ISO 23275-2:2006

Animal and vegetable fats and oils — Cocoa butter equivalents in cocoa butter and plain chocolate — Part 2: Quantification of cocoa butter equivalents

ISO 23275-2:2006 specifies a procedure for the quantification of cocoa butter equivalents (CBEs) in cocoa butter and plain chocolate by high-resolution capillary gas chromatography (HR-GC) of triacylglycerols, and subsequent data evaluation by partial least squares regression analysis.

Corps gras d'origines animale et végétale — Équivalents au beurre de cacao dans le beurre de cacao et dans le chocolat de ménage — Partie 2: Quantification des équivalents au beurre de cacao

L'ISO 23275-2:2006 spécifie un mode opératoire permettant la quantification des équivalents au beurre de cacao (EBC) dans le beurre de cacao (BC) et le chocolat de ménage par analyse chromatographique en phase gazeuse/liquide capillaire haute résolution (HR-GC) des triacylglycérols, et l'évaluation ultérieure des données par analyse de régression par la méthode des moindres carrés partiels.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 19-Oct-2006
• ICS: 67.190 - Chocolate
• ICS: 67.200.10 - Animal and vegetable fats and oils
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 11 - Animal and vegetable fats and oils
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 11 - Animal and vegetable fats and oils
• Current Stage: 9093 - International Standard confirmed
• Completion Date: 16-Jun-2020

Standards Content (Sample)

МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 23275-2
Первое издание
2006-11-01

Жиры и масла животные и
растительные. Эквиваленты масла
какао в масле какао и обыкновенном
шоколаде.
Часть 2.
Определение количества эквивалентов
масла какао
Animal and vegetable fats and oils — Cocoa butter equivalents in cocoa
butter and plain chocolate —
Part 2: Quantification of cocoa butter equivalents




Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочный номер
ISO 23275-2:2006(R)
©
ISO 2006

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 23275-2:2006(R)
Отказ от ответственности при работе в PDF
Настоящий файл PDF может содержать интегрированные шрифты. В соответствии с условиями лицензирования, принятыми
фирмой Adobe, этот файл можно распечатать или вывести на экран, но его нельзя изменить, пока не будет получена
лицензия на загрузку интегрированных шрифтов в компьютер, на котором ведется редактирование. В случае загрузки
настоящего файла заинтересованные стороны принимают на себя ответственность за соблюдение лицензионных условий
фирмы Adobe. Центральный секретариат ISO не несет никакой ответственности в этом отношении.
Adobe торговый знак фирмы Adobe Systems Incorporated.
Подробности, относящиеся к программным продуктам, использованным для создания настоящего файла PDF, можно найти в
рубрике General info файла; параметры создания PDF были оптимизированы для печати. Были приняты во внимание все
меры предосторожности с тем, чтобы обеспечить пригодность настоящего файла для использования комитетами-членами
ISO. В редких случаях возникновения проблемы, связанной со сказанным выше, просьба проинформировать Центральный
секретариат по адресу, приведенному ниже.


ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ


©  ISO 2006
Все права сохраняются. Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO по соответствующему адресу, указанному ниже, или комитета-члена ISO в стране
запрашивающей стороны.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Опубликовано в Швейцарии

ii © ISO 2006 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 23275-2:2006(R)
Содержание Страница
Предисловие .iv
Введение .v
1  Область применения .1
2  Термины и определения .1
3  Принцип.2
4  Реагенты и материалы .2
5  Аппаратура.2
6  Отбор проб.3
7  Приготовление образца для испытания.3
7.1  Приготовление CRM масла какао для целей калибровки и проверки пригодности
системы.3
7.2  Приготовление образца шоколада .3
8  Процедура.3
8.1  Экстракция жира.3
8.2  Разделение индивидуальных триацилглицеринов методом HR-GC.4
8.3  Идентификация.4
9  Вычисление.5
9.1  Определение коэффициентов чувствительности.5
9.2  Вычисление процентного содержания триацилглицеринов.5
9.3  Вычисление содержания CBE в масле какао .5
9.4  Вычисление содержания CBE в шоколаде .6
10  Процедурные требования .6
10.1  Общие вопросыl .6
10.2  Пригодность системы .6
11  Прецизионность.7
11.1  Межлабораторное испытание.7
11.2  Повторяемость .7
11.3  Воспроизводимость .7
12  Протокол испытания.7
Приложение А (информативное) Результаты межлабораторного испытания .8
Библиография.13

© ISO 2006 – Все права сохраняются iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 23275-2:2006(R)
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией национальных
организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных стандартов
обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член, заинтересованный в
деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть представленным в
этом комитете. Международные правительственные и неправительственные организации, имеющие
связи с ISO, также принимают участие в работах. Что касается стандартизации в области
электротехники, ISO работает в тесном сотрудничестве с Международной электротехнической
комиссией (IEC).
Проекты международных стандартов разрабатываются по правилам, указанным в Директивах ISO/IEC,
Часть 2.
Главная задача технических комитетов состоит в разработке международных стандартов. Проекты
международных стандартов, принятые техническими комитетами, рассылаются комитетам-членам на
голосование. Их опубликование в качестве международных стандартов требует одобрения, по
меньшей мере, 75 % комитетов-членов, принимающих участие в голосовании.
Обращается внимание на возможность патентования некоторых элементов данного международного
стандарта. ISO не несет ответственности за идентификацию какого-либо или всех таких патентных
прав.
ISO 23275-2 был подготовлен Техническим комитетом ISO/TC 34, Пищевые продукты, Подкомитетом
SC 5, Молоко и молочные продукты.
ISO 23275 состоит из следующих частей под общим названием Жиры и масла животные и
растительные. Эквиваленты масла какао в масле какао и обыкновенном шоколаде:
⎯ Часть 1. Определение наличия эквивалентов масла какао
⎯ Part 2. Определение количества эквивалентов масла какао
iv © ISO 2006 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 23275-2:2006(R)
Введение
“Эквиваленты масла какао”– это общий термин для жиров, используемых для замены масла какао в
шоколаде. Они имеют очень близкое сходство по химическому составу и физическим свойствам с
маслом какао, что сильно затрудняет их количественное определение и в некоторых случаях даже их
обнаружение. В принципе, эквиваленты масло какао должны быть по определению жирами,
содержание которых является низким в лауриновой кислоте и высоким в симметричных
мононенасыщенных триацилглицеринах типа 1,3-дипалмитоил-2-олеоилглицерин, 1-палмитоил-2-
олеоил-3-стеароилглицерин и 1,3-дистеароил-2-олеилглицерин, которые смешаны с маслом какао и
получаются только очисткой и фракционированием.
В пределах Европейского союза следующие растительные жиры, полученные из перечисленных ниже
[1]
растений, можно использовать по отдельности или в смесях согласно Директиве 2000/36/EC :
⎯ орех бассия, борнейское сало или тенгкаванг (Shorea spp.),
⎯ пальмовое масло (Elaeis guineensis, Elaeis olifera),
⎯ сал (Shorea robusta),
⎯ масляное дерево (Butyrospermum parkii),
⎯ масло гарцинии индийской (Garcinia indica) и
⎯ косточка манго (Mangifera indica).
ISO 23275-1 устанавливает процедуру для обнаружения этих жиров (ограничения сделаны только для
образцов чистого жира ореха бассия) в масле какао и обыкновенном шоколаде. Эта часть ISO 23275
устанавливает процедуру для достоверного количественного определения этих жиров при
[1]
концентрации 5 % в соответствии с установленным пределом в Директиве 2000/36/EC
Европарламента и Совета.
Для помощи в использовании обеих частей ISO 23275 был создан аналитический инструментарий под
названием “CoCal-1. “CoCal-1” содержит достоверные методы для обнаружения (часть 1) и
количественного определения (часть 2) CBEs в обыкновенном шоколаде, а также сертифицированный
эталонный материал масла какао (IRMM-801), применяемый для калибровки аналитических приборов,
и электронный оценочный бланк для Microsoft Excel®, чтобы вычислить окончательный результат.
Аналитику, работающему над обнаружением CBE и их количественным определением, придется
только калибровать газохроматографическую систему разделения с использованием IRMM-801,
разделять триглицеридовые фракции рассматриваемого образца и использовать электронный
оценочный бланк для последующей обработки данных в целях обнаружения и количественного
определения CBEs.
© ISO 2006 – Все права сохраняются v

---------------------- Page: 5 ----------------------
МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ ISO 23275-2:2006(R)

Жиры и масла животные и растительные. Эквиваленты
масла какао в масле какао и обыкновенном шоколаде.
Часть 2.
Определение количества эквивалентов масла какао
1 Область применения
Эта часть ISO 23275 устанавливает процедуру для количественного определения эквивалентов масла
какао (CBEs) в масле какао (CB) и обыкновенном шоколаде методом высокоразрешающей
капиллярной газожидкостной хроматографии (HR-GC) триацилглицеринов и последующей оценки
данных посредством регрессионного анализа с частичным применением метода наименьших
квадратов.
ПРИМЕЧАНИЕ Наличие CBEs в CB и обыкновенном шоколаде ниже уровня 0,6 % (предполагаемое
содержание жира в шоколаде 30 %) можно определить, используя процедуру, описанную в ISO 23275-1. Различия
в процедуре двух методов состоят в количестве отдельных триацилгицеринов, применяемых для обработки
данных, и в принципе математической оценки данных. Наличие CBEs определяют методом линейной регрессии,
применяемой к относительным пропорциям трех основных триацилглицериновых фракций анализируемого жира.
Количество примеси CBE оценивают регрессионным анализом с частичным методом наименьших квадратов,
применяемым к относительным пропорциям пяти основных триацилглицеринов.
2 Термины и определения
Применительно к этому документу используются следующие термины и определения.
2.1
эквиваленты масла какао
cocoa butter equivalents
CBEs
жиры, обнаруживаемые в масле какао и обыкновенном шоколаде
2.2
содержание СВЕ в масле какао
CBE content of cocoa butter
массовая доля веществ в масле какао, определенная, методом, установленным в этой части
ISO 23275
ПРИМЕЧАНИЕ Оно выражается в граммах на 100 г масла какао.
2.3
содержание CBE в шоколаде
CBE content of chocolate
Массовая доля веществ в шоколаде, определенная методом, установленным в этой части ISO 23275
ПРИМЕЧАНИЕ Оно выражается в граммах на 100 г шоколада.
© ISO 2006 – Все права сохраняются 1

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 23275-2:2006(R)
3 Принцип
Масло какао, или жир, полученный из обыкновенного шоколада, разделяют методом HR-GC на
триацилглицериновые фракции согласно их молекулярной массе и степени ненасыщенности.
Добавленное количество CBEs оценивают посредством регрессионного анализа с частичным методом
наименьших квадратов, применяемого к отдельным триацилглицериновым фракциям анализируемого
образца.
4 Реагенты и материалы
Используют только реагенты признанной аналитической чистоты, если нет других указаний.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ — Обращается внимание на регламент, который устанавливает правила
обращения с опасными веществами. Должны соблюдаться технические, организационные и
индивидуальные меры безопасности.
[2]
4.1 Сертифицированный эталонный материал масла какао (CRM) IRMM-801 , для целей
калибровки и проверки пригодности системы.
4.2 Растворитель жира, нехлорированные растворители (например, диэтиловый эфир, n-гептан,
изооктан).
4.3 Соляная кислота, c = 8 моль/л.
1)
4.4 Гофрированная фильтровальная бумага ,15 см.
5 Аппаратура
5.1 Аналитические весы, считываемость 0,1 мг.
5.2 Сушильный шкаф, поддерживаемый при 55 °C.
Можно использовать блок сухого подогревателя.
5.3 Пищевая терочная машина, т.е. кухонный блендер, конструкция которого характеризуется
2)
установкой двигателя над приемным контейнером для избежания расплавления образцов .
5.4 Мерные колбы, емкостью 20 мл.
5.5 Пипетки, емкостью 1 мл.
5.6 Микрошприц, с максимальным объемом 10 мкл, градуированный до 0,1 мкл, или
автоматический пробоотборник.
5.7 Газовый хроматограф (GC), оснащенный встроенной в колонку холодной инжекционной
системой и пламенно-ионизационным детектором (FID).
Можно использовать альтернативные инжекционные системы [например, щелевой инжектор,
испаритель с программируемой температурой (PTV) или инжектор с движущейся иглой], при условии
что получаются такие же результаты, как указано в 10.2.

1) Гофрированная фильтровальная бумага средних сортов S&S 589 является примером подходящего продукта,
имеющегося в продаже.
2) Philips HR2833 является примером подходящего оборудования, имеющегося в продаже.
Эта информация дается для удобства пользователей этой части ISO 23275 и не является рекомендацией ISO для
этого продукта.
2 © ISO 2006 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 23275-2:2006(R)
Разделение и количественное определение будут удовлетворительными, если соблюдаются
следующие экспериментальные условия:
⎯ GC колонка: длина 25 м - 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм, кварцевое стекло, покрытое
термостойким 50-% фенилметилполисилоксаном с толщиной пленки от 0,1 мкм до 0,15 мкм.
⎯ программирование температуры: 100 °C (начальная температура), программируемая скорость
изменения 30 °C/мин до получения 340 °C (окончательная температура).
⎯ транспортирующий газ: гелий или водород (чистота W 99,999 %).
ПРИМЕЧАНИЕ Подходящие колонки и альтернативные экспериментальные условия, применяемые в
международном совместном исследовании, приведены в Приложении А. Рабочие условия можно изменять для
получения оптимального разделения триацилглицеринов в масле какао.
5.8 Хроматографическая система данных.
5.9 Экстрактор Сокслета, стандартные соединения с конусной нарезкой, емкость сифона
приблизительно 100 мл (экстракционный наконечник 33 мм × 88 мм), колба Эрленмейера емкостью
250 мл и кожух регулируемого нагрева.
6 Отбор проб
В лабораторию должна быть отправлена представительная проба. Ее следует оберегать от
повреждений или изменений во время транспортировки или хранения.
Отбор проб не является частью метода, установленного в этой части ISO 23275. Рекомендованный
метод отбора проб дан в ISO 5555.
7 Приготовление образца для испытания
7.1 Приготовление CRM масла какао для целей калибровки и проверки пригодности
системы
Перед вскрытием и использованием CRM масла какао (4.1) ампулу следует нагревать в сушильном
шкафу (5.2), пока ее содержимое не будет расплавлено. Когда получен прозрачный раствор,
содержимое перемешивают, многократно переворачивая ампулу не менее чем 20 с. Затем открывают
ампулу и переводят содержимое в чистую бутылочку, которую можно герметически закрыть и хранить
в прохладном месте для будущего использования.
7.2 Приготовление образца шоколада
Охлаждают приблизительно. 200 г шоколада до затвердения и трут до мелкозернистого состояния,
используя механическое устройство (5.3). Тщательно перемешивают и хранят в закупоренной бутылке
в холодном месте.
8 Процедура
8.1 Экстракция жира
8.1.1 Выделяют жир и определяют содержание жира в образце шоколада (приготовленного, как
[3]
описано в 7.2) экстракцией Сокслета следующим образом. Отвешивают 4 г - 5 г шоколада в колбу
емкостью 300 мл - 500 мл. Медленно добавляют, помешивая, 45 мл кипящей воды, чтобы получить
однородную суспензию. Добавляют 55 мл HCl (4.3) и немного обезжиренной кипящей стружки или
другого средства против бурления и перемешивают. Закрывают часовым стеклом, медленно доводят
раствор до кипения и медленно кипятят в течение 15 мин. Промывают часовое стекло в 100 мл воды.
Фильтруют вываренный раствор через гофрированную фильтровальную бумагу средних сортов (4.4),
© ISO 2006 – Все права сохраняются 3

---------------------- Page: 8 ----------------------
ISO 23275-2:2006(R)
или аналогичную, промывая колбу три раза водой. Продолжают промывку до тех пор, пока в последней
порции фильтрата не будет хлора. Переносят фильтр с образцом в обезжиренный экстракционный
наконечник и сушат 2 ч в небольшой колбе при 100 °C. Помещают тампон из стекловаты над
фильтровальной бумагой.
Добавляют немного обезжиренной стружки против бурления в колбу Эрленмейера емкостью 250 мл и
сушат в течение 1 ч при 100 °C. Охлаждают колбу до комнатной температуры в эксикаторе, затем
взвешивают. Помещают наконечник, содержащий высушенный образец, в аппарат Сокслета (5.9),
поддерживающий его спиралью или стеклянными бусами. Промывают выварную колбу, сушильную
колбу и часовое стекло тремя порциями петролейного эфира по 50 мл, и добавляют остаток промывки
в наконечник. Орошают вываренный образец в течение 4 ч, регулируя те
...

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 23275-2
First edition
2006-11-01

Animal and vegetable fats and oils —
Cocoa butter equivalents in cocoa butter
and plain chocolate —
Part 2:
Quantification of cocoa butter
equivalents
Corps gras d'origines animale et végétale — Équivalents au beurre
de cacao dans le beurre de cacao et dans le chocolat de ménage —
Partie 2: Quantification des équivalents au beurre de cacao




Reference number
ISO 23275-2:2006(E)
©
ISO 2006

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 23275-2:2006(E)
PDF disclaimer
This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but
shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In
downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. The ISO Central Secretariat
accepts no liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.
Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation
parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies. In
the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.


©  ISO 2006
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or
ISO's member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Published in Switzerland

ii © ISO 2006 – All rights reserved

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 23275-2:2006(E)
Contents Page
Foreword. iv
Introduction . v
1 Scope .1
2 Terms and definitions .1
3 Principle.1
4 Reagents and materials .2
5 Apparatus .2
6 Sampling.3
7 Preparation of test sample.3
7.1 Preparation of cocoa butter CRM for calibration purposes and system suitability check.3
7.2 Preparation of chocolate sample .3
8 Procedure .3
8.1 Fat extraction .3
8.2 Separation of individual triacylglycerols by HR-GC .4
8.3 Identification.4
9 Calculation.4
9.1 Determination of response factors .4
9.2 Calculation of percentages of triacylglycerols.5
9.3 Calculation of CBE content in cocoa butter .5
9.4 Calculation of CBE content in chocolate .6
10 Procedural requirements .6
10.1 General.6
10.2 System suitability .6
11 Precision.6
11.1 Interlaboratory test .6
11.2 Repeatability.7
11.3 Reproducibility.7
12 Test report .7
Annex A (informative) Results of interlaboratory test.8
Bibliography .13

© ISO 2006 – All rights reserved iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 23275-2:2006(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 23275-2 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 11, Animal
and vegetable fats and oils.
ISO 23275 consists of the following parts, under the general title Animal and vegetable fats and oils — Cocoa
butter equivalents in cocoa butter and plain chocolate:
⎯ Part 1: Determination of the presence of cocoa butter equivalents
⎯ Part 2: Quantification of cocoa butter equivalents
iv © ISO 2006 – All rights reserved

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 23275-2:2006(E)
Introduction
“Cocoa butter equivalents” is the general term for fats used to replace cocoa butter in chocolate. They
resemble the chemical composition and physical properties of cocoa butter very closely, making them
therefore extremely difficult to quantify and even in some cases to detect. In principle, cocoa butter
equivalents must by definition be fats low in lauric acid, rich in symmetrical mono-unsaturated triacylglycerols
of the type 1,3-dipalmitoyl-2-oleoylglycerol, 1-palmitoyl-2-oleoyl-3-stearoylglycerol and 1,3-distearoyl-2-
oleoylglycerol, miscible with cocoa butter, and obtained only by refining and fractionation.
Within the European Union, the following vegetable fats, obtained from the plants listed below, may be used
[1]
singly or in blends, according to Directive 2000/36/EC :
⎯ illipé, Borneo tallow or tengkawang (Shorea spp.),
⎯ palm oil (Elaeis guineensis, Elaeis olifera),
⎯ sal (Shorea robusta),
⎯ shea (Butyrospermum parkii),
⎯ kokum gurgi (Garcinia indica), and
⎯ mango kernel (Mangifera indica).
ISO 23275-1 specifies a procedure for the detection of these fats (restrictions are only made for pure illipé fat
samples) in cocoa butter and plain chocolate. This part of ISO 23275 specifies a procedure allowing a reliable
quantification of these fats at the level of 5 %, complying with the statutory limit laid down in Directive
[1]
2000/36/EC of the European Parliament and the Council.
To facilitate the usage of both parts of ISO 23275, an analytical toolbox named “CoCal-1” has been
established. “CoCal-1” contains the validated methods for detection (part 1) and quantification (part 2) of
CBEs in plain chocolate, and also a certified cocoa butter reference material (IRMM-801) to calibrate the
analyst’s instruments and an electronic evaluation sheet for Microsoft Excel® to calculate the final result. An
analyst working on CBE detection and quantification has only to calibrate the gas chromatographic separation
system using IRMM-801, separate the triglyceride fractions of the sample in question, and use the electronic
evaluation sheet for subsequent data treatment to detect and quantify CBEs.
© ISO 2006 – All rights reserved v

---------------------- Page: 5 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD ISO 23275-2:2006(E)

Animal and vegetable fats and oils — Cocoa butter equivalents
in cocoa butter and plain chocolate —
Part 2:
Quantification of cocoa butter equivalents
1 Scope
This part of ISO 23275 specifies a procedure for the quantification of cocoa butter equivalents (CBEs) in
cocoa butter (CB) and plain chocolate by high-resolution capillary gas chromatography (HR-GC) of
triacylglycerols, and subsequent data evaluation by partial least-squares regression analysis.
NOTE The presence of CBEs in CB and plain chocolate down to a level of 0,6 % (fat content of chocolate assumed
to be 30 %) can be determined by using the procedure explained in ISO 23275-1. Differences in the procedure of the two
methods exist in the number of individual triacylglycerols used for data treatment and in the mathematical evaluation
principle of the data. The presence of CBEs is detected by linear regression analysis applied to the relative proportions of
the three main triacylglycerol fractions of the fat analysed. The amount of the CBE admixture is estimated by partial least
squares regression analysis applied to the relative proportions of the five main triacylglycerols.
2 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
2.1
cocoa butter equivalents
CBEs
fats detected in cocoa butter and plain chocolate
2.2
CBE content of cocoa butter
mass fraction of substances in cocoa butter determined by the procedure specified in this part of ISO 23275
NOTE It is expressed in grams per 100 g of cocoa butter.
2.2
CBE content of chocolate
mass fraction of substances in chocolate determined by the procedure specified in this part of ISO 23275
NOTE It is expressed in grams per 100 g of chocolate.
3 Principle
Cocoa butter, or the fat obtained from plain chocolate, is separated by HR-GC into triacylglycerol fractions
according to their molecular mass and degree of unsaturation. The added amount of CBEs is estimated by
partial least squares regression analysis applied to individual triacylglycerol fractions of the fat analysed.
© ISO 2006 – All rights reserved 1

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 23275-2:2006(E)
4 Reagents and materials
Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise stated.
WARNING — Attention is drawn to the regulations which specify the handling of dangerous matter.
Technical, organizational and personal safety measures shall be followed.
[2]
4.1 Cocoa butter Certified Reference Material (CRM) IRMM-801 , for calibration purposes and system
suitability check.
4.2 Fat solvent, non-chlorinated solvents (e.g. diethyl ether, n-heptane, iso-octane).
4.3 Hydrochloric acid, c = 8 mol/l.
1)
4.4 Fluted filter paper ,15 cm.
5 Apparatus
5.1 Analytical balance, with a readability of 0,1 mg.
5.2 Drying oven, maintained at 55 °C.
A dry heater block may be used.
5.3 Food grater, a kitchen blender with a design featuring the motor above the receiving container to avoid
2)
melting the samples .
5.4 Volumetric flasks, of capacity 20 ml.
5.5 Pipettes, of capacity 1 ml.
5.6 Microsyringe, with maximum volume 10 µl, graduated to 0,1 µl, or automatic sampler.
5.7 Gas chromatograph (GC), fitted with a cold on-column injection system and a flame ionization detector
(FID).
Alternative injection systems [e.g. a split injector, a programmed-temperature vaporizer (PTV) or a moving-
needle injector] may be used provided the same results are obtained as indicated in 10.2.
The separation and quantification have proven to be satisfactory if the following experimental conditions are
followed:
⎯ GC column: 25 m to 30 m length, with 0,25 mm i.d., fused silica coated with thermostable 50 %
phenylmethylpolysiloxane to a film thickness of 0,1 µm to 0,15 µm.
⎯ temperature programme: 100 °C (initial temperature), programme rate 30 °C/min to 340 °C (final
temperature).
⎯ carrier gas: helium or hydrogen (purity W 99,999 %).

1) S&S 589 medium filter paper is an example of a suitable product available commercially.
2) Philips HR2833 is an example of suitable equipment commercially available.
This information is given for the convenience of the users of this part of ISO 23275 and does not constitute an
endorsement by ISO of these products.
2 © ISO 2006 – All rights reserved

---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 23275-2:2006(E)
NOTE Suitable columns and alternative experimental conditions, used in an international collaborative study, are
listed in Annex A. Operating conditions may be changed to obtain optimum separation of cocoa butter triacylglycerols.
5.8 Chromatographic data system.
5.9 Soxhlet extractor, with standard taper joints, siphon capacity ca. 100 ml (33 mm × 88 mm extraction
thimble), 250 ml Erlenmeyer flask, and regulated heating mantle.
6 Sampling
A representative sample should have been sent to the laboratory. It should not have been damaged or
changed during transport or storage.
Sampling is not part of the method specified in this part of ISO 23275. A recommended sampling method is
given in ISO 5555.
7 Preparation of test sample
7.1 Preparation of cocoa butter CRM for calibration purposes and system suitability check
Before opening and using the cocoa butter CRM (4.1), the ampoule shall be warmed in a drying oven (5.2)
until the contents have melted. When a clear solution is obtained, mix the contents by repeated inversion for
not less than 20 s. Then open and transfer the contents to a clean vial, which can be tightly sealed and
preserved in a cool place for future usage.
7.2 Preparation of chocolate sample
Chill approx. 200 g of chocolate until hard, and grate to fine granular condition using a mechanical device (5.3).
Mix thoroughly and preserve in tightly stoppered bottle in a cool place.
8 Procedure
8.1 Fat extraction
8.1.1 Separate the fat and determine the fat content in a sample of chocolate (prepared as described in 7.2)
[3]
by Soxhlet extraction , as follows. Weigh 4 g to 5 g of chocolate into a 300 ml to 500 ml beaker. Add slowly,
while stirring, 45 ml of boiling water to obtain a homogeneous suspension. Add 55 ml of HCl (4.3) and a few
defatted boiling chips, or other antibumping agent, and stir. Cover with a watch glass, bring the solution slowly
to the boil, and boil gently for 15 min. Rinse the watch glass with 100 ml of water. Filter digest the solution
through a medium fluted filter paper (4.4), or equivalent, rinsing the beaker three times with water. Continue
washing until last portion of filtrate is chlorine-free. Transfer the filter with the sample to a defatted extraction
thimble and dry for 2 h in a small beaker at 100 °C. Place a glass wool plug over the filter paper.
Add a few defatted antibumping chips to a 250 ml Erlenmeyer flask and dry for 1 h at 100 °C. Cool the flask to
room temperature in a desiccator then weigh it. Place the thimble containing the dried sample in the Soxhlet
apparatus (5.9), supporting it with spiral or glass beads. Rinse the digestion beaker, drying beaker and watch
glass with three 50 ml portions of petroleum ether, and add the washings to the thimble. Reflux the digested
sample for 4 h, adjusting the heat so that the extractor siphons >30 times. Remove the flask and evaporate
the solvent. Dry the flask at 102 °C to constant mass (1,5 h). Cool in the desiccator to room temperature then
weigh. Constant mass is attained when successiv
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 23275-2
Première édition
2006-11-01


Corps gras d'origines animale et
végétale — Équivalents au beurre de
cacao dans le beurre de cacao et dans
le chocolat de ménage —
Partie 2:
Quantification des équivalents au beurre
de cacao
Animal and vegetable fats and oils — Cocoa butter equivalents in cocoa
butter and plain chocolate —
Part 2: Quantification of cocoa butter equivalents




Numéro de référence
ISO 23275-2:2006(F)
©
ISO 2006

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 23275-2:2006(F)
PDF – Exonération de responsabilité
Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées
acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO décline toute
responsabilité en la matière.
Adobe est une marque déposée d'Adobe Systems Incorporated.
Les détails relatifs aux produits logiciels utilisés pour la création du présent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info
du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir
l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO. Dans le cas peu probable où surviendrait un problème d'utilisation,
veuillez en informer le Secrétariat central à l'adresse donnée ci-dessous.


©  ISO 2006
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
de l'ISO à l'adresse ci-après ou du comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax. + 41 22 749 09 47
E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Publié en Suisse

ii © ISO 2006 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 23275-2:2006(F)
Sommaire Page
Avant-propos. iv
Introduction . v
1 Domaine d'application. 1
2 Termes et définitions . 1
3 Principe . 2
4 Réactifs et matériaux. 2
5 Appareillage. 2
6 Échantillonnage . 3
7 Préparation de l’échantillon pour essai. 3
7.1 Préparation du MRC beurre de cacao pour étalonnage et vérification de l’aptitude du
système. 3
7.2 Préparation de l’échantillon de chocolat. 3
8 Mode opératoire . 3
8.1 Extraction de la matière grasse. 3
8.2 Séparation des triacylglycérols individuels par HR-GC . 4
8.3 Identification. 5
9 Calculs. 5
9.1 Détermination des facteurs de réponse . 5
9.2 Calcul des pourcentages des triacylglycérols. 5
9.3 Calcul de la teneur en EBC dans le beurre de cacao . 6
9.4 Calcul de la teneur en EBC dans le chocolat.6
10 Exigences du mode opératoire. 6
10.1 Généralités. 6
10.2 Aptitude du système. 7
11 Fidélité. 7
11.1 Essai interlaboratoires . 7
11.2 Répétabilité. 7
11.3 Reproductibilité. 7
12 Rapport d’essai . 8
Annexe A (informative) Résultats d'un essai interlaboratoires . 9
Bibliographie . 14

© ISO 2006 – Tous droits réservés iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 23275-2:2006(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 23275-2 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 11,
Corps gras d'origines animale et végétale.
L'ISO 23275 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Corps gras d'origines animale et
végétale — Équivalents au beurre de cacao dans le beurre de cacao et dans le chocolat de ménage:
⎯ Partie 1: Détermination de la présence d'équivalents au beurre de cacao
⎯ Partie 2: Quantification des équivalents au beurre de cacao
iv © ISO 2006 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 23275-2:2006(F)
Introduction
L’expression «équivalents au beurre de cacao» est l’expression générale désignant les matières grasses
employées pour remplacer le beurre de cacao dans le chocolat. Leur composition chimique et leurs propriétés
physiques ressemblent très fortement à celles du beurre de cacao, ce qui les rend extrêmement difficiles à
quantifier et même, dans certains cas, à détecter. En principe, les équivalents au beurre de cacao doivent par
définition être des matières grasses pauvres en acide laurique, riches en triacylglycérols monoinsaturés
symétriques de type 1,3-dipalmitoyl-2-oléoyl-glycérol, 1-palmitoyl-2-oléoyl-3-stéaroyl-glycérol et
1,3-distéaroyl-2-oléoyl-glycérol, miscibles avec le beurre de cacao, et obtenues uniquement par raffinage et
fractionnement.
Dans l’Union Européenne, les matières grasses végétales suivantes, obtenues à partir des plantes
énumérées ci-dessous, peuvent être utilisées isolément ou en mélanges, conformément à la
[1]
Directive 2000/36/CE :
⎯ illipé, suif de Bornéo ou tengkawang (Shorea spp.),
⎯ huile de palme (Elaeis guineensis, Elaeis olifera),
⎯ sal (Shorea robusta),
⎯ karité (Butyrospermum parkii),
⎯ kokum gurgi (Garcinia indica), et
⎯ noyaux de mangue (Mangifera indica).
L'ISO 23275-1 spécifie un mode opératoire pour la détection de ces matières grasses (seules existent des
restrictions pour les échantillons de graisse d’illipé pure) dans le beurre de cacao et dans le chocolat de
ménage. La présente partie de l'ISO 23275 spécifie un mode opératoire permettant de réaliser une
quantification fiable de ces matières grasses au taux de 5 %, valeur conforme à la limite statutaire fixée par la
[1]
Directive 2000/36/CE du Parlement européen et du Conseil.
Pour faciliter l’utilisation de ces deux parties de l'ISO 23275, une boîte à outils d’analyse, nommée «CoCal-1»,
a été créée. «CoCal-1» contient, en tête des méthodes validées de détection (partie 1) et de quantification
(partie 2) des équivalents au beurre de cacao dans le chocolat de ménage, un matériau de référence certifié
de beurre de cacao (IRMM-801) permettant d’étalonner les instruments, et une fiche d’évaluation électronique
Microsoft Excel® permettant de calculer le résultat final. L’analyste chargé de la détection et de la
quantification des équivalents au beurre de cacao n’a plus qu’à étalonner le système de séparation par
chromatographie en phase gazeuse à l’aide du matériau de référence certifié IRMM-801, séparer les fractions
de triglycéride de l’échantillon en question, et utiliser la fiche d’évaluation électronique pour le traitement des
données afin de détecter et de quantifier les équivalents au beurre de cacao.

© ISO 2006 – Tous droits réservés v

---------------------- Page: 5 ----------------------
NORME INTERNATIONALE ISO 23275-2:2006(F)

Corps gras d'origines animale et végétale — Équivalents au
beurre de cacao dans le beurre de cacao et dans le chocolat de
ménage —
Partie 2:
Quantification des équivalents au beurre de cacao
1 Domaine d'application
La présente partie de l'ISO 23275 spécifie un mode opératoire permettant la quantification des équivalents au
beurre de cacao (EBC) dans le beurre de cacao (BC) et le chocolat de ménage par analyse
chromatographique en phase gazeuse/liquide capillaire haute résolution (HR-GC) des triacylglycérols, et
l’évaluation ultérieure des données par analyse de régression par la méthode des moindres carrés partiels.
NOTE La présence d’EBC dans le BC et le chocolat de ménage en une teneur aussi faible que 0,6 % (pour un taux
de matière grasse du chocolat supposé égal à 30 %) peut être déterminée en utilisant le mode opératoire décrit dans la
l'ISO 23275-1. Les différences entre les modes opératoires de l’une et l’autre méthodes résident dans le nombre de
triacylglycérols individuels utilisés lors du traitement des données et dans le principe mathématique auquel il est fait appel
pour l’évaluation des données. La présence d’EBC est détectée par une analyse de régression linéaire effectuée sur les
proportions relatives des trois principales fractions de triacylglycérols issues de la matière grasse analysée. La quantité
d’EBC dans le mélange est estimée par une analyse de régression par la méthode des moindres carrés partiels effectuée
sur les proportions relatives des cinq triacylglycérols principaux.
2 Termes et définitions
Pour les besoins de la présente Norme internationale, les termes et définitions suivants s'appliquent.
2.1
équivalents au beurre de cacao
EBC
matières grasses détectées dans le beurre de cacao et le chocolat de ménage
2.2
teneur en EBC du beurre de cacao
fraction massique de substance déterminée selon la méthode spécifiée dans la présente partie de
l'ISO 23275
NOTE Elle est exprimée en grammes pour 100 g de beurre de cacao.
2.3
teneur en EBC du chocolat
fraction massique de substance déterminée selon la méthode spécifiée dans la présente partie de
l'ISO 23275
NOTE Elle est exprimée en grammes pour 100 g de chocolat.
© ISO 2006 – Tous droits réservés 1

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 23275-2:2006(F)
3 Principe
Le beurre de cacao, ou la matière grasse obtenue à partir de chocolat de ménage, est séparé en fractions de
triacylglycérols par HR-GC en fonction de la masse moléculaire et du degré d’insaturation de ceux-ci. La
quantité ajoutée d’EBC est estimée par une analyse de régression par la méthode des moindres carrés
partiels effectuée sur les fractions de triacylglycérols individuels issus de la matière grasse analysée.
4 Réactifs et matériaux
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue, sauf indication contraire.
AVERTISSEMENT — L’attention des lecteurs est attirée sur les règles qui régissent la manipulation
des produits dangereux. Les mesures de sécurité sur les plans technique, organisationnel et
personnel doivent être suivies.
[2]
4.1 Matériau de Référence Certifié (MRC) beurre de cacao IRMM-801 , pour étalonnage et vérification
de l’aptitude du système.
4.2 Solvant d'extraction, solvants non chlorés (par exemple éther diéthylique, n-heptane, iso-octane).
4.3 Acide chlorhydrique, c = 8 mol/l.
1)
4.4 Papier filtre plissé , 15 cm.
5 Appareillage
5.1 Balance d’analyse, avec une précision de lecture de 0,1 mg.
5.2 Étuve à dessiccation, maintenue à 55 °C
Il est possible d’utiliser un bloc chauffant à chaleur sèche.
5.3 Robot ménager, un appareil de cuisine dont le moteur est situé au-dessus du récipient collecteur afin
2)
d’éviter de faire fondre les échantillons .
5.4 Fioles jaugées, de 20 ml de capacité.
5.5 Pipettes, de 1 ml de capacité.
5.6 Microseringue, volume maximal de 10 µl avec graduations de 0,1 µl, ou échantillonneur
automatique.
5.7 Chromatographe en phase gazeuse (GC), un chromatographe équipé d’un système d’injection à froid
sur colonne et d’un détecteur à ionisation de flamme (FID).
D’autres systèmes d’injection, par exemple un injecteur à débit divisé, un vaporisateur à température
programmée (VTP), ou un injecteur à aiguille mobile, peuvent être employés à condition que soient obtenus
les mêmes résultats que ceux indiqués en 10.2.

1) Le papier-filtre moyen S&S 589 est un exemple de produit approprié disponible sur le marché.
2) Philips HR2833 est un exemple d'appareillage approprié disponible dans le commerce.
Cette information est donnée par souci de commodité à l’intention des utilisateurs de la présente partie de l'ISO 23275 et
ne saurait constituer un engagement de l’ISO à l’égard de ces produits.
2 © ISO 2006 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 23275-2:2006(F)
La séparation et la quantification se sont avérées satisfaisantes en suivant les conditions expérimentales
ci-dessous:
⎯ colonne GC: 25 m à 30 m de longueur, avec un diamètre intérieur de 0,25 mm, en silice fondue revêtue
de poly(phénylméthylsiloxane) 50 % thermostable, sous forme d’un film d’épaisseur 0,1 µm à 0,15 µm;
⎯ programmation de température: 30 °C/min de 100 °C (température initiale) à 340 °C (température finale);
⎯ gaz vecteur: hélium ou hydrogène (pureté W 99,999 %).
NOTE Des types de colonnes appropriés ainsi que d’autres conditions expérimentales, utilisés lors d’une étude
comparative interlaboratoires internationale, sont énumérés dans l’Annexe A. Il est possible de modifier les conditions de
fonctionnement en vue d’obtenir une séparation optimale des triacylglycérols du beurre de cacao.
5.8 Système de traitement des données chromatographiques.
5.9 Extracteur Soxhlet, équipé de bouchons à rodage conique normalisés, d’un siphon d’une capacité
d’environ 100 ml (cartouche d'extraction de 33 mm × 88 mm), d’un Erlenmeyer de 250 ml, et d’un chauffe-
ballon thermostaté.
6 Échantillonnage
Il convient qu’un échantillon représentatif ait été envoyé au laboratoire. Il convient qu’il n’ait été ni
endommagé ni modifié au cours du transport ou du stockage.
L’échantillonnage ne fait pas partie de la méthode indiquée dans la présente Norme internationale. Une
méthode d’échantillonnage recommandée est indiquée dans l’ISO 5555.
7 Préparation de l’échantillon pour essai
7.1 Préparation du MRC beurre de cacao pour étalonnage et vérification de l’aptitude du
système
Avant d’ouvrir et d’utiliser le MRC beurre de cacao (4.1), l’ampoule doit être chauffée dans une étuve à
dessiccation (5.2) jusqu’à ce que son contenu ait fondu. À l’obtention d’une solution limpide, mélanger le
contenu de l’ampoule par retournements successifs pendant au moins 20 s, l’ouvrir et en verser le contenu
dans un flacon propre pouvant être hermétiquement fermé et conservé au froid en vue d’une utilisation
ultérieure.
7.2 Préparation de l’échantillon de chocolat
Réfrigérer environ 200 g de chocolat jusqu’à ce qu’il soit dur, puis le réduire en fins copeaux à l’aide d’un
dispositif mécanique (5.3). Bien mélanger et conserver au froid dans un flacon soigneusement fermé par un
bouchon.
8 Mode opératoire
8.1 Extraction de la matière grasse
Isoler la matière grasse et déterminer la teneur en matière grasse du chocolat (préparé de la façon décrite en
[3]
7.2) à l’aide d’un extracteur Soxhlet . Autrement dit: placer tout d’abord 4 g à 5 g de chocolat dans un
bécher de 300 ml à 500 ml. Ajouter lentement, tout en agitant, 45 ml de H O bouillante afin de former une
2
suspension homogène. Ajouter 55 ml de HCl (4.3) et quelques copeaux d’ébullition exempts de graisse ou un
autre agent antidébordement, puis agiter. Couvrir avec un verre de montre, porter lentement à ébullition, et
© ISO 2006 – Tous droits réservés 3

---------------------- Page: 8 ----------------------
ISO 23275-2:2006(F)
laisser bouillir tranquillement pendant 15 min. Rincer le verre de montre avec 100 ml de H O. Filtrer le produit
2
de la digestion à travers 15 cm de papier filtre moyen plissé (4.4) S&S 589, ou équivalent, en rinçant le bécher
3 fois avec du H O. Poursuivre le lavage jusqu’à ce que la dernière portion du filtrat soit exempte de Cl.
2
Transférer l’ensemble filtre/échantillon dans une cartouche d’extraction exempte de graisse et faire sécher, en
plaçant le tout dans un petit bécher, pendant 2 h à 100 °C. Placer un tampon en laine de verre sur le papier.
Ajouter quelques copeaux régulateurs d’ébullition exempts de graisse dans un Erlenmeyer de 250 ml et
sécher pendant 1 h à 100 °C. Laisser refroidir à température ambiante dans un dessiccateur et peser. Placer
la cartouche contenant l’échantillon séché dans l’appareil Soxhlet (5.9), en la faisant reposer sur une spirale
métallique ou des billes de verre. Rincer le bécher ayant servi à la digestion, le bécher ayant servi au
séchage, ainsi que le verre de montre à l’aide de trois portions de 50 ml d’éther de pétrole, et ajouter les
solutions de lavage dans la cartouche. Chauffer à reflux l’échantillon digéré pendant 4 h en ajustant la
température de telle sorte que l’extracteur effectue au moins 30 cycles de sipho
...