medium 5,6
Acidification of PDA: Acidify the medium with drops of 10 % sterile tartaric acid to reach a pH of 3,5 ± 0,1.
After adding the tartaric acid to the medium, mix without foaming, and prepare poured plates as usual. Do not
heat the medium after the acid has been added, since heating in the acid state will hydrolyse the agar and
destroy its solidifying properties.
It is frequently desirable in making yeast and mould counts to inhibit bacterial growth by acidifying the PDA
medium, and it is recommended that the reaction of the medium be reduced to pH (3,5 ± 0,1) subsequent to
sterilization. The growth of bacteria can alternatively be inhibited by addition of a bactericide. The use of a
bactericide shall be stated in the test report.
NOTE The Tryptone Glucose Extract Agar (TGEA) and the Potato Dextrose Agar (PDA) are commercially available
in dehydrated form. When using the dehydrated medium, follow the i
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 8784-1
Deuxième édition
2005-07-01


Pâte, papier et carton — Analyse
microbienne —
Partie 1:
Dénombrement total des bactéries,
levures et moisissures basé sur la
désintégration
Pulp, paper and board — Microbiological examination —
Part 1: Total count of bacteria, yeast and mould based on disintegration




Numéro de référence
ISO 8784-1:2005(F)
©
ISO 2005

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 8784-1:2005(F)
PDF – Exonération de responsabilité
Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées
acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO décline toute
responsabilité en la matière.
Adobe est une marque déposée d'Adobe Systems Incorporated.
Les détails relatifs aux produits logiciels utilisés pour la création du présent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info
du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir
l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO. Dans le cas peu probable où surviendrait un problème d'utilisation,
veuillez en informer le Secrétariat central à l'adresse donnée ci-dessous.


©  ISO 2005
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
de l'ISO à l'adresse ci-après ou du comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax. + 41 22 749 09 47
E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Publié en Suisse

ii © ISO 2005 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 8784-1:2005(F)
Sommaire Page
Avant-propos. iv
Introduction . v
1 Domaine d'application. 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions. 1
4 Principe. 1
5 Substrats et diluants . 2
5.1 Substrat nutritif . 2
6 Matériel . 2
7 Échantillonnage . 3
8 Préparation du matériau d'essai . 3
8.1 Détermination de la teneur en matière sèche . 3
8.2 Pesée. 4
9 Mode opératoire . 4
9.1 Conditions . 4
9.2 Désintégration. 4
9.3 Ensemencement . 4
9.4 Incubation. 5
10 Dénombrement des colonies. 5
11 Calcul et expression des résultats. 5
11.1 Calcul . 5
11.2 Absence de colonies . 6
11.3 Rapport . 6
12 Exactitude. 6
13 Rapport d'essai . 6
Annexe A (informative) Liquide de dilution . 7
Annexe B (informative) Modèle de dilution. 8
Bibliographie . 9

© ISO 2005 – Tous droits réservés iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 8784-1:2005(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 8784-1 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 6, Papiers, cartons et pâtes, sous-comité SC 2,
Méthodes d'essais et spécifications de qualité des papiers et cartons.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 8784-1:1987), qui a fait l'objet d'une
révision technique. La première édition n'était applicable qu'aux papiers et cartons et ne permettait de
déterminer que les colonies bactériennes. La seconde édition est également applicable aux pâtes (pâtes
marchandes sèches) et détermine les levures et les moisissures en plus des bactéries. Les conditions
d'incubation ont également été changées dans cette seconde édition (37 °C, 48 h pour les bactéries, 30 °C,
5 jours pour les levures et les moisissures) par rapport à la première édition (30 °C, 72 h).
L'ISO 8784 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Pâte, papier et carton — Analyse
microbienne:
 Partie 1: Dénombrement total des bactéries, levures et moisissures basé sur la désintégration
 Partie 2: Méthode extérieure pour l'énumération des microbes sur le papier cartonné
iv © ISO 2005 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 8784-1:2005(F)
Introduction
La présente partie de l'ISO 8784, qui traite de l'examen microbiologique de la pâte marchande sèche, du
[2]
papier et du carton, est fondée dans ses grandes lignes sur l'ISO 4833 bien que les conditions soient
différentes; elle fournit cependant des précisions particulières lorsque cela s'avère nécessaire. Elle est
destinée à l'estimation du nombre d'unités formant colonies (UFC), sans chercher à isoler des souches ayant
une importance particulière pour la santé publique.
Compte tenu de la précision des techniques exigées dans toute procédure aseptique, des résultats
reproductibles ne peuvent être garantis que par un personnel de laboratoire de microbiologie qualifié. De plus,
des risques pour la santé sont possibles si l'on fait appel à un personnel non qualifié.
© ISO 2005 – Tous droits réservés v

---------------------- Page: 5 ----------------------
NORME INTERNATIONALE ISO 8784-1:2005(F)

Pâte, papier et carton — Analyse microbienne —
Partie 1:
Dénombrement total des bactéries, levures et moisissures basé
sur la désintégration
1 Domaine d'application
La présente partie de l'ISO 8784 spécifie une méthode de détermination de la population microbienne des
pâtes marchandes sèches, des papiers et des cartons. Le dénombrement utilise des milieux spécifiques.
La présente partie de l'ISO 8784 s'applique à la plupart des papiers et des cartons, en particulier à ceux de
qualités destinées à entrer en contact avec des denrées alimentaires.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 287, Papier et carton — Détermination de l'humidité — Méthode par séchage à l'étuve
ISO 638, Pâtes — Détermination de la teneur en matières sèches
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, le terme et la définition suivante s'applique.
3.1
dénombrement microbien
nombre d'unités formant colonies (UFC) qui se sont formées dans un milieu de culture étalon après incubation
dans les conditions fixées
4 Principe
Préparation de boîtes de culture à partir des dilutions indiquées d'une suspension de l'échantillon dans un
milieu de culture spécifié. Incubation aérobie des boîtes de culture pendant 48 h à 37 °C pour la détermination
des bactéries. Incubation aérobie pendant 5 jours à 30 °C pour la détermination des levures et des
moisissures. Calcul du nombre d'unités formant colonies (UFC) sur les boîtes au terme de la phase
d'incubation.
À partir du nombre de colonies comptées, calcul du nombre d'UFC par gramme d'échantillon.
© ISO 2005 – Tous droits réservés 1

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 8784-1:2005(F)
5 Substrats et diluants
Tous les substrats et les diluants doivent être stérilisés de façon adéquate. Au moment de la préparation du
milieu de culture, s'assurer de la complète dissolution de tous les ingrédients avant introduction dans des
flacons appropriés et avant stérilisation.
5.1 Substrat nutritif
5.1.1 Extrait de tryptone-glucose-agar (TGEA)
Utiliser le TGEA pour le dénombrement des bactéries. Composition par litre:
Extrait de bœuf 3,0 g
Tryptone 5,0 g
Dextrose (d-glucose) 1,0 g
Agar 15,0 g
pH du milieu prêt à l'emploi 7,0
En cas d'indisponibilité du TGEA, il est possible de le remplacer par de la gélose PCA (Plate Count Agar).
L'utilisation de gélose PCA doit être notée dans le rapport d'essai. La composition du milieu PCA est identique
à celle du TGEA à l'exception de l'extrait de bœuf (3 g) remplacé par 2,5 g d'extrait de levures.
5.1.2 Gélose dextrosée à l'extrait de pomme de terre (PDA)
Utiliser la PDA pour le dénombrement des levures et des moisissures. Composition par litre:
Pommes de terre (infusion de) 200 g
Dextrose 20 g
Agar 15 g
pH du milieu prêt à l'emploi 5,6
Acidification de la PDA: Acidifier le milieu avec des gouttes d'acide tartrique stérile à 10 % afin d'atteindre un
pH de 3,5 ± 0,1. Après avoir ajouté l'acide tartrique au milieu, mélanger sans faire mousser et préparer les
boîtes destinées à recevoir le mélange en suivant la procédure habituelle. Ne pas faire chauffer le milieu
après l'ajout d'acide car le chauffage en milieu acide entraîne une hydrolyse de l'agar et détruit ainsi ses
propriétés de solidification.
Il est souvent souhaitable dans le calcul de levures et de moisissures, d'empêcher le développement de
bactéries par l'acidification du milieu PDA et il est recommandé de réduire la réaction du milieu à un pH
(3,5 ± 0,1) après la stérilisation. Le développement de bactéries peut également être freiné par l'ajout d'un
bactéricide. L'utilisation d'un bactéricide doit être notée dans le rapport d'essai.
NOTE L'extrait de tryptone-glucose-agar (TGEA) et la gélose dextrosée à l'extrait de pomme de terre (PDA) existent
dans le commerce sous forme déshydratée. Lors de l'utilisation du milieu déshydraté, suivre les instructions inscrites sur
le flacon.
5.2 Diluant étalon: Il est préférable d'utiliser la solution de Ringer (voir A.1) mais toute autre solution
isotonique peut être employée. Des comprimés de solution de Ringer existent dans le commerce.
Pour faciliter la libération des cellules par les fibres, il est recommandé d'ajouter 20 µl de Tween 80 (voir A.2)
par litre à la solution de Ringer avant stérilisation.
6 Matériel
Tout matériel en
...